Nesse trabalho avaliamos a sensibilidade a drogas in vitro de alguns isolados obtidos de pacientes brasileiros com leishmaniose cutânea. O microteste de MTT modificado mostrou-se eficaz para avaliação da sensibilidade in vitro de promastigotas de Leishmania e macrófagos de medula como modelo de infecção por L. (V.) braziliensis. A atividade de tamoxifeno e anfotericina B foi similar entre os isolados de Leishmania avaliados. Foi observada uma variação maior da sensibilidade ao Glucantime®, sendo que os isolados de L. (V.) braziliensis apresentaram maior sensibilidade a essa droga. Não foi observada correlação da resposta clínica dos pacientes ao tratamento com a atividade in vitro. Avaliamos também a eficácia de tamoxifeno no tratamento de camundongos BALB/c infectados com L. (V.) braziliensis. Observamos que 20 ou 30 mg/kg/dia de tamoxifeno por 15 dias resultou em redução no tamanho das lesões e carga parasitária em comparação com animais controle.Um isolado apresentou morfologia flagelar distinta daquela observada em promastigotas típicos de Leishmania. / In this work we evaluated the in vitro sensitivity to drugs of some isolates from Brazilian patients with cutaneous leishmaniasis. The modified MTT microtest was effective for evaluation of in vitro sensitivity of Leishmania promastigotes and macrophages from bone marrow as a model of infection by L. (V.) braziliensis. The activity of tamoxifen and amphotericin B was similar among isolates of Leishmania evaluated. Sensitivity to Glucantime®, was more variable with isolates of L. (V.) braziliensis presenting higher sensitivity to the drug. There was no correlation between clinical response to treatment with in vitro activity. We have also evaluated the effectiveness of tamoxifen in the treatment of BALB/c mice infected with L. (V.) braziliensis and observed that 20 or 30 mg/kg/day of tamoxifen for 15 days resulted in reduction in the size of lesions and parasite load when compared with control animals. One of the isolates presented atypical flagellar morphology.

Introdução: A neoplasia de mama é o tipo mais comum de câncer entre as mulheres. A despeito dos programas de rastreamento, que marcadamente reduziram a mortalidade, devido, principalmente ao diagnóstico precoce, uma significativa parcela de mulheres, apresenta-se com tumores localmente avançados na ocasião do diagnóstico. Nestas situações o tratamento neoadjuvante (TNA) está indicado. Com o advento de novos esquemas medicamentosos e crescentes indicações de TNA, busca-se fatores preditores da resposta tumoral, que a determinem de maneira precoce, precisa, objetiva e reprodutível. Até o momento, não há consenso em como determinar, clinicamente, a resposta da neoplasia ao TNA. Objetivo: O presente estudo investigou a associação entre o realce de fundo do tecido fibroglandular (BPE) em exames de RM da mama contralateral a neoplasia e a resposta patológica ao tratamento quimioterápico neoadjuvante (TNA), em pacientes portadoras de câncer de mama localmente avançado. Materiais e Métodos: Um total de 55 pacientes apresentando carcinoma ductal invasivo de mamas foram avaliadas, consecutivamente, entre setembro de 2010 e novembro de 2013. As pacientes selecionadas realizaram RM previamente ao início do tratamento quimioterápico e foram submetidas a tratamento cirúrgico após término do TNA. O BPE foi aferido através da avaliação qualitativa, de acordo com as categorias preconizadas pela 5° edição do BI-RADS e por método quantitativo, por segmentação automática do tecido fibroglandular da mama contralateral a neoplasia e cálculo do coeficiente de realce do parênquima. As pacientes foram divididas em dois grupos, de acordo com os achados anatomopatológicos encontrados na peça cirúrgica obtida ao término do TNA: Grupo Resposta Completa: ausência de neoplasia na peça cirúrgica e Grupo Resposta Ausente: presença de neoplasia residual na peça cirúrgica. O BPE destes dois grupos foi então comparado. Resultados: Encontramos diferença significativa (p<0,001) entre os grupos para a variável BPE, quando aferida de maneira qualitativa, sendo que o grupo que obteve resposta patológica completa apresentou maior BPE. A análise do coeficiente do BPE não demonstrou diferença significativa entre os grupos (p=0,075), porém uma tendência a diferença significativa, com o grupo resposta patológica completa apresentando valores superiores de coeficiente de realce, em concordância com a avaliação qualitativa. Conclusões: Os resultados sugerem que o BPE da mama contralateral à neoplasia pode estar relacionado à resposta patológica após TNA, quando aferido de maneira qualitativa. Maiores valores de coeficiente de BPE também parecem estar associados a maior chance de obter resposta patológica completa. / Introduction: Breast cancer is the most common type of cancer among women. Despite screening programs, which markedly reduced mortality mainly due to early diagnosis, a significant number of women present with locally advanced tumors at diagnosis. The neoadjuvant chemotherapy treatment (NAT) is indicated in these situations. The advent of new drug regimens and growing indications of NAT requires biomarkers for assessing and predicting the response of breast cancer to neoadjuvant therapy. At presente, there is no consensus to the early assessment of breast cancer response to NAT. Objective: This study investigated the association between Backgroud Parenchymal Enhancement (BPE) of contralateral breast cancer and the pathologic response to neoadjuvant chemotherapy treatment in patients with locally advanced breast cancer. Materials and Methods: A retrospective study of 55 patients with locally advanced breast cancer. The selected patients underwent MRI before the start of chemotherapy and underwent surgery after TNA completion. The BPE was determined by qualitative assessment, according to the categories recommended by the 5th edition of BI- RADS, and quantitative method by automatic segmentation of fibroglandular tissue of contralateral breast and calculation of BPE coefficient. The patients were divided into two groups according to pathological findings in surgical specimens obtained at the end of TNA, Group Complete Response: no tumor in the surgical specimen and Group Response Absent: presence of residual tumor in the surgical specimen .The BPE of these two groups were compared. Results: We found a significant difference (p <0.001) between the groups for the BPE variable when measured in a qualitative manner. The complete pathological response group got highest category of BPE. The analysis of the BPE coefficient showed no significant difference between groups (p=0.075), but a tendency to significant differences, with complete pathological response group presenting higher values of BPE coefficient. Conclusions: The results suggest that the BPE of contralateral breast is correlated to the pathological response after neoadjuvant chemotherapy treatment, when measured in a qualitative manner. Higher values of BPE coefficient appear to be associated with a higher chance of getting complete pathological response to neoadjuvant chemotherapy treatment.

