Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000412451-Texto+Completo-0.pdf: 927067 bytes, checksum: ec73648f4eb167d149ba89190dcd21c2 (MD5) Previous issue date: 2009 / Background: Results from epidemiological studies are controversial regarding the effect of helminth exposition on the development of asthma. It is not currently clear whether different parasites have distinct effects on the immune response in asthma. Aims: To analyze the effect of different parasite extracts on pulmonary allergic response in a murine model. Methods: Extracts of three different helminths (Angiostrongylus costaricensis, Angiostrongylus cantonensis and Ascaris lumbricoides) were injected intraperitoneally (i. p. ) in female adult BALB/c mice. Ovalbumin (OVA) sensitization and pulmonary challenge was performed 7 days after helminth extract. Mice with no extract parasite exposition was used as the control group. Total and differential cell counts, IL-5, INF-U and IL-10 levels were measured in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid. Results: Airway cellular influx (cell counts, eosinophils and lymphocytes) induced by OVA was significantly suppressed by extracts of A. cantonensis and A. lumbricoides, when compared to the control group (p=0. 001, p=0. 001 and p<0. 001, respectively). Extracts of A. costaricensis and A. lumbricoides also led to a marked reduction of IL-5 in BAL (p<0. 001). INF- U levels in BAL samples were not different from the studied groups. Exposition to A. lumbricoides led to increased production of IL-10 in the lungs (p<0. 001). Conclusions: Distinct helminths present different immune responses in mice with OVA pulmonary sensitization. Our findings suggest that controversies on epidemiological data may be explained by different immune responses triggered by distinct parasites in human populations. / Introdução: Resultados de estudos epidemiológicos são controversos em relação ao desenvolvimento de asma após a exposição por helmintos. Ainda não está claro se diferentes parasitas têm efeitos distintos na resposta imune em asma. Objetivo: Analisar o efeito de diferentes extratos parasitários na resposta pulmonar alérgica em um modelo animal murino. Métodos: Extrato de três diferentes parasitas (Angiostrongylus costaricensis, Angiostrongylus cantonensis e Ascaris lumbricoides) foram injetados intraperitonealmente em camundongos fêmeas adultas BALB/c. A sensibilização com ovalbumina intraperitoneal e pulmonar foi realizada sete dias após a sensibilização com extrato parasitário. BALB/c sem extrato parasitário fizeram parte do grupo controle. No lavado broncoalveolar (LBA) foram analisados: número total de células, células diferenciais, IL-5, IL-10 e INF-U. Resultados: O número total de células, eosinófilos e linfócitos foram suprimidos pelos extratos dos parasitas Angiostrongylus cantonensis e Ascaris lumbricoides quando comparado ao grupo controle (p=0. 001, p=0. 001 e p<0. 001, respectivamente) no LBA. Extratos de A. lumbricoides e Angiostrongylus costaricensis também induziram uma marcada redução de IL-5 no lavado broncoalveolar (p<0. 001). Níveis de INF- U no lavado broncoalveolar não foram diferentes nos grupos estudados. Exposição à A. lumbricoides levou a um aumento dos níveis de IL-10 no pulmão de camundongos (p<0. 001). Conclusão: Diferentes helmintos apresentam respostas imunes distintas em camundongos sensibilizados com OVA intrapulmonar. Nossos achados sugerem que controvérsias publicadas em estudos epidemiológicos podem ser explicadas pelas diferenças nas respostas imunes induzidas pelos diferentes parasitas na população humana.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000442103-Texto+Completo-0.pdf: 1045106 bytes, checksum: c41cb173539d408ecd0b051fca78598e (MD5) Previous issue date: 2012 / Introduction: Heat shock proteins like mycobacterial HSP70 has a protective and anti-inflamatory activity in several animals models diseases, like arthritis and skin allograft. This protein can modulates both the innate and adaptative immune system. Objective: The aim of this study was evaluate the effect of HSP70 from M. tuberculosis on development of pulmonary allergic reponse in a mice model. Methods: Female BALBc mice with ovalbumin induced pulmonary disease received intraperitoneal inject or intranasal instillation of mycobacterium HSP70. Treg cell in lung tissue, inflammatory cells profiles and cytokines levels in broncalveolar lavage fluid was measured. Results: HSP70 show an inhibitory effect on pulmonary allergic response on mice. Eosinophils, IL-5 and IFN-ϒ levels was reduced in broncoalveolar lavage fluid in animals that received intranasal instillation of mycobacterial HSP70.Conclusion: Mycobacterial HSP70 can be efficiently used to treat airway allergic disorders. / Introdução: Algumas proteínas de choque térmico, como a HSP 70 micobacteriana, apresentam propriedades anti-inflamatórias e protetoras em modelos experimentais de doenças como artrite e aloenxertos cutâneos. Essa proteína pode modular tanto o sistema imune inato quanto o adaptativo. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da proteína HSP70 de M. tuberculosis no desenvolvimento da resposta pulmonar alérgica em um modelo experimental de asma alérgica em camundongos.Métodos: camundongos BALB/c fêmeas submetidos a um protocolo de indução de asma por ovalbumina foram expostos a proteína HSP70 de M. tuberculosis através de diferentes vias de administração (intraperitoneal e intranasal). Foram analisados parâmetros inflamatórios (leucócitos e citocinas IFN, IL-4, IL-5 e IL-10) no fluido do lavado broncoalveolar. Resultados: A administração de MtHSP70 intranasal reduziu significativamente o infiltrado inflamatório e os níveis de IL-5 e IFN-ϒ no lavado broncoalveolar. Conclusão: A proteína HSP70 micobacteriana pode apresentar potencial aplicação no tratamento da asma alérgica.

