O presente trabalho objetivou verificar se a conformação vulvar e a espessura da união útero placentária (EUUP) são indicativos de placentite ascendente em éguas Puro Sangue de Corrida no final da gestação. Foram utilizadas 333 éguas Puro Sangue de Corrida, com idades que variaram de 3 a 28 anos. As éguas foram examinadas nos últimos 30 dias que antecederam a previsão de parto, para avaliação da condição corporal, análise da conformação vulvar, medida da espessura da união útero placentária (EUUP). Os parâmetros de conformação vulvar foram avaliados pelo comprimento vulvar efetivo e total (CE e CT), maior ângulo de inclinação (MA) da vulva, ângulo de inclinação até a comissura dorsal (A). O resultado CE x A forneceu o Índice Caslick (IC). Após o parto uma amostra da região da estrela cervical foi retirada para exame histopatológico do cório alantóide para diagnóstico de placentite.A condição corporal média das reprodutoras foi 4,1 (±0,6); o maior ângulo de inclinação (A) médio foi de 11,5º (±8,8); o ângulo até a comissura dorsal médio foi de 10,5º (±8,3), o comprimento vulvar efetivo (CE) médio foi de 2,3 cm (±1,6) e o comprimento vulvar total (CT) médio foi de 7,2 cm (±1,9); o Índice Caslick (IC) médio foi de 24,9 (±29,6). O modelo de equação logística utilizou como variável resposta o resultado do exame histopatológico da placenta, e como variáveis explicativas o comprimento efetivo e a espessura média da união útero placentária (EUUP) e suas interações, por terem P inferiores a 0,3. Não se observaram diferenças significativas entre os termos do modelo. Conclui-se que a conformação vulvar e a espessura da união útero placentária (EUUP) não são indicativos de placentite ascendente na égua Puro Sangue de Corrida no final da gestação. / The present study aims to verify if the combined thickness of the uterus and placenta (CTUP) and vulvar conformation are indicative of ascending placentitis on thoroughbred broodmares in the end of gestation. 333 thoroughbred broodmares, with ages between 3 and 28 years old were used. The broodmares were examined 30 days prior to the expected birth date for evaluation of body condition, vulvar conformation, CTUP. The parameters of vulvar conformation were evaluated by its total length and effective length (TL and EL), vulva greater declination angle, declination angle until dorsal commmisure (A). A Caslick Index (IC) was obtained upon A x CE measurements factor (IC). A sample of the cervical star region was taken after the birth for histopathological exam of the allantochorion for placentitis diagnosis. The average body condition of the broodmares was 4,1 (±0,6); average (A) was 11,5º (±8,8); average angle until dorsal commmisure was 10,5º (±8,3), the average effective length (CE) was 2,3 cm (±1,6) and the vulvar average total length (CT) was 7,2 cm (±1,9); the average Caslick Index (IC) was 24,9 (±29,6). The model of logistic equation used as explanation variable the result of the placenta histopathological exam, and as answer variables the effective length and CTUP, and its interactions, by having P lower than 0,3. No significant differences were observed between the terms of the model. It was concluded that vulvar conformation and thickness of the uterus and placenta (CTUP) are not indicatives of ascending placentitis on the thoroughbred broodmares in the end of gestation.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-08T12:45:24Z No. of bitstreams: 1 Elane Rafaela Cordeiro Nunes.pdf: 921731 bytes, checksum: eddcacad472e8bebb52d60738ec901b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T12:45:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elane Rafaela Cordeiro Nunes.pdf: 921731 bytes, checksum: eddcacad472e8bebb52d60738ec901b1 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / The widespread use of antimicrobials for veterinary and human medicine is the main cause of the selection of resistant bacteria. Monitoring antimicrobial use the occurrence of disease and profile of bacterial resistance to antimicrobial assists in policy formulation and solution of public events related to ecological and microbial diseases. The use of these drugs for milking animals may result in residues in milk and favors the selection of bacteria. In the Southeast and South of Brazil there is more research on antimicrobial residues in raw milk. Thus, the objective of this study was to evaluate the frequency of antibiotic residues in raw milk produced in farms located in the microregion of Garanhuns of the state Pernambuco. Like, make a survey of active antimicrobials sold in pharmacies veterinary and human that region. We analyzed 84 samples of milk collected in expansion tanks or drums, coming from 84 herds in 19 counties. In each farm received a questionnaire on milk production, health management and use antimicrobial. The survey of antimicrobials in milk was performed with kit Charm Cowside II®. The results showed that 14.29% of fresh milk were positive for the presence of antimicrobial residues in milk. The only variable significantly associated with the presence of antimicrobial residues in milk was the type of milking (p=0.038) with a predominance of positive results in the technique of milking mechanics the foot. The active principle antimicrobials often used in dairy cattle herd are tetracyclines, aminoglycosides anda penicillins. The presence of antimicrobial residues in fresh milk was detected in over 50% of the municipalities of the region of Garanhuns, PE. The milking technique as well as the hygienic milking may favor the presence of antimicrobial residues in fresh milk. There were differences in the classes of antimicrobials used in the dairy herd in 47.3% of the municipalities. The diagnosis of antimicrobials showed some of the health and economic risks associated with the use of these drugs in dairy cattle herd in the region. And hence the need to implement intervention strategies in order to control the irrational use of these drugs in animals, and the development of research related to antimicrobial efficacy in human and veterinary