Orientadores: Jancarlo Ferreira Gomes, Alexandre Xavier Falcão / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T15:19:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_JulianaBarboza_M.pdf: 1818938 bytes, checksum: d44ab358d0482575e52d1f77a3f4c07b (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: As parasitoses intestinais são altamente prevalentes no mundo, estando entre as maiores causadoras de doenças e óbitos em seres humanos. Atualmente, o diagnóstico laboratorial destas parasitoses é realizado por meio de procedimentos técnicos manuais, desenvolvidos na sua grande maioria há décadas, o que justifica a aplicabilidade de técnicas mais sensíveis e práticas para esta finalidade, visando obter resultados eficientes, especialmente em programas governamentais direcionados à Saúde Pública. Sendo assim, o objetivo do projeto foi de avaliar e validar uma nova técnica parasitológica, denominada TF-Test Modified, em comparação com três técnicas parasitológicas convencionais consagradas pela literatura: TF-Test Conventional; Rugai, Mattos e Brisola; e Kato-Katz/Helm-Test. As etapas do trabalho consistiram em realizar coleta de material fecal de 457 indivíduos localizados em regiões endêmicas para parasitoses no município de Campinas, SP; no processamento laboratorial de 1.828 exames; no diagnóstico de 14 espécies parasitárias; e na análise estatística qualitativa de resultados de maneira abrangente. Dentre as espécies parasitárias encontradas, helmintos e protozoários intestinais foram detectados em 42,23% de indivíduos pela técnica de TF-Test Modified, ante 36,76% por TF-Test Conventional, 5,03% por Kato-Katz/Helm-Test, e 4,16% por Rugai, Mattos e Brisola. Destes casos, 54,40% de infecção simples dos indivíduos demonstrou serem portadores de monoparasitismo. A nova técnica parasitológica de TF-Test Modified, quando comparada com as demais técnicas, apresentou alto valor de infecção, como exemplo para dupla, tripla e múltipla, de maneira a perfazer um total de 98,37% de infecções. Ademais, a nova técnica apresentou índice Kappa com grau de concordância Quase Perfeito em todos os parâmetros avaliados com estimativa de 95% (P<0,05), permitiu encontrar com alta eficiência diagnóstica todas as espécies parasitárias estudadas, mostrou um notável diagnóstico verdadeiro, especialmente quando analisada comparativamente com as outras três técnicas convencionais. O atual estudo permitiu concluir que a técnica de TF-Test Modified pode ser utilizada de forma abrangente no diagnóstico qualitativo de protozoários e helmintos intestinais de humanos. O ganho de sensibilidade diagnóstica proporcionada por esta nova técnica deverá ser de estimável contribuição para o diagnóstico individual laboratorial, inquéritos populacionais e controle das parasitoses intestinais, de modo a repercutir em contribuição social / Abstract: Intestinal parasites are highly prevalent worldwide and is among the largest cause of illness and death in humans. Currently, the laboratory diagnosis of these parasites is accomplished through technical procedures manuals, developed mostly for decades, justifying the applicability of more sensitive techniques and practices for this purpose, to obtain effective results, especially in government programs aimed at Public Health. Thus, the objective of the project was to evaluate and validate a new technique parasite, called TF-Test Modified, compared with three conventional parasitological techniques enshrined in literature: TF-Test Conventional; Rugai, Mattos and Brisola, and Kato-Katz / Helm-Test. The steps of the work consisted of conducting a collection of fecal samples from 457 individuals located in regions endemic for parasitic infections in Campinas, SP, in laboratory processing of 1,828 examinations, the diagnosis of 14 parasitic species, and the qualitative statistical analysis of results so comprehensive. Among the species found parasitic, helminths and intestinal protozoa were detected in 42,23% of subjects using the technique of TF-Test Modified, against 36,76% by TF-Test Conventional, 5,03% by Kato-Katz/Helm-Test, and 4,16% Rugai, Mattos and Brisola. Of these cases, 54,40% of single infections of individuals were shown to be carriers of monoparasitism. The new technique parasitological TF-Test Modified compared to other techniques of infection showed a high value, for example double, triple and multiple so as to make a total of 98,37% infections . Moreover, the new technique presented Kappa index level of agreement with Almost Perfect in all parameters with estimated 95% (P <0.05), allowed to meet with high diagnostic efficiency all parasitic species studied showed remarkable true diagnosis, especially when viewed in comparison with other three conventional techniques. The current study showed that the technique TF-Test Modified can be used comprehensively in qualitative diagnosis of intestinal protozoa and helminths of humans. The gain in diagnostic sensitivity afforded by this new technique should be estimable contribution to the individual diagnostic laboratory, population surveys and control of intestinal parasites, in order to reflect on social contribution / Mestrado / Parasitologia / Mestra em Parasitologia