Made available in DSpace on 2014-04-09T02:01:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000456587-Texto+Completo-0.pdf: 4329153 bytes, checksum: 3b1fcb08380fd20462af2db313e93f52 (MD5) Previous issue date: 2014 / Oral squamous cell carcinoma is among the six most common cancers in the world. For half of the diagnosed cases, oral cancer is a fatal disease, and those who survive often are disfigured and life quality becomes highly compromised. In this sense, one of the main allies for possible pharmacological therapy testing is the animal model, in this case, the hamster buccal pouch carcinogenesis model. This experimental model has been used with great success over the last 60 years. However the different protocols found in the literature sometimes have incomplete information. Thus, in the first part of this work we conducted a review of the animal model over the last 60 years, analyzing important technical parameters, such as: 1 - The hamster strains used;2 - The gender of animals; 3 - The age of the animals at the beginning of the induction protocol; 4 - The buccal pouch that was used for induction; 5 – The different types of carcinogens used; 6 – The concentrations of these carcinogens; 7 – The solvents used to dilute the carcinogen; 8 - The number of applications per week; 9 - The different applying systems; and 10 - The length of the exposure protocol used to induce carcinogenic lesions or cancer. After this study, we used a modified carcinogenic model to induce precancerous lesions in the hamster buccal pouch mucosa. In this experimental model we tested a novel pharmacological alternative used to treat different types of cancers. Sunitinib is a multiple tyrosine kinase inhibitor that acts on endothelial cells and pericytes inhibiting the process of angiogenesis which is essential for tumor growth. The second study evaluated qualitatively and quantitatively the morphological effects that sunitinib had in precancerous lesions induced by DMBA in the hamster buccal pouch mucosa. Moreover we evaluate different clinical parameters of these animals. Our main results with respect to the second study were: 1 - Sunitinib was not able to reverse the decrease in body weight gain induced by DMBA; - 2 Sunitinib was able to inhibit tumor growth and ulceration induced by DMBA; 3 - Sunitinib was able to reverse the increase in epithelial rete ridges induced by DMBA. Thus, sunitinib can be considered an effective agent for chemoprevention, being an interesting alternative for further studies in a more advanced stage of oral cancer in the hamster buccal pouch or similar model. / O câncer bucal de células escamosas está entre os seis cânceres mais comuns no mundo. Para metade dos casos diagnosticados, o câncer bucal é uma doença fatal, e para aqueles que sobrevivem geralmente trata-se de uma patologia mutiladora, na qual a qualidade de vida torna-se bastante comprometida. Neste sentido, um dos principais aliados para o teste de possíveis terapias farmacológicas para o tratamento desta patologia é o uso de modelos animais, destacando-se o modelo de indução de câncer bucal na mucosa da bolsa jugal de hamster sírio dourado. Este modelo experimental tem sido utilizado com bastante sucesso ao longo dos últimos 60 anos. Contudo os diferentes protocolos encontrados na literatura científica apresentam informações muitas vezes incompletas. Deste modo, na primeira parte deste trabalho realizamos uma revisão deste modelo animal ao longo dos últimos 60 anos, analisando importantes parâmetros técnicos deste modelo, como por exemplo: 1 - As linhagens de hamsters utilizadas; 2 - O gênero dos animais utilizados; 3 - A idade dos animais no início do tratamento com agente carcinogênico; 4 - A hemiface do animal que é predominantemente utilizada para a indução de câncer bucal;5 - Os diferentes tipos de agentes carcinogênicos utilizados neste modelo experimental; 6 - As diferentes concentrações destes agentes carcinogênicos; 7 - Os solventes utilizados para diluição dos agentes carcinogênicos; 8 - O número de aplicações por semana; 9 - Os diferentes sistemas de aplicação do agente carcinogênico; e 10 - A determinação da extensão do período de exposição ao carcinógeno, que é responsável pela produção de lesões cancerizáveis ou indução tumoral. Após esta revisão de metodologia sistemática, utilizamos um modelo experimental modificado para a indução de lesões cancerizáveis. Neste modelo experimental testamos uma nova alternativa farmacológica utilizada para o tratamento de diferentes tipos de cânceres, o sunitinib, um inibidor múltiplo de tirosina quinase, que age nas células endoteliais e nos pericitos inibindo o processo de angiogênese que é essencial para o crescimento tumoral. Neste segundo estudo avaliamos qualitativamente e quantitativamente os efeitos morfológicos do sunitinib nas lesões cancerizáveis induzidas por DMBA na mucosa da bolsa jugal de hamster sírio dourado. Ademais avaliamos diferentes parâmetros clínicos destes animais. Nossos principais achados relativos ao segundo estudo foram: 1 - O sunitinib não foi capaz de reverter o decréscimo de ganho de peso corpóreo, induzido por DMBA; 2 - O sunitinib foi capaz de inibir o crescimento tumoral e a presença de ulcerações induzidas pelo DMBA; 3 - O sunitinib foi capaz de reverter o aumento de cristas epiteliais induzido por DMBA. Deste modo, o sunitinib pode ser considerado um agente efetivo para a quimioprevenção destes tumores, constituindo uma alternativa interessante para novos estudos, em estágios mais avançados desta patologia, utilizando o modelo de câncer bucal em bolsa jugal de hamster ou modelos similares.