medicine. / O amplo uso de antimicrobianos na medicina veterinária e humana é a principal causa da seleção de bactérias resistentes a antimicrobianos. Monitorar o uso de antimicrobianos, a ocorrência de doenças e o perfil de resistência bacteriana a estes fármacos auxilia na formulação de política públicas e na elucidação de fatos relacionados a ecologica microbiana e das doenças. No rebanho leiteiro, a utilização desses fármacos pode resultar na presença de resíduos no leite, o que favorece a seleção de bactérias. As pesquisas elaboradas no intuito de detectar resíduos de antimicrobiano em leite in natura estão concentradas nas regiões Sudeste e Sul do país. Desse modo, o objetivo do presente trabalho foi pesquisar resíduos de resíduos de antimicrobianos em leite in natura produzido em propriedades rurais localizadas na microrregião de Garanhuns do Estado de Pernambuco. Foram analisadas 84 amostras de leite coletadas em tanques de expansão ou latões, procedentes de 84 propriedades localizadas em 19 municípios. Em cada propriedade foi aplicado um questionário sobre produção leiteira e manejo sanitário e uso de antimicrobiano. A pesquisa de antimicrobianos no leite foi realizada com o Kit Charm Cowside II®. Os resultados evidenciaram que 14,29% do leite in natura foram positivos para presença de resíduos de antimicrobianos no leite. A única variável de manejo que teve associação significativa com a presença de resíduos de antimicrobianos no leite foi o tipo de ordenha (p=0,038) com predominância de resultados positivos na técnica de ordenha mecânica ao pé. Os princípios ativos de antimicrobianos frequentemente utilizados no rebanho bovino leiteiro da microrregião pertencem à classe das tetraciclinas, aminoglicosídeos e penicilinas. A presença de resíduos de antimicrobianos em leite in natura foi detectada em mais de 50% dos municípios da microrregião de Garanhuns, PE. A técnica de ordenha, assim como o manejo higiênico durante a ordenha pode favorecer a presença de resíduos de antimicrobianos em leite in natura. Houve diferença nas classes de antimicrobianos utilizadas no rebanho leiteiro em 47,3% dos municípios. O diagnóstico sobre os antimicrobianos evidenciou alguns dos riscos sanitários e econômicos associados ao uso destes fármacos no rebanho bovino leiteiro da região. E consequentemente, a necessidade da implantação de estratégias de intervenção, visando controlar o uso irracional desses fármacos nos animais, e a elaboração de pesquisas relacionada à eficácia antimicrobiana na medicina humana e veterinária.

As doenças entéricas associadas com diarreia, desidratação e perda de peso constituem um dos principais problemas da bovinocultura mundial, contribuindo para expressivos índices de morbidade e mortalidade, principalmente entre neonatos. Nesse contexto, exigências para o aprimoramento do diagnóstico laboratorial de doenças entéricas de natureza infectocontagiosa, tornaram-se constantes, face às perdas econômicas vinculadas. Entre os principais enteropatógenos virais, de distribuição mundial e história recente, destaca-se o astrovírus bovino (BoAstV), cuja primeira identificação data de 1978. BoAstV entérico induz diarreia principalmente entre neonatos e imunocomprometidos, tendo uma prevalência acima de 60% nas 5 primeiras semanas de vida dos animais. Devido à carência de dados a respeito da prevalência desse vírus no Brasil, o presente estudo foi realizado objetivando a detecção e caracterização moleculares de cepas de BoAstV em amostras fecais de bovinos com e sem diarreia de diferentes idades. O estudo foi conduzido a partir de 272 animais em diferentes estados do Brasil, obtendo-se 14,3% de positividade através de RT-PCR, sendo que 11 amostras, provenientes dos estados de São Paulo, Minas Gerais e Rio Grande do Sul, foram submetidas ao sequenciamento nucleotídico. A similaridade entre as sequências deduzidas de aminoácidos das amostras obtidas foi maior do que 86,8%, quando comparadas umas com as outras, e situou-se entre 86,2 a 94,8% quando comparadas com sequências de outros BoAstV descritos. Nas reconstruções filogenéticas, 9 amostras agruparam-se conjuntamente em clado distinto de outros BoAstV, uma amostra (BoAstV-155-BRA) formou ramo parafilético a clado que agrupa tanto outros BoAstV como astrovírus de cervídeos e a amostra restante (BoAstV-267-BRA) formou ramo basal aos astrovírus bovinos e suínos. No entanto, o posicionamento das 2 amostras divergentes (BoAstV-155-BRA e BoAstV-267-BRA) não derivou de episódios de seleção positiva ou recombinação. Em síntese, os resultados obtidos indicam, de maneira inédita, a circulação de variantes de BoAstV entérico em rebanhos de estados da região centro-sul do Brasil. / Enteric diseases associated with diarrhea, dehydration and weight loss is one of the major problems of cattle worldwide, contributing to significant morbidity and mortality, especially among newborns. In this context, demands for improving the laboratory diagnosis of infectious enteric diseases, became constant, given the economic losses involved. Among the major viral enteropathogens of worldwide distribution and recent history, highlight the bovine astrovirus (BoAstV), whose first mention dates from 1978. Enteric BoAstV induce diarrhea especially among newborns and immunocompromised animals, having a prevalence above 60% in the first 5 weeks of life. Due to lack of data concerning the occurrence of this virus in Brazil, the present study was aimed at molecular detection and characterization of BoAstV strains in fecal samples from cattle with and without diarrhea of different ages. The study was conducted on 272 animals from different states of Brazil, obtaining positivity of 14.3% by RT-PCR, and 11 samples from the states of São Paulo, Minas Gerais and Rio Grande do Sul were subjected to nucleotide sequencing. The similarity between the deduced amino acid sequences of the samples was greater than 86.8% when compared with each other and was between 86.2 to 94.8% compared with sequences of other BoAstV described. In phylogenetic reconstructions, 9 samples were grouped together in a separate clade from other BoAstV, a sample (BoAstV-155-BRA) formed a paraphyletic branch to a clade that groups both other BoAstV and deer astrovirus and the remaining sample (267-BRA-BoAstV ) formed a basal branch to bovine and porcine astrovirus. However, the positioning of the two different samples (BoAstV-155-BRA and BoAstV-267-BRA) did not derive from episodes of positive selection or recombination. In summary, the results indicate, in an unprecedented manner, the circulation of enteric BoAstV variants in herds of cattle form states of the south-central region of Brazil.