CAPES; CNPq / Thaumastocoris peregrinus (Hemiptera: Thaumastocoridae) é um inseto originário da Austrália que está causando sérios danos à cultura do eucalipto ao redor do mundo. Ao alimentar-se da seiva das folhas, causa seu bronzeamento, podendo levar à desfolha. Medidas de controle estão sendo estudadas e a mais promissora é o parasitoide de ovos Cleruchoides noackae (Hymenoptera: Mymaridae). Produtos alternativos a base de compostos provenientes de plantas com potencial inseticida também poderiam ser uma ferramenta importante, e talvez serem utilizados concomitantemente com o parasitoide, visando um controle mais efetivo. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi verificar a ação dos extratos aquosos de Matricaria chamomilla, Echinodorus grandiflorus, Punica granatum, Maytenus ilicifolia e Origanum majorana a 5% sobre T. peregrinus. Além disso, estudar sua possível toxicidade contra C. noackae e Gallus domesticus L., tendo em vista que estes compostos podem ter efeito negativo indesejado sobre organismos não alvo. Em uma primeira etapa, cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) foi utilizada para verificar os compostos fenólicos presentes nos extratos. Os extratos, então, foram testados sobre percevejo adultos, em confinamento (para verificar a ação inseticida) e teste de livre escolha (para verificar a ação repelente). Os três extratos que mostraram melhores resultados foram selecionados para os testes com os organismos não alvo. Com relação à C. noackae, testes pré e pós-parasitismo, de confinamento e de livre-escolha foram realizados para verificar se os extratos afetariam a escolha do hospedeiro pelas fêmeas ou o desenvolvimento das fases imaturas do parasitoide. Para verificar se os extratos seriam tóxicos a G. domesticus, estes foram adicionados à dieta de aves juvenis por cinco dias. Parâmetros como peso, consumo de alimento, quantificação de enzimas séricas e análise histopatológica foram realizados. Por meio das análises cromatográficas, foram detectados os ácidos gálico, ferúlico, cafeico, cumárico e vanílico. Os extratos levaram à mortalidade de 100% dos insetos em até 49% do tempo, quando comparados com a testemunha, mas E. grandiflorus, Matricaria chamomilla e Maytenus ilicifolia destacaram-se mostrando efeito repelente, sendo selecionados para a próxima etapa. Nenhum destes afetou a escolha do hospedeiro pela fêmea ou a emergência dos parasitoides, quando comparado com a testemunha. Além disso, os extratos não causaram alterações em G. domesticus, em nenhum dos parâmetros avaliados. Desta forma, verificou-se que E. grandiflorus, Matricaria chamomilla e Maytenus ilicifolia têm potencial para serem utilizados no controle de T. peregrinus, bem como mostraram-se seguros para C. noackae e G. domesticus. / Thaumastocoris peregrinus (Hemiptera: Thaumastocoridae ) is an insect from Australia which is causing severe damage to eucalyptus crops around the world. When feeding from the leaves sap, it causes bronzening, and in extreme cases, may lead to the tree death. Control methods have been studied and the most promising so far is the egg parasitoid Cleruchoides noackae (Hymenoptera: Mymaridae). Alternative products from plants with insecticidal properties could also be a viable option, and they might even be used concomitantly with C. noackae, aiming for a most effective control, but still safe for the environment. Thus, the objective of this work was to verify the action of 5% aqueous plant extracts of Matricaria chamomilla, Echinodorus grandiflorus, Punica granatum, Maytenus ilicifolia a n d Origanum majorana on T. peregrinus. In addition, we aimed to study the extracts potential toxicity to C. noackae and Gallus domesticus L., since the plant compounds might have negative effect upon the non-target organisms. At first, HPLC (High Performance Liquid Chromatography) was used to verify which phenolic compounds would be found in the plant extracts. These were tested on bronze bug adults, in confinement test (to verify the insecticidal action of the extracts) and free-choice test (to verify the repellency). The extracts that showed better results were selected for further tests with non-target organisms. Regarding C. noackae, pre-parasitism and post-parasitism, confinement and free-choice tests were performed to verify if the extracts would affect the host-choosing by the female or the development of the immature stages of the parasitoid. To verify if the extracts would be toxic to G. domesticus, the plant extracts were added to young birds feed for five days. Parameters such as weight gain, food intake, quantification of serum enzymes and histopathological analysis were carried out. HPLC analysis detected gallic, ferulic, vanillic, caffeic and cumaric acid in the extracts samples. All plant extracts tested reduced T. peregrinus survival, but E. grandiflorus, Matricaria chamomilla Maytenus ilicifolia had also a repellent effect, and were tested on the non-target organisms. None of these extracts affected neither the host choice by C. noackae nor adult emergency, when compared to the control group. In addition, the extracts did not cause alterations in any of the studied parameters. Thus, we verified that E. grandiflorus, Matricaria chamomilla and Maytenus ilicifolia have potential to be used to control T. peregrinus and are safe to C. noackae and G. domesticus.