Made available in DSpace on 2014-12-24T01:01:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000464259-Texto+Completo-0.pdf: 3964531 bytes, checksum: 04739dfcb6adbc45be2c0bbc0dde167b (MD5) Previous issue date: 2014 / Introduction : Injuries in peripheral nerves are common in clinical practice being responsible for serious problems and often permanent as loss of motor, sensitive functions, acute and chronic pain. Although surgical, physiotherapy and diagnostic techniques have evolved in recent decades, the clinical outcomes of nerve recovery still unsatisfactory, which encourages many researchers to seek drugs and devices that may help regeneration (NOBLE et al, 1998; OLIVEIRA et al, 2004). Various trophic factors, also known as growth factors (GF) are used and tested in vitro and in vivo in an attempt to assist the regeneration of peripheral nerves. These proteins act directly on the proliferation and differentiation of various cell types, being able to promote tissue repair and functional recovery (BOYD AND GORDON, 2003). Among them, we highlight the FK506 (Tacrolimus), a ligand for immunophilins with strong immunosuppressive effect that has potential neurotrophic and neuroprotective actions. Studies have shown that FK506 increases the rate of axonal regeneration and also the level of necessary reinnervation after peripheral nerve injury, besides enhancing recovery from nerve damage. Objective : Evaluating in vivo the availability and effect of FK 506 on the repair of injury of rat sciatic nerve. Material and Methods : Thirty-six male adult Wistar rats were randomized into three groups (I - control, II - Systemic FK506 III - FK506 site;). To evaluate the effect of different treatments, the sciatic nerve of animals was transected, creating a defect of 10 mm and then tubulized with the silicone chamber. In the control group, no additional treatment was performed. In systemic group, FK506 (dose 0. 1 mg/kg/day) was administered systemically via osmotic minipump ALZET while in the local group the administration also occurred through the ALZET osmotic minipump, but adapted to release into the silicone chamber the same dose. The performed treatment lasted 90 days. Results : Data from the present study suggest that the immunosuppressive drug FK506 has a positive effect on the nervous functional improvement and the use of osmotic minipumps is effective in continuous dispensing of the drug. The most important finding of this research is that the degree of functional recovery, measured by the rate of sciatic function after injury with loss of substance and repair through tubing, it is better when FK506 is administered locally whether compared to systemic administration in animal models. No other studies have used local application of the drug with constant release rate for comparison were found. / Introdução : Lesões em nervos periféricos são frequentes na prática clínica sendo responsáveis por problemas graves e muitas vezes permanentes como perda de funções motoras, sensitivas, dor aguda e crônica. Embora as técnicas cirúrgicas, fisioterápicas e de diagnóstico tenham evoluído nas últimas décadas, os desfechos clínicos de recuperação nervosa continuam insatisfatórios, o que estimula diversos pesquisadores a buscarem drogas e dispositivos que possam auxiliar na regeneração (NOBLE et al, 1998; OLIVEIRA et al, 2004). Diversos fatores tróficos, também conhecidos como fatores de crescimento (FC), são utilizados e testados in vitro e in vivo como uma tentativa de auxiliar a regeneração de nervos periféricos. Essas proteínas atuam diretamente na proliferação e diferenciação de diversos tipos celulares, sendo capazes de promover reparo tecidual e recuperação funcional (BOYD E GORDON, 2003). Dentre eles, destaca-se o FK506 (Tacrolimus), um ligante de imunofilinas com forte efeito imunossupressor que apresenta potenciais ações neurotróficas e neuroprotetoras. Estudos têm mostrado que o FK506 aumenta a taxa de regeneração axonal e também o nível de reinervação necessária após lesão do nervo periférico, além de melhorar a recuperação após lesões no nervo. Objetivo : Avaliar in vivo a viabilidade e efeito do FK 506 sobre o reparo de lesão de nervo ciático de ratosMaterial e Métodos : Trinta e seis ratos Wistar, machos, adultos foram randomicamente distribuídos em três grupos (I – controle; II – FK506 sistêmico; III – FK506 local;). Para avaliar o efeito dos diferentes tratamentos, o nervo ciático dos animais foi transeccionado criando um defeito de 10mm e, em seguida, tubulizado com câmara de silicone. No grupo controle, nenhum tratamento adicional foi realizado. No grupo sistêmico, o FK506 (dose 0,1mg/kg/dia) foi administrado sistemicamente via minibomba osmótica ALZET enquanto que no grupo local a administração também ocorreu através da minibomba osmótica ALZET, mas adaptada para liberação dentro da câmara de silicone na mesma dose. O tratamento empregado teve duração de 90 dias. Resultados : Os dados do presente estudo sugerem que a droga imunossupressora FK506 possui efeito positivo na melhora funcional nervosa e o uso de minibombas osmóticas é eficaz na dispensação contínua da droga. O dado mais importante dessa pesquisa é que o grau de recuperação funcional, medido através do índice de função ciática após lesão com perda de substância e reparo através de tubulização, é melhor quando o FK506 é administrado localmente se comparado à administração sistêmica em modelos animais. Não foram encontrados outros trabalhos que tenham usado aplicação local da droga com taxa de liberação constante para efeitos de comparação.