Atualmente existem diversas opções terapêuticas para o tratamento do fotoenvelhecimento cutâneo.Uma das formas de tratamento muito utilizada é a fototerapia com laser. Com o desenvolvimento da tecnologia em lasers surgiu um novo conceito de tratamento da pele envelhecida, a fototermólise fracionada microablativa. Essa tecnologia fracionada visa combinar os efeitos visíveis de uma terapia ablativa com o conforto e segurança dos métodos não ablativos. Antes de atingir a pele o laser passa por uma lente óptica especial que o divide em microrraios. Tal procedimento produz colunas de lesões térmicas microscópicas que penetram na epiderme e derme, sem danificar o tecido circunvizinho. A grande vantagem de ser fracionado é que a pele íntegra ao redor de cada coluna funciona como um reservatório de células potentes para a rápida cicatrização e regeneração da pele, culminando com a produção de colágeno e resultando em uma pele mais jovial, sem o inconveniente de um longo período de recuperação pós-tratamento. 20 pacientes foram selecionadas para o tratamento das rítides periorais com uma sessão de laser Erbium-YAG de 2940nm, fracionado. Após 28 dias do procedimento observou-se melhora na textura da pele, clareamento de manchas e atenuação de rugas finas periorais. Foi realizado um estudo comparativo da quantificação das células de Langerhans e receptores toll-like ( TLRs ) 2, 3 e 9 na epiderme, antes e após 3, 7, 14 e 28 dias do tratamento e da quantificação das fibras de colágeno na derme superior, antes e após 28 dias do laser. Houve diferenças estatisticamente significativas entre as medianas dos valores de CD1a (p = 0,0085), TLR 2 (p = 0,0108), TLR 3 (p = 0,0011) e TLR 9 (p = 0,0012) na epiderme pré e pós-tratamento. Foi constatado que a significância se deu entre os valores: antes e após 14 dias para CD1a (diminuição), antes e após 7 dias para TLR 2 (diminuição), antes e após 14 dias para TLR 3 (aumento), antes e após 7 dias para TLR 9 (diminuição). Não se encontraram diferenças estatisticamente significativas entre os valores medianos das fibras colágenas do tipo I (p = 1,0000) e III (p = 0,3125) antes e após 28 dias do tratamento. O protocolo desse estudo mostrou-se bastante seguro, pois apresentou efeitos colaterais transitórios e nenhuma complicação permanente. / There are several treatment options for skin photoaging. One of them widely used nowadays is lasertherapy. The development of lasers technology introduced a new therapeutic concept for aging skin: ablative fractional photothermolysis. This technology combines the visible effects of an ablative therapy with the comfort and safety of nonablative methods. Before reaching the skin the laser passes through a special optical lens that splits it into tiny rays. This procedure produces columns of microscopic thermal injuries that penetrate the epidermis and dermis, without damaging the surrounding tissue. The great advantage of the fractional photothermolysis is that the intact skin around each column acts as a potent reservoir of cells for fast healing and skin regeneration, resulting in collagen production and a youthful skin without the inconvenience of a long period of recovery after treatment. 20 patients were selected for perioral wrinkles treatment with a session of fractional Erbium-YAG 2940nm. After 28 days of the procedure the perioral skin showed improvement in texture, bleaching of sunspots and attenuation of superficial wrinkles. A comparative study was conducted between the expression of Langerhans cells and toll-like receptors 2, 3 and 9 in the epidermis, before and after 3,7,14 and 28 days of treatment and among collagen fibers in the dermis, before and after 28 days of the laser. There were statistically significant differences between the median values of CD1a (p = 0.0085), TLR 2 (p = 0.0108), TLR 3 (p = 0.0011) and TLR 9 (p = 0.0012) in the epidermis pre and post-treatment. The significance occurred between the values: before and after 14 days for CD1a (decrease) before and after 7 days to TLR 2 (decrease) before and after 14 days for TLR 3 (increase) before and after 7 days for TLR 9 (decrease). There were not statistically significant differences between the median values of collagen type I (p = 1.0000) and III (p = 0.3125) before and after 28 days of treatment. The irradiation of skin with fractional Erbium-YAG was safe, as it showed transitory side effects and no permanent complication.

