Orientadores: Fernando Ferreira Costa, Valder Roberval Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T04:25:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ozelo_MargarethCastro_D.pdf: 10683645 bytes, checksum: d3f023c228cd390367aaa3992b5e629d (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As plaquetas estão associadas não só às atividades hemostáticas, como também à resposta inflamatória. O comprometimento funcional das plaquetas está relacionado à ocorrência de patologias hemorrágicas e ao maior risco para desenvolvimento de aterosclerose e doença arterial oclusiva. O primeiro objetivo deste estudo foi estudar as alterações do complexo das glicoproteínas de membrana plaquetária (GP) Ib(a e f3)-IX-V que levam à perda da sua capacidade hemostática, resultando na patologia hemorrágica denominada Síndrome de Bernard-Soulier (SBS). Foram avaliadas as alterações moleculares da GP Iba, que contém os sítios de ligação para fator de von Willebrand (FvW), trombina e integrinas (presentes na região N-terminal globular da GP Iba). Entre os casos com plaquetopenia persistente avaliados no Ambulatório de Hemostasia do Hemocentro da Unicamp, houve a confirmação do diagnóstico de SBS em três pacientes. Em dois destes indivíduos com SBS foi possível identificar duas mutações distintas em homozigose na região N-terminal globular da GP Iba. Uma destas mutações é resultado da troca de T~A, levando à substituição da Cys209 ~ Ser, comprometendo uma das ligações dissulfídicas que ocorrem entre os resíduos Cys209 - Cys248 e Cys211 - Cys268. Esta mesma mutação já havia sido descrita anteriormente por Simsek e cols. (1994). A segunda mutação evidenciou pela primeira vez a ocorrência da troca de T~C, com substituição da Leu115~Pro, na região das repetições ricas em leucina da GP Iba. Em ambos os casos a avaliação por citometria de fluxo mostrou que a GP Iba estava ausente, sugerindo que estes resíduos sejam essenciais para manter a integridade da molécula. o terceiro paciente apesar do diagnóstico clínico e laboratorial de 888, confirmado pela ausência das GP Iba e GP IX pela citometria de fluxo evidenciou exclusivamente uma alteração não descrita no códon iniciador ATG do gene da GP IbB, levando à substituição da -25Met --7 Arg em heterozigose. No entanto, foi observado que outros membros da família, apesar de assintomáticos, eram portadores da mesma alteração. Embora na literatura, a 888 seja relacionada exclusivamente com mutações ocorrendo nos genes da GP Iba, GP IbB e GP IX, é possível que a diferença fenotípica e clínica deste caso possa revelar outros mecanismos reguladores do complexo GP Ib-IX-V possam estar envolvidos na ocorrência da 888. Na outra parte deste estudo, foi estudada a prevalência genotípica de três polimorfismos da GP Iba: seqüência Kozak, HPA-2 e VNTR. A avaliação de 492 indivíduos brasileiros, pertencentes a três grupos étnicos distintos (caucasóides; negróides e indígenas), permitiu a identificação de dez haplótipos distintos, onde: o Kozak-TT/HPA-2aaNNTR-CC foi o mais comum (-40%) entre os caucasóides e negróides e o Kozak- TT/HP A-2aaNNTR-CC e Kozak- TC/HP A-2aaNNTR-CC estiveram presentes na mesma proporção entre os indígenas. Embora anteriormente fosse descrita a presença de uma ligação de desequilíbrio entre os polimorfismos VNTR e HPA-2, neste estudo esta ligação não foi completa em cerca de 10% dos indivíduos de todos os três grupos. Dois indivíduos não relacionados apresentaram uma variante rara, o alelo VNTR - E, onde há perda da seqüência de 39 pb, o que foi confirmado pelo seqüenciamento da região. O estudo funcional das plaquetas destes indivíduos e seus familiares, não evidenciaram diferença em relação às demais variantes do VNTR. alelo VNTR-A com quatro cópias da repetição de 39 pb, presente em populações asiáticas, não foi encontrado em nenhum dos cerca de 1.000 indivíduos aqui estudados. No entanto, entre duas espécies de primatas não humanos (chimpanzé e gorila), ambos apresentaram oalelo VNTR-A em homozigose (Kozak-TT/HPA- 2aaIVNTR-AA). Foi possível desta maneira sugerir um novo mecanismo evolutivo para o surgimento das variantes do gene da GP Iba, onde diferentemente do proposto anteriormente, acreditamos que a variante com maior número de cópias tenha precedido as demais, e com a perda sucessiva destas cópias, as variantes menores foram surgindo. Finalmente em um estudo caso-controle investigou-se o risco para ocorrência de infarto agudo do miocárdio (IAM) relacionado aos três polimorfismos da GP Iba. Foram avaliados 350 indivíduos com antecedente de IAM, divididos em grupo 1, que foram incluídos no momento do primeiro IAM e grupo 2, que sobreviveram a um ou mais episódio de IAM há mais de seis meses. Estes pacientes foram pareados por sexo, idade e raça a 350 