Orientadores: Francisco Humberto Nociti Junior, Marcio Zaffalon Casati / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T21:22:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_PatriciaFurtado_D.pdf: 1584484 bytes, checksum: 320d77faa174f7b65746904c2c6166c6 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Tendo sido demonstrada a possibilidade de preservação do cemento como forma alternativa de tratamento da doença periodontal, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do cemento dental na regeneração periodontal. Foram utilizados nove cães, sem raça definida, que receberam ligaduras de fio de algodão nos terceiros pré-molares inferiores, bilateralmente, para produzir lesões de bifurcação classe III. Após o levantamento de retalhos mucoperiosteais, os defeitos foram aleatoriamente escolhidos para receber um dos seguintes tratamentos: (A) remoção do tecido de granulação e uma cuidadosa raspagem e alisamento radicular, utilizando curetas e brocas, objetivando a remoção dos depósitos duros e moles e do cemento radicular, e polimento radicular com taças de borracha e pasta profilática; (B) somente a remoção do tecido de granulação e polimento radicular com taças de borracha e pasta profilática, objetivando a preservação do cemento radicular. Em ambos os grupos, os defeitos foram tratados com o princípio da Regeneração Tecidual Guiada (membranas reabsorvíveis - RESOLUT XT®) e os retalhos foram posicionados coronariamente e suturados. Após quatro meses os animais foram sacrificados para uma análise histomorfométrica. No grupo B, houve uma maior extensão (3,59±1,67 e 6,20±2,26mm para os grupos A e B, respectivamente; p=0,004) e espessura (18,89±9,47 e 52,29±22,48µm para os grupos A e B, respectivamente; p=0,001) de novo cemento, uma maior extensão de novo osso (1,86±1,76 e 4,62±3,01mm para os grupos A e B, respectivamente; p=0,002), além de uma maior extensão de regeneração periodontal, quando comparado ao grupo A (p<0,05 ¿ Wilcoxon). Observou-se ainda, no grupo B, uma menor formação de tecido epitelial/conjuntivo sobre a superfície radicular (2,77±0,79 e 1,10±1,48mm para os grupos A e B, respectivamente; p=0,009), além de uma maior porcentagem de preenchimento da área do defeito (80,95±17,46 e 94,50±10,27 para os grupos A e B, respectivamente; p<0,05), com uma maior proporção de novo osso e uma menor proporção de tecido epitelial/conjuntivo (p<0,05). Dentro dos limites deste estudo, conclui-se que o cemento dental pode modular a regeneração periodontal / Abstract: The aim of the present study was to histometrically evaluate, in dogs, the effect of root cementum on periodontal regeneration. Nine mongrel dogs were used to obtain bilateral chronic class III furcation defects by placing cotton ligatures around both third mandibular premolars. The teeth were randomly assigned to receive one of the following treatments: (A) Scaling and root planning, by means of hand and rotatory instruments, in order to remove soft and hard deposits as well as all root cementum; (B) Removal of only soft microbial deposits, by polishing the root surface with rubber cups and polishing paste, aiming at maximum root cementum preservation. Both groups were treated with Guided Tissue Regeneration (GTR), with the use of resorbable poliglycolic-lactic-acid membranes (RESOLUT XT®) covering the buccal e lingual aspects of the furcation defect, and the flaps coronally positioned. Four months after the treatment, the animals were sacrificed and the histological sections obtained. Data analysis showed that a superior length (3.59±1.67 vs. 6.20±2.26mm; p=0.004) and a thicker layer (18.89±9.47 vs. 52.29 ±22.48µm; p=0.001) of new cementum were observed for group B (p<0.05). Additionally, group B presented and a superior length of new bone (1.86±1.76 vs. 4.62±3.01mm; p= 0.002) and less soft tissue along the root surface (2.77±0.79 vs. 1.10±1.48mm; p=0.009), and a larger proportion of periodontal regeneration when compared to control (p<0.05). A larger area of new bone (p=0.018) and a smaller area of soft tissue (p=0.024) were also observed for group B (p<0.05 - Wilcoxon). Within the limits of this study, it can be concluded that root cementum may modulate periodontal regeneration / Doutorado / Periodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Processos fotodinâmicos aplicados a sistemas biológicos têm sido utilizados in vitro e in vivo como uma modalidade terapêutica seletiva e não invasiva em diversas áreas da saúde, incluindo a Medicina Regenerativa. Neste trabalho, propomos o seu estudo na reparação e regeneração tecidual, pela utilização de um fármaco fotossensibilizante associado a um sistema de veiculação e sua ação fotobiológica, monitorada pela atividade celular (sistemas 2D e 3D). Para superar limitações do modelo celular convencional em monocamada, tais como baixa interação célula-célula e célula-matriz extracelular, propomos o uso de modelos tridimensionais de pele (denominados equivalentes dérmicos). Desta forma, algumas condições existentes in vivo podem ser mimetizadas in vitro, conduzindo à observação de um comportamento mais próximo à situação real. Os equivalentes dérmicos foram preparados através do cultivo celular em uma matriz de colágeno tipo I, que foi extraído de tendões da cauda de ratos Wistar. Foram escolhidas duas linhagens celulares para a padronização dos modelos tridimensionais: fibroblastos NIH/3T3 (ATCC® CRL-1658TM) e células-tronco humanas HBMS (Human Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells, ATCC® PCS-500-012TM). Os ED produzidos foram monitorados por um período de 14 dias para o estudo do perfil de cinética de contração e também observamos a formação da matriz tridimensional de colágeno através da microscopia óptica. O perfil de contração observado é mais acentuado nos primeiros dias e tende a se estabilizar no final do período analisado. Fatores como concentração celular e de colágeno interferem nesta cinética. Estudos de histologia, microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia confocal também foram realizados para melhor caracterizar o modelo. Em uma segunda etapa deste trabalho, estudos de fotobiomodulação foram conduzidos nestes modelos celulares, associando-se o uso de fotoprocessos com luz visível de baixa intensidade (doses 70, 140 e 300 mJ/cm2) e o fármaco fotossensibilizante ftalocianina de cloro alumínio (ClAlPc), veiculado em um sistema de liberação nanoestruturado clássico do tipo nanoemulsão. A expressão de metaloproteinases de matriz (MMPs), enzimas associadas a eventos biológicos de remodelação da matriz extracelular, foi avaliada através da técnica de zimografia. / Photodynamic Process applied to biological systems has been used in vitro and in vivo as selective and noninvasive modality in several areas including Regenerative Medicine. In this research project, we propose to study wound healing and tissue regeneration, induced by the use of a photosensitizer drug into 2D and 3D cellular models. In order to perform experiments with high level of biological complexity, we propose to use three-dimensional tissue models (called dermal equivalents). The aim is to mimic in vitro, the conditions existing in in vivo, such as cell-cell contact and cell-extracellular matrix interactions, which cannot be observed in monolayer cultures. The dermal equivalents were obtained combing fibroblasts cells NIH /3T3 (ATCC® CRL-1658TM) or Human Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells (ATCC® PCS-500-012TM) with collagen matrix. Collagen type I was obtained from tail tendons of Wistar rats. The three-dimensional model was monitored over 14 days and to study the kinetic contraction, the diameter of each disc was measured. Also, the collagen matrix was evaluated by bright field microscopy. The classical profile observed is more pronounced in the early days and tends to stabilize at the end of the period. This kinetic can be modified by the concentration of cells and collagen. Histological analyses, scanning electron microscopy (SEM) and confocal microscopy were also important to describe this model. Second, photobiology tests were performed, combining low-intensity laser (70, 140 e 300 mJ/cm2) and a classical Chloro Aluminum Phthalocyanine photosensitizer drug encapsulated into polymeric nanoemulsion. Matrix metalloproteinases (MMPs) expression in the cell culture was evaluated by zymography. These are endopeptidases associated with wound healing and remodeling processes.