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000425869-0.pdf: 4399384 bytes, checksum: 3e433ccca5e1acd4bbb191c1f4293ca1 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This study aimed to compare the effects of different fluencies of indiumgallium- aluminum phosphide laser (λ= 685 nm) on skin wound healing in rats. Thirty six male rats were used, divided in three groups of 12 animals each. Two standardized skin wounds were created on the back of each animal, one treated with laser and the other serving as control. In group 1, the irradiations were performed with a dosimetry equivalent to average doses used in most recent polls, determined as 8 J/cm2. The second group was irradiated with twice the dose of energy (16 J/cm2) and group 3 with half the dose (4 J/cm2). The irradiations were performed immediately after surgery, in 48 hours, on 4 and 7 days, and the animals were killed at 4, 7 and 9 days. Therefore, each animal received, depending on his death, two, three or four irradiations. The healing tissues were excised and analyzed with optical microscopy. Histomorphometric analysis was performed, considering the measures between the epithelial edges, and histomorphological analysis. Using the paired ttest, there was a significant difference (p = 0. 004) between values referring to the average of the measures between the test and control samples. When analyzing the energy doses used (4, 8 and 16 J/cm2) and time of observation of the animals (4, 7 and 9 days), it appears that there was no difference in the fluency factor, but it occurred on the time factor, with changes most evident in the early stages (4 days) of the healing process. Based on histomorphologic and histomorphometric analysis, this study demonstrated that the Low Level Laser Therapy (LLLT) increases the rate of wound healing in rats when irradiated with indium-gallium-aluminum phosphide laser (λ = 685 nm). There are no differences between fluencies used (4, 8 and 16 J/cm2), but the time factor seems to be relevant, with changes most evident in the early stages of the healing. / O presente estudo teve como propósito comparar, em diferentes tempos, diferentes fluências do laser vermelho de fosfeto de índio-gálio-alumínio (λ=685 nm) sobre o processo de cicatrização de feridas cutâneas padronizadas em dorso de ratos. Foram realizadas duas feridas cirúrgicas em 36 ratos, sendo uma tratada com laser e a outra servindo como controle. Os ratos foram divididos em três grupos. No grupo um, as irradiações foram realizadas com dosimetria equivalente a média das doses mais utilizadas nas pesquisas recentes, determinada como 8 J/cm2. O grupo dois foi irradiado com o dobro da dose de energia, ou seja, 16 J/cm2, e o grupo três com metade da dose, ou 4 J/cm2. As irradiações foram realizadas imediatamente após o término da cirurgia, em 48 horas, em quatro e sete dias, e os animais foram mortos aos quatro, sete e nove dias. Portanto, cada animal recebeu, na dependência de sua morte, duas, três ou quatro irradiações. As lesões foram excisadas e analisadas em microscopia óptica. Foram realizadas análises histomorfométricas, considerando as medidas entre as bordas epiteliais, e análises histomorfológicas. Verificou-se, utilizando-se o teste t pareado, que houve diferença significativa (p = 0,004) entre os valores referentes às médias das medidas entre as amostras teste e controle. Ao se analisar as doses de energia utilizadas (4, 8 e 16 J/cm2) e o tempo de observação dos animais (quatro, sete e nove dias), verifica-se que não houve diferença em relação ao fator fluência, mas ocorreu quanto ao fator tempo, sendo as alterações mais evidentes nos momentos iniciais (quatro dias) do processo de reparo.A partir das análises histomorfométrica e histomorfológica, este estudo demonstrou que a terapia a laser em baixa intensidade (LLLT) aumenta a velocidade de cicatrização em ferimentos produzidos em dorso de ratos quando irradiados com o laser de fosfeto de índiogálio- aluminio (λ = 685 nm). Não há diferenças entre as doses de energia utilizadas (4, 8 e 16 J/cm2), mas há em relação ao fator tempo, sendo as alterações evidenciadas nos momentos iniciais da cicatrização.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000409051-0.pdf: 6131224 bytes, checksum: 71cc1a1f53851465a70df30e55117e72 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The aim of this work was to investigate if nitrogen bisphosphonate therapy is a sufficient condition to determine the occurrence of maxillary osteonecrosis in individuals undergoing tooth extraction, as well to assess the macro- and microscopic features at the site of tooth extraction in this population. Thirty-one female rats (Rattus norvegicus, Wistar) were allocated into 3 groups: (1)11 rats treated with oral alendronate; (2)10 rats treated with parenteral zoledronate, and (3)10 rats without bisphosphonate treatment. At the 45th day of drug administration, all groups were submitted to tooth extractions and, as completed 145-day period, the animals were euthanized. After a macroscopic evaluation for the presence of oral mucosal lesion, histological slices of the site of tooth extraction were processed for hematoxilin/eosin staining and immunohistochemistry with anti-VEGF monoclonal antibody (VG1). Osteonecrosis, inflammatory cell infiltrate, microorganism colonies, epithelial tissue, connective tissue, root fragment and vital bone were determined with HE staining. The tooth extraction site was also analyzed for VEGF immunohistochemical expression of vital bone tissue. Variables were quantified by the manual point counting method using the software Image Pro Plus 6. 0. Macroscopic analysis showed that the zoledronate group was associated with the occurrence of oral mucosal lesion (chi-square, residual adjusted analysis, P<0. 001).The zoledronate group also showed significant higher incidences of osteonecrosis, inflammatory cell infiltrate and microorganism colonies in comparison to the other groups. There was no significant difference for incidence of epithelial tissue, connective tissue, root fragment, vital bone (Kruskal-Wallis, multiple comparison test, a=0. 05) and positive staining for VEGF (ANOVA, P=0. 