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_ana_paula_de_lara.pdf: 4627911 bytes, checksum: 887ee69dd56b73509c1a603e3b25aebd (MD5) Previous issue date: 2013-03-08 / Bacillus thuringiensis (Bt) is a Gram-positive bacteria, ubiquitous, facultative anaerobic, and form spores. During sporulation produce a parasporal crystals inclusion. Within these inclusions there are δ-endotoxin proteins well known for its insecticides proprieties. Among them, the Cry (crystal) is wide employed for biological control of plagues. The δ-endotoxin has an advantage of been more specific than chemical insecticides, thus been consider more favorable for the environment. The aim of this study was to obtain the Cry 11Aa recombinant protein of Bacillus thuringiensis var. israelensis in Escherichia coli, active for use in biocontrol. Two expression E. coli strains were tested: BL 21 (DE3) C41 and BL 21 (DE3) Ril. The protein Cry 11Aa was expressed and secreted in a soluble form by the two strains. The expression was demonstrated by Western Blot using anti-histidin monoclonal antibody. The strain BL 21 (DE3) C41 express the protein Cry 11Aa ~3.6 times more than the strain Rill, and showed a biologic efficiency of 95% of mortality for Culex quinquefaciatus larvae. The data obtained in this study suggest that the protein recombinant Cry 11Aa expressed in E. coli has a potential to be used in biological control. / Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria Gram-positiva, de ocorrência ubíqua, anaeróbica facultativa, formadora de esporos. Produz cristais, como inclusões parasporal durante a esporulação. Estas inclusões contêm proteínas chamadas de δ-endotoxinas, que são bem conhecidas pelas suas propriedades inseticidas. Dentre elas as toxinas Cry (crystal) são largamente empregadas no controle biológico de pragas. As δ-endotoxinas têm a vantagem de serem mais específicos do que os inseticidas químicos sintéticos, portanto, são considerados como agentes de controles favoráveis ao meio ambiente. O objetivo deste estudo foi a obtenção da proteína Cry 11Aa recombinante de Bacillus thuringiensis var. israelensis em Escherichia coli, ativa, para utilização no controle biológico.Duas cepas de E. coli de expressão foram testadas: BL 21 (DE3) C41 e BL 21 (DE3) Ril. A proteína Cry 11Aa foi expressa e secretada na forma solúvel pelas duas cepas. A expressão foi demonstrada por Western blot utilizando-se anticorpo monoclonal anti-histidina. A cepa BL 21 (DE3) C41 expressou a proteína Cry 11Aa ~3.6 vezes mais que a cepa BL 21 (DE3) Ril, e apresentou, em teste biológico, uma eficácia de 95% de mortalidade sobre larvas de Culex quinquefaciatus. Com os dados obtidos neste trabalho podemos sugerir que a proteína recombinante Cry 11Aa expressa em E. coli é um potencial candidato para ser utilizado no controle biológico.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_andrio_zafalon_silva.pdf: 3030038 bytes, checksum: a10638c2996d28623646b9fa7980b243 (MD5) Previous issue date: 2013-07-05 / The fragmentation of natural environments is a major concern among conservation ecologists nowadays, especially in areas with a great diversity of habitats as the coastal plains of Rio Grande do Sul. In order to provide the basis to the managers responsible for the maintenance of natural areas, as well as to develop the knowledge of the Muscidae family in the southern Brazil, this study aimed to determine the biodiversity of the Muscidae family, in addition to proposing a method to evaluate the pattern of the species-area relationship (SAR) without using a different sampling effort between the areas of different sizes. To do that, 140 Malaise traps were installed distributed in 35 areas of five regions in the Coastal Plains. Each region was composed of seven areas with four traps at proportional distances. A total of 6102 individuals were collected