Made available in DSpace on 2016-02-05T18:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-04. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:34:23Z : No. of bitstreams: 1 000857686.pdf: 1187842 bytes, checksum: 14d8766f37ee30869882525621ded6f0 (MD5) / Perimenopausa é um período marcado pela redução da densidade mineral óssea areal (aDMO) associada com um aumento do estresse oxidativo, e antioxidantes naturais têm sido utilizados como uma alternativa para reverter esta situação. Neste contexto, o presente estudo foi realizado com o objetivo de investigar os efeitos do chá mate (CM) (Ilex paraguariensis), uma bebida com alta capacidade antioxidante, no osso de ratas naturalmente perimenopausadas. Ratas Wistar perimenopausadas foram tratadas com CM na dose de 20 mg/kg de massa corpórea (m.c) durante quatro semanas e foram comparadas ao grupo não tratado. Grupo de ratas adultas foi investigado também, para confirmar os efeitos da perimenopausa. A atividade das enzimas fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) e fosfatase alcalina (FAL) foram investigados no plasma. Densidade mineral óssea areal (aDMO), área ocupada pelos adipócitos (AOA), número de osteócitos (N.Ot), volume ósseo trabecular (VTO) e imuno-histoquímica para superóxido dismutase (SOD2), osteoprotegerina (OPG), TRAP e ligante do receptor ativador do fator nuclear-kB (RANKL) foram avaliados no colo femoral. Peroxidação lipídica (MDA) e atividade da SOD foram determinadas em homogenato ósseo. O tratamento com CM foi capaz de atenuar a redução da aDMO, melhorar AOA, N.Ot e VTO. Estes resultados foram seguidos de redução de TRAP e de ALP no plasma e de MDA e SOD2 no osso. O CM minimiza o estresse oxidativo e a reabsorção óssea, atenuando assim a osteopenia de ratas na perimenopausa / Perimenopause is a period marked by a reduction in areal bone mineral density (aBMD) associated with increased oxidative stress, and natural antioxidants have been used as an alternative to reverse this situation. In this context, the present study was to investigate the effects of mate tea (MT) (Ilex paraguariensis), a drink with high antioxidant capacity in the bone naturally perimenopausadas rats. Perimenopausadas Wistar rats were treated with MC at a dose of 20 mg / kg body mass (mc) for four weeks and compared with the untreated group. Group of adult rats was also investigated to confirm the effects of perimenopause. The activity of the enzyme tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) and alkaline phosphatase (ALP) were investigated in plasma. Areal bone mineral density (aBMD) area occupied by adipocytes (AOA), number of osteocytes (N.Ot), trabecular bone volume (TBV) and immunohistochemistry for superoxide dismutase (SOD2), osteoprotegerin (OPG), TRAP and binder the receptor activator of the nuclear factor-kB (RANKL) were evaluated at the femoral neck. Lipid peroxidation (MDA) and SOD activity were determined in bone homogenates. Treatment with MT was able to attenuate the reduction of aBMD improve AOA N.Ot and TBV. These findings were followed by reduction of TRAP and ALP and plasma MDA and SOD2 in the bone. The MT minimizes oxidative stress and bone resorption, thereby attenuating the osteopenia of perimenopausal rats

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-05Bitstream added on 2014-06-13T19:53:30Z : No. of bitstreams: 1 000742104.pdf: 1014576 bytes, checksum: 756eb37581269053728e8fa1771a4c98 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / O envelhecimento em fêmeas é caracterizado por declínio progressivo nas funções bioquímicas e fisiológicas de vários tecidos e órgãos, que resulta em menor produção de estrógeno, diminuição da defesa antioxidante e aumento do estresse oxidativo. Ervas com poder antioxidante que possam minimizar os efeitos do estresse oxidativo na senilidade vem sendo estudadas e o Ilex paraguariensis (chá mate), consumido em alguns países da América do Sul na forma de chá, apresenta elevada capacidade antioxidante in vivo, além de aumentar a expressão de enzimas antioxidantes. Este trabalho analisou o efeito da administração de chá mate por 8 semanas, na defesa antioxidante e dano oxidativo de ratas jovens e senis. Fêmeas Wistar de 4 e 17 meses de idade foram distribuídas nos grupos: Senis (S), Senis tratadas com chá mate (SCM), Jovens (J) e Jovens tratadas com chá mate (JCM). Os grupos SCM e JCM receberam diariamente chá mate na dose de 20 mg/kg de massa corpórea, por oito semanas. Foram avaliadas a capacidade antioxidante no plasma, as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e