Várias espécies do gênero Fícus são muito utilizadas na medicina popular como agente anti-hemíntico, anti-reumático, antifúngico, antibacteriano, etc. Recentemente, um novo produto natural denominado Aripuanin foi isolado das folhas da espécie Fícus Aripuanensis. Neste trabalho, foi realizada a primeira síntese total do Aripuanin. / Some species of the Fícus are used in folk medicine for their anthelmintic, antiheumatic, antifungal, antimicrobial. Recently, a new natural product denominated Aripuanin, was isolated from the leaves of Fícus Aripuanensis. In this work, was performed the first total synthesis of Aripuanin.

O fungo Moniliophthora perniciosa, fitopatógeno responsável pela doença vassoura-de-bruxa no cacaueiro, é responsável por reduzir a produtividade de frutos de cacau nas Américas. Visto que os métodos atuais de controle desta doença não são eficientes, faz-se necessário a busca por compostos para seu controle químico. Os produtos naturais têm contribuído na síntese de novos pesticidas e a família Solanaceae é reconhecida como uma fonte promissora de compostos antifúngicos. Neste contexto, este trabalho teve por objetivo explorar o potencial biológico e químico de metabólitos secundários produzidos por plantas da família Solanaceae com atividade antifúngica à M. perniciosa. Para tanto, extratos aquosos de folhas de dez plantas foram avaliados quanto sua atividade inibitória a M. perniciosa e, observou-se maior atividade antifúngica pelos extratos de Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Destas, as plantas S. seaforthianum e B. uniflora mostram-se como promissoras e foram selecionadas para isolamento de seus compostos ativos. A partir do extrato aquoso de S. seaforthianum obteve-se duas frações constituídas por saponinas furostanas, a mistura (25R)-karatavioside C / (25R)-purpureagitoside, com CI50 de 40,9 &mu;g mL-1, e a mistura (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, com CI50 de 22,3 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial. E, a partir do extrato aquoso de B. uniflora obteve-se três compostos da classe das saponinas espirostanas, o composto karatavioside A e os compostos parcialmente identificados BuM8i4, com aglicona identificada como (25R)-yucagenina, e BuM8i6, com aglicona identificada como (25R)-diosgenina, todos com CI50.< 15,63 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial de M. perniciosa. Todos os compostos caracterizados neste trabalho estão sendo relatados pela primeira vez a partir das plantas estudas e também para atividade antifúngica. / The fungal phytopathogen Moniliophthora perniciosa is the causal agent of Witches\' Broom disease and the main responsible by limiting cacao production in Americas. The current disease control methods are not efficient and new antifungal compounds are necessary to the chemical management. Natural products has contributed to the development of natural product-based pesticides and the Solanaceae plants are known as a promising source of antifungal compounds. In this context, this work aimed to explore the biological and chemical potential of secondary metabolites produced by Solanaceae plants with antifungal activity against M. perniciosa. For this, antifungal activity of water extracts from leaves of ten plants was evaluated against M. perniciosa and the best results were observed by using extracts from Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Among these plants, S. seaforthianum and B. uniflora were selected for active compounds isolation due to their promising characteristics. From water extract of S. seaforthianum two furostan saponin fractions were obtained, the mixture (25R)-karatavioside C / (25R)- purpureagitoside, with IC50 of 40,9 &mu;g mL-1, and the mixture (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, with IC50 of 22,3 &mu;g mL-1 to the mycelial growth. From water extract of B. uniflora three spirostan saponin compounds were obtained, the compound karatavioside A and the compounds partially identified BuM8i4, with aglycone identified as (25R)-yucagenina, and BuM8i6, with aglycone identified as (25R)- diosgenina, all these compounds showed IC50< 15,63 &mu;g mL-1 to the mycelial growth of M. perniciosa. All compounds characterized in this study were obtained for the first time from these plants and also described about their antifungal activity.

