Submitted by Heitor Rapela Medeiros (heitor.rapela@ufpe.br) on 2015-03-06T13:17:24Z No. of bitstreams: 2 versão digital DISSERTAÇÃO LIANY BARROS RIBEIRO.pdf: 876687 bytes, checksum: c28f039fa113b4f7870246ea4b20e689 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-06T13:17:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 versão digital DISSERTAÇÃO LIANY BARROS RIBEIRO.pdf: 876687 bytes, checksum: c28f039fa113b4f7870246ea4b20e689 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-03-01 / Os dados sobre tuberculose multirresistente são escassos no grupo dos vinte e dois países responsáveis por 80% dos casos de tuberculose no mundo. No Brasil, há poucos dados consolidados sobre a prevalência de multirresistência. Esta pesquisa teve como principal objetivo verificar a resistência primária e adquirida à pirazinamida em isolados de Mycobacterium tuberculosis provenientes de amostras de escarro de pacientes com tuberculose pulmonar, assim como a sensibilidade às outras drogas de primeira linha antituberculose. O estudo foi prospectivo, descritivo, realizado no período de abril a novembro de 2011, em hospital de referência para tratamento de tuberculose no estado de Pernambuco. Utilizou-se formulário próprio da pesquisa. Cultura e testes de sensibilidade para micobactérias e o teste da produção da pirazinamidase foram realizados em laboratório particular de Recife. Para análise dos dados foram utilizadas distribuições absolutas e percentuais uni e bivariadas para as variáveis categóricas e foram utilizados os testes: t-Student com variâncias iguais e Qui-quadrado de Pearson ou o teste Exato de Fisher quando as condições para utilização do teste Qui-quadrado não foram verificadas. Dos 71 pacientes incluídos no estudo, todos (37) do grupo virgem de tratamento (VT) foram sensíveis a pirazinamida, 1/37 (2,7%) foi resistente à isoniazida e 1/37 (2,7%) foi resistente à estreptomicina. No grupo em retratamento (RT), 29/34 (85,3%) eram resistentes à isoniazida, 22/34 (64,7%) à rifampicina, 19/34 (55,9%) ao etambutol, 17/34 (50,0%) à estreptomicina, 14/34 (41,2%) à pirazinamida e 12/14 (85,7%) dos isolados resistentes à Z também apresentavam resistência à H e à R. Todos os isolados pertencentes ao grupo VT e susceptíveis à pirazinamida produziram pirazinamidase. Entre as cepas de M. tuberculosis recuperadas de pacientes do grupo RT, 10 (90,9%) que exibiram PZase inativa apresentaram resistência à Z. Por outra parte, 19 (82,6%) dos isolados PZase positivos eram sensíveis àquela droga. Os resultados do estudo sugerem que a elevada frequência de cepas resistentes à pirazinamida (41,2%) em pacientes com falha terapêutica para tratamento da tuberculose destaca a necessidade de realização de testes de sensibilidade à pirazinamida antes de se escolher novo esquema de resgate.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-10T22:11:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Michael Williames Leal Quirino.pdf: 1612594 bytes, checksum: efd1d05bd549ad9943e822fd7c434eb4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T22:11:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Michael Williames Leal Quirino.pdf: 1612594 bytes, checksum: efd1d05bd549ad9943e822fd7c434eb4 (MD5) Previous issue date: 2016-03-15 / CNPQ / INCT-IF / Os inibidores de topoisomerase se destacam entre os quimioterápicos usados na clínica, sendo capazes de interferir em processos vitais, como a transcrição e a replicação celular. Entretanto, muitos cânceres tornaram-se resistentes a esses inibidores, sendo cada vez mais necessário a busca de novos agentes anticâncer ou novas abordagens terapêuticas. Este trabalho teve como objetivo testar novas abordagens terapêuticas em células leucêmicas resistentes a inibidores de topoisomerase, a partir da avaliação da atividade antineoplásica de derivados tiofênicos e do uso de inibidores de N-glicosilação, afim de sensibilizar células tumorais ao tratamento. Inicialmente, foi utilizado o método de redução