A cirurgia ortognática é o procedimento cirúrgico que visa a correção das deformidades dentofaciais esqueléticas e pode levar a diminuição dos movimentos mandibulares, dor e edema. Uma possibilidade de tratamento para essas consequências é a fototerapia com laser de baixa potência. O objetivo deste estudo foi realizar uma avaliação longitudinal dos movimentos mandibulares, dor e edema em pacientes submetidos à cirurgia ortognática bimaxilar, após fototerapia com laser de baixa potência (LLLT). Foram avaliados 30 pacientes, divididos em grupo laser (n=15) e grupo controle (n=15) de modo aleatório. O grupo laser recebeu laserterapia pós-operatória por 19 sessões. O grupo controle recebeu placebo de laserterapia. Os grupos foram comparados quanto aos movimentos mandibulares - abertura máxima, lateralidade e protrusão máxima, dor - escala visual analógica, edema - medidas entre pontos cefalométricos, em um período de 60 dias após a cirurgia. Foram aplicados testes estatísticos para comparação entre os grupos (p<0,05). Houve diferença significante para abertura máxima, lateralidade e protrusão máxima nos períodos de 14 a 60 dias para a maioria das comparações. Foi verificada diferença significante para dor pós-operatória na maioria das comparações, nos períodos 24 h a 5 semanas, sendo que grupo laser atingiu o valor 0, 2 semanas antes. Ocorreu redução do edema, sem diferença estatisticamente significante para maioria das mensurações. Com base neste estudo, foi possível concluir que após a fototerapia com laser de baixa potência (LLLT) houve um ganho nos valores de todos os movimentos mandibulares, não houve diferença significante para ocorrência de edema e houve uma diminuição da ocorrência de dor. / The orthognathic surgery is the surgical procedure that aims to correct skeletal dentofacial deformities and can lead to decrease in jaw movements, pain and edema. A possible treatment for these consequences is the low-power laser phototherapy. The aim of this study was a longitudinal evaluation of jaw movements, pain and edema in patients undergoing orthognathic surgery bimaxillary after lowlevel laser light therapy (LLLT). We evaluated 30 patients divided into laser group (n=15) and control group (n=15) randomly. The laser group received postoperative laser therapy for 19 sessions. The control group received laser therapy placebo. The groups were compared regarding jaw movements - maximum aperture, laterality and maximum protrusion, pain - visual analog scale, edema - measured between cephalometric points in a period of 60 days after surgery. Statistical tests were applied to compare the groups (p <0.05). There was a significant difference for maximum aperture, laterality and maximum protrusion in periods of 14 to 60 days for most comparisons. There was a significant difference in postoperative pain in most comparisons, in the periods 24 h to 5 weeks, and laser group reached the value 0 a 2 weeks before. There was a reduction of edema, with no statistically significant difference for most measurements. Based on this study, it was concluded that after phototherapy with low power laser (LLLT) there was a gain in the amount of all mandibular movements, there was no significant difference in the occurrence of edema and there was a decrease in the occurrence of pain.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / INTRODUCTION - The biological effects of low intensity light sources, such as light emitting diode therapy (LEDT), indicate that phototherapy is a method for obtaining ergogenic and recuperative effects of skeletal muscle. However, clinical trials and experimental researches differ in respect to the parameters to be used. OBJECTIVE - To compare different doses of the LED (630 nm) in the inflammation of striated skeletal muscle induced by exercise in rats. METHODS - Wistar rats were divided in five experimental groups (n=8/group): control (CON), the animals were not submitted to exercise protocol; passive recovery (RP), the animals received no treatment after induction of inflammation; LEDT (1.2 J, 4.2 J or 10.0 J), the animals were submitted to phototherapy after induction of inflammation. Skeletal muscle inflammation was induced by a protocol of 100 minutes of swimming. After exercise, the animals in the LEDT groups were exposed to phototherapy at the doses of 1.2 J, 4.2 J or 10.0 J on the triceps sural muscles (gastrocnemius and soleus). For evaluation of mechanical hyperalgesia by electronic von Frey, the animals were submitted to evaluation before and at 24 hours after swimming procedure. After 24 hours of swimming, blood samples were collected to measure creatine kinase (CK) activity. The soleus muscle was removed for histological analysis. Data were expressed as mean ± standard error of mean (S.E.M). Analysis of variance was used followed by Tukey post hoc. The histological data were performed with chi-square analysis followed by correction of Yates. This study was approved by the Ethics Committee on Research with Animals (Federal University of Sergipe) under n°. 15/2013 and by the Ethics Committe in the Use of Animals (State University of Londrina) under nº 124/2014. RESULTS - The plasma activity of CK was increased (p <0.0001) in the PR group (2071 ± 346 U / L) when compared to the CON group (683 ± 103 U / L) and attenuation (p <0.0001) of this response was observed in the LEDT (630 nm)-treated groups at the doses of 1.2 J (379 ± 71 U / L), 4.2 J (599 ± 131 U / L) or 10.0 J (544 ± 86 U / L). Regarding mechanical hyperalgesia, the PR group presented a reduction (p <0.005) in the paw withdrawal threshold (-11.9 ± 1.9 g) when compared to the CON group (2.2 ± 1.5 g). Only LEDT 4.2 J (-3.3 ± 2.4 g) altered this threshold (p <0.05) when compared to the PR group. In the histological analysis, leukocyte infiltration was observed in the muscle of animals from the PR group, in addition to areas of edema and necrosis. However, lower infiltration was observed in the animals treated with doses of 4.2 and 10.0 J. CONCLUSION: The application of LEDT (630 nm) reduces the inflammatory lesion in muscle fibers of rats submitted to exercise. The dose of 4.2 J induced better anti-inflammatory and antinociceptive effects than doses of 1.2 and 10.0 J. / INTRODUÇÃO - Os efeitos biológicos de fontes de luz de baixa intensidade, como a terapia com diodo emissor de luz (LEDT), indicam que a fototerapia induz efeitos ergogênicos e recuperativos do músculo esquelético. No entanto, ensaios clínicos e pesquisas experimentais apresentam divergências no que diz respeito aos parâmetros a serem utilizados. OBJETIVO - Comparar o efeito de diferentes doses da LEDT (630 nm) na inflamação do músculo estriado esquelético induzida por exercício em ratos. MÉTODOS - Ratos Wistar foram divididos em cinco grupos experimentais (n=8/grupo): controle (CON), animais não submetidos ao protocolo de exercício; recuperação passiva (RP), animais que não receberam tratamento após a indução da inflamação; LEDT (1,2 J; 4,2 J ou 10,0 J), animais tratados com fototerapia após indução da inflamação. A inflamação muscular esquelética foi induzida por protocolo de 100 minutos de nado. Após o exercício, os animais dos grupos LEDT foram expostos à fototerapia nas doses de 1,2 J, 4,2 J ou 10,0 J sobre os músculos tríceps sural (gastrocnêmios e sóleo). Para avaliação da hiperalgesia mecânica com o von Frey eletrônico, os animais foram submetidos a avaliação antes e 24 horas após o procedimento de nado. Após 24 horas do nado, amostras sanguíneas foram coletadas para análise da atividade de creatina quinase (CK). O músculo sóleo foi retirado para análise histológica. Os dados foram expressos como média± erro padrão da média (EPM). Foi utilizado análise de variância seguido pelo Tukey post hoc. Para os dados histológicos foi realizada análise com Qui-quadrado seguido de correção de Yates. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa com Animais (Universidade Federal de Sergipe) sob nº 15/2013 e pelo Comitê de Ética em Uso de Animais (Universidade Estadual de Londrina) sob nº 124/2014. RESULTADOS - No grupo RP houve um aumento (p<0,0001) da atividade plasmática de CK (2.071±346 U/L) quando comparado ao grupo CON (683±103 U/L) e houve atenuação (p<0,0001) da resposta nos grupos tratados com LEDT (630 nm) com doses de 1,2 J (379±71 U/L), 4,2 J (599±131 U/L) ou 10,0 J (544±86 U/L). Em relação à hiperalgesia mecânica, o grupo RP apresentou redução (p<0,05) no limiar de retirada da pata (-11,9±1,9 g) quando comparado ao grupo CON (2,2±1,5 g) e apenas o grupo LEDT 4,2 J (-3,3±2,4 g) alterou esse limiar (p<0,05) quando comparado ao grupo RP. Na análise histológica, foi observada infiltração de leucócitos no músculo do grupo RP, além de áreas edemaciadas e necrosadas. Porém, menor infiltração foi observada nos animais tratados com as doses de 4,2 e 10,0 J. CONCLUSÃO - A aplicação de LEDT (630 nm) reduz a lesão inflamatória nas fibras musculares de ratos submetidos ao exercício. A dose de 4,2 J induziu melhor efeito anti-inflamatório e antinociceptivo do que as doses de 1,2 e 10,0 J.