O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) é um produto derivado de células sanguíneas obtido por centrifugação, o qual contém uma alta concentração de fatores de crescimento em um pequeno volume de plasma. Este procedimento é utilizado desde a década de 1950 e vem crescendo amplamente para aplicação em diversas áreas como na Ortopedia, Odontologia, Cardiologia, Oftalmologia, Dermatologia, e para uso no reparo de feridas crônicas, especialmente em pacientes diabéticos ou com complicações venosas, feridas em mucosas, tecidos conjuntivos, patologias do sistema músculo-esquelético, superfície de fratura, enxerto ósseo entre outros. Nessas situações, observa-se um comprometimento dos níveis ideais de fatores de crescimento nas fases de cicatrização, por esse motivo vê-se a importância de manter os níveis adequados dos fatores de crescimento nas diferentes fases do reparo tecidual. O preparo de PRP por não ser padronizado pode comprometer a eficácia do tratamento, pois o número de células pode variar em cada paciente e a cada isolamento, e por consequência, a quantidade dos fatores de crescimento podem ser variáveis. As coletas de sangue são invasivas para o paciente, sendo dispendiosas em tempo e mão-de-obra ao procedimento operacional, implicando no aumento do custo. O preparo antecipado do PRP com possibilidade de armazenamento para o uso nas aplicações durante o tratamento pode ser uma solução importante para acelerar a regeneração tecidual e evitar o desconforto do paciente, que muitas vezes já não tem uma boa qualidade de vida. Portanto, o presente estudo visou comparar a diferença no processo de cicatrização durante sete dias em um modelo de lesão no dorso de rato nude com a aplicação de PRP humano obtido a fresco e PRP armazenado por liofilização e estocado a temperatura ambiente durante 18 dias, preparados a partir de dois diferentes doadores, comparados à aplicação do fator de crescimento derivado de plaquetas BB humano recombinante (rhPDGF-BB), um dos fatores de crescimento mais abundante no PRP. Os resultados mostraram eficácias comparadas nos tratamentos das feridas com rhPDGF-BB (controle 11 positivo) e com os PRPs fresco ou aramazenado a temperatura ambiente, de ambos os doadores, indicando a possibilidade de coleta de sangue do paciente apenas uma única vez e estocagem do mesmo até a reconstituição do produto no dia da aplicação, possibilitando o oferecimento de um tratamento de maior qualidade e menor invasividade ao paciente. Não houve diferença estatística significativa nos tratamentos das feridas com os PRPs fresco ou armazenado obtidos dos dois doadores, indicando que os valores de plaquetas dos doadores (189.000 e 216.000/mm3) foram adequados para o processo de regeneração tecidual. Este trabalho mostra a possibilidade do estoque do PRP, preparado a partir do sangue do paciente, em diversas alíquotas liofilizadas e estéreis a temperatura ambiente, o que poderá facilitar a aplicação do produto, possibilitando seu uso até mesmo em domicílio, e, consequentemente, uma melhora na qualidade de vida deste paciente. Também aponta para um protocolo de preparo rápido e efetivo para pacientes com até 189.000 plaquetas/ mm3, com atividade biológica testada in vivo, visando a preparação de PRP. / Platelet Rich Plasma (PRP) is a blood cell derived product obtained by centrifugation, which contains a high concentration of growth factors in a small volume of plasma. This procedure has been used since the 1950s and has been widely used in various areas such as Orthopedics, Dentistry, Cardiology, Ophthalmology, Dermatology for use in chronic wound repair, especially in diabetic patients or patients with venous complications, mucosal wounds, connective tissues, pathologies of the musculoskeletal system, fracture surface, bone graft, among others. In scarring and deficient tissues, there is an impairment of the ideal levels of growth factors in the wound healing phases. Therefore, it is important to maintain adequate levels of growth factors in all the different stages of tissue repair. The preparation of PRP is a non-standard procedure, with variable results being observed in the literature, being able to be involved with the amount of growth factors and methods of preparation. Usually, more than one PRP application is required involving a new blood collection for each application in order to accelerate tissue regeneration. The blood collections are invasive for the patient, being expensive in time and labor in the operational procedure, implying in the increase of the cost. The early preparation of PRP with possibility of storage for use in future applications during treatment could be an important solution to avoid the discomfort of patients, who often no longer have a good quality of life. Therefore, the present study aimed to compare the difference in the healing process for seven days in a nude rat dorsal lesion model, treated with human fresh PRP or stored PRP (prepared by lyophilization and stored at room temperature for 15 days, from two different donors, and compared to the application of recombinant human BB platelet-derived growth factor (rhPDGF-BB), one of the most abundant growth factors in PRP. The results showed comparative efficacies in the treatments of wounds with rhPDGF-BB (positive control) and with fresh PRPs or room temperature stored PRP of both donors, indicating the possibility of collecting blood from the patient only once and storing the same until the reconstitution of the product on the day of application, allowing the offer of a 13 treatment of higher quality and less invasiveness to the patient. There was no statistically significant difference in wound treatments with fresh or stored PRPs obtained from the two donors, indicating that donor platelet values (189,000 and 216,000/mm3) were adequate for the tissue regeneration process. This work shows the possibility of PRP stock, prepared from the patient\'s blood, in several sterile freeze-dried aliquots at room temperature, which may facilitate the application of the product, allowing its use even at home, and, consequently, an improvement in the quality of life of this patient. It also points to a fast and effective preparation protocol for patients with up to 189,000 platelets/mm3, with biological activity tested in vivo, aiming at the preparation of PRP.