O fungo Moniliophthora perniciosa, fitopatógeno responsável pela doença vassoura-de-bruxa no cacaueiro, é responsável por reduzir a produtividade de frutos de cacau nas Américas. Visto que os métodos atuais de controle desta doença não são eficientes, faz-se necessário a busca por compostos para seu controle químico. Os produtos naturais têm contribuído na síntese de novos pesticidas e a família Solanaceae é reconhecida como uma fonte promissora de compostos antifúngicos. Neste contexto, este trabalho teve por objetivo explorar o potencial biológico e químico de metabólitos secundários produzidos por plantas da família Solanaceae com atividade antifúngica à M. perniciosa. Para tanto, extratos aquosos de folhas de dez plantas foram avaliados quanto sua atividade inibitória a M. perniciosa e, observou-se maior atividade antifúngica pelos extratos de Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Destas, as plantas S. seaforthianum e B. uniflora mostram-se como promissoras e foram selecionadas para isolamento de seus compostos ativos. A partir do extrato aquoso de S. seaforthianum obteve-se duas frações constituídas por saponinas furostanas, a mistura (25R)-karatavioside C / (25R)-purpureagitoside, com CI50 de 40,9 &mu;g mL-1, e a mistura (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, com CI50 de 22,3 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial. E, a partir do extrato aquoso de B. uniflora obteve-se três compostos da classe das saponinas espirostanas, o composto karatavioside A e os compostos parcialmente identificados BuM8i4, com aglicona identificada como (25R)-yucagenina, e BuM8i6, com aglicona identificada como (25R)-diosgenina, todos com CI50.< 15,63 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial de M. perniciosa. Todos os compostos caracterizados neste trabalho estão sendo relatados pela primeira vez a partir das plantas estudas e também para atividade antifúngica. / The fungal phytopathogen Moniliophthora perniciosa is the causal agent of Witches\' Broom disease and the main responsible by limiting cacao production in Americas. The current disease control methods are not efficient and new antifungal compounds are necessary to the chemical management. Natural products has contributed to the development of natural product-based pesticides and the Solanaceae plants are known as a promising source of antifungal compounds. In this context, this work aimed to explore the biological and chemical potential of secondary metabolites produced by Solanaceae plants with antifungal activity against M. perniciosa. For this, antifungal activity of water extracts from leaves of ten plants was evaluated against M. perniciosa and the best results were observed by using extracts from Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Among these plants, S. seaforthianum and B. uniflora were selected for active compounds isolation due to their promising characteristics. From water extract of S. seaforthianum two furostan saponin fractions were obtained, the mixture (25R)-karatavioside C / (25R)- purpureagitoside, with IC50 of 40,9 &mu;g mL-1, and the mixture (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, with IC50 of 22,3 &mu;g mL-1 to the mycelial growth. From water extract of B. uniflora three spirostan saponin compounds were obtained, the compound karatavioside A and the compounds partially identified BuM8i4, with aglycone identified as (25R)-yucagenina, and BuM8i6, with aglycone identified as (25R)- diosgenina, all these compounds showed IC50< 15,63 &mu;g mL-1 to the mycelial growth of M. perniciosa. All compounds characterized in this study were obtained for the first time from these plants and also described about their antifungal activity.