Orientadora: Profa. Dra. Christiane Bertachini Lombello / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica, 2015. / A engenharia de tecidos visa cultivar celulas sobre substratos tridimensionais, para implantacao no organismo, restaurando desta forma partes danificadas. Os materiais utilizados como substratos devem apresentar caracteristicas propicias ao cultivo celular. Na cultura de celulas e necessario o estabelecimento de certas condicoes, como o modo de suplementacao do meio de cultura. Sendo assim, este estudo avaliou sistemas de cultura autologo (coagulo e soro do plasma rico em plaquetas) e xenogeno (gelatina e soro fetal bovino), como substratos e suplementos para a cultura de celulas. O plasma rico em plaquetas (PRP) apos ativacao da cascata de coagulacao apresenta uma estrutura tridimensional, o coagulo. Com a retracao do coagulo, ocorre a liberacao do soro do PRP. A gelatina e uma substancia com capacidade de gelificacao. Para manutencao de sua estrutura, a gelatina foi reticulada com glutaraldeido. A caracterizacao do substrato de gelatina e a liberacao de glutaraldeido foram avaliadas por espectroscopia. Foram realizadas avaliacoes do intumescimento e da degradacao do coagulo e da gelatina por 24 horas e cinco dias, respectivamente. A analise da ultraestrutura dos substratos foi realizada por microscopia eletronica de varredura (MEV). O diametro das fibras do coagulo e a rugosidade superficial da gelatina tambem foram examinados. Para as analises biologicas foram utilizadas celulas Vero. Nas culturas com o coagulo, o meio foi suplementado com 10% do soro do PRP e as culturas com gelatina tiveram o meio suplementado com 10% de SFB. A avaliacao da citotoxicidade foi realizada atraves do teste do extrato e de contato direto das celulas com os substratos. Nas analises do comportamento celular com os substratos, as celulas foram inoculadas sobre o coagulo e a gelatina. As culturas foram mantidas a 37¿C com 5% CO2. As avaliacoes por espectroscopia da gelatina nao identificaram alteracao da estrutura primaria e a presenca do agente reticulador. Os substratos do coagulo e da gelatina exibiram intumescimentos superiores a 200% e ambos demonstraram boa estabilidade, nao apresentando uma degradacao significativa no periodo de cinco dias. A ultraestrutura do coagulo e formada por uma rede irregular de fibras de diferentes diametros, com um valor medio de 0,210}0,097 ¿Êm. A gelatina apresentou uma estrutura densa e plana, exibindo uma micro-rugosidade de 0,11}0,02 ¿Êm. As avaliacoes da citotoxicidade confirmaram que os sistemas de cultura nao foram toxicos para as celulas Vero, exibindo valores de viabilidade celular superiores a 90%. Na analise da interacao celular com os substratos foi verificado que as celulas aderiram e se espalharam sobre os materiais. As celulas presentes na gelatina exibiram maior area superficial (866,32}390,53 ¿Êm) do que as celulas aderidas no coagulo (425,53}245,21 ¿Êm), indicando maior interacao com o substrato. Portanto, os resultados sugerem que ambos os sistemas de cultura sao promissores para utilizacao em engenharia de tecido. Todavia o sistema autologo apresenta a vantagem de ser proprio do organismo. / Tissue engineering aims to grow cells on three dimensional substrates for implantation in the body, restoring damaged parts. The materials used as substrates must have favorable characteristics to the cell culture. In cell culture, it is necessary to establish certain conditions, such as supplementation of the culture medium. Thus, this study evaluated autologous culture systems (clot and serum platelet-rich plasma) and xenogeneic (gelatin and fetal bovine serum) as substrates and supplements for cell culture. The platelet-rich plasma (PRP) upon activation of the coagulation cascade has a three dimensional structure, the fibrin clot. With clot retraction, the serum PRP is released. Gelatin is a substance with gelling capacity. To maintain its structure, gelatin was crosslinked with glutaraldehyde. Characterization of the gelatin substrate and the release glutaraldehyde were assessed by spectroscopy. For the characterization of the substrates were performed assessments of swelling