As abelhas africanizadas (Apis mellifera L.) estão desaparecendo e acredita-se que seja devido ao intenso uso de inseticidas, poluição e alterações climáticas, no entanto muitas culturas dependem da polinização realizada por essas abelhas. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de três linhagens de Bacillus thuringiensis (Bt) (IPS 82, BR 81 e BR 147), entomopatógeno utilizado para o controle de lagartas desfolhadoras, e de três produtos fitossanitários sintéticos (PFS 1: Acetamiprido + Alfa-cipermetrina; PFS 2: Imidacloporido + Beta-Ciflutina e PFS 3: Fenitrotiona + Esfenvalerato), sobre a longevidade de operárias adultas de A. mellifera africanizada. Foram realizados três bioensaios com as linhagens de Bt e dos PFSs: A) Pulverização sobre A. mellifera; B) Contato de A. mellifera com superfície pulverizada e C) Pasta cândi incorporada com os produtos e análise histológica do intestino médio das abelhas. Nos três bioensaios a testemunha foi composta por água deionizada esterilizada. Cada tratamento foi composto por 60 abelhas, sendo cada abelha considerada uma repetição. Os bioensaios foram mantidos em câmara climatizada tipo BOD (34 ± 2ºC, U.R. de 60 ± 5%) e a longevidade das operárias avaliada a uma; duas; três; quatro; cinco; seis; nove; 12; 15; 18; 21; 24; 30; 36; 42; 48; 60; 72; 96; e 120 horas.Na pulverização de Bt sobre A. mellifera verificou-se que apenas a linhagem Bt 1 (IPS 82) causou redução da longevidade de operárias (88,7 horas), enquanto no bioensaio de contato a linhagem Bt 3 - BR147 provocou redução (101,2 horas). Todas as linhagens de Bt avaliadas, quando incorporadas à alimentação de A. mellifera reduziram a longevidade das operárias (Bt 1 – IPS 82: 64,50 horas; Bt 2 – BR 81: 64,56 horas e Bt 3 – BR 147: 60,00horas) e com a análise histológica pôde-se perceber a desintegração das células epiteliais do mesêntero das abelhas, causada pelas bactérias que elas ingeriram. Os três produtos fitossanitários sintéticos reduziram a longevidade das operárias de A. mellifera, no bioensaio de pulverização direta (PFS 1 e PFS 2 – 1,0 hora; PFS 3 – 2,21 horas). No contato de A. mellifera com superfície pulverizada com PFS, as abelhas ficaram duas horas em contato com os produtos na placa de Petri, e ao final dessas duas horas, 100% abelhas que entraram em contato com os três produtos fitossanitários sintéticos estavam mortas. Quando incorporados os PSFs na alimentação, ambos reduziram a longevidade das operárias (PFS 1 – 22 horas, PFS 2 – 21,72 horas e PFS 3 – 43,93 horas) e na análise histológica foi possível observar diferenças na estruturação do intestino médio das operárias de A. mellifera alimentadas com os três PFSs. Apesar das linhagens de Bt reduzirem a longevidade das operárias de A. mellifera não é possível afirmar que não sejam seletivas, pois a interferência é mínima quando comparada à interferência provocada pelos PFSs, os quais provocaram drástica redução na longevidade de A. mellifera. / Africanized bees (Apis mellifera L.) are disappearing and are believed to be due to the intense use of insecticides, pollution and climate change, however many crops depend on the pollination performed by these bees. The objective of this work was to evaluate the effect of three strains of Bacillus thuringiensis (Bt) (IPS 82, BR 81 and BR 147), entomopathogen used for the control of Acetamiprid + Alpha-cypermethrin, PFS 2: Imidacloporide + Beta-Cyflutin and PFS 3: Fenitrothione + Esfenvalerate), on the longevity of African female A. mellifera workers. Three bioassays were performed with the Bt and PFS lines: A) Spraying on A. mellifera; B) A. mellifera contact with pulverized surface and C) Candi paste incorporated with the products and histological analysis of the medium intestine of the bees. In the three bioassays the control was composed of sterilized deionized water. Each treatment consisted of 60 bees, each bee being considered a repetition. The bioassays were maintained in a BOD type chamber (34 ± 2ºC, 60 ± 5% U.R) and the workers longevity was evaluated at one; two; three; four; five; six; nine; 12; 13; 18; 21; 24; 30; 36; 42; 48; 60; 72; 96; And 120 hours. In Bt spraying on A. mellifera, it was verified that only the Bt 1 strain (IPS 82) caused a reduction in worker longevity (88.7 hours), while in the contact bioassay the Bt 3 - BR147 strain caused a reduction (101, 2 hours). All strains of Bt evaluated when incorporated into A. mellifera feed reduced workers longevity (Bt 1 - IPS 82: 64.50 hours; Bt 2 - BR 81: 64.56 hours and Bt 3 - BR 147: 60). And the histological analysis showed the disintegration of the epithelial cells of the bees mesentery, caused by the bacteria they ingested. The three synthetic phytosanitary products reduced the longevity of A. mellifera workers in the direct spray bioassay (PFS 1 and PFS 2 - 1.0 hour; PFS 3 - 2.21 hours). At the contact of A. mellifera with a PFS-sprayed surface, the bees stayed two hours in contact with the products on the petri dish, and at the end of these two hours, 100% bees that came in contact with the three synthetic phytosanitary products were dead. When the PSFs were incorporated in the diet, they reduced the longevity of the workers (PFS 1 - 22 hours, PFS 2 - 21.72 hours and PFS 3 - 43.93 hours) and in the histological analysis it was possible to observe differences in the workers from A. mellifera fed with the three PFSs. although the Bt lineages reduce the longevity of A. mellifera workers, it is not possible to assert that they are not selective, since the interference is minimal when compared to interference caused by PFSs, which caused a drastic reduction in the longevity of A. mellifera.

