Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-09T18:59:13Z No. of bitstreams: 1 Tese-Liliane Aparecida Tanus Benatti-2013.pdf: 1297536 bytes, checksum: 448305a12775a03108961cc2d74864d3 (MD5) / Rejected by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com), reason: on 2014-12-09T18:59:23Z (GMT) / Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-12T19:34:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese-Liliane Aparecida Tanus Benatti-2013.pdf: 1297536 bytes, checksum: 448305a12775a03108961cc2d74864d3 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-16T09:23:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese-Liliane Aparecida Tanus Benatti-2013.pdf: 1297536 bytes, checksum: 448305a12775a03108961cc2d74864d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-16T09:23:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese-Liliane Aparecida Tanus Benatti-2013.pdf: 1297536 bytes, checksum: 448305a12775a03108961cc2d74864d3 (MD5) Previous issue date: 2013-07-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study aimed at evaluating the productive performance and physiological markers of stress of bovines from different breeds. We evaluated 45 bovines, Curraleiro Pe-Duro (Gcur), Pantaneiro (Gpan) and Nellore (Gnel), finished in feedlot. We analyzed cortisol and acute phase proteins levels, hemogram, protein and energetic profiles and enzymatic evaluation at three moments, M0, M56 and M103, we also carried out the histopathological examination of liver and lymph nodes fragments. Cortisol values in Gnel were higher at M0 than at M103. In all groups, the values of globular volume, hemoglobin, albumin and α-1-acid glycoprotein were higher at M0 than at M103, the same occurred to transferrin in Gpan and Gnel. IgG showed higher concentrations at M0 in all three groups. Fibrinogen in Gpan and Gnel was lower at M103 than in M0. Weight gain was satisfactory in all groups. The ALP and GGT serum values were lower at M0 and AST was lower at M103. The protein and the energetic profile (cholesterol) increased throughout the experiment. Histopathological analysis of liver and mesenteric lymph nodes showed cholangiohepatitis. Feedlot system for Curraleiro Pé-Duro, Pantaneiro and Nellore bovines causes discrete alterations in eritrogram and acute phase protein (α-1-acid glycoprotein). Metabolic and enzymatic profiles as well as hepatic and lymph nodes histopathological evaluation showed presence of cholangiohepatitis; however such alterations did not affect productive performance. / Com este estudo propôs-se avaliar o desempenho e os marcadores fisiológicos de estresse de bovinos de diferentes raças. Foram avaliados 45 bovinos Curraleiro Pé-Duro (Gcur), Pantaneiro (Gpan) e Nelore (Gnel) terminados em confinamento. Analisaram-se os índices cortisol, proteínas de fase aguda, hemograma, perfil proteico, energético e a avaliação enzimática em três momentos, M0, M56 e M103; o desempenho ponderal e o exame histopatológico de fragmentos de fígado e linfonodos. Os valores de cortisol em Gnel no M0 foram maiores em relação ao M103. Nos três grupos, os valores do volume globular, hemoglobina, albumina e α-1 glicoproteína ácida foram mais elevados em M103 quando comparados ao M0 e o mesmo ocorreu com a transferrina em Gpan e Gnel. A IgG foi maior em M0 nos três grupos. O fibrinogênio no Gpan e Gnel foi menor em M103 em relação ao M0. O ganho em peso foi satisfatório em todos os grupos. Os valores séricos da ALP e a GGT foram menores em M0 e da AST em M103. Os perfis proteico e energético (colesterol) aumentaram ao longo do experimento. A análise histopatológica do fígado e linfonodos mesentéricos revelou presença de colangio hepatite. O sistema de confinamento para bovinos da raça Curraleiro Pé-Duro, Pantaneiro e Nelore ocasiona discretas alterações no eritrograma e na proteína de fase aguda (α1- glicoproteína ácida). Os perfis metabólico e enzimático, a avaliação histopatológica hepática e de linfonodos indicaram presença de colangiohepatite, e essas alterações aparentemente não comprometeram o desempenho produtivo.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-09-22T19:23:19Z No. of bitstreams: 1 thiagodealmeidaoliveira.pdf: 1376099 bytes, checksum: 1223858331fe263a8bdcce2a114266c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-09-27T13:42:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 thiagodealmeidaoliveira.pdf: 1376099 bytes, checksum: 1223858331fe263a8bdcce2a114266c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-27T13:42:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 thiagodealmeidaoliveira.pdf: 1376099 bytes, checksum: 1223858331fe263a8bdcce2a114266c5 (MD5) Previous issue date: 2017-06-28 / A modulação da resposta imune inata seria uma ferramenta capaz de elhorar a capacidade do sistema imune de combater a infecção por patógenos e outros estímulos externos. A utilização de