controles. O genótipo VNTR-CD, assim como o alelo D, foi mais freqüente entre os pacientes com IAM que entre os controles. Embora esses resultados sejam diferentes do descrito na literatura. A análise da gravidade da doença coronariana oclusiva, baseada no número de vasos com obstrução de pelo menos 50% do lúmen, mostrou um aumento significativo da prevalência do alelo D entre os indivíduos com doença mais grave. Os resultados deste trabalho corroboram com estudos anteriores sobre a influência dos polimorfismos do gene da GP Iba e a função plaquetária / Abstract: Platelets are associated not only with haemostatic activity, but also with inflammatory response. Functional alterations of platelets are related with bleeding diseases and with a greater risk for developing atheriosclerosis and occlusive artery disease. In this study we analyzed the molecular alterations in the platelet membrane glycoprotein (GP) Iba, the subunit of the complex GP Ib(a and ~)-IX-V. The GP Iba contains binding sites for von Willebrand factor (vWF), thrombin and actin-binding proteins. First of ali, we studied the mutations in the complex GP Ib-IX-V related with the 1055of haemostatic function, resulting in a bleeding disease denominated Bernard-Soulier syndrome (BSS). We identified two distinct mutations in homozygous affecting the Nterminal globular region (where the vWF and thrombin biding sites are located) in two unrelated subjects with BSS. One of these mutations, was first describe by Simsek et aI., 1994, where a homozygous single base pair mutation T-7A, resulted in a substitution of a Cys209 -7 Ser, which involving one of the two disulfide loops from the C-terminal flanking sequence between Cys209 - Cys248 and Cys211 - Cys268. The second subject with BSS presented for the first time, the occurrence of a single base pair exchange T-7C, leading to a single amino acid substitution of the Leu115-7Pro, in the region of the leucine-rich repeats of the GP Iba. In both cases a 1055of GP Iba expression was observed, suggesting that these residues, are essential in maintaining the integrity of the molecule. The third case of BSS, presents serious hemorrhagic symptoms and an intense reduce in the platelet number, in addition to a lack of expression of GP Iba and GP IX. Although none of the other family members presented a bleeding history, the mother of the patient, a maternal uncle and her maternal grandfather, presented a mild macrothrombocytopenia. The sequence of the involved genes (GP Iba, GP Ib(3e GP IX), revealed a non described alteration with the exchange of T~G in initial start ATG codon of the GP Ib(3gene exclusively, leading to the substitution of the -25Met ~ Arg in heterozygosity as in the patient and between the affected members of the family. Thus, it may be that the BSS phenotype in this patient involves other proteins or gene regulators related to the complex GP Ib-IX-V. There are no other genes described involving BSS development , except the first three described, GP Iba, GP Ib(3e GP IX. In the other part of this study, we determined the prevalence of the distinct genetic variants of the GP Iba, resulting from three polymorphisms: Kozak sequence, HPA-2 and VNTR. First, 492 subjects from three distinct Brazilian ethnic groups were evaluated, including: Caucasians; African descents, and Indigenous. The presence of 10 distinct haplotypes were determined. The most common (-40%) haplotype was the Kozak-TT/HPA-2aaNNTR-CC for both Caucasian and African descents. However, among Indigenous, Kozak-TT/HPA-2aaNNTR-CC and Kozak-TC/HPA-2aaNNTR-CC were equal/y present. Although a strong linkage disequilibrium between VNTR and HPA-2 polymorphism had been observed at first, here we determined incomplete linkage disequilibrium in 10% of the subjects from ali ethnic groups. Two unrelated subjects presented the allele VNTR - E, arare variant lacking the 39bp repeat, and functional platelet studies among these subjects and their family members revealed no abnormalities. No VNTR-A allele, the largest variant containing 4 copies of the repeats, was identified among approximately 1,000 subjects studied in this population. However, homozygosity for the VNTR-A allele (Kozak-TT/HPA-2aaNNTRAA) was determined in two distinct species of non-human primates (chimpanzee and gorilla). These results suggest a greater complex evolutionary mechanism in the macroglycoprotein region of the GP Iba gene, different from that previously proposed, an hypothesis is that the largest variant, VNTR-A should be considered the oldest allele and that subsequent deletions resulted in the smaller forms. We also carried out a case-control study correlating the three polymorphisms of the GP Iba and the risk for myocardial infarction (MI) occurrence. 