CAPES; CNPq / Thaumastocoris peregrinus (Hemiptera: Thaumastocoridae) é um inseto originário da Austrália que está causando sérios danos à cultura do eucalipto ao redor do mundo. Ao alimentar-se da seiva das folhas, causa seu bronzeamento, podendo levar à desfolha. Medidas de controle estão sendo estudadas e a mais promissora é o parasitoide de ovos Cleruchoides noackae (Hymenoptera: Mymaridae). Produtos alternativos a base de compostos provenientes de plantas com potencial inseticida também poderiam ser uma ferramenta importante, e talvez serem utilizados concomitantemente com o parasitoide, visando um controle mais efetivo. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi verificar a ação dos extratos aquosos de Matricaria chamomilla, Echinodorus grandiflorus, Punica granatum, Maytenus ilicifolia e Origanum majorana a 5% sobre T. peregrinus. Além disso, estudar sua possível toxicidade contra C. noackae e Gallus domesticus L., tendo em vista que estes compostos podem ter efeito negativo indesejado sobre organismos não alvo. Em uma primeira etapa, cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) foi utilizada para verificar os compostos fenólicos presentes nos extratos. Os extratos, então, foram testados sobre percevejo adultos, em confinamento (para verificar a ação inseticida) e teste de livre escolha (para verificar a ação repelente). Os três extratos que mostraram melhores resultados foram selecionados para os testes com os organismos não alvo. Com relação à C. noackae, testes pré e pós-parasitismo, de confinamento e de livre-escolha foram realizados para verificar se os extratos afetariam a escolha do hospedeiro pelas fêmeas ou o desenvolvimento das fases imaturas do parasitoide. Para verificar se os extratos seriam tóxicos a G. domesticus, estes foram adicionados à dieta de aves juvenis por cinco dias. Parâmetros como peso, consumo de alimento, quantificação de enzimas séricas e análise histopatológica foram realizados. Por meio das análises cromatográficas, foram detectados os ácidos gálico, ferúlico, cafeico, cumárico e vanílico. Os extratos levaram à mortalidade de 100% dos insetos em até 49% do tempo, quando comparados com a testemunha, mas E. grandiflorus, Matricaria chamomilla e Maytenus ilicifolia destacaram-se mostrando efeito repelente, sendo selecionados para a próxima etapa. Nenhum destes afetou a escolha do hospedeiro pela fêmea ou a emergência dos parasitoides, quando comparado com a testemunha. Além disso, os extratos não causaram alterações em G. domesticus, em nenhum dos parâmetros avaliados. Desta forma, verificou-se que E. grandiflorus, Matricaria chamomilla e Maytenus ilicifolia têm potencial para serem utilizados no controle de T. peregrinus, bem como mostraram-se seguros para C. noackae e G. domesticus. / Thaumastocoris peregrinus (Hemiptera: Thaumastocoridae ) is an insect from Australia which is causing severe damage to eucalyptus crops around the world. When feeding from the leaves sap, it causes bronzening, and in extreme cases, may lead to the tree death. Control methods have been studied and the most promising so far is the egg parasitoid Cleruchoides noackae (Hymenoptera: Mymaridae). Alternative products from plants with insecticidal properties could also be a viable option, and they might even be used concomitantly with C. noackae, aiming for a most effective control, but still safe for the environment. Thus, the objective of this work was to verify the action of 5% aqueous plant extracts of Matricaria chamomilla, Echinodorus grandiflorus, Punica granatum, Maytenus ilicifolia a n d Origanum majorana on T. peregrinus. In addition, we aimed to study the extracts potential toxicity to C. noackae and Gallus domesticus L., since the plant compounds might have negative effect upon the non-target organisms. At first, HPLC (High Performance Liquid Chromatography) was used to verify which phenolic compounds would be found in the plant extracts. These were tested on bronze bug adults, in confinement test (to verify the insecticidal action of the extracts) and free-choice test (to verify the repellency). The extracts that showed better results were selected for further tests with non-target organisms. Regarding C. noackae, pre-parasitism and post-parasitism, confinement and free-choice tests were performed to verify if the extracts would affect the host-choosing by the female or the development of the immature stages of the parasitoid. To verify if the extracts would be toxic to G. domesticus, the plant extracts were added to young birds feed for five days. Parameters such as weight gain, food intake, quantification of serum enzymes and histopathological analysis were carried out. HPLC analysis detected gallic, ferulic, vanillic, caffeic and cumaric acid in the extracts samples. All plant extracts tested reduced T. peregrinus survival, but E. grandiflorus, Matricaria chamomilla Maytenus ilicifolia had also a repellent effect, and were tested on the non-target organisms. None of these extracts affected neither the host choice by C. noackae nor adult emergency, when compared to the control group. In addition, the extracts did not cause alterations in any of the studied parameters. Thus, we verified that E. grandiflorus, Matricaria chamomilla and Maytenus ilicifolia have potential to be used to control T. peregrinus and are safe to C. noackae and G. domesticus.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The efficient management of Sclerotinia stem rot of soybean (SSR), caused by Sclerotinia sclerotiorum, can be obtained through biological control with Trichoderma spp. which has antagonistic properties based on the activation of a diverse arsenal of mechanisms. The objective of this research work was to evaluate the efficiency of different products with Trichoderma spp. available, for the SSR control. The commercial bioproducts used were: Agrotrich, Ecotrich, Quality and Trichodermil. For this, experiments were performed in laboratory and greenhouse conditions, at the Federal University of Uberlândia - UFU, to demonstrate the quality of this bioproducts, such as concentration, viability, and contamination from serial dilutions; to verify the antagonistic capability and hyperparasitism of the isolates against pathogen by scanning electron microscopy; compatibility between fungicides and bioproducts after plating in culture medium and after treatment of seeds with them; to verify the influence of isolated on seed health, germination and emergence of soybean seeds with and without SSR inoculation using the techniques of seedling tests, paper roll and tray; the influence on colonization and germination of sclerotia recovered from soil treated with bioproducts, and testing biological products in the field, alone or in combination with chemical fungicides Fluazinam and Thiophanate methyl to control SSR. The assessments were done for the following variables: incidence, severity, disease index (incidence x severity), AUDPC (Area Under the Disease Progress Curve), sclerotia weight, thousand kernel weight and yield. The