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Atualmente hà um aumento no interesse em desenvolver novos agentes terapÃuticos a partir de molÃculas biologicamente ativas presentes em fontes naturais, e os organismos marinhos tem-se destacado. Dentro deste contexto, as algas marinhas vermelhas tÃm recebido muita atenÃÃo por apresentar propriedades biolÃgicas e farmacolÃgicas ativas, como: antibacteriana, antioxidante, antiviral, antitumoral, antitrombÃtica, prÃ-trombÃtica, antinociceptiva, antinflamatÃria, anticoagulante e anticancerÃgena. Pesquisas recentes mostram que muitos bioativos obtidos de origem marinha apresentam grande potencial para aplicaÃÃes neurofarmacolÃgicas. Assim o objetivo desta dissertaÃÃo foi avaliar os efeitos dos polissacarÃdeos sulfatados totais (PST) obtidos da alga marinha vermelha Gracilaria cornea no Sistema Nervoso Central, em modelos clÃssicos de animais (labirinto em cruz elevada (LCE), campo aberto, Placa perfurada, rota rod, nado forÃado e suspensÃo de cauda) para screening de drogas com atividades relacionadas com as desordens neurocomportamentais, como ansiedade e depressÃo. Para a realizaÃÃo dos experimentos foram utilizados camundongos Swiss, machos, pesando de 25-32g, provenientes do biotÃrio da Universidade Federal do CearÃ. Os animais foram tratados agudamente com PST nas doses de 0,1, 1 ou 10 mg/kg, via intraperitoneal. Trinta minutos apÃs o tratamento, os animais foram submetidos aos testes comportamentais de locomoÃÃo (campo aberto e rota rod), ansiedade (LCE e placa perfurada) e depressÃo (nado forÃado e suspensÃo de cauda). Os resultados mostraram que PST, na dose de 10 mg/kg, apresentou efeito ansiolÃtico nos modelos de LCE e placa perfurada, pois aumentou todos os parÃmetros analisados no LCE, assim como o nÃmero de mergulhos nos orifÃcios da placa perfurada. Este efeito està provavelmente relacionado com o sistema gabaÃrgico, pois o flumazenil, antagonistas dos receptores GABAA/ BenzodiazepÃnicos, reverteu o efeito ansiolÃtico dos PST no LCE. No teste de campo aberto a dose de 10 mg/kg aumentou o nÃmero de quadrantes e o nÃmero de rearing, tento uma aÃÃo exitatÃria, jà no teste de rota rod nÃo houve alteraÃÃo, mostrando que a atividade motora dos animais nÃo foi prejudicada. Na avaliaÃÃo da atividade depressiva, os PST nÃo alteraram o tempo de imobilidade nos testes de nado forÃado e de suspensÃo de cauda, embora a dose de 10mg/kg apresentou uma diminuiÃÃo no parÃmetro analisado, porÃm nÃo significativo. ConclusÃo: os polissacarÃdeos sulfatados totais extraÃdos da Gracilaria cornea, na dose de 10 mg/Kg, sugerem uma aÃÃo ansiolÃtica no Sistema Nervoso Central, possivelmente relacionado com o sistema gabaÃrgico, desprovida de aÃÃo antidepressivo. / Currently there is an increased interest in developing new therapeutic agents from biologically active molecules present in natural sources from marine organisms has been posted. Within this context, red marine algae have received much attention for presenting active biological and pharmacological properties such as antibacterial, antioxidant, antiviral, antitumor, antithrombotic, pro-thrombotic, antinociceptive, anti-inflammatory, anticancer and anticoagulant. Recent surveys show that many bioactive obtained from marine sources have great potential for neuropharmacological applications. Thus the aim of this thesis was to evaluate the effects of sulfated polysaccharides total (PST) obtained from the red seaweed Gracilaria cornea in the Central Nervous System in classic animal models elevated plus maze (EPM), open field, hole board, rota rod, forced swim and tail suspension for the screening of drugs with activities related to neurobehavioral disorders such as anxiety and depression. For the experiments Swiss male mice were used, weighing 25-32g, from the vivarium of the Federal University of CearÃ. The animals were treated acutely with PST at doses of 0.1, 1 or 10 mg/kg intraperitoneally. Thirty minutes after treatment, the animals were subjected to behavioral tests of locomotion (open field and rota rod), anxiety (LCE and hole board) and depression (forced swim and tail suspension). The results showed that PST, at a dose of 10 mg/kg, showed anxiolytic effects in models of EPM and hole board, it increased all parameters analyzed in the EPM, as well as the number of dives in the holes of the perforated plate. This effect is probably related to the GABAergic system because flumazenil, antagonists of GABA/Benzodiazepine receptor, reversed the anxiolytic effects of PST in the EPM. In the open field test dose of 10 mg/kg increased the number of quadrants and the number of rearing, try one exitatÃria action already in the route test rod did not change, showing that the motor activity of the animals was not affected. In the assessment of depressive activity, the PST did not alter the immobility time in the forced swim and tail suspension tests, although the dose of 10mg/kg showed a decrease in the parameter analyzed nonsignificant. Conclusion: total sulfated extracted from Gracilaria cornea, at a dose of 10 mg/kg, polysaccharides suggest an anxiolytic action in the central nervous system, possibly associated with the GABAergic system, devoid of antidepressant action.