and degradation for 24 hours and five days, respectively. The analysis of the ultrastructure of the substrates was performed by scanning electron microscopy (SEM). The diameter of the clot fiber and the surface roughness of gelatin were also examined. For biological testing, Vero cells were used. In cultures with the clot the medium was supplemented with 10% serum from PRP and gelatin medium were supplemented with 10% FBS. Assessment of cytotoxicity was performed using the test extract and direct contact of the cells with the substrates. In cellular behavior analysis with the substrates, the cells were inoculated onto the clot and gelatin. Cultures were maintained at 37°C with 5% CO2. The evaluations of gelatin by spectroscopy have not identified change in the primary structure and the presence of the crosslinking agent. The substrates of the clot and gelatin exhibited swellings higher than 200% and both demonstrated good stability, showing no significant degradation over a five day period. The ultrastructure of the clot is formed by an irregular network of fibers of different diameters, with an average value of 0.210±0.097 ìm. The gelatin presented a dense and planar structure, showing a micro-roughness of 0.11±0.02 ìm. The evaluation of cytotoxicity confirmed that culture systems were not toxic to Vero cells, exhibiting cell viability higher than 90%. In the analysis of cell interaction with the substrates, was found that the cells adhered and spread on the materials. Cells present in the gelatin exhibited a greater surface area (866.32±390.53 ìm) than the cells adhered in the clot (425.53±245.21 ìm), indicating a greater interaction with the substrate. Therefore, the results suggest that both culture systems are promising for use in tissue engineering. However autologous system has the advantage of being the body itself.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:26:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-07. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:45:55Z : No. of bitstreams: 1 000847517.pdf: 1122598 bytes, checksum: 5bc0d6d1da79abdbf524626af4ab9944 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo avaliou, histoquimicamente e imunoistoquimicamente, a influência do plasma rico em plaquetas (PRP), da terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) ou da associação de ambos na cicatrização de defeitos de fenestração periodontal (DFP) em ratos. DFP foram criados cirurgicamente na mandíbula de 80 ratos. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos: 1) C (controle) e 2) PRP - defeitos preenchidos com coágulo sanguíneo ou PRP, respectivamente; 3) LLLT e 4) PRP/LLLT - defeitos receberam aplicação da LLLT, foram preenchidos com coágulo sanguíneo ou PRP, respectivamente e irradiados novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 10 ou 30 dias pós-operatórios. As fibras colágenas imaturas e maduras foram avaliadas por análise histoquímica e suas porcentagens calculadas. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para fator de transcrição relacionado à Runt (Runx2), osteocalcina (OCN), osteopontina (OPN) e fosfatase alcalina (ALP). Células Runx2-positivas foram quantificadas. Um método semi-quantitativo foi usado para avaliar a imunomarcação de OCN, OPN e ALP. Os dados foram analisados estatisticamente. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas nas porcentagens de fibras colágenas imaturas e maduras dos grupos experimentais quando comparadas ao grupo controle. Aos 10 dias, os grupos PRP e PRP/LLLT apresentaram número de células Runx2-positivas significativamente maior que o controle; o grupo PRP/LLLT apresentou padrões de imunomarcação de OCN e OPN significativamente maiores que o controle e não houve diferenças estatisticamente significativas no padrão de imunomarcação de ALP. Aos 30 dias, diferenças estatisticamente significativas não foram Resumo observadas nos padrões de imunomarcação de OCN, OPN e ALP entre os grupos experimentais... / This study histochemically and imunoistochemically evaluated the influence of platelet-rich plasma (PRP), low-level laser therapy (LLLT), or their combination on the healing of periodontal fenestration