Um dos desafios recorrentes na prática clínica da Oncologia é o processo de repopulação, no qual células tumorais resistentes à terapia são capazes de proliferar e reconstituir o tumor. No entanto, os mecanismos envolvidos neste fenômeno ainda foram pouco explorados, sendo necessário melhor compreendê-los para evitar a falha terapêutica. Melanomas são bons modelos para estudar repopulação devido às baixas taxas de sobrevida livre de progressão e às altas taxas de resistência às terapias associadas a este tipo de tumor sólido. Sabe-se que a exposição de células tumorais a condições estressoras do microambiente, como hipóxia e hipóxia/reoxigenação, bem como ao próprio tratamento antitumoral, são pressões seletivas frequentemente encontradas em tumores sólidos que favorecem a resistência às terapias e a repopulação tumoral. Estudos prévios indicam que a sinalização mediada pelo Fator de Ativação de Plaquetas (PAF), um lipídio bioativo relacionado à diversas funções fisiológicas, e de seu receptor, PAFR, está associada com a resistência de células de melanoma aos tratamentos citotóxicos e com crescimento tumoral. Portanto, este trabalho teve como objetivo investigar o envolvimento da sinalização de PAFR frente às condições estressoras descritas acima no fenômeno de repopulação de melanomas. Os resultados de espectrometria de massa indicaram que hipóxia aumentou a geração de PAF nas linhagens de melanoma humano SKmel05 e A375, mas não na A375M, embora este aumento não tenha sido observado após a reoxigenação. Além disso, mostraram que SKmel37 exibiu os maiores níveis basais de PAF, aumentando substancialmente sua geração em diferentes tempos de exposição à hipóxia e hipóxia/reoxigenação. Investigamos também a geração de outros ligantes de PAFR, porém nenhum deles foi encontrado nas amostras. Os resultados de detecção de PAFR por Western Blot e/ou citometria de fluxo revelaram que os níveis proteicos não foram modulados por estas condições em nenhuma das linhagens e que, em termos basais, SKmel37 e SKmel05 apresentaram os maiores níveis. Estas linhagens foram, portanto, submetidas a ensaios de proliferação, os quais evidenciaram que frente ao tratamento com o antagonista de PAFR, WEB2086, em condições de hipóxia e hipóxia/reoxigenação, apenas as células SKmel37 tiveram sua proliferação reduzida e morfologia associada à morte. Ensaios de incorporação de iodeto de propídio indicaram que o tratamento destas células expostas à hipóxia/reoxigenação com WEB2086 levou a acúmulo em SG2M, morte celular e sensibilização à cisplatina. Além disso, imunofluorescência de cortes congelados de tumores induzidos com SKmel37 revelou que houve acúmulo de PAFR em áreas hipóxicas e em seu entorno. Em relação ao modelo de exposição à tratamentos antitumorais, por sua vez, curvas de concentração e tempo com Vemurafenib mostraram que SKmel37 e A375 foram resistentes à droga, ao passo que SKmel05 e UACC62 foram sensíveis. Além disso, WEB2086 potencializou o efeito de morte induzido por Vemurafenib nas linhagens sensíveis, mas não afetou as resistentes. Considerando os aspectos clínicos de resposta inicial com posterior desencadeamento de repopulação, seguimos com as linhagens sensíveis e verificamos por citometria que esta droga aumentou ROS em ambas as linhagens, mas só aumentou PAFR extracelular na SKmel05. O tratamento combinado potencializou a geração de ROS e levou a ativação de caspase3/7 apenas na SKmel05. Esta linhagem foi então submetida a ensaios clonogênicos cujos resultados mostraram que o tratamento com Vemurafenib reduziu o número de clones e que WEB2086 não potencializou este efeito. Assim, o conjunto de resultados apresentados evidencia que a sinalização de PAFR participa dos desfechos de sobrevivência frente à hipóxia/reoxigenação e/ou tratamentos antitumorais, podendo, de alguma forma, contribuir com a repopulação de melanomas / One of the recurrent challenges in the clinical practice of Oncology is the process of repopulation, in which therapy-resistant tumor cells can proliferate and reconstitute the tumor. However, the mechanisms involved in this phenomenon were still little explored. The understanding of these events is, therefore, needed to avoid therapeutic failure. Melanomas are good models for studying repopulation due to the low rates of progression-free survival and the high rates of resistance to therapies associated to this type of solid tumor. It is known that the exposure of tumor cells to microenvironmental stress conditions, such as hypoxia and hypoxia/reoxygenation, as well as the exposure to antitumor treatment itself, are selective pressures frequently found in solid tumors that favor therapy resistance and tumor repopulation. Previous studies have indicated that the signaling mediated by the Platelet Activation Factor (PAF), a bioactive lipid related to various physiological functions, and its receptor, PAFR, is associated with resistance of melanoma cells to cytotoxic treatments and with tumor growth. Therefore, the aim of this study was to investigate the involvement of PAFR signaling upon the adverse conditions described above in the phenomenon of melanoma repopulation. Mass spectrometry results indicated that hypoxia increased the generation of PAF in human melanoma cell lines SKmel05 and A375, but not in A375M, although this increase was not observed after reoxygenation. In addition, they showed that SKmel37 exhibited the highest PAF basal levels, whose generation increased substantially after different times of hypoxia and hypoxia/reoxygenation exposure. We