Orientador: Antonio Roberto Martins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:02:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zucchi_FabiolaCristinaRibeiro_M.pdf: 24090460 bytes, checksum: 27e1bbac09c938fe441fff2ec63849ce (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: o PIN é a proteína inibidora da sintase neuronal do óxido nítrico (nNOS). O mecanismo de regulação ocorre pela interação do PIN com a nNOS, inibindo sua dimerização, dissociando os dímeros já formados e assim inibindo a formação da enzima ativa. O PIN é uma proteína de 10 kDa e 89 resíduos de aminoácidos altamente conservada na natureza. O PIN humano apresenta 100% de homologia com a cadeia leve da dineína (DLC) humana. A DLC está envolvida na modulação da atividade transcional do NFkB. A dineína está envolvida em uma variedade de processos de motilidade intracelular, incluindo divisão celular, tráfego de vesículas membranosas e outras partículas intracelulares. A interação de PIN com múltiplas proteínas e sua alta conservação evolutiva sugerem que o PIN possa ser um importante regulador de vários processos fisiológicos. O óxido nítrico (NO) atua como um mensageiro não convencional nos sistemas vascular, imune e nervoso. O modelo corticogênese cerebelar humana é relativamente bem conhecido e permite correlacionar eventos morfogenéticos e bioquímicos/moleculares. Observamos que a expressão imunohistoquímica de PIN/DLC e nNOS no cerebelo humano é desenvolvimento-dependente. Durante a ontogênese estas moléculas ocorrem em regiões proliferativas, como a EGL e a zona ventricular, no núcleo e citoplasma das células. Células com aspecto migratório foram imunomarcadas para PIN, DLC e nNOS no núcleo e no citoplasma. Este resultado é inédito, e não encontramos relatos semelhantes na literatura. Os interneurônios e as células de Purkinje expressaram PIN e DLC, principalmente no núcleo celular, desde o surgimento até 98 anos. E a imunodetecção de nNOS nos interneurônios e células de Purkinje foi observada principalmente no citoplasma e ramificações dendríticas em todas as idades observadas. A camada granular interna expressou PIN, DLC e nNOS em todo o período estudado. Detectamos imunorreatividade para PIN e DLC nas células ganglionares do núcleo denteado, principalmente no núcleo celular, e para a nNOS principalmente no citoplasma, desde a ontogênese até o envelhecimento do cerebelo humano. Nossos resultados imunohistoquímicos foram validados pela detecção de PIN, DLC, DIC e nNOS em amostras cerebelares obtidas de pacientes de 6, 16, 23, 47, 68 e 82 anos de idade usando Western bloting / Abstract: PIN is the protein inhibitor of neuronal nitric oxide synthase (nNOS). PIN interacts physically with nNOS, inhibits it by destabilizing its dimer form, thus being able to regulate nNOS activity. PIN is a 10 kDa protein composed of 89 amino acid residues, which are highly conserved in nature. Human PIN has 100% amino acid sequence identify to the human dynein light chain (DLC). DLC appears to play a role in the modulation of the transcriptional activity of NF-kB. Dynein is involved in several processes of intracellular motility, including mitosis, traffic of membranous vesicles, and others intracellular particles.The interaction of PIN/DLC with multiple proteins and its high evolutive conservation suggest that PIN can be an important regulator of various physiological processes. Nitric oxide (NO) acts as a nonconventional messenger in the vascular, immune and nervous systems. The model of human cerebellar corticogenesis is relatively well known and permits to correlate morphogenetic events with their molecular counterparts. We observed that the immunohistochemical expression of PIN/DLC and nNOS in the human cerebellum is development-dependent. During ontogenesis, this molecules were detected in the nuc1eiand cytoplasm of cells in proliferative regions, such as the EGL and the ventricular zone. We show here for the first time the detection of PIN, DLC and nNOS in the nuclei and cytoplasm of cells with a migratory profile. Intemeurons and Purkinje cells expressed PIN and DLC, mainly in the cellular nuclei, from the first time they were identified until age 98 years. Immunodetection of nNOS in the intemeurons and Purkinje cells was observed mainlyin the cytoplasm and dendritic arborization in all ages observed. Internal granular layer expressed PIN, DLC and nNOS through out the time range studied. PIN and DLC immunoreactivity were detected in ganglion cells of the dentate nucleus, mainly in the cellular nuclei, whereas anti-nNOS stained mainly the cytoplasm of these cells, throughout the time range studied. Our immunohistochemical data were further validated by the detection of PIN, DLC, DIC and nNOS in cerebella obtained from patients aged 6, 16, 23, 47, 68 and 82 years-old using Western bloting / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Elizabeth Maria Ap. B. Quagliato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T21:53:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sousa_RaimundoNonatoCampos_M.pdf: 888181 bytes, checksum: 9a4faed1d83db6c5eb92d78e6b13107c (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O autor apresenta