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-24T16:14:21Z No. of bitstreams: 1 Gustavo Neto Bandeira.pdf: 480654 bytes, checksum: e048697a909f44f9284d66f9f557a5c9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-24T16:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gustavo Neto Bandeira.pdf: 480654 bytes, checksum: e048697a909f44f9284d66f9f557a5c9 (MD5) Previous issue date: 2009-07-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The family Brassicaceae is one of the most economically important in the world, having as their main pest to Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae), which causes great damage to the crop with up to 100% of yield losses. In order to investigate alternatives to synthetic insecticides, medicinal plants have been in recent years in search of compounds with insecticidal properties, repellent, fumigant or that act directly on the disruption of biological cycles of pests such as P. xylostella. Furthermore, the literature is scarce when it comes to studies with the use of essential oils and organic extracts to verify their potential insecticide. Accordingly, the medicinal plants chosen to carry out the research potential of the insecticide are the following families: Tiliaceae (Muntingia calabura) Piperaceae (Piper marginatum) Rutaceae (Citrus reticulata x Citrus sinensis, C. reticulata Blanco) and Myrtaceae (Melaleuca leucadendron). The bioassays carried out indicated that P. xylostella larvae were susceptible to all selected plant extracts and oils tested. Furthermore the extract etanolic of flowers (MCEFL) achieved 99.5% of larvalmortality and a lethal concentration LC50 estimated of 1.63 mg/mL. In addition the extract MCEFL caused 100% of pupal inviability on treated larvae. The development of larvae increased 1.62 days when being treated with the extract hexanic of fruits (MCHFR) compared to the untreated ones. P. xylostella was susceptible to all essential oils tested. Among the oils the mosttoxic was those prepared from Citrus (LC50 of 0.55ppm for C. reticulata and 0,78ppm for C. sinensis x C. reticulata). Also, the oil from C. reticulata x C. sinensis increased larval development in 2.2 days compared to the other oils and untreated larvae. / A família Brassicaceae é uma das mais economicamente importantes no mundo, tendo como sua principal praga a Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae), que causa grandes danos à cultura chegando a atingir até 100% de perdas na produção. Tendo em vista a investigação de alternativas aos inseticidas sintéticos, as plantas medicinais tem sido alvo nos últimos anos na busca de compostos com propriedades inseticidas, repelentes, fumigante ou que atuem diretamente na interrupção dos ciclos biológicos de pragas, como a P. xylostella. Por outro lado, a literatura é escassa, quando se trata de estudos com o uso de óleos essenciais e extratos orgânicos para verificar seu potencial inseticida. Nesse sentido, as plantas medicinais escolhidas para realização da investigação do potencial inseticida foram: Muntingia calabura; Piper marginatum; Citrus reticulata x Citrus sinensis, C. reticulata Blanco e Melaleuca leucadendra. Os experimentos realizados com extratos e óleos das diferentes plantas selecionadas mostraram que as larvas de P. xylostella foi sensível a todos. Com relação ao extratos, o mais tóxico foi o extrato etanólico da flor, que promoveu 99,5% de mortalidade de larvas e uma CL50 estimada de 1,63 mg/mL. Na duração da fase larval, o extrato hexânico do fruto prolongou essa fase em 1,62 dias em relação ao controle e quanto à mortalidade da fase pupal, o extrato etanólico da flor inviabilizou completamente a emergência de adultos. As larvas de P. xylostella foi sensível atodos os óleos testados. Os mais tóxicos foram os óleos de Citrus (CL50 0,55ppm para C. reticulata e CL50 0,78ppm para C. sinensis x C. reticulata). Quanto a duração da fase larval, o melhor resultado foi observado para o óleo de C. reticulata x C. sinensis, que apresentou um incremento de 2,2 dias com relação ao controle.