also investigated the generation of other PAFR ligands, but none were found in the samples. The results of PAFR detection by Western Blot and/or flow cytometry revealed that protein levels were not modulated by these conditions in any of the cell lines and that, at baseline, SKmel37 and SKmel05 showed the highest levels. These lines were therefore submitted to proliferation assays, which showed that the treatment with the PAFR antagonist, WEB2086, under conditions of hypoxia and hypoxia/reoxygenation, led to proliferation reduction and death-associated morphology in SKmel37 cells only. Propidium iodide incorporation studies indicated that the treatment of these cells exposed to hypoxia/reoxygenation with WEB2086 led to accumulation in SG2M, cell death and cisplatin sensitization. In addition, immunofluorescence of frozen sections of SKmel37-induced tumors revealed that PAFR was found accumulated in hypoxic areas and its surroundings. Regarding the model of exposure to antitumor treatments, concentration and time curves with Vemurafenib showed that SKmel37 and A375 were resistant to the drug, whereas SKmel05 and UACC62 were sensitive. In addition, WEB2086 potentiated the effect of Vemurafenib-induced death on sensitive cell lines but did not affect the resistant ones. Considering the clinical aspects of initial response with subsequent repopulation triggering, we continued using the sensitive cell lines and we verified by cytometry that this drug increased ROS in both cell lines but only increased extracellular PAFR in SKmel05. The combined treatment potentiated the generation of ROS and led to the activation of caspase3/7 in SKmel05 only. This cell line was then submitted to clonogenic assays whose results showed that treatment with Vemurafenib reduced the number of clones and that WEB2086 did not potentiate this effect. Thus, the set of results presented highlights that PAFR signaling participates in the survival outcomes upon hypoxia/reoxygenation and/or antitumor treatments, and may, in some way, contribute to the repopulation of mel

Submitted by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2012-07-23T13:47:00Z No. of bitstreams: 2 Dissertacao_ExpressaoGenesC-myc.pdf: 1582070 bytes, checksum: ded639d2c11fa3ed553f5b611b74750c (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2012-07-23T13:59:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_ExpressaoGenesC-myc.pdf: 1582070 bytes, checksum: ded639d2c11fa3ed553f5b611b74750c (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-23T13:59:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_ExpressaoGenesC-myc.pdf: 1582070 bytes, checksum: ded639d2c11fa3ed553f5b611b74750c (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2010 / O câncer de mama é um dos tumores de maior incidência na mulher, e por isso, muitas pesquisas vêm sendo realizadas, desde a avaliação das características epidemiológicas, à dinâmica biocelular e o tratamento desta doença. Na avaliação de respostas ao tratamento, os fatores preditivos são marcadores que auxiliam na escolha da melhor droga a ser usada. Esta dissertação teve o objetivo de avaliar os genes de receptores de estrogênio e progesterona, HER-2 e C-MYC em tumores localmente avançados da mama, como fatores preditivos de resposta à quimioterapia neoadjuvante. Estudaram-se fragmentos da neoplasia maligna mamária de 50 pacientes com carcinoma ductal infiltrativo, com estadiamento clínico E-III e tratadas com quimioterapia neoadjuvante. Utilizaram-se as técnicas de imunohistoquímica e de hibridização in situ por fluorescência (FISH). A análise dos receptores hormonais não apresentou diferença estatisticamente significativa comparando as pacientes com resposta satisfatória à quimioterapia, das insatisfatórias; a análise do HER-2 apresentou significância apenas para as respostas satisfatórias, onde houve baixa amplificação deste gene. Em relação ao C-MYC observou-se uma diferença estatisticamente significativa comparando a alta amplificação deste gene a uma resposta insatisfatória à quimioterapia. O estudo concluiu que o gene C-MYC pode ser um importante marcador de predição nos tratamentos quimioterápicos neoadjuvantes usados em câncer mamário. / Breast cancer is a higher incidence of tumors in women, and therefore many studies have been performed since the assessment of the epidemiological characteristics, the dynamics biocelular and treatment of this disease. In evaluating responses to treatment, the risk factors are markers that help in choosing the best drug to use. This work aimed to evaluate the genes of estrogen and progesterone receptors, HER-2 and C-MYC in locally advanced breast tumors as predictors of response to neoadjuvant chemotherapy. We studied fragments of mammary malignancy in 50 patients with infiltrating ductal carcinoma, with clinical stage III and E-treated with neoadjuvant chemotherapy. We used the techniques of immunohistochemistry and fluorescence in situ hybridization (FISH). The analysis of hormone receptors showed no statistically significant difference comparing patients with satisfactory response to chemotherapy, the poor and the analysis of HER-2 showed significance only for satisfactory answers, where there was poor amplification of this gene. Regarding C-MYC was observed a statistically significant difference comparing the high amplification of this gene to a poor response to chemotherapy. The study concluded that the C-MYC gene may be an important marker for predicting the treatments used in neoadjuvant chemotherapy for breast cancer.

Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2016-10-04T13:48:43Z No. of bitstreams: 1 analiviasilvagalbiatti_dissert.pdf: 5434854 bytes, checksum: b9182b3ea6a5987585226aa5a73bb3f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T13:48:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 analiviasilvagalbiatti_dissert.pdf: 5434854 bytes, checksum: b9182b3ea6a5987585226aa5a73bb3f1 (MD5) Previous issue date: 2014-10-02 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - FAPESP / Introduction: Antifolate chemotherapies such as methotrexate (MTX) and 5-fluorouracil (5-FU) act inhibiting enzymes involved in folate pathway. These enzymes are important to DNA synthesis and cell growth. Chemotherapy dose may alter these levels of expression of these genes encoding enzymes involved in folate pathway and to influence in the response to treatment. Objectives: To evaluate relationship between mRNA and protein expression levels expression of MTHFR, DHFR, TYMS and SLC19A1 folate metabolic genes in laryngeal and oral cancer cell lines treated with MTX and 5-FU antifolate chemotherapies, separately. Materials and methods: HEP-2 (laryngeal cancer) and HN13 (oral cancer) cell lines were treated with 0.25, 25.0, and 75 μM of MTX and 10 ng/ml, 50 ng/ml, and 100 ng/ml of 5-FU, separately, for 24 hours/37°C. Flow Cytometry, Real-time PCR and Western blotting techniques were performed to analyzing the level of apoptosis, quantification of mRNA and quantification of proteins of genes, respectively. ANOVA and Bonferroni's post hoc tests were utilized for statistical analysis. P<0.05 was considered significant. Results: The higher concentration of MTX chemotherapeutic was associated with increased expression of MTHFR, DHFR, TYMS and SLC19A1 genes in laryngeal cancer cell line (p <0.05) and increased expression of DHFR and SLC19A1 genes in oral cancer cell line (p <0.05). The lower dose was associated with decreased expression of SLC19A1 gene laryngeal cancer (p <0.05). The higher concentration of 5-FU chemotherapy was associated with increased expression of DHFR gene in laryngeal cancer cell line (p <0.05) and increased expression of DHFR and TYMS genes in oral cancer cell line (p <0.05). The lower dose of 5-FU was associated with decreased expression of SLC19A1 gene. Conclusion: Exposure to low and high-dose of chemotherapeutics in oral cancer cell line can modulate the level of expression of genes involved in folate metabolism in laryngeal and oral cancer cell line. / Introdução: Quimioterápicos antifolato, tais como Methotrexato (MTX) e 5-Fluorouracil (5-FU) agem inibindo enzimas envolvidas na via do folato. Essas enzimas são essenciais para a síntese de DNA e divisão celular. A dose destes quimioterápicos podem alterar níveis de expressão de genes que codificam essas enzimas envolvidas na via do folato e influenciar na resposta ao tratamento. Objetivos: Avaliar a relação entre a expressão do RNAm e de proteínas dos genes MTHFR, DHFR, TYMS and SLC19A1 envolvidos no metabolismo do folato em linhagens celulares de câncer oral e câncer de laringe administradas com os quimioterápicos antifolato MTX e 5-FU em diferentes concentrações e em monoterapia. Materiais e métodos: Duas linhagens celulares HEP-2 (câncer da laringe) e HN13 (câncer de cavidade oral) foram tratadas com 0,25, 25,0 e 75 mM de MTX e 10 ng / ml, 50 ng / ml e 100 ng / ml de 5 -FU, separadamente, durante 24 horas a 37 °C. Técnicas de Citometria de Fluxo, PCR em tempo real e Western blotting foram realizadas para análise do nível de apoptose, quantificação do RNAm e quantificação das proteínas dos genes, respectivamente. Para análise estatística foi utilizado o teste ANOVA com correção de Bonferroni. P <0,05 foi considerado significante. Resultados: O aumento da concentração do quimioterápico MTX foi associado com expressão aumentada dos genes MTHFR, DHFR, TYMS e SLC19A1 na linhagem de câncer de laringe (p<0,05) e expressão aumentada dos genes DHFR e SLC19A1 na linhagem de câncer oral (p<0,05). A dose mais baixa de MTX foi associada com expressão diminuída do gene SLC19A1 em câncer de laringe (p<0,05). O aumento da concentração do quimioterápico 5-FU foi associado com expressão aumentada do gene DHFR na linhagem de câncer de laringe (p<0,05) e expressão aumentada dos genes TYMS e DHFR na linhagem de câncer oral (p<0,05). A dose mais baixa de 5-FU foi associada com expressão diminuída do gene SLC19A1. Conclusão: Exposição à alta ou baixa dose dos quimioterápicos MTX e 5-FU, em monoterapia, pode modular o nível de expressão de genes envolvidos no metabolismo do folato.