Orientador: Yasmin Rodarte Carvalho / Banca: Rubens Guimarães Filho / Banca: Carla Roberta Tim / Banca: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Banca: Mônica Ghislaine Oliveira Alves / Resumo: Estudos anteriores sugerem que o ácido hialurônico (AH) e o plasma rico em plaquetas (PRP) têm potencial para melhorar o processo de cicatrização da cartilagem e diminuir a progressão da osteoartrite. No entanto, poucas pesquisas avaliam seu efeito sinérgico. Este trabalho tem como objetivo avaliar o efeito do AH associado ao PRP na regeneração do disco articular e da superfície osteocondral da articulação temporomandibular (ATM). A osteoartrite será induzida por meio da perfuração bilateral do disco articular de coelhos. Quarenta coelhos foram divididos em 4 grupos, conforme o procedimento: sem lesão(SL)/sem tratamento(ST) (n=4), lesão(L)/sem tratamento (ST) (n=12), L/AH (n=12), L/AH+PRP (n=12). Quatro coelhos do grupo SL/ST foram eutanasiados no tempo zero. Após 8 e 24 semanas da perfuração dos discos articulares, seis coelhos dos grupos L/ST, L/AH e L/AH+PRP foram eutanasiados. O disco articular foi avaliado radiograficamente para visualizar possíveis calcificações. Foi realizada análise macroscópica e histológica do disco e do côndilo mandibular. Foi utilizada a análise histoquímica por Picrosirius Red para avaliar a presença de colágeno I e III e a análise imuno-histoquímica do colágeno I e II. As porcentagens de marcação obtidas nas análises histoquímica e imuno-histoquímica foram avaliadas estatisticamente, adotando-se o nível de significância de 5%. Macroscopicamente, o disco articular nos grupos tratados apresentou, na maioria dos espécimes, preenchimento parcial ou ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract : Previous studies have suggested that hyaluronic acid (HA) and platelet-rich plasma (PRP) have the potential to improve the healing process of cartilage and decrease the progression of osteoarthritis. However, few studies have evaluated their synergistic effect. This study aims at evaluating the effect of HA associated with PRP on the regeneration of the articular disc and the osteochondral surface of the temporomandibular joint (TMJ). Osteoarthritis was induced by means of bilateral perforation of the articular disc of rabbits. Forty rabbits were divided into 4 groups, according to the procedure: without lesion (WL)/without treatment (WT) (n = 4), lesion (L)/without treatment (WT) (n = 12), L/HA (n = 12), L/ HA+PRP (n = 12). Four rabbits from group G1 were euthanized at time zero. After 8 and 24 weeks of joint disc perforation, six rabbits from groups L/WT, L/HA and L/HA+PRP were euthanized. The articular disc was evaluated radiographically to visualize possible calcifications. Macroscopic and histological analysis of the disc and the mandibular condyle were performed. The histochemical analysis by Picrosirius Red was used to evaluate the presence of collagen I and III, as well as the immunohistochemical analysis was used to evaluate the expression of collagen I and II. The percentages of staining obtained from the histochemical and immunohistochemical analysis were statistically evaluated, adopting the significance level of 5%. Macroscopically, the articular disc in the treated groups presented in most of the specimens partial or total filling of the defect created. The condyles presented, in most of the specimens, degeneration of the osteochondral surface. Radiographically, after 24 weeks of disc perforation, foci of radiopacity were observed in the untreated and in some of the specimens of treated groups. Histological analysis confirmed the presence ......(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-31Bitstream added on 2014-06-13T20:05:23Z : No. of bitstreams: 1 martins_tm_dr_araca.pdf: 622083 bytes, checksum: b164d76ff1eb9d604ddcefbda1146d1a (MD5) / O objetivo do presente estudo foi avaliar histológica e histometricamente a cicatrização de defeitos de deiscência periodontal associados ao aplainamento radicular tratados com enxerto de tecido conjuntivo subepitelial (ETC) ou Membrana Bioabsorvível (MB), cada qual comparado ao tratamento com Retalho Posicionado Coronal (RPC). Foram utilizados 12 cães, divididos em dois grupos de 6. Defeitos de deiscência óssea (6x8 mm) e o aplainamento radicular foram realizados nos caninos superiores e os grupos divididos, seguindo um modelo de boca dividida de acordo com o tratamento. Os caninos esquerdos serviram como controle (RPC), onde o retalho foi somente posicionado coronalmente. Os caninos direitos receberam os tratamentos com ETC ou MB. Após 3 meses pósoperatórios os animais foram submetidos à eutanásia e os blocos processados para análise histológica e histométrica. Os parâmetros histométricos avaliados incluíram extensão de tecido epitelial (TE), extensão da nova inserção de