BACKGROUND: Low-level phototherapy is advocated to increase energetic metabolism, muscle performance, protect skeletal muscle from injuries due to energetic imbalance and accelerate muscle recovery following exercise. Nevertheless, results from individual researches do not agree on its efficacy. OBJECTIVES: To determine the efficacy of low-level phototherapy (i.e. Light-Emitting Diode therapy [LEDtherapy] or Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation therapy [LASERtherapy]) on exercise capacity and skeletal muscle protection and recovery in people undergoing an exercise protocol. METHODS: We performed two systematic reviews with meta-analyses based on Cochrane Collaboration and PRISMA statement. Trials were collected from Cochrane Central Register of Controlled Trials, MEDLINE, EMBASE, SciELO, PEDro and LILACS up to May 2014 or February 2015. The references lists from selected manuscripts were screened for further references of interest. We included randomized controlled trials and crossover studies in which study participants were allocated to receive either low-level phototherapy or placebo treatment. Outcomes of interest were pain, creatine kinase activity, lactate concentration, lactate dehydrogenase activity, edema, range of movement, strength, number of repetitions, time to exhaustion, peak torque and muscle power. RESULTS: In the first review we identified 15 studies involving 317 participants and in the second review we identified 16 studies involving 297 participants. Compared to the placebo group, pre-exercise LASERtherapy improved the number of repetitions (mean difference [MD] = 3.52 repetitions; 95% confidence interval [CI] = 1.24 repetitions, 5.80 repetitions; P = 0.002), delayed the time to exhaustion (MD = 3.23 s; 95% CI = 0.24 s, 6.22 s; P = 0.03), reduced the lactate levels (MD = -0.41 mmol/L; 95% CI = -1.34 mmol/L, -0.17 mmol/L; P = 0.0007) and reduced the creatine kinase levels (standardized mean difference = -0.66; 95% CI = -1.30, -0.02; P = 0.04). Post-exercise LEDtherapy reduced pain measured by visual analogue scale (MD = -2.04 mm; 95% CI = -4.03 mm, -0.06 mm; P = 0.04). CONCLUSION: There is moderate evidence that low-level phototherapy improves exercise capacity. It is not clear if low-level phototherapy has beneficial effects on skeletal muscle injury and pain. / CONTEXTO: A fototerapia de baixa intensidade é indicada para melhorar o metabolismo energético e o desempenho muscular, proteger a musculatura de lesões provenientes da depleção energética e favorecer a recuperação muscular após o exercício. No entanto, resultados de investigações clínicas não se mostram concordantes em relação à sua eficácia. OBJETIVOS: Determinar os efeitos da fototerapia de baixa intensidade com Diodos Emissores de Luz (LEDterapia) ou Amplificação da Luz por Emissão Estimulada de Radiação (Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation, LASERterapia) na capacidade de exercício, proteção e recuperação musculares em pessoas submetidas ao exercício. MÉTODO: Foram realizadas duas revisões sistemáticas com metanálise baseadas nas recomendações da Colaboração Cochrane e PRISMA statement. Os estudos foram provenientes da Cochrane Central Register of Controlled Trials, MEDLINE, EMBASE, SciELO, PEDro e LILACS até maio de 2014 ou fevereiro de 2015, além da busca manual nas referências dos artigos selecionados. Foram incluídos ensaios clínicos controlados aleatórios e estudos cruzados nos quais os participantes foram alocados para receber fototerapia de baixa intensidade ou tratamento placebo. Os desfechos avaliados foram dor, atividade de creatina quinase, concentração de lactato, atividade de lactato desidrogenase, edema, amplitude de movimento, força, número de repetições, tempo até a exaustão, pico de torque e potência muscular. RESULTADOS: A primeira revisão sistemática foi composta por 15 estudos, totalizando 317 participantes, e a segunda revisão sistemática foi composta por 16 estudos com um total de 297 participantes. Comparado ao placebo, a LASERterapia antes do exercício promoveu um aumento do número de repetições (diferença média [mean difference, MD]= 3,52 repetições; intervalo de confiança (IC) 95% = 1,24 repetições, 5,80 repetições; P = 0,002), aumento do tempo até a exaustão (MD = 3,23 s; IC 95% = 0,24 s, 6,22 s; P = 0,03), redução dos níveis séricos de lactato (MD = -0,41 mmol/L; IC 95% = -1,34 mmol/L, -0,17 mmol/L; P = 0,0007) e redução dos níveis séricos de creatina quinase (diferença média padronizada = -0,66; IC 95% = -1,30, -0,02; P = 0,04). A LEDterapia aplicada após o exercício resultou menos dor avaliada pela escala visual analógica (MD = -2,04 mm; 95% CI = -4,03 mm, -0,06 mm; P = 0,04). CONCLUSÃO: Há moderada evidência de que a fototerapia de baixa intensidade aumenta a capacidade de exercício. Não é possível afirmar que a fototerapia apresenta efeitos positivos na lesão muscular e na dor secundários ao exercício.