350 subjects who had suffered a previously episode of MI, were divided into: group 1, having suffered the first MI at the moment of inclusion and group 2, who had survived to one or more episodes of MI, in which the last episode had occurred at least six months before enrollment. These patients were matched by sex, age and race to 350 controls. Genotype VNTRCD, as well as allele D were more frequent among the patients with MI than among controls. Although this differed from that previously described, it was possible to observe that when the severity of coronary artery disease among these patients was analyzed, assigned by the number of affected vessels by coronary angiography, the allele O was also associated with more extensive disease. Also, it is in accordance to functional data related to the polymorphisms of GP Iba gene previously described / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2005 / Bibliografia: f.40-49 / Micropartículas são pequenas vesículas (geralmente <1m diâmetro), liberadas da membrana plasmática de células ativadas ou apoptóticas. Já foram descritas micropartículas derivadas de vários tipos celulares, como leucócitos, células vasculares, plaquetas e / Microparticles are small vesicles, produced during cell activation or apoptosis. They can be derived from several cell types, such as leukocytes, vascular cells, platelets and hepatocytes. An increase in circulating microparticles number has been document

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-graduação em Odontologia / Made available in DSpace on 2012-10-21T09:15:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 209158.pdf: 715656 bytes, checksum: 208190e8e62ae24ad119ab5fe35f8f2a (MD5) / A regeneração óssea do osso alveolar é freqüentemente necessária para possibilitar a colocação de implantes em uma posição ideal de estética e função. As técnicas cirúrgicas de reconstrução têm como objetivo primordial uma melhora na qualidade e quantidade óssea para que o rebordo retorne as funções de suporte, tal como antes da perda do dente natural. Entre as técnicas que são utilizadas podemos citar : enxertos ósseos autógenos, alógenos xenógenos, materiais aloplásticos, regeneração tecidual guiada e distração osteogênica.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-11Bitstream added on 2014-06-13T21:06:12Z : No. of bitstreams: 1 pola_nm_dr_araca.pdf: 634797 bytes, checksum: 8b4ab7ef9455c2193ad36e3bcf123e2a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo avaliou a influência do Plasma Rico em Plaquetas (PRP) e da Fibrina Rica em Plaquetas (FRP) no reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC) criados cirurgicamente em calvárias de ratos. 90 ratos foram aleatoriamente divididos em 3 grupos: C (controle), PRP e FRP. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo somente. Nos grupos PRP e FRP, os defeitos foram preenchidos com PRP e FRP, respectivamente. Os animais foram eutanasiados aos 7, 15 ou 30 dias pós-operatórios. Análises histomorfométrica e imunoistoquímica foram realizadas. A Área de Osso Neoformado (AON) foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Imunomarcações do antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), fator de transcrição relacionado à Runt 2 (Runx2), proteína morfogenética óssea - 2 (BMP-2) e fosfatase alcalina específica do osso (BALP) foram realizadas. Células positivas para PCNA e Runx2 foram quantificadas e as imunomarcações para BMP-2 e BALP foram semi-quantificadas. Os dados foram estatisticamente analisados. Aos 7 dias, o Grupo PRP (10,74 ± 4,80%) apresentou AON significativamente maior do que os grupos C (0,86 ± 0,98%) e FRP (2,95 ± 2,37%). Aos 15 dias, os grupos C, PRP e FRP apresentaram AON similares (13,07 ± 4,48%; 14,19 ± 2,85%; 18,83 ± 6,71%, respectivamente). Aos 30 dias, os grupos PRP (32,75 ± 7,39%) e FRP (28,73 ± 10,67%) apresentaram AON significativamente maior do que o Grupo C(13,55 ± 4,62%). Não houve diferenças estatisticamente significativas entre os grupos PRP e FRP aos 30 dias. Aos 7 dias, os grupos PRP e FRP apresentaram número de células PCNA-positivas significativamente maior do que o Grupo C. Aos 15 dias, o Grupo FRP apresentou número de células... / This study evaluated the influence of Platelet-Rich Plasma (PRP) and Platelet-Rich Fibrin (PRF) on bone healing in surgically created critical-size defects (CSD) in rat calvaria. 90 rats were randomly divided into 3 groups: C (control), PRP and PRF. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In groups PRP and PRF, the defects were filled with PRP and PRF, respectively. Animals were euthanized 7, 15 or 30 days postoperatively. Histomorphometric and immunohistochemical analyses were performed. Newly formed bone area (NFBA) was calculated as percentage of the total area of the original defect. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA), Runt-related transcription factor 2 (Runx2) Bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) and Bone Alkaline phosphatase (BALP) immunohistochemical staining were performed. PCNA-positive and Runx2-positive cells were quantified and BMP-2 and BALP immunostaining were semi-quantified. Data were statistically analyzed. At 7 days, Group PRP (10.74 ± 4.80) had significantly greater NFBA than groups C (0.86 ± 0.98) and PRF (2.95 ± 2.37). At 15 days, groups C, PRP and PRF presented similar amount of NFBA (13.07 ± 4.48; 14.19 ± 2.85; 18.83 ± 6.71, respectively). At 30 days, groups PRP (32.75 ± 7.39) and PRF (28.73 ± 10.67) presented significantly greater NFBA than Group C (13.55 ± 4.62) and no significant differences were observed between groups PRP and PRF. At 7 days, Groups PRP and PRF showed a significantly higher number of PCNA-positive cells than Group C. At 15 days, Group PRF had a significantly higher number of PCNA-positive cells than groups C and PRP; Group PRP had a significantly higher number of these cells than Group C... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-13Bitstream added on 2014-06-13T18:45:13Z : No. of bitstreams: 1 deliberador_tm_dr_araca.pdf: 1826350 bytes, checksum: c9b70744658285e53b20a4d8f21b9cf5 (MD5) / O objetivo do presente estudo foi avaliar, histologicamente, o processo de cicatrização de defeitos de furca Classe II, criados cirurgicamente e tratados com a associação do Plasma Rico em Plaquetas (PRP), partículas esféricas de Novo Vidro Bioativo (NVB) e Sulfato de Cálcio (SC). Os segundos e quartos prémolares mandibulares de 8 cães foram usados neste estudo. Defeitos de furca Classe II (5 mm de altura x 2 mm de profundidade) foram criados cirurgicamente e imediatamente tratados. Usando o modelo de boca dividida, os dentes foram aleatoriamente divididos em 2 grupos: Grupo C (controle): o defeito foi preenchido somente com coágulo sanguíneo e Grupo T (teste): o defeito foi preenchido com a associação de PRP, NVB e SC. Os retalhos foram reposicionados para cobrir totalmente os defeitos. A eutanásia dos animais foi realizada aos 90 dias pósoperatórios. Foram obtidos cortes histológicos seriados mésio-distais, corados com Hematoxilina e Eosina. Foram realizadas análises histométrica, usando um software analisador de imagens, e histológica. Foram avaliadas medidas lineares e de área da cicatrização periodontal, calculadas como porcentagem do defeito original. Os dados percentuais foram transformados em arcoseno para análise estatística (análise de variância, p < 0,05). A regeneração óssea e de tecido conjuntivo nos defeitos de furca foi incompleta na maioria dos espécimes. O Grupo C apresentou quantidade de neoformação óssea e regeneração periodontal significativamente maior que o Grupo T. Quantidade considerável de partículas remanescentes de NVB foi observada na maioria dos espécimes do Grupo T. Dentro dos limites do presente estudo, pode-se concluir que a associação do PRP, NVB e SC não foi mais efetiva que o debridamento cirúrgico somente no tratamento de defeitos de furca Classe II. / The purpose of this study was to histologically evaluate the healing of surgically created Class II furcation defects treated using a combination of platelet-rich plasma (PRP), new spherical bioactive glass (NBG) particles and calcium sulfate (CS). The second and fourth mandibular premolars of eight mongrel dogs were used in this study. Class II furcation defects (5 mm in height x 2 mm in depth) were surgically created and immediately treated. Using a split-mouth design, teeth were randomly divided into two groups: group C (control) - defect filled with blood clot only; and group T (test) - defect filled with a combination of PRP, NBG and CS. Flaps were repositioned to cover all defects. The animals were euthanized 90 days post-surgery. Mesio-distal serial sections were obtained and stained with either hematoxylin and eosin. Histometric, using image-analysis software, and histologic analyses were performed. Linear and area measurements of periodontal healing were evaluated and calculated as a percentage of the original defect. Percentage data were transformed into arccosine for statistical analysis (analysis of variance; P<0.05). Regeneration of bone and connective tissue in the furcation defects was incomplete in most of the specimens. Group C had significantly more bone formation and periodontal regeneration than group T. A considerable amount of remaining NBG particles was observed in most specimens of group T. Within the limits of this study, it can be concluded that the combination of PRP, NBG and CS was not more effective than the surgical debridement alone in the treatment of Class II furcation defects.