tecido conjuntivo (NITC) e extensão da aposição de tecido conjuntivo (ATC), extensão de novo cemento (NC) e extensão de novo osso (NO). Histologicamente, o grupo MB mostrou significativamente maiores NC, NO e NITC (4.12±1.24; 2.44±0.78; 1.80±0.39, respectivamente) em comparação ao grupo RPC (1.04±0.43; 0.93±0.23; 0.71±0.45, respectivamente) (P<0.05) e significativamente menor ATC (0.29±0.33) comparado aos grupos RPC (2.79±1.74) e ETC (2.62±1.52) (P<0.05). A NITC no grupo ETC (0.71±0.36) foi significativamente menor, enquanto a ATC (2.62±1.52) e TE (1.70±0.53) foram significativamente maiores comparado ao grupo MB (1.80±0.39; 0.29±0.33; 1.00±0.35, respectivamente) (P<0.05). Dentro dos limites deste estudo, concluiuse que o grupo MB mostrou melhores resultados histológicos de nova inserção de tecido conjuntivo, formação de novo osso e novo cemento em relação aos grupos RPC e ETC. / The aim of the present study was to evaluate histologically and histometrically the healing of periodontal dehiscence defects associated to root planing treated with subepithelial connective tissue graft (CTG) or Bioabsorbable Membrane (BM), each one compared to the treatment with Coronally Positioned Flap (CPF). Twelve dogs were used, divided into two groups of six elements. Bone dehiscence defects (6x8 mm) and root planing were accomplished in the upper canine and the groups were divided, following a model of divided mouth according to the treatment used. Left canine were used as control (CPF), where the flap was only coronally positioned. Right canine received treatments with CTG or BM. After three postoperative months, the animals were euthanized and the blocks were processed for histological and histometrical analysis. The evaluated histometric parameters included lenght of epithelial tissue (TE), new attachment (NACT) and connective tissue aposition (CTA), new cementum (NC), and new bone (NB). Histologically, group BM showed significant higher values of NC, NO and NITC (4.12±1.24; 2.44±0.78; 1.80±0.39, respectively) in comparison to the group CPF (1.04±0.43; 0.93±0.23; 0.71±0.45, respectively) (P<0.05) and significant lower values of ATC (0.29±0.33) in comparison to the groups CPF (2.79±1.74) and CTG (2.62±1.52) (P<0.05). NITC in group CTG (0.71±0.36) was significantly lower, while ATC (2.62±1.52) and TE (1.70±0.53) were significantly higher in comparison to group BM (1.80±0.39; 0.29±0.33; 1.00±0.35, respectively) (P<0.05). Within the limits of this study, it can be concluded that group BM showed better histological results of connective tissue new attachment, new bone and new cementum formation in comparison to groups CPF and CTG.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-14Bitstream added on 2014-06-13T20:11:30Z : No. of bitstreams: 1 iamaguti_ls_me_botfmvz.pdf: 753163 bytes, checksum: 213a9899967bd02b03e8f98c82bf083c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicação de membrana biossintética de celulose (MBC) nacional, após a realização de trocleoplastia experimental em cães, com intuito de verificar se o uso desta poderia favorecer a migração de células com potencial condrogênico, assim como ocorre no tecido ósseo. A evolução pós-operatória dos cães foi analisada com especial interesse nos processos de reparação frente ao defeito osteocondral, estabelecendo as vantagens e desvantagens do uso do biomaterial. Foram utilizados 12 cães (Canis familiaris) adultos, sadios e sem alterações no aparelho locomotor. Todos os animais foram submetidos ao procedimento de trocleoplastia bilateral, sendo que a MBC foi aplicada no membro esquerdo. Os animais foram avaliados clínica e radiograficamente aos 15, 30, 60 e 90 dias de pós-operatório. A função locomotora do membro foi avaliada em escores pré-definidos, nos referidos momentos. A avaliação macroscópica da articulação foi realizada, nos momentos pré-estabelecidos, seguida da artrotomia exploratória, bem como da coleta de biópsia para o exame microscópico. Todos os animais apresentaram função normal dos membros nos momentos avaliados. Não houve diferença clínica e radiográfica entre os grupos controle (GC) e tratado (GT). Na avaliação histopatológica, aos 30 dias, notou-se intensa celularidade em ambos os grupos, sendo que no GC esta era constituída por fibroblastos ativos e no GT por condrócitos imaturos, formando um tecido conjuntivo mais organizado. O GC apresentava fibrose e muitos fibroblastos aos 60 dias, enquanto o GT apresentava maior número de condrócitos. Aos 90 dias, constatou-se formação de tecido do tipo fibrocartilaginoso maduro em ambos os grupos. Histomorfometricamente, o GT apresentou melhor resposta ao processo de reparação nos momentos iniciais quanto ao número de células e espessura do tecido... / The aim of this study was to evaluate the application of national biosynthetic cellulose membrane after