distributed among 120 species/morphspecies in the five regions. Based on the lists it can be stated the degree of conservation and the anthropic influence on the studied areas, mainly by the presence of the species of Muscinae and Coenosiinae. The similarity between the communities of Muscidae was determined by the proximity of the collection places or by the climatic conditions of the period, and it was also observed a positive relationship in the species-area relationship for the linear and logistic models. Although the model with the power function is not significant, it showed coefficients that allow the interpretation of the types of fragments that occur in the coastal plains of RS. / A fragmentação das áreas naturais é uma das maiores preocupações entre os ecólogos da conservação na atualidade, principalmente em áreas com uma grande diversidade de habitats como a Planície Costeira do Rio Grande do Sul. A fim de prover embasamento aos gestores responsáveis pela manutenção das áreas naturais e desenvolver o conhecimento sobre a família Muscidae no sul do Brasil, o presente estudo objetivou conhecer a biodiversidade da família Muscidae, além de propor um método para a avaliação do padrão de relacionamento espécie área (SAR) sem utilizar esforço amostral distinto entre as áreas de diferentes tamanhos. Para isso, foram instaladas 140 armadilhas Malaise distribuídas em 35 áreas de cinco regiões na Planície Costeira. Cada região foi composta por sete áreas com quatro armadilhas com distâncias proporcionais. Foram coletados 6102 indivíduos distribuídos entre 120 espécies/morfoespécies nas cinco regiões. A partir das listas podemos constatar o grau de conservação e a influência da ação antrópica nas áreas naturais amostradas, principalmente pela presença de espécies de Muscinae e Coenosiinae. A similaridade entre as comunidades de Muscidae foi determinada pela proximidade entre os locais de coletas ou pelas condições climáticas do período, e observamos ainda uma relação positiva no relacionamento espécie-área para os modelos linear e logístico. Apesar do modelo com a função de poder não ser significativo, apresentou coeficientes que possibilitam a interpretação dos tipos de fragmentos que existem na planície costeira do RS.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_tony_da_silveira.pdf: 2236842 bytes, checksum: 944d753a4ecf58121a6ca37c8589d2f5 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Pontoporia blainvillei is a cetacean popularly know in Brasil as toninha. Its distribution is restrict for estuarine and coastal waters of south-west of Atlantic. Studies of gastrintestinalparasitology of toninhas indicate a component community formed for less species, including nematodes, trematodes and acantocephalans. However, despite knowing that the course of infection is the ingestion of infected prey, intermediate hosts are unknown. The toninhas s diet is composed mainly for fishes, squids and shrimps. Many of these fishes in various areas of distribution of the cetacean have been reported with parasites that attack the species in some stage of development. However, larval forms of the trematode Synthesium pontoporiae and the acantocephalan Bolbosoma turbinella were not identified in any of the food items of P. blainvillei. The present study aimed to evaluate three components of the diet of P. blainvillei as possible sources transmission of parasitiasis. Fifty specimens of Doryteuthis sanpaulensis; forty-three specimens of Paralonchurus brasiliensis and fifty specimens of Trachurus lathami were necropsied. The organs were individually, washed in tamis (150μm) and examined under a stereomicroscope. Helminths were collected, counted, fixed in AFA, stained with Delafield s hematoxylin or Gomori s trichrome, clarified in Amman s lactophenol or Beech creosote and mounted on slides. Parasitological indices were calculated. None of the food items analyzed showed infection by metacercariae of S. pontoporiae. Helminths found in D. sanpaulensis did not have records of infection of P. blainvillei. Cistacanths of C. australe were found in the coelomic cavity and mesentery of P. brasiliensis (P=53,49%; IMI=6,74) and of T. lathami (P=4%; IMI=1,50). Cistacanths of B. turbinella were on same sites of T. lathami (P=14%; IMI=2,14). Paralonchurus brasiliensis and T. lathami are recorded in this study as new paratenics hosts for C. australe, as well as T. lathami is to B. turbinella. In addition to the parasites that infect P. blainvillei, the nematodes Hysterothylacium sp., Dichelyne (D.) spinicaudatus and Procamallanus pereirai, and trematodes Diphterostomum brusinae, Opecoeloides catarinensis, O. stenosomae, Pachycreadium gastrocotylum, Aponurus laguncula, A. pyriformis and Lecithochirum sp. are registered as members of the component community of P. brasiliensis and five new records of parasitism on fish and a new record of parasite species to brazilian waters. The use of nematodes as biomarkers for distinguishing the populations of P. brasiliensis is discussed. Through the present study more about the ecology and parasitology of final and paratenic hosts were revealed, as well as aspects of the biology of parasites, contributing to the knowledge about the marine biology of the south Atlantic. / Pontoporia blainvillei é um cetáceo conhecido popularmente no Brasil como toninha, cuja distribuição é restrita às águas estuarinas e costeiras do sudoeste do Atlântico. Estudos sobre parasitologia gastrintestinalde toninhas indicam uma comunidade componente formada por poucas espécies, incluindo nematódeos, trematódeos e acantocéfalos. Entretanto, apesar de se saber que a forma de infecção é a ingestão de presas infectadas, os hospedeiros intermediários são pouco conhecidos. A dieta da toninha é composta principalmente por peixes, lulas e camarões. Muitos desses peixes em várias áreas da distribuição do cetáceo já foram reportados com parasitos que acometem a espécie em algum estágio de desenvolvimento. Contudo, formas larvais do trematódeo Synthesium pontoporiae e do acantocéfalo Bolbosoma turbinella não foram identificadas em nenhum dos itens alimentares de P. blainvillei. O presente estudo teve como objetivo avaliar três espécies componentes da dieta de P. blainvillei como possíveis fontes transmissoras de parasitíases. Cinquenta espécimes de Doryteuthis sanpaulensis; quarenta e três espécimes de Paralonchurus brasiliensis e cinquenta espécimes de Trachurus lathami foram necropsiados. Os órgãos foram individualizados, lavados em tamis (150μm) e examinados sob estereomicroscópio. Os helmintos coletados foram contados, fixados em AFA, corados com hematoxilina de Delafield ou tricrômico de Gomori, clarificados em lactofenol de Amman ou creosoto de Faia e montados em lâminas. Índices parasitológicos foram calculados. Nenhum dos itens alimentares analisados apresentou infecção por metacercárias de S. pontoporiae. Helmintos encontrados em D. sanpaulensis não têm registros de infecção em P. blainvillei. Acantocistos de C. australe foram encontrados na cavidade celômica e mesentério de P. brasiliensis (P=53,49%; IMI=6,74) e de T. lathami (P=4%; IMI=1,50). Acantocistos de B. turbinella estiveram nos mesmos sítios de T. lathami (P=14%; IMI=2,14). Paralonchurus brasiliensis e T. lathami são registrados no presente estudo como novos hospedeiros paratênicos para C. australe, assim como T. lathami é para B. turbinella. Além dos parasitos que infectam P. blainvillei, os nematódeos Hysterothylacium sp., Dichelyne (D.) spinicaudatus e Procamallanus (S.) pereirai, e os trematódeos Diphterostomum brusinae, Opecoeloides catarinensis, O. stenosomae, Pachycreadium gastrocotylum, Aponurus laguncula, A. pyriformis e Lecithochirum sp. são registrados como membros da comunidade componente de P. brasiliensis sendo cinco novos registros de parasitismo para o peixe e um novo registro de espécie parasita para águas brasileiras. A utilização de nematódeos como biomarcadores para a distinção de populações de P. brasiliensis é abordada. Através do presente estudo mais informações sobre a ecologia e parasitologia dos hospedeiros definitivo e paratênicos foram reveladas, assim como aspectos da biologia dos parasitos, contribuindo para o conhecimento sobre a biologia marinha do Atlântico sul.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_regina_celis_pereira_reiniger.pdf: 329158 bytes, checksum: 6caf8cc77973c7a12a10801deeda4e26 (MD5) Previous issue date: 2008-05-15 / The presence of anti-Babesia bovis and anti-B. bigemina immunoglobulins (IgG class) were evaluated, by indirect fluorescent antibody test, in bovine sera from a naturally tick-infected beef cattle herd. Samples were collected from 31 heifers, from 13 to 24 months of age, from a farm located South of Rio Grande do Sul, Brazil. Blood samples were monthly collected followed by observing the presence of Boophilus microplus ticks in cattle. Climatic data were also observation. Mean temperature and relative humidity showed to be higher than their climate normal (1971-2000), allowing constant tick infestations throughout the year. Serologic