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2016-08-23T17:05:27Z No. of bitstreams: 1 2011 - Michele Valadares Deveza.pdf: 2385296 bytes, checksum: 127bd8c33d0595f06af98fe22cfc21e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-23T17:05:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011 - Michele Valadares Deveza.pdf: 2385296 bytes, checksum: 127bd8c33d0595f06af98fe22cfc21e1 (MD5) Previous issue date: 2011-02-08 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The bee?s pollen is a product rich in essential nutrients to feed the bees. In the hive it goes through chemical processes and becomes the bee?s bread, of extreme importance for the growth of larvae. Currently, the use of pollen in the human?s cuisine has been increasing for its therapeutic properties, and by its use in the food industry. To produce quality pollen the hive needs to be healthy, and bees, like any other animal, are susceptible to various diseases, parasites and predators, which can affect their development and productivity. The The Brazilian Sac Brood (BSB) is one of these diseases, which in Brazil affects honeybee larvae. In apiaries of Rio de Janeiro state, a high mortality of larvae with symptoms similar to the BSB is occurring, and until now, there is no definite conclusion regarding the etiologic agent of this disease in the state. Therefore, the objectives of this study was to clarify two issues: 1) provide a mycological research, through a study case, of bees? bread samples, adult bees and bees? pollen in areas affected and not affected by the BSB, aiming the elucidation of its etiologic agent, 2) verify the hygienic quality of dehydrated pollen samples sold in Rio de Janeiro state. A total of 48 samples of bees? bread, 15 of adult bees and 12 of pollen were collected from endemic regions of the BSB. The samples were collected in the months before, during and after the period of the disease. The dehydrated pollen samples were also purchased in commercial stores of the state, totaling 27 samples. Fungal species enumeration (cfu g-1) was through decimal dilution method using general culture media and selective ones. The isolation frequency and relative density of species were determined. The toxigenic profile of strains was determined, as also the detection and quantification of aflatoxin B1 in bread and bees? pollen. The results obtained from the study case samples showed that the bees? bread was the best vehicle of contamination for the hive. It was also observed a high fungal counts and the presence of mycotoxins and entomopathogenic fungi such as Aspergillus flavus, A. niger aggregate and A. fumigatus, which cause a decrease of the immune response, leaving them susceptible to various diseases, including the BSB itself. Pollen dehydrated samples showed a high fungal contamination with 92% of the samples in unsatisfactory hygienic conditions according to legal standards. A total of 25% of the A. flavus strains showed to be aflatoxigenic. The high percentage of unhygienic samples combined with the presence of a large variety of fungal contaminants, including mycotoxin-producing species, evidences that the legislation needs to be updated so that it can be safely commercialized. It is considered that the whole line production of bees? pollen, since its extraction until its storage should be monitored in order to minimize risks to human health. / O p?len ? um produto ap?cola rico em nutrientes essenciais para a alimenta??o das abelhas. Na colmeia ele passa por processos qu?micos e se torna o p?o de abelhas, de extrema import?ncia para o crescimento das larvas. Atualmente, o p?len ap?cola vem se destacando tamb?m na alimenta??o humana, tanto por suas propriedades terap?uticas, quanto pela sua utiliza??o na ind?stria aliment?cia. Para a produ??o de um p?len de qualidade a colmeia precisa estar sadia, e as abelhas, como qualquer outro animal, s?o suscept?veis a v?rias doen?as, parasitas e predadores, que podem prejudicar seu desenvolvimento e produtividade. A Cria Ensacada Brasileira (CEB) ? uma dessas doen?as, que no Brasil acomete larvas de abelhas mel?feras. Em api?rios do estado do Rio de Janeiro v?m ocorrendo uma alta mortalidade de larvas com sintomatologia semelhante a da CEB, e ainda n?o h? uma conclus?o definitiva acerca do agente etiol?gico desta doen?a no estado. Portanto, os objetivos desse estudo visam esclarecer duas problem?ticas: 1) avaliar, atrav?s de estudo de caso, amostras de p?o de abelhas, abelhas adultas e p?len ap?cola em regi?es atingidas e n?o atingidas pela CEB, diagnosticando a presen?a de fungos, visando fornecer informa??es importantes para a elucida??o do agente etiol?gico da CEB no estado do Rio de Janeiro; 2) verificar a qualidade higi?nica das amostras de p?len desidratado comercializado no estado do Rio de Janeiro. Um total de 48 amostras de p?o de abelhas, 15 de abelhas adultas e 12 de p?len ap?cola, foram adquiridas de regi?es end?micas da CEB. As coletas ocorreram nos meses que antecederam, durante e ap?s o per?odo da doen?a. J? as amostras de p?len desidratado foram adquiridas no com?rcio do estado, totalizando 27 amostras. A enumera??o da micobiota (ufc g-1) foi realizada atrav?s do m?todo de dilui??o decimal com semeadura em placas utilizando-se meios de cultivo gerais e seletivos. Foram determinadas a freq??ncia de isolamento dos g?neros f?ngicos e a densidade relativa das esp?cies. Foi determinado o perfil tox?geno de cepas isoladas e foi feita