results shows that have difference in the products quality available on the market, although all isolates analyzed proved to be antagonistic against S. sclerotiorum. The compatibility between fungicides and bioproducts must be analyzed with caution, given that some fungicides are incompatible with this antagonist. Seed treatment with Trichoderma spp. not interferes with the vigor and germination of soybean without inoculation. The efficiency SSR control using biological products with Trichoderma spp. has been proved, that Quality and Trichodermil highlighted by the highest quality and viability of bioproducts, which led to similar efficiency to Fluazinam and Thiophanate methyl. / O manejo eficiente da podridão branca da haste da soja, causada pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum, pode ser obtido através do controle biológico com Trichoderma spp. o qual possui propriedades antagônicas baseadas na ativação de um arsenal de mecanismos variados. O objetivo do trabalho foi avaliar a eficiência de diferentes produtos à base de Trichoderma spp. disponíveis no mercado, no controle da podridão branca da haste da soja. Os bioprodutos comerciais utilizados foram: Agrotrich, Ecotrich, Quality e Trichodermil. Para isso, foram realizados experimentos em laboratório e casa de vegetação, na Universidade Federal de Uberlândia - UFU, a fim de se comprovar a qualidade desses bioprodutos, como concentração, viabilidade e contaminação a partir de diluições seriadas; verificar a capacidade antagônica e o hiperparasitismo dos isolados sobre o patógeno através da microscopia eletrônica de varredura; a compatibilidade entre os bioprodutos e fungicidas após plaqueamento em meio de cultura e após tratamento de sementes com os mesmos; verificar a influência dos isolados na sanidade, germinação e emergência de sementes de soja com e sem inoculação de S. sclerotiorum utilizando as técnicas dos testes em gerbox, rolo de papel e bandeja; a influência na colonização e germinação de escleródios recuperados de solo tratado com os bioprodutos e testar os produtos biológicos no campo, de forma isolada ou combinada com os fungicidas químicos Fluazinam e Tiofanato Metílico, para o controle do mofo branco. As avaliações para o teste de campo foram realizadas para as seguintes variáveis: incidência, severidade, índice de doença (incidência x severidade), AACPD (Área Abaixo da Curva de Progresso da Doença), peso de escleródios, peso de mil grãos e produtividade. Os resultados obtidos demonstram que há diferença na qualidade dos produtos existentes no mercado, embora todos os isolados analisados mostraram-se antagônicos à S. sclerotiorum. A compatibilidade entre fungicidas e bioprodutos deve ser analisada com cautela, visto que alguns fungicidas são incompatíveis com este antagonista. O tratamento de sementes com Trichoderma spp. não interfere no vigor e germinação das sementes de soja sem inoculação do patógeno. A eficiência do controle do mofo branco utilizando produtos biológicos à base de Trichoderma spp. foi comprovada, em que se destacaram Quality e Trichodermil, pela maior qualidade e viabilidade dos bioprodutos, o que propiciaram eficiência semelhante aos fungicidas Fluazinam e Tiofanato Metílico. / Mestre em Agronomia

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES.

Os agentes de controle biológico têm recebido grande reconhecimento, e o seu uso tem contribuído como um complemento ou substituição de agroquímicos. No entanto, existem poucos estudos sobre o controle biológico da Pinta Preta dos Citros, causada pelo fungo Guignardia citricarpa, o que impede o seu mercado in natura, além de prejudicar a sua exportação pelo uso intensivo de insumos químicos para controlar este patógeno. Os fungos do gênero Trichoderma são agentes de controle utilizados em todo o mundo contra vários fitopatógenos relevantes. Este estudo visou identificar proteínas extracelulares secretadas por T. atroviride T17 e por T.harzianum T1A, eficazes para o controle de G. citricarpa. Por eletroforese bidimensional (2D) foram obtidos perfis de proteínas secretadas por Trichoderma em meio de glicose (controle) e em meio suplementado com micélio desativado de G. citricarpa. As proteínas foram identificadas por LC-MS/MS mostrando que ambas as espécies secretam proteínas diferentes. Foram identificadas 68 proteínas das 178 diferencialmente expressas por T. harzianum, sendo a maioria relacionada aos mecanismos de biocontrole, mesmo no meio controle. Foi verificado que em contato com o patógeno a expressão de proteínas relacionadas com o metabolismo primário diminui. Por outro lado, Trichoderma atroviride mostrou uma maior expressão de proteínas relacionadas com biocontrole na presença de micélio do patógeno. Nesta espécie identificamos 59 proteínas de 116 diferencialmente expressas, principalmente proteínas relacionadas com a degradação da parede celular: α- manosidase, quitinase, mutanase, glicosidase, endoquitinase e, algumas famílias de glicoside hidrolases. Os resultados indicam que estas espécies apresentam um elevado potencial como agentes de controle de G. citricarpa. Os resultados são pioneiros em detalhar a interação de Trichoderrma com G. citricarpa, por meio da análise do secretoma. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Biological control agents (BCA) have received great recognition, and their use has contributed as a complement or replacement of agrochemicals. However, there are few studies on the biological control of Black spot of citrus, caused by the fungus Guignardia citricarpa, which prevents the market in natura, besides damaging their export by the intensive use of chemical inputs to control this pathogen. Trichoderma fungi are the most applied worldwide BCA against various relevant plant pathogens. The purpose of this study was to identify extracellular proteins secreted by T. atroviride T17 and of T. harzianum T1A, which are effective for the control of G. citricarpa. Bidimensional electrophoresis (2D) allowed obtaining the secreted protein profiles of Trichoderma grown in glucose medium (control) and in medium containing inactivated mycelium of G. citricicarpa. From the 178 differentially expressed proteins by T. harzianum, 68 were identified, most of them related to biocontrol mechanisms, even in the control medium. In the presence of the pathogen, the expression of proteins related to the metabolism decreases. On the other hand, Trichoderma atroviride showed higher expression of proteins related to biocontrol pathogen when grown in the presence of pathogen mycelium, when compared to the control medium. From the 116 differentially expressed proteins, 59 were identified, mainly proteins related to fungi cell wall degradation such as α-mannosidase, chitinase, mutanase, glycosidase, endochitinase and, some families of glycoside hydrolases. The results indicate that these species have a high potential as biocontrol agents of G. citricicarpa. These results are pioneers in to detail the Trichoderrma interaction with G. citricicarpa through the secretome analysis.