um estudo clínico transversal e analítico, envolvendo 61 pacientes com doença de Parkinson Idiopática que foram examinados consecutivamente e comparados a 74 indivíduos entre cônjuges, familiares ou acompanhantes selecionados para o grupo controle. Foram incluídos apenas pacientes com doença de Parkinson idiopática que preencheram os critérios de diagnóstico estabelecidos. A ressonância magnética do encéfalo, que foi realizada em todos os pacientes assim como a ultra-sonografia da próstata realizada nos homens dos dois grupos, foi utilizada como critério de exclusão. O objetivo do estudo foi avaliar a prevalência de sintomas do trato urinário inferior na doença de Parkinson e estudar as possíveis associações entre variáveis demográficas e fatores clínicos às disfunções urinárias. No grupo de pacientes 39,3% apresentavam sintomatologia urinária quando comparados a 10.8% do grupo controle. Todos os pacientes sintomáticos apresentaram sintomas irritativos. A noctúria foi o sintoma irritativo mais prevalente, seguido pela freqüência e a urgência com ou sem incontinência urinária. Sintomas obstrutivos foram encontrados em 25% dos pacientes. Não foi observada correlação entre a sintomatologia urinária e as variáveis sexo, duração e gravidade da doença, presença de sintomas autonômicos representados pela hipotensão postural e sintomas ortostáticos, os sinais motores (tremor, bradicinesia e rigidez) e ainda o tratamento com a levodopa. Apenas a idade apresentava evidência de correlação com os sintomas urinários / Abstract: The author presents a cross-sectional study involving 61 patients with idiopathic Parkinson¿s disease (PD) who were seen consecutively and compared to a control group of 74 individuals, among spouses, family and accompanying members. Only patients who fulfilled the standard diagnostic criteria for PD and whose brain magnetic resonance imaging was normal or with characteristic of idiopathic Parkinson¿s disease were included. Degenerative, secondary or other types of parkinsonism were excluded. The objective of the study was to evaluate the prevalence of inferior urinary tract symptoms in PD and to study the possible association among demographic variables and clinical factors to urinary dysfunction. In the patient group, 39.3% presented urinary symptoms when compared to 10.8% in the control group. All symptomatic patients presented irritative symptoms. The most common irritative symptom was nocturia, followed by frequency and urinary urgency or urge-incontinence. Around 25% of the patients presented functional obstructive symptoms determined by the disease. The most frequent obstructive symptom was incomplete emptying of the bladder. In the comparative study among women with the disease and in the control group, a wide prevalence of symptoms both irritative and obstructive in those with PD was observed. These observations avoid distortion and show evidence that the disease is responsible for obstructive urinary dysfunction as well. The variables that were not correlated to urinary symptoms were sex, the duration of the disease, severity, autonomic symptoms, represented by postural hypotension and orthostatic symptoms, cardinal symptoms: tremor, bradicinesia and rigidity and treatment with levodopa. Only the age was correlated with urinary dysfunction / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Heloisa Amelia de Lima Castro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T08:10:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_OsvaldoBenedito_M.pdf: 2600674 bytes, checksum: 8fb08d1713ca5998127db5bcf69af568 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: As vitaminas do complexo B são importantes tanto no metabolismo do sistema nervoso central como periférico. Sua deficiência pode causar degeneração do axônio ou da bainha de mielina das fibras nervosas; sendo porém revertido o quadro quando da sua administração. Varias patologias do sistema nervoso periférico causam lesão da bainha de mielina, ou do axônio ou de ambos. Assim o uso de vitaminas está indicado como medida de tratamento, porém há controvérsia a respeito. O objetivo deste trabalho foi estudar a influência da tiamina, piridoxina e cianocobalamina durante a regeneração axonal. Ratos adultos foram divididos em três grupos: I II III Nos animais dos grupos I e II foi injetado álcool etílico a 95% no nervo isquiático esquerdo, levando a degeneração da bainha de mielina e do axônio das fibras nervosas. Os animais do grupo I receberam via oral tiamina, piridoxina e cianocobalamina diariamente, os do grupo II não receberam-nas e os animais do grupo fi foram usados para análise morfoquantitativa do nervo isquiático normal. Após 60 dias da infiltração com álcool etílico a 95%, o nervo isquiático esquerdo de todos os animais foi removido, processado para microscopia de luz e eletrônica, submetido à análise quantitativa e qualitativa. Os resultados mostraramnão haver diferenças histológicas entre os grupos I e II. A análise do número médio de axônios mielínicos e da área média da secção transversa mostraram não haver diferença significativa entre os três grupos. Não foram observados sinais de intoxicação vitamínica com a dosagem utilizada / Abstract: The vitamin B complex are important in the metabolism of the central and peripheral nervous system. Its deficiency can lead to the disintegration of the myelin sheath and to the to axonal damage, and can be relieved by appropriated therapeutic measures. Several diseases of the peripheral nervous system may lead damage in the myelin sheath or in the axon or both. This fact has lead to the recommendation that vitamins B complex can be administrated as a therapeutic method, but there is controversy about this. The aim of this work was to study the influency of the thiamine, pyridoxine and cobalamine in the course of axonal regeneration. Fully-grown rats were divided in three groups: I II III. In the animals of the groups I and II were injected ethylic alcohol in concentrationof 95% in de left ciatic nerve, what promoted degeneration of the myelin sheat and the axon of the nerve fibers. The animals of the group I daily received thiamine, pyridoxine and cobalamine by oral way, that of the group II do not received the vitamins and that of the group III were used to provide histological and quantitative data of the normal catic nerve. Sixty days after the application of ethylic alcohol - 95%, the left ciatic nerve of all animals were removed, processed for light and electron-microscopy,and carried to a histological and quantitative analysis. The results showed no histological differences between the groups I and II.The analysis of the number of the myelinic axons and the value of the cross section area showed no significant difference among the three groups. It was not seen any sign of intoxication by vitamins, with the doses used in the present study / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Orientador: Sergio Tadeu Martins Marba / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T10:45:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ponte_MariniceDuarteda_M.pdf: 1389874 bytes, checksum: 127b5a445deedd96dda274b39f476ab2 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Este trabalho objetivou determinar alterações neurológicas em duas instituições no período de 01/12/1998 a 30/11/1999. Foram admitidos 292 recém-nascidos na Maternidade de Campinas e 206 no Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas, submetidos à ultra-sonografia transfontanelar, tendo sido determinadas e comparadas as prevalências gerais e por grupos de patologias nas instituições. Também foram analisados os resultados em função da idade gestacional, peso, adequação do peso à idade gestacional e sexo. Finalmente, foi feita a análise da ocorrência de hemorragia periintraventricular nos recém-nascidos com peso inferior a 1500 gramas. Os grupos estudados diferiram em relação à idade gestacional, adequação ao peso de nascimento, porcentagem de recém-nascidos pré-termos, de baixo e muito baixo peso ao nascer e freqüência de alterações neurológicas encontradas. Quanto à prevalência de hemorragia e sua extensão em recém-nascido de muito baixo peso, não houve diferença significativa entre as duas unidades, havendo diferença significativa quanto à adequação do peso à idade gestacional. Neste grupo, a variável que se manteve estatisticamente significativa foi a idade gestacional abaixo de 30 semanas. Concluímos que existem diferenças entre os dados ultra-sonográficos das duas instituições, provavelmente por suas diferenças epidemiológicas. A alta prevalência de lesões encontrada nos dois grupos deste estudo indica a necessidade da pesquisa rotineira pelo método proposto / Abstract: This study aimed to evaluate the neurological changes found in two institutions from 12/01/1998 to 11/30/1999. For this purpose, 292 newborns were selected from the Campinas Maternity Hospital and 206 ones were selected from the Center for Integral Assistance to Women¿s Health of the State University of Campinas. All of them were submitted to a transfontanel ultrasonography, according to their protocols, and the determination and comparison of the general prevalence and the pathology groups in each institution. Then, the results were analyzed according to gestational age, weight, adequacy of weight to the gestational age, and sex. Finally, the newborns weighing less than 1,500 grams were evaluated regarding peri-intraventricular hemorrhage. The studied groups differ as to gestational age, adequacy to the birth weight, the frequency of preterm newborns, low and very low birthweight, and frequency of neurological changes found: intracranial hemorrhage and choroid plexus cyst. As to the peri-intraventricular hemorrhage prevalence and its extension, no significant difference was found between both units. Yet, a significant difference was found regarding the adequacy of weight to the gestational age. In this group, the variable gestational age fewer than 30 weeks was kept statistically significant. We concluded that differences were found in the ultrasound findings of both institutions. The high prevalence of neurological lesions found in both groups of this study proves the importance of the ultrasonographic diagnosis / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientadores: Iscia Lopes-Cendes, Fernando Cendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:21:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Torres_FabioRossi_M.pdf: 7583190 bytes, checksum: 82a86de9b55790740b827b62023fd6b1 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Os distúrbios do desenvolvimento cortical (DDC) são uma das principais causas de deficiência mental e epilepsia e podem ter uma etiologia genética predominante. Extensos estudos determinaram genes envolvidos nos DDC como a heterotopia nodular periventricular (HNP), o espectro da lissencefalia/heterotopia subcortical em banda (LIS/HSB) e a esquizencefalia. Os objetivos deste projeto foram: 1) pesquisar mutações nos quatro principais genes responsáveis por DDC (FLN1, LIS1, DCX e EMX2) em um grupo de pacientes com diferentes formas de malformações corticais e 2) estabelecer correlações entre as mutações encontradas e características de neuroimagem. Todos indivíduos participantes deste estudo possuíam exames de tomografia computadorizada (TC) ou ressonância magnética (RM). Nossa amostra foi dividida em três grupos: a) pacientes com heterotopias nodulares, b) portadores do espectro LIS/HSB e c) pacientes com esquizencefalia. Os pacientes foram genotipados pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando-se primers descritos na literatura. Os produtos de PCR foram analizados pela técnica de single strand conformation polymorphism (SSCP) e subsequentemente sequenciados manualmente ou por sequenciamento automático. Foram analisados 58 indivíduos com DDC. Nove possuíam heterotopias nodulares, 15 tinham o espectro LIS/HSB e 34 eram portadores de esquizencefalias. Também genotipamos 50 indivíduos normais pertencentes a um grupo controle. A pesquisa de mutações do gene FLN1 no grupo da heterotopias nodulares revelou uma mutação 1159G®C em 2 indivíduos relacionados apresentando o padrão clássico de HNP. Além disso, encontramos uma variante neutra IVSV + 519C®G em 3 pacientes (1 com padrão clássico e outros 2 com padrão atípico de HNP). No grupo das LIS/HSB 7 indivíduos mostraram-se portadores da substituição 1805C ® T também presente em 9 indivíduos normais. Um outro indivíduo com agiria/paquigira possui uma mutação 1385A®C levando a substituição de uma histidina por uma prolina na posição 277 da proteína. Além disso, uma variante normal rara IVSV + 19G®A no gene DCX foi encontrada em uma paciente com agiria/paquigiria. No grupo das esquizencefalias foram identificados 4 indivíduos com a alteração 796C®A que não leva a troca de uma arginina por outro aminoácido. Esta mesma alteração foi detectada em 4 controles normais. Concluímos que: a) pacientes com padrões atípicos de HNP não possuem mutação nos primeiros 6 exons codificantes do gene FLN1 e confirmamos a alta incidência de mutações no gene FLN1 em casos familiares de HNP; b) mutações de sentido trocado no gene LIS1 são raras em pacientes com LIS/HSB; c) a substituição 1805C®T é o mesmo polimorfismo descrito por KOCH et al. (1996); d) mutações de sentido trocado em LIS1 e sua localização em domínios WD terminais não estão associados com graus leves de lissencefalia; e) a substituição IVSV+19G®A no gene DCX é uma variante rara; f) a ausência de mutações no gene DCX pode ser explicada pela pequena amostra de pacientes com HSB, mosaicismo somático ou baixa estringência quanto as características de neuroimagem; g) as esquizencefalias parecem não ter base genética no gene EMX2 já que detectamos apenas polimorfismos neutros neste gene / Abstract: Cortical development malformations (CDM) are one of the most important causes of epilepsy and developmental delay. Extensive molecular genetic studies have resulted in gene discovery for CDM such as periventricular nodular heterotopia (PNH), lisencephaly/ subcortical band heterotopia spectrum (LIS/SBH) and schizencephaly. The main goals of this project were 1) to screen for mutations in the four main genes responsible for abnormal cortical development (FLN1, LIS1, DCX and EMX2) in a large cohort of patients with different types of cortical malformations and 2) to perform phenotype-genotype correlations. All patients included in this study had CT scans or high resolution MRI scans. We have divided our patients in three groups: a) individuals with nodular heterotopia, b) individuals with the LIS/HSB spectrum and c) individuals with schizencephaly. Mutation screening was performed by the polymerase chain reactions (PCRs). PCR products were analyzed by single strand conformation polymorphism (SSCP) and were subsequently sequenced using standard manual sequencing or an automatic sequencer. We have studied a total of 58 patients with CMDs. Nine had nodular heterotopia, 15 had the LIS/HSB spectrum and 34 individuals had schizencephaly. In the group of nodular heterotopias we have detected a 1159G®C mutation in the FLN1 gene in two related patients with classical HNP and a neutral variant IVS5 + 519C®G in three patients (1 with typical and 2 with atypical imaging findings). In the LIS/SBH group 7 patients had a 1805C® T substitution in the beginning of the untranslated 3'region that is also present in 9 control individuals. One patient with agyria/pachygyria had a 1385A®C transversion which changes a histidine for a proline in amino acid 277 