a detec??o e quantifica??o de aflatoxina B1 no p?o de abelhas e p?len ap?cola. Nos resultados obtidos das amostras do estudo de caso, o p?o de abelhas mostrou ser o melhor substrato para o ve?culo de contamina??o para a colmeia. Observou-se tamb?m altas contagens f?ngicas, al?m da presen?a de micotoxinas e fungos entomopatog?nicos, como Aspergillus flavus, A. niger agregados e A. fumigatus o que favorece a queda da imunidade desses insetos deixando-os suscet?veis a diversas doen?as, entre elas a pr?pria CEB. Em rela??o ao p?len desidratado, os resultados mostraram uma alta carga f?ngica com 92% das amostras em condi??es higi?nicas insatisfat?rias segundo os padr?es legais consultados e 25% das cepas de A. flavus mostraram-se potencialmente produtoras de aflatoxinas. Os alt?ssimos percentuais de reprova??o das amostras para a qualidade higi?nica, aliado ? presen?a de grande variedade de fungos contaminantes, incluindo esp?cies produtoras de micotoxinas, ? uma evid?ncia de que a legisla??o necessita ser atualizada, para que este produto possa ser comercializado com seguran?a. Considera-se que toda a linha de produ??o do p?len ap?cola, desde sua coleta at? o armazenamento deva ser monitorada, a fim de minimizar os riscos para a sa?de humana

Submitted by Leticia Schettini (leticia@ufrrj.br) on 2016-08-29T16:13:08Z No. of bitstreams: 1 2010 - Paula Sant?ana Alves.pdf: 1049254 bytes, checksum: 295fd608eecdae86916f71cbebfc389e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-29T16:13:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010 - Paula Sant?ana Alves.pdf: 1049254 bytes, checksum: 295fd608eecdae86916f71cbebfc389e (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPQ / Stomoxys calcitrans is a hematophagous fly of which parasitism causes economic losses related to the reduction of milk production and weight gain. Due to the high level of resistance of the stable fly to most of chemical insecticides, it is necessary to search for new alternatives for their control, and one of them would be the use of entomopathogenic fungi. However, few researches related to microbial control of this fly were carried out. The objective of this study was to assess the ability of the Lecanicillium lecanii fungus in to make unfeasible eggs, larvae and pupae of the stable fly under laboratory conditions and verify the formation of inhibition zone in agar solid due to the presence of substances in the mucus and total homogenized larvae not previously exposed and sensitized to the fungus. The S. calcitrans colony was maintained in the Laborat?rio de D?pteros Hemat?fagos, UFRRJ. The tests were performed in the Laborat?rio de Controle Microbiano de Artr?podes, UFRRJ, where the strain CG 420 of L. lecanii was used to prepare the water suspensions. In assays with eggs, larvae and pupae of S. calcitrans, fungal suspensions were used at 2x108, 2x107, 2x106, 2x105 con.mL-1 concentrations, besides the positive control. In assays with eggs, they were immersed in different fungal suspension and transferred to Petri dishes with paper filter, which were added larval rearding medium and its respective suspension. Mortality was assessed five days after exposure, where it was observed whether stage change occurred. There was no significant difference in the hatching of eggs exposed to different fungal concentrations against the control. Larvae were subjected to the same treatment of eggs, and mortality was assessed ten to fifteen days after exposure. There was no significant difference in mortality of larvae exposed to the fungus when compared with the control group, however, the fungus L. lecanii was significantly able to reduce adult emergence from larvae exposed to the highest tested concentration and there was a percentage of emergence of 25,45% and 43,64% compared to 63,64% and 90,91% of the control group. The pupae were also immersed in different fungal suspensions, and transferred to Petri dishes with paper filter, added to its respective suspension. Mortality was assessed ten days after exposure. There was no significant difference in mortality of pupae exposed to different fungi concentrations. Filter paper discs were soaked in mucus samples and total homogenized from larvae of S. calcitrans not exposed and previously sensitized to the fungus L. lecanii and placed in petri dishes sown with the same fungus. It was not observed the formation of inhibition zone around the discs. The L. lecanii fungus was unable to make unfeasible eggs, larvae or pupae of S. calcitrans in tested fungal concentrations, however, was significantly able to reduce the emergence of adults when their third larvae stage were exposed to 2x108 con.mL-1 concentration. / Stomoxys calcitrans ? um d?ptero hemat?fago cujo parasitismo ocasiona perdas econ?micas relacionadas ? redu??o da produ??o leiteira e ganho de peso, al?m de estar associado ? dissemina??o e transmiss?o de agentes patog?nicos. Devido ao elevado grau de resist?ncia da mosca dos est?bulos a uma diversidade de inseticidas qu?micos, torna-se necess?rio a busca por alternativas para o seu controle, e uma delas seria a utiliza??o de fungos entomopatog?nicos. Todavia, poucas pesquisas relacionadas ao controle microbiano desta mosca foram realizadas. O objetivo deste estudo foi verificar a capacidade do fungo Lecanicillium lecanii em inviabilizar ovos, larvas e pupas de S. calcitrans em condi??es laboratoriais e verificar a forma??o de halo de inibi??o em meio de cultivo s?lido, em decorr?ncia de subst?ncias presentes no muco e no macerado total de larvas n?o expostas e previamente sensibilizadas ao fungo. A col?nia de S. calcitrans foi mantida no Laborat?rio de D?pteros Hemat?fagos, UFRRJ. Os ensaios foram realizados no Laborat?rio de Controle Microbiano de Artr?podes, UFRRJ. Nos ensaios foram utilizadas suspens?es aquosas do isolado CG 420 de L. lecanii nas concentra??es de 2x108, 2x107, 2x106, 2x105 con.mL-1, al?m do controle positivo. Nos ensaios com ovos, estes foram imersos nas suspens?es f?ngicas, e transferidos para placas de Petri com papel filtro, meio de