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-07Bitstream added on 2014-11-10T11:57:29Z : No. of bitstreams: 1 000785278.pdf: 9323801 bytes, checksum: f9990068cf96a193d90d9cb627dc3c41 (MD5) / Objetivos: Avaliar, através de um estudo clinico, randomizado, controlado e cego, a eficácia do plasma rico em plaquetas na cicatrização, dor e hemostasia após artroplastia total do joelho. Metodologia: Foram selecionados 40 pacientes que seriam submetidos a prótese total do joelho e randomizados. Em 20 destes pacientes foi aplicado o plasma rico em plaquetas antes do fechamento da cápsula articular. Foram realizadas dosagens de hemoglobina (mg/dL) e hematócrito (%) no pré-operatório, após 24 e 48 horas da cirurgia. Aplicado o questionário WOMAC, a escala verbal da dor e medidas as amplitudes de movimento do joelho até o 2o mês pós-operatório. A análise estatística comparou os resultados afim de comprovar haver diferença entre os grupos em cada um dos momentos da avaliação. Resultados: Medidas do valor da hemoglobina (mg/dL) e hematócrito (%) realizadas no pré-operatório, após 24 e 48 horas da cirurgia não mostraram diferenças significativas entre os grupos (p>0,05). O questionário WOMAC e a amplitude de movimento medidas no pré-operatorio e até os dois primeiros meses também não mostraram diferenças estatísticas entre os grupos (p>0,05). A avaliação da dor através da escala verbal, mostrou vantagem no grupo que utilizou o plasma rico em plaquetas após 24 e 48 horas, uma e três semanas e dois meses de pós-operatório (p<0,05). Conclusões: Da maneira que foi utilizado, o plasma rico em plaquetas não se mostrou efetivo para reduzir sangramento ou melhorar a função do joelho após a artroplastia em comparação aos controles. Houve vantagem na escala verbal de dor pós-operatória. Descritores: Artroplastia, joelho, transfusão, plasma rico em plaquetas, sangramento / Purpose: To assess, through a clinical study, randomized, controlled ande singleblinded, the effectiveness of platelet-rich plasma in healing, pain and hemostasis after a total knee arthroplasty. Methods: 40 patients, that would be submitted to total knee arthroplasty, were selected and randomized. In 20 of these was applied platelet-rich plasma before the closure of the joint capsule. Hemoglobin and hematocrit levels were measured in the preoperative, after 24 and 48 hours of surgery. The WOMAC questionnaire and verbal pain scale were applied, measures of the range of motion of the knee were performed until the second postoperative month. Statistical analysis compared the results in order to prove if there is a difference between the groups at each time of evaluation times. Results: Hemoglobin and hematocrit levels performed preoperatively, after 24 and 48h of surgery showed no significant differences between groups (p>0,05). The WOMAC questionnaire and the measures of range of motion in the preoperative and even in the first two months also showed no statistic differences between groups (p>0,05). Pain assessement through verbal scale showed benefit in the group using platelet-rich plasma after 24 and 48 hours, one to three weeks and two months postoperative (p<0,05). Conclusions: The way it was used, the platelet-rich plasma was not effective for reducing bleeding or improve knee function after arthroplasty compared with controls. There was an advantage in the verbal scale of postoperative pain

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-19Bitstream added on 2014-06-13T18:50:20Z : No. of bitstreams: 1 ariede_jr_me_botfm.pdf: 465481 bytes, checksum: 176c1868eb3cbd83f7fadce9ed496bcc (MD5) / A detecção do RNA viral do VHC tem sido documentada em outros compartimentos biológicos além do soro e plasma de pacientes infectados pelo vírus, como nas plaquetas. No entanto, sua influência na terapia antiviral é desconhecida. Poucos estudos têm sido realizados na tentativa de avaliar a quantificação do RNA viral em outros compartimentos biológicos e a significância deste achado no resultado da terapia antiviral. Considerando que o VHC é carreado pelas plaquetas na circulação, a avaliação quantitativa do RNA viral neste compartimento biológico pode se mostrar distinta da observada no plasma.Realizar a avaliação comparativa in vitro do RNA do VHC plasmático e do RNA do VHC carreado à plaqueta e, realizar a avaliação comparativa da quantificação do RNA viral do VHC em plasma e plaquetas de pacientes com recidiva ao tratamento antiviral.Amostras de sangue periférico provenientes de pacientes infectados pelo VHC foram utilizadas para realização de dois experimentos. Experimento in vitro (repetido em triplicata) consistiu na separação de quatro alíquotas da mesma amostra, as quais foram submetidas a incubação