Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000422850-Texto+Completo-0.pdf: 2953890 bytes, checksum: a9a608f4e09d0de94b994f35e62d2827 (MD5) Previous issue date: 2010 / Introduction: There is growing evidence that stem cell transplantation may be an effective therapy to treat liver disease. With systemic delivery of stem cells, a significant proportion of cells are retained in the lung and spleen. Therefore, ultrasound-guided percutaneous portal vein puncture has been tested as an alternative method in rat models. The objective of the present study was to evaluate the feasibility of percutaneous portal vein puncture and the efficacy of intraportal transplantation of bone marrow mononuclear cells in a rat model of cirrhosis. Method: To carry out the experiment, 24 female Wistar rats with cirrhosis induced by bile duct ligation were used. Fourteen days after ligation, the animals were randomized and then shaved and sedated for the procedure with Doppler ultrasound to facilitate identification of the portal vein. The mononuclear fraction obtained from the bone marrow of male rat donors was infused with a 30-gauge needle through direct abdominal puncture using a transhepatic route running along the liver hilum. On the 28th experimental day, the rats were euthanized. Liver repopulation with stem cells was evaluated through immunohistochemical detection of y chromosomecontaining cells. The number of cells was determined using flow cytometry. Results: The results obtained with ultrasound-guided delivery of stem cells directly into the portal vein show that of 24 animals studied, seven (29. 2%) died in the first 24 h. Significant liver repopulation with donor stem cells was observed in 77. 8% of the rats studied, with an efficacy of 31. 5%. Conclusion: The performance of percutaneous portal vein puncture was simple and enabled visualization of the material inside the portal system during the procedure, although approximately one third of the animals died during the observation period. The delivery of mononuclear stem cells directly to the portal vein of rats with cirrhosis enabled the implantation, fusion and/or phagocytosis of donor cells in the liver of recipients, suggesting therapeutic potential to treat cirrhosis in humans. / Introdução: Evidências crescentes têm demonstrado que o transplante de células-tronco pode tornar-se uma terapia eficaz em hepatopatias. A injeção sistêmica de células-tronco tem demonstrado que um percentual significativo dessas células fica retido no pulmão e no baço. Assim, a punção percutânea da veia porta orientada por ultrassonografia com Doppler colorido, em ratos, para administração de células-tronco apresenta-se como uma alternativa. O objetivo deste estudo foi avaliar a exequibilidade da técnica de punção percutânea da veia porta e a eficácia do transplante intraportal de células mononucleares de medula óssea em ratos com cirrose induzida. Metodologia: Para a execução do experimento, foram selecionados 24 ratos fêmeas da raça Wistar com cirrose induzida através da ligadura do ducto biliar. Quatorze dias após a ligadura, os animais foram preparados com tricotomia abdominal, sedação e orientação do procedimento por ecografia abdominal com Doppler colorido para facilitar a localização da veia porta. A fração mononuclear obtida da medula óssea de ratos machos doadores foi infundida utilizando uma agulha de gauge 30, com punção direta pela parede abdominal por via transhepática até a veia porta, junto do hilo do fígado. No 28º dia do experimento, os ratos foram sacrificados e avaliou-se o repovoamento hepático de células-tronco através da análise imunohistoquímica das células portadoras do cromossoma Y e a quantidade de células através da citometria de fluxo. Resultados: Os resultados obtidos através da infusão de células-tronco diretamente na veia porta, orientada por ultrassonografia com Doppler colorido, evidenciaram que, dos 24 ratos estudados, sete animais (29,2%) morreram nas primeiras 24 horas. Houve um significativo repovoamento hepático com células da medula óssea do doador em 77,8% dos ratos estudados e uma eficácia de 31,5%. Conclusão: A técnica de punção percutânea da veia porta mostrou-se de fácil execução e com visualização do material no interior do sistema portal durante o procedimento, embora aproximadamente 1/3 dos animais tenham morrido no período relacionado ao procedimento. A infusão da fração mononuclear da medula óssea diretamente na veia porta de ratos cirróticos permitiu a nidação, fusão e/ou fagocitose das células do animal doador no fígado do receptor, sugerindo potencial terapêutico no tratamento da cirrose humana.