of the LIS1 protein. Furthermore, We detected a rare polymorphism in the DCX gene, a IVSV+19G®A, in a female with agyria/pachygyria. In the group of the schizencephalies we have detected 4 individuals with a 796A®C substitution that does not change the identity of the wild type arginine. The same alteration was found in 4 individuals of the control group. We conclude that: a) patients with atypical PNH do not have mutations in the first six coding exons of the FLN1 gene and there is a high incidence of FLN1 mutations in classical familial PNH; b) missense mutations in the LIS1 gene are a rare finding in patients with the LIS/SBH spectrum and its localization in latter WD domains are not always related with less severe LIS; c) the substitution 1805C®T is the same polymorphism previously described by KOCH et al. (1996); d) the absence of mutations in the DCX gene in patients with SBH could be explained by our small sample of patients with this pattern of malformation, somatic mosaicism or low stringency for the neuroimage findings; e) the substitution IVSV+19G®A found in the DCX gene is a rare polymorphism (idiomorphism) f) schizencephalies appear not to have genetic background in the EMX2, since our study detected only a neutral polymorphism in these patients / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira, Edson Rosa Pimentel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:54:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pierucci_Amauri_M.pdf: 5128505 bytes, checksum: a07838aa6b35835acc1f67167d46c9dd (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A regeneração nervosa periférica é um fenômeno complexo que envolve diferentes tipos celulares, os quais auxiliam na regeneração axonal e na reorganização dos componentes da matriz extracelular do microambiente do nervo. Nesse, estão presentes as células de Schwann, fibroblastos, macrófagos, fibras de colágeno, laminina, fibronectina e proteoglicanos. Entre os componentes não neurais, as células de Schwann são fundamentais para o processo regenerativo, pois fagocitam os fragmentos de axônios e de bainha de mielina em degeneração no coto distal, guiam os axônios em regeneração através das bandas de Büngner e secretam fatores neurotróficos para a sobrevivência e crescimento neuronal. Entre os componentes da matriz extracelular, os proteoglicanos apresentam a propriedade de reter substâncias hidrossolúveis, interagir com outros componentes da matriz extracelular, e funcionar como receptores para fatores de crescimento. Tendo-se em vista as características estruturais dos proteoglicanos no que diz respeito à sua capacidade de retenção de moléculas hidrossolúveis, bem como a homologia de seus componentes a fatores de crescimento, o presente trabalho teve como objetivo investigar os efeitos do agrecan sobre a regeneração axonal in vivo, empregando-se a técnica da tubulização do nervo ciático. Adicionalmente, seus efeitos sobre o comportamento das células de Schwann serão investigados in vitro, através da cultura de explantes de nervo ciático. O nervo ciático esquerdo dos camundongos C57BL/6J (n=20) foi transeccionado e os cotos proximal e distal foram suturados no interior de um tubo de polietileno, permanecendo uma distância de 4mm entre os cotos. No grupo controle o tubo foi implantado e deixado vazio enquanto que no grupo experimental, esse foi preenchido com agrecam. Após 5 semanas, os animais foram sacrificados e o nervo regenerado foi processado para imunoístoquimica e microscopia eletrônica. Em cultura, nervos ciáticos de ratos Wistar (n=10) foram utilizados para estudo da migração e viabilidade celular. Os resultados in vitro mostraram que a migração e viabilidade celular foram maiores quando utilizada menor concentração de soro fetal bovino (20%) associada ao acréscimo do agrecam. In vivo, houve um aumento do número de fibras quando utilizado o agrecam (2343±370,31) em relação ao grupo controle (1522±424,58). Embora o diâmetro axonal, o diâmetro da fibra e a espessura da bainha de mielina tenham sido menores quando utilizado agrecam (3,01µm±0,10; 3,86µm±1,22; 0,36µm±0,10) em relação ao grupo controle (3,40µm±1,37; 4,53µm±1,56; 0,44µm±011), a razão ¿g¿ indicou que o padrão de mielinização foi proporcional ao diâmetro axonal no grupo com agrecam (0,76±0,06) e no controle (0,74±0,08). Os resultados desse estudo reforçam a hipótese que o agrecam, devido as propriedades biológicas e capacidade trófica, contribui para o processo da regeneração axonal e tem efeitos positivos sobre as células de Schwann / Abstract: Peripheral nerve regeneration is an intricate phenomenon that is dependent on the glial cells, which produce neurotrophic factors and reorganize the environment at the distal stump. It is well known that extracellular matrix components may have positive effects on both glial and neuronal survival and behavior. Among such molecules, collagen, laminin and fibronectin were proven to benefit the process both in vivo and in vitro. More recently, studies have shown that glycosaminoglycans also have, under certain conditions, a positive influence on the peripheral nerve regeneration process. In the present study we evaluated the effects of aggrecan, a