defects (PFD) in rats. PFD were surgically created in the mandible of 80 rats. The animals were randomly divided into 4 groups: 1) C (Control) and 2) PRP - defects were filled with blood clot or PRP, respectively; 3) LLLT and 4) PRP/LLLT - defects received laser irradiation, were filled with blood clot or PRP, respectively, and then irradiated again. Animals were euthanized at either 10 or 30 days post-operative. Immature and mature collagen fibers were histochemically evaluated and their percentages were calculated. Runtrelated transcription factor 2 (Runx2), osteocalcin (OCN), osteopontin (OPN) and alkaline phosphatase (ALP) immunohistochemical staining were performed. Runx2-positive cells were quantified. A semi-quantitative method was used to evaluate OCN, OPN, and ALP immunolabeling pattern. Data were statistically analyzed. Statistically significant differences were not observed in the percentages of immature and mature collagen fibers when each experimental group was compared to control. At 10 days, PRP and PRP/LLLT groups presented a significantly higher number of Runx2-positive cells than control; PRP/LLLT presented significantly higher OCN and OPN immunolabeling than control; and statistically significant differences were not observed in the ALP immunolabeling. At 30 days, statistically significant differences were not observed in the OCN, OPN and ALP immunolabeling among the experimental groups... / FAPESP: 13/15380-3

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-14. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:38Z : No. of bitstreams: 1 000848921.pdf: 574953 bytes, checksum: a70399b9991013344e70c1ffa225f94a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (Capes) / O tratamento de lesões musculares geralmente resulta na interrupção da atividade esportiva, por isso estudos que visam antecipar o retorno à atividade, com o adequado reparo tecidual se tornam importantes. Sendo assim, o presente estudo objetivou avaliar o efeito da terapia a laser de baixa intensidade (LLLT) associada ou não ao plasma rico em plaquetas (PRP) no tratamento de lesão muscular. Foram utilizados 42 animais separados em seis grupos (n=7): Controle (C), Controle Lesão Aguda (CLA), Controle Lesão (CL), Lesão LLLT (LLt), Lesão PRP (LP), e Lesão LLLT e PRP (LLtP). A lesão muscular foi induzida por estiramento no músculo gastrocnêmio e, os animais dos grupos LP e LLtP, receberam a aplicação do PRP imediatamente após a lesão, o LLLT foi aplicado diariamente por sete dias. Os animais foram eutanasiados no sétimo dia após a lesão, exceto o grupo CLA, que foi eutanasiados 48 horas após a lesão. Lâminas histológicas do músculo gastrocnêmio foram confeccionadas sem corante para análise por Raman e coradas com Hematoxilia e Eosina (HE) e Picrosirius, que foram analisadas histologicamente, e por meio da dimensão fractal (DF), analisando o infiltrado inflamatório e o colágeno. A análise de NAD e NADH foi realizada por espectroscopia de RAMAN... / Treatment of muscle injuries usually results in the interruption of sports practice, so studies aimed at anticipating the return to activity, with proper tissue repair become important. Therefore, this study intended to evaluate the effect of low level laser therapy (LLLT) associated or not with platelet-rich plasma (PRP) in the treatment of muscle injury. Forty two animals were used divided into six groups (n=7), Control (C), Acute Injury Control (CLA), Injury Control (CL), Injury LLLT (LLT), injury PRP (LP), and injury LLLT and PRP (LLtP). Muscle injury were induced by stretching the gastrocnemius muscle and the animals of groups LLtP and LP received the application of PRP immediately after the injury. The LLLT were applied daily for seven days. The animals were euthanized seven days after the injury, except the CLA group, which were euthanized 48 hours after injury. Histological slides of the gastrocnemius muscle were prepared without stained for Raman analyze and stained by Hematoxylin and eosin (HE), and Picrosirius witch are analyzed by fractal dimension (DF), analyzing the inflammatory infiltrated and collagen. Analysis of NADH and NAD were performed by Raman spectroscopy...