860) among the groups analyzed. According to the results, (1) parenteral therapy with nitrogen bisphosphonate is associated with maxillary osteonecrosis and represents sufficient condition for the occurrence of osteonecrosis in individuals submitted to tooth extraction; (2) oral therapy with nitrogen bisphosphonate is not a sufficient condition for the occurrence of maxillary osteonecrosis in individuals submitted to tooth extraction; (3) neither oral or parenteral nitrogen bisphosphonate therapy is associated with lower immunohistochemical VEGF expression of vital bone tissue at the tooth extraction site. / A presente pesquisa teve por objetivo investigar se a terapia com bisfosfonato nitrogenado é fator suficiente à ocorrência de osteonecrose maxilar em indivíduos submetidos a exodontias, bem como avaliar os eventos macro e microscópicos que caracterizam a área submetida a exodontias nesses indivíduos. Trinta e um ratos fêmeas (Rattus norvegicus, Wistar) foram distribuídos em 3 grupos submetidos a exodontias: (1)11 animais tratados com alendronato por via oral; (2)10 animais tratados com zoledronato por via parenteral e (3)10 animais que não receberam bisfosfonato. Aos 45 dias do início da terapia, os grupos foram submetidos a exodontias e, concluído o prazo de 145 dias, os animais foram mortos. Após avaliação macroscópica, que investigou a presença de solução de continuidade da mucosa, cortes histológicos da área das exodontias foram corados por hematoxilina e eosina (HE) e submetidos a processamento imunoistoquímico empregando-se o anticorpo monoclonal anti- VEGF (VG1). As lâminas coradas por HE foram submetidas à avaliação das variáveis osteonecrose, infiltrado celular inflamatório, colônias microbianas, tecido epitelial, tecido conjuntivo fibroso, resto radicular e osso vital. A expressão imunoistoquímica do VEGF em campo de tecido ósseo vital também foi avaliada. As variáveis foram quantificadas aplicandose o método da contagem manual de pontos por meio do software Image Pro Plus 6. 0. Na avaliação macroscópica, verificou-se que o grupo zoledronato está associado à presença de solução de continuidade da mucosa (qui-quadrado, análise de resíduos ajustados, P<0,001). Nas variáveis osteonecrose, infiltrado celular inflamatório e colônias microbianas, o grupo zoledronato exibiu percentuais significativamente maiores do que os demais grupos. Nas variáveis tecido epitelial, tecido conjuntivo fibroso, resto radicular, osso vital (Kruskal- Wallis, teste de comparações múltiplas, a=0,05) e marcação positiva para VEGF (ANOVA, P=0,860) não houve diferença significativa entre os grupos avaliados. Os resultados permitem concluir que (1) a administração de bisfosfonato nitrogenado por via parenteral está associada à osteonecrose dos maxilares e é condição suficiente para que esta ocorra em indivíduos submetidos a exodontias; (2) o bisfosfonato nitrogenado administrado por via oral não constitui condição suficiente para a ocorrência de osteonecrose maxilar em indivíduos submetidos a exodontias; (3) a administração de bisfosfonato nitrogenado, por via oral ou parenteral, não está associada à diminuição da expressão imunoistoquímica do VEGF em tecido ósseo vital na área das exodontias.

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2012-03-20T18:33:27Z No. of bitstreams: 1 435690.pdf: 1603547 bytes, checksum: 8c5ac8fddab858e42d15c091581d65d0 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-20T18:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 435690.pdf: 1603547 bytes, checksum: 8c5ac8fddab858e42d15c091581d65d0 (MD5) / A presente pesquisa teve por objetivo verificar a influência da corticoterapia e do diabetes mellitus no desenvolvimento da osteonecrose maxilar associada ao uso de alendronato de sódio em animais de experimentação. A amostra compreendeu 44 ratos fêmeos, da linhagem Wistar, distribuídos aleatoriamente em 4 grupos: (1) 11 ratos tratados com alendronato de sódio (grupo alendronato); (2) 11 ratos tratados com alendronato de sódio e corticoterapia sistêmica (grupo corticosteroide); (3) 11 ratos tratados com alendronato de sódio e submetidos à indução de diabetes mellitus (grupo diabetes); (4) 11 ratos aos quais foi administrada solução salina (grupo-controle). Todos os animais foram submetidos a exodontias dos molares superiores do lado direito uma vez decorridos 90 dias do início do experimento. A eutanásia foi realizada 21 dias após os procedimentos cirúrgicos. Os cortes histológicos foram corados pela técnica de hematoxilina e eosina (H&E) e, subsequentemente, submetidos a processamento imunoistoquímico empregando-se os anticorpos anti-BMP-4 e anti-MMP-13. A avaliação histológica consistiu na análise quantitativa das variáveis: epitélio, tecido conjuntivo, infiltrado inflamatório, restos radiculares, colônias microbianas, osso vital e osteonecrose pela técnica da contagem manual de pontos (Image Pro Plus 4.5.1). As variáveis imunoistoquímicas foram avaliadas por meio da técnica da segmentação semiautomatizada (Image Pro Plus 4.5.1). Os resultados foram analisados pelos testes qui-quadrado e Kruskal-Wallis complementado pelo teste de comparações múltiplas, considerando-se o nível de significância de 5%.Na análise por H&E, a proporção de infiltrado inflamatório, colônias microbianas e osteonecrose foi significativamente maior no grupo diabetes (p<0.05), não havendo diferença significativa para as demais variáveis entre os grupos. A expressão imunoistoquímica da BMP-4 foi significativamente maior na área de tecido conjuntivo no grupo corticosteroide, quando esse foi comparado ao alendronato (p<0.05), não havendo diferença significativa entre os demais grupos. A expressão imunoistoquímica da MMP-13 não diferiu entre os grupos avaliados. De acordo com os resultados, o diabetes mellitus pode ser considerado um fator de risco ao desenvolvimento da osteonecrose dos maxilares associada ao uso de alendronato de sódio. Entretanto, para a corticoterapia essa associação não foi observada. / This study aimed to investigate the influence of corticotherapy and diabetes mellitus in the development of the osteonecrosis of the jaws associated with sodium alendronate. The sample consisted of 44 female rats, Wistar strain, randomly allocated into 4 groups: (1) 11 rats treated with sodium alendronate (alendronate group); (2) 11 rats treated with sodium alendronate and corticotherapy (corticosteroid group); (3) 11 rats treated with sodium alendronate and subjected to diabetes induction (diabetes group); (4) 11 rats