vias sinalizadoras com a participação de alguns receptores específicos, como o peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARα) surgiria como importante hipótese para modular a produção de proteínas de fase aguda e do complemento em hepatócitos bovinos, órgão principal envolvido nessa síntese. Nesse sentido, o presente trabalho se utilizou de técnicas de cultivo primário de hepatócitos bovinos, provenientes de 5 animais diferentes, que foram isolados, cultivados e estimulados com um ligante desse receptor nuclear, o fenofibrato. Após 48 horas de cultivo as células tiveram seu ácido ribonucleico (RNA) extraído e quantificado, seguindo-se à síntese de ácido desoxirribonucleico complementar (cDNA) e execução das reações em cadeia da polimerase quantitativo (qPCR), a fim de se verificar a expressão e produção de proteínas de fase aguda e do sistema complemento por meio de de reações de qPCR. Os sobrenadantes de cultura também foram avaliados após esse período de tempo, onde foram dosadas as mesmas proteínas, por meio da técnica de Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Os resultados demonstraram que o cultivo se provou ineficiente no que diz respeito à viabilidade celular e à quantificação de RNA extraído, indicando que mais estudos devem ser feitos para padronização dessa técnica. Além disso, os resultados demonstraram que o PPARα, ativado frente ao seu ligante específico, o fenofibrato, não foi capaz de modular a expressão e tampouco a produção dos fatores de complemento e das proteínas de fase aguda analisadas, podendo indicar que em hepatócitos bovinos a modulação por esse receptor não ocorre da mesma maneira como em humanos e em murinos. No entanto, devido à grande variabilidade racial dos animais cujos fígados foram coletados e ao pequeno número amostral utilizado, análises mais refinadas são necessárias. Dessa maneira, estudos devem ser realizados visando novas moléculas capazes de modular proteínas relacionadas ao sistema imune em bovinos. / The innate immune modulation is a tool capable of improve the immune system capacity to fight infections by pathogens and other external stimuli. The use of signaling paths with participation of some specific receptors, such as peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARα) arises as an important hypothesis to modulate the acute phase proteins (APP) and complement proteins in bovine liver cells, where most of these molecules are produced in a systemic level. In this way, this work aimed to establish a protocol of primary culture of bovine hepatocytes suitable to analyze intracellular signaling paths and genetic expression and synthesis of proteins related to innate immune system. For that, bovine hepatocytes from five different animals were isolated, cultivated and activated by a receptor ligand - fenofibrate, both alone and associated with proinflammatory stimuli, in different concentrations. After 48 hours of culture, ribonucleic acid (RNA) was extracted and quantified, complementary deoxyribonucleic acid was synthetized and real-time polymerase chain reactions were setup to verify the acute phase and complement proteins expression and synthesis. The culture supernatant was used to analyze the protein dosage by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). The results showed that the hepatocytes isolation and culture were not very effective, since the extracted RNA showed low concentration and bad integrity, indicating that more studies must be performed to standardize this technique. Considering the low quantification and bad quality of RNA, it was not possible to access the role of the receptor PPARα in complement factors and acute phase proteins genetic expression and production, when activated by its specific ligand (fenofibrate). Thus, the development of isolation and culture techniques for bovine hepatocytes must continue to be developed in order to better evaluate the intracellular signaling pathways and the search for new molecules capable to modulate proteins related to the immune system in bovines.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2018-05-22T16:51:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_josiane_feijo.pdf: 1901281 bytes, checksum: 4995490ffaaf74c8692c66cfb785d3df (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-05-22T16:58:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_josiane_feijo.pdf: 1901281 bytes, checksum: 4995490ffaaf74c8692c66cfb785d3df (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-22T16:58:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_josiane_feijo.pdf: 1901281 bytes, checksum: 4995490ffaaf74c8692c66cfb785d3df (MD5) Previous issue date: 2016-07-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O cálcio é um mineral essencial para uma variedade de processos fisiológicos do organismo da vaca leiteira, sua deficiência pode causar vários distúrbios