Submitted by MARCUS VINÍCIUS DANIELI null (mvdanieli@hotmail.com) on 2016-03-27T21:45:38Z No. of bitstreams: 1 MARCUS DANIELI - TESE DOUTORADO final.pdf: 6960713 bytes, checksum: 56e8937d8630da03708a88bc3972f48e (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: O título presente na ficha catalográfica está diferente do título que consta na capa do trabalho. Por favor, corrija as informações e realize uma nova submissão Agradecemos a compreensão. on 2016-03-28T17:52:00Z (GMT) / Submitted by MARCUS VINÍCIUS DANIELI null (mvdanieli@hotmail.com) on 2016-03-29T23:39:53Z No. of bitstreams: 1 MARCUS DANIELI - TESE.pdf: 6987024 bytes, checksum: b5d4ed4a0e5713184b0232dd23c5b974 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-30T12:55:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 danieli_mv_dr_bot.pdf: 6987024 bytes, checksum: b5d4ed4a0e5713184b0232dd23c5b974 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-30T12:55:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 danieli_mv_dr_bot.pdf: 6987024 bytes, checksum: b5d4ed4a0e5713184b0232dd23c5b974 (MD5) Previous issue date: 2016-02-02 / A estrutura da cartilagem hialina é muito complexa e por possuir poucas células e não ter vasos sanguíneos, linfáticos ou nervos, tem seu potencial de cicatrização muito limitado. Lesões da cartilagem hialina do joelho são muito comuns, e seu tratamento representa um grande desafio. As opções cirúrgicas disponíveis atualmente para essa lesão, como condroplastia, microfraturas, mosaicoplastia ou transplante autólogo de condrócitos, ainda não tem resultados satisfatórios, principalmente em longo prazo. O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) vem sendo usado na ortopedia desde os anos 90 para estimular a cicatrização dos tecidos, devido ao seu potencial de concentrar fatores de crescimento no local desejado. O objetivo da aplicação do PRP seria estimular um melhor ambiente de cicatrização. Em cartilagem o PRP tem sido usado no tratamento de osteoartrose e como coadjuvante em técnicas de tratamento de lesões condrais. Porém a literatura ainda apresenta resultados duvidosos em relação a aplicação do PRP em cirurgias de cartilagem. Essa tese apresenta a aplicação cirúrgica do PRP em pacientes com lesões condrais de joelhos, para avaliar se esse tratamento pode ter o efeito de acelerar e/ou melhorar o resultado cirúrgico destes pacientes. A tese foi dividida em três partes, sendo a primeira a revisão da literatura sobre tratamento de lesões condrais e sobre o plasma rico em plaquetas em ortopedia, a segunda parte um artigo sobre a comparação da avaliação das lesões condrais do joelho pela artroscopia comparada à ressonância nuclear magnética e a terceira e última parte é o trabalho principal que analisa o efeito da aplicação cirúrgica do PRP em lesões condrais do joelho. / The hyaline cartilage structure is very complex, with few cells, and without blood and lymphatic vessels or nerves. This makes the healing potential very limited. Knee cartilage injuries are very common, and its treatment is a major challenge. Surgical options available nowadays like chondroplasty, microfractures, mosaicplasty and autologous chondrocyte transplantation still doesn’t have satisfactory results, mainly in long term. Platelet-Rich Plasma (PRP) has been used in orthopedics since the 90’s in order to stimulate tissue healing, because of its potential to concentrate platelet derived growth factors in the target place. The goal of the PRP application is to stimulate a better healing environment. PRP has been used in cartilage to treat osteoarthritis and to support treatment techniques for chondral injuries. However, the literature is still doubtful regarding the surgical results with PRP application. This thesis presents the PRP application in patients with knee chondral injuries to evaluate if this treatment is able to accelerate the healing process and/or to improve the surgical results in these patients. The thesis was divided into three parts, the first one is a literature review about chondral injuries treatments and platelet-rich plasma in orthopedics; the second part is a manuscript comparing the chondral injuries evaluation by arthroscopy and magnetic resonance imaging; and the last part is the main article that analyses the effect of PRP surgical application in knee chondral injuries.