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000443023-Texto+Completo-0.pdf: 2231703 bytes, checksum: 8fa714244d8e44469edc5dc83e9b3038 (MD5) Previous issue date: 2012 / Injuries to the peripheral nervous system present a challenge for regenerative medicine. The study investigated the effects of platelet-rich plasma (PRP) and erythropoietin (EPO), alone or in combination, in the regeneration of peripheral nerve in rats. The work was developed in three phases using 70 rats. The first phase, evaluated the platelet concentration and growth factors production/release (TGF-β, PDGF, VEGF and αβ) in three protocols for obtaining PRP (A, B and C) obtained by aortic or cardiac puncture. Cardiac puncture in association with A protocol showed the best results. In the second stage, using best results methods at the first stage, was produced two PRP concentrations (1,000,000 and 2,000,000 platelets. μl-1; PRP1 and PRP2, respectively) for applying in the rats sciatic nerve. Comparison of concentrations with autologous nerve graft (ANG) and saline solution (SS) groups showed benefits in the use of PRP2. In the third phase (same experimental model) were added PRP2 + EPO and EPO groups. The animals of phases 1 and 2 were evaluated by walking track test and histomorphometric analysis (toluidine blue) and showed benefits in autologous nerve graft (ANG) with respect to tubulization (independent of regenerative factor). For tubularized animals, the study showed advantages for PRP and EPO simultaneous use followed by EPO group. Finally, it was observed that PRP 2,000,000 platelets. μl-1 has beneficial effects when compared to PRP 1,000,000 platelets. μl-1 for peripheral neuroregeneration rats. / Lesões ao sistema nervoso periférico representam um desafio para a medicina regenerativa. O estudo objetivou conhecer os efeitos do plasma rico em plaquetas (PRP) e da eritropoietina (EPO), isolados ou combinados, na regeneração do nervo periférico de ratos. O trabalho desenvolveu-se em três etapas utilizando 70 ratos. A primeira fase avaliou a concentração plaquetária e produção/liberação de fatores de crescimento (TGF-β, PDGF-αβ e VEGF) em três protocolos de obtenção do PRP (A, B e C) obtidos por punção aórtica ou cardíaca. A punção cardíaca em associação com protocolo A gerou os melhores resultados. Na segunda fase, usando os métodos com melhores resultados na primeira etapa, produziram-se duas concentrações de PRP (1. 000. 000 e 2. 000. 000 plaquetas. μl-1; PRP1 e PRP2, respectivamente) para aplicação no nervo ciático tubulizado de ratos. Comparação das concentrações entre si e com grupos auto enxerto (AE) e solução fisiológica (SF) evidenciaram benefícios no uso de PRP2. Na terceira fase (mesmo modelo experimental), foram adicionados os grupos EPO e EPO+PRP2. Os animais das fases 1 e 2 foram avaliados por teste de marcha e histomorfometria (azul de toluidina) e demonstraram que o auto enxerto apresentou benefícios sobre a tubulização (independente do fator regenerativo utilizado). Para os animais tubulizados, o estudo demostrou melhores resultados para o uso simultâneo de PRP e EPO, seguido do grupo EPO. Finalizando, observou-se que a aplicação de PRP na concentração de 2. 000. 000 plaquetas. μl-1 em comparação com 1. 000. 000 platelets. μl- 1 apresentou vantagens para neuroregeneração periférica de ratos.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000410040-Texto+Parcial-0.pdf: 122324 bytes, checksum: 45a894ba60e6f927801a47a55af0ba93 (MD5) Previous issue date: 2009 / O câncer da cavidade bucal e o câncer orofaríngeo representam o 6º tipo mais comum de câncer no mundo, sendo que 90% desses tumores bucais são do tipo carcinoma de células escamosas. Para que ocorra o estabelecimento, a expansão e a metastatização de neoplasias é fundamental que tumores estimulem a produção de sua própria rede vascular, processo conhecido como angiogênese tumoral. Assim, o resultado é uma nova rede de vasos adequada ao crescimento e a viabilização de metástases. Os vasos do tumor são considerados como imaturos e diferem dos vasos normais, apresentando formas tortuosas, irregulares, revestidos por células endoteliais amplamente fenestradas e muitas vezes com ausência de membrana basal. Os objetivos deste trabalho foram: definir um protocolo para estudo da angioarquitetura em réplicas vasculares de tumores quimicamente induzidos na bolsa jugal de hamster sírio dourado Mesocricetus auratus, descrever a histologia do órgão normal por microscopia de luz (ML) e a angioarquitetura por microscopia eletrônica de varredura (MEV), analisar qualitativamente a rede vascular neoformada em bolsas jugais de hamster sírios após indução química de tumor em três tempos diferentes. 