a 37oC por 30xg por diferentes intervalos de tempo (0, 48, 96, 144h) e, posteriormente separadas para obtenção de plasma e pellet de plaquetas. A partir de cada uma destas frações foi extraído RNA viral, o qual foi utilizado como fonte para qPCR. Experimento in vivo: Foram acompanhados pacientes que iniciaram e finalizaram a terapêutica entre janeiro de 2011 a julho de 2012 e, dentre estes, os que apresentaram recidiva virológica ao tratamento antiviral estabelecido. Dos pacientes em recidiva virológica foram processadas amostras para a obtenção do plasma e pellet de plaquetas em dois momentos: no momento da recidiva virológica e, no momento imediatamente anterior (12 semanas anteriores... / Treatment for chronic hepatitis C is effective in about 50% of patients treated with exogenous interferon, which induces interferon-stimulated genes leading to endogenous interferon production. Integrins are involved in interferon production and structural modifications of them can be associated with altered function. Some integrins, expressed on the platelet membrane, show polymorphic antigenic determinants called human platelet antigens (HPA). The association between HCV infection and HPA-5b has already been demonstrated, in the same way the HPA profile could be associated with therapeutic response. This study aimed evaluates the association between the HPA-1, -3, -5 frequencies and therapy response in HCV-infected patients. HPA genotyping was performed in 168 HCV-infected patients by PCRSSP or PCR-RFLP. The patients were on interferon- (48.8%: 43.9% carriers of HCV genotype 1 and 56.1% non-1) or peginterferon (51.2%; 87.2% carriers of HCV genotype 1 and 12.8% non-1), both combined with ribavirin. Statistical analysis was performed using the proportional odds model. The genotypic frequency of HPA-1a/1b was significantly higher in the patients with therapeutic failure (odds ratio=3.58, 95% CI -1.18 – 10.82). The results suggest that the HPA-1a/1b genotype is associated with therapy failure... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-05Bitstream added on 2014-06-13T18:19:57Z : No. of bitstreams: 1 silva_alm_me_jabo.pdf: 515451 bytes, checksum: e4541fd6e085b2151dc035caa5bdb7d9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O rhG-CSF é uma citocina que eleva o número de neutrófilos e também mobiliza células-tronco hematopoéticas (CTH) para o sangue periférico, porém sua aplicação pode ocasionar a queda de plaquetas. O objetivo do presente trabalho foi estabelecer entre três diferentes doses (5, 10 e 20μg/Kg/dia) do rhG-CSF qual proporcione mobilização de pelo menos 10 CTH CD34+/μL ao sangue periférico, elevação do número de neutrófilos, além de avaliar seu efeito sobre o número de plaquetas em cães sadios. O rhG-CSF (filgrastine) foi aplicado em cães sadios durante quatro dias e a contagem no número de CTH CD34+/μL, neutrófilos e plaquetas foi obtida durante a aplicação da citocina e sete dias após o término da aplicação. A leucocitose ocorreu devido à elevação dose-dependente de neutrófilos segmentados que ocorreu 24 horas após a primeira aplicação do medicamento com diferença estatística. Entretanto, 48 horas após a última dose, os valores retornaram aos níveis basais nos três grupos. O número de plaquetas reduziu após a primeira dose e não recuperou até o último momento de avaliação. Em relação às CTH CD34+, para os grupos que receberam 10 e 20μg/Kg/dia ocorreu elevação dose–dependente 24h após primeira aplicação com diferença estatística; no grupo que recebeu 5μg/Kg/dia os valores não elevaram. A dose de 5μg/Kg/dia foi suficiente para elevar os valores de neutrófilos, porém não acarretou na mobilização de CTH CD34+. As três doses administradas aos animais levou a queda nos valores de plaquetas, sendo necessária precaução ao administrar em cães trombocitopenicos / The rhG-CSF is a cytokine that increase the number of neutrophils and also mobilizes hematopoietic stem cell (HSC) to peripheral blood, but their application can cause a drop in platelets. The aim this work was to establish between three different doses (5, 10 e 20 μg/kg/day) of rhG-CSF which provides mobilization at least 10 HSC CD34+/μL to peripheral blood, increased number of neutrophils and to evaluate its effect on the number platelets in normal dogs. The rhG-CSF (Filgrastine®) was applied from healthy dogs for four days and couting the number of HSC CD34+, neutrophils and platelets was obtained during the application of cytokine and seven days after the application. The leukocytosis occurred due to increase dose relation of segmented neutrophils that occurred 24 hours after the first application of the drug with a statistical difference. However, 48 hours after the last dose, the values returned to baseline levels in the three groups. The number of platelets reduced after the first dose and not returns to the last time point. Regarding the number HSC CD34+, for the groups receiving 10 and 20 μg/kg/day occurred increase dose relation 24 hours after the first application with a statistical difference; in the group that received 5 μg/kg/day, values did not improve. The dose of 5 μg/kg/day was enough to raise the values of neutrophils, but did not result in the mobilization of HSC CD34+. All three doses administered to animals led to a drop in platelets, necessitating caution when administering in thrombocytopenic dogs