experimental trochleoplasty, to verify if its utilization could support chondrogenic cells migration like occurs in osseous tissue. The advantages and disadvantages of the use of this biomaterial were evaluated through the observation of the reparative process of the osteochondral injury. Twelve adult healthy dogs (Canis familiaris) were used. All dogs were submitted to trochleoplasty in both pelvic limbs and the biosynthetic cellulose membrane was applied in the left limb. Clinical and radiographic evaluation was performed at 15, 30, 60 and 90 postoperatively. The locomotor function of the limb was evaluated in scores on the differents moments. The joint macroscopic evaluation was performed before exploratory arthrotomy and biopsy for microscopic exam. All dogs showed normal function of the limbs in all differents moments. Radiographic results showed no difference in control (CG) and treated groups (TG). Microscopic results showed at 30 days an increase of the celularity in both groups was observed. In the CG it was constituted by active fibroblasts and in TG by immatures condrocytes forming a more organized connective tissue. In the CG a fibrous tissue and many fibroblasts appear at 60 days and in the TG more condrocytes appear. A mature fibrocartilaginous tissue formed in both groups at 90 days. Histomorphometrically, TG presents better response of repair process in the fist moments as the number of cells and the tissue thickness. The biosynthetic cellulose membrane didn't cause deleterious effects showing good adaptation in intrarticular environment...(Complete abstract, access undermentioned eletronic address)

Orientador: Joni Augusto Cirelli / Banca: José Eduardo Cezar Sampaio / Banca: Elton Gonçalves Zenóbio / Resumo: Este trabalho teve como objetivo determinar as reações teciduais em lesões de furca Grau II em 2ºs pré-molares de cães após tratamento com matriz mineral óssea bovina e membrana absorvível e movimentação ortodôntica de translação para mesial. Foram criadas lesões de furca Grau II nos 2º pré-molares superiores de 4 cães, totalizando 8 lesões. Após 75 dias, estas foram tratadas pela técnica de Regeneração Tecidual Guiada com membrana absorvível associada ao preenchimento com matriz mineral óssea bovina. Deu-se início ao controle de placa com gel de clorexidina 0,2% 5 vezes por semana até o final do estudo. Após 2 meses do tratamento, os 2ºs pré-molares foram divididos aleatoriamente em dois grupos (teste e controle) e foi instalado aparelho ortodôntico em ambos os lados, sendo os 3ºs pré-molares e caninos superiores usados como ancoragem. No lado teste a movimentação ortodôntica foi realizada durante 3 meses. Os animais foram sacrificados, e os 2ºs pré-molares removidos em bloco e processados para análise histológica. Não houve diferenças estatisticamente significantes entre os grupos em relação a área total de preenchimento ósseo, de biomaterial e extensão linear de regeneração periodontal na superfície radicular. Porém, houve uma tendência do grupo teste apresentar maior quantidade óssea e menor quantidade de biomaterial, além de deslocamento do biomaterial para o lado de pressão na região de furca, no grupo teste. / Abstract: The aim of this study was to establish the tissue reactions on Degree II furcation lesions in the 2nd premolars of dogs after treatment with bovine osseous mineral source, absorbable membrane and orthodontic movement of translation to mesial and also evaluate the effect of movement on the grafting material used. It was produced Degree II furcation lesions in upper second premolars of 4 dogs, resulting in 8 lesions. After75 days, they were treated by the method of Guided Tissue Regeneration with absorbable membrane associated with bovine osseous mineral source. The plaque control was started with 0,2% chlorhexidine gel, 5 times a week until the end of the study. After 2 months of treatment, the second premolars were randomly divided in two groups (test and control) and it was installed orthodontic appliance in both sides, using the third premolars and upper canine as anchorage. The orthodontic movement was achieved only in the test side, during 3 months. The animals were sacrificed and the second premolars were removed in block and processed for histological analysis. There weren't any differences that were statistically significant among the groups with relation to the total area of osseous filling, biomaterial and linear periodontal regeneration. However, there was a trend of the group to present more osseous amount and less biomaterial amount, besides the dislocation of the biomaterial for the furcation pressure side. The orthodontic movement could be done without intercurrences. Key- words: Periodontics; Guided tissue regeneration; Biocompatible materials; Orthodontic. / Mestre