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-29T16:49:22Z No. of bitstreams: 1 Sergio Monteze Alves.pdf: 300642 bytes, checksum: fce1237abc75b8072be0d5a98b316b58 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-29T16:49:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sergio Monteze Alves.pdf: 300642 bytes, checksum: fce1237abc75b8072be0d5a98b316b58 (MD5) Previous issue date: 2012-02-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The bean species, Phaseolus vulgaris (L.), stands out as the most important of the five cultivated in the world. Among the pests of stored beans in Brazil, Zabrotes subfasciatus (Boh.) is considered the major one, whose control is commonly carried out using synthetic protectors and fumigants. New approaches to control have been tested, using less toxic compounds, less expensive, accessible and appropriate to the principles of Integrated Pest Management (IPM). The aims of this study were: (i) toxicity test (contact and fumigation) and repellence of dos Eucaliptus staigeriana F. Muell, Eucaliptus citriodora Hook, Ocimum gratissimum (L.) and Foeniculum vulgare Mill essential oils; (ii) identify and quantify the constituting compounds. The analysis by GC/ME indicated the presence of Limonene (28.73%), Geranial (15.20%) and Neral (12.16%), as main constituents of E. staigeriana oil; and for E. citriodora oil, Citronellyl acetate (3.34%), 1,8-Cineole (2.87%) and β-Pineno (0.94%). Among the oils tested at fumigant action, the most effective in controlling Z. subfasciatus were: O. gratissimum (LC50 = 0.9 μL/L air) and E. citriodora (LC50 = 0.9 μL/L air). In contact tests the highlights were: E. staigeriana (LC50 = 2.73 μL/20g) and F. vulgare (LC50 = 2.74 μL/20g). E. citriodora resented repellent effect from the concentration of 7.6 μl/20g of beans seeds, followed by E. staigeriana 8.0 μl/20g. The oviposition reduction of Z. subfasciatus was 96.2%, 96.4% and 57.2%, respectively, for E. staigeriana, E. citriodora and F. vulgare oils. Similar results were found to adult emergence. / A espécie de feijão comum, Phaseolus vulgaris (L.), destaca-se como a mais importante, entre as cinco cultivadas no mundo. Dentre as pragas do feijão armazenado no Brasil, Zabrotes subfasciatus (Boh.) é considerada uma das mais significativas, sendo seu controle comumente realizado com inseticidas sintéticos protetores e fumigantes. No entanto, novas alternativas aos inseticidas sintéticos vêm sendo testadas, como os produtos naturais, que são menos tóxicos, de menor custo, biodegradáveis e adequados aos princípios do Manejo Integrado de Pragas (MIP). Os objetivos desse trabalho foram: (i) testar a toxicidade (contato e fumigação) e a repelência dos óleos essenciais de Eucaliptus staigeriana F. Muell, Eucaliptus citriodora Hook, Ocimum gratissimum (L.) e Foeniculum vulgare Mill em Z. subfasciatus; (ii) identificar e quantificar os compostos constituintes. A análise por CG/EM revelou a presença de Limoneno (28,73%), Geranial (15,20%) e Neral (12,16%), como constituintes majoritários do óleo de E. staigeriana; e para E. citriodora, Citronelil acetato (3,34%), 1,8-Cineole (2,87%) e β-Pineno (0,94%). Os óleos mais efetivos com efeito fumigante no controle de Z. subfasciatus foram O. gratissimum e E. citriodora com CL50s de 0,9 μL/L de ar. Nos testes de contato se destacaram E. staigeriana (CL50 = 2,73 μL/20g) e F. vulgare (CL50 = 2,74 μL/20g). E. citriodora apresentou efeito repelente para adultos de Z. subfasciatus, a partir de 7,6 μl/20g de feijão, seguido por E. staigeriana à 8,0 μl/20g. A redução da postura de Z. subfasciatus foi de 96,2, 96,4 e 57,2%, respectivamente, para os óleos de E. staigeriana, E. citriodora e F. vulgare. Resultados semelhantes, também, foram encontrados para a emergência de adultos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T16:46:54Z No. of bitstreams: 1 Ligia Helena de Andrade.pdf: 893001 bytes, checksum: 05a989dafe1ad7f022e1aa878889031d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T16:46:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ligia Helena de Andrade.pdf: 893001 bytes, checksum: 05a989dafe1ad7f022e1aa878889031d (MD5) Previous issue date: 2010-02-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The aphid, Aphis gossypii Glover (Hemiptera: Aphididae) stands out among the major cotton pests, and therefore alternative tactics have been used in its control, such as botanical insecticides. This study aimed to evaluate the lethal and sublethal effects of botanical insecticides on the biology and behavior of this pest. Experiments were performed in the laboratory using leaf discs of cotton CNPA 8H cultivar, immersed in the concentrations of formulated botanical insecticides (emulsifiable oils and extract) and essential oils as food substrate. Formulations based on neem and Bioalho® caused significant reductions in reproductive rates obtained by the life table of fertility. On the other hand, essential oils did not alter significantly these parameters except the oil of Chenopodium ambrosioides L. (Chenopodiaceae), which increased reproductive rates due to the likely hormoligosis effect. For products tested by the instantaneous rate of population growth, Compostonat®, Rotenat® and Neempro caused aphid population decline, while Natuneem promoted positive rates, indicating that the population continued to increase. Concerning the aphid behavior, repellency-choice experiments were performed. The oils of Piperaduncum L. (Piperaceae), Azadirachta indica A. Juss. (Meliaceae) and Cymbopogom winterianus (L.) (Poaceae) had the highest repellency percentage (66.67, 60.87 and 84%) for adult females.The latter two oils also reduced nymphs production (80.65 and 92%). The opposite occurred with F. vulgare, which attracted significantly aphid females to the treated disks and stimulated nymphs production. / O pulgão, Aphis gossypii Glover (Hemiptera: Aphididae), destaca-se entre as principais pragas do algodoeiro, e deste modo, táticas alternativas têm sido utilizadas no seu controle, a exemplo dos inseticias botânicos. O presente trabalho objetivou avaliar os efeitos letais e subletais de inseticidas botânicos sobre a biologia e o comportamento dessa praga. Os experimentos foram realizados em laboratório, utilizando-se como substrato alimentar, discos de folhas de algodoeiro, cultivar CNPA 8H imersos nas concentrações de inseticidas botânicos formulados (óleos emulsionáveis e extrato) e óleos essenciais. Formulações a base de nim e Bioalho® provocaram reduções significativas nas taxas reprodutivas obtidas pela tabela de vida de fertilidade. Por ourtro lado, os óleos essenciais não alteraram de forma significativa estes parâmetros, com exceção do óleo de Chenopodium ambrosioides L. (Chenopodiaceae), que aumentou as taxas reprodutivas, devido ao provável efeito de hormoligose. Em relação aos produtos testados, através da taxa instantânea de crescimento populacional, Compostonat®, Rotenat® e Neempro provocaram declínio da população do pulgão, enquanto Natuneemproporcionou taxas positivas, indicando que a população continuou aumentando. Em relação ao comportamento do pulgão, foram realizados experimentos de repelência com chance de escolha.Os óleos de Piper aduncum L. (Piperaceae), Azadirachta indica A. Juss. (Meliaceae) e Cymbopogom winterianus (L.) (Poaceae) apresentaram os maiores percentuais de repelência (66,67; 60,87 e 84%) para fêmeas adultas. Os dois últimos óleos também provocaram redução na produção de ninfas (80,65 e 92%). O contrário ocorreu com F. vulgare, que atraiu significativamente as fêmeas do pulgão para os discos tratados, e favoreceu a produção de ninfas.

Os isômeros de posição do triterpeno pentacíclico amirina (alfa e beta), estão presentes em várias espécies de plantas, como a Protium spruceanum. Estas moléculas vêm mostrando várias propriedades farmacológicas importantes, como efeitos anti-inflamatórios, efeito gastroprotetor, efeito antipruriginoso, efeito antitumoral, entre outros, sendo, dessa forma, uma candidata a um novo fármaco. No entanto, o comportamento destas substâncias frente as enzimas do citocromo P450 (CYP 450) ainda não foram estudadas. Portanto, o presente trabalho tem como objetivo realizar um estudo de metabolismo in vitro com esses triterpenos, caracterizar os parâmetros cinéticos enzimáticos assim como possíveis metabólitos que possam surgir empregando microssomas hepático de ratos. Para isto, foi