The botanical acaricides are natural products derived from plant secondary metabolism. This metabolism produces a large variety of compounds with acaricidal action that can be exploited through the use of essential oils or as a template for synthesis of synthetic acaricides. The need for safer methods, less harmful to humans and the environment, has stimulated the search for new pesticides from plant products. Thus, the aim of this study was to i) select medicinal and aromatic plants with biological activity on the tick Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennense ii) test the sublethal effects of essential oil of Chrysopogon zizanioides (Poaceae) value of high acidity and acid value low on the stages of egg, larva and adult of A. cajennense and R. microplus iii) test the lethal effects of essential oils of C. zizanioides high acid value and amount of low acidity on larvae of A. cajennense and R. microplus iv) test the sublethal effects of essential oils from Pogostemon cablin (Lamiaceae), Croton sonderianus (Euphorbiaceae), Pelargonium graveolens (Geraniaceae) and Zingiber officinale (Zingiberaceae), on the stages of egg, larva and adult of R. microplus v) test the lethal effects of essential oils of P. cablin; C. sonderianus; P. graveolens on larvae of R. microplus iv) From the oil more toxic for the tick R. microplus, producing a formulation and testing the lethal and sublethal effects of this emulsion in ticks R. microplus. Essential oils were purchased through the company Raros, only the Z. officinale obtained by hydrodistillation of dry biomass in a Clevenger type apparatus at the Federal University of Sergipe. These oils were analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The study was conducted at the Federal University of Sergipe, Saint Kitts-SE, Brazil. The essential oils were emulsified with Triton X-100 as surfactant agent, in the bioassay with adults and diluted in acetone to bioassay with larvae mortality. In bioassay with adult females were immersed in a final solution (oil with Triton X-100) for 2 minutes, oviposition calculated after 14 days. For the bioassay the larvae a solution (oil in acetone) was applied on filter paper envelopes closed with clips type |bulldog| in which these larvae were maintained for 48 hours. The formulation in both bioassays was diluted with water The paper was divided into three items. In the first article was made a literature review on the use of essential oils of medicinal and aromatic plants in controlling R.microplus, in the second it was demonstrated that the essential oils of C. zizanioides acid value and high value low acidity showed activity ticks on species A. cajannense and R. microplus and third article was observed that the essential oil P. cablin (Lamiaceae) and formulation made from this oil exhibit activity ticks on the tick R. microplus. / Os carrapaticidas botânicos são produtos naturais derivados do metabolismo secundário das plantas. Esse metabolismo produz uma grande diversidade de compostos com ação acaricida que podem ser explorados através do uso de óleos essenciais ou como modelo para síntese de carrapaticidas sintéticos. A necessidade de métodos mais seguros, menos agressivos ao homem e ao meio ambiente, tem estimulado a busca de novos pesticidas a partir de produtos vegetais. Assim, objetivou-se com este trabalho i) selecionar plantas medicinais e aromáticas com atividade biológica sobre os carrapatos Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense; ii) testar os efeitos subletais do óleo essencial de Chrysopogon zizanioides (Poaceae) acidez alta e acidez baixa sobre os estádios de ovo, larva e adulto de A. cajennense e R. microplus; iii) testar os efeitos letais dos óleos essenciais de C. Zizanioides acidez alta e acidez baixa sobre larvas de A. cajennense e R. microplus; iv)testar os efeitos subletais dos óleos essenciais de Pogostemon cablin (Lamiaceae), Croton sonderianus (Euphorbiaceae), Pelargonium graveolens (Geraniaceae) e Zingiber officinale (Zingiberaceae), sobre os estádios de ovo, larva e adulto de R. microplus; v) testar os efeitos letais dos óleos essenciais de P. cablin; C. sonderianus; P. graveolens sobre larvas de R. microplus; iv) A partir do óleo mais tóxico para o carrapato R. microplus, produzir uma formulação e testar os efeitos subletais e letais dessa emulsão nos carrapatos R. microplus. Os óleos essenciais foram adquiridos através da empresa Raros, sendo apenas o Z. officinale obtido por hidrodestilação da biomassa seca em um aparelho do tipo Clevenger na Universidade Federal de Sergipe. Estes óleos foram analisados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC-MS). O estudo foi realizado na Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão-SE, Brasil. Os óleos essenciais foram emulsionados com Triton X-100, como agente surfactante, no bioensaio com os adultos e diluídos em acetona para o bioensaio de mortalidade com as larvas. No bioensaio com os adultos as fêmeas foram imersas em uma solução final (óleo com Triton X-100) por 2 minutos, calculado a oviposição depois de 14 dias. Para o bioensaio com as larvas uma solução (óleo com acetona) foi aplicada em envelopes de papel filtro fechados com clipes tipo buldogue , no qual estas larvas permaneceram por 48 horas. A formulação nos dois bioensaios foi diluída em água A dissertação foi dividida em dois artigos. No primeiro artigo foi demonstrado que os óleos essenciais de C. zizanioides acidez alta e acidez baixa apresentaram atividade carrapaticida sobre as espécies A. cajannense e R. microplus e no segundo artigo foi observado que O óleo essencial de P. cablin (Lamiaceae) e a formulação feita através deste óleo apresentam atividade carrapaticida sobre o carrapato R. microplus.