Úlcera venenosa é o tipo de úlcera mais freqüente nos membros inferiores, conseqüente à insuficiência venosa crônica. Há várias condutas terapêuticas para o seu tratamento, desde terapias tópicas como a sulfadiazina de prata a 1% a aparelhos bioestimuladores como fototerapia, ultra-som e outros. A fototerapia por laser ou LEDs (diodos emissores de luz) tem sido estudada principalmente como método bioestimulador para o reparo tecidual e alívio da dor. O presente estudo tem como objetivo analisar a eficácia do tratamento com fototerapia (LEDs) associado ao curativo diário de sulfadiazina de prata a 1% creme (SDZ) em pacientes com úlceras venosas crônicas. Estudo randomizado, duplo-cego, no qual foi utilizado aparelho de fototerapia (Dynatron 880 Infrared Therapy Probe - Dynatron Solaris) contendo 2 sondas de conformação idêntica, cujas especificidades foram reveladas apenas ao final do estudo: sonda 1 (1 LED de 644 nm, 18 mW, 1,12 J/\'CM POT.2\') e sonda 2 (1 LED de 641 nm e 32 LEDs de 891 nm; 131 mW; 1,57 J/\'CM POT.2\'). Foram selecionados 20 pacientes com 32 úlceras venosas crônicas, atendidos no ambulatório de úlceras da dermatologia do CSE-FMRP-USP, das quais se constituíram 3 grupos (G) distintos pela forma de tratamento: G1-sonda 1 e SDZ; G2-sonda 2 e SDZ e G3-somente SDZ, seguidos por 90 dias. Após a assepsia das úlceras, as sondas foram aplicadas pontualmente sobre a ferida protegida com PVC, a 1,5 J/\'CM POT.2\', durante 30 seg/5 \'CM POT.2\', 2x/semana, e posterior curativo com SDZ. Quinzenalmente, as úlceras foram fotografadas digitalmente e suas imagens avaliadas por meio do software Image J (marca registrada), para mensuração das áreas total, de tecido de granulação (cor vermelha) e de esfacelo/fibrina (cor amarela). Foram calculados os índices de cicatrização das úlceras (ICU) pela fórmula [(ICU=Ai-Af)/Ai], sendo Ai (área inicial) e Af (área final). O ICUs médios do G2 foram de 0,3 e 0,5 no 30º e 90º dias com redução significante das áreas ulceradas (p < 0,01), quando comparado ao G3 com ICUs médios de -0,08 e -0,03 respectivamente. No G1, apenas no 90º dia, o ICU médio (0,42) foi diferente do G3 (-0,03), sendo p < 0,01. Ao considerar a freqüência das úlceras pequenas com ICU \'> OU =\' 0,4, o G2 teve esse índice alcançado por 75% das úlceras no 30º e no 90º dias, enquanto o G1 o atingiu em 33% das úlceras somente no 60º dia. À análise espectofotométrica no final do estudo, observou-se que os LEDs de 641 nm não emitiam luz eficaz na sonda 2, a qual se constituía essencialmente de LEDs de 891 nm. Os resultados obtidos demonstraram que a fototerapia LED 891 nm acelerou o processo cicatricial das úlceras venosas crônicas em relação ao LED 644 nm e, ambos, em relação à sulfadiazina de prata a 1%, corroborando as evidências de vários estudos in vivo e in vitro sobre o uso de fototerapia (laser e LEDs) de 600 a 1000 nm no reparo tecidual. Desta forma, a fototerapia por LEDs mostrou-se como um bom método físico, bioestimulador, não invasivo e coadjuvante aos tratamentos convencionais para úlceras venosas, como a sulfadiazina de prata a 1% / Venous ulcer is the most common type of ulcer in the lower limbs, consequent to chronic venous insufficiency. There are several forms to treat them from topical therapies such as 1% silver sulfadiazine cream to biostimulators devices as ultrasound, phototherapy and others. The phototherapy laser or LEDs (light-emitting diode) has been studied, mainly as biostimulator method for tissue repair and pain relief. This study aims to analyze the effectiveness of treatment with phototherapy (LEDs) associated with the daily dressing of 1% silver sulfadiazine cream (SDZ) in patients with chronic venous ulcers. This study was randomized, double-blind, in which device was used for phototherapy (Dynatron 880 Infrared Therapy Probe - Dynatron Solaris) containing 2 probes of similar conformation and their specifications were revealed only at the end of the study: probe 1 (1 LED - 644 nm, 18 mW, 1.12 J/\'CM POT.2\') and probe 2 (1 LED - 641 nm and 32 LEDs - 891 nm; 131 mW; 1.57 J/\'CM POT.2\'). Twenty patients were selected from ulcer outpatient clinic of dermatology service CSE-FMRP-USP, with 32 chronic venous ulcers, which were created 3 groups (G) by different forms of treatment: G1-probe 1 and SDZ; G2-probe 2 and SDZ and G3-only SDZ, followed by 90 days. After ulcers asepsis, the probes were applied on the wound punctually protected with PVC plastic sheet, to 1.5 J/\'CM POT.2\' for 30 seg/5 \'CM POT.2\', twice a week, and dressing with SDZ later. Fifthly, the ulcers were photographed digitally and their images were evaluated by the software ImageJ to measure of the total, granulation tissue (red) and sphacel/fibrin (yellow) areas. The wound healing rates (WHR) were calculated by formula [(WHR = Ao-Af)/Ai], meaning Ao (original area) and Af (final area). The averages of the G2 WHRs were 0.3 and 0.5 in the 30th and 90th days, with a significant reduction of the ulcerated areas (p < 0.01) when compared to the G3 with averages -0.08 and -0.03 respectively. In the G1, only at the 90th day, the mean of WHR (0.42) was different from the G3 (-0.03), and p<0.01. Considering the frequency of small ulcers with WHR \'> OU =\' 0.4, the G2 has reached this index by 75% of the ulcers in 30th and 90th days, while the G1 achieved in 33% of ulcers only in the 60th day. In the spectrophotometric analysis in the end of the study, it was observed that the 641 nm LEDs didn\'t issued effective light in probe 2, which was mainly constituted of 891 nm LEDs. The results showed that the 891 nm LED phototherapy accelerated the healing process of chronic venous ulcers in relation to the 644 nm LED, and both in relation to the silver sulfadiazine cream to 1%, corroborating evidence from several studies in vivo and in vitro on using of phototherapy (lasers and LEDs) of 600 to 1000 nm in tissue repair. Thus, the phototherapy by LEDs showed itself as a good physical method, biostimulator, noninvasive and an adjunct to conventional treatments for venous ulcers, such as silver sulfadiazine to 1%.