desenvolvimento larval e 3 mL de sua respectiva suspens?o. A mortalidade foi avaliada cinco dias ap?s a exposi??o. N?o foi observada diferen?a significativa na eclos?o dos ovos tratados frente ao controle. As larvas foram submetidas ao mesmo tratamento dos ovos, e a mortalidade foi avaliada dez e quinze dias ap?s a exposi??o. N?o foi observada diferen?a significativa na mortalidade de larvas expostas ao fungo quando comparados com o grupo controle, entretanto, o fungo L. lecanii reduziu significativamente a emerg?ncia de adultos provenientes das larvas expostas ? concentra??o m?xima testada (2x108 con.mL-1) sendo observado um percentual de emerg?ncia de 25,45% e 41,82 %, em compara??o com 63,64% e 90,91% do grupo controle. As pupas tamb?m foram imersas nas suspens?es f?ngicas, e transferidas para placas de Petri com papel filtro e sua respectiva suspens?o. A mortalidade foi avaliada dez dias ap?s a exposi??o. N?o foi observada diferen?a significativa na mortalidade das pupas expostas ?s diferentes concentra??es f?ngicas. Discos de papel filtro foram embebidos em amostras de muco e macerado total proveniente de larvas de S. calcitrans n?o expostas e previamente sensibilizadas ao fungo L. lecanii e colocados em placas de Petri semeadas com o mesmo fungo (1x108 con.mL-1). N?o foi verificada a forma??o de halo de inibi??o ao redor dos discos. O fungo L. lecanii foi incapaz de inviabilizar ovos, larvas ou pupas de S. calcitrans nas concentra??es f?ngicas testadas, no entanto, reduziu significativamente a emerg?ncia de adultos quando suas larvas de terceiro est?dio foram expostas a concentra??o 2x108 con.mL-1.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-05-11T19:12:48Z No. of bitstreams: 1 2012 - F?bio Jorge Moreira da Silva.pdf: 1417566 bytes, checksum: a168314142bf607a64227972ff4c85e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-11T19:12:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012 - F?bio Jorge Moreira da Silva.pdf: 1417566 bytes, checksum: a168314142bf607a64227972ff4c85e8 (MD5) Previous issue date: 2012-06-06 / CNPq / Activities in high productivity systems to dairy cattle contribute to imbalance health and disease, and increase the possibility of illness compatible with the infestation and infections transmitted by arthropods vectors. The objectives were to evaluate the prevalence and the seroepidemiological condition for Anaplasma marginale in 41calves from birth to completed 180 days. The animals belonged to ?Centro Estadual de Pesquisa em Agricultura Org?nica? ? Pesagro-Rio, Serop?dica-RJ. There are few reports of molecular diagnostic techniques for this agent. The study was conducted during the rainy and dry seasons and collected a total of 1607 blood samples, initially every three days and processed using indirect ELISA test and PCR. Percent values for A. marginale seroprevalence as function of age were tested using the ?2 test at 5% significance level. The prevalence of anti-A. marginale antibodies were 39.8% in calves aged less than 30 days, 23.3% between 30 and 60 days, 27.3% between 60 and 120 days and 38.2% between 120 and 180 days, with 31.4% for samples of all age group (180 days). Calves aged between 30 and 60, 60 and 120 and 120 and 180 days were respectively 1.90, 1.75 and 1.55 more likely to be seronegative for A. marginale than newborn ones. All calves were positive to PCR until 13 days old. The values show that during the study calves had low levels of antibodies to A. marginale, a condition that predisposes them to the development of clinical anaplasmosis. In addition, the herd was considered unstable epidemiologically to A. marginale infection. The results show that animals had low antibody titers of IgG anti-A. marginale, being more susceptible to develop clinical anaplasmosis from 30 to 60 days. The results of the PCR method confirmed A. marginale in all animals before they are 15 days old and suggest the possibility of transplacental transmission occurs in the herd. / As atividades relacionadas a bovinocultura leiteira em sistemas de alta produtividade contribuem cada dia mais com o desequil?brio sa?de-doen?a, e aumentam a probabilidade de enfermidades compat?veis com as ectoparasitoses e as infec??es transmitidas por estes vetores. Os objetivos do trabalho foram detectar a infec??o por Anaplasma marginale de forma precoce e avaliar o n?vel de anticorpos IgG anti-A. marginale em bezerros nativos e naturalmente parasitados por Rhipicephalus microplus na Baixada Fluminense, estado do Rio de Janeiro. S?o escassos os relatos sobre t?cnicas de diagn?stico molecular para este agente. Um total de 41 bezerras foi acompanhado do nascimento aos 180 dias de idade. Os animais pertenciam ao Centro Estadual de Pesquisa em Agricultura Org?nica da Pesagro-RJ. O estudo foi conduzido nas esta??es chuvosa e seca, e foram coletados um total de 1607 amostras, com intervalo inicial de tr?s dias e processados utilizando o teste ELISA indireto e a t?cnica PCR. Os valores percentuais de soropreval?cia para A. marginale em fun??o da idade foram submetidos ao teste ?2 a 5% de signific?ncia. A preval?ncia de anticorpos anti-A. marginale nos bezerros, em fun??o da idade, foi de 39,8% do soro de animais com idade inferior a 30 dias, 23,3% entre 30 e 60 dias, 27,3% entre 60 e 120 dias e 38,2% entre 120 e 180 dias, com um percentual de 31,4% para as amostras de todo o grupo et?rio (180 dias). Bezerros com idade 30 - 60, 60 - 120 e 120 - 180 dias apresentaram respectivamente 1,90, 1,75 e 1,55 mais risco de serem soronegativos para A. marginale do que os animais rec?m nascidos. Os bezerros foram diagnosticados positivos a PCR em no m?ximo 13 dias de idade. Os valores demonstram que os animais estudados apresentaram baixos t?tulos de anticorpos da classe IgG anti-A. marginale, sendo mais suscet?veis a desenvolverem anaplasmose cl?nica entre 30 a 60 dias de vida. Os resultados do m?todo PCR comprovaram a circula??o de A. marginale em todos os animais antes de completarem 15 dias de vida e sugerem a possibilidade de ocorrer transmiss?o transplacent?ria no rebanho estudado.