tests showed that 100% of the animals remained positive for B. bigemina during the experimental period. For B. bovis, however, this condition was only reached from 17 months of age onwards, after the classical third tick generation infestation (autumn). These results showed that the enzootic stability was maintained in this farm, as observed earlier when these same animals were monitored in their first year of age. This epidemiological condition being unusual for this region. The experimental animals showed lower anti-B. bovis (P=0,0002) and anti-B. bigemina (P<0,0001) specific-immunoglobulins when compared to their first year averages. Anti-B. bigemina specific-immunoglobulins were significantly higher than anti-B. bovis specific-immunoglobulins (P=0,0001). These results reveal a situation of enzootic stability in geographical areas early described as of enzootic instability for cattle babesiosis, and provide information to better understand the high frequency of B. bovis outbreaks in this region. / Avaliou-se, através da reação de imunofluorescência indireta, a presença de imunoglobulinas (classe IgG) anti-Babesia bovis e anti-Babesia bigemina no soro de 31 bovinos de um rebanho de corte naturalmente infectado, dos 13 aos 24 meses de vida, em uma propriedade localizada ao sul do Rio Grande do Sul. As coletas mensais de sangue foram acompanhadas de observação da presença do Boophilus microplus, bem como de dados climatológicos durante o ano do experimento. A temperatura e a umidade relativa do ar mantiveram-se superiores às normais ao longo do ano, favorecendo a constância do carrapato no rebanho. A sorologia revelou que 100% dos bovinos mantiveram-se positivos para B. bigemina durante todo o período experimental, enquanto para B. bovis, esse índice só foi obtido a partir dos 17 meses de idade, após a infestação pela terceira geração de carrapatos (outono). Isso revela que foi mantida a situação de estabilidade enzoótica na propriedade, constatada durante o primeiro ano de vida destes animais, o que é atípico para região. Os bovinos mantiveram títulos de anticorpos significativamente inferiores aos observados durante o seu primeiro ano de vida, tanto para B. bovis (P=0,0002) como para B. bigemina (P<0,0001). A titulação de anticorpos para B. bigemina foi significativamente (P=0,0001) superior à verificada para B. bovis. Os resultados obtidos revelam a existência de situação de estabilidade enzoótica em uma área de instabilidade enzoótica para a babesiose bovina, e fornece subsídios para o entendimento da maior freqüência de casos clínicos causados por B. bovis na região.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_luis_eduardo.pdf: 638136 bytes, checksum: bebab3fdb3ce4b3622bd9aa8729c10d2 (MD5) Previous issue date: 2009-09-09 / Enteric parasitic infections are worldly known and reach mainly the poorest countries. This problem becomes more serious when it is associated with the Human Immunodeficiency Virus (HIV) infection. The objective of the study was to understand the prevalence and the risk factors associated with the enteric parasites among AIDS patients and HIV-positive healthy carriers. Cross-sectional study was carried out at the single assistance health service specialized in HIV/AIDS on Pelotas, a city in southern Brazil. Out of 273 patients who were interviewed in this study, 19,8% had pathogenic enteric parasites, and the most frequent pathogens were Trichuris trichiura, Giardia lamblia and Ascaris lumbricoides. The prevalence of pathogenic enteric parasites was significantly higher (31,4%) among who were not undergoing antiretroviral therapy (HAART) than among who were undergoing HAART (13,0%). The frequency of opportunistic enteric parasites (Cryptosporidium spp., Cystoisospora belli and Strongyloides stercoralis) was low; and it was 1,9% and 2,4%, respectively, among who were and were not undergoing HAART. This difference was not statistically significant. People with lower socioeconomic status, who had domestic animals and were not undergoing antiretroviral therapy (HAART), would have more chance to suffer from enteric parasitic infection when contrasted with the compared groups. The study has shown that it is necessary to adopt and carry out preventive and diagnosis actions among HIV-positive patients. / As parasitoses intestinais são conhecidas globalmente, atingindo especialmente países mais pobres. Este problema se torna ainda mais grave quando associado à infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). O objetivo do estudo foi estimar