treated with saline (control group). The animals were subjected to tooth extractions 90 days after starting the bisphosphonate therapy. Euthanasia was performed 21 days after the surgical procedures. Sections were stained by hematoxylin and eosin (H&E) and by immunohistochemistry technique using anti-BMP-4 and anti-MMP-13 antibodies. Histological evaluation consisted of quantitative analysis of epithelial tissue, connective tissue, inflammatory infiltrate, root fragments, microbial colonies, vital bone and osteonecrosis using the manual point counting technique (Image Pro Plus 4.5.1). BMP-4 and MMP-13 were evaluated with the semi-automated segmentation technique (Image Pro Plus 4.5.1). The results were analyzed by chi-square and Kruskal-Wallis tests (followed by the multiple comparisons test), stating the significance level at 5%.In the H&E analysis, inflammatory infiltrate, microbial colonies and osteonecrosis proportions were significantly higher in the diabetes group (p<0.05), while the other variables did not differ between the groups. The immunohistochemical expression of BMP-4 in the connective tissue was significantly higher in the corticosteroid group than in the alendronate group (p<0.05), whereas the other groups did not differ for this variable. BMP-4 in the bone area and MMP-13 did not significantly differ between the groups. In conclusion, diabetes can be considered as a risk factor for the development of osteonecrosis of the jaw associated with alendronate therapy. However, for corticotherapy this association was not observed.

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-04-17T13:09:48Z No. of bitstreams: 1 447185.pdf: 1490319 bytes, checksum: 062b3580e76c16931c597b9792a749c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-17T13:09:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 447185.pdf: 1490319 bytes, checksum: 062b3580e76c16931c597b9792a749c2 (MD5) / O biomaterial constituído por 60% de hidroxiapatita (HA) e 40% de beta fosfato tricálcico (β-TCP) (Bone Ceramic®, Straumann S. A. – Zurich, Suíça) é um enxerto ósseo sintético, biocompatível, cuja composição bifásica fornece capacidade de suportar a neoformação óssea e manter a estabilidade mecânica do tecido. No presente estudo foi avaliado o reparo em defeitos ósseos críticos, confeccionados em calvária de ratos, preenchidos com esse biomaterial, antes e após a terapia com radiação ionizante. A amostra foi constituída por 33 ratos Wistar distribuídos em dois grupos experimentais, que receberam 12 Gy de radiação em dose única, e um grupo-controle. No primeiro grupo experimental (n=12) a confecção e o preenchimento do defeito na calvária foram realizados duas semanas após a radioterapia (grupo pós-radioterapia). No segundo grupo (n=12) a confecção e o preenchimento do defeito ósseo ocorreram duas semanas antes da radioterapia (grupo pré-radioterapia). Os animais do grupo-controle (n=9) foram submetidos aos mesmos procedimentos cirúrgicos, no entanto, não receberam terapia com radiação ionizante. Os animais foram mortos 12 semanas após os procedimentos cirúrgicos. Em todos os grupos foi observado íntimo contato entre o tecido ósseo neoformado e os grânulos do biomaterial, bem como ausência de necrose. Na análise histomorfométrica não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas entre os três grupos quanto ao percentual de tecido ósseo neoformado nos defeitos. Também não houve diferenças significativas entre os grupos quanto ao número de osteoblastos, osteoclastos e células inflamatórias. O percentual de imunodetecção do VEGF (fator de crescimento endotelial vascular) (p<0,001) e a densidade mineral na região dos defeitos (p=0,020) foram superiores no grupo-controle. Pode-se concluir que o biomaterial constituído por HA e β-TCP promove osteocondução no tecido irradiado de forma semelhante a que ocorre no tecido não irradiado. Além disso, não há diferenças quanto ao momento do emprego da radiação ionizante, ou seja, se antes ou após a aplicação do biomaterial. / The biomaterial made up of 60% hydroxyapatite (HA) and 40% beta tricalcium phosphate (β-TCP) (Bone Ceramic®, Straumann S.A. – Zurich, Switzerland) is a synthetic bone graft, biocompatible, whose biphasic composition enables it to bear the bone newly formation and maintain the tissue mechanical stability. The present study has evaluated the repair in critical bone defects, made on rats calvaria, filled with that biomaterial before and after therapy with ionizing radiation. The sample was formed by 33 Wistar rats distributed into two experimental groups that received 12 Gy radiation (single dose), and a control group. In the first experimental group (N=12) the fabrication and filling of the calvaria defect were performed two weeks after radiotherapy (pos-radiotherapy group). In the second group (n=12) the fabrication and filling of the calvaria defect were performed two weeks before radiotherapy (pre-radiotherapy group). The animals in the control group (n=9) were submitted to the same surgical procedures but did not receive any ionizing radiation therapy. The animals were killed 12 weeks after surgical procedures. In all groups a close contact between the biomaterial granules and the newly formed bone tissue was observed, as well as absence of necrosis. No statistically relevant differences were detected in the histomorphological analysis of the three groups with regards to the percentage of newly formed bone tissue in the defects. There were also no differences among the groups with regards to the number of osteoblasts, osteoclasts and inflammatory cells. The VEGF (Vascular Endotelial Growth Factor) (p<0.001) immunodetection percentage, and the mineral density in the defect site (p=0.020) were higher in the control group. Thus, it can be concluded that the biomaterial made up of HA and β-TCP promotes osteoconduction in the irradiated tissue similarly to what occurs in the non-irradiated tissue. Moreover, there is no difference regarding the moment the ionizing radiation is employed, that is, whether before or after applying the biomaterial.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:57:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000385829-Texto+Parcial-0.pdf: 113761 bytes, checksum: 29bd3ad70c5993e527ae31d24df43c2b (MD5) Previous issue date: 2006 / Mandibular advancement (MA) by means of functional orthopedic techniques is currently used in young patients to stimulate mandibular growth. Mandibular morphology depends on the maintenance of the condylar cartilage. Degenerative changes in the temporomandibular joint associated with aging could affect the shape of the mandible and reduce growth potential when stimulated by functional appliance therapy. The purpose of this study was to evaluate the morphological changes associated with aging and mandibular advancement (MA) in the mandible, condyle and articular disc of male and female mice of 2-, 7-, 15- and 16-month-old. Every 3 days during 1 month, the lower incisors were trimmed by 1 mm to induce protrusion when the animal was feeding. The left mandibles of the 53 experimental and 55 control individuals were subsequently dissected and digital images were obtained to analyze nine linear/angular measurements. The condylar microstructure was also analyzed by scanning electron microscopy (SEM). The right mandibular condyles and articular discs of the 30 experimental and 27 control female mice were analyzed by light microscopy to measure the thickness of articular disc and verify the number of proliferative and hypertrophic cells in the condylar cartilage in three regions: posterior, middle and anterior. The results showed changes in linear/angular measurements of the mandible with age in the control group and a growth response in the mandibular condyle in 7- and 15-month-old male mice after MA.Moreover, SEM analysis revealed many depressions in the condylar cartilage in the 7- and 15-month-old treated mice in comparison with controls. In female mice, the results demonstrated that MA produces mandibular growth in 2- and 16-month-old. Although there was no mandibular growth in 7-month-old mice, regeneration of the condylar cartilage was detected by SEM and histological analysis. The thickness of articular cartilage in the middle region changes during aging in natural and stimulated growth with higher averages in 2-month-old animals. An interaction between age and treatment occurred in the anterior region of the articular disc in youngest mice and in the posterior region was suggestive in 16-month-old mice. In treated mice, the proliferative cells in the condylar cartilage enhanced in the posterior region of 7- and 16-month-old, in the midle of 16-month-old and in the anterior in all ages as the hypertrophic cells in the anterior region. The averages of proliferative cells in all regions and hypertrophic cells in the middle region confirmed the age effect and the interaction to treatment occurred in 16-month-old mice with an increase of proliferative cells in posterior and middle regions. In conclusion, the mechanical stimulus changes the growth patterns of the mandible, condyle and articular disc of female mice of different ages. In addition, linear measurements change during the aging process and MA can stimulate condylar growth in aged male mice. / O avanço mandibular através das técnicas ortopédicas funcionais é atualmente utilizado em pacientes jovens para estimular o crescimento mandibular. A morfologia da mandíbula depende da manutenção da cartilagem condilar. As mudanças degenerativas na articulação temporomandibular associadas ao envelhecimento podem influir na forma da mandíbula e reduzir o potencial de crescimento quando estimulado pelo tratamento com aparelho funcional. O propósito deste estudo foi avaliar as mudanças morfológicas associadas com o envelhecimento e o avanço mandibular na mandíbula, côndilo e disco articular de camundongos machos e fêmeas de 2, 7, 15 e 16 meses de idade. A cada 3 dias, durante um mês, os incisivos inferiores foram desgastados em 1mm para induzir a protrusão mandibular quando o animal estava se alimentando. Após, as mandíbulas esquerdas de 53 animais experimentais e 55 controles foram dissecadas e imagens digitais foram obtidas para analisar oito medidas lineares e uma angular. A microestrutura condilar também foi analisada através do Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV). Os côndilos e discos articulares do lado direito da mandíbula de 30 camundongos fêmeas experimentais e 27 controles foram analisados pela microscopia de luz para medir a espessura dos discos articulares e verificar o número de células proliferativas e hipertróficas da cartilagem condilar nas regiões: posterior, média e anterior. Os resultados mostraram mudanças nas medidas lineares e angulares com o envelhecimento no grupo controle e resposta de crescimento no côndilo mandibular após o estímulo biomecânico em camundongos machos com 7 e 15 meses.A análise pelo MEV revelou depressões na cartilagem condilar dos animais de 7 e 15 meses experimentais em comparação com os controles. Nas fêmeas com 2 e 16 meses, os resultados demonstraram que o avanço mandibular induz ao crescimento mandibular e aos 7 meses foi detectada a regeneração da cartilagem pelo MEV e análise histológica. A espessura do disco articular na região média é modificado durante o envelhecimento no crescimento natural e estimulado com as médias maiores aos 2 meses de idade. Foi observada uma interação entre a idade e o tratamento na região anterior do disco articular do grupo de animais mais jovens e sugestiva na região posterior dos animais de 16 meses. Nos animais tratados, as células proliferativas aumentaram na região posterior do côndilo nos camundongos de 7 e 16 meses, na média dos animais de 16 meses e em todas as idades na região anterior. As médias do número de células proliferativas em todas as regiões e das células hipertróficas na região média confirmaram o efeito da idade e a interação com o tratamento ocorreu nos animais de 16 meses com um aumento de células proliferativas na região posterior e média. Concluindo, o estímulo biomecânico muda os padrões de crescimento da mandíbula, do côndilo e do disco articular em camundongos fêmeas de diferentes idades. Nos machos, as medidas lineares mudam durante o processo de envelhecimento e o avanço mandibular pode estimular o crescimento do côndilo mandibular em animais idosos.