A Salmonella continua sendo um dos principais problemas para a avicultura mundial. Os mecanismos pelos quais ela interage com o seu hospedeiro para causar doenças são complexos e dependem de vários fatores que ainda não foram completamente elucidados. Ainda estamos começando a entender como esse mecanismo funciona a nível molecular. Genes associados à virulência, resistência a antimicrobianos e adaptação ao meio em que vivem são considerados fatores de virulência em todas as bactérias. Neste trabalho sete protocolos para PCR (Polimerase Chain Reaction), testados internacionalmente, foram padronizados para a pesquisa de genes associados à virulência de Salmonella sp. em sua fase de aderência e invasão celular. Após a padronização dos protocolos, foi realizada a pesquisa desses sete genes em 41 amostras de Salmonella Hadar (S. Hadar), levando-se em conta a importância que esse sorovar vem adquirindo nos últimos anos. Também foram traçados o perfil de resistência a antimicrobianos e o perfil bioquímico nessas amostras de S. Hadar. Os sete protocolos para PCR se mostram viáveis para a pesquisa dos genes. Ao analisar as 41 amostras de S. Hadar para os genes estudados neste trabalho foram encontrados quatro perfis genéticos diferentes, sendo que apenas os genes sopE (Salmonella Outer Protein) e avrA (Avirulence), apresentando positividade em 4 e 7 amostras respectivamente, variaram entre os perfis. No teste com os antimicrobianos 73,17% das cepas se mostraram resistentes para a tetraciclina e ainda foram observados altos índices de resistência para a estreptomicina (31,70%) e ampicilina (29,27%). 13 cepas apresentaram multiresistência, sendo assim resistentes a dois ou mais agentes antimicrobianos. Os testes bioquímicos confirmaram todas as amostras como pertencentes ao gênero Salmonella, apresentando variações apenas nos testes de TSI em sua região de bisel, LIA em sua região de bisel, citrato e principalmente a arginina e o dulcitol. / Salmonella remains one of the biggest problems for the poultry industry. The mechanisms by which it interacts with its host to cause disease are complex and depend on several factors that have not been fully elucidated. Although we are just beginning to understand how this mechanism works at a molecular level. Genes associated with virulence, antibiotic resistance and adaptation to environment are considered virulence factors in all bacteria. In this work seven protocols for PCR (Polymerase Chain Reaction), tested internationally, have been standardized for detection of genes associated with virulence of Salmonella sp. in its phase of adhesion and cell invasion. After the standardization of protocols, was performed a research for this seven genes in 41 strains of Salmonella Hadar (S. Hadar), considering the importance of this serovar has acquired in the last years. Were also tested the antimicrobial resistance profile and biochemical profile in these samples of S. Hadar. The seven protocols for PCR are shown viable to the research of genes. Analyzing the 41 samples of S. Hadar for the genes studied in this work were found four different genetic profiles, in with only the sopE (Salmonella Outer Protein) and avrA (Avirulence) genes varied between the profiles, showing positivity in 4 and 7 samples respectively. In the test with the antimicrobials agents 73,17% of the strains proved resistant for tetracycline, and were still observed high levels of resistance to streptomycin (31,70%) and ampicillin (29,27%). Thirteen strains showed multidrug resistance, being resistant to two or more antimicrobial agents. Biochemical tests confirmed all samples as belonging to the genus Salmonella, with variations only in the tests of TSI in the region of the bezel, LIA in the region of bezel, citrate and especially arginine and dulcitol.

Membros termofílicos do gênero Campylobacter são reconhecidos como importantes enteropatógenos para o ser humano e animais. A grande diversidade ecológica destes microorganismos em diferentes habitats tais como: água, animais e alimentos predispõem ao aparecimento de novos fatores de virulência. Este trabalho teve por objetivo detectar os genes codificantes da Toxina Distensiva Citoletal (CDT) por meio da técnica de PCR, pesquisar a atividade de hemolisinas e a influência de soluções quelantes e de íons nesta atividade. Foram utilizadas 45 amostras de C. jejuni de origem avícolas para pesquisa de atividade hemolítica, cultivadas em Caldo Triptona de Soja (TSB). Após o crescimento bacteriano, as amostras foram semeadas em Ágar tríptico de soja (TSA) contendo 5% de sangue de ovino, equino e bovino, sendo cada sangue testado isoladamente. Para verificar a influência de agentes quelantes e solução de íons na atividade hemolítica, as amostras de C. jejuni foram cultivadas em TSB contendo separadamente os quelantes EDTA, ácido acético, soluções de íons CaCl2 , MgCl2 e FeCl3, em atmosfera de microaerofilia. Quanto à atividade de hemolisina de Campylobacter jejuni em placas de TSA – sangue, foi possível observar que houve hemólises em 48,89% das amostras quando utilizado sangue eqüino, em 40% em sangue de bovino e em 31,11% quando de ovino. Quanto à influência de agentes quelantes e íons em caldo TSB na atividade de hemolisinas em amostras de Campylobacter jejuni semeadas em placas de TSA – sangue ovino, foi observada atividade hemolítica em 26,67% quando utilizado CaCl2, 15,55% (FeCl3), 22,22% (EDTA), 11,11% (MgCl2) e apenas 2,22% (ácido acético). No tocante à atividade hemolítica, o TSA - sangue bovino apresentou 15,55% (CaCl2), 24,44% (FeCl3), 26,26% (EDTA), 20% (MgCl2) e 11,11% (ácido acético). A atividade hemolítica para o sangue equino foi de 24,44% (CaCl2), 22,22% (FeCl3), 28,89% (EDTA), 28,89% (MgCl2) e 8,89% (ácido acético). Para detecção dos genes cdtA, cdtB e cdtC através da técnica da Reação da Polimerase em Cadeia (PCR), foram utilizadas 119 amostras de C. jejuni de origem avícolas. Foi possível observar que 38% possuíam os três genes, e foram identificados somente os genes cdtA e cdtC em 19% do total de amostras, sendo que o gene cdtB foi encontrado em 14%, o gene cdtC foi observado em 12%, os genes cdtA e cdtB em somente 1%, os genes cdtB e cdtC em 1% e para cdtA em 1%. Observou-se que os resultados são dignos de atenção, pois