One of the greatest threats to human health is increasing antimicrobial resistance among pathogens, and finding alternatives for treatment of bacterial infections is of highest importance together with a more controlled use of antibiotics. Porphyrins and heme have both been shown to be a promising class of compounds for inactivation of bacteria; porphyrins by their excellent properties to act as a photosensitizer, and heme by its importance as an iron source during a bacterial infection in vertebrates. This thesis describes the development of analytical methods for the identification and determination of porphyrins and heme using liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry. Subsequently, these developed methods were applied to bacterial samples to investigate different culture conditions and additives effect to the intracellular porphyrin and heme composition. Singlet oxygen production of three naturally occurring porphyrins have been determined together with the photosensitivity for blue light and the porphyrin content in E. coli. Toothbrushes equipped with a LED, emitting light with a wavelength of 450 nm, were used in an eight week randomized clinical trial to investigate any positive periodontal effect of blue light. Porphyrin and heme content in Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis were highly affected by the different cultivation conditions. The culture age of A. actinomycetemcomitans affected the porphyrin profile, while only small changes were observed for P. gingivalis during growth. A large change of the porphyrin profile could be observed when the bacteria were passaged onto a new growth medium. Additional porphyrins were detected and the total porphyrin content increased up to 28 times. These findings highlight the need for more standardized cultivation procedures when performing in vitro experiments. Heme content in Escherichia coli was affected when different additives related to biosynthesis of heme were added to the growth medium. The uptake of heme could be reduced with 52% when a compound that chemically looks similar to heme was added to the growth medium. Since heme acquisition is important for many pathogens, this could be a promising target for antimicrobial drugs. E. coli showed no sensitivity for 405 nm light using light doses up to 172.8 J/cm2 and only low concentrations of porphyrins could be quantified. By adding a porphyrin precursor to E. coli the intracellular concentration of porphyrins increased remarkably and a light dose of 57.6 J/cm2 reduced the bacterial number with &gt; 5 log10 steps. This shows that E. coli can be killed due to their endogenous porphyrins. In the clinical study we could see a weak trend that the 450 nm LED toothbrush possessed a phototherapeutic effect for three clinical indices. All indices were decreased in the intervention group, but there were no statistically significant difference compared to the control group. However, four inflammation markers were significantly decreased in the intervention group while only one decreased significantly in the control group. In conclusion, this thesis has shown that porphyrins and heme are produced endogenously in microorganisms and that the porphyrin profiles vary depending on culture conditions and different additives. Furthermore, porphyrins may be used as endogenous photosensitizers to inactivate bacteria, but more research is necessary to determine if there is a specific porphyrin that contributes more to the photosensitivity. / <p>At the time of the doctoral defense, the following papers were unpublished and had a status as follows: Paper 4: Manuscript. Paper 5: Manuscript.</p>

In 2007, the Canadian Paediatric Society (CPS) released a guideline aimed at preventing complications of neonatal jaundice through universal screening and guidelines for follow-up and treatment. This thesis investigates the impact of implementation of the CPS guideline on health services utilization at a population level in Ontario. First, we surveyed all Ontario hospitals providing maternal-newborn services to determine if and when they had implemented universal bilirubin screening, and to gather information about the organization of services to provide follow-up and treatment, and about the factors that influenced screening implementation. Then we conducted two population-based cohort studies using linked administrative health data to evaluate the association between 1) the implementation of universal bilirubin screening and phototherapy use (during and following birth hospitalization) length of stay (LOS), jaundice-related emergency department (ED) visits and readmissions; and 2) universal bilirubin screening implementation and access to recommended follow-up care by socio-economic status (SES). By 2012, the majority of Ontario hospitals had implemented universal bilirubin screening. There is heterogeneity in how hospitals organize services, but a notable trend towards hospital-based post-discharge care. Screening was associated with an increase in phototherapy during hospitalization at birth (relative risk (RR) 1.32, 95% confidence interval (CI) 1.09-1.59), and a decrease in jaundice-related ED visits (RR 0.79, 95% CI 0.64-0.96), but no statistically significant difference in phototherapy after discharge, length of stay, or jaundice-related readmissions after accounting for pre-existing temporal trends in healthcare service use and other patient socio-demographic and hospital characteristics. Implementation of the universal bilirubin screening in Ontario was associated with a modest increase in rates of early follow-up (adjusted RR 1.11, CI 1.0014-1.22, p=0.0468), but most babies were not seen within the recommended timeframe. Babies of lowest SES were least likely to receive recommended follow-up, and disparities in follow-up