de redução do MTT para avaliar a citotoxicidade dos cinco derivados tiofênicos (SB-68,SB-30, SB-44, SB-83 e SB-200) junto a Células Mononucleares do Sangue periférico (PBMC), células tumorais HL-60 e células com perfil multidroga resistente HL6O/MX1, bem como determinar o IC50 dos inibidores de topoisomerase (etoposídeo, bisantreno, amsacrina e camptotecina) e a dose máxima não citotóxica dos inibidores de N-glicosilação (miglustato e tunicamicina). Modificações na progressão do ciclo celular, atividade de caspase 3/7 e a atividade de transportadores ABC foram avaliados por citometria de fluxo. Nas condições de associação a administração da tunicamicina foi realizada 24h antes do tratamento como inibidores de topoisomerase e o miglustato foi adicionado simultaneamente aos inibidores. Por fim ensaios de inibição de topoisomerase II foram realizados. Os derivados tiofênicos SB-83 e SB-200 maior citotoxicidade em células HL60/MX1 (IC₅₀ = 7.94 e 9.36 μM, respectivamente) e índice de seletividade maior que 3. Todos os derivados tiofênicos não foram capazes de induzir modificações no ciclo celular e na atividade de caspase 3/7, indicando que outros mecanismos de morte estão envolvidos na citotoxicidade dos SBs em HL60/MX1. Foi observado a atividade ABCC1 em HL60/MX1, muito embora sua ativação não altere o efeito citotóxico dos SB-200 e SB-83. A inibição da atividade de topoisomerase II foi observada em SB-83 (50 e 100 μM) e SB-200 (100 μM). A sensibilização com miglustato a 1 μM não alterou o efeito citotóxico dos inibidores de topoisomerase em HL60/MX1. Por outro lado, a sensibilização com tunicamicina se mostrou eficaz em aumentar a atividade citotóxica do bisantreno, sendo mais efetiva que a utilização do bloqueador de ABCC1. Ademais, SB-83 e SB-200 apresentam-se como grandes candidatos para o tratamento de leucemias agudas resistentes, bem como o uso de tunicamicina associada aos inibidores de topoisomerase. Entretanto, outros estudos são requeridos para avaliar o efeito de outras condições de sensibilização e para elucidar os mecanismos de indução de morte celular destes derivados tiofênicos. / Among chemotherapeutic agents used in clinical settings, topoisomerase inhibitors are one of the most important because they act directly interfering in cellular vital processes, such as transcription and replication. However, many cancer types have become resistant to treatment with these molecules, being necessary the search for more effective anticancer compounds or therapies. This study aimed to test two novel therapeutic approaches in leukemia cells resistant to topoisomerase inhibitors: evaluating anticancer activity of new thiophene derivatives and sensitizing cells resistant to topoisomerase inhibitors using N-glycosylation inhibitors. For this purpose, cytotoxicity assays were performed in multi-drug resistant cell lines HL-60/MX1 and CCRF-CEM/C2 in order to initially determine IC50 values of novel thiophene derivates. SB-83 showed the best value IC₅₀ = 7.94±2.26μM). Then were evaluated IC50 values of topoisomerase inhibitors currently used in clinical. In addition, optimal sensitizing concentrations of N-glycosylation inhibitors are being determined. Two new thiophene derivatives showed better cytotoxic activity when compared to topoisomerase inhibitors, and also a promising selectivity index. However, further assays need to be repeated and performed in order to achieve the main objective of this study.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências / Made available in DSpace on 2012-10-26T03:10:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 290960.pdf: 1513906 bytes, checksum: bc9577e279974bb51b5f0952e2edaa3b (MD5) / Florianópolis possui a segunda maior taxa de incidência de casos de AIDS entre as capitais brasileiras, mas pouco se sabe sobre a epidemiologia molecular do HIV-1 e a prevalência de resistência primária a drogas nesta cidade. Com o intuito de melhor entender a dinâmica da epidemia do HIV-1 na região metropolitana de Florianópolis foram analisadas as regiões genômicas do envelope, protease, transcriptase reversa e integrase do HIV-1 de 82 indivíduos soro-positivos e virgens de tratamento. A forma genética do HIV-1 mais freqüente foi o subtipo C (65,8%), seguido por cepas mosaico BC (18,3%), subtipo B (13,6%), subtipo F1 (1,2%) e uma forma recombinante BCF1 (1,2%). Uma associação estatisticamente significativa entre categorias de exposição e subtipos do HIV-1 foi observada no presente estudo. Mais de 75% das formas recombinantes BC e de sequências subtipo C pertenciam a sujeitos da categoria de exposição heterossexual, enquanto que 73% das sequências subtipo B eram provenientes da categoria HSH. Mutações de resistência a drogas foram observadas em 11% dos indivíduos estudados. O presente estudo confirma a alta prevalência de subtipo C e formas recombinantes BC no estado de Santa Catarina e revela uma diferença significante (?<0,05) na distribuição dos subtipos virais entre as diferentes categorias de exposição, bem como demonstra uma prevalência de mutações de resistência primária maior que a encontrada na maioria das cidades brasileiras.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-04-29T21:05:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 330536.pdf: 3500374 bytes, checksum: 15992ed423b9beb5fa061d0b05f86e13 (MD5) Previous issue date: 2014 / As Leishmanioses afetam cerca de 15 milhões de pessoas e constiuem um importante problema de saúde pública mundial. O controle da parasitose baseia-se principalmente na quimioterapia, usando como medicamento de primeira escolha o antimonial pentavalente SbV (Glucantime®). O surgimento de resistência aos fármacos de uso clínico, a ausência de vacinas eficazes, a propagação de vetores resistentes aos inseticidas tornam o controle das Leishmanioses difícil e complexo. Para entender melhor o papel dos macrófagos na Leishmaniose humana e estabelecer estratégias para prevenir os efeitos nocivos da Leishmania, dados sobre os padrões de expressão de genes e proteínas, em Macrófagos Derivados de Monócitos de Humanos (MDM) infectados com Leishmania sob condições de tratamento, são essenciais. Neste estudo, foram analisadas as alterações nos níveis de expressão de genes e proteínas de macrófagos humanos, durante a infecção in vitro por Leishmania braziliensis e tratamento com Glucantime usando qPCR-arrays, ensaios de Western blot, microscopia confocal e ensaios de inibição usando siRNA. Os resultados indicam que a infecção com L. braziliensis e o tratamento SbV conjuntamente, modulam a expressão de genes em macrófagos, em particular aqueles envolvidos na via de biossíntese da glutationa. Análises de correlação permitiram determinar superexpressão dos marcadores GSTP1, GCLM, GSR, GSS, TRX e ABCB5 tanto nos níveis do mRNA quanto das proteínas, em MDM de humanos infectados e tratados quando comparados ao grupo controle. O estudo da localização subcelular mostrou que o transportador ABCB5 apresenta uma localização predominantemente fagolisossomal, indicando que essa proteína poderia estar envolvida no transporte de Glucantime. Nos ensaios de inibição selectiva o silenciamento dos genes gstp1, gss e abcb5 aumentaram o efeito leishmanicida in vitro do SbV induzindo uma redução da sobrevivência intracelular de L. brazilienisis em macrófagos THP-1. Essa resposta foi igualmente confirmada para o gene gstp1 onde os resultados de tempo e concentração dependente mostraram que a redução da sobrevivência intracelular era observada 24h após exposição ao SbV e a uma dose menor. Nossos resultados sugerem que há uma ativação de genes envolvidos na defesa antioxidante em macrófagos humanos como resposta a infecção com L. braziliensis e o tratamento com Glucantime, potencializando a detoxificação do fármaco. Conclui-se que as proteínas GSTP1, GSS e ABCB5 seriam potenciais alvos candidatos para intervenção terapêutica mediante a inibição seletiva destes marcadores. <br> / Abstract: Leishmaniasis affects millions of people worldwide and represents a major public health problem. Leishmaniasis control relies primarily on chemotherapy, with the mainstay being pentavalent antimony (SbV) complexed to carbohydrates in the form of sodium stibogluconate (Pentostam®) or meglumine antimoniate (Glucantime®). Due to the emergence of drug resistance, the absence of effective vaccines and the spread of insecticide-resistant vectors, Leishmaniasis control is becoming extremely difficult and complex. To better understand the role of macrophages in human Leishmaniasis and to advance in new strategies to prevent the harmful effects of Leishmania parasites, information about the protein expression patterns in the context of Leishmania-infected human monocyte-derived macrophages (MDM) under drug treatment conditions are essential. In this study, we analyzed the changes in the expression levels of human MDM proteins during in vitro infection by Leishmania braziliensis and treatment with Glucantime using qPCR arrays, Western blot, confocal microscopy and siRNA inhibition assays. The results indicate that L. braziliensis infection/SbV treatment modulated the host gene expression, particularly in the glutathione biosynthesis pathway. Comparing results from gene transcription and protein expression analysis, allowed to determine that GSTP1, GCLM, GSR, GSS, TXN, and ABCB5 were strongly up-regulated at both mRNA and protein levels when compared to the control group. Subcellular localization studies showed mostly fagolissosomal location of the ABCB5 transportes, indicating that this protein may be involved in the transport of Glucantime. Selective inhibition assays by gene silencing siRNA assays of gstp1, gss and abcb5 showed an increased in vitro leishmanicidal effect to Sb exposure inducing a decrease in intracellular survival of L. brazilienisis in THP-1 macrophages. This response was also confirmed for gstp1 gene in which the results showed a time and dose-dependent effect in the reduction of intracellular survival where even at 24 hours of exposure to SbV and a lower dose of 8 mg/mL significant intracellular leishmanicidal effects were found. These analyses suggest that, modulations of human MDM by L. braziliensis infection and Glucantime treatment raise the activation of genes participating in antioxidant defense enhancing the drug detoxification. Therefore we concluded that GSTP1, GSS and ABCB5 proteins could be potential targets for therapeutic interventions by selective inhibition of these markers.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000445040-Texto+Completo-0.pdf: 2039522 bytes, checksum: 2f433c611b99e5b28cbd56ef7aed5bb1 (MD5) Previous issue date: 2010 / Rationale: Comorbidity between difficult-to-treat epilepsies and ADHD is high, but because of concerns with the use of stimulants in this population, there is no data on the possible impact of such treatment. Objective: We studied the effect of methylphenidate in the quality of life of children and adolescents with DSM-IV criteria for ADHD and difficult-to-treat epilepsies. Methods: Open label, non-controlled trial, with intention-to-treat analysis following 30 patients for 6 months. Subjects received methylphenidate following 3 months of baseline, during which antiepileptic drugs (AEDs) were adjusted and epilepsy, ADHD and quality of life variables were assessed. Multivariate regression analysis identified the main variables correlated with outcome. Results: Only one patient withdrew because of seizure worsening. Following methylphenidate introduction, reaching doses of 0. 40 - 0. 50 mg/kg/day, a marked improvement in quality of life scores and a significant reduction in seizure frequency and severity were observed. Female sex, reduction of core ADHD symptom burden and tolerability to adequate doses of methylphenidate correlated with quality of life scores. Conclusion: These preliminary data suggest that methylphenidate treatment is safe and effective to patients with ADHD and difficult-to-treat epilepsies and has a positive impact on quality of life scores. / Fundamentos - A associação entre epilepsia e TDAH é altamente prevalente comprometendo a Qualidade de Vida de crianças e adolescentes com crises epilépticas. Metilfenidato – Ritalina@ - é o medicamento de uso consagrado para o Transtorno de Déficit de Atenção/Hiperatividade com 80% de eficácia em crianças com TDAH com ou sem epilepsia. Questiona-se a possibilidade do MFD diminuir o limiar convulsivo dos pacientes epilépticos. Objetivos - Avaliar a influência do uso de Metilfenidato sobre a Qualidade de Vida e o perfil das crises epilépticas em crianças e adolescentes com epilepsias de difícil controle. Pacientes e Métodos - Foi realizado um ensaio clínico aberto, não randomizado, com 30 crianças e adolescentes do Ambulatório de Neuro-Epilepsias Graves apresentando crises de difícil controle e TDAH. Foram avaliadas quanto à Qualidade de Vida, sintomas de TDAH e perfil das crises antes e após o uso de MFD. Houve um ajuste/troca de FAE somente no tempo -3 (baseline). Metilfenidato foi iniciado após estes 3 meses (T 0) sem outras modificações nos FAE com avaliações 1 mês e 3 meses após. Foram avaliados também eventos adversos ao uso do MFD. Resultados - Ocorreu melhora da QV em todos os momentos avaliados: T -3 (baseline) a T0, T0 a T+1 e T+1 a T+3. A melhora ocorrida entre T-3 e T0, momento em que foi realizado o ajuste de FAE, não foi estatisticamente significativa. Nos tempos subseqüentes, com o uso de MFD, as variações de QV ocorridas apresentaram significância estatística. Ocorreu melhora da qualidade de vida com significância estatística em indivíduos do sexo feminino, os que apresentaram início mais tardio da doença e naqueles em houve maior diminuição dos escores de déficit de atenção. Os pacientes com crises generalizadas apresentaram piores índices de QV. Não houve associação estatisticamente significativa entre a variação da QV com a freqüência e/ou gravidade das crises, idade, duração da doença, QI, ocorrência de eventos adversos. Conclusões - Houve melhora da QV de pacientes epilépticos de difícil controle tratados com MFD sem que houvesse piora na freqüência ou gravidade das crises. Condizente com a literatura também não verificamos a presença de efeitos colaterais de gravidade significativa ao MFD. Estes dados preliminares sugerem a possibilidade da utilização deste fármaco no tratamento de crianças e adolescentes com crises epilépticas de difícil controle com a conseqüente melhora de QV destes pacientes.

Made available in DSpace on 2012-09-05T18:24:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 242.pdf: 2406045 bytes, checksum: a552ef271851578e23d08f3c12daaf28 (MD5) Previous issue date: 2005 / A tuberculose constitui problema prioritário de saúde pública no Brasil. As maiores taxas de incidência da doença concentram-se nas periferias das grandes cidades da região Sudeste e na região Amazônica, onde vive cerca de 60 por cento da população indígena no Brasil. Por causas ainda pouco esclarecidas, os povos indígenas são mais vulneráveis à tuberculose e experimentam cargas da doença muito superiores às observadas na população geral do país. Este estudo teve por objetivos investigar a freqüência, as formas clínicas e a associação de fatores clínico-biológicos com a infecção por M. tuberculosis entre o povo indígena Suruí. Utilizou-se das seguintes estratégias para abordagem do problema: a) identificação dos registros históricos disponíveis para a doença entre o grupo; b) busca ativa de sintomáticos respiratórios para determinar a prevalência de tuberculose ativa nas aldeias; c) análise dos padrões radiológicos dos doentes submetidos ao tratamento no período 2003-2004; d) estudo prospectivo, na forma de inquérito tuberculínico em duas fases e acompanhado de vacinação com BCG para estimar a prevalência de infecção por Mycobacterium tuberculosis e determinar o risco médio anual de infecção em 2005. (...) Por meio dos dados disponíveis ficou claramente demonstrada a maior vulnerabilidade dos Suruí à Tuberculose. Apesar da alta cobertura vacinal por BCG verificada entre o grupo, foi possível estimar a prevalência de infecção específica por M. tb com o método utilizado neste estudo. As evidências levantadas por esta investigação indicam a necessidade de se elaborar estratégias específicas para o controle da tuberculose entre os povos indígenas no Brasil, levando em consideração suas diferenças sociais, culturais e ambientais

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-06T00:39:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319055.pdf: 3105190 bytes, checksum: f462b93c678d315794c7ff809ddb0b6c (MD5) Previous issue date: 2013 / Menos de 45% dos portadores de leucemias agudas (LAs) sobrevivem cinco anos após o diagnóstico. O insucesso no tratamento relaciona-se, principalmente, à resistência à quimioterapia. O mecanismo mais comumente implicado na resistência a múltiplos fármacos (MDR) é a expressão de proteínas de membrana capazes de transportar para fora da célula moléculas citotóxicas, mantendo as concentrações intracelulares de quimioterápicos abaixo das desejadas. O objetivo deste trabalho foi investigar a expressão de abcb1/ABCB1, abcc1/ABCC1 e lrp/LRP como marcadores moleculares de diagnóstico diferencial, estratificação de prognóstico e detecção de doença residual mínima em portadores de LA atendidos pelo Serviço de Oncohematologia do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC). Para tanto, foram coletadas amostras de 75 portadores de LA. A análise da transcrição dos genes mdr foi verificada por RT-PCR semiquantitativo e a expressão das proteínas MDR foi avaliada por citometria de fluxo. Os resultados mostram que nos casos de LA, a expressão de ABCB1 e a atividade da LDH correlacionaram-se positivamente (P=0,001), a presença do marcador CD34 associou-se com a maior transcrição de abcc1 (P=0,006), e a maior transcrição de lrp associou-se com a ausência do marcador CD56 (P=0,029) e com a ausência de transcrição de survivina (P=0,029). Nos portadores de leucemia mieloide aguda (LMA), a transcrição de abcc1 e a idade dos pacientes correlacionaram-se positivamente (P=0,029), a ausência da transcrição de survivina associou-se com a maior transcrição de lrp (P=0,040), e a maior expressão de LRP associou-se com o diagnóstico de LMA (P=0,025). Nos portadores leucemia promielocítica aguda (LPA), as expressões de abcc1 e de LRP correlacionaram-se positivamente com o percentual de blastos leucêmicos ao diagnóstico (P=0,019 e P=0,001, respectivamente), e a expressão de ABCC1 correlacionou-se positivamente com a atividade da LDH (P=0,019). Nos casos de leucemia linfoide aguda (LLA) B, as expressões de ABCB1 e de abcc1 correlacionaram-se positivamente com a atividade da LDH (P=0,007 e P= 0,017, respectivamente), a expressão de ABCC1 correlacionou-se negativamente com a contagem de leucócitos ao diagnóstico (P=0,006), e a expressão de LRP correlacionou-se positivamente com o número de leucócitos ao diagnóstico (P=0,001) e associou-se com a presença da t(9;22)(q34;q11.2) (P=0,012). Nos casos de LLA-T, a transcrição de abcb1 e a contagem de leucócitos correlacionaram-se positivamente (P=0,007). Os pacientes com diagnóstico de LA que não entraram em remissão após a terapia de indução expressaram mais abcb1 do que aqueles que apresentaram remissão completa (P=0,004). Os portadores de LMA que não responderam à terapia de indução expressaram mais abcb1 e ABCC1 do que os que apresentaram remissão (P=0,005 e P=0,017, respectivamente). Além disso, os casos de LMA expressaram menos abcc1 após indução (P=0,016) e os de LPA expressaram mais LRP após a indução (P=0,025). Os resultados mostram que a análise de transcrição dos genes mdr fornece informações de prognóstico diferentes da análise das proteínas MDR. Diante disso, o presente estudo recomenda que no momento do diagnóstico dos portadores de LA seja realizada a avaliação simultânea da expressão dos genes abcb1, abcc1 e lrp e das proteínas ABCB1, ABCC1 e LRP de resistência à quimioterapia.<br> / Abstract : Less than 45% of patients with acute leukemia (ALs) survive five years after diagnosis. The failure in treatments relate primarily to chemotherapy resistance. The mechanism most commonly implicated in the multidrug resistance (MDR) is the expression of membrane proteins capable of carrying cytotoxic molecules out of the cell, which keeps intracellular concentrations of the chemotherapics below those desired. The aim of this study was to investigate the expression of abcb1/ABCB1, abcc1/ABCC1 and lrp/LRP as molecular markers for differential diagnosis, prognostic stratification and minimal residual disease detection in patients with AL treated by Oncohematology Service do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC). For this purpose, samples were collected from 75 patients with AL. Analysis of mdr genes transcription was assessed by semi-quantitative RT-PCR and MDR proteins expression was evaluated by flow cytometry. The results showed that in AL cases, ABCB1 expression and LDH activity were positively correlated (P=0.001), the presence of CD34 marker was associated with increased abcc1 transcription (P=0.006), and higher LRP expression was associated with the absence of CD56 marker (P=0.029) and with the absence of survivin transcription (P=0.029). In patients with acute myeloid leukemia (AML), the abcc1 transcription and the patients age were positively correlated (P=0.029), the absence of survivin transcription was associated with a bigger lrp transcription (P=0.040), and bigger LRP expression was associated with AML diagnosis (P=0.025). In patients with acute promyelocytic leukemia (APL), abcc1 and LRP expressions were positively correlated with the percentage of blasts at diagnosis (P=0.019 and P=0.001, respectively), and ABCC1 expression was positively correlated with LDH activity (P = 0.019). In B acute lymphoid leukemia (ALL) cases, ABCB1 and abcc1 expressions were positively correlated with LDH activity (P=0.007 and P=0.017, respectively), ABCC1 expression was negatively correlated with the white blood cell count at diagnosis (P=0.006), and LRP expression was positively correlated with the white blood cell count at diagnosis (P=0.001) and with the presence of t(9; 22)(q34; q11.2) (P=0.012). In T-ALL cases, ABCB1 expression and the white blood cell count at diagnosis were positively correlated (P = 0.007). Patients diagnosed with AL who had achieved remission after induction therapy expressed more ABCB1 than those who had had complete remission (P=0.004). The AML patients who have not responded to induction therapy expressed more abcb1 and ABCC1 than those who had achieved remission (P=0.005 and P=0.017, respectively). Additionally, AML cases expressed less abcc1 after induction therapy (P=0.016) and APL cases expressed more LRP after induction (P=0.025). The results showed that mdr genes expression analysis and MDR proteins analysis provide different prognostic informations. Thus, the present study recommends that at the moment of AL patients diagnosis a simultaneous evaluation of mdr genes abcb1, abcc1 and lrp and MDR proteins expression ABCB1, ABCC1 and LRP should be held.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Enfermagem. / Made available in DSpace on 2012-10-20T02:31:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T02:11:39Z : No. of bitstreams: 1 187304.pdf: 2212172 bytes, checksum: 549a634e457905899a30e9d186c6dde2 (MD5) / A Tese revela a pesquisa feita sobre os significados dos conhecimentos teóricos / práticos de profissionais de saúde em relação ao uso indiscriminado de antibióticos na ecologia das bactérias-antibiótico-resistentes associadas à problemática da infecção hospitalar à luz da Ética da Responsabilidade, de Hans Jonas. Assim, para poder interpretar tão complexo problema, este trabalho adotou a metodologia da Pesquisa Qualitativa-Hermenêutica-Dialética usando como instrumento a entrevista dialogada semi-estruturada. Os 29 Atores Sociais que participaram deste estudo são médicos, enfermeiros, farmacêuticos, bioquímicos e cirurgiões dentistas que trabalham no Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina, na cidade de Florianópolis. Após a análise e discussão das "falas" dos Atores Sociais, do levantamento dos conhecimentos emergidos, das contradições observadas, estabeleceram-se princípios orientadores e um novo referencial teórico /filosófico sobre o uso indiscriminado de antibióticos. Conclui-se que os conhecimentos e práticas em relação ao uso de antibióticos, a ecologia das bactérias, a infecção hospitalar e a ética da responsabilidade são a chave para o desempenho prudente da prática de profissionais de saúde no Hospital Universitário

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-18T20:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T01:26:51Z : No. of bitstreams: 1 139401.pdf: 5705068 bytes, checksum: 59f260095a200f62dfc055ef62c1a33f (MD5)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002Bitstream added on 2014-06-13T19:49:31Z : No. of bitstreams: 1 genaro_a_me_botfm.pdf: 377043 bytes, checksum: 72c1832d7ec88dfecbd5ba14344427c1 (MD5) / O Enterococcus faecalis é considerado, atualmente, um dos grandes agentes responsáveis pelas infecções hospitalares, onde sua resistência a diversas drogas tem sido motivo de preocupação das autoridades. Neste contexto, o trabalho teve como objetivo determinar a suscetibilidade antimicrobiana e a presença de linhagens mutantes em E. faecalis. Foram obtidas 74 linhagens provenientes de hemoculturas e de secreções purulentas de pacientes internados no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP, no período de 1995 a 2001. Foram analisadas “in vitro”, quanto à sua suscetibilidade, a vancomicina e a ciprofloxacina através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), da concentração bactericida mínima (CBM) e a presença de linhagens mutantes através da determinação da taxa de mutação espontânea à ciprofloxacina. Os resultados demonstraram uma maior efetividade da vancomicina, que inibiu 98,6% das linhagens de E. faecalis (CIM 0,06 a 1mg/ml). Entretanto, quando da análise bactericida, o perfil de sensibilidade desta droga apresentou-se elevado, onde 73% das linhagens tiveram a CBM igual ou maior que 64mg/ml. Para a ciprofloxacina, o perfil de sensibilidade ficou distribuído entre as classes de CIM e CBM. Nesse estudo, não foi encontrada a presença de linhagens mutantes. Há probabilidade de algumas linhagens serem tolerantes à vancomicina, sendo necessário então, a realização de testes mais apurados, no sentido de confirmar esta característica. / Enterococcus faecalis has been considered one of the major agents of nosocomial infection; its resistance to several drugs has been the concern of health authorities. The objective of this study was to determine antimicrobial susceptibility and the presence of mutant strains in E. faecalis. Seventy-four strains were obtained from hemocultures and purulent secretions of patients hospitalized at the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu – UNESP between 1995 and 2001. They were analyzed in vitro for their susceptibility to vancomycin and ciprofloxacin by determining the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC), and the presence of mutant strains through determination of the spontaneous mutation rate to ciprofloxacin. Our results showed vancomycin higher efficacy, inhibiting 98.6% of E. faecalis strains (MIC 0.06 1μg/ml). The bactericidal analysis, however, showed vancomycin high susceptibility profile, with 73% of strains, presenting MBC equal or higher than 64μ/ml. Ciprofloxacin sensitivity profile was found in MIC and MBC classes. No mutant strains were found in this study. It is probable that some strains are resistant to vancomycin, which requires that further tests be performed.