a atividade das enzimas antioxidantes, superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase no hemolisado e homogenato do fígado. O chá mate aumentou a capacidade antioxidante no plasma, diminuiu TBARS e elevou a atividade das enzimas antioxidantes no hemolisado e homogenato do fígado, porém as respostas ao tratamento foram influenciadas pela idade. / Aging process in females is characterized by a progressive decline in biochemical and physiological functions of various tissues and organs, resulting in decreased production of estrogen, decreased antioxidant defense and increased oxidative stress. Herbs with antioxidant properties that can minimize the effects of oxidative stress in aging have been studied and Ilex paraguariensis (mate tea), consumed in some countries of South America in the form of tea has high antioxidant capacity in vivo, in addition to increasing the expression of antioxidant enzymes. This study examined the effect of administration of mate tea for 8 weeks in antioxidant defense and oxidative damage in young and senile rats. Female rats (4 and 17 months of age) were allocated into groups: Senile (S), Senile treated with mate tea (SCM), Young (J) and Young treated with mate tea (JCM). SCM and JCM received daily mate tea (20 mg / kg body mass) for eight weeks. We evaluated the antioxidant capacity of plasma (FRAP), the thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and antioxidant enzymes, superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase in liver homogenate and hemolysate. Mate tea increased the plasma FRAP, decreased TBARS and increased the antioxidant enzyme activity, both in hemolysate and liver homogenate, but responses to treatment were influenced by age.

Resumo: A Araucaria angustifolia é classificada como criticamente em perigo de extinção pela União internacional de conservação da natureza (IUCN) lista vermelha de espécies ameaçadas. O desenvolvimento e propagação desta espécie são influenciados por situações de estresse abiótico, como a variação de temperatura. Estudos anteriores evidenciaram a ativação da proteína desacopladora de mitocôndrias de plantas (PUMP) em células embriogênicas de A. angustifolia submetidas ao estresse pelo frio, um efeito associado ao estresse oxidativo. No presente estudo, buscou-se avançar no conhecimento da resposta desta conífera ao estresse pelo frio, com enfoque particular no estresse oxidativo. Desta forma, células embriogênicas de A. angustifolia foram submetidas ao estresse pelo frio (4 ± 1 ° C por 24h ou 48h) e foram avaliados a viabilidade e morfologia celulares, os níveis de H2O2, a lipoperoxidação e a atividade de enzimas antioxidantes. Em mitocôndrias isoladas destas células foram determinadas a atividade das NAD(P)H desidrogenases alternativas e a transição de permeabilidade mitocondrial (TPM). O estresse causado pelo frio não foi capaz afetar a morfologia e a viabilidade das células embriogênicas de A. angustifolia, no entanto, promoveu o aumento dos níveis de H2O2 em ~ 35% (em 24 e 48h). A lipoperoxidação também foi aumentada em ~ 15% e 30% após 24h e 48h de stress, respectivamente. A atividade da catalase foi reduzida em cerca de 20% após 48h de estresse, enquanto a ascorbato peroxidase (APx) e a dehidroascorbato redutase (DHAR) tiveram suas atividades aumentadas em ~ 100% e ~ 64%, respectivamente. Somente a atividade da monodehidroascorbate redutase (MDHAR) foi aumentada (~172%) no menor tempo de estresse (24h). As atividades das enzimas Glutationa redutase (GR) e superóxido oxidase (SOD) não foram alteradas pelas condições de estresse. Nas mitocôndrias, o estresse induzido pelo frio promoveu uma inibição significativa das NAD(P)H desidrogenases alternativas externas (~40% em 24 horas do stress e ~ 65% em 48 horas do stress), enquanto a transição de permeabilidade mitocondrial (MPT) foi discretamente inibida (em 24h e 48h de stress). Estes resultados mostram que o estresse por baixa temperatura foi capaz de induzir o estresse oxidativo nas células embriogênicas de A. angustifolia, o que resultou na ativação das enzimas antioxidantes, em especial as do ciclo glutationa-ascorbato. Esta ativação parece compensar a inibição da catalase e das NAD(P)H desidrogenases externas, uma vez que a viabilidade e morfologia das células não foram alteradas. Este estudo contribui para o esclarecimento da resposta desta gimnosperma a condição de estresse por baixa temperatura e, assim, também para o desenvolvimento de métodos de conservação desta espécie, como a micropropagação in vitro.