demonstraram em amostras avícolas a presença de estirpes de C. jejuni com potencial virulento. A atividade hemolítica apresentou significativo aumento quando utilizado sangue de origem equina. A mesma foi diminuída quando utilizados agentes quelantes ou íons, nos três tipos de sangue. / Thermophilic members of the Campylobacter genus are recognized as important enteropathogenics for humans and also for other animals. The great diversity of ecological habitats in different organisms such as water, food, and animals may promote new virulence factors. This study aimed at detecting the distending cytolethal toxin (CDT) encoding genes by PCR, studying the activity of hemolysin and also the influence of chelation solutions and ions. A total of 45 samples of C. jejuni from poultry origin, grown in Tryptone Soy Broth (TSB) were used for investigating hemolytic activity. After bacterial growth, samples were plated on Tryptic Soy Agar (TSA) containing 5% sheep, equine or bovine blood, being each blood tested individually. In order to check the influence of chelation agents and ions solution on the hemolytic activity, samples of C. jejuni strains were grown in TSB containing chelation agents individually: EDTA, acetic acid, CaCl2 ion, MgCl2 and FeCl3 solutions, all in microaerophilic atmosphere. Regarding the detection of Campylobacter jejuni hemolysin activity on TSA plates, blood hemolysis were observed in 48.89 % of samples when equine blood was used; in 40% of samples when bovine blood was used and in 31.11 % when the blood used was of sheep origin. The influence of ions and chelation agents in hemolysin activity in TSB when Campylobacter jejuni was plated on TSA with sheep blood can be described as: hemolytic activity was observed at 26.67% of samples when CaCl2 was used, at 15.55 % for FeCl3, 22 22 % for EDTA, 11.11 % for MgCl2 and only 2.22% when acetic acid was used. The hemolytic activity detected when bovine blood - TSA was used indicated 15.55% for CaCl2, 24.44% for FeCl3, 26.26 % for EDTA, 20 % for MgCl2 and 11.11% for acetic acid. In terms of the hemolytic activity when equine blood was used, the results indicated 24.44% for CaCl2, 22.22 % for FeCl3, 28.89 % for EDTA, 28.89 % for MgCl2 and 8.89% for acetic acid. Finally, regarding the detection of cdtA, cdtB and cdtC through PCR, 119 samples of C. jejuni from poultry origin were used. The results indicated that all three genes were present in 38 % of the samples, whereas only two genes were identified in 19 % of samples, while the cdtB gene was singly found in 14%, the cdtC gene was independently observed in 12%, cdtA and cdtB genes together were found in 1% of the samples; the cdtB and cdtC genes associated were detected in 1%, while cdtA alone answered for 1% of detections. The results also showed the presence of C. jejuni strains with virulence potential. The hemolytic activity increased significantly when blood of equine origin was used, and that this activity was reduced when ions or chelating agents were used in combination with the three types of blood cells.

Made available in DSpace on 2017-07-10T15:14:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Cattaneo.pdf: 561766 bytes, checksum: 799e4a531c12c6339682bf2b62bd5254 (MD5) Previous issue date: 2015-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The crambe (Crambe abyssinica) is an oilseed crop belonging to the family of crucifers, which has good adaptability and hardiness and can be an alternative for the production of biodiesel. However, the occurrence of diseases might be a limiting factor for production. The objective of this study was to evaluate the effectiveness of seed treatment to control pathogens crambe seed, vigor analysis (size and fresh and dry weight) of seedlings, yield components and grain yield, using two biological products and three chemicals. The experimental design was completely randomized with six seed treatments (T0 - control; T1 - Trichoderma asperellum, T2 - Bacillus subtilis, T3 - glutamic acid, seaweed extract (Ascophillum nodosum), cobalt, molybdenum and manganese, T4 - thiamethoxam; T5 - zinc). Treatments when tested in the laboratory, resulted in no increase in the percentage of seed germination, although the treatments with T. asperellum and B. subtilis reduced the size of seedlings. In the field, yield components, except for the height and weight of 1000 grains were positively influenced by seed treatments. The chemical and biological treatments had suppressive effect of pathogens contained in the seeds, what can be an alternative for the control of pathogens in seeds of crambe, however, when they were tested in the field, only the treatments based on T. asperellum and B. subtilis and thiamethoxam resulted in increased productivity / O crambe (Crambe abyssinica) é uma cultura oleaginosa pertencente à família das crucíferas, que possui boa adaptação e rusticidade e pode ser uma alternativa para a produção de biodiesel. Porém, a ocorrência de doenças pode ser um fator limitante para a produção. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do tratamento de sementes de crambe no controle de patógenos da semente, análise de vigor (tamanho e massas fresca e seca) das plântulas, componentes de produção e produtividade de grãos, utilizando dois produtos biológicos e três produtos químicos. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com seis tratamentos de semente (T0 Testemunha; T1 Trichoderma asperellum; T2 Bacillus subtilis; T3 ácido glutâmico, extrato de alga (Ascophillum nodosum), cobalto, molibdênio e manganês; T4 tiametoxam; T5 zinco). Os tratamentos quando testados em laboratório, não resultaram em aumento da percentagem de germinação das sementes, porém os tratamentos com T. asperellum e B. subtilis reduziram o tamanho de plântulas. Em campo, os componentes da produção, com exceção da altura e da massa de 1000 grãos foram influenciados positivamente pelos tratamentos de semente. Os tratamentos químico e biológico tiveram efeito supressivo dos patógenos contidos nas sementes, mostrado-se uma alternativa para o controle de patógenos em sementes de crambe, porém, quando estes foram testados a campo, somente os tratamentos a base de T. asperellum, B. subtilis e tiametoxam resultaram em incremento de produtividade.