a prevalência e os fatores associados aos enteroparasitos em pacientes HIV positivos. Foi realizado estudo transversal no único serviço de assistência especializada em HIV/AIDS de Pelotas, RS. Do total de 273 entrevistados, 19,8% estavam infectados por enteroparasitos patogênicos, sendo que os mais frequentes foram Trichuris trichiura, Giardia lamblia e Ascaris lumbricoides. A prevalência de parasitos patogênicos foi significativamente superior (31,4%) entre pacientes que não estavam usando a terapia antirretroviral altamente potente e efetiva (HAART) em relação aos que estavam usando HAART (13,0%). As prevalências foram baixas para os parasitos intestinais oportunistas Cryptosporidium spp., Cystoisospora belli e Strongyloides stercoralis, sendo de 2,4% em pacientes que não faziam uso de HAART e de 1,9% em pacientes tratados com HAART, não havendo diferença estatística. Os pacientes com níveis socioeconômicos mais baixos, que referiam ter animais domésticos e que não faziam uso de terapia com HAART tiveram mais chance de desenvolver enteroparasitos patogênicos. O estudo demonstra que é necessária a adoção e implementação de medidas preventivas e de investigação diagnóstica nos pacientes HIV positivos.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_amanda_fernandes_pinheiro.pdf: 1197006 bytes, checksum: f76aeabc9ec7ff7c3ad7cdaa92c92c7f (MD5) Previous issue date: 2010-10-22 / The neosporosis is a disease caused by intracellular protozoa Neospora caninum, which is of great importance, especially in cattle, because it may cause abortion in infected animals, causing big economic losses for the cattle industry of many countries in the world. In the present study it was reported the expression, purification, and characterization of the protein NcSRS2 of N. caninum in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. The gene ncsrs2 was cloned in the vector of expression pPICZαB, followed by the integration in the genome of yeast. The recombining protein NcSRS2 was shown in the supernatant of the culture, where later it was concentrated and purified. An indirect immunoenzymatic assay (ELISA) was developed, using seronegative and seropositive of cattle and sheep, naturally field-infected. It showed that the recombinant protein presented the antigenic characteristics of native protein, which allowed its recognition by the blood serum of different species of animals with neosporosis. The results were compared with the indirect immunofluorescence (IFI). The diagnosis test ELISA- NcSRS2 described in the present work is a specific and sensitive method for the detection of N. caninum in cattle and sheep. The results indicate that the recombinant protein produced in this work, can be used for the development of diagnosis methods with low-cost production, and in industrial scale, because they are necessary and important for the introduction of proper controlling measurements for this parasitosis in cattle flocks. / A neosporose é uma enfermidade causada pelo protozoário intracelular Neospora caninum esta é de grande importância principalmente em bovinos, pois pode ocasionar abortos nos animais infectados, causando grandes perdas econômicas para indústria pecuária de vários países do mundo. No presente estudo, foi relatada a expressão, purificação e a caracterização da proteína NcSRS2 de N. caninum na levedura metilotrófica Pichia pastoris. O gene ncsrs2 foi clonado no vetor de expressão pPICZαB seguindo de integração no genoma da levedura. A proteína recombinante NcSRS2 foi demonstrada no sobrenadante da cultura onde posteriormente foi concentrada e purificada. Um ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) foi desenvolvido utilizando soros negativos e positivos de bovinos e ovinos naturalmente infectados a campo por N. caninum. Este demonstrou que a proteína recombinante apresentou as características antigênicas da proteína nativa o que permitiu o seu reconhecimento por soros de diferentes espécies de animais com neosporose. Os resultados foram comparados com a imunofluorescência indireta (IFI). O teste diagnóstico ELISA-NcSRS2 descrito no presente trabalho constitui um método específico e sensível para a detecção de N. caninum em bovinos e ovinos. Os resultados indicam que a proteína recombinante produzida neste trabalho pode ser utilizada para o desenvolvimento de métodos diagnósticos com menor custo de produção e em escala industrial, pois estes são necessários e importantes para a implantação de medidas de controle adequadas para esta parasitose nos rebanhos bovinos.