Orientador: Joni Augusto Cirelli / Banca: Luís Carlos Spolidorio / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Marcio Fernando de Moraes Grisi / Banca: Elton Gonçalves Zenóbio / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar histomorfometricamente o efeito do plasma rico em plaquetas (PRP), associado a enxerto ósseo autógeno e a membrana absorvível (Resolut®), no tratamento de lesões de furca grau III. Foram criados defeitos cirúrgicos nos 3os pré-molares inferiores (P3) de cinco cães, de ambos os lados, totalizando 10 dentes. Após um período de três meses de cronificação, as lesões foram divididas aleatoriamente em dois grupos de tratamento. (1) Grupo teste: PRP + enxerto ósseo autógeno + membrana; (2) Grupo controle: enxerto ósseo autógeno + membrana. Após um período de cicatrização de 90 dias, os animais foram sacrificados. A análise histológica, a partir da marcação, mostrou formação de novo cemento celular, mínima quantidade de novo osso e ligamento periodontal, em ambos os grupos. Nenhuma diferença estatisticamente significante foi observada entre os grupos teste e controle. A associação do PRP ao enxerto ósseo autógeno e membrana, ou somente, do enxerto ósseo autógeno e membrana, não apresentou vantagens estatisticamente significantes no tratamento das lesões, resultando em preenchimento parcial das furcas e regeneração periodontal limitada à marca experimental das lesões. / Abstract: The objective of this study was to evaluate histomorphometrically the platelet-rich plasma (PRP) effects, associated with autogenous bone graft and absorbable membrane (Resolut®), for the treatment of Class III furcation defects, in 5 dogs. Surgical defects were created in the 3nd mandibular premolars (P3) on both sides, of each dog, totaling 10 teeth. After a period of three months of chronified, the defects were randomly divided in two treatment groups. (1) Group Tests: PRP + graft bone autogenous + membrane; (2) Group Control: graft bone autogenous + membrane. Animals were sacrificed after 90 days healing. Histologic evaluation revealed new cellular cementum, low amount of bone and periodontal ligament formation in both groups, starting from the demarcation. No statistically significant difference was observed between Groups Test and Control. PRP + autogenous bone graft + membrane or autogenous bone graft + membrane no present statistically significant advantages on the lesions treatment, resulting in furcation partial filling and periodontal regeneration limited to the experimental mark of the lesions. / Doutor

Os avanços relacionados à ciência dos biomateriais e engenharia tecidual buscam esclarecer os mecanismos envolvidos na resposta biológica associada ao uso desses dispositivos e sua interação com o sistema imune. Neste estudo, avaliou-se a resposta imune e inflamatória desenvolvida em camundongos frente à implantação de membrana de cortical óssea bovina no tecido subcutâneo, em implantação única e sequencial de duas membranas, assim como os possíveis mecanismos envolvidos no processo de reconhecimento e reabsorção desse biomaterial, de acordo com análise histomorfométrica, enzimática e molecular. Após a implantação da membrana, sinais de reabsorção que antes eram notados em pontos isolados, aos poucos se unem até sua completa degradação, observada somente após 15 dias. Todo o processo de reabsorção da membrana é acompanhado por uma reação inflamatória de magnitude moderada, seguida pelo declínio do número de leucócitos, surgimento de células gigantes multinucleadas e formação de uma cápsula de tecido conjuntivo fibroso. A cinética de TNF- e MMP-2, MMP-8, MMP-9 e MMP-13 apresentou um padrão de produção decrescente, entretanto os níveis dos inibidores de metaloproteinases (TIMPs) e TGF- parecem atuar de forma inversa. A velocidade de reabsorção após duas implantações consecutivas da membrana foi maior quando comparada ao grupo de animais que sofreu apenas uma implantação, porém os resultados do teste de hipersensibilidade do tipo tardia (DTH) demonstraram que a membrana é biocompatível, pois não elicitou resposta imunológica exacerbada após uma segunda implantação, confirmando então a natureza não imunogênica desse biomaterial. Finalmente, os animais CD14KO e MyD88KO apresentaram uma reabsorção mais lenta da membrana implantada, quando comparados aos animais C57Bl/6 (WT), demonstrando que as moléculas CD14 e MyD88 estão envolvidas no reconhecimento do biomaterial e desempenham importante papel no processo de reabsorção da membrana de cortical óssea bovina, indicando a participação de PAMPs e/ou DAMPs na resposta biológica gerada por esse biomaterial. / Advances related to the biomaterials science and tissue engineering seek to clarify the mechanisms involved in the biological response associated with the use of those devices and their interaction with the immune system. This study evaluated