metabólicos, que levam a redução do desempenho produtivo e reprodutivo, com consequentes perdas econômicas. Atualmente há no mercado veterinário algumas estratégias para a prevenção da hipocalcemia, como: dieta aniônica, dieta deficiente de cálcio, administração de vitamina D3 no pré-parto e tratamento com cálcio oral no pós-parto recente, mas todas essas requerem ajustes a serem melhorados. Com isso, o objetivo desta Tese, é desenvolver uma estratégia farmacêutica eficiente no pré-parto, para prevenir a hipocalcemia subclínica (HSC) no pós-parto, para tal foi realizado dois experimentos in vivo, aprovados pelo Comitê de Ética de Experimentação animal da Universidade Federal de Pelotas. O primeiro foi relacionar a queda do cálcio no periparto com a síntese de proteínas de fase aguda, observamos que vacas com concentrações de cálcio  8,5 mg/dL alteram a síntese de proteínas de fase aguda já no pré-parto, causando diminuição no escore de condição corporal, no peso e na produção de leite. O segundo experimento foi analisar o efeito da suplementação de diferentes dietas cátion-anionica no pré-parto e relacionar com a hemogasometria e concentrações de cálcio sanguíneo. Observamos que a suplementação com dieta aniônica, proporciona um aumento na concentração de cálcio ionizado disponível no plasma e redução nas globulinas, demonstrando que o pH levemente ácido provavelmente altera a síntese de glubulinas. / Calcium is an essential mineral for a variety of physiological processes in the body of the dairy cow, its deficiency can cause various metabolic disorders, leading to reduced production and reproductive performance, with consequent economic losses. There are currently in the veterinary market some strategies for the prevention of hypocalcemia, such as anionic diet, deficient in dietary calcium, vitamin D3 administration in pre-partum and treatment with oral calcium in the recent post-partum, but all of these require adjustments to be improved. Thus, the aim of this thesis is to develop an effective strategy in the pre-partum to prevent subclinical hypocalcemia (HSC) postpartum, for this was done two in vivo experiments, approved by the Animal Experimentation Ethics Committee of the University Federal of the Pelotas. The first was to correlate the drop of calcium in the peripartum with the synthesis of acute phase proteins, we observed that cows in concentrations of calcium  8.5 mg / dL alter the synthesis of acute phase proteins, causing decrease in body condition score, in weight and milk production. The second experiment was to evaluate the effect of supplementation of different cation-anion diets in prepartum and relate to the blood gas analysis and blood calcium levels. We observed that supplementation with dietary anion, provides an increase in concentration of available calcium in ionized plasma and reduction in globulins, demonstrating that pH may change glubulinas synthesis.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2016-09-15T12:44:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_lorena_amaral.pdf: 1402709 bytes, checksum: dc0cdf39546ca7aa38b1d66d2153ecb3 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-09-15T19:48:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_lorena_amaral.pdf: 1402709 bytes, checksum: dc0cdf39546ca7aa38b1d66d2153ecb3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T19:48:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_lorena_amaral.pdf: 1402709 bytes, checksum: dc0cdf39546ca7aa38b1d66d2153ecb3 (MD5) Previous issue date: 2014-10-02 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / A pesquisa por marcadores precoces de inflamação tem sido o foco na medicina humana e veterinária durante as últimas décadas. Acredita-se que tanto o exercício físico quanto a obesidade sejam capazes de gerar a reação de fase aguda. O primeiro estudo teve como objetivo caracterizar a reação de fase aguda e sua relação com desempenho de cavalos submetidos a uma competição de longa distância. Foram avaliados 23 equinos os quais foram divididos em dois grupos sendo o grupo 1 composto pelos 10 primeiros colocados na competição e o grupo 2 composto pelos 13 animais que concluíram a competição em colocações inferiores. Foram efetuadas coletas sanguíneas em repouso (dia 0) e no ultimo dia de competição e foram realizados o teste de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Os resultados demonstraram que o exercício físico imposto influenciou de forma significativa (p<0,0001) as concentrações séricas das proteínas inflamatórias. A haptoglobina foi superior nos animais com baixo desempenho. Conclui-se que o exercício prolongado é capaz de gerar reação de fase aguda e que o monitoramento da concentração de haptoglobina pode ser um sinalizador de processo inflamatório e baixo desempenho. O segundo estudo teve como objetivo associar a adiposidade corporal e a forma de criação