Orientador:Mario Jefferson Quirino Louzada / Co-orientador:Paulo Cesar Ciarlini / Banca:Tatiana de Sousa Barbosa / Banca:Suely Regina Mogami Bomfim / Resumo:A determinação da capacidade antioxidante total (TAC) tem importância fundamental na avaliação do estresse oxidativo, tanto em humanos como em animais. Cada vez mais tem se tornado relevante o estudo de metodologias para determinar a TAC em várias áreas como em tecnologia e ciência de alimentos, laboratórios clínicos, nutrição animal e humana. Na espécie ovina esta determinação ainda não foi validada. Antes de iniciar qualquer tipo de análise da TAC, o método utilizado deve ser validado, pois a validação de métodos é um aspecto primordial da garantia da qualidade analítica. A validação é um processo dinâmico e constante, que se inicia na fase de seleção, desenvolvimento e otimização do método, qualidade dos instrumentos, materiais e analistas, permanecendo na fase de experimentos. Um processo de validação bem definido deve obedecer às características investigadas no processo de validação a fim de demonstrar o desempenho do método como: linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, precisão, exatidão, recuperação analítica e robustez. O método mais comumente utilizado para determinar a TAC é o método espectrofotométrico-colorimétrico que usa (ABTS˙+) 2,2'-azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-sulfonato). Apesar da existência de muitas técnicas modernas, o método espectrofotométrico tem demonstrado ser eficaz, além do baixo custo e de fácil manuseio. O método foi desenvolvido, padronizado e validado / Abstract:The determination of total antioxidant capacity (TAC) is important to evaluation of oxidative stress, in both humans and animals. The study of methodologies to the determination of TAC has become relevant in several areas such as technology and food science, clinical laboratory, animal and human nutrition. In sheep, this determination has not yet been validated. Before starting any type of analysis, the method used for TAC measurement must be validated, since method validation is a key aspect of analytical quality assurance. Validation is a dynamic and ongoing process that begins at the stage of selection, development and optimization of the method, the quality of the tools, materials and analysts, remaining in the experimental phase. A well defined process of validation must have the characteristics investigated in the validation process to demonstrate the performance of the method as: linearity, limit of detection, limit of quantification, accuracy, precision, analytical recovery and robustness. The most commonly used method used to determine the TAC is the spectrophotometric-colorimetry assay using the (ABTS˙+) 2,2'-azinobis (3- ethylbenzthiazoline-6-sulfonate). Despite the existence of many modern techniques, the spectrophotometric method has shown to be effective, in addition to lower cost and easy handling. The method was developed, validated and standardized / Mestre

Orientador: Paola Castro Moraes / Coorientador: Sérgio Britto Garcia / Coorientador: Andrigo Barboza De Nardi / Resumo: A síndrome do intestino curto (SIC) representa condição clínica grave na medicina, caracterizada pela deficiente absorção intestinal de nutrientes, causada pela perda extensa do intestino delgado, culminando em altas taxas de mortalidade tanto em pacientes humanos quanto veterinários. Os tratamentos disponíveis não possuem, até então, resultados satisfatórios para resolução desta importante afecção e consistem em terapias paliativas. Diversos estudos demostraram que o método de desnervação intestinal intrínseca, com utilização do Cloreto de Benzalcônio (CB), consiste em promissora esperança na busca de terapias menos invasivas e eficazes no tratamento da SIC, permitindo melhora nas condições pós-cirúrgicas e prognóstico dos pacientes, por aumentar a área absortiva do intestino. Objetivou-se, com esse trabalho, avaliar a capacidade do CB induzir desnervação química intrínseca, por meio de aplicações intramurais em íleo de ratos Wistar e aprofundar o conhecimento sobre a evolução da lesão neuronal causada neste processo. Foram utilizados 40 ratos, distribuídos em dois grupos (controle- GC e benzalcônio- GB) de 20 animais cada, subdivididos em quatro subgrupos de acordo com o tempo de avaliação pós-operatória de 24, 48 horas, 30 e 90 dias. Os animais foram submetidos à microinjeções intramurais de solução salina estéril 0,9% (GC) ou de cloreto de benzalcônio (GB) em porção ileal, e posterior análise histopatológica e imuno-histoquímica, para avaliação da lesão neuronal. Houve di... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Short bowel syndrome (SBS) represents a serious clinical condition in medicine, characterized by deficient intestinal absorption of nutrients, caused by extensive loss of the small intestine, culminating in high mortality rates in both human and veterinary patients. The available treatments do not have, until then, satisfactory results to solve this important affection and consist of palliative therapies. Several studies have shown that the intrinsic intestinal denervation method, using Benzalkonium Chloride (BC), is a promising hope in the search for less invasive and effective therapies in the treatment of SBS, allowing improvement in the post-surgical conditions and prognosis of the patients, by increasing the absorptive area of the intestine. The aim of this study was to evaluate the ability of BC to induce intrinsic chemical denervation through intramural applications in the ileum of Wistar rats and to deepen the knowledge about the mechanism of action of the neuronal injury caused in this process. A total of 40 rats were divided into two groups (GC-control and benzalkonium-GB) of 20 animals each, subdivided into four subgroups according to the postoperative evaluation time of 24, 48 hours, 30 and 90 days. The animals were submitted to intramural microinjections of sterile saline solution 0,9% (GC) or benzalkonium chloride (GB) in the ileal portion, and later histopathological and immunohistochemical analysis, to evaluate the neuronal lesion. There was a significant decrease (p <0.05) in the myenteric neuronal count in GB2, GB3 and GB4 groups. Positive specific immunoblotting for H2AX and Caspase-3 confirmed the results obtained in the histopathological evaluation, denoting the onset of irreversible cell damage, with DNA double strand break, at 24 and 48 hours, as assessed by the positivity of H2AX immunostaining, progr... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Camila Renata Corrêa / Resumo: O diabetes mellitus tipo 1 (DM1) ocorre pela destruição das células β pancreáticas, levando a deficiência de secreção e síntese de insulina e perda de controle glicêmico, resultando em maior uso de ácidos graxos como fonte de energia. A utilização excessiva de ácidos graxos leva ao estresse oxidativo nos cardiomiócitos que está relacionado à cardiomiopatia diabética. Além disso, a superprodução de espécies reativas de oxigênio e a diminuição da defesa antioxidante têm impacto negativo na função muscular, como comprometimento do crescimento muscular e força e capacidade metabólica alterada. Uma vez que a cardiomiopatia diabética e a resposta adaptativa do músculo esquelético estão estreitamente relacionadas ao estresse oxidativo, o tratamento com folhas de Yacon pode ser útil para diminuir/prevenir a progressão dessas complicações diabéticas. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito protetor do extrato das folhas de Yacon (YLE) sobre a disfunção metabólica, cardiomiopatia e resposta adaptativa do músculo esquelético em ratos diabéticos. Ratos Wistar machos (10/grupo) foram alocados da seguinte forma: C, controles; C + Y, controles tratados com YLE; DM, controles diabéticos; e DM + Y, ratos diabéticos tratados com YLE. O T1DM foi induzido pela administração de estreptozotocina (40mg/kg/peso corporal). Os grupos tratados receberam 100 mg/kg de YLE por dia (via gavagem) por 30 dias. O grupo tratado apresentou melhora na disfunção metabólica na condição diabética (DM vs. DM... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Type 1 diabetes mellitus (T1DM) occurs by destruction of pancreatic β-cells leading to insulin deficiency and loss of glycemic control, resulting in increased fatty acids (FA) utilization as energy source. FA over-utilization leads to oxidative stress in the cardiomyocytes which is related to diabetic cardiomyopathy. The overproduction of reactive oxygen species and decreased antioxidant defense have a negative impact on muscle function, such as impairment of muscle growth and strength and altered metabolic capacity. Since diabetic cardiomyopathy and the adaptive response of skeletal muscle are closely related to oxidative stress, treatment with Yacon leaves may be useful to decrease/prevent the progression of these diabetic complications. The aim of this study was to investigate the protective effect of Yacon leaves extract (YLE) on dysmetabolism, cardiomyopathy and soleus muscle adaptive response to stress in diabetic rats. The rats (10/group) were allocated as follows: C, controls; C+Y, controls treated with YLE; DM, diabetic controls; and DM+Y, diabetic rats treated with YLE. T1DM was induced by administration of streptozotocin (40mg/kg/body weight). treated groups received 100 mg/kg YLE daily via gavage for 30 d. The YLE group improves dysmetabolism in diabetic condition (DM vs. DM+Y), by ameliorating the pancreatic islet injury, insulin release and hyperglycemia, as well as increasing the activity of the antioxidant enzymes in cardiac and skeletal muscle and decreasing ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Resumo: INTRODUÇÃO: O parto pré-termo é definido como o nascimento ocorrido anteriormente a 37ª semana de gestação completa, podendo ser induzido ou espontâneo. A etiologia do parto pré-termo é multifatorial e inclui fatores de riscos maternos, paternos e genéticos. Apesar dessa multifatoriedade, estudos demonstram que a infecção intra-amniótica acomete de 25% a 40% das gestações pré-termo, com chance dessa porcentagem ser subestimada devido a ausência de sinais clínicos e sintomas de infecção na maioria dos casos. À microscopia, a evidência de infiltrado inflamatório polimorfonuclear nas membranas corioamnióticas caracteriza a corioamnionite histológica e sustenta a infecção intra-amniótica como uma das causas importantes do parto pré-termo. O principal mecanismo pelo qual a infecção intra-amniótica é causa direta de parto pré-termo é a indução de síntese de prostaglandinas, pela via da ciclooxigenase, responsável pelo início das contrações uterinas. Estudos recentes sugerem que uma quantidade substancial dos partos pré-termo estão associados a inflamação estéril na ausência de infecção intra-amniótica ou corioamnionite histológica, indicando uma fisiopatologia alternativa que pode levar a um processo inflamatório. O dano causado por estresse oxidativo e a inflamação induzida pelo estresse oxidativo foram também considerados importantes desencadeadores de resultados obstétricos adversos. Compreender a relação entre estresse oxidativo e mecanismos inflamatórios como componentes insep... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Roberto Calderon Gonçalves / Resumo: Durante a gestação ocorrem modificações no metabolismo de ovelhas que podem predispor a ocorrência de transtornos metabólicos, dos quais se destaca a toxemia da prenhez (TP), especialmente no terço final de¬vido ao maior crescimento dos fetos. Os objetivos deste estudo foram avaliar o perfil metabólico de ovelhas durante a gestação e no periparto imediato (até 48 horas pós-parto), comparando-se gestação única com gemelar. Foram utilizadas 60 ovelhas criadas em manejo semi-intensivo, hígidas, da raça Dorper, com dois a cinco anos de idade. Foram constituídos dois grupos experimentais: Grupo 1: 30 ovelhas, com diagnóstico ultrassonográfico de gestação de feto único; Grupo 2: 30 ovelhas, com diagnóstico ultrassonográfico de gestação gemelar. Os momentos experimentais