the inflammatory and immune response developed in mice after implantation bovine bone cortical membrane in subcutaneous tissue, in both, unique and sequential implantation of 2 membranes, as the mechanisms involved in this biomaterial recognition and resorption process, on regards to histomorphometric, enzymatic and molecular analysis. After membrane implantation, previously observed signs of resorption in isolated spots, gradually unite until their complete degradation after 15 days. The whole membrane resorption process is accompanied by a moderate inflammatory reaction, followed by a decline in the leukocytes number, appearance of multinucleated giant cells and formation of a capsule of fibrous connective tissue. The kinetics of TNF-, MMP-2, MMP-8, MMP-9 e MMP-13 showed a pattern of decreasing production, however, levels of metalloproteinases inhibitors (TIMPs) and TGF- seem to act in reverse way. The resorption rate after two successive membrane implantations was higher when compared to the group which suffered only one implantation, however, the results of delayed test hypersensity (DTH) demonstrated that the membrane is biocompatible, that is, it does not elicited too high immune response after a second position, confirming the non immunogenic nature of this biomaterial. Eventually, CD14KO and MyD88KO strains showed a slower membrane resorption when compared to animals C57Bl/6, demonstrating that the CD14 and MyD88 molecules are involved in biomaterial recognition and play an important role in bovine cortical bone membrane resorption process, indicating that PAMPs and/or DAMPs are involved in biological response generated by this biomaterial.

Recent researches in bioengineering allow the production of three-dimensional biodegradable scaffolds to act as temporary support in bone tissue regeneration. In this perspective, the in vitro behavior of porous 3D scaffolds based on sodium alginate (SA), silk fibroin (SF) and hydroxyapatite (HA) at different proportions was evaluated as follows: group I: SA (100 wt.%), group II: SA/SF/HA (25:25:50 wt.%), group III: SA/SF/HA (50:25:25 wt.%), group IV: SA/SF/HA (35:35:30 wt.%), face to MC3T3-E1 and MG-63 cells, for a possible application in bone tissue engineering. Physical-chemical analyzes were performed using Fourier transform infrared spectroscopy and X ray diffraction, in order to demonstrate the physical interaction of the materials in the composite. In addition, the thermal degradation behavior of the scaffolds was assessed by thermogravimetric analysis and differential scanning calorimetry which provided an understanding of possible thermal events. Morphological changes and microstructure analyzes were observed in a bioactivity assay and by computerized microtomography, respectively. Finally, we conclude that regardless of composition, all the scaffolds produced have a topography and microstructure composition capable of promoting osteogenic adhesion, proliferation and differentiation, more effectively, as verified by biological assays. However, the frameworks were considered biocompatible and therefore feasible for use as supports in the regeneration of bone tissue. / Pesquisas recentes na bioengenharia permitem a produção de arcabouços tridimensionais biodegradáveis, para atuarem como suporte temporário na regeneração tecidual óssea. Nessa perspectiva, foi produzido, caracterizado e avaliado o comportamento in vitro de arcabouços 3D porosos, à base de alginato de sódio (AS), fibroína da seda (FS) e hidroxiapatita (HA), em diferentes proporções: grupo I: AS (100 % da composição), grupo II: AS/FS/HA (25:25:50 % da composição), grupo III: AS/FS/HA ( 50:25:25 % da composição), grupo IV: AS/FS/HA (35:35:30 % composição), com o propósito de avaliar a influência da composição frente às células das linhagens MC3T3-E1 e MG-63. Análises físico-químicas foram realizadas através de espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier e difração de raios X, a fim de investigar a interação física dos materiais no compósito. Além disso, o comportamento de degradação térmica dos arcabouços foi estudado, por análise termogravimétrica e calorimetria exploratória diferencial, que forneceu compreensão dos possíveis eventos térmicos ocorridos. Alterações morfológicas e análises de microestrutura foram observadas em ensaio de bioatividade e por microtomografia computadorizada respectivamente. Por fim, concluímos, que independente da composição, todos os arcabouços produzidos possuem uma composição topográfica e de microestrutura capazes de promover adesão, proliferação e diferenciação osteogênica, de forma mais eficaz, como verificado por ensaios biológicos. Entretanto os arcabouços foram considerados biocompatíveis sendo, portanto, viáveis para utilização como suportes na regeneração do tecido ósseo. / São Cristóvão, SE