de potros com o perfil energético sanguíneo, as concentrações sanguíneas de proteínas inflamatórias e lesões osteoarticulares no tarso comparando animais criados em regimes intensivo ou extensivo. Foram avaliados 40 potros com 18 meses de idade da raça crioula, sendo 20 animais criados em sistema extensivo e 20 animais em sistema intensivo. Foram efetuadas avaliação bioquímica e eletroforese proteica. Foram efetuadas a mensuração de acumulo de gordura através de ultrassonografia e estudo radiológico da região por tarso. Foi observado maiores níveis de colesterol total e LDL, glicemia, amiloide A sérica, transferina, haptoglobina, glicoproteina acida e proteína de 23Kda não identificada no animais do grupo intensivo com relação aos do grupo extensivo. Em 100% dos animais do grupo intensivo foram observados lesões articulares enquanto 23% dos animais do grupo extensivo apresentaram tais alterações. No teste de Fisher foi observado que os animais do grupo intensivo apresentaram 105% mais chance de desenvolver osteoartrite que os animais do grupo extensivo. Ainda, no teste de Pearson foi observada correlação positiva entre a gordura na crista do pescoço com o grau de comprometimento articular. Conclui-se que tanto o exercício quanto o sobre peso foram capazes de gerar uma reação de fase aguda, sendo que durante o exercício prolongado a haptoglobina apresentou relação com o desempenho dos animais. Já os potros em criação intensiva, além da reação de fase aguda, foi observada elevada incidência de osteoartrite juvenil e alterações no metabolismo energético / The search for early markers of inflammation has been the focus in human and veterinary medicine during the last decades. To determine the value of the measurement of proteins in the situations described, two studies were conducted. It is believed that both the physical exercise as obesity can generate an acute phase reaction. The first study aimed to characterize the acute phase reaction and its relation to performance of horses subjected to long distance competition. Was developed during the March of Resistance of Crioulo horses, consisting of a route of 750 km traveled. Were evaluated 23 horses, of wich were divided into two groups, with the first group consisting of the top 10 in the competition and the second group comprises the 13 animals that completed the competition in lower positions. Blood samples were collected at rest (day 0) and on the last day of competition and testing polyacrylamide electrophoresis (SDS-PAGE) gel were performed. The results showed that imposed physical exercise influenced significantly (p<0.0001) in serum concentrations of haptoglobin, ceruloplasmin, immunoglobulin A, acid glycoprotein and the protein with molecular weight of 23 kDa. Haptoglobin was higher in animals with low performance. The second study aimed to associate adiposity and the shape of creation of foals with blood energy profile, blood concentrations of inflammatory proteins and osteoarticular lesions in the tarsus comparing animals raised in intensive or extensive regimes. Were evaluated 40 Crioulo foals at 18 months old, 20 animals kept in extensive systems and 20 animals in intensive system. Protein electrophoresis and biochemical evaluation were performed. Measurement of fat accumulation were made by ultrasound and radiological study of the tarsus region. Higher levels of total cholesterol and LDL, blood glucose, serum amyloid A, transferrin, haptoglobin, acid glycoprotein and unidentified protein 23Kda of animals in the intensive group compared to the extensive group was observed. The intensive group also showed greater deposit of fat in the crest of the neck, retroperitoneal area and base of the tail region. In 100% of the animals in the intensive group were observed lesions compatible with juvenile osteoarthritis while 23% of the animals in extensive group showed such changes. In Fisher's exact test was observed that the animals in the intensive group had 105% more likely to develop osteoarthritis than animals from extensive group. Still, the Pearson test positive correlation between fat on the crest of the neck with the degree of joint involvement of foals was observed. We conclude that both the exercise and the overweight were able to generate an acute phase reaction, and during prolonged exercise haptoglobin were related to animal performance. Already foals in intensive farming, besides the acute phase reaction, high incidence of juvenile osteoarthritis and changes in energy metabolism was observed.