24 hamsters sírios machos e com cinco semanas de vida, divididos em três grupos de oito animais cada, tiveram suas bolsas jugais direitas tratadas três vezes por semana com dimetilbenzantraceno (DMBA) e duas vezes por semana com peróxido de carbamida por 55, 70 e 90 dias, respectivamente cada grupo. A bolsa esquerda foi isenta de tratamento e considerada como controle. Posteriormente à indução do tumor, cinco animais de cada grupo tiveram suas redes vasculares moldadas pela resina Mercox® e analisadas em microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os três animais restantes de cada grupo tiveram suas bolsas preparadas para análise em microscopia de luz (ML).Após 55 dias de indução tumoral, todos os espécimes analisados por ML já apresentavam carcinoma de células escamosas na bolsa jugal tratada e este resultado se consolidou aos 70 e 90 dias de tratamento. O menor tempo necessário para a indução tumoral comparado a estudos anteriores e o sucesso na produção do tumor em todos os animais submetidos ao tratamento foi correlacionado a ação do peróxido de carbamida e ao enriquecimento ambiental empregado durante o experimento. Foi possível concluir que o protocolo desenvolvido pode ser útil à análise da angioarquitetura dos tumores em bolsas jugais de hamster sírio. A técnica de MEV possibilitou diferenciar vasos arteriais de venosos, como também replicar estruturas como esfíncteres, bifurcações, anastomoses e sugestionar a presença de sproutings. No estudo da bolsa jugal normal com ML foram evidenciadas três túnicas: a túnica mucosa, a túnica muscular e a túnica adventícia. Quando analisadas por MEV, as replicas vasculares das bolsas controle apresentavam sua rede vascular composta por vasos paralelos ao seu maior eixo, conforme a fisiologia do órgão. Nas bolsas submetidas à indução tumoral observou-se a formação de uma nova rede vascular, com a presença de vasos tortuosos e paralelos. Durante a progressão do tumor houve perda do paralelismo vascular e um aumento do calibre dos vasos. Estururas [sic] de angiogênese também foram observadas.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000425543-Texto+Completo-0.pdf: 747447 bytes, checksum: 25a6005ed4d57ac7cb87a5a7d22ed8de (MD5) Previous issue date: 2010 / Aging is associated with the gradual decline in the immune system function (immunosenescence), both in humoral immunity as well in cellmediated responses, resulting in an increased susceptibility to infections and cancer, as well as reduced response to vaccination. Dendritic cells (DCs) are the most powerful and efficient antigen-presenting cells (APC), playing a pivotal role in the presentation and consequent T-cell mediated immune response. However, most of the studies focusing on immunosenescence focus on T cells. Also, most of the data on aged dendritic cells come from in vitro studies. The interaction between dendritic and T cells affects the processing and consequent presentation of antigens, influencing the effectiveness of T cell-mediated immune responses. The goal of this study was to evaluate the stimulatory capacity of dendritic cells from old mice in a specific T CD4+ response compared to young mice in vivo. Transgenic T cells from TEa mice, specific for the Ea:IAb complex were transferred to normal C57Bl/6 mice. T cells from young mice being transferred into young and old animals, and T cells from old mice transferred into young and old animals. The results demonstrate that, after immunization with EaRFP antigen, young dendritic cells stimulated equally young and old T cells. However, dendritic cells from old animals were less capable of stimulating old as well as young T cells. While both T cells, young and old, acquired CD44+ phenotype when transferred to young animals, young T cells when transferred to old animals did not acquired the same phenotype. This fact suggested that dendritic cells from old animals possess lower capacity to stimulate T cells, even if these cells come from a young animal. We hypothesized that this could be due to an extremely diminished dendritic cells number in old animals, or rather to some deficiency in one of the signals supplied by dendritic cells in T lymphocyte priming (antigen presentation or costimulatory signals). The dendritic cells total number was lower in old mice compared to young mice. Also, the number of antigen presenting cells was lower in draining lymph nodes of old animals and the expression of CD86 by dendritic cells did not differ between old and young animals. Altogether, the results suggest that the impairment of antigen presentation capacity presented by aged dendritic cells is critical for their loss of stimulatory potential of CD4+ T cells. / O envelhecimento está associado com o declínio progressivo nas funções do sistema imunológico (imunosenescência), tanto na imunidade humoral quanto na imunidade mediada por células, resultando em maior suscetibilidade a infecções e câncer, além da diminuição na capacidade de responder a vacinas. As células dendríticas (DCs) são as mais poderosas e eficientes apresentadoras de antígenos (APC), desempenhando um papel primordial na apresentação e conseqüente resposta imune mediada por células T. Poucos estudos enfocam a atividade das células dendríticas no envelhecimento, sendo que a maioria dos dados são relativos às funções das células T. As interações entre as células dendríticas e as células T afetam o processamento e consequente apresentação de antígenos, influenciando a efetividade das respostas imunes mediadas por células T. Este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade estimulatória de células dendríticas de camundongos velhos em uma resposta específica T CD4+ comparada à resposta imune de camundongos jovens. Para isso, células T de camundongos transgênicos TEa, específicas para o complexo Ea:IAb foram transferidas para camundongos normais C57Bl/6, células T de camundongos jovens para animais velhos e jovens, e células T de camundongos velhos para animais velhos e jovens. Os resultados demonstram que, após imunização com o antígeno EaRFP, tanto as células T jovens quanto as células T velhas foram estimuladas de modo semelhante por células dendríticas jovens. Contudo, células dendríticas de animais velhos não foram capazes de estimular suficientemente as células T de animais velhos nem mesmo as células T de animais jovens. Enquanto ambas as células T, jovens e velhas, adquiriram o fenótipo CD44+ quando transferidas para os animais jovens, células T jovens transferidas para animais velhos não adquiriram o mesmo fenótipo. Esse fato sugeriu que células dendríticas de animais velhos possuem baixa capacidade de estimular células T, mesmo que essas células venham de um animal jovem. Nós hipotetizamos que esse resultado poderia estar ligado a um número extremamente diminuído de células dendríticas nos animais velhos, ou ainda em uma deficiência em um dos sinais fornecidos pelas células dendríticas no priming de linfócitos T (apresentação de antígeno ou sinais coestimulatórios). O número total de células dendríticas foi significativamente menor em camundongos velhos comparado a camundongos jovens. Além disso, o número de células apresentando antígeno foi menor no linfonodo drenante de animais velhos, e a expressão de CD86 por células dendríticas de animais velhos não foi diferente da dos animais jovens. Os resultados sugerem que a diminuição da capacidade de apresentação de antígeno apresentada no envelhecimento é crítica para a perda do potencial estimulatório de células T CD4+ por células dendríticas.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000399357-Texto+Completo-0.pdf: 1396496 bytes, checksum: 2fad2df47997209231d151979b59a483 (MD5) Previous issue date: 2008 / The purpose of this study was to investigate the potential effect of low level laser therapy (LLLT) on modulating the pro-inflammatory and antiinflammatory mediators of acute inflammation in rat pleurisy model. In the classic model of pleurisy there is little evidence of anti-inflammatory effects from LLLT and dosage characteristic, such as wavelength, total energy, number and pattern of treatment, with the necessity for more studies. A sample of 48 female Wistar rats were divided into control and experiential groups. An inflammation was induced by carrageenan (0. 2mL) injected into the pleural cavity. At 1, 2, and 3 h after induction the continuous wave (20 mW) diode laser of the InGaAlP (660nm) type was used in laser groups different doses and treatment patterns and with a total energy delivered of 0. 9, 2. 1 and 4. 2 joules. At 4 h after the exudate volume, total and differential leukocytes, protein concentration, nitric oxide (NO), interleukin (IL)-6, interleukin (IL)-10, tumor necrosis factor (TNF)-J and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 were measured from the aspirated liquid. Any treatment pattern and quantity of energy can reduce a significantly volume of the exudate (P<0,05). The final energy lower than 2. 1 joules reduces significantly (P<0,05) only NO, IL-6, MCP-1 and IL-10, while 2. 1 joules reduce significantly all variables independently of the treatment pattern. The neutrophil migration has significant correlation with the TNF-J concentration (r=0,551). The LLLT (660nm) induced an anti-inflammatory effect characterized by inhibition of both total and differential leukocyte influx, exudation, total protein, NO, IL-6, MCP-1, IL-10 and TNF-J, but keeping a highly dose-dependent outline. Under these conditions, laser with 2. 1 joules was more effective than 0. 9 joule and 4. 2 joules. / A proposta deste estudo foi investigar o efeito potencial da terapia laser de baixa intensidade na modulação de mediadores pró-inflamatórios e antiinflamatórios na fase aguda da inflamação no modelo de pleurisia em ratos. No modelo clássico de pleurisia temos poucas evidencias do efeito antiinflamatório do laser e das características de dosagem, como o comprimento de onda, energia total, números e formas de tratamento, necessitando ainda de mais estudos. A amostra de 48 ratas Wistar foram divididas em grupos controle e experimentais. A inflamação foi induzida por carragenina (0. 2 mL) injetada na cavidade pleural. Na 1ª, 2ª e 3ª hora após a indução o laser diodo de InGaAlP (660 nm) no modo contínuo (20 mW) foi usado nos grupos laser diferentes doses e formas de tratamento, com uma energia total de 0. 9, 2. 1 e 4. 