Resumo: Dezoito cães com diagnóstico citopatológico e/ou histopatológico de linfoma foram avaliados quanto às alterações clínicas e clinico-patológicas. Os animais foram submetidos ao protocolo quimioterápico de Madison-Wisconsin e avaliados clinicamente a cada sessão de quimioterapia quanto à sua resposta ao tratamento. Cinqüenta por cento dos cães apresentaram a forma multicêntrica da doença e 33% a forma cutânea. A manifestação clínica mais comum foi a linfadenomegalia superficial, acompanhada dos sinais sistêmicos de hiporexia, apatia e perda de peso. As principais alterações hematólogicas foram anemia normocítica normocrômica, trombocitopenia e leucocitose, associadas às síndromes paraneoplásicas. Elevações nas atividades séricas de lactato desidrogenase foram observadas em 58% dos cães e a hiperproteinemia ocorreu em 38% dos animais, sendo atribuída principalmente ao aumento de globulinas séricas. Vinte e sete por cento dos animais atingiram remissão completa da doença e 33% atingiram sobrevida de seis meses. Houve correlação positiva entre o valor do hematócrito e o tempo de sobrevida para os cães que morreram, entretanto, o mesmo não foi observado para o valor de lactato desidrogenase. Sugere-se a ocorrência da síndrome da lise tumoral aguda para sete animais dado o intervalo de tempo observado entre a quimioterapia e o óbito e o avançado estágio da doença. A ausência de resposta às tentativas de reindução da remissão, observada em quatro cães, pode estar relacionada com o fenômeno de resistência tumoral aos agentes quimioterápicos. / Abstract: Clinical and laboratorial evaluation were performed in eighteen dogs with cytopathological and/or histopathological lymphoma diagnosis. Animals underwent the Madison-Wisconsin chemotherapy protocol and were evaluated clinically at each session performed weekly. The multicentric and cutaneous forms of the disease were observed in 50% and 33% of the dogs, respectively. The most common clinical sign was superficial lymphadenomegaly, combined to systemic signs of hyporexia, apathy and weight loss. The main hematological changes were anemia, thrombocytopenia and leukocytosis, associated with paraneoplastic syndromes. Elevated serum activity of lactate dehydrogenase was observed in 58% of the dogs and hyperproteinemia in 38%, attributed to serum globulin increase. Complete remission was achieved in 27% of the animals and the six-month survival rate was 33%. There was a positive correlation between the hematocrit and survival time in dogs that died, however, there was no correlation between lactate dehydrogenase and survival time. The time interval between chemotherapy and death and the advanced stage of the disease in seven animals suggest the occurrence of acute tumor lysis syndrome. The absence of response to attempts of remission reinduction in four animals may be related to the drug tumoral resistance effect. / Orientador: Aureo Evangelista Santana / Coorientadora: Ana Paula Massae Nakage Canesin / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Sílvia Ricci Lucas / Banca: Márcia Ferreira da Rosa Sobreira / Banca: Carlos Roberto Daleck / Doutor

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:39:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeboraSLS_DISSERT.pdf: 842349 bytes, checksum: edfd0464865223ade8a750fe80589852 (MD5) Previous issue date: 2014-07-11 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The present study investigated the impact of the treatment modalities of Acute Lymphoblastic Leukemia on neurocognitive abilities of children and adolescents survivors, aged between 6 and 16 years of age, accompanied in pediatric oncology sectors of public health services in the cities of Campina Grande-PB and Natal-RN. The study included 52 children, 13 of these being children and adolescents diagnosed with leukemia and 39 healthy children matched in relation to the study group considering gender, age, school type and level of maternal education. Later the group of children with leukemia was subdivided into two subgroups depending on treatment modality which were submitted: Group 1A (only chemotherapy) and 1B (chemotherapy and radiotherapy). All participants were subjected to a battery of neuropsychological tests that investigated the following neurocognitive abilities: intellectual ability, memory system, attention, visuospatiality and visuoconstruction, processing speed and executive functions. Data were analyzed using descriptive and inferential measurements with the aid of the U test of Mann-Whitney and T test, considering the influence of the variables: sex, age at diagnosis, time since completion of treatment and level of schooling mothers, on the performance of children. Overall, it is concluded that the illness and the treatment of acute lymphoblastic leukemia significantly favors the emergence of cognitive deficits, particularly in terms of visuospatial skills, and executive skills visoconstrutivas. In turn, the treatment modality of radiotherapy is associated with the presence of more severe deficits, highlighting the significant impact on the speed of information processing. It is hoped that the results presented here will contribute to a better understanding of the nature and extent of neurocognitive effects arising ALL treatment / O presente estudo investigou o impacto das modalidades de tratamento da Leucemia Linf?ide