desenvolvido e validado um método bioanalítico para análise desses triterpenos em microssomas de ratos e análise por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG-EM). Como técnica de preparação das amostras foi empregado a extração liquido-liquido utilizando hexano como solvente extrator. A metodologia para quantificação dos triterpenos em microssomas hepático foi validada de acordo com a legislação vigente para análise de fármacos em fluidos biológicos, avaliando os seguintes parâmetros: linearidade, sensibilidade, seletividade, precisão, exatidão, estabilidade e recuperação. Todos os parâmetros avaliados corroboraram com as exigências da legislação. Após validação, iniciou-se os estudos para determinação dos parâmetros cinéticos enzimáticos avaliando a variação do tempo de incubação e da concentração de proteínas microssomais no consumo dos subtratos. Utilizando a faixa linear destes experimentos foi determinada a concentração de 0,25 mg mL-1 e o tempo de incubação de 20 min, respeitando as condições de Velocidade Inicial. Em seguida, ao avaliar a variação da concentração do substrato observou-se que a cinética obtida é do tipo sigmoidal. Dessa forma, para os cálculos dos parâmetros cinéticos foi utilizado a equação de Hill, obtendo Vmax = 0,698 ± 0,022 ?mol/mg proteína/min, S50 = 55,1 ± 10,5 ?M e o coeficiente de Hill 2,7 ± 0,17, já os parâmetros da beta amirina foram: Vmax = 0,775 ± 0,034 ?mol/mg proteína/min, S50 = 130,4 ± 42,8 ?M e coeficiente de Hill 2,5 ± 0,21. A partir destes dados obteve-se o clearance intrínseco para a beta e a alfa amirina de 3,05 mL/min/kg e 6,55 mL/min/kg, respectivamente. Apesar das amirinas serem metabolizadas pelas enzimas da CYP 450, nenhum metabólito foi encontrado. Nesse trabalho, foi demostrando pela primeira vez, o comportamento das enzimas das CYP 450 de ratos frente aos produtos naturais alfa e beta amirina, no qual foi verificado um comportamento atípico, que não segue a cinética michaeliana. / The isomers of pentacyclic triterpene amyrins (alpha and beta) occurring in a variety of plants, as Protium spruceanum. These molecules have showed significant pharmacological effects, as anti-inflammatory, gastroprotective and antitumor effects. Based on that, these substances have demonstrated great potential to become new drugs. However, the metabolic behavior by employing CYP enzymes (CYP450) has not been studied yet. The aim of this work was to perform an in vitro metabolism study by using these triterpenes and to determine the enzymatic kinetic parameters and possible metabolites by employing rat liver microsomes. To perform that, a bioanalytical method was developed and validated to analysis amyrins in rat microsomes. Gas chromatography coupled with mass spectrometer (GC-MS) was applied in the analysis. Liquid-liquid extraction was used to clean the sample and hexane was used as extraction solvent. Before metabolism studies, the method was validated according to current legislation to analysis of drugs in biological fluids. The following parameters were evaluated: linearity, sensitivity, selectivity, precision, accuracy, stability and recovery. All parameters evaluated were in agreement to legislation guidelines. After validation, enzymatic kinetic parameters were determined through variation of incubation time and concentration of microsomal proteins. By using linear range, the incubation time of 20 min and microsomal protein concentration of 0.25 mg mL-1 were determined to respect V0 conditions. The enzymatic kinect results showed a sigmoidal profile. Thus, to calculate the kinetic parameters it was used the Hill equation. It was observed a Vmax = 0.698 ± 0.022 ?mol/mg protein/min, S50 = 55.18 ± 10.5 ?M and Hill coefficient of 2.7 ± 0.17 to alpha amyrin and a Vmax = 0.775 ± 0.034 ?mol/mg protein/min, S50 = 130.4 ± 42.8 ?M and Hill coefficient of 2.5 ± 0.21 to beta amyrin. The intrinsic clearance to beta and alpha amyrin was 3.05 mL/min/kg e 6.55 mL/min/kg, respectively. In spite of amyrins were metabolized by the CYP 450 enzymes, none metabolite was found. In this work, it was demonstrated, for the first time, the behavior of rat liver microsomes front to alpha and beta amyrin, in which it was observed an atypical behavior, that it does not follow the Michaelis-Menten kinetics.