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:57:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000391944-Texto+Completo-0.pdf: 113050 bytes, checksum: c1a3c0bb9fecfbbcc9629f83a84a0330 (MD5) Previous issue date: 2004 / Various studies have demonstrated the beneficial potential of flavonoids on many biological aspects, which lead to the prescription of many of those substances as food supplements to prevent or to correct functional alterations, especially the ones concerning aging. Morin presents the potential to protect the cardiovascular system against oxidative stress and also presents very promising anti-tumor effects on the treatment of neoplasias. However, other studies demonstrate that morin is pro-oxidant because it induces the production of superoxide (O2 -) and hydrogen peroxide (H2O2) and because it causes damage to DNA in lymphocyte cultures and it inhibits the enzymeglutathione reductase. Once many studies indicate that free radicals, besides being involved in pathogeny of many illnesses, are involved in changes and illnesses associated to aging, including the decline of cognitive performance, particularly learning and memory, the present study aims at analyzing the acute effect of different doses of morin on recognition memory and inhibitory avoidance in mice submitted to behavioral tasks. The animals submitted to the task of recognizing a new object were administrated intraperioneal injections of vehicle or morin (Sigma) (5mmol/Kg e 50mmol/Kg ) 96 hours before the training session or immediately after task training. Mice that received morin before training, in both doses, presented complete block of STM and LTM. In mice that received the 5,0mmol/Kg dose immediately after training, amnesiac effect of STM and LTM was observed, while mice that received the 50,0mmol/Kg dose presented only LTM block. The total time of exploration of objects during task training session in which the animals received morin before training was statistically different between the groups that received vehicle solution and the groups that received morin. Such fact lead us to consider that morin may have some other unspecific effect on the exploratory locomotion activity, motivation or anxiety. Exposed to inhibitory avoidance task, animals were administrated intraperitoneal injections of morin in 50,0mmol/Kg doses 96 hours before the training session and 5,0mmol/Kg and 50,0mmol/Kg doses in two different moments: 30 before training and immediately after training. In none of the doses or moments memory deficits were found. As a whole, the results found in this study indicate that the effects of morin on memory depend on the content of the behavioral task, once it damaged a neutral task and it did not provoke alterations in an aversive task. However, we suggest the accomplishment of additional studies which evaluate the effect of this flavonoid on other neurobehavioral aspects, which could influence the performance of animals in memory tasks. / Diversos estudos têm demonstrado o potencial benéfico dos flavonóides sobre vários aspectos biológicos, o que levou a prescrição de diversas destas substâncias como suplementos alimentares para prevenir ou corrigir alterações funcionais, principalmente no que diz respeito àquelas relacionadas ao envelhecimento. A morina apresenta potencial protetor do sistema cardiovascular contra o estresse oxidativo e apresenta efeitos antitumorais bastante promissores no tratamento de neoplasias. Entretanto, outros estudos demonstram que ela pró-oxidante por induzir a produção de superóxido (O2 ·-) e peróxido de hidrogênio (H2O2), causar dano ao DNA em cultura de linfócitos e inibir a enzima glutationa redutase. Visto que vários estudos apontam que os radicais livres além de estarem envolvidos com a patogênese de muitas doenças, estão envolvidos com as mudanças e doenças associadas à idade, entre elas, o declínio da performance cognitiva, em particular, o aprendizado e a memória, o presente estudo tem por função analisar o efeito agudo de diferentes doses da morina sobre a memória de reconhecimento e esquiva inibitória em ratos submetidos a tarefas comportamentais. Os animais submetidos à tarefa de reconhecimento do objeto novo receberam injeções intraperitoneais de veículo ou morina (Sigma) (5mmol/Kg e 50mmol/Kg ) 96 horas antes da sessão de treino ou imediatamente após o treino da tarefa. Os ratos que receberam morina pré-treino, em ambas as doses, apresentaram bloqueio completo de STM e LTM. Nos ratos que receberam a dose de 5,0mmol/Kg imediatamente pós-treino foi observado efeito amnésico na STM e LTM enquanto que os ratos que receberam a dose de 50,0mmol/Kg apresentaram bloqueio apenas na LTM.O tempo total de exploração dos objetos durante a sessão de treino da tarefa onde os animais receberam morina pré treino foi diferente estatisticamente entre os grupos que receberam solução veículo e os grupos que receberam morina. Tal fato, nos leva a considerar que a morina pode ter algum outro efeito inespecífico sobre a atividade locomotora exploratória, motivação ou ansiedade. Expostos à tarefa de esquiva inibitória os animais receberam injeções intraperitoneais de morina na dose de 50,0mmol/Kg 96 horas antes da sessão de treino e nas doses de 5,0mmol/Kg e 50,0mmol/Kg em dois diferentes tempos: 30 pré-treino e imediatamente pós- treino. Em nenhuma das doses ou tempos foram encontrados déficts de memória. Em conjunto os resultados obtidos neste estudo indicam que os efeitos da morina sobre a memória dependem do conteúdo da tarefa comportamental, uma vez que ela causou prejuízo em uma tarefa neutra e não provocou alterações em uma tarefa aversiva. Entretanto, sugere-se a realização de estudos adicionais que avaliem o efeito deste flavonóide em outros aspectos neurocomportamentais, os quais poderiam influenciar o desempenho dos animais nas tarefas de memória.