foram definidos como: MI – imediatamente após a inseminação artificial (controle); MG30 – 30 dias de gestação; MG90 – 90 dias de gestação; MG120 – 120 dias de gestação; MG130 – 130 dias de gestação; MG140 – 140 dias de gestação; MP - dia do parto; MPP1 - 24 horas após o parto; MPP2 - 48 horas após o parto. Em todos os momentos foram realizados pesagem; ultrassonografia transabdominal para confirmação da viabilidade fetal; e colheita de amostra de sangue venoso para as diversas análises laboratoriais: exames bioquímicos (ureia, creatinina, AST, FA, GGT, PT, albumina, globulina, colesterol e triglicérides); dosagens hormonais (insulina, glucagon, cortisol, T3, T4) e glicemia; dosagens dos marcadores de estresse oxidat... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Resumo:A disfunção mitocondrial está associada com a manifestação e com a origem de doenças e distúrbios metabólitos. Um novo paradigma complementa um dogma recente relacionado com esta função, onde moléculas presentes no meio extra ou intra-mitocondrial podem atuar como reguladores da resposta imunológica nata, decorrente de um estresse e/ou de uma infecção. O vírus da cinomose canina é responsável por um quadro de depleção quando se encontra em fase de produção viral, principalmente nas células imunocompetentes. Neste sentido, células mononucleares de sangue periférico canino (CMPC) foram coletadas de cães saudáveis, cultivadas e infectadas pela estirpe vacinal CDV (Onderstepoort). Após 24h post-infection (p.i.), as enzimas superóxido dismutase 1 (SOD1), proteína antioxidante 1 (AOP-1) e estresse térmico 70 (Hsp-70) foram detectadas pela reação de imunofluorescência. A expressão do mRNA dos respectivos genes foi realizada em CMPC CDV+ e CDV - após 24h de infecção com a reação em cadeia da ™ polimerase em tempo real. As sondas fluorescentes JC-1 e MitoTracker Green foram utilizadas para avaliar potencial de membrana e função mitocondrial, respectivamente. A estirpe vacinal induziu a perda da viabilidade em mais de 80% das células infectadas em comparação ao grupo controle (p = 0,001) após 24 h. A permeabilidade da membrana mitocondrial (Δψ) detectada pelo uso da sonda MitoTracker™Green e JC-1 revelou um aumento da Δψ e da atividade mitocondrial no grupo CDV + (p = 0,0012) em comparação com as CMPC não infectadas. Em contraste, a expressão do mRNA dos genes AOP-1 e SOD1 foram considerados superiores, enquanto o Hsp-70 não apresentou diferença na sua expressão nos grupos CDV + e CDV-. As CMPC infectadas pelo CDV aumentaram a transcrição dos genes AOP-1 e SOD1, uma defesa antioxidante celular, concomitante com a redução de viabilidade...(resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:itochondrial dysfunction is associated with the manifestation and origin of diseases and disorders. The new paradigm complements the current mitochondrial dogma, whereby molecules present on or inside the mitochondria may act as immune regulators in response to stress or pathogens. Canine distemper virus infection (CDV) is responsible to immunosuppressive stage when the virus replicates among immune cells. For this purpose, canine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) collected from healthy dogs were cultured and infected by CDV vaccine strain (Onderstepoort) and after 24 h post-infection (p.i.) superoxide dismutase (SOD1), antioxidant like protein 1 (AOP-1) and heat shock protein 70 (Hsp-70) enzymes were search in PBMC by immunofluorescence. The expression of mRNA of respective genes was performed in infected and uninfected canine PBMC at 24 h post-infection by real time polymerase chain reaction. Mitochondrial dysfunction was evaluated by the use of MitoTracker™Green and JC-1 probes at the same post-infection time. The vaccine strain induced loss of PBMC viability in more than 80% of infected cells in comparison to control group (p<0.001) at 24h post-infection. The mitochondrial membrane permeability (Δψ) searched by MitoTracker™ Green and JC-1 probes revealed an increase of Δψ in the CDV + group (p<0.0012) in comparison to uninfected PBMC. In contrast, the expression of mRNA of AOP-1 and SOD 1 were considered higher, whereas the Hsp-70 has no difference in its expression between CDV+ and CDV- groups. PBMC infected by CDV increased AOP-1 and SOD1 gene transcription, an antioxidant cell defense, concomitant to a reduce level of PBMC viability. The viral replication also seems to regulate mitochondrial function by modify the membrane potential. However, at this point, host cells have developed an defense producing mediators related to protect against oxidative insult. This is the first... / Orientador: Tereza Cristina Cardoso da Silva / Banca: Vera Cláudia Lorenzetti Magalhães Curci / Banca: Roberto Gameiro Carvalho / Mestre

Orientador: Mário Jefferson Quirino Louzada / Co-orientador: Paulo César Ciarlini / Banca: José Carlos Silva Camargo Filho / Banca: Suely Regina Mogami Bomfim / Resumo: O sedentarismo é um problema de saúde pública e um dos maiores males da sociedade moderna. Grande parte da população sedentária pratica atividade física de modo esporádico. Já está bem estabelecido que esforço físico em excesso ou em indivíduos não condicionados acarreta estresse oxidativo e lesões musculares. No presente estudo foi testada a hipótese de que um único esforço físico é capaz de causar estresse oxidativo e lesão muscular em indivíduos sedentários. Aditivamente, foi avaliado o efeito antioxidante do polifenol resveratrol (RV) quanto à sua capacidade de atenuar o estresse oxidativo e a lesão muscular causada pelo esforço físico. Para tal, 40 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) machos adultos sedentários foram aleatoriamente submetidos ou não a 90 minutos de natação, com e sem tratamento com RV (100mg/kg/14dias): N-RV- (n=10) grupo mantido em repouso e não tratados com RV; N-RV+ (n=10) grupo mantido em repouso e tratados com RV; N+RV- (n=10) grupo submetidos ao esforço físico de natação e não tratados com RV e N+RV+ (n=10) grupo submetido ao esforço físico de natação e tratados com RV. Em ratos sedentários, o esforço físico da natação promoveu estresse oxidativo (aumento da peroxidação lipídica e diminuição da capacidade antioxidante total do plasma) e aumento significativo da atividade plasmática de creatina quinase (CK) e lactato desidrogenase (LDH). O tratamento com RV diminuiu a peroxidação lipídica e a concentração dos marcadores de lesão muscular (CK e LDH) de ratos sedentários submetidos à natação. Esta é uma das primeiras evidências de que uma única sessão de esforço físico pode causar estresse oxidativo em indivíduos sedentários e que o RV pode ser uma alternativa para atenuar a lesão muscular causada por este estresse / Abstract: Physical inactivity is a public health problem and one of the greatest evils of modern society. Biggest part of the sedentary population practice physical activity sporadically. It is well established that the excess of physical exercise in or non-conditioned people causes oxidative stress and muscle damage. The present study tested the hypothesis that a single session of physical exercise can cause oxidative stress and muscle damage in sedentary rats. Additively, the antioxidant effect of the polyphenol resveratrol (RV) was evaluated, and its ability to attenuate oxidative stress and muscle damage caused by physical activity. For this, 40 sedentary adults rats (Rattus norvegicus Albinus, Wistar) were randomly subjected or not to 90 minutes of swimming, with and without treatment with RV (100mg/kg/14days): N-RV- (n=10) group maintained at rest and not treated with RV, N-RV+ (n=10) group maintained at rest and treated with RV, N+RV- (n=10) group subjected to physical exercise of swimming not treated with RV and N+RV+ (n=10) group submitted to physical exercise of swimming and treated with RV. In sedentary rats, physical activity of swimming promoted oxidative stress (observed by increased lipid peroxidation and decreased total antioxidant capacity of plasma) and significant increase in plasma activity of creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH). The RV treatment decreased lipid peroxidation and activity of the markers of muscle injury (CK and LDH) in sedentary rats submitted to swimming. This is one of the first evidence that a single session of physical exercise can cause oxidative stress in sedentary individuals and that the RV can be an alternative to alleviate muscle injury caused by this stress