2 joules. Após 4 horas o volume de exsudato, leucócitos totais e diferencial, concentração de proteínas, oxido nítrico (NO), interleucina (IL)-6, interleucina (IL)-10, fator de necrose tumoral (TNF)-J e proteína quimioatrativa de monócitos (MCP)-1 foram mensuradas no liquido pleural aspirado. Todas as formas de tratamento e quantidade de energia reduzem significativamente o volume do exsudato (P<0,05). A energia final abaixo de 2. 1 joules somente reduz significativamente (P<0,05) o NO, IL-6, MCP-1 e IL-10, enquanto que 2. 1 joules reduz significativamente todas as variáveis independente da forma de tratamento. A migração de neutrófilos tem uma correlação significativa com a concentração de TNF-J (r=0,551). A terapia laser de baixa intensidade (660 nm) induz um efeito antiinflamatório caracterizado pela inibição de ambos leucócitos totais e diferencial, exsudato, proteínas totais, NO, IL-6, MCP-1, IL-10 e TNF-J, mas mantendo um alto perfil dose-dependente. Nestas condições acima, o laser com 2. 1 joules foi mais efetivo que 0. 9 joule e 4. 2 joules.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000422656-Texto+Completo-0.pdf: 178694 bytes, checksum: 08cc79754d1c2a415b01732d55433825 (MD5) Previous issue date: 2010 / The gastrin-releasing peptide receptor (GRPR) has been put forward as a novel molecular target in neurodevelopmental disorders. We have previously shown that pharmacological blockade of the GRPR during the neonatal period in rats produces long-lasting behavioral features associated with autistic disorders, such as deficits in social behavior. Alterations in attachment behavior might play a role in the dysfunction in social behavior displayed by autistic infants. Here we show that neonatal GRPR blockade by systemic administration of the GRPR antagonist RC-3095 induces a reduction in maternal odor preference, a task involving attachment behavior, in infant rats. This impairing effect is likely to represent a specific dysfunction of attachment behavior rather than a general impairment of odor learning, since animals given RC-3095 showed normal aversive odor conditioning. These findings provide the first evidence that the GRPR regulates maternal preference and are consistent with the view that the GRPR is involved in behavioral features associated with neurodevelopmental disorders. / O receptor do peptídeo liberador de gastrina tem sido considerado como um novo alvo molecular em desordens do desenvolvimento neurológico. Estudos prévios realizados em nosso laboratório demonstraram que o bloqueio farmacológico do GRPR durante o período neonatal em ratos produz características comportamentais que tem sido associadas com distúrbios autistas, tais como déficits de comportamento social. Alterações no comportamento de estabelecimento de vínculos podem desempenhar um papel importante na disfunção de comportamento social apresentada por crianças autistas. Ratos filhotes machos receberam duas injeções intraperitoneais diárias do antagonista do GRPR (RC-3095) do 1º ao 10º dia de vida pós-natal. No 11° dia de vida os filhotes foram submetidos à tarefa de preferência pelo odor materno e ao completarem 15 dias, à tarefa de condicionamento aversivo ao odor. Os resultados do presente trabalho demonstram que o bloqueio do GRPR no período neonatal pela administração sistêmica do antagonista RC-3095 induz uma redução na preferência pelo odor materno, uma tarefa que envolve o comportamento de apego, em ratos lactentes. Provavelmente, este efeito prejudicial possa representar uma disfunção específica no comportamento de apego mais do que um prejuízo no aprendizado do odor, pois animais que receberam RC-3095 mostraram uma resposta normal ao condicionamento aversivo ao odor. Estes resultados fornecem a primeira evidência de que o GRPR regula o comportamento de preferência materna e são consistentes com a visão de que o GRPR está envolvido com mecanismos comportamentais associados a perturbações do desenvolvimento neurológico.

Made available in DSpace on 2015-08-18T02:06:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000473525-Texto+Parcial-0.pdf: 378184 bytes, checksum: b680d905cd5090c77c92df187b59241d (MD5) Previous issue date: 2015 / Epilepsy comprehends a category of syndromes characterized by spontaneous and recurrent crises (SRCs), which are a result of intense electric activity, synchronized and rhythmic of neuronal populations of the central nervous system (CNS), and of excessive excitability in the absence of a toxic-metabolic condition or fever 1 2, 3. Experimental studies have shown that SE induction in rodents provokes pronounced inflammatory cerebral reaction involving endothelial cells, glia, and neurons4, 5. Our group has shown that intravenous bone marrow cells administration following lithium-pilocarpine SE induction reduces SRCs, improves cognitive function, and modulates the production of pro-inflammatory cytokines6, 7. The spleen is important to induce cerebral inflammatory response and also is an important target for stem cell intervention therapies8. Splenectomy before a cerebrovascular accident (CVA) significantly reduces the infarction size in the