O objetivo geral deste trabalho foi avaliar a influência do uso precoce de antimicrobianos na microbiota intestinal, resposta imune e ocorrência de diarreias em bezerras recém-nascidas. Foram selecionadas 26 bezerras Holandesas distribuídas de acordo com a aplicação (ATB+) ou não (ATB-) de tulatromicina (2,5 mg/Kg - SC) até 12h de vida. Capítulo 1 Este capítulo avaliou a influência do uso precoce de antimicrobiano na sanidade de bezerras holandesas recém-nascidas, por meio do exame clínico geral. As diarreias foram detectadas por sistema de escore e matéria seca (%) nas fezes, além do escore respiratório e palpação externa da região umbilical. O desempenho das bezerras foi determinado pela estimativa do ganho de peso. As bezerras ATB- apresentaram maior frequência de mucosas esbranquiçadas (P=0,066) e inflamações umbilicais no ATB- em D3-5 (P=0,063) e D13-15 (P= 0,066). A frequência de escore fecal 2 e 3 foi semelhante entre os grupos, observando-se pico no D13-15. Os valores médios para matéria seca (%) foram menores no ATB+ no D7-9 (P=0,063) e D27-30 (P=0,084). O agente etiológico das diarreias foi o Cryptosporidium e/ou rotavírus. O ganho de peso diário (GPD) foi igual entre grupos, observando-se intensa redução no GPD em D13-15. Capítulo 2 O objetivo deste capítulo foi avaliar a influência do uso precoce de antimicrobianos na colonização bacteriana intestinal, por meio da detecção de material genético dos principais grupos bacterianos por meio do PCR em tempo real. Não foram observadas diferenças entre os grupos para bactérias totais e C. perfringens. As bezerras ATB- apresentaram maior quantidade de Bifidobacterium, nas fezes no D3-5 (P=0,002) e D7-9 (P=0,018). A população de Lactobacillus também apresentou tendência (P=0,097) para maior número de cópias de DNA no grupo ATB-. Ao contrário, a Escherichia coli apresentou tendência para maiores valores no grupo ATB+ no D20-23 (P=0,052) e D27-30 (P=0,072). Capítulo 3 O objetivo deste capítulo foi avaliar a influência do uso precoce de antimicrobianos no perfil inflamatório de bezerras holandesas recém-nascidas por meio de provas hematológicas, imunológicas, bioquímicas e eletroforéticas. Observou-se tendência para menores valores de hemoglobina (P=0,071), CHCM (P=0,057) e ferro sérico (P=0,051) no D3-5 no ATB-. Neste momento, a frequência de anemias também foi maior no ATB- (P=0,016). O número de neutrófilos (P=0,051) e a produção espontânea de EROs foi maior no ATB-, enquanto o número de linfócitos foi maior no ATB+ (P=0,061) no D7-9. Estes dados são condizentes com as análises imunes, no qual a proporção de populações de mononucleares 1 e 2 expressando o CD62L+ apresentou tendência para maior valor no ATB+ em D3-5 (P=0,098) e D7-9 (P=0,083). Após as diarreias (D13-15), os granulócitos (P=0,043) e mononucleares (P=0,089) das bezerras ATB+ apresentaram maior intensidade de fluorescência para expressão CD62L no D20-23. O grupo ATB+ também apresentou maiores teores de beta-globulina (P=0,057), gama-globulina (P=0,069) e haptoglobina (P=0,032) no D13-15. O uso precoce de tulatromicina influenciou na microbiota intestinal, imunidade inata e ocorrência de doenças no período neonatal. / The general goal of this research was to evaluate the influence of early antimicrobial use in the gut microbiota, immune response and occurrence of diarrhea in neonate heifers. It was screened 26 neonate Holstein heifers distributed according to the application (ATB+) or not (ATB-) of tulathromycin (2.5mg/Kg - SC) from birth until 12 hours of life. Chapter 1 This chapter evaluated the influence of early use of antimicrobial in the health of neonate Holstein heifer by general clinical examination. Diarrheas were detected using score system and fecal dry matter (%), besides of respiratory score and external palpation of navel region. The performance of calves was evaluated by daily weight gain. Heifers ATB- had high frequency of paleness mucous (P=0.066) and umbilical inflammation in ATB- group on D3-5 (P=0.063) and D13-15 (P= 0.066). The frequency of fecal score 2 and 3 was similar between groups, observing peak of diarrhea on D13-15. The mean values of fecal dry matter were low in ATB+ group on D7-9 (P=0.063) and D27-30 (P=0.084). The main etiologic agent of diarrheas was Cryptosporidium and/or rotavírus. The daily weight gain (DWG) was similar between groups, observing intense decrease of DWG on D13-15. Chapter 2 The aim of this chapter was to evaluate the influence of early use of antimicrobial in the microbial gut colonization by detection of genetic bacterial material using real time PCR. It was not found difference between groups for total bacteria and C. perfringens. The calves from ATB- group had high quantity of Bifidobacterium in the fecal material on D3-5 (P=0.002) and D7-9 (P=0.018). The Lactobacillus population had a tendency (P=0.097) to have high number of DNA copies in the ATB- group. On the other hand, Escherichia coli had tendency to high values in ATB+ group on D20-23 (P=0.052) and D27-30 (P=0.072). Chapter 3 The aim of this chapter was to evaluate the influence of early use of antimicrobial in the inflammatory profile of neonate Holstein heifers by hematological, immunological and biochemical tests, besides electrophoresis. It was possible to observe lower values of hemoglobin (P=0.071), CHCM (P=0.057) and serum iron (P=0.051) in ATB- group on D3-5. In this moment, the frequency of anemia also was high in ATB- group (P=0.016). The number of neutrophils (P=0.051) and spontaneous ROSs was high in ATB- group, while the number of lymphocytes was high in ATB+ group (P=0.061) on D7-9. These data were according to immune analysis, where the proportion of mononuclear population 1 and 2 expressing CD62L+ had a tendency for high values in ATB+ group on D3-5 (P=0.098) and D7-9 (P=0.083). After diarrhea (D13-15), granulocytes (P=0.043) and mononuclear cells (P=0.089) showed high fluorescence intensity of CD62L in ATB+ heifers on D20-23. ATB+ group also had high rate of beta globulin (P=0.057), gamma globulin (P=0.069) and haptoglobin (P=0.032) on D13-15. The early use of tulathromycin had influence on gut microbiota, innate immunity and occurrence of disease in the neonatal period.