Orientador : Drª. Lucélia Donatti - UFPR / Coorientador : Lars Tomanek, PhD. California Polytechnic State University, EUA / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 27/08/2015 / Inclui referências : f. 132-159 / Área de concentração : Biologia celular e molecular / Resumo: O impacto de metais sobre os organismos vivos pode ser evidenciado em diferentes níveis de organização biológica a partir de moléculas e células, chegando a comunidades e aos ecossistemas. A lapa Nacella conccina e encontradas na região litorânea e zona de infralitoral da Antártida onde na Baia do Almirantado se localiza a Estação Antártica Brasileira Comandante Ferraz (EACF), local deste estudo. Durante os experimentos N. concinna (N=6/metal/concentracao/tempo) foram expostos a duas concentrações de chumbo (0,9 PgL-1 e 3,0 PgL-1) e cobre (0,12 PgL-1 e 0,25 PgL-1) nos tempos de 12, 24, 48 horas para ambos os metais e 168 horas somente para o chumbo. A temperatura de 0°C e a salinidade de 34% foram mantidas constantes. As brânquias foram congeladas em nitrogênio liquido e analisadas através de técnicas de proteomica. Foram quantificadas as mudanças na abundancia de proteinas a partir de géis gerados por eletroforese 2D. As proteinas foram identificadas por espectrometria de massa tandem. Para as brânquias de N. concinna expostas ao chumbo e ao cobre um grupo semelhante de proteinas alteradas foi observado. Foram identificadas proteínas antioxidantes, incluindo a Mn-superoxido dismutase e a Ferri tina indicando maior produção de especies reativas de oxigênio. As chaperonas envolvidas na maturação de proteínas presentes no reticulo endoplasmático apresentaram alterações possivelmente devido a uma mudança no estado redox deste compartimento celular. A maior abundancia de subunidades do proteassoma pode evidenciar maiores taxas de desnaturação de proteínas pelo proteassoma. Os metais também levaram a alterações na anidrase carbonica, provavelmente decorrente de alterações no equilíbrio acida-base das células branquiais. Proteínas metabólicas, como a arginina quinase, a triose fosfato isomerase glicolitica e a enolase, bem como a piruvato desidrogenase, tiveram seu volume alterado, o que pode estar relacionado a uma maior taxa de renovação de ATP. Finalmente, observamos a alteração na abundancia de uma isoforma da Cdc42, uma proteína de sinalização com função de modificar componentes do citoesqueleto. Possíveis efeitos em cascata da alteração da Cdc42 incluem mudanças da miosina e paramiosina. Nós supomos que, a substituição de metais ligados a proteínas pelo chumbo ou cobre causou um aumento de ROS e um desafio acida-base em brânquias, provocando uma inibição de maturação de proteínas no reticulo endoplasmatico, um aumento no tamponamento de ATP por arginina quinase e proteínas glicoliticas, bem como mudanças na abundancia de Cdc42 que afetaram filamentos do citoesqueleto. Estes fatos colaboram na elucidacao das ligações entre o metabolismo, balanço energético e tolerância ao estresse em organismos antárticos, neste caso, a lapa antartica N. concinna. Palavras-chave: Antártica, anidrase carbonica, Cdc42, chaperoninas, metabolismo energético, metal, estresse oxidativo, homeostase proteica. / Abstract: The impact of metals on living organisms may be evidenced at different levels of biological organization from molecules and cells, reaching communities and ecosystems. The limpet Nacella conccina is found in the coastal region and subtidal zone of Antarctic, including the South Shetlands archipelago islands and the King George Island where is the Brazilian Antarctic Station Comandante Ferraz (EACF), local of this study. Samples of N. concinna were collected in Admiralty Bay at Punta Plaza (62 ° 04'14,5 "S, 58 ° 24'11,9" W) and Botany Point (62 ° 06'15 7 "S, 58 ° 21'14,0" W) during 2011 and 2012 austral summer. During the experiments specimens (n = 6 / metal / concentration / time) were exposed to two concentrations of lead (0.9 ?gL -1 and 3.0 ?gL-1) and copper (0.12 ?gL-1 and 0.25 ?gL-1) during 12, 24, 48 hours for both metls and 168 hours for lead. The temperature was 0 ° C and salinity was maintained constant at 34%. The gills were frozen in liquid nitrogen and analyzed by proteomic techniques. Changes in abundance of proteins were quantified in 2D gels generated by electrophoresis. Proteins were identified by tandem mass spectrometry. Gills exposed to lead and copper had a similar changed proteins. Antioxidant proteins were identified, including Mn-superoxide dismutase and ferritin indicating increased production of reactive oxygen species. The chaperone involved in the maturation of proteins in the endoplasmic reticulum showed significant differences possibly due to a change in redox state of this cellular compartment. The greater abundance of proteasome subunits may indicate higher rates of denaturation of proteins by the proteasome. Metals also led to a change in carbonic anhydrase, which may be due to changes in acidbase balance of gill cells. Metabolic proteins, such as arginine kinase, triose phosphate isomerase and glycolytic enolase and pyruvate dehydrogenase, had changed their volumes in gels, which can be related to a higher rate of ATP renewal. Finally, we note the change in the abundance of an isoform of cdc42, a signaling protein related to modify cytoskeletal structures. Possible downstream effects of cdc42 included possible shifts in myosin and paramyosin. We assume that the substitution of metals bound to proteins by lead or copper caused an increase of ROS and a challenge in acid based on gills, causing inhibition of the protein maturation in the endoplasmic reticulum, an increase in buffering ATP and the glycolytic protein arginine kinase, as well as changes in the abundance of cdc42 affecting cytoskeletal filaments. Facts those who collaborate in the elucidation of links between metabolism, energy balance and stress tolerance. Keywords: Antarctic, carbonic anhydrase, Cdc42, chaperonins, energy metabolism, ferritin, gills, heavy metal, oxidative stress, protein homeostasis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-01Bitstream added on 2014-06-13T19:26:38Z : No. of bitstreams: 1 prado_rp_dr_botfm.pdf: 1768816 bytes, checksum: 9cf30006e86899d47a461a8d33e92140 (MD5) / É crescente o número de estudos que demonstram a importância de micronutrientes e compostos bioativos presentes nos alimentos na prevenção de diversas doenças degenerativas crônicas. Entretanto vários estudos moleculares epidemiológicos têm demonstrado que além de fatores ambientais, como a dieta, essas doenças degenerativas podem ser modulada por genes envolvidos no biometabolismo de xenobióticos, metabolismo do carbono e no reparo de DNA. Portanto, o presente estudo avaliou a possível influência do padrão alimentar e dos polimorfismos dos genes GSTP1, CYP1A1, XRCC1 e MTHFR sobre os níveis de danos oxidativos no DNA, uracilas incorporadas no DNA e eficiência do sistema de reparo de DNA em dois grupos de indivíduos residentes em Botucatu com diferentes padrões alimentares. Grupo I (GI): 87 indivíduos com alimentação rica em produtos orgânicos, grãos integrais, frutas e vegetais, e baixa ingestão de produtos industrializados; Grupo II (GII): 97 indivíduos com alimentação rica em produtos industrializados e pobres em frutas e vegetais. A quantificação do nível de danos oxidativos no DNA, uracilas incorporadas ao DNA e a eficiência do sistema reparo de DNA em linfócitos de sangue periférico, foi analisada utilizando-se o Teste do Ensaio Cometa. Os polimorfismos dos genes GSTP1, CYP1A1, XRCC1 e MTHFR foram analisados por realtime PCR. Também foi realizada a análise dos níveis de luteína, criptoxantina, -caroteno, -caroteno, licopeno, retinol e -tocoferol no plasma, pela técnica de cromatografia líquida de alta