LIMA, Glauber Pacelli Gomes de. Purificação, caracterização bioquímica e atividade biológica in vitro contra insetos praga de um novo inibidor de tripsina isolado de sementes de Sapindus saponaria L. (Sapindaceae). 119 f. : Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências, Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-05-20T13:23:01Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_gpglima.pdf: 2370771 bytes, checksum: 509ae0531057d53f967b325467f88d5c (MD5) / Approved for entry into archive by demia Maia (demiamlm@gmail.com) on 2016-05-23T11:59:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_gpglima.pdf: 2370771 bytes, checksum: 509ae0531057d53f967b325467f88d5c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T11:59:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_gpglima.pdf: 2370771 bytes, checksum: 509ae0531057d53f967b325467f88d5c (MD5) Previous issue date: 2012 / Environmental toxicity, low biodegradability and increased resistance in agricultural pest insects and in insect vectors of diseases to insecticides traditionally used for their control have encouraged the development of chemical alternatives with greater specificity and biodegradability especially from plants. In this way, the present study aimed the purification, characterization and evaluation of activity towards pest insect digestive enzymes of a new trypsin inhibitor obtained from Sapindus saponaria seeds. This new trypsin inhibitor obtained from S. saponaria seeds (SSTI2) belongs to Potato I inhibitor family and was purified by protein precipitation with trichloroacetic acid, affinity chromatography and reverse phase chromatography using UFLC system. The native inhibitor and its fragments generated by enzymatic treatment with trypsin and pepsin were analyzed and sequenced by MALDI-TOF and ESI-TOF mass spectrometry, determining its accurate molecular mass (MM = 7571, 976 Da) and primary structure (64 of 69 amino acids). The SSTI2 showed an IC50 of 8.3 x 10-2 μmol.L-1 against bovine trypsin, and a much lower inhibitory activity on the enzymes chymotrypsin (13.24 ± 0.28%) and papain (5.28 ± 0 , 42%), but was unable to inhibit proteolysis promoted by bromelain. In spite to show moderate inhibition of total digestive enzymes (4.74 ± 0.45% to 56.06 ± 1.41%), the inhibitor was very effective upon trypsin-like enzymes present in Aedes aegypti (92.44 ± 0.99%), Anthonomus grandis (77.93 ± 0.12%), Anticarsia gemmatalis ( 32.21 ± 0.57%) and Spodoptera frugiperda (71.44 ± 1.23%) guts. This strong inhibitory effect of SSTI2 on the catalytic activity of trypsin-like peptidases of insect’s midguts suggests a possible suppressive effect on development and survival of insects fed with diets containing the inhibitor. Thus, future in vivo assays and evaluation of other biochemical properties will be important to establish the potential biotechnological application of SSTI2, especially for the combat of Ae. aegypti, A. grandis and An. gemmatalis. Furthermore, the sequence of SSTI2 elucidated in this study allows the chemical synthesis, cloning of coding gene sequence and heterologous expression of this potential new biotechnological tool. / A toxicidade ao meio ambiente, a baixa biodegrabilidade e a crescente resistência de insetos praga da agricultura e de insetos vetores de doenças aos inseticidas tradicionalmente utilizados tem estimulado o desenvolvimento de alternativas com maior biodegradabilidade e especificidade, especialmente de origem vegetal. Nesse sentido, o presente estudo consistiu na purificação, caracterização e avaliação do efeito biológico in vitro de um novo inibidor de tripsina obtido das sementes de Sapindus saponaria sobre as enzimas digestivas de insetos. Através de precipitação com ácido tricloroacético (TCA), cromatografia de afinidade à tripsina e cromatografia de fase reversa em sistema UFLC, foi purificado um novo inibidor de tripsina (SSTI2) pertencente ao grupo de inibidores do tipo Batata I, uma categoria de inibidores de peptidases serínicas com reconhecido efeito tóxico sobre insetos. O inibidor nativo e fragmentos desse gerados por tratamento enzimático com tripsina e pepsina foram analisados e sequenciados por espectrometria de massa do tipo MALDI-TOF e ESI-TOF, determinando assim a sua massa molecular acurada (MM = 7571, 976 Da) e elucidando a sua estrutura primária (64/69 aminoácidos). O inibidor apresentou uma IC50 de 8,3 x 10-2 μmol.L-1 contra a tripsina bovina, mas apresentou baixa atividade inibitória sobre as enzimas quimotripsina (13,24 ± 0,28%) e papaína (5,28 ± 0,42%), e não foi capaz de inibir a proteólise promovida pela bromelaína. O SSTI2 inibiu moderadamente a atividade catalítica das enzimas digestivas totais dos insetos, com percentual de inibição variando entre 4,74 ± 0,45% a 56,06 ± 1,41%. No entanto, o inibidor foi eficaz em atuar sobre as enzimas digestivas do tipo tripsina presentes nos intestinos dos insetos Aedes aegypti (92,44 ± 0,99%), Anthonomus grandis (77,93 ± 0,12%), Anticarsia gemmatalis (32,21 ± 0,57%) e Spodoptera frugiperda (71,44 ± 1,23%). Esse expressivo efeito inibitório do SSTI2 sobre a atividade catalítica das peptidases do tipo tripsina provenientes do intestino médio dos insetos sugere um possível efeito supressor no desenvolvimento e sobrevivência de insetos alimentados com dietas contendo o inibidor. Assim, futuros estudos in vivo e avaliações de outras propriedades bioquímicas do inibidor serão importantes para determinar a potencial aplicação biotecnológica do SSTI2, especialmente para o combate de A. aegypti, A. grandis e A. gemmatalis. Além disso, a sequência do SSTI2 elucidada nesse estudo possibilita a síntese, clonagem do gene codificante e expressão heteróloga dessa potencial ferramenta biotecnológica.