Aguda sobre as habilidades neurocognitivas de crian?as e adolescentes sobreviventes, com faixa et?ria entre 6 e 16 anos de idade, acompanhados nos setores de oncologia pedi?trica de servi?os p?blicos de sa?de das cidades de Campina Grande- PB e Natal-RN. Participaram deste estudo 52 crian?as, sendo destas 13 crian?as e adolescentes diagnosticados com leucemia e 39 crian?as saud?veis pareadas em rela??o ao grupo de estudo considerando-se o sexo, idade, tipo de escola e n?vel de escolaridade materna. Posteriormente o grupo de crian?as com leucemia foi subdividido em dois subgrupos em fun??o da modalidade de tratamento as quais foram submetidos: Grupo 1A (exclusivamente tratamento quimioter?pico) e 1B (tratamento quimioter?pico e radioter?pico). Todos os participantes foram submetidos ? bateria de testes neuropsicol?gicos que investigou as seguintes habilidades neurocognitivas: capacidade intelectiva, sistema mnem?nico, aten??o, visoespacialidade e visoconstru??o, velocidade de processamento e fun??es executivas. Os dados foram analisados atrav?s de medidas descritivas e inferenciais com o aux?lio do Teste U de Mann-Whitney e do Teste t, considerando-se a influ?ncia das vari?veis: sexo, idade ao diagn?stico, tempo decorrido desde o t?rmino do tratamento e n?vel de escolariza??o das m?es, sobre o desempenho das crian?as. De forma geral, conclui-se que o adoecimento e o tratamento da leucemia linfoide aguda favorece significativamente o surgimento de d?ficits cognitivos, em especial em termos de habilidades visoespaciais, visoconstrutivas e habilidades executivas. Por sua vez, a modalidade de tratamento da radioterapia est? associada ? presen?a de d?ficits mais severos, com destaque para o impacto significativo sobre a velocidade no processamento da informa??o. Espera-se que os resultados ora apresentados venham a contribuir para uma melhor compreens?o acerca da natureza e da extens?o dos efeitos neurocognitivos advindos do tratamento da LLA

A caracterização fenotípica de Plasmodium falciparum permite conhecer o padrão de sensibilidade do parasito às drogas antimaláricas utilizadas em países endêmicos. No presente estudo avaliamos fenotipicamente isolados clínicos de P. falciparum provenientes do Continente Africano e do Caribe. A sensibilidade à dihidroartemisinina (DHA: 4 - 1.000 nM), artesunato (AS: 0,1 - 100 nM), lumefantrina (LMF: 3,1 - 200 nM) e mefloquina (MFQ: 0,2 - 1.000 nM) foi investigada por meio de quatro técnicas: (a) ensaio de sensibilidade ex-vivo e in vitro, (b) ensaio de dormência, (c) ensaio de citometria de fluxo e (d) ensaio de sobrevivência do trofozoíto jovem (Ring Stage Survival Assay - RSA). Nos experimentos ex-vivo e in vitro, os IC50 estabelecidos foram 0,4 - 66,6 nM para DHA; 3,8 - 48,8 nM para LMF; 0,3 - 25,9 nM para AS e 2 - 439 nM para MFQ. No ensaio de dormência, esquizontes foram observados na amostra de referência NF54 de P. falciparum e na amostra clínica S-01/15 após pressão com 62,5 nM, 250 nM e 1.000 nM de DHA. O período de recuperação variou de 4 a 40 dias. Para LMF, houve maturação para o estágio de esquizonte no isolado de referência no sétimo e décimo segundo dia após a exposição a 66,6 nM e 200 nM da droga, respectivamente. Esquizontes foram visualizados no isolado clínico FS-08/15 de P. falciparum depois da pressão com 100 nM de AS, com recuperação de 0 a 28 dias, portanto sem apresentar dormência. Na citometria de fluxo, trofozoítos jovens viáveis de P. falciparum marcados com Rodamina 123 e DAPI foram observados nas máximas concentrações de DHA (1.000 nM) e LMF (200 nM). Finalmente no RSA, a taxa de crescimento (TC) e porcentagem de supervivência (PS) do isolado de referência foi 2,92 e 4,19%, respectivamente, frente a 700 nM de DHA. O mesmo isolado pressionado com 3.500 nM de LMF apresentou 3,6 de TC e 2,25% de PS. A avaliação microscópica dos ensaios de sensibilidade ex-vivo e in vitro subestima a resposta de P. falciparum à terapia combinada com artemisinina (ACT). Nossos resultados sugerem que a dormência, principal mecanismo de tolerância às artemisininas (ART), não aconteceria em todos os isolados clínicos de P. falciparum. A citometria de fluxo avaliou com acurácia a viabilidade parasitária. No presente estudo, pela primeira vez foi reportada a dormência de P. falciparum à LMF / The phenotypic characterization of Plasmodium falciparum is useful for the knowledge of parasite sensitivity against antimalarial used in endemic countries. In this study we evaluated the sensitivity of clinical isolates of P. falciparum from the African continent and the Caribbean. The sensitivity to dihydroartemisinin (DHA: 4 - 1,000nM), artesunate (AS: 0.1 - 100 nM), lumefantrine (LMF: 3.1 to 200 nM), and mefloquine (MFQ: 0.2 to 1,000 nM) was investigated through four techniques: (a) ex vivo and in vitro microtests, (b) dormancy assay, (c) flow cytometry assay and (d) survival assay using young trophozoites (Ring Stage Survival Assay - RSA). In the ex vivo and in vitro experiments, the IC50 was calculated and was 0.4 - 66.6 nM for DHA; 3.8 - 48.8 nM for LMF; 0.3 - 25.9 nM for AS and 2 - 439 nM for MFQ. According to dormancy assays, schizonts were observed in the P. falciparum reference isolate NF54 and in the clinical isolate S-01/15 after pressure with 62.5 nM, 250 nM and 1,000 nM DHA. The recovery period ranged from 4 to 40 days. For LMF was observed the growth to the schizont