Orientador: Edison Bittencourt / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-27T14:50:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Verceze_ArmandoValladas_M.pdf: 3062706 bytes, checksum: 0e14b20018f95cd0fb842992c96ca734 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Em Hemoterapia,tem-se utilizado bolsas múltiplas para a coleta e fracionamento de sangue e seus derivados. A característica especial destas bolsas é quanto à variação do tempo de estocagem para os concentrados de plaquetas, que depende de propriedades como a permeabilidade ao oxigênio, considerado fator importante para o metabolismo das plaquetas. Tomando como padrão o filme de PVC plastificado com DOP (di-2-etilhexilftalato), de espessura padrão 370 micra, com gravação usual por jateamento, foi estudado o filme denominado PL5, plastificado com o mesmo DOP, com espessura reduzida para 350 micra, com gravação especial, piramidal, regular e o filme de PVC plastificado com TOTM (tri-octil trimelitato) de espessura 370 micra, com gravação usual por jateamento. As modificações causadas pelo tipo de gravação foram avaliadas pelo estudo da permeabilidade ao oxigênio, com filmes da mesma espessura aparente, utilizando diferentes gravações e diferentes plastificantes (DOP e TOTM). Para caracterização da compatibilidade bio-toxicológica foram estudados todos os metais e as substâncias exigidas em portarias do Ministério da Saúde e norma ISO específica...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: In hemoteraphy, multiple blood bags have been used to collect and fractionate blood and its derivatives. The special feature of such bags is related to the storage-time length variation of the platelet concentrates, which depends upon properties such as permeability to oxygen, considered a factor of high importance for the metabolism oh platelets. Having a PVC film, plasticized with DOP, as thick as 370 micra, made rugged by usual jet as a pattern, a film named PL5, plasticized with the same DOP which was thinned to 350 micra and was regularly, pyramid-like rugged, as well as a PVC film plasticized with TOTM, as thiek as 370 micra, made rugged by usual jet were studied. The changes caused by the kind of rugosity were evaluated by a study on the permeability to oxygen in films with the same thickness using different techniques to make them rugged and different plastieizers ( DOP and TOTM ). ln order to characterize the bio-toxicological compatibility, all the metals and substances required by regulations of the Ministry of Health and specific ISO norm were studied...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencia e Tecnologia de Materiais / Mestre em Engenharia Química

Orientador: Edson Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T23:37:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BaldisseraJunior_Lineu_M.pdf: 826113 bytes, checksum: a2244710b71a5e86c7de35e81492c539 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Há relatos de que as plaquetas desempenham função importante no desencadeamento da resposta inflamatória alérgica, como a asma brônquica. Entretanto, existem poucos estudos funcionais avaliando a interação plaqueta-asma. O objetivo deste trabalho foi investigar a função plaquetária em modelo de asma alérgica em ratos. Para tanto, ratos Wistar machos (180-200 g) foram sensibilizados à ovalbumina (OVA) e desafiados intranasalmente uma única vez, quatorze dias após a sensibilização. Para confirmar a eficácia da sensibilização à OVA, realizou-se a dosagem de IgE sérica e contagem de leucócitos no lavado broncoalveolar (LBA) após o desafio antigênico. O comportamento plaquetário foi avaliado através da contagem de plaquetas no sangue periférico entre 30 minutos a 24 horas após o desafio. As plaquetas foram isoladas em tempos variados após o desafio com OVA, a saber: 30 minutos, 2, 8 e 24 horas. Em seguida, realizou-se ensaios de adesão plaquetária em microplaca de 96 poços recoberta com fibrinogênio e ensaios de agregação plaquetária. Nossos resultados mostraram que a sensibilização e o desafio