increased following universal bilirubin screening implementation. En 2007, la Société canadienne de pédiatrie (SCP) a publié une directive visant à la prévention des complications de l'ictère néonatal par le dépistage universel et des lignes directrices pour le suivi et le traitement. Cette thèse étudie l'impact de la mise en œuvre de la directive SCP sur l'utilisation des services de santé à niveau de population de l'Ontario. Tout d'abord, nous avons interrogé tous les hôpitaux de l'Ontario offrant des services de santé maternelle-nouveau-né afin de déterminer si et quand ils avaient mis en œuvre le dépistage universel de la bilirubine, et à recueillir des informations sur l'organisation des services pour assurer un suivi et de traitement, et sur les facteurs qui ont influencé la mise en œuvre de dépistage. Ensuite, nous avons mené deux études de cohorte basée sur la population à partir de données administratives sur la santé pour évaluer 1 ) l'association entre la mise en œuvre du dépistage de la bilirubine universel et la photothérapie utilisation lors de l'hospitalisation à la naissance, la photothérapie après avoir sortie de l'hôpital, la durée du séjour, le service des urgences liées à la jaunisse et des réadmissions liées à la jaunisse; et 2 ) l'association entre la mise en œuvre du dépistage universel et l'accès aux soins de suivi recommandés et si cela différait entre les quintiles de statut socioéconomique. En 2012, la majorité des hôpitaux de l'Ontario a mis en œuvre le dépistage universel de la bilirubine. Il existe une hétérogénéité de la façon dont les hôpitaux organisent des services, mais une tendance notable vers les soins post-décharge en milieu hospitalier. Le dépistage a été associé à une augmentation de la photothérapie pendant l'hospitalisation à la naissance (risque relatif (RR) de 1,32, intervalle de confiance 95 % (IC 95 %) de 1,09 à 1,59), et une diminution des visites à l'urgence liées à la jaunisse (RR 0,79, IC 95 % 0,64 à 0,96), mais aucune différence statistiquement significative dans la photothérapie après la sortie , la durée du séjour , ou réadmissions liées jaunisse - après comptabilisation des tendances temporelles pré- existants dans l'utilisation des services de soins de santé et d'autres caractéristiques socio- démographiques des patients et caractéristiques de l'hôpital. La mise en œuvre de le dépistage universel en Ontario a été associée à une légère augmentation des taux de suivi précoce (RR ajusté 1,11; IC de 1,0014 à 1,22; p = 0,0468), mais la plupart des bébés n'ont pas été vues dans les délais recommandés. Les bébés de statut socioéconomique faibles étaient moins susceptibles de recevoir de soins de suivi recommandés et les disparités dans le suivi ont augmenté suite à la mise en œuvre du dépistage universel de la bilirubine.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-16T20:01:20Z No. of bitstreams: 1 Beatriz Guimarães Ribeiro.pdf: 1467862 bytes, checksum: d166e20babcfe778cdc4c7cf5708fc53 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-16T20:01:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beatriz Guimarães Ribeiro.pdf: 1467862 bytes, checksum: d166e20babcfe778cdc4c7cf5708fc53 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / The low level laser therapy (LLLT) is a resource capable of modulating in a positive way the different stages of the muscle repair process. However, little has been described about its effects when applied prior to injury, associated or not with post-injury treatment. The general objective of the present study was to evaluate the effect of LLLT applied prior to the muscle injury associated or not to the post-injury application on the rat skeletal muscle repair process. The aim of article 1 was to evaluate the effect of infrared LLLT applied prior to cryoinjury on the expression of IL-6, MyoD and myogenin. The aim of article 2 was to evaluate the effect of red and infrared LLLT prior to cryoinjury associated or not with post-injury application on oxidative stress. The aim of article 3 was to evaluate the effect of infrared LLLT applied prior to injury with or without post-injury application on the gene expression and protein synthesis of inflammatory cytokines TNF-α and IL-6, and muscle morphology. For the three studies, 205 Wistar rats were divided into the following experimental groups: Control; Injury; LLLT 660 nm prior to injury; LLLT 780 nm prior to injury; LLLT 660 nm pre- and post-injury; and LLLT 780 nm pre- and post-injury. The cryoinjury consisted of two applications of cane cooled in liquid nitrogen in the anterior tibial muscle (TA). The injured groups were evaluated at 1, 3, 7 and 14 days after injury (only for oxidative stress analysis, evaluation occurred at 1, 3, and 7 days). LLLT irradiation was performed with the AsGaAl laser (780 nm) at the parameters of 10 J/cm²; 40 mW; 10 seconds per point; 8 points; 3.2 J. At the end of the protocol, TA muscles were carefully removed for analysis of oxidative stress by lipid peroxidation (LPO) by chemiluminescence initiated by t-BOOH, protein oxidation through the carbonyl damage assay, and analysis of antioxidant enzymes: catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx). TNF-α and IL-6 cytokines were analyzed by quantitative real-time PCR for the detection of gene expression. In addition, a morphological analysis was performed by staining with hematoxylin and eosin. TNF-α and IL-6 cytokines were analyzed by ELISA for protein expression. Data were expressed as mean and standard error of the mean because they were parametric and the comparison between the groups was performed by ANOVA/Tukey (p<0.05). The results of article 1 demonstrate a reduction in the levels of IL-6 mRNA in the group irradiated prior to the injury, concluding that the LBP applied prior to injury was able to modulate positively this inflammatory cytokine, but had no effect on the myogenic regulatory factors MyoD and myogenin in the