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Inflammatory and degenerative pathophysiological processes within the central nervous system (CNS) and platelets are important causes of human disease promoted by cigarette smoke. The objective of the present study was to evaluate activity of the enzymes that hydrolyze nucleotides and nucleosides in synaptosomes of cerebral cortex and platelets from rats exposed to aged and sidestream diluted smoke of commercial cigarettes. The animals were randomly divided into two groups (ten rats in each group): control (not exposed to cigarette smoke) and smoke (exposed to cigarette smoke). The smoke group was exposed via inhalation through the nose only 15 minutes per day inside a cigarette smoke exposure chamber during 3 weeks. The results demonstrated that E-NTPDase (with ATP and ADP as substrate) activity was significantly higher in the smoke group (p<0.05), while the 5'- nucleotidase with AMP as substrate demonstrated decreased activity in the smoke group (p<0.05). However, in platelets activities demonstrated that E-NPP and ENTPDase with ATP as substrate and 5´-nucleotidase with AMP as substrate were significantly higher in the smoke group (p<0.05) as compared to the control group, while E-NTPDase with ADP as substrate demonstrated decreased activity in the smoke group (p<0.05). A decrease of adenosine, a neuroprotective nucleoside, was observed in brain, which could lead to damage of the brain tissue. However, in platelets, there was an increase of adenosine, which may reflect adaptative changes. These alterations caused by cigarette smoke on ectonucleotidase activities may assist in verifying pathophysiological effects in biological systems. / Os processos patofisiológicos inflamatórios e degenerativos no sistema nervoso central (SNC) e plaquetas são importantes causas de doenças humanas promovidas pela fumaça de cigarro. O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade das enzimas que hidrolisam nucleotídeos e nucleosídeos em sinaptossomas de córtex cerebral e plaquetas de ratos expostos à fumaça envelhecida e diluída inalada por via secundária de cigarros comerciais. Os animais foram aleatoriamente divididos em dois grupos (10 ratos por grupo): controle (não exposto a fumaça de cigarro) e fumo (exposto a fumaça de cigarro). O grupo fumo foi exposto à fumaça de cigarro 15 minutos por dia no interior de uma câmara de exposição durante 3 semanas. Em relação ao sinaptossoma de córtex cerebral os resultados demonstraram que a atividade da E-NTPDase (ATP e ADP como substrato) aumentou significativamente no grupo exposto à fumaça de cigarro (p<0.05) e a atividade da 5'-nucleotidase (AMP com substrato) diminuiu neste grupo (p<0.05), comparado ao grupo controle. Nas plaquetas foi demonstrado um aumento na atividade das enzimas E-NPP e ENTPDase (ATP como substrato) e 5 -nucleotidase (AMP como substrato) no grupo exposto à fumaça de cigarro (p<0.05) quando comparado ao grupo controle. Já a ENTPDase (ADP como substrato) demonstrou uma diminuição de sua atividade no grupo exposto à fumaça de cigarro (p<0.05). Pode-se sugerir que a provável diminuição da adenosina, uma molécula neuroprotetora, pode levar ao dano no tecido do encéfalo. Entretanto, em plaquetas, houve um aumento da adenosina, a qual pode refletir mudanças adaptativas. As alterações na atividade das ectonucleotidases em animais submetidos à exposição de fumaça de cigarro podem contribuir na elucidação de seus efeitos patológicos em sistemas biológicos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-05Bitstream added on 2014-06-13T20:33:20Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_vbc_me_araca.pdf: 188984 bytes, checksum: d34a3a3d8b0e932349f9662a2c1f19a2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Biotechnology as the platelet-rich plasma (PRP) have been widely used in tissue repair, aiming to accelerate the healing of wounds. The potencial of PRP to reduce the recovery time of injuries depends on the concentration of platelets, its function and their growth factors. The lack of protocols for obtaining PRP in dogs, combined with variations of the same, hinders the use of biotech. The aim of this study was to test three different protocols for obtaining PRP and verify effectiveness in dogs. 15 mL were collected blood of 20 healthy dogs, and the samples were subjected to protocols to obtain PRP second Anitua, Sonnleitner and Vendramin. The mean concentrations of each protocol provided by platelets were 247%, 351% and 439% respectively. The protocol Vendramin stood in relation to other, better platelet count in PRP, and has good reproducibility