Amebic keratitis and granulomatous amebic encephalitis are diseases caused by free-living amoebas of the Acanthamoeba type. In the case of keratitis, the great problem is the relapse of this disease because of its resistance to medicines used for it, especially the cystic form of the organism. Plant essential oils have been used as potentially active agents against this protist. Therefore, the objective of this study was to determine the amebacide activity of plant essential oils of Lippia type against Acanthamoeba polyphaga trophozoites. To do this, 8 x 104 trophozoites were exposed to increased concentrations of essential oils of Lippia sidoides, Lippia gracilis, Lippia alba and Lippia pedunculosa during 24 hours, as well as of their majority compounds rotundifolona, carvone and carvacrol. Practically all the oil and compound concentrations presented amebacide activity. Based on these results, the researched oils in this study are potential candidates for a complementary healing for amebic keratitis and granulomatous amebic encephalitis. / A ceratite amebiana e a encefalite amebiana granulomatosa são doenças causadas por amebas de vida livre do gênero Acanthamoeba. No caso da ceratite, o grande problema é a recidiva da doença devido à resistência, especialmente da forma cística do organismo, aos medicamentos utilizados. Óleos essenciais de plantas têm sido utilizados como agentes potencialmente ativos contra este protista. Portanto, o objetivo deste estudo foi determinar a atividade amebicida de óleos essenciais de plantas do gênero Lippia frente à trofozoítos de Acanthamoeba polyphaga. Para isto 8 x 104 trofozoítos foram expostos durante 24 horas a concentrações crescentes dos óleos essenciais de Lippia sidoides, Lippia gracilis, Lippia alba e Lippia pedunculosa, bem como de seus compostos majoritários rotundifolona, carvona e carvacrol. Praticamente todas as concentrações dos óleos e compostos apresentaram atividade amebicida. Diante destes resultados, os óleos pesquisados neste estudo são candidatos em potencial para a terapêutica complementar na ceratite amebiana e encefalite amebiana granulomatosa.

The papillomatosis is an infectious disease caused by papillomaviruses which belongs to the Papillomaviridae family. In dogs, Canis familiaris papillomavirus (CPV) species is the causative agent of the disease and it has so far twenty identified types. These viruses can lead to benign neoplastic lesions of the skin and mucosal epithelium that are exophytic and endophytic papilloma and pigmented plaques which may occur progression to carcinoma squamous cell (SCCs) cancer. The pathogenicity of the virus related to the types, subtypes and variants can influence deafferents lesions on the animal. Thus, there is a need to identify and characterize the existing virus to a better understanding of the disease and adoptions of both preventive measures as treatment. In this study, the general objective is to analyze the genetic diversity of canine papillomavirus present in infected dogs in the state of Sergipe - Brazil. We used diagnostic strategies for the identification of canine papillomavirus; wherein the histopathology was used to the characterization of the lesion as papilloma and the PCR with electrophoresis for confirm the viral DNA, then sequencing performed for subsequent genotyping of samples and bioinformatics tools was used for analysis of the nucleotide and amino acid sequences of the L1 gene. As a result, eighteen samples of possible papillomatous lesions were collected and nine samples had the presence of CPV DNA with oral and cutaneous exophytic lesions confirmed by histopathology. It was possible observe in one sample the presence of oral SCCs. The Canine papillomavirus type 1 (CPV1) was identified in nine samples of this study. Eight samples were CPV1 variants with 100% identity with the already described variants and one sample was identified as a new CPV1 variant having a difference of 0.8% when compared with the reference sequence of the CPV1 L1 gene and a difference of 0.2% with the existing CPV1 variant. The mutations of the variants and the change in stability of the protein structure were analyzed and it was observed that the V204A mutation of the new variant of isolate eight is highly destabilizing with alteration of protein function. This study corroborates the characterization of CPV1 as the main cause of oral papillomatosis in dogs, observing the genetic variability of CPV1 with variants of different pathogenic potentials, with a putative new variant associated with cancer with a mutation that can destabilize the L1 protein structure of CPV1 altering its function. / A papilomatose é uma doença infecciosa causada pelos papilomavírus pertencentes a família Papillomaviridae. Em cães, a espécie Canis familiaris papilomavírus (CPV) é o agente etiológico da doença e possui até o momento vinte tipos identificados. Estes vírus podem levar a lesões neoplásicas benignas na pele e epitélio da mucosa, que são os papilomas exofíticos, endofíticos e as placas pigmentadas, podendo ocorrer a progressão para o câncer carcinoma de células escamosas (CCEs). A patogenicidade do vírus relacionada aos tipos, subtipos e variantes pode influenciar diferentes tipos de lesões nos animais. Com isso, percebe-se que há uma necessidade de identificar e caracterizar os vírus existentes para um melhor entendimento da doença e adoções de medidas tanto preventivas quanto de tratamento. Nesse estudo o objetivo geral é analisar a diversidade genética de papilomavírus canino presentes em cães infectados no estado de Sergipe - Brasil. Estratégias de diagnóstico foram utilizadas para a identificação de papilomavírus canino, em que o exame histopatológico foi utilizado para a caracterização da lesão e o PCR juntamente com a eletroforese para a confirmação da presença do DNA viral, depois foi realizado o sequenciamento para subsequente genotipagem das amostras e ferramentas de bioinformática foram utilizadas para análise das sequências de nucleotídeos e aminoácidos do gene L1. Como resultado, dezoito amostras de possíveis lesões papilomatosas foram coletadas, nove amostras tiveram a presença do DNA de CPV, com lesões exofíticas orais e uma cutânea, confirmadas pelo histopatológico. Foi possível observar na amostra oito a presença de CCEs oral. O CPV1 foi identificado em nove amostras deste estudo. Oito amostras eram variantes de CPV1 com 100% de identidade com uma variante já descrita e uma amostra foi identificada como uma nova variante de CPV1, possuindo uma diferença de 0,8% quando comparada com a sequência do gene L1 de referência de CPV1 e uma diferença de 0,2% com a variante já existente de CPV1. As mutações das variantes e a alteração na estabilidade da estrutura proteína foram analisadas e pôde-se observar que a mutação V204A da nova variante do isolado oito é altamente desestabilizadora com alteração de função da proteína. Esse estudo corrobora com a caracterização do CPV1 como o principal causador da papilomatose oral em cães, observando-se a variabilidade genética de CPV1 com variantes de diferentes potenciais patogênicos, com uma putativa nova variante associada ao câncer com uma mutação que pode desestabilizar a estrutura proteica de L1 de CPV1 alterando sua função. / São Cristóvão, SE

A região N-terminal de OTI-VIT-1 foi expressa e os polipeptídeos recombinantes foram purificados. OTI-VIT-1 pode ser homólogo da vitelina YP170B de C. elegans. Foram identificados um intron na região 5´ e dois na região 3´ do gene Oti-vit-1. Antissoro monoespecífico para PVIT1HisC confirmou que o gene Oti-vit-1 codifica VT1. O polipeptídeo recombinante P40-H, correspondente à região N-terminal da proteína OTI-VIT-6 interage com um polipeptídeo de aproximadamente 100 kDa (P100) presente em extratos proteicos totais de O. tipulae. Estudamos também o papel da Proteína Microssômica Transportadora de Triglicerídeos (MTP) na biossíntese de Vitelogenina do nematoide C. elegans. Ensaios de RNAi em C. elegans, utilizando parte da sequência do gene da MTP (Cel-dsc-4) foram realizados nas linhagens N2 e DH1033. Microscopia de fluorescência de vermes adultos da linhagem DH1033, submetidos a RNAi, mostrou acúmulo de YP170B::GFP no interior dos enterócitos. Este acúmulo sugere a participação da MTP na secreção de VTG. Análise imunológica da vitelogenina nestes mesmos vermes não detectaram alterações no processamento de CEL-VIT-6, sugerindo que o mesmo ocorra não só no pseudoceloma, mas também no interior dos enterócitos. / The N-terminal region of OTI-VIT-1 was expressed and the recombinant polypeptides were purified. OTI-VIT-1 may be homologous to the vitellin YP170B from C. elegans. We identified an intron in the 5 \'region and two in 3\' region from Oti-vit-1. Monospecific antisera to PVIT1HisC confirmed that the gene Oti-vit-1 encodes VT1. The recombinant polypeptide P40-H, corresponding to the N-terminal region of the protein OTI-VIT-6, interacts with a polypeptide of approximately 100 kDa (P100) present in total protein extracts of O. tipulae. The role of microsomal triglyceride transfer protein (MTP) in the biosynthesis of vitellogenin was studied in the nematode C. elegans. Trials of RNAi in C. elegans, using the sequence of the MTP gene (Cel-dsc-4) were performed in the strains N2 and DH1033. Fluorescence microscopy of adult worms of strain DH1033, subjected to RNAi, showed accumulation of YP170B:: GFP within the enterocytes. This accumulation suggests the involvement of MTP in the secretion of VTG. Analysis using anti-vitellogenin immune serum did not detect changes in the processing of CEL-VIT-6, suggesting that it occurs not only in pseudocoelom but also within the enterocytes.