evaluated parameters. The results of article 2 containing the oxidative stress analysis showed that the irradiated groups presented reduction of the lipoperoxidation and positive modulation of the antioxidant enzymes during the muscle repair process, concluding the red and infrared laser were able to modulate positively the oxidative stress, being the most effective infrared laser in the modulation of antioxidant enzymes. The results of article 3 demonstrated a reduction in the gene expression of TNF-α in the group irradiated prior to injury. In the pre-and post-injury irradiated group, IL-6 and TNF-α mRNA levels increased during the skeletal muscle repair process, concluding that the infrared laser was able to positive modulation these inflammatory cytokines in the two forms of application. Therefore, it is concluded that the LLLT irradiated prior to injury associated or not with the post-injury application has a beneficial effect on inflammatory cytokines and oxidative stress during the repair of the skeletal muscle of rats. / O laser de baixa potência (LBP) é um recurso capaz de modular de forma positiva as diferentes etapas do processo de reparo muscular. Contudo, pouco há descrito sobre seus efeitos quando aplicado previamente a uma lesão, associado ou não a um tratamento pós-lesão. O objetivo geral do presente estudo foi avaliar o efeito do LBP aplicado previamente à lesão muscular associado ou não a aplicação pós-lesão sobre o processo de reparo musculo esquelético de rato. O objetivo do artigo 1 foi avaliar o efeito do LBP infravermelho aplicado previamente à criolesão sobre a expressão de IL-6, MyoD e miogenina. O objetivo do artigo 2 foi avaliar o efeito do LBP vermelho e infravermelho previamente a criolesão associado ou não a aplicação pós-lesão sobre o estresse oxidativo. O objetivo do artigo 3 foi avaliar o efeito do LBP infravermelho aplicado previamente à criolesão associado ou não a aplicação pós-lesão sobre a expressão gênica e síntese proteica das citocinas inflamatórias TNF-α e IL-6, e morfologia muscular. Para a realização dos três estudos, foram utilizados 205 ratos Wistar, divididos nos seguintes grupos experimentais: Controle; Somente lesão; LBP 660 nm previamente à lesão; LBP 780 nm previamente à lesão; LBP 660 nm pré e pós-lesão; e LBP 780 nm pré e pós-lesão. A criolesão consistiu de duas aplicações de bastão resfriado em nitrogênio líquido no músculo tibial anterior (TA). Os grupos lesionados foram avaliados em 1, 3, 7 e 14 dias após a lesão (somente para análise de estresse oxidativo, a avaliação ocorreu em 1, 3, e 7 dias). A irradiação com LBP foi realizada com o laser AsGaAl (780 nm) nos parâmetros de 10 J/cm²; 40 mW; 10 segundos por ponto; 8 pontos; 3.2 J. Ao término do protocolo, os músculos TA foram retirados cuidadosamente para análise de estresse oxidativo pela lipoperoxidação (LPO) por quimiluminescência iniciada por t-BOOH, pela oxidação proteica através do ensaio de dano as carbonilas, e pela análise das enzimas antioxidantes: catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx). Também foram analisadas as citocinas TNF-α e IL-6 por PCR em tempo real quantitativo para detecção da expressão gênica. Além disso, foi realizada análise morfológica por coloração com hematoxilina e eosina. As citocinas TNF-α e IL-6 também foram analisadas por ELISA para detecção da expressão proteica. Os dados foram expressos em média e erro-padrão da média por se apresentarem paramétricos e a comparação entre os grupos foi realizada pelo ANOVA/ Tukey (p<0,05). Os resultados do artigo 1 demonstram redução nos níveis de mRNA IL-6 no grupo irradiado previamente à lesão, concluindo que o LBP aplicado previamente à lesão foi capaz de modular positivamente essa citocina inflamatória, mas não teve efeito sobre os fatores regulatórios miogênicos MyoD e miogenina nos parâmetros avaliados. Os resultados do artigo 2 contendo a análise de estresse oxidativo demonstram que os grupos irradiados apresentaram redução da lipoperoxidação e modulação positiva das enzimas antioxidantes durante o processo de reparo muscular, concluindo que tanto o laser vermelho como infravermelho foram capazes de modular positivamente o estresse oxidativo sendo o laser infravermelho mais eficaz na modulação de enzimas antioxidantes. Os resultados do artigo 3 demonstram uma redução na expressão gênica de TNF-α no grupo irradiado previamente a lesão. Já no grupo irradiado pré e pós-lesão, houve aumento dos níveis de mRNA IL-6 e TNF-α durante o processo de reparo musculo esquelético, concluindo que o laser infravermelho foi capaz de modular de forma positiva essas citocinas inflamatórias nas duas formas de aplicação. Portanto, conclui-se de forma geral que o LBP utilizado previamente à lesão associado ou não a aplicação pós-lesão tem efeito benéfico sobre a modulação de citocinas inflamatórias e do estresse oxidativo durante o reparo do músculo esquelético de ratos.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-19T19:06:04Z No. of bitstreams: 1 Fernanda Cordeiro da Silva.pdf: 1381976 bytes, checksum: fbe6ec859374d855f93a0382db62b771 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-19T19:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernanda Cordeiro da Silva.pdf: 1381976 bytes, checksum: fbe6ec859374d855f93a0382db62b771 (MD5) Previous issue date: 2017-11-30 / Background: Spinal injury is a devastating condition with physical, emotional, psychological, social and financial repercussions for affected individuals and their families. This type of injury impedes the performance of functional activities due to the partial or complete interruption of ascending sensory and descending motor pathways. Photobiomodulation is a noninvasive treatment that has been widely used in neurotrauma and neurodegenerative diseases. In the present study, low-level laser therapy was administered in cases of spinal cord injury to investigate the sensory responses and perceptions of patients. The