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-02-27Bitstream added on 2014-06-13T19:24:07Z : No. of bitstreams: 1 loureiro_es_dr_botfca.pdf: 393758 bytes, checksum: fae8a4e1b680f21d3d03858c5c8608bf (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Com o objetivo de determinar a patogenicidade de diferentes isolados do fungo Metarhizium anisopliae sobre ninfas de Mahanarva fimbriolata foi testada, em laboratório, a patogenicidade de 79 isolados, provenientes de diferentes hospedeiros e regiões do país. Inicialmente, foi realizado um bioensaio para estabelecimento da concentração a ser utilizada nos experimentos de seleção, adotando-se, como padrão, o isolado IBCB 348 de M. anisopliae. Através da Análise de Probit, foi calculada a CL50 obtendo uma concentração de 1,2 x 108 conídios/mL, decorridos 4 dias da pulverização. As avaliações foram realizadas diariamente, observando-se os níveis de mortalidade acumulada (total, confirmada e corrigida) de cada tratamento. Os melhores isolados testados foram IBCB 348; IBCB 351; IBCB 363; IBCB 408; IBCB 410; IBCB 418; IBCB 425 e IBCB 482, os quais apresentaram uma eficiência igual ou superior a 70% de mortalidade confirmada, aos seis dias da pulverização. Os isolados IBCB 348; IBCB 408; IBCB 410 e IBCB 425 foram os que mais produziram conídios em arroz com 2,08 x 108, 1,75 x 108, 2,22 x 108 e 2,30 x 108 conídios/g de arroz pré-cozido, respectivamente, pelo método de bandeja. Foi pulverizado 2kg/ha de arroz+fungo, contendo 1,5 x 1012 conídios/ha, destacando-se os isolados IBCB 348 e IBCB 408 que causaram mortalidade, para ninfas de 100%, respectivamente, aos 15 dias da pulverização. Decorridos 30 dias da pulverização, os isolados IBCB 408 e IBCB 425 apresentaram eficiência de controle de 63 e 62%, respectivamente, para as ninfas e para os adultos foi de 100%, respectivamente. Aos 60 dias da aplicação, o isolado IBCB 425 foi o mais eficiente para controlar as ninfas (48,4%) e para os adultos de M. fimbriolata, os isolados não foram eficientes. Nas avaliações realizadas aos 90 e 120 dias, a população de cigarrinha manteve-se acima do nível de dano econômico... . / This work was carried out evaluate the pathogenicity of different isolates of the fungus Metarhizium anisopliae against nymphs of Mahanarva fimbriolata. The pathogenicity of 79 isolates, provenients from differents hosts and regions of the country, were tested in the laboratory. First, it was performed a bioassay to determine the concentration to be used in the selection experiments, the IBCB 348 isolate of M. anisopliae was used as standard. Evaluations were done daily, observing the levels of mortality (total, confirmed and corrected) of each treatment. The best isolates were IBCB 348; IBCB 351; IBCB 363; IBCB 408; IBCB 410; IBCB 418; IBCB 425 and IBCB 482, which showed an efficiency equal or higher than 70% six days after the pulverization. The isolates IBCB 348; IBCB 408; IBCB 410 and IBCB 425 produced the largest number of conidia with 2,08 x 108; 1,75 x 108; 2,22 x 108 and 2,30 x 108 conidia/g of rice, respectively by the tray method. Was pulverized 2kg/ha de rice+fungus, with 1,5 x 1012 conidia/ha, showing off the isolates IBCB 348 and IBCB 408 that caused a mortality for nymphs of 100%, respectively, 15 days after the pulverization. After 30 days of the pulverization, the isolates IBCB 408 and IBCB 425 showed control efficiency of 63 and 62%, respectively, for the nymphs and for adults the efficiency was 100%, respectively. Sixty day after the application, the isolate IBCB 425 were the most efficients for control nymphs (48%) and for adults of M. fimbriolata the isolates weren't efficients. In the evaluation realized at 90 and 120 days, the speatlebug population was kept above the economic threshold level. The efficiency of the isolates was null for adults and for nymphs, the isolate IBCB 408 showed efficiency of 31%, after ninety days of the pulverization. At 120 days, the efficiency of the isolates was null for nymphs and for adults the maxim efficiency (63%) was... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2015-03-26T12:42:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1309198 bytes, checksum: d65db94e2ef0c47a8b4a59379f09b014 (MD5) Previous issue date: 2014-01-31 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The culture of strawberry , Fragaria x ananassa Duch, has faced several problems, among which we highlight those caused by pathogens. In addition to widely known diseases such as gray mold, new diseases have caused serious damage to the crop. In order to study the various problems of strawberry culture, this study aimed to: i) identify the causal agent of a postharvest fruit rot in strawberry , ii) to study the temporal and spatial dynamics of the redness in strawberry, whose etiology is still unknown; iii) determine the species of Botrytis that cause gray mold in strawberry in Brazil iv) conduct a survey of the current situation of fungicides for control of gray mold on strawberry v) to study the sensitivity of isolates of B. cinerea to dicarboxamide and benzimidazole fungicides. In order to identify the causal agent of post harvest fruit rot of strawberry, isolates from symptomatic fruits were analyzed by morphologic and phylogenetic analyzes. After confirming the pathogenicity of the isolates, species identification as Neofusicoccum kwambonambiense and N. parvum was taken. This is the first report of the occurrence of Neofusicoccum kwambonambiense in Brazil and the first report of Neofusicoccum spp. causing rot in strawberry. By studying the pattern