antigênico resultaram em aumento significativo dos níveis de IgE e infiltrado eosinofílico no LBA, validando o modelo alérgico adotado no estudo. Observou-se redução significativa do número de plaquetas circulantes em 30 minutos após o desafio com OVA, atingindo redução máxima em 8 horas, retornando aos valores basais 24 horas após o desafio. A adesão plaquetária ao fibrinogênio imobilizado e agregação plaquetária foram realizadas nos tempos de 30 min, 2, 8 e 24 horas após o desafio com OVA. A adesão plaquetária espontânea não foi modificada em nenhum dos tempos estudados. A adesão plaquetária induzida com ADP (5-50 µM) ou trombina (30-100 mU/mL) mostrou-se significativamente elevada em 30 minutos, e diminuída em 24 horas após o desafio com OVA. O desafio antigênico não modificou o perfil de agregação plaquetária, exceto para as plaquetas ativadas com ADP (50 µM) e/ou trombina (200 mU/mL), em 24 horas após o desafio. Com o intuito de se verificar se a via de sinalização de cálcio estaria envolvida nas mudanças observadas na adesão plaquetária, realizamos ensaios de mobilização de cálcio em plaquetas nos tempos de 30 min e 24 horas. A mobilização dos estoques internos de cálcio induzidos por ADP (20 µM) ou trombina (100 mU/mL) foram significativamente maiores em 30 minutos, e menores 24 horas após desafio antigênico à OVA. O influxo de cálcio externo foi significativamente maior em plaquetas de ratos estimuladas com ADP (20 µM) em 30 minutos após desafio com OVA. Após 24 horas, houve tendência de redução do influxo de cálcio externo em plaquetas de animais sensibilizados. Em conjunto, nossos dados mostram que o desafio intranasal com OVA acarreta, na fase imediata (30 minutos), aumento de adesão plaquetária ao fibrinogênio e elevação do transporte interno e externo de cálcio. Na fase tardia (24 horas), observamos redução da adesão plaquetária e diminuição dos estoques internos de cálcio / Abstract: Evidences show that platelets play important roles in triggering the allergic inflammatory diseases, such as bronchial asthma. However, there are few functional studies attempting to evaluate the platelet-asthma interaction. The aim of this work was to investigate platelet function in a rat model of allergic asthma. Male Wistar rats (180-200 g) were sensitized with ovalbumin (OVA) and challenged intranasally fourteen days after sensitization. In order to assess the efficacy of OVA sensitization, serum IgE levels and leukocyte counts in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid was performed post-antigen challenge. Counts of platelets in peripheral blood were performed from 30 minutes to 24 hours post-OVA challenge. Platelets were isolated in different time-periods after OVA challenge, namely: 30 minutes, 2, 8, 24 hours; then, ex-vivo platelet adhesion to immobilized fibrinogen and aggregation assays were performed. Our results showed that antigen-sensitization and challenge resulted in increased serum levels of IgE and eosinophil infiltration in BAL fluid, thus validating the allergic model adopted in this work. A significant reduction of circulating platelet was observed at 30 minutes post OVA-challenge, reaching the maximal reduction at 8 hours, and returning to baseline at 24 hours post-challenge. Platelet adhesion to immobilized fibrinogen and aggregation were performed at 30 minutes, 2, 8 and 24 hours after OVA challenge. Spontaneous platelet adhesion remained unaffected in all studied time. ADP (5-50 µM)- and thrombin (50-100 mU/mL)-stimulated platelet adhesion were significantly increased at 30 minutes, and decreased 24 hours after OVA challenge. The antigen challenge did not modify the platelet aggregation profile, except in platelets activated with 50 µM ADP and 200 mU/mL thrombin, at 24 hours post challenge. In order to verify whether calcium signaling pathway would be involved in the changes observed in platelet adhesion, we performed Ca2+ mobilization assays at 30 minutes and 24 hours. Internal calcium stores mobilization induced by ADP (20 µM) and thrombin (100 mU/mL) were significantly enhanced at 30 minutes, and decreased 24 hours after OVA-challenge. The extracellular calcium influx was significantly increased in ADP (20 µM)-stimulated rat platelets at 30 minutes post OVA-challenge. After 24 hours, the platelet calcium influx was lesser than that in nonsensitized animals. Together, our results show that intranasal OVA challenge causes an increased platelet adhesion at an early time post OVA-challenge (30 minutes) concomitant with elevated Ca2+ internal and/or external transport. At late phase (24 hours), we observed reduced platelet adhesion and decreased Ca2+ internal storage / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia