FONSECA, Iêda Maria Rocha Lima Vieira da. Avaliação da concentração de proteínas totais na saliva humana frente a diferentes protocolos de tratamento da saliva. 2015. 40 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T12:39:00Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_imrlvfonseca.pdf: 763869 bytes, checksum: 7ff734931eddb02f3b4465dc7f77d0f5 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T12:39:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_imrlvfonseca.pdf: 763869 bytes, checksum: 7ff734931eddb02f3b4465dc7f77d0f5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-19T12:39:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_imrlvfonseca.pdf: 763869 bytes, checksum: 7ff734931eddb02f3b4465dc7f77d0f5 (MD5) Previous issue date: 2015 / The need to preserve the stability of saliva samples during and/or after collection has been considered a factor that might influence its analytical results, compromising the reliability and reproducibility of these analytical methods. The main challenges related to saliva preservation include the complexity of saliva composition, and its inherent elevated proteolitic activity. Thus, collection and storage of saliva requires specific precautions to preserve its components. The present study aimed to evaluate the protein concentration of saliva samples obtained from 10 healthy adults, aged 23 – 65 years, with a mean age of 31 years, subject to different pre-analytical sample preparation. Following collection, the salivary flow rate was calculated, and saliva samples from each volunteer were fractioned and divided in six different groups, in which each of these groups corresponded to a different type of pre-analytical sample preparation. The groups were as follows: G1- immediate centrifugation, no addition of protease inhibitor, room temperature during 24 hours; G2- immediate centrifugation, no addition of protease inhibitor, -80oC during 30 days; G3- immediate centrifugation, protease inhibitor added during collection, -80oC during 30 days; G4- immediate centrifugation, protease inhibitor added during analysis, -80oC during 30 days; G5- centrifugation 30 days after collection, no addition of protease inhibitor, -80oC during 30 days; G6- centrifugation 30 days after collection, protease inhibitor added during analysis, -80oC during 30 days. Total protein concentration was analyzed in duplicates, through the bicinchoninic acid assay. After analysis, the total protein concentration in each group was statistically correlated through Pearson and Spearman correlation tests and compared using repeated measure ANOVA (p<0.05). The mean total protein concentrations showed a negative correlation with salivary flow rate in G1 (P= 0,020), G4 (P= 0,027) and G5 (P= 0,05). Total protein concentration and age were only statistically correlated in G3 (P= 0,01). The mean total protein concentrations did not significantly differ between groups, F(5,45)= 1,132, P= 0,358. These results were also observed when comparing the mean total protein concentrations normalized by each individual’s salivary flow rate, F(5,45) = 2,068, P= 0,087. In conclusion, the methodological alterations proposed for the preparation of saliva samples before analysis did not generate significant quantitative alterations in total protein concentration within these samples. / A necessidade de preservar a estabilidade da saliva durante e/ou depois da coleta, tem sido considerado um fator que pode influenciar os resultados obtidos na análise desse fluido, comprometendo a confiabilidade e reprodutibilidade de tais métodos analíticos. Os principais desafios relacionados à preservação da saliva referem-se à complexidade da sua composição e da sua elevada atividade proteolítica inerente. Consequentemente, coleta e armazenamento da saliva exigem precauções especiais para preservação de seus componentes. O presente estudo se propôs a avaliar a concentração proteica de amostras de saliva total de dez voluntários adultos, saudáveis, com idades variando de 23 a 65 anos, com média de 31 anos submetidas a alterações metodológicas no preparo pré-analítico da amostra. Após coletadas, os fluxos salivares foram calculados e as amostras de saliva de cada indivíduo foram fracionadas e divididas em seis diferentes grupos, onde cada um desses grupos correspondeu a um tipo diferente de preparo pré-analítico da amostra. Os grupos foram conforme segue: G1- centrifugação imediata, inibidor ausente, temperatura ambiente por 24 horas; G2- centrifugação imediata, inibidor ausente, -80oC por 30 dias; G3- centrifugação imediata, inibidor no ato da coleta, -80oC por 30 dias; G4- centrifugação imediata, inibidor no ato da análise, -80oC por 30 dias; G5- centrifugação após 30 dias, inibidor ausente, -80oC por 30 dias; G6- centrifugação após 30 dias, inibidor no ato da análise, -80oC por 30 dias. As concentrações de proteínas totais foram avaliadas pelo método do ácido bicinconínico, em duplicatas. Após análise a concentração de proteínas totais em cada grupo foi estatisticamente correlacionada pelos testes de Pearson e Spearman, e comparações feitas realizadas por meio do teste ANOVA para medidas repetidas (p<0.05). As concentrações médias de proteínas totais demonstraram uma correlação negativa significativa com o fluxo salivar em G1 (P= 0,020), G4 (P= 0,027) e G5 (P= 0,05). Proteínas totais e idade só demonstraram correlação significativa em G3 (P= 0,01). As concentrações de proteínas totais médias não diferiram de forma significante entre os grupos, F(5,45)= 1,132, P= 0,358. Esses resultados foram, também, observados ao se comparar as médias de proteínas totais com base no fluxo salivar dos voluntários, F(5,45) = 2,068, P= 0,087. Em conclusão, as alterações metodológicas ora propostas no tratamento das amostras de saliva não redundaram em alterações quantitativas significantes nas concentrações de proteínas totais presentes nesse fluido.

COSTA, Dijane Pereira. Estudo do perfil de aminoácidos salivares em crianças desnutridas com cárie da primeira infância. 2008. 98 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-08T12:17:32Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_dpcosta.pdf: 1178880 bytes, checksum: af67d76852798c6cb33976558abb905f (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T12:57:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_dpcosta.pdf: 1178880 bytes, checksum: af67d76852798c6cb33976558abb905f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T12:57:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_dpcosta.pdf: 1178880 bytes, checksum: af67d76852798c6cb33976558abb905f (MD5) Previous issue date: 2008 / Aim: The aim of the present study was to identify the free amino acid content in whole saliva of children with protein-energy malnutrition (PEM), with and without early childhood caries (ECC), correlating these findings with caries experience and mutans streptococci (MS) levels in saliva. Methods: One hundred and twenty two, 12 – 70 months-old children, with or without ECC were selected to participate in the study. Consent forms were signed and children were divided into healthy (GH, n = 47), and mildly (GI,n = 22) or moderately (GII,n = 53) malnourished groups. Malnourishment levels were classified according to WHO 2006 growth standards. Unstimulated whole saliva was collected from all participants and centrifuged. Supernatants were extracted, lyophilized, stored at – 20oC and used for amino acid analysis, on a Biochem 20 plus amino acid analyzer. Stimulated whole saliva was also collected from all subjects, and used for MS detection on MSB agar medium (cfu/mL). Amino acid concentrations were expressed in µM/mL. Dental examination was performed for calculation of dmfs scores. Pearson Chi-Square test and a Logistic Binary Model were used for statistical analysis. Results were considered significant when p-value < 0.02. Results: Forty amino acids were identified, with great variability in their concentrations. Analysis of presence/absence of each amino acid and presence/absence of caries demonstrated an association between asparagine and ECC in GII (p = 0.003). Logistic regression showed that caries experience increased with an increase in age (p = 0.003). The presence of alanine (p = 0.014) and carnithine (p = 0.008) reduced the chances of experiencing ECC. The presence of histidine significantly increased caries risk (p = 0.012). However, MS counts did not significantly increase the risk of experiencing ECC (p = 0.065) in this model. Conclusion: Presence of specific amino acids in saliva of children with PEM predisposes to a higher or lower risk of caries experience. / Objetivo: Investigar o perfil dos aminoácidos salivares em crianças saudáveis e com diferentes graus de desnutrição, portadoras e livres de cárie da primeira infância (CPI), correlacionando esses achados com experiência de cárie e níveis de estreptococos do grupo mutans (EGM) em saliva. Métodos: Cento e vinte e duas crianças, de 12 – 71 meses de idade, com e sem CPI foram selecionadas para participar do estudo. Termos de consentimento foram assinados e as crianças foram divididas nos grupos saudáveis (GS, n = 47), levemente (GI, n = 22), e moderadamente (GII, n = 53) desnutridas. Níveis de desnutrição foram classificados segundo os padrões de crescimento da OMS 2006. Amostras de saliva não estimulada foram coletadas de todos os participantes e subseqüentemente centrifugadas. Sobrenadantes foram extraídos, liofilizados, armazenados a – 20o C e utilizadas para análise de aminoácidos em um analisador de aminoácidos Biochem 20 plus. Saliva estimulada foi também coletada e usada para detecção de EGM. Estas amostras foram cultivadas em meio de cultura MSB (ufc/mL). Os resultados das concentrações de aminoácidos foram expressos em µM/mL. O exame dentário foi realizado para cálculo do índice ceo-s. Os dados foram analisados por meio do teste do Qui-quadrado de Pearson e de um modelo Logístico Binário. Resultados foram considerados significantes quando p-valor < 0.02. Resultados: Quarenta aminoácidos foram identificados, com grande variabilidade em suas concentrações. Análise da presença/ausência de cada aminoácido, e presença/ausência de cárie demonstrou uma associação entre asparagina e CPI em GII (p=0.003). Regressão logística mostrou que o risco à experiência de cárie aumenta com a idade (p = 0.003). A presença de alanina (p = 0.014) e carnitina (p = 0.008) reduziram as chances de experiência de CPI. A presença de histidina aumentou significativamente o risco à cárie (p = 0.012). Entretanto, EGM não aumentou o risco à CPI (p = 0.065) nesse modelo. Conclusão: A presença de aminoácidos específicos na saliva de crianças com DEP predispõem a um maior ou menor risco à experiência de cárie.

Two cysteine and two serine protease inhibitors from a tick Ixodes ricinus saliva were overexpressed using a prokaryotic overexpression system and refolded to their native state. Both cysteine protease inhibitors were tested as potential antigens for an anti-tick vaccine showing no effect on tick feeding or reproduction. Various immunological methods were employed to test the potential immunomodulatory function of these proteins without success.

Orientador: Prof. Dr. José Miguel Amenábar Céspedes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia. Defesa: Curitiba, 2016 / Inclui referências : f. 28-30;32-36 / Resumo: A doenca celiaca (DC) e uma enteropatia sensivel ao gluten, com manifestacoes sistemicas e bucais que leva ao desequilibrio entre oxidantes e antioxidantes. Diversos estudos avaliaram o estresse oxidativo em individuos com DC em tecidos e plasma, no entanto, nao ha relatos desta avaliacao na saliva. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi analisar o estado oxidativo da saliva em individuos com DC. Foi avaliada a saliva de 30 individuos de faixa etaria entre 05 e 33 anos com DC confirmada atraves de biopsia endoscopica do intestino delgado. Foi comparada com individuos sem DC com idade e sexo pareados. As amostras foram analisadas por meio de metodos colorimetricos para a determinacao do Estado Oxidante Total (EOT), Capacidade Antioxidante Total (CAT) e Indice do Estresse Oxidativo (IEO). Os dados obtidos foram tabulados e submetidos ao teste de Mann Whitney, considerando significancia quando p<0,05. A CAT (0,002}0,001 mM) e o IEO (0,154}0,304) no grupo de celiacos apresentaram diferencas significativas quando comparados aos controles (0,007}0,001 mM e 0,012}0,013, respectivamente). Ja o valor do EOT foi semelhante em ambos os grupos, sendo os valores do grupo com DC de 2,524}0,268 ƒÊM e do controle 2,492}0,284 ƒÊM. Dentro dos limites do presente estudo pode ser concluido que os individuos com DC apresentam o estado oxidativo salivar aumentado decorrente de uma menor capacidade antioxidante. Palavras-chave: Doenca celiaca. Oxidantes. Antioxidantes. Estresse Oxidativo. Saliva. / Abstract: Celiac disease (CD) is a sensitive enteropathy to gluten, with systemic and oral manifestations that lead to an imbalance between oxidants and antioxidants. Several studies have assessed oxidative stress in individuals with DC in tissues and plasma but not yet in saliva. Thus, the aim of this study was to analyze the salivary oxidative status in individuals with CD. Saliva was evaluated in 30 subjects between 05 and 33 years with CD confirmed by endoscopic biopsy from the small intestine. They were compared with individuals without DC with age and sex matched.The specimens were analyzed by means of colorimetric methods to determine the Total Oxidant State (TOS), Total Antioxidant Capacity (TAC) and Oxidative Stress Index (OSI). Data obtained were tabulated and submitted the Mann Whitney test, a level of p < 0.05 was considered statistically significant. The TAC (0.002 ± 0.001 mM) and OSI (0154 ± 0304) in the celiac group showed significant differences compared to control group (0.007 ± 0.001 mM and 0.012 ± 0.013, respectively). The value of the TOS was virtually the same in both groups, group values with CD were 2524 ± 0268 ?M and control group 2.492 ± 0.284 ?M. Within the limits of the present study can be concluded that individuals with celiac disease have salivary oxidative state altered due to a decreased antioxidant capacity. Key-words: Celiac disease. Oxidants. Antioxidants. Oxidative Stress. Saliva.

Resumo: A Anemia de Fanconi (AF) é uma desordem genética de fenótipo variado sendo o mais importante a falência medular progressiva. O único recurso terapêutico com possibilidade de cura das complicações hematológicas é o transplante de células tronco hematopoéticas (TCTH). O regime de condicionamento terapêutico antes e após o TCTH pode provocar alterações da microbiota bucal em pacientes com AF aumentando o risco de problemas bucais e agravando o quadro clínico geral. O propósito deste estudo foi avaliar fatores sociais, comportamentais e microbiológicos associados à saúde bucal de crianças e adolescentes com AF. A amostra foi composta por três grupos: AF pré-transplante (n=25), AF pós-transplante (n=23) e controle (n=24). Os indivíduos com AF foram avaliados no Serviço de Transplante de Medula Óssea do Hospital de Clínicas da UFPR, entre abril/2011 e julho/2011 e os indivíduos saudáveis foram avaliados na Clínica de Odontologia da UFPR, entre maio/2011 e dezembro/2011. Todos os pacientes leram e aceitaram participar do estudo assinando o termo de consentimento. A idade média dos grupos foi de 10 anos (6 a 18 anos). Os hábitos de higiene dos indivíduos em geral foi caracterizado com três ou mais escovações ao dia, sem o uso de fio dental e enxaguatório bucal. Diferenças significativas não foram observadas entre os grupos quanto aos hábitos de higiene. No acesso odontológico, os grupos pré-transplante e controle utilizaram o serviço odontológico público pelo menos uma vez no ultimo ano para avaliação de rotina. Em geral, o grupo pós-transplante visitou o cirurgião-dentista do serviço privado liberal em menos de um ano também para avaliação de rotina. O Índice de Higiene Oral-Simplificado (IHO-S) não apresentou diferença significativa entre os grupos, sendo em sua maioria insatisfatório. A prevalência salivar de Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola e Fusobacterium nucleatum foi de 44%, 84%, 24% e 64% respectivamente para o grupo pré-transplante; de 65%, 96%, 22% e 48% para o grupo pós-transplante e de 58%, 75%, 46% e 75% para o grupo controle. No biofilme supragengival a presença de A. actinomycetemcomitans foi observada em apenas uma amostra do grupo pré-transplante. P. gingivalis foi detectado em uma amostra do biofilme supragengival dos grupos pré e pós-transplante T. denticola esteve presente em 16% no grupo pré-transplante, não sendo detectado em outros grupos. A presença de F. nucleatum no biofilme supragengival foi de 62% no grupo pré-transplante, 38% no grupo pós-transplante e 30% no controle. Diferenças significativas não foram observadas entre os grupos no que diz respeito aos fatores comportamentais e a presença dos microrganismos estudados na saliva e biofilme supragengival, sugerindo que as alterações sistêmicas observadas nos pacientes com AF e o acondicionamento pré-transplantes não afetou a distribuição destes microrganismos na saliva e no biofilme supragengival.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:42Z : No. of bitstreams: 1 000846451.pdf: 1430012 bytes, checksum: b36ec304aba3d25dcd4c3440e3fd6a9e (MD5) / Dental materials act as substrates for the adhesion of microorganisms, and consequently, for biofilm development. Given that the surface characteristics of materials may interfere in the initial adhesion, changes in these characteristics may inhibit or reduce the adhesion of bacteria and fungi, thus preventing the development of diseases. Another aspect to consider is that, in the oral cavity, surfaces are covered with saliva, forming a thin film referred to as acquired salivary pellicle. In order to simulate oral conditions, in vitro studies have used preconditioning in human saliva before biofilm formation. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of plasma polymerized films on the surface characteristics of dental materials (acrylic resin, titanium and zirconia), as well as on the biofilm formation on these materials, with and without preconditioning in human saliva. For this purpose, the monomer hexamethyldisiloxane HMDSO was used as precursor in the PECVD (Plasma Enhanced Chemical Vapor Deposition) process. Deposition parameters were varied to produce a range of films with hydrophobic or hydrophilic characteristics. Specimens of each material without film deposition were used as controls. Characterization of the films was performed by Fourier Transformed infrared spectroscopy (FTIR), scanning electron microscopy (SEM), contact angle measurements and surface free energy, X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), and profilometry. To evaluate biofilm formation, half of the test specimens (10 × 2 mm) of the experimental and control groups were stored in previously prepared 16 human saliva and afterwards incubated with 1 × 107 cells/mL of both Candida albicans (for acrylic resin) and Porphyromonas gingivalis (for titanium and zirconia). Samples without preconditioning in saliva were also incubated in the respective microorganisms... (Complete abstract electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:51:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-18Bitstream added on 2014-08-13T17:59:41Z : No. of bitstreams: 1 000775903.pdf: 879703 bytes, checksum: e0fcc321d866d9f9d797500ce85cece8 (MD5) / As técnicas de biópsia óptica consistem na análise de tecidos através das suas propriedades físicas. Dentre essas técnicas, destaca-se a espectroscopia Fourier Transform Infrared (FT-IR), a qual tem sido utilizada para identificar padrões de alterações moleculares por meio dos modos vibracionais. O objetivo do presente estudo foi avaliar através da espectroscopia FT-IR amostras de saliva de 14 pacientes do com ardência bucal visando estudar alterações bioquímicas globais e comparar à saliva de 14 pacientes controle, pareados por idade e sexo. Para obtenção dos resultados, os espectros adquiridos e armazenados pelo software de controle do espectrômetro Fourier Transform Infrared foram convertidos para o formato ASCII, e posteriormente foi realizado processamento e análise no Minitab 16. Os resultados revelaram por meio da análise dos gráficos realizados pelos programas Origin e Qytplot que houveram diferenças nas intensidades das bandas relacionadas a proteínas e lipídios, que apresentaram-se com menor intensidade espectral para a saliva dos pacientes com ardência. Portanto, foi possível concluir que a técnica se mostrou eficaz para caracterizar a presença de alterações na saliva dos pacientes com ardência comparados a saliva dos pacientes normais / The optical biopsy techniques consist in the analysis of tissues through its physical properties. Among these techniques, there is a Fourier Transform Infrared (FT-IR) spectroscopy, which has been used to identify patterns of molecular changes through vibrational modes. The aim of this study was to evaluate by FT-IR spectroscopy saliva samples from 14 patients complaining of burning mouth aiming to study global biochemical changes and compare the saliva of 14 patients without any complaint, matched for age and sex. To obtain results, the spectra acquired and stored by the control software of the spectrometer Fourier Transform Infrared (FT-IR) were converted to ASCII format for further processing and analysis be conducted in Minitab 16. The results revealed by the analysis performed by the graphics program Origin and Qytplot that there were differences in the intensities of the bands related to proteins and lipids, who presented with lower spectral intensity to the saliva of patients with burning complain. Therefore, it was concluded that the technique was effective for characterizing the presence of changes in the saliva of patients with burning compared saliva from normal patients

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-05-19T19:44:15Z No. of bitstreams: 1 2015_FlaviaMarquesBorbaModesto.pdf: 1257832 bytes, checksum: afcc42e607748a9f1617decfacbcbac9 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-05-19T20:14:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_FlaviaMarquesBorbaModesto.pdf: 1257832 bytes, checksum: afcc42e607748a9f1617decfacbcbac9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-19T20:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_FlaviaMarquesBorbaModesto.pdf: 1257832 bytes, checksum: afcc42e607748a9f1617decfacbcbac9 (MD5) / Objetivo Avaliar as manifestações bucais e a qualidade de vida de pacientes com Síndrome de Sjögren, comparando com controles saudáveis, pareados por sexo, idade e condição socioeconômica. Metodologia Estudo clínico, transversal, observacional com grupo controle, aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Faculdade de Medicina da Universidade de Brasília. A amostra estudada compreendeu 25 pacientes com Síndrome de Sjögren (SS) de acordo com o critério diagnóstico do Grupo Americano-Europeu (Vitali et al, 2002) e 46 controles saudáveis. Foram obtidos os fluxos da saliva total não estimulada e estimulada; as características clínicas da mucosa bucal; os índices CPOD e CPOS, da coroa e da raiz e o índice CPOS1 da coroa; o Índice de sangramento gengival e a concentração total de IgA, pelo método de nefelometria. O grau de xerostomia e a qualidade de vida foram analisados pelo Inventário de xerostomia (XI) e pelo Perfil de Impacto na Saúde Oral (OHIP14), respectivamente. As variáveis qualitativas foram analisadas por meio do teste de Qui Quadrado para k proporções, as variáveis quantitativas foram analisadas por meio do teste t para amostras independentes e a concentração da IgA salivar total foi avaliada por meio do teste não paramétrico de Mann-Whitney-U. A correlação de Spearman foi realizada entre as variáveis do estudo, para o grupo de pacientes com Sjögren e para o grupo controle. Em todos os testes estatísticos foi aplicado um nível de significância equivalente a p<0,05. Resultados e Conclusões O fluxo salivar total não estimulado e o estimulado, e a qualidade de vida foram significativamente menores nos pacientes com SS (p<0.001). O índice CPOS1, a intensidade da xerostomia, a frequência de mucosa seca (p<0,0001), de língua seca e atrófica (p<0,05), de saliva com aparência espumante em fundo de saco (p<0,05), a frequência de sangramento gengival à sondagem e a concentração total da IgA estimulada e não-estimulada foram significativamente maiores nos pacientes com SS (p<0.001). Na SS, foram encontradas associações positivas e significativas entre a idade e o tempo de doença versus os índices CPOD, CPOS e CPOS1 da coroa, XI versus OHIP-14 e LCR versus IgA NE. O fluxo NE correlacionou-se negativamente com a IgA NE e o XI. Não houve diferença significativa entre os grupos quanto aos índices CPOD, CPOS e à presença de sinais de candidíase. / Objective: To assess the oral manifestations and the impact of oral health on the health-related quality of life in 25 patients with SS diagnosed according to the criteria of the American-European Consensus (Vitali et al, 2002) and compared with those for 46 healthy volunteers matched for age, sex, and socioeconomic status. Methods: This is a cross-sectional study. The Oral Health Impact Profile 14 (OHIP-14) and Xerostomia Inventory (XI) scores were determined to assess the impact of oral health on the health-related quality of life and degree of xerostomia, respectively. The total unstimulated and stimulated salivary flow rates, the clinical features of the oral mucosa, DMFT, DMFS and DMFT1, total IgA and gingival bleeding index were evaluated. Qualitative variables were analyzed using the chi-square test for k proportions. Quantitative variables were analyzed using the t-test. Total IgA were analyzed using MWU test. Spearman’s correlation was performed to identify associations between studying variables. A significant level of p< 0,05 was applied for all tests. Results and conclusions: The unstimulated and stimulated salivary flow rates, and the health-related quality of life were significantly lower for the SS patients than for the controls (p<0.001). DMFT1, xerostomia, oral mucosa dryness, gingival bleeding scores and total IgA were higher in SS patients (p<0.001). In SS patients, unstimulated salivary flow rates were inversely correlated with IgA NE and XI. The OHIP-14 scores correlated significantly with higher XI scores, LCR correlated significantly with higher IgA NE concentrations, age and disease duration correlated significantly with higher CPOD, CPOS e CPOS1 of crown. DMFT, DMFS and candidiasis signs were not different between SS and control group.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-08-17T20:14:00Z No. of bitstreams: 1 2016_YannaReisPraça.pdf: 8951084 bytes, checksum: 723a2e6a0e521ef29a7ba1303584bf80 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-09-20T18:44:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_YannaReisPraça.pdf: 8951084 bytes, checksum: 723a2e6a0e521ef29a7ba1303584bf80 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-20T18:44:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_YannaReisPraça.pdf: 8951084 bytes, checksum: 723a2e6a0e521ef29a7ba1303584bf80 (MD5) / Os triatomíneos são artrópodes hematófagos durante todo o seu ciclo de vida e para garantir o sucesso de seu repasto, desenvolveram estratégias adaptativas que contrapõem o sistema hemostático e imune do hospedeiro, injetando moléculas farmacologicamente ativas durante esse processo. Por possuirem diversas moléculas com interesse farmacológico, a saliva desses artrópodes hematófagos passou a ser alvo de pesquisas. Para ampliar o conhecimento sobre essas moléculas, esse trabalho teve como objetivos: 1) investigar a expressão protéica na saliva de Triatoma dimidiata em diferentes tempos após a alimentação sanguínea, por meio da análise proteômica comparativa por LC-MS/MS, eletroforese bidimensional e análises in silico, e 2) caracterizar in silico a sequência aminoacídica do antígeno 5 salivar de Rhodnius neglectus (RNAV), além da expressão dessa molécula em Escherichia coli. A análise proteômica comparativa da saliva de T. dimidiata levou à identificação de 362 proteínas, das quais 65 eram específicas da amostra de cinco dias após a alimentação sanguínea (dpa) e 79 específicas da amostra de 10 dpa, além de contribuir para validar dados do transcritoma dessa espécie disponível na literatura. A análise in silico do RNAV sugere que a molécula é secretada pela via clássica, que modificações pós-traducionais como fosforilação e glicosilação devem ocorrer na proteína, e que existem aproximadamente 25 resíduos de aminoácidos que podem estar presentes em epítopos lineares para células B. Não foi possível obter o RNAV recombinante. O conhecimento das proteínas salivares do T. dimidiata e sua comparação com as de outras espécies de artrópodes hematófagos pode ser útil para entender processos biológicos fundamentais como sobrevivência, adaptação e as interações desses vetores com seus hospedeiros e com os agentes infecciosos que eles são capazes de transmitir. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Triatomine are bloodsucking arthropods throughout their life cycle and to ensure the success of their meal, they have developed adaptive strategies that counteract the hemostatic and immune system of the host, injecting pharmacologically active molecules during this process. By owning several molecules with pharmacological interest, bloodsucking arthropods saliva has become the subject of various research. To enhance our knowledge about these molecules, this study aimed 1) to investigate the protein expression in Triatoma dimidiata saliva at different times after the blood feeding through comparative proteomic analysis using LC-MS/MS, 2-DE electrophoresis and bioinformatics, and 2) to characterize in silico the salivary antigen 5 of Rhodnius neglectus (RNAV), beyond its expressin in Escherichia coli. The comparative proteomic analysis of T. dimidiata saliva revealed 362 proteins, 65 specific of the sample collected 5 days after feeding and 79 specific of the sample collected 10 days after feeding, and aided to validate available data from T. dimidiata transcriptome. RNAV in silico analysis revealed this protein may be secreted by the classical pathway, phosphorilation and glycosilation sites, and the existence of 25 amino acid residues that may be present in linear epitopes to B cells. Our attempt failed to produce recombinant RNAV. Knowing T. dimidiata salivary proteins and comparison with those from other species of hematophagous arthropods may help to understand fundamental biological processes such as survival, adaptation, vector-host and vector-pathogens interactions.

Doctor of Philosophy / Biochemistry and Molecular Biophysics Interdepartmental Program / Gerald R. Reeck / Armet is a bifunctional protein that is apparently universally distributed among multicellular animal species, vertebrate and invertebrate alike. A member of the Unfolded Protein Response, (UPR) Armet promotes survival in cells that are under endoplasmic-reticulum (ER) stress. I have carried out biophysical studies on human Armet looking for compounds that bind to Armet and hence could reduce its anti-apoptotic function, thus potentially joining the growing class of pro-apoptotic drugs. Performed primarily with 1H-15N HSQC NMR, ligand studies showed that approximately 60 of the 158 residues are potentially involved with binding. The 60 residues are distributed throughout both domains and the linker suggesting multi-domain interaction with the ligand. Circular dichroism studies showed heat denaturation in a two-step unfolding process with independent unfolding of both domains of Armet with Tm values near 68°C and 83 C with the C-terminal domain unfolding first, as verified by 1H-15N HSQC NMR measurements. I also provide the first identification of UPR transcripts in pea aphids, Acyrthosiphon pisum, the genetic model among aphids. I measured transcript abundance with hope of finding future transcriptional targets for pest mitigation. I identified 74 putative pea aphid UPR components, and all but three of the components have higher transcript levels in aphids feeding on plants than those that fed on diets. This activated UPR state is attributed to the need for saliva proteins for plant feeding. Because aphids are agriculturally significant pests, and saliva is pivotal to their feeding on host plants, genes that encode saliva proteins may be targets for pest mitigation. Here I have sought the aphid’s saliva proteome by combining results obtained in several laboratories by proteomic and transcriptomic approaches on several aphid species. With these data I constructed a tentative saliva proteome for the pea aphid by compiling, collating, and annotating the data from several laboratories. I used RNA-seq to verify the transcripts in pea aphid salivary glands, thus expanding the proposed saliva proteome from approximately 50 components to around 130 components, I found that transcripts of saliva proteins are upregulated during plant feeding compared to diet feeding.