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Rangelia vitalii is the etiologic agent of rangeliosis, a hemorrhagic disease that was described in dogs from South and Southeast Brazil, Uruguay and Argentina. The immunological aspects involved in this disease have not been fully elucidated. This study aimed to investigate the immunological parameters in rangeliosis by the determination of serum cytokines, nitric oxide, electrophoretic profile, acute phase proteins and immunoglobulins of dogs experimentally infected with R. vitalii. Twelve dogs were divided into two groups: Group A (control) composed by uninfected animals (n=5) and Group B consisting of animals inoculated with R. vitalii (n=7). After inoculation, animals were monitored by blood smear. Blood samples were collected through the jugular vein on days 0, 10 and 20 post-inoculation (PI) to determine the serum levels of interferon-gamma (IFN-γ), tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin 1 (IL-1), interleukin 6 (IL-6), oxidation products of nitric oxide (NOx), electrophoretic profile, acute phase proteins (C-reactive protein and alpha 1 acid glycoprotein) and immunoglobulins (IgG, IgM, IgA and IgE). The parasite was found within erythrocytes, neutrophils and monocytes on day 5 PI in infected group. This study showed an increase (P<0.01) of cytokines levels in the infected group when compared to control group. Serum levels of NOx increased on days 10 (P<0.01) and 20 PI (P<0.05) in infected animals. Total protein decrease on days 10 (P<0.01) and 20 (P<0.05) PI. There was a reduction (P<0.01) in albumin in infected group when compared with control group. Alpha-1 globulin and gamma globulin fractions increased (P<0.01) on day 20 PI in infected animals. Alpha-2 globulin (days 10 and 20 PI) and beta-2 globulin (day 10 PI) were decreased (P<0.05) in infected animals when compared to control group. Beta-1 globulin fraction did not differ statistically. Serum C-reactive and alpha 1 acid glycoprotein concentrations increased (P<0.05) on days 10 and 20 PI in infected animals. IgG was increased on days 10 (P<0.05) and 20 PI (P<0.01) in infected animals. It was observed an increase (P<0.01) in the levels of IgM, IgA, and IgE in infected animals compared to control group. From these results, we can conclude that rangeliosis causes alterations in serum cytokines, nitric oxide metabolites, serum proteins and stimulates the synthesis of acute phase proteins and immunoglobulins. These alterations may be associated with the host immune protection against the piroplasms, similar to what occurs in other hemoparasite infections. / Rangelia vitalii é o agente etiológico da rangeliose, uma doença de curso hemorrágico que foi descrita em cães no Sul e Sudeste do Brasil, Uruguai e Argentina. Os aspectos imunológicos envolvidos nessa doença não foram totalmente elucidados. Nesse estudo objetivou-se investigar os parâmetros imunológicos na rangeliose, através da determinação sérica de citocinas, óxido nítrico, perfil eletroforético, proteínas de fase aguda e imunoglobulinas de cães experimentalmente infectados por Rangelia vitalii. Foram utilizados 12 cães divididos em dois grupos: Grupo A (controle) composto por animais não infectados (n=5) e Grupo B composto por animais inoculados com R. vitalii (n=7). Após inoculação, os animais foram monitorados por esfregaço sanguíneo. Foi coletado sangue da veia jugular nos dias 0, 10 e 20 pós-inoculação (PI) para a dosagem sérica das citocinas interferon gama (IFN-γ), fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interleucina 1 (IL-1) e interleucina 6 (IL-6), dosagem de produtos de oxidação do óxido nítrico (NOx), perfil eletroforético, dosagem de proteínas de fase aguda (proteína C-reativa e alfa 1 glicoproteína ácida) e imunoglobulinas (IgG, IgM, IgA e IgE). No grupo infectado o parasita foi encontrado no interior de eritrócitos, neutrófilos e monócitos no dia 5 PI. Esse estudo demonstrou aumento (P<0,01) dos níveis de citocinas séricas no grupo infectado em relação ao grupo controle. Os níveis séricos de NOx aumentaram nos dias 10 (P<0,01) e 20 PI (P<0,05) nos animais infectados. A proteína total reduziu nos dias 10 (P<0,01) e 20 PI (P<0,05). Ocorreu redução (P<0,01) de albumina no grupo infectado em relação ao grupo controle. As frações alfa-1 globulina e gama globulina aumentaram (P<0,01) nos animais infectados no dia 20 PI. Alfa-2 globulina (dias 10 e 20 PI) e beta-2 globulina (dia 10 PI) decresceram (P<0,05) nos animais infectados em comparação ao grupo controle. A fração beta-1 globulina não diferiu estatisticamente. As concentrações séricas de proteína C- reativa e alfa-1 glicoproteína ácida aumentaram (P<0,05) nos dias 10 e 20 PI nos animais infectados. Ocorreu aumento de IgG nos dias 10 PI (P<0,05) e 20 PI (P<0,01) no soro dos animais infectados. Foi observado aumento (P<0,01) de IgM, IgA e IgE nos animais infectados em relação ao grupo controle. A partir dos resultados pode-se concluir que a rangeliose causa alteração na concentração de citocinas séricas, nos metabólitos do óxido nítrico, nas proteínas séricas e estimula a síntese de proteínas de fase aguda e imunoglobulinas. Estas alterações podem ser associadas à resposta imune do hospedeiro contra o piroplasma.