stage in NF54, in the days 7 e 12 after exposure to 66.6 nM and 200 nM of the drug, respectively. Schizonts were seen in the P. falciparum clinical isolate FS-08/15 after pressure with 100 nM of AS, right after incubation period, with no dormancy of trophozoites. In flow cytometry assays, viable young trophozoites of P. falciparum labeled with DAPI and Rhodamine 123 were observed at the maximum concentrations of DHA (1,000 nM) and LMF (200 nM). Finally in RSA, the growth rate (GR) and percentage of survival (PS) of the reference isolate was 2.92 and 4.19%, respectively, after pressure with 700 nM of DHA. The same isolate pressed with 3,500 nM of LMF presented GR of 3.6% and PS of 2.25%. In conclusion, microscopic evaluation of ex vivo and in vitro sensitivity tests underestimates the P. falciparum response to artemisinin-based combination therapy (ACT). Our results suggest that the dormancy, main mechanism of tolerance to artemisinin (ART), is not presented in all clinical isolates of P. falciparum. Flow cytometry was able to confirm the parasite viability accurately. In this study, for the first time the dormancy of P. falciparum after pressure with LMF was reported

nÃo hà / A elaboraÃÃo de materiais educativos de orientaÃÃo a pacientes em tratamento quimioterÃpico visa melhorar a qualidade da assistÃncia prestada pois entende-se que quando bem orientados sobre como lidar com a terapÃutica a que sÃo submetidos aumenta-se a adesÃo; as informaÃÃes os tornam mais seguros e colabora-se para o sucesso do tratamento O objetivo do estudo foi construir e validar uma cartilha de orientaÃÃo sobre o tratamento quimioterÃpico Trata-se de uma pesquisa metodolÃgica que seguiu as seguintes etapas para construÃÃo e validaÃÃo de manuais para a educaÃÃo em saÃde: submissÃo do projeto ao comità de Ãtica levantamento bibliogrÃfico construÃÃo do manual educativo e validaÃÃo do material construÃdo Para a construÃÃo da cartilha realizou-se um levantamento bibliogrÃfico nas seguintes bases de dados: Scielo Lilacs Cochrane e Pubmed utilizando os descritores: âcÃncerâ âquimioterapiaâ âantineoplÃsicosâ âtoxicidade de drogasâ e âcuidados de enfermagemâ contemplando o perÃodo de 2003 a 2013 A sÃntese de 19 artigos selecionados norteou orientaÃÃes sobre os principais efeitos colaterais da quimioterapia (enjoos vÃmitos diarreia ferimentos na boca queda do cabelo baixa imunidade reaÃÃes cutÃneas e outros) e cuidados de enfermagem para estes pacientes ApÃs a escolha do conteÃdo procurou-se produzir um material educativo rico em cores a fim de descontrair e incentivar a leitura as imagens foram cuidadosamente selecionadas com a ajuda de um profissional de designer grÃfico buscando-se em todos os momentos adequar Ãs orientaÃÃes da literatura as caracterÃsticas do instrumento idealizado A construÃÃo da cartilha ocorreu no perÃodo de novembro de 2013 a janeiro de 2014 Em seguida a cartilha foi validada por nove juÃzes quanto aos aspectos tÃcnicos todos com vasta experiÃncia na Ãrea do cÃncer e quimioterapia A anÃlise dos dados foi realizada de forma descritiva A valoraÃÃo atribuÃda pelos juÃzes aos itens foi em sua grande maioria Totalmente adequado e Adequado As maiores consideraÃÃes feitas pelos juÃzes foram sobre substituiÃÃo de termos tÃcnicos por expressÃes que possam ser compreendidas pelo pÃblico alvo e correÃÃo de orientaÃÃes confusas As alteraÃÃes feitas tiveram o objetivo de evitar complexidade no conteÃdo da cartilha Acredita-se que a cartilha pode contribuir na melhoria das informaÃÃes a essa clientela amenizando os efeitos do desconhecimento da doenÃa e seu tratamento fomentando o diÃlogo o esclarecimento de dÃvidas e facilitando a prÃtica educativa do enfermeiro / The development of educational guidance materials to patients undergoing chemotherapy aims to improve the quality of care since it is understood that when properly instructed on how to deal with the treatment they undergo increases the adhesion the information make the safer and contributes to the success of the treatment The aim of the study was to construct and validate a primer guidance on chemotherapy This is a methodological research which followed the following steps to develop and validate manuals for health education: project submission to the ethics committee bibliographic and production of an educational manual validation of material built For the construction of the booklet we performed a bibliographic survey of the following databases: SciELO LILACS Cochrane and PubMed using the keywords " cancer " " chemotherapy " " antineoplastic " " drug toxicity " and " care nursing " covering the period 2003-2013 synthesis of 19 articles selected guided guidance on the main side effects of chemotherapy ( nausea vomiting diarrhea mouth ulcers hair loss low immunity skin reactions and other ) and nursing care for these patients After choosing the content we sought to produce a rich educational material color to unwind and encourage reading the images have been carefully selected with the help of a professional graphic designer seeking at all times conform to the guidelines literature idealized characteristics of the instrument The construction of the booklet occurred from November 2013 to January 2014 Then the primer was validated by nine justices on the technical aspects all with extensive experience in the area of cancer and chemotherapy Data analysis was performed descriptively The rating assigned by judges to the items was mostly Totally appropriate and suitable The major considerations were made by the judges on Replacement technical expressions by terms that can be understood by the target audience and correction confusing guidelines The changes were intended to avoid complexity in the content of the booklet It is believed that the primer can contribute to the improvement of information to this population mitigating the effects of ignorance of the disease and its treatment fostering dialogue answering questions and facilitating educational practice nurses