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-09-21Bitstream added on 2014-06-13T20:44:55Z : No. of bitstreams: 1 dagnone_as_dr_jabo.pdf: 2655933 bytes, checksum: 8f6122da8b67a36f40a31689501140e2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este estudo foi realizado objetivando-se detectar e identificar a presença de material genômico de agentes pertencentes à Família Anaplasmataceae em 55 cães com inclusões citoplasmáticas encontrados em células leucocitárias granulocíticas, monocíticas e plaquetas, compatíveis com infecção por Ehrlichia canis, E. chaffeensis, E. ewingii, A. phagocytophilum, A. platys ou Neorickettsia risticii. A ocorrência natural de Babesia canis também foi avaliada pois vetor Rhipicephalus sanguineus, é o principal carrapato encontrado em cães no Brasil. Também objetivou-se realizar, através da utilização de técnicas de Seqüenciamento de um fragmento do gene 16S rRNA, a caracterização parcial dos fragmentos das amostras positivas encontradas neste estudo, e comparar as seqüências dos fragmentos obtidos com as seqüências apresentadas previamente no GenBank, iniciando a realização de estudos filogenéticos das seqüências encontradas. Amostras de sangue foram colhidas de 25 e 30 cães atendidos nos Hospitais Veterinários da Universidade Estadual Paulista-Unesp, Câmpus de Jaboticabal-SP e Universidade para o Desenvolvimento do Estado e da região do Pantanal-UNIDERP, Campo Grande- MS, respectivamente. Dentre as inclusões citoplasmáticas encontradas neste estudo foi observado uma grande diversidade na morfologia, tamanho, coloração e localização das inclusões. DNA de agentes Família Anaplasmataceae foram detectados em 45/55 das amostras sangüíneas examinadas (81,8%), sendo destas 32 (58,18%) e 13 (23,63%) positivas para Ehrlichia canis e Anaplasma platys, respectivamente. Dez animais que foram incluídos neste estudo por apresentarem inclusões citoplasmáticas foram negativos quando uma segunda confecção de esfregaço de papa leucocitária corada pelo Giemsa foi realizada, e também... / The aim of this study was to evaluate the natural occurrence of Anaplasmataceae agents (Ehrlichia canis, E. chaffeensis, E. ewingii, A. phagocytophilum, A. platys and Neorickettsia risticii) using molecular techniques. For this purpose a group of fifty-five supposedly infected dogs from two different Brazilian states (São Paulo and Mato Grosso do Sul) that showed suggestive Anaplasmataceae agent intracitoplasmic inclusions in white blood cells and platelets were analysed. The natural occurrence of Babesia canis was also evaluated, because its vector is also Brazilian dog tick, Rhipicephalus sanguineus. Sequencing of a partial phragment of 16S rRNA gene from the positive samples were performed to conduct phylogenetic study. The evaluated blood cells of the studied dog population displayed a wide variety in shapes, sizes, stain pattern and localization of the inclusions. Anaplasmataceae DNA were amplified in 45/55 (81.8%) examined blood samples. Thirty-two samples were positive for E. canis (58.18%) and thirteen for Anaplasma platys (23.63%). Ten animals were negative by PCR and an analyses of a second Buffy coat smear. The obtained nucleotide sequences were analysed for similarity of the 16S rRNA gene sequence using Blast with other sequences available in the GenBank database. The sequences obtained from E. canis positive were closely related to E. canis from Spain (Acession number AY 394465) presenting an identity percentage of between 94.82% and 99.67%. Sequences from Anaplasma sp and Anaplasma platys positive samples were closely related to A. platys from Venezuela (Genbank Acession number AF 399917) presenting an identity betwwen 96.52% and 99.69%, and A. platys from Spain (Genbank Acession number AY 530 806\0 presenting... (Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-09Bitstream added on 2014-06-13T20:44:59Z : No. of bitstreams: 1 melo_lgn_dr_araca.pdf: 931001 bytes, checksum: c60fdb1de080f3e5dcb844fe719ab023 (MD5) / O objetivo do presente trabalho foi avaliar, histologicamente, a influência da associação do plasma rico em plaquetas (PRP) ao enxerto de osso autógeno (OA) no reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC) em calvárias de coelhos. Sessenta coelhos foram divididos em 3 grupos: C (controle), OA (osso autógeno) e OA/PRP (osso autógeno associado ao plasma rico em plaquetas). Um defeito de tamanho crítico, com 15 mm de diâmetro, foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido somente com coágulo sanguíneo. No Grupo OA, o defeito foi preenchido com osso autógeno particulado. No Grupo OA/PRP, o