brain9. Moreover, it has been demonstrated that in the pilocarpine model splenectomy decreases the severity of crises, the time to SE onset, and the mortality rate caused by SE10. The aim of the present work was investigating the importance of the interaction between bone marrow mononuclear cells (BMC) and the spleen in epileptic rats. As a result, the animals treated with BMC presented a better capability of memory retrieval in the Morris aquatic maze (MAM) when compared to the treated animals without the spleen. Besides, the treatment did not present the potential of reducing the levels of IL-1 β or of increasing the levels of IL-10 in the serum and hippocampus of treated rats without the spleen. In conclusion, the work suggests that the spleen could be involved in the therapeutic effect promoted by BMC transplant. / A epilepsia compreende uma categoria de síndromes que se caracterizam por crises espontâneas e recorrentes (CERs), que são resultados de disparos elétricos intensos, sincronizados e rítmicos de populações neuronais no sistema nervoso central (SNC) e de excitabilidade excessiva, na ausência de condição tóxico-metabólica ou febril. 1 2, 3 Pesquisas experimentais mostram que a indução do Status Epilépticos (SE) em roedores provoca reação inflamatória cerebral pronunciada envolvendo as células endoteliais, glia e neurônios. 4, 5 Nosso grupo mostrou que a administração de células da medula óssea por via intravenosa depois da indução do SE por lítio-pilocarpina é capaz de reduzir as CERs, melhorar a função cognitiva e modular a produção de citocinas pró-inflamatórias. 6, 7 O baço é importante na indução da resposta inflamatória cerebral e também é um alvo importante para a intervenção de células-tronco. 8 A esplenectomia antes do acidente vascular cerebral (AVC) reduz significativamente o tamanho do infarto no cérebro. 9 Foi também demonstrado que no modelo da pilocarpina, a esplenectomia diminuiu a gravidade das crises, o tempo para o início do SE, e a taxa de mortalidade causada pelo SE. 10 O objetivo do presente trabalho é investigar a importância da interação entre células mononucleares da medula óssea (CMMO) e o baço em ratos epilépticos. Como resultado do trabalho nossos animais tratados com as CMMO apresentaram melhor capacidade de reter a memória no teste do LAM quando comparados aos animais tratados sem o baço. Além disso, nesses animais o tratamento não teve o potencial de reduzir as taxas de IL-1 β no soro e nem de aumentar os níveis de IL-10 no soro e no hipocampo de ratos tratados e sem o baço. Concluindo, o trabalho sugere que o baço possa estar envolvido modulando a cascata inflamatória no efeito terapêutico promovido pelo transplante de CMMO.

Made available in DSpace on 2015-10-29T01:04:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000475906-Texto+Completo-0.pdf: 2818432 bytes, checksum: ef1bbe62cc37365a42f48dd4ca4182ea (MD5) Previous issue date: 2015 / Bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw (BRONJ) is an important side-effect of bisphosphonates. The condition has high morbidity and its treatment is difficult, where many therapies have been tried including antibiotics, surgical interventions, and also some alternative therapies such as low-level laser therapy, platelet-rich plasma and hyperbaric oxygen therapy (HBOT). Nevertheless, there is no consensus about the effectiveness of HBOT in BRONJ. The aim of the present study was to investigate the effect of HBOT on tooth extraction site in rats treated with bisphosphonate. Thirty-five Wistar rats were treated with zoledronic acid, subjected to tooth extractions and allocated into groups according to HBOT regimen: (1) 7 days of HBOT; (2) 14 days of HBOT; (3) without HBOT (7-day control); (4) without HBOT (14-day control). The site of tooth extractions was analyzed by histomorphometry and immunohistochemistry. Bone exposure volume did not significantly differ between pre- and post-HBOT or between test groups and controls. At 7 days, the HBOT group showed amounts of epithelium and root fragment that were significantly less than the control. At 14 days, non-vital bone was significantly less in the HBOT group than in the control. HBOT groups compared to each other showed higher amounts of non-vital bone and less root fragment at 7 days. The HBOT group showed at 7 days lower expression of VEGF, RANKL, BMP-2 and OPG compared to the control, whereas at 14 days, there was no significant difference. Comparing HBOT groups at 7 and 14 days to each other, VEGF and OPG showed significantly higher expression at 14 days, whereas RANKL and BMP-2 did not show any significance. Conclusion: HBOT can reduce the amounts of non-vital bone microscopically detected in tooth extraction sites of rats subjected to bisphosphonate therapy. The effect seems to occur in a dose-dependent mode. Further studies are required to clarify the mechanisms accounting for this effect. / A osteonecrose maxilar associada aos bisfosfonatos (bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw, BRONJ) é um importante efeito adverso desses fármacos. A condição exibe elevada morbidade e difícil tratamento, sendo que várias modalidades terapêuticas têm sido empregadas, entre as quais se destacam antibioticoterapia, intervenções cirúrgicas e terapias alternativas como a terapia a laser de baixa intensidade, plasma rico em plaquetas e oxigenoterapia hiperbárica (hyperbaric oxygen therapy, HBOT). Entretanto, não existe consenso sobre a efetividade da HBOT no tratamento da BRONJ. O presente estudo teve por objetivo investigar o efeito da HBOT em sítio de exodontias em ratos sob tratamento com bisfosfonatos. Trinta e cinco ratos Wistar foram tratados com ácido zoledrônico, submetidos a exodontias e distribuídos em grupos de acordo com o regime de HBOT recebido: (1) 7 dias de HBOT; (2) 14 dias de HBOT; (3) sem HBOT (controle de 7 dias); (4) sem HBOT (controle de 14 dias). O sítio das exodontias foi analisado por meio de histomorfometria e imunoistoquímica. O volume de exposição óssea não diferiu significativamente entre os períodos pré- e pós-HBOT, nem entre grupo-teste e controle. Aos 7 dias, o grupo HBOT exibiu proporção de epitélio e resto radicular significativamente menor que o controle. Aos 14 dias, a proporção de osso não-vital foi significativamente menor no grupo HBOT que no controle. Quando os grupos-teste foram comparados entre si, foi observada maior proporção de osso não-vital e menor proporção de resto radicular aos 7 dias. O grupo HBOT exibiu, aos 7 dias, expressão de VEGF, RANKL, BMP-2 e OPG significativamente menor que o controle, enquanto aos 14 dias essa diferença não foi significativa. Quando os grupos-teste foram comparados entre si, VEGF e OPG exibiram expressão significativamente maior aos 14 dias, enquanto RANKL e BMP-2 não exibiram diferença significativa. Conclusão: A HBOT está associada a menor proporção de osso não-vital detectado microscopicamente em sítios de exodontias de ratos submetidos a terapia com bisfosfonato. O efeito parece ser dose-dependente e novos estudos são necessários para esclarecer os mecanismos responsáveis por esse efeito.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000411483-Texto+Completo-0.pdf: 9511623 bytes, checksum: 6e96dbea5095542343d03d019de7bb7c (MD5) Previous issue date: 2009 / Introduction: Hemorrhage subependymal layer/intraventricular, also called the germinal matrix hemorrhage occurs in premature infants with less than 34 weeks and 1500 grams or below. The development of models for understanding the evolution of brain damage before and after the hemorrhage is important to determine strategies for treatment of disease. Objective: Developing a neonatal experimental model of hemorrhage subependymal layerintraventricular in newborn rats by collagenase type VII and evaluate the outcomes of the injury through neuromotor tests, cognitive test, and macroscopic and microscopic evaluation of subgroups: negative control, saline group and collagenase. Method: Rats were subjected to the P6 hemorrhage by free hand technique (freehand) through an injection with intracranial collagenase type VII; one group caused a unilateral hemorrhage in another bilateral hemorrhage. They were evaluated with neuromotor and cognitive tests in P7, P11, P15 and P30. After the neuromotor and cognitive test, macroscopic and histological examinations were performed. A group of animals also were evaluated histologically in P7 hemorrhage after injury. Results: It was possible to cause injury to the germinal matrix with collagenase type VII, and easy to play. Neuromotor changes as ambulation; negative geotaxis, surface righting, and forelimb grip have a significant value in the acute phase. But the test of the cylinder and the test of recognition of objects were not statistically significant. The test of the open field was significant, for the group with bilateral hemorrhage. We found decrease in the volume of encephalon and the germinal matrix lesion in histological evaluation. Conclusion: The model of hemorrhage subependymal layer/intraventricular in newborn rats (P6) was established using the collagenase type VII, and easy to implement. There was no significant difference in cognitive evaluation and the neuromotor changes are remarkable in the acute phase. Histological evaluation showed changes similar to those of humans. Reduction in the volume of the encephalon in the hemisphere corresponding to the lesion. / Introdução: A hemorragia subependimária-intraventricular, também chamada de hemorragia da matriz germinativa, ocorre, em pré-termos com menos de 34 semanas e/ou abaixo de 1500 gramas. O desenvolvimento de modelos para entender a evolução da lesão cerebral antes e depois da hemorragia é importante para determinar estratégias de tratamento da doença. Objetivo: desenvolver um modelo experimental neonatal de hemorragia subependimária-intraventricular em ratos recém-nascidos, através da colagenase tipo VII e avaliar os desfechos