O melanoma é o mais agressivo tumor da pele, cuja resistência aos tratamentos quimioterápicos tem promovido a crescente utilização de imunoquimioterapia, como é o caso da utilização de agonistas dos receptores Toll-Like (TLRs). Nesse contexto, os compostos abreviados por P-MAPA e seu sintético estrutural MRB-CFI-1 com reconhecidas propriedades antitumorais e imunológicas, são fortes candidatos na terapia e prevenção desse tipo de câncer. Esse estudo visa determinar o potencial anticâncer do P-MAPA e de MRB-CFI-1 contra o melanoma murino em consequência ao padrão de resposta microambiental semelhante ao de morte imunogênica, em regimes de tratamento terapêutico ou vacinal, na vigência de quimioterapia com cisplatina e/ou em associação com antígenos de células tumorais totais. Após avaliação In vivo do crescimento de tumores B16F10 implantados em modelos murinos selvagem e nocaute para o gene Myd88, na vigência ou não do tratamento com cisplatina e/ou P-MAPA, nossos resultados mostraram que o P-MAPA apresentou atividade pró-tumoral e antagonizou a ação da cisplatina em inibir o crescimento dos tumores, de forma dependente de Myd88. Além disso, através de análises qualitativa e quantitativa pelo software ImageJ em fotomicrografias de secções tumorais coradas histologicamente, observamos que o P-MAPA promoveu mudanças microambientais nos tumores que podem impactar negativamente em seu desempenho. Como monoterapia em esquema de vacinação com lisado tumoral total em combinação com quimioterapia, o P-MAPA em dose baixa falhou em suprimir o crescimento de tumores B16F10, mas o seu sintético MRB-CFI-1 foi capaz de prevenir o crescimento desse tipo de melanoma num regime de vacinação profilática. Apesar do sucesso terapêutico desse imunomodulador em diversos modelos de câncer e de doenças infecciosas, o P-MAPA não foi eficaz em produz respostas microambientais contra o melanoma murino, dados esses que limitam a aplicabilidade clínica do composto. De outro modo, o composto fosfato inorgânico MRB-CFI-1 foi protetivo em retardar o aparecimento desse tipo de doença. Assim, o presente estudo foi importante por ampliar o entendimento funcional do P-MAPA numa abordagem imunoquimioterápica em modelos biológicos de tumores de melanoma, e representa uma importante mudança na utilização de constituintes individuais similares ao P-MAPA que sejam mais eficazes, de fácil obtenção, e de produção controlada e garantida / Melanoma is the most aggressive skin cancer, whose resistance to chemotherapeutic treatments has promoted the increasing use of immunochemotherapy, as is the case for the use of Toll-Like receptor agonists (TLRs). In this context, the compounds abbreviated by P-MAPA and its structural synthetic MRB-CFI-1 with recognized antitumor and immunological properties are strong candidates in the therapy and prevention of this type of cancer. This study aims to determine the anti-cancer potential of P-MAPA and MRB-CFI-1 against murine melanoma as a consequence of the microenvironmental response pattern similar to that of immunogenic death in therapeutic or vaccine treatment regimens when using chemotherapy with cisplatin alone or in combination with whole tumor cell antigens. After In vivo evaluation of the growth of B16F10 tumors implanted in wild-type and Myd88 gene knockout mice, under treatment or not with cisplatin and / or P-MAPA, our results showed that P-MAPA showed pro-tumor activity and antagonized the action of cisplatin in inhibiting the growth of tumors in a Myd88-dependent manner. In addition, using qualitative and quantitative analysis by ImageJ software in histological images of tumor sections, we observed that P-MAPA promoted microenvironmental changes in tumors that may negatively impact its performance. As monotherapy in vaccination schedule with total tumor lysate in combination with chemotherapy, low dose P-MAPA failed to suppress the growth of B16F10 tumors, but its synthetic MRB-CFI-1 was able to prevent the growth of this type of melanoma in prophylactic vaccination regimen. Despite the therapeutic success of this immunomodulator in various cancer models and infectious diseases, P-MAPA has not been effective in producing microenvironmental responses against murine melanoma, data that limit the clinical applicability of the compound. Otherwise, the inorganic phosphate compound MRB-CFI-1 was protective in delaying the onset of this type of disease. Thus, the present study was important because it broadened the functional understanding of P-MAPA in an immuno-chemotherapeutic approach in biological models of melanoma tumors and represents an important change in the use of individual constituents similar to P-MAPA that are more efficient, easily obtainable, and controlled and guaranteed production