defeito foi preenchido com osso autógeno particulado associado ao PRP. Todos os grupos foram divididos em subgrupos (n = 10) para eutanásia aos 30 ou 90 dias pós-operatórios. Foram realizadas análises histológica e histométrica. A quantidade de osso neoformado foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Os dados em porcentagem foram transformados em raiz quadrada para análise estatística (ANOVA, teste t, p<0,05). Aos 30 dias pós-operatórios, o Grupo OA/PRP apresentou uma quantidade significativamente maior de osso neoformado que o Grupo OA (64,44% e 46,88%, respectivamente). Aos 90 dias, todos os espécimes dos Grupos OA/PRP e OA mostraram fechamento ósseo completo do defeito, com quantidades similares de osso neoformado (77,9% e 75%, respectivamente). Dentro dos limites deste trabalho, pode-se concluir que o PRP acelerou o processo de reparo do enxerto de osso autógeno em defeitos de tamanho crítico em calvária de coelhos. / The purpose of this study was to histologically analyze the effect of platelet-rich plasma (PRP) on bone healing in an autogenous bone graft placed in surgically created criticalsize defects (CSD) in rabbit calvaria. 60 rabbits were divided into 3 groups: C (control); AB (autogenous bone graft) and AB/PRP (autogenous bone graft with platelet-rich plasma). A 15 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C the defect was filled by blood clot only. In Group AB the defect was filled with particulate autogenous bone. In Group PRP it was filled with particulate autogenous bone in combination with platelet-rich plasma. All groups were divided into subgroups (n=10) and euthanized at either 30 or 90 days post-operative. Histometric, using image analysis software, and histologic analyses were performed. Amount of new bone was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Percentage data were transformed into square root for statistical analysis (ANOVA, t test, p<0.05). At 30 days post-op, Group AB/PRP had a statistically greater amount of bone formation than Group AB (64.44% and 46.88%, respectively). At 90 days, complete bone regeneration of the defect was seen in all specimens of Groups AB/PRP and AB, with similar amounts of newly formed bone (77.9% and 75%, respectively). Within the limits of this study, it can be concluded that PRP accelerated the healing of autogenous bone graft in critical-size defects in rabbit calvaria.

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-30Bitstream added on 2015-05-14T16:59:07Z : No. of bitstreams: 1 000828989.pdf: 1077462 bytes, checksum: ad94a8164b9e30d6a8c7bf2ba8b96849 (MD5) / A cicatrização da pele é o objetivo de estudos e pesquisas, devido ao seu interesse clínico, científico e econômico, principalmente devido à grande freqüência de feridas causadas por lesões em cavalos. A cura da ferida é um fenômeno fisiológico que se inicia a partir da perda da integridade da pele, gerando uma solução de continuidade que atinge as camadas subjacentes em diversos graus e depende de uma série de reações químicas (BERTONE,1989). Vários fatores influenciam a cicatrização após lesão traumática ou cirúrgica. Feridas abaixo do jarrete ou joelho nos eqüinos são um problema, mesmo em animais sadios. Contudo esta dificuldade não ocorre na parte superior do corpo, isto pode ser explicado ao baixo suprimento sanguíneo, baixa oxigenação, temperaturas mais baixas e um desequilíbrio de fatores de crescimento (DYSON, 1997). É essencial na reparação tecidual uma fonte rica em fatores de crescimento. As plaquetas atuam na hemostase, cicatrização de feridas, reepitelização, liberadora de diversos fatores de crescimento que estimulam a angiogênese, promotores de crescimento e proliferação de fibroblastos que por sua vez proporciona um aumento na síntese de colágeno, sendo o PRP uma fonte natural e segura, pois é plasma do próprio animal (DYSON, 1997). Esse trabalho tem como objetivo a avaliação de eqüinos induzidos com uma solução de continuidade, ferida, na face dorsal da região metacarpiana dos membros torácicos, onde foram utilizados 6 animais da espécie eqüina, SRD, tendo como tratamento o uso de plasma rico em plaqueta (PRP) centrifugado e solução fisiológica. Os animais serão avaliados por parâmetros clínicos, morfométricos, avaliações histopatológicas e imunoistoquímicas durante 30 dias / The healing of the skin is the purpose of study and research, due to its clinical, scientific and economic interest, mainly due to the high frequency of wounds caused by injuries in horses. The wound healing is a