aim of the present study was to investigate the sensory and motor response and perception of the patients with spinal cord injuries submitted to photobiomodulation therapy. Methods/Design: The 25 volunteers were randomly allocated in the control group-placebo more physical therapy or group photobiomodulation more physical therapy. Photobiomodulation was performed three times per week for a total of 12 sessions. A wavelength of 810 nm was used, 5 points being 25 J per point, exactly on the region of the cord where it was injured, radiant power, 120 mW, 208 seconds per point and Radiant Exposure 983 J/cm2. All individuals were evaluated using the ASIA scale, a sensory perception questionnaire and electromyography to assess the motor response before, immediately after and 30 days after photobiomodulation. The control group-placebo was subjected to photobiomodulation simulated, that is, without emission of radiation. The data were analyzed statistically, with α < 0.05 considered indicative of statistical significance. Results: Thirteen types of sensorimotor changes were reported, with a significant difference between groups in relation to "trait contractions." In the intragroup analysis of the photobiomodulation group, statistically significant differences were found between the pre-intervention and immediate post-sensory sensory evaluations, as well as between sensory evaluations after immediate intervention and 30 days after photobiomodulation. No significant differences were found in the control group between any of the evaluation times. In the intra-group analysis of the laser group, median frequency values of the brachial biceps and femoral quadriceps muscles were higher at rest and during isotonic contraction 30 days after photobiomodulation. Conclusion: In the present study, phototherapy was effective in promoting a motor and sensory response in individuals with spinal cord injuries, so the results suggest that photobiomodulation may be a promising approach for the treatment of sensorimotor changes in patients with lesions of the spinal cord. / Introdução: A lesão medular é uma condição devastadora com repercussões físicas, emocionais, psicológicas, sociais e financeiras para os indivíduos afetados e suas famílias. Este tipo de lesão impede o desempenho de atividades funcionais devido à interrupção parcial ou total das vias motoras sensoriais e descendentes e ascendentes. A fotobiomodulação é um tratamento não invasivo amplamente utilizado em neurotrauma e doenças neurodegenerativas. No presente estudo, a fotobiomodulação foi administrada na medula espinhal lesada com objetivo de investigar as respostas sensório-motoras e as percepções dos pacientes após o tratamento. Métodos: Os 25 voluntários foram alocados aleatoriamente no grupo controle-placebo mais fisioterapia ou grupo fotobiomodulação mais fisioterapia. A fotobiomodulação foi realizada três vezes por semana com um total de 12 sessões. Foi utilizado o comprimento de onda de 810 nm, 5 pontos sendo 25 J por ponto, exatamente sobre a região da medula onde foi lesada, potencia radiante 120 mW, 208 segundos por ponto, exposição radiante 983 J/cm². Todos os indivíduos foram avaliados utilizando a escala ASIA, a entrevista de percepção sensorial e eletromiografia para avaliar a resposta motora antes, imediatamente após e 30 dias após a fotobiomodulação. O grupo controle-placebo foi submetido à fotobiomodulação simulada, ou seja, sem emissão da radiação. Os dados foram analisados estatisticamente, com um α <0,05 considerado indicativo de significância estatística. Resultados: Foram relatados 13 tipos de alterações sensório-motoras, com uma diferença significativa entre os grupos em relação aos esboços de contrações. Na análise intragrupo, no grupo fotobiomodulação, foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre as avaliações sensoriais pré-intervenção e pós imediata, bem como, entre avaliações sensoriais após intervenção imediata e 30 dias após a fotobiomodulação. Não foram encontradas diferenças significativas no grupo controle em quaisquer uns dos tempos avaliados. Na análise intragrupo, no grupo fotobiomodulação, os valores de freqüência mediana do bíceps braquial e do quadríceps femoral foram maiores em repouso e durante a contração isotônica 30 dias após a fotobiomodulação. Conclusão: No presente estudo, a fototerapia foi efetiva na promoção de uma resposta motora e sensorial em indivíduos com lesões da medula espinhal, sendo assim, os resultados sugerem que a fotobiomodulação pode ser uma abordagem promissora para o tratamento de alterações sensório-motoras em pacientes com lesões da medula espinhal.

Present work has been focused on the importance of the products of the heme catabolic pathway, in particular under conditions of unconjugated hyperbilirubinemias (neonatal jaundice and Crigler-Najjar syndrome (CNS)). The second part of the project was focused on the improvement of some pharmacological approaches used in the treatment of these diseases, as well as on studies of bilirubin products that are formed during the treatment by phototherapy (PT). Neonatal jaundice is one of the most common complications in neonates. Currently, there is no efficient pharmacotherapy and the treatment with blue light is used as a gold standard for severe neonatal jaundice. However, the absolute safety of PT has still not been confirmed. In this context, it is important to note that some neonatologists start the PT before serum bilirubin levels reach the recommended values and that patients with CNS type I (CNSI) are forced to be on life-long PT (unless undergoing liver transplantation). The focus of the present project was to study biological effects of bilirubin photoisomers (PI) in an in vitro model of the human neuroblastoma SH-SY5Y cells that are used for studies of the neuronal metabolism. In further studies performed on animal model of hyperbilirubinemic rats and mice, we investigated a suitable gene...