Orientador: Pedro de Magalhães Padilha / Resumo: O peixe é uma importante fonte de proteínas de alto valor biológico, vitaminas e minerais. Porém, este alimento é também uma das principais vias de exposição humana a contaminantes tóxicos como o metilmercúrio (MeHg). Assim a sua acumulação no peixe pode predispor sérios riscos para a saúde humana. As altas concentrações de mercúrio encontrados em solo, sedimentos, peixes e humanos na Amazônia brasileira têm sido estudados intensamente pela comunidade científica nas últimas décadas, procurando-se elucidar os mecanismos de toxicidade das espécies mercuriais. As espécies mercuriais ligam-se preferencialmente às proteínas. Podendo significar que a fração biodisponível das espécies mercuriais nas diferentes espécies de peixes pode ser dependente da forma como estas estão ligadas a essas proteínas. Portanto esta proposta de trabalho buscou otimizar procedimentos eletroforéticos por 2D-PAGE para fracionamento e identificação de proteínas responsáveis pelo transporte de mercúrio em amostras de tecido muscular e hepático de peixes coletados no reservatório da Usina Hidrelétrica de Jirau – no rio Madeira; utilizando o método de espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GFAAS), para determinação de mercúrio nos tecidos e spots proteicos obtidos; avaliou o estresse oxidativo dos peixes contaminados com mercúrio por meio das atividades das enzimas catalase (CAT), glutationa peroxidase (GSH-Px) e superóxido dismutase (SOD), bem como das concentrações de hidroperóxido de lipí... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Fernanda da Cruz Landim / Coorientador: José Buratini Junior / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: José Antonio Visentini / Banca: Mario Binelli / Resumo: Objetivo deste experimento foi estudar os mecanismos envolvidos na sobrevivência à criopreservação de embriões Bos taurus indicus (Nelore) e Bos taurus taurus (Simental) produzidos in vitro (PIV) e in vivo (TE). Em um arranjo fatorial 2 x 2, duas subespécies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) e duas origens (PIV vs TE) foram utilizadas para testar a hipótese de que a capacidade de sobrevivência após a criopreservação é um evento multifatorial, e que a composição lipídica e o padrão de expressão gênica global afetam a criotolerância embrionária. Vacas Nelore (N=14) e Simental (N=14) foram submetidas a OPU e os oócitos recuperados (N=840 e 450, respectivamente) foram submetidos a MIV, FIV e CIV. Além disso, vacas Nelore (N=7) e Simental (N=8) foram submetidas a superestimulação ovariana, IATF e lavagem uterina. Os embriões PIV (N=349 e N=105) e TE (N=80 e N=74), respectivamente Nelore e Simental, foram submetidos as técnicas de vitrificação (N=70-94), coloração de Sudan Black (n=30), espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-MS; N=8 por grupo), microarray genômico (Nelore PIV N=4, Nelore TE N=4, Simental PIV N=3, Simental TE N=3) e validação no qPCR (N=8 por grupo). Modelos univariados (PROC LOGISTIC e PROC GLIMMIX- SAS 9.2) e multivariados (análise dos componentes principais-PCA- Piruete v.3.11 e MetaboAnalyst) foram utilizados na análise estatística. A análise do Microarray genômico procedeu-se no FlexArray 1.6.1.1. Genes com "fold change" de 1,5 e P≤0,05 foram considerados diferentemente expressos. Embriões Simental apresentaram maior sobrevivência após a vitrificação que os Nelore (34,6 vs 20,2%; P<0,05). Apesar disso, os embriões Simental apresentaram maior conteúdo lipídico do que os Nelore (3,4±0,3 vs 2,4±0,3 intensidade de cinza x 10-4 / μm3 ; P<0,05)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective was to study mechanisms involved in the post-cryopreservation survival of Bos taurus indicus (Nellore) and Bos taurus taurus (Simmental) in vitro (IVP) and in vivo (ET) produced embryos. In a 2x2 factorial experimental design, two subspecies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) and two origins (PIV vs ET) were used to test the hypotheses that the postcryopreservation embryo survival capacity is a multifactorial event and that the lipid composition and the global gene expression pattern affect embryo cryotolerance. Nellore and Simmental cows (N=14) were submitted to OPU sessions and recovered oocytes (840 and 450, respectively) underwent IVM, IVF and IVC. Moreover, Nellore (N=7) and Simmental (N=8) cows were submitted to ovary superstimulation, FTAI, and uterine flushing. The IVP (N=349 and N=105) and ET (N=80 and N=74) embryos, Nellore and Simmental respectively, were used in the vitrification (N=70-94), Sudan Black B stain (N=30), matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDIMS) (N=8 per group), genomic microarray (Nellore IVP N=4, Nellore ET N=4, Simmental IVP N=3, Simmental ET N=3) and qPCR (N=8 per group) techniques. Univariate (PROC LOGISTIC and PROC GLIMMIX, SAS 9.2) and multivariate (PCA - Piruete v.3.11 and MetaboAnalyst) models were used for the statistical analysis. Microarray data analysis was performed in FlexArray 1.6.1.1 software. Genes with a fold change of at least 1.5 and a probability of P<0.05 were considered differentially expressed. Simmental embryos had higher post-vitrification survival (34.6 vs 20.2%; P<0.05) compared with Nellore. Nevertheless, Simmental embryos had higher lipid content than Nellore (3.4±0.3 vs 2.4±0.3 gray intensity x 10-4 / μm3; P<0.05). When compared ET with PIV embryos, it was observed that the former had higher post-vitrification... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Marcelo Sady Plácido Ladeira / Banca: Luis Carlos Giarola / Banca: Alaor Aparecido Almeida / Banca: Aniele Radzikoski Agner / Banca: Rodrigo Otávio Alves de Lima / Resumo: É crescente o número de estudos que demonstram a importância de micronutrientes e compostos bioativos presentes nos alimentos na prevenção de diversas doenças degenerativas crônicas. Entretanto vários estudos moleculares epidemiológicos têm demonstrado que além de fatores ambientais, como a dieta, essas doenças degenerativas podem ser modulada por genes envolvidos no biometabolismo de xenobióticos, metabolismo do carbono e no reparo de DNA. Portanto, o presente estudo avaliou a possível influência do padrão alimentar e dos polimorfismos dos genes GSTP1, CYP1A1, XRCC1 e MTHFR sobre os níveis de danos oxidativos no DNA, uracilas incorporadas no DNA e eficiência do sistema de reparo de DNA em dois grupos de indivíduos residentes em Botucatu com diferentes padrões alimentares. Grupo I (GI): 87 indivíduos com alimentação rica em produtos orgânicos, grãos integrais, frutas e vegetais, e baixa ingestão de produtos industrializados; Grupo II (GII): 97 indivíduos com alimentação rica em produtos industrializados e pobres em frutas e vegetais. A quantificação do nível de danos oxidativos no DNA, uracilas incorporadas ao DNA e a eficiência do sistema reparo de DNA em linfócitos de sangue periférico, foi analisada utilizando-se o Teste do Ensaio Cometa. Os polimorfismos dos genes GSTP1, CYP1A1, XRCC1 e MTHFR foram analisados por realtime PCR. Também foi realizada a análise dos níveis de luteína, criptoxantina, -caroteno, -caroteno, licopeno, retinol e -tocoferol no plasma, pela técnica de cromatografia líquida de alta pressão (HPLC). Os indivíduos do GI apresentaram menores níveis de danos oxidativos no DNA e menores níveis de dano no DNA induzidos pela H2O2 quando comparados aos indivíduos do GII. Quanto aos subgrupos de micronutrientes: Indivíduos do subgrupo percentil 75 para todos os micronutrientes tiveram maior nível de danos no DNA do que os indivíduos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Doutor