of temporal and spatial distribution of the redness of strawberry was conducted in four areas of commercial cultivation. With the data on incidence of disease progress curves and dispersion maps were constructed, and analysis of aggregation of plants by ordinary runs test. The results showed that the disease has a similar disease biotic distribution pattern similar to diseases which are dispersed in the row. To achieve other goals, isolates were obtained from plants with symptoms of gray mold on various properties of different cities in the states of Espírito Santo, Minas Gerais and São Paulo, totaling 200 isolates. Initially, a study was conducted to verify the occurrence of other species of Botrytis in the fields of strawberry cultivation in Brazil. For this, the extraction of DNA from all strains was performed, followed by PCR with the specific species and B. cinerea and B. caroliniana primers. Despite the morphological variation observed among isolates , all were identified as B. cinerea . The survey on the practices used to control gray mold on strawberry was performed directly with the producers, who were asked about the products used for the control of disease, efficiency of these products and use of the practice of removing diseased material . It was possible to observe many problems, especially reduced use of cultural control measures, the use of products not recommended for culture and the low level of knowledge of the farmers. Finally, the sensitivity analysis of the isolated main culture fungicides (iprodione , procymidone and thiophanate- methyl) was carried. Thus, a total of 100 isolates were grown in culture medium containing different doses of the fungicide was used. The results showed that 89% of isolates were insensitive to thiophanate-methyl fungicide, 36% to and 54% to procymidone. Considering the limited number of fungicides registered for the control of gray mold and the low sensitivity of isolates of B. cinerea to these products , it becomes difficult to manage this important disease of strawberry. / A cultura do morangueiro, Fragaria x ananassa Duch, tem enfrentado diversos problemas, dentre os quais destacam-se os causados por patógenos. Além de doenças amplamente conhecidas, como o mofo cinzento, novas doenças vêm causando sérios danos à cultura. Visando estudar os diversos problemas da cultura do morangueiro, este trabalho teve por objetivos: i) identificar o agente causal de uma podridão pós-colheita em frutos de morango; ii) estudar a dinâmica temporal e espacial do vermelhão do morangueiro, cuja etiologia é ainda desconhecida; iii) determinar as espécies de Botrytis que causam mofo cinzento em morangueiro no Brasil; iv) realizar um levantamento da situação atual do uso de fungicidas para controle do mofo cinzento do morangueiro; v) estudar a sensibilidade de isolados de B. cinerea aos fungicidas dicarboxamidas e benzimidazóis. A fim de identificar o agente causal da podridão pós-colheita de frutos de morango, isolados obtidos a partir de frutos sintomáticos foram analisados por meio de análises morfológicas e filogenéticas. Após a confirmação da patogenicidade dos isolados, foi feita a identificação das espécies como Neofusicoccum kwambonambiense e N. parvum. Este é o primeiro relato da ocorrência de Neofusicoccum kwambonambiense no Brasil e o primeiro relato de Neofusicoccum spp. causando podridão em morango. O estudo do padrão de distribuição temporal e espacial do vermelhão do morangueiro foi realizado em quatro áreas de cultivo comercial. Com os dados de incidência da doença foram construídas curvas de progresso e mapas de dispersão, além da análise de agregação de plantas pelo teste de ordinário runs. Os resultados mostraram que a doença apresenta comportamento semelhante a uma doença biótica com padrão de distribuição semelhante ao de doenças que se dispersam na linha de plantio. Para atingir os demais objetivos, foram obtidos isolados a partir de plantas com sintomas do mofo cinzento, em diversas propriedades de diferentes cidades nos estados do Espírito Santo, Minas Gerais e São Paulo, totalizando 200 isolados. Inicialmente, foi realizado um estudo para verificar a ocorrência de outra espécie de Botrytis nos campos de cultivo de morango no Brasil. Para isso, foi feita a extração de DNA de todos os isolados, seguindo-se à reação de PCR com primers específicos para as espécies B. cinerea e B. caroliniana. Apesar da variação morfológica observada entre os isolados, todos foram identificados como B. cinerea. O levantamento sobre as práticas utilizadas para controle do mofo cinzento do morangueiro foi realizado diretamente com os produtores, que foram questionados quanto aos produtos utilizados para o controle da doença, eficiência de controle dos produtos e uso da prática de retirada de material doente. Foi possível observar diversos problemas, destacando-se o reduzido uso de medidas de controle cultural, o uso de produtos não recomendados para a cultura e o baixo nível de conhecimento dos produtores. Por fim, foi realizada a análise de sensibilidade dos isolados aos principais fungicidas utilizados na cultura (iprodiona, procimidona e tiofanato-metílico). Para isso, foi utilizado um total de 100 isolados, os quais foram crescidos em meio de cultura contendo diferentes doses dos fungicidas. Os resultados mostraram que 89% dos isolados foram insensíveis ao fungicida tiofanato-metílico, 36% ao iprodiona e 54% ao procimidona. Considerando o número restrito de fungicidas registrados para o controle do mofo cinzento e a baixa sensibilidade dos isolados de B. cinerea a estes produtos, torna-se difícil o manejo dessa importante doença do morangueiro.