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O ambiente marinho é um dos ecossistemas mais diversos e complexos em termos de biodiversidade. As condições químicas, físicas e biológicas desse ambiente favorecem a produção de uma variedade de substâncias pela biota, transformando os produtos naturais marinhos em um dos recursos promissores na pesquisa por novos compostos bioativos. O gênero Tubastraea (Scleractinia, Dendrophylliidae) inclui corais ahermatípicos que produzem compostos secundários bioativos em situações de competição. No estado do Rio de Janeiro são encontradas duas espécies invasoras desse gênero, Tubastraea coccinea e Tubastraea tagusensis. A primeira é amplamente distribuída nas águas tropicais do Atlântico e do Pacífico, e a segunda é nativa do leste do pacífico, ambas invasoras no Atlântico Sul. Este trabalho objetiva avaliar as atividades anti-inflamatória, antioxidante e toxicológica de extratos metanólicos de T. coccinea e T. tagusensis. As colônias de Tubastraea foram coletadas na Baía de Ilha Grande, Rio de Janeiro - Brasil e extraídas com metanol. A caracterização química foi realizada através da espectroscopia ultravioleta, visível e de infravermelho. Ação anti-inflamatória foi avaliada pelo modelo in vivo de edema em pata de camundongo induzido por carragenina. Atividade sequestrante de radicais livres foi avaliada pelo método do DPPH. Na avaliação toxicológica utilizamos o ensaio Salmonella/microssoma, na presença e ausência de ativação metabólica exógena, o teste in vitro de micronúcleo com células de macrófagos de rato e o teste de mortalidade com o microcrustáceo Artemia salina. Foi possível a distinção dos grupos químicos presentes nos extratos, com os resultados encontrados sendo corroborados com os presentes na literatura. Os extratos de ambas as espécies apresentaram inibição significativa no edema da pata nas doses testadas, em relação ao veículo. Ambos os extratos demonstraram capacidade pela captura do radical DPPH. Atividades citotóxica e mutagênica na ausência de metabolização exógena não foram observadas para as linhagens TA97, TA98 e TA102 nas duas espécies; para a TA100 o extrato de T. coccinea induziu citotoxidade na concentração de 50 g/placa. Os dois extratos induziram citotoxicidade na presença de metabolização exógena para a cepa TA98, tendo sido detectada também indução de mutagenicidade nesta linhagem para T. coccinea. Os extratos não foram capazes de induzir a formação de micronúcleos e não foram tóxicos para o microcrustáceo A. salina. A resposta inibitória do edema após 2 h da indução indica que os compostos presentes nos extratos atuam na segunda fase da inflamação, possivelmente pela inibição da produção de prostaglandinas. Os resultados sugerem que os extratos das espécies T. coccinea e T. tagusensis apresentam substâncias com potencial uso farmacológico, como agente anti-inflamatório e antioxidante. / The marine environment is one of the most diverse and complex ecosystems in terms of biodiversity. The conditions of chemical, physical and biological environment enables the production of a variety of substances by the biota, transforming the marine natural products resources on a promising research for new bioactive compounds. The genus Tubastraea (Scleractinia, Dendrophylliidae) includes ahermatypic corals that produce bioactive secondary compounds in competitive situations. In the state of Rio de Janeiro are found two invasive species of this genus, Tubastraea coccinea and Tubastraea tagusensis. The first is widely distributed in the tropical waters of the Atlantic and Pacific, and the second is native to the eastern Pacific, both are invasive in the South Atlantic. This study is focused on the anti-inflammatory, antioxidant and toxicological evaluation of methanol extracts of T. coccinea and T. tagusensis. Tubastraea colonies were collected in the Ilha Grande Bay, Rio de Janeiro - Brazil and extracted with methanol. Chemical characterization was performed by spectroscopies ultraviolet, visible and infrared. Anti-inflammatory properties were assessed by in vivo carrageenan-induced mouse paw oedema. Radical scavenging was evaluated by DPPH method. In toxicological evaluation Salmonella/microsome mutagenicity assay, in the presence and absence of exogenous metabolic activation, the in vitro mammalian cell micronucleus test and mortality test to brine shrimp Artemia salina were performed. Distinct chemical groups in extracts were found, with the results being corroborated with the literature. The extracts from both species showed significant inhibition of paw oedema at the doses tested, in relation to the vehicle. Both extracts showed DPPH radicals scavenger capacity. Cytotoxic and mutagenic activities in the absence of exogenous metabolism were not observed for TA97, TA98 and TA102 strains by both species. T. coccinea extract induced cytotoxicity in TA100 at 50 &#956;g/placa. Both extracts induced cytotoxicity in the presence of exogenous metabolism for TA98 strain, and was also detected induction of mutagenicity by T. coccinea extract. The extracts were unable to induce micronucleus formation and were not toxic to the brine shrimp assay. The inhibitory response of carrageenan-induced mouse paw oedema after two hours indicates that the compounds present in the extracts act on the second stage of inflammation, possibly by inhibiting prostaglandin production. The results suggest that the extracts of the species T. coccinea and T. tagusensis contain pharmacological substances with potential use as anti-inflammatory and antioxidant.