da lesão através de testes neuromotores, cognitivos e avaliação macroscópica e microscópica dos subgrupos: controle negativo, grupo salina e colagenase. Método: Ratos Wistar no P6 foram submetidos à hemorragia pela técnica da mão livre (freehand) através de uma injeção intracraniana com colaganese tipo VII. Num grupo foi provocada hemorragia unilateral, e, em outro, hemorragia bilateral. Os mesmos foram avaliados com testes neuromotores e cognitivos (P7, P11, P15 e P30). Após os testes neuromotores e cognitivos, foram realizadas as avaliações macroscópicas e histológicas. Um grupo de animais também foi avaliado histologicamente no P7 após a lesão hemorrágica. Resultados: Foi possível provocar lesão na matriz germinativa com colagenase tipo VII, sendo fácil de reproduzir. As alterações neuromotoras, como ambulação, geotaxia negativa, reflexo de endireitamento e o teste de preensão das patas anteriores apresentaram valores significativos na fase aguda. Já o teste do cilindro e o reconhecimento de objeto não foram estatisticamente significativos. O teste do campo aberto foi significativo para o grupo com hemorragia bilateral. Encontramos diminuição do volume do encéfalo e lesão da matriz germinativa na avaliação histológica. Conclusão: O modelo de hemorragia subependimária-intraventricular em ratos Wistar recém-nascidos (P6) foi estabelecida utilizando a colagenase tipo VII, sendo de fácil execução. Não houve diferença significativa na avaliação cognitiva e as alterações neuromotoras são notáveis na fase aguda. A avaliação histológica evidenciou alterações semelhantes às do humano. Houve redução do volume do encéfalo na região do hemisfério correspondente à lesão.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000423010-Texto+Completo-0.pdf: 5093899 bytes, checksum: 94708bfc488359788a7d9860dabeeeb3 (MD5) Previous issue date: 2010 / Introduction: the search for new therapies to treat asthma should currently aim the disease primary prevention. Bacterial products seem to strongly inhibit the inflammatory response, but the period of major effect and the mechanisms of action are not clearly identified. Objective: to study the effect of the bacterial extract OM-85 in the development of allergic pulmonary response to ovalbumin in a murine model, evaluating particularly the temporal factor of the exposition. Methods: female Balb/c mice were exposed to the bacterial lysate (OM-85) by gavage in different moments of life (neonatal, pre-sensitization). One positive control and one negative control were used. After exposition of OM-85, the following procedures were performed: bronchoalveolar lavage with total cell counts and differential cytology, and eosinophil peroxidase (EPO) activity and histopathological analyzis in lung tissue. Results: OM-85 did not show an inhibitory effect of allergic pulmonary response in mice. In the early intervention group, there was only a reduction of the number of eosinophils in bronchoalveolar lavage (p=0,001). The levels of EPO and histopathological alterations in lung tissue did not show differences between the groups. Conclusion: OM-85 extract exposition during neonatal and pre-sensitization in adult life periods, by gavage, did not inhibit allergic pulmonary response in mice. Our results do not exclude the possibility of an inhibitory effect to in this model with higher doses of OM-85 or other routes of administration. / Introdução: a busca de novos fármacos para o tratamento da asma alérgica deve objetivar a prevenção primária à doença. Os produtos bacterianos parecem inibir a resposta inflamatória de forma potente, porém o momento de exposição com maior efeito e seus mecanismos de ação ainda não foram claramente identificados. Objetivo: estudar o efeito do extrato bacteriano OM-85 no desenvolvimento de resposta pulmonar alérgica a ovalbumina em um modelo murino, avaliando particularmente o fator temporal da exposição. Métodos: camundongos BALB/c fêmeas foram expostas a lisado bacteriano (OM-85) por gavagem em diferentes momentos da vida (neonatal e pré-sensibilização), com um grupo controle positivo e um negativo. Após exposição ao OM-85, foram realizados contagem total de células e exame citológico diferencial no lavado broncoalveolar, e ensaio de peroxidase eosinofílica (EPO) e análise histopatológica em tecido pulmonar. Resultados: o extrato bacteriano OM-85 não apresentou efeito inibidor da resposta pulmonar alérgica em camundongos. No grupo com intervenção precoce, houve redução somente do número de eosinófilos no lavado broncoalveolar (p=0,001). Os níveis de EPO e as alterações histopatológicas observadas nos tecidos pulmonares não foram diferentes entre os grupos. Conclusão: A exposição ao extrato OM-85, no período neonatal e pré-sensibilização na idade adulta, por via oral, não inibe a resposta pulmonar alérgica em camundongos. Esse resultado não exclui a possibilidade de um efeito inibidor neste modelo com doses mais altas do OM-85 ou outras vias de administração.