physiological phenomenon which starts from the loss of skin integrity, generating a continuous flow that reaches the underlying layers to different degrees and depends on a series of chemical reactions (Bertone, 1989). Several factors influence healing after traumatic or surgical injury. Wounds below the knee or hock in horses are a problem, even in healthy animals. However, this difficulty does not occur in the upper part of the body, this can be explained by low blood supply low oxygenation, lower temperatures and an imbalance of growth (DYSON, 1997) factors. It is essential in tissue repair a rich source of growth factors. Platelets act in hemostasis, wound healing, re-epithelialization, releasing several growth factors that stimulate angiogenesis, growth promoters and proliferation of fibroblasts which in turn provides an increase in collagen synthesis, the PRP being a natural source and secure because it is the animal's own plasma (DYSON, 1997). This study aims to evaluate horses induced with a solution of continuity, wound on the dorsal surface of the metacarpal region of the forelimb, where 6 animals of the equine species, SRD were used, with treatment as the use of platelet rich plasma (PRP) saline and centrifuged. The animals will be evaluated by clinical, morphometric, histopathological and immunohistochemical reviews for 30 days

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-11-24Bitstream added on 2015-05-14T16:58:55Z : No. of bitstreams: 1 000828044_20200101.pdf: 74188 bytes, checksum: 70cfaebb828d250a5522ad34603d8b17 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do plasma rico (PRP) e pobre (PPP) em plaquetas na proliferação celular e expressão de matriz metaloproteinases (MMPs), durante a reparação de úlceras corneais profundas. Foram utilizadas 45 coelhas, distribuídas em 3 grupos (G) experimentais (n=15), designados como grupos PRP (GR), PPP (GP) e Controle (GC), de acordo com o tratamento. Todos os animais foram submetidos à indução cirúrgica unilateral de úlcera corneal. No GR e GP, o sangue autólogo foi centrifugado, utilizando protocolo padronizado, e foram confeccionados os colírios de PRP e PPP, instilados cinco vezes ao dia. No GC, foi utilizado colírio lubrificante. Cada grupo foi subdividido (n=5), segundo o momento final de avaliação, sendo 4(M4), 7(M7) e 30 dias (M30). As córneas dos animais foram processadas para avaliação morfológica e imuno-histoquímica para PCNA, MMP1, MMP2, MMP9, MT1-MMP e TIMP1. No M4, os níveis de MMP2 foram maiores no GP e GR, sendo que no M7, esse comportamento foi observado apenas no GP. No M30, no GR verificou-se maior número de células epiteliais e marcação para MMP1 que o GP. No GR, a proliferação celular foi maior no M4 que nos demais momentos e a marcação para MMP2 foi maior no M4 que no M30. O PRP estimula a proliferação celular na fase inicial (M4) do tratamento quando comparado aos demais momentos, diferente dos demais tratamentos. O uso de colírios de plasma rico e pobre em plaquetas influencia a expressão de matriz metaloproteinases envolvidas no processo de reparação corneal / The aim of this study was to evaluate the influence of platelet-rich (PRP) and poor (PPP) plasma in cell proliferation and matrix metalloproteinases (MMPs) expression during the repair of deep corneal ulcers. Forty-five female rabbits were distributed in 3 experimental groups (G) (n = 15), referred as PRP (GR), PPP (GP) and Control groups (GC), in accordance with the treatment. All animals underwent surgical induction of unilateral corneal ulcer. PRP and PPP eyedrops were made by using centrifuged blood through standardized protocol, and instilled five times a day. In GC, lubricant eyedrops was used. Each group was subdivided (n = 5), according to the final time point, 4 (M4), 7 (M7) and 30 days (M30). The animals corneas were processed for morphological and immunohistochemical analysis for PCNA, MMP1, MMP2, MMP9, MT1-MMP and TIMP1. In M4, the levels of MMP2 were higher in GP and GR, and in M7, this behavior was only observed in the GP. In M30, more epithelial cells and MMP1 expression were found in GR than GP. In the GR, cell proliferation was higher in M4 than at others time points and MMP2 expression was higher in M4 than in M30. The PRP stimulates cell proliferation in the early phase (M4) of treatment when compared to other time points, different from other treatments. The use of platelet-rich and poor plasma eyedrops influences the expression of matrix metalloproteinases involved in the corneal repair process