high molecular weight proteoglycan, on non neuronal cell migration in vitro. Also, we investigated the properties of such a proteoglycan on axonal regeneration after sciatic nerve transection and tubulization. In vitro, non neuronal cell migration and viability were accessed for up to 2 weeks of culturing. In vivo, five weeks after tubulization, the number of axons, axonal and fiber diameter and myelin thickness were obtained from regenerated fibers found at the tube mid point. In culture, with lower fetal calf serum concentration (20%), aggrecan increased the glial cell number and viability. In vivo, the number of regenerated fibers was statistically greater when aggrecan was used (2343±370.31) compared to the empty tube (1522±424.58). Although the axonal diameter, fiber diameter and myelin thickness in the aggrecan treated group (3.01µm±0.10; 3.86µm±1.22; 0.36µm±0.10; respectively) were smaller than in the empty tube (3.40µm±1.37; 4.53µm±1.56; 0.44µm±0.11; respectively), the ¿g¿ ratio indicated a pattern of myelination that was proportional to the axonal diameter in both groups (0.76±0.06 - aggrecan; 0.74±0.08 - empty). The results of this study reinforce the hypothesis that aggrecan, due to its biological properties and trophic capabilities, contributes to the axonal regeneration process and has particularly positive effects on the Schwann cells / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Iscia Lopes Cendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:30:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_FlaviaChagas_M.pdf: 2665617 bytes, checksum: b552b22eff093aa5e800faf30ad82041 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: As ataxias espinocerebelares (ABC) formam um grupo heterogêneo de doenças degenerativas que envolvem o sistema nervoso central. Esse grupo se caracteriza clinicamente por apresentar disfunção cerebelar manifestada por ataxia de marcha, incoordenação e disartria. Nos casos familiares, o padrão de herança é variável, podendo ser compatível com herança autossômica dominante (HAD) ou herança autossômica recessiva (HAR). Para as ataxias espinocerebelares com HAR existem três lócus identificados até o momento: ataxia de Friedreich (AP) no cromossomo 9q; ataxia com deficiência de vitamina E (ADVE) no cromossomo 8q,. e uma forma muito rara de início da inf'ancia, IOSCA (Infantile Onset Spinocebellar Ataxia) no cromossomo 10q. A maioria dos casos de AP é causada por uma expansão em homozigose do trinucleotídeo (GAA)n localizado no primeiro ÍI1tron do gene -125. Esse gene codifica uma proteína de 210 aminoácidos denominada de Frataxina, com alvo mitocondrial. Alelos normais variam de sete a 30 unidades (GAA)n enquanto que alelos expandidos' variam de 100 a 1700 (GAA)n. A ADVE é clinicamente semelhante à AP, sendo que a maneira mais confiável de realizar o diagnóstico diferencial entre essas duas formas de ataxia é através da análise molecular. A ADVE é causada por mutações de vários tip?s ,e~ontradas no gene a-TTP, que codifica a proteína transportadora do alfa-tocoferol, com 278 aminoácidos. Pelo menos 13 tipos de mutações foram descritas até o momento. Neste estudo, foram genotipados 97 indivíduos pertencentes a 58 famílias não relacionadas. Uma freqüência de 15% de indivíduos afetados com a mutação AP foi encontrada Este é um estudo pioneiro no Brasil, onde estudamos a freqüência das mutações responsáveis pelas ataxias espinocerebelares com fIAR determinamos as características das mutações encontradas e realizamos estudos de correlação entre o genótipo e características feno típicas desses pacientes / Abstract: The spinocerebellar ataxia form a group of neurodegenerative disorders with clínical heterogeneity. They are characterized by cerebelIar dysfunction with progressive ataxia, incoordenation and dysarthria. Familial cases show variable pattem of inheritance: autossomal dominant (AD) or autossomal recessive (AR). To date, thereare four loci described for the spinocerebelIar ataxia with AR: Friedreich ataxia (F A) on chromosome 9q; ataxia with vitamin E deficiency (ADVE) on chromosome 8q, the lnfantile Onset SpinocerebelIar Ataxia (IOSCA) on chromosome 10q and ataxia telangiectasia on chromosome llq. the %25 gene. This gene encodes for a 210 aminoacids protein named Frataxin, with mitochondrial target. Normal (GAA)n alleles range ITom seven to 30 (GAA)n units and expanded (GAA)n alleles have 200 to 1700 (GAA)n units. ADVE is clinically identical to the FA,-and the best way to di:fferentiate between the two forms is by molecular testing. ADVE is caused by di:fferent types of mutations, found in the a-TTP gene, with codes for alpha tocopherol transfer protein, with 278 aminoacids. To date, there are 13 di:fferent mutations reported in a-TTP. We studied 97 individuais, belonging to 58 unrelated families. The ITequency of patients with FA mutation was 15% among our patients. No mutations were found in a-TTP gene by SSCP ana1ysis. This is the first report on the fTequency of different mutations causing spinocerebellar ataxia with AR inheritance in the Brazilian population. In addition, we analyzed the molecular characteristics of the mutations detected and performed genotype - phenotype correlation / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Lourenço Gallo Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T13:25:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maraes_VeraReginaFernandesdaSilva_M.pdf: 9466045 bytes, checksum: e4e2f54651e731c4699c9c53addf4d01 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O presente estudo tem como objetivo estudar a resposta da freqüência cardíaca durante o repouso, a manobra de Valsalva e determinar os padrões da variabilidade da freqüência cardíaca (VFC), nos domínios do tempo e da freqüência, durante a execução de exercício físico dinâmico de intensidades progressivas crescentes e alternadas, em voluntários sadios.Foram estudados 21 (vinte e um) voluntários considerados normais, do sexo masculino, com padrão ativo de vida; destes, dez eram pessoas jovens (J),com idades compreendidas entre 20 e 24 anos (mediana = 22,5) e onze outros eram pessoas de meia-idade (MI), com idades compreendidas entre 40 e 46 anos (mediana = 43). Os voluntários foram submetidos a: a) condição controle de repouso, nas posições supina e sentada; b) manobra de Valsalva (MV); c) Protocolo I: Teste de esforço físico dinâmico descontínuo (TEFDD) com potências progressivas: potência inicial de 25 Watts 0N) e incrementos de 10 em 10 W; d) Protocolo 11:TEFDO com potências alternadas; e) Protocolo 111:TEFDD com potência progressivas com medidas metabólicas: repetiu-se o protocolo I, utilizando-se a análise das variáveis ventilatórias; f) Protocolo IV: teste de esforço físico dinâmico contínuo em rampa, com medidas metabólicas: incrementos contínuos de 10 W a cada minuto, até a exaustão física. Antes de cada protocolo experimental os voluntários permaneceram por 15 minutos na condição de repouso supina e sentada. Os protocolos de TEFDD foram realizados em bicicleta de frenagem eletromagnética na posição sentada, e durante todos os protocolos experimentais a FC foi registrada e armazenada, batimento a batimento, em tempo real. A análise no domínio do tempo constou de: ajustes dos modelos autorregressivos-integrados-médias móveis (AR 1MA) para verificar o LA através da variabilidade da FC (protocolos I, 11, 111), cálculos dos índices de variabilidade (RMSM e RMSSD) dos intervalos RR (IRR) obtidos durante o repouso e durante potências dos TEFDD (protocolo I), cálculos dos deltas e índices de Valsalva. Por outro lado, para a análise no domínio da freqüência utilizou-se a transformada rápida de Fourier (TRF). Os resultados na condição de repouso mostram que os valores absolutos da FC são maiores na postura sentada comparativamente à postura supina para ambos os grupos (P<0,05); existe uma maior VFC no grupo J (P<0,05); e que as áreas de AF são maiores nos voluntários J comparativamente aos voluntários de MI. Os resultados dos TEFD, mostram que as potências de esforço físico expressas em mediana nas quais ocorreu o LA foram similares para o grupo J, onde o LA ocorreu em 75 e 85 W e para o grupo de MI em 60 e 75 W nos protocolos 1e 11(P>0,05), respectivamente; os índices espectrais não mostram diferenças estatisticamente significantes nas potências de esforço físico e entre os grupos estudados (P>0,05). Os resultados obtidos a partir da FC durante a MV sugerem que o índice de Valsava expressa melhor as diferenças de respostas entre os grupos estudados do que deltas (incrementos), uma vez que os valores (medianas) dos índices de Valsalva calculados com os dados de FC (J = 2,01 e MI = 1,75) e com os IRR (J= 2 e MI = 1,70) foram estatisticamente diferentes (P< 0,05). Os nossos resultados suportam a idéia de que os voluntários de MI possuem: 1) menor VFC (repouso, TEFDD) e menor resposta reflexa à MV, o que reflete uma diminuição da atividade parassimpática atuante sobre o nódulo sinoatrial e 2) menor nível do LA, expresso em potência, comparativamente aos voluntários J, refletindo uma menor capaci- dade aeróbia em tais voluntários. O método ARIMA mostrou um melhor ajuste ao conjunto de dados em relação a regressão linear (método dos mínimos quadrados) e a transformada rápida de Fourier, no que diz respeito à mudança do padrão de VFC, que expressa o limiar de anaerobiose / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Lourenço Gallo Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Física / Made available in DSpace on 2018-07-24T17:06:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Chacon-Mikahil_MaraPatriciaTraina_M.pdf: 3389104 bytes, checksum: 1a442fdefdd85d15db6f276c5e2bcae9 (MD5) Previous issue date: 1993 / Mestrado

Orientador: Eduardo Vera Tibiriça / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T22:03:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas_VanessaEstatode_M.pdf: 1904058 bytes, checksum: ef4cba4a38edd86a43acec7c1e161c30 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A aranha Phoneutria nigriventer, popularmente conhecida como aranha armadeira, é responsável pelo maior número de acidentes com araneídeos na América do Sul, particularmente no Brasil. As manifestações clínicas observadas após o envenenamento incluem sudorese, hipotermia, fasciculação muscular generalizada, vômitos, arrtimias cardíacas, taquicardia e hipertensão arterial. Estudos recentes descreveram os efeitos cardiovasculares do veneno da P. nigriventer após a administração intravenosa em ratos anestesiados, quando o ven.eno causa uma resposta bifásica da pressão arterial, caracterizada por hipotensão transitória seguida por hipertensão prolongada. Demonstrou-se ainda que os efeitos cardiovasculares produzidos pelo veneno não envolvem a participação de mediadores endógenos sistêmicos como a bradicinina, a acetilcolina, a angiotensina li, o óxido nítrico, o PAF e as catecolaminas entre outros. No presente estudo investigamos os efeitos cardiovasculares do veneno da P. nigriventer em coelhos anestesiados, assim como os mecanismos de ' ação da resposta hipertensora induzida pelo veneno. Os experimentos foram realizados em coelhos albinos New Zealand anestesiados com barbitúricos, imobilizados e artificialmente ventilados. Para a avaliação dos efeitos hemodinâmicos do veneno da P. nigriventer, foram monitorizados a pressão arterial, freqüência cardíaca, débito cardíaco, pressões do ventrículo esquerdo e dP/dtmax. A injeção intracerebroventricular do veneno da P. nigriventer (100 1-19/kg) induziu importantes aumentos de pressão arterial, queda no débito cardía.co e aumento da resistência vascular sistêmica e inotropismo positivo. Ao contrário, a injeção da mesma dose do veneno pela via sistêmica induziu hipotensão arterial e queda da resistência vascular sistêmica. O pré-tratamento i.c.v. com diversos antagonistas de neuromoduladores ou neurotransmissores envolvidos no controle central da pressão arterial tais como a bradicinina, acetilcolina, angiotensina 11 e o glutamato não foi eficaz em inibir os feitos hipertensores induzidos pelo veneno. O tratamento com ifenprodil, um modulador do sítio das poliaminas do receptor NMDA, bloqueou parcialmente a resposta cardiovascular à injeção LcoVo do veneno. Utilizamos também a técnica de desmedulação dos animais, com o propósito de. eliminar a participação do sistema nervoso central na resposta induzida sistemicamente pelo veneno. Os resultados observados neste trabalho demonstraram que a administração intravenosa do veneno induz uma resposta hipertensora devida, provavelmente, à ativação do sistema nervoso simpático, com conseqüente ativação dos receptores a-adrenérgicos, já que a administração intravenosa de prazosin bloqueou a resposta induzida centralmente pelo veneno. Finalmente, em animais íntegros, o tratamento com o prazosin por via intravenosa bloqueou os efeitos cardiovasculares induzidos após a administração sistêmica ou central do veneno da P. nigriventero Nossos resultados sugerem que os efeitos cardiovasculares produzidos pelo veneno da P. nigriventer possuem componentes de ação central e periférica. O mecanismo de ação central teria como via efetora final a ativação do sistema nervoso simpático e conseqüente ativação dos receptores alfa¬ adrenérgicos ao passo que o mecanismo de ação periférica, provavelmente envolve a ativação direta e/ou indireta dos receptores a- adrenérgicos vasculares / Abstract: The putative central effects of Phoneutria nigriventer venom have been investigated. New Zealand rabbits were anaesthetized, immobilized and artificially ventilated. The arterial pressure (AP), cardiac output (CO), the pressures of the left ventricle, dP/dt max were continuously monitored and systemic vascular resistance (SVR) was calculated from CO values. The intracerebroventricular injection of increases doses of PNV (30 1l9.kg-1 and 100 1l9.kg-1) (n=5-13), produced an increase in MAP (61 2: 5 and 61 2: 10 %), in SVR (135 2: 21 and 161 2: 37 %) and the dP/dt max (302: 21 and 37 2: 7 %), respectively and a decrease in CO. These changes were accompanied by tachycardia, salivation, fasciculations and arrythmias. At the contrary, the same dose of the Phoneutria nigriventer venom injected intravenously produced only a hypotensive effect with a decrease of the SVR. Moreover, a much higher dose of the PNV (1 mg.kg-1) injected intravenously produced a similar hypertensive effect with a increase in MAP (702: 9 %), in SVR (1082: 31 %) and dP/dt max (51 2: 8 %). The central administration of atropine (10 1l9), Hoe 140 (0.5 1l9/kg), Losartan (50 1l9/kg) and kynurenic acid (250 1l9/kg) did not inhibited the hypertensive response induced by the i.c.v. injection of PNV (30 1l9/kg). Only ifenprodil (100 1l9/kg) was able to partly reduce the P. nigriventer venom effects. This result is "probably due to the fact that ifenprodil is also an a blocker. The pretreatment of the animais with intravenous injections of prazosin (100 1l9/kg) promptly reduced the hypertensive response induced by PNV injected centrally and systemically. In pithed rabbits, the pretreatment with prazosin (100 1l9/kg) but not atenolol (0,5 1l9/kg) abolished the hypertensive resposnse induced by P. igriventer venom. Our results indicate that the PNV central and peripheral effects. The central mechanism of action may activate the sypathetic nervous system with consequent activation of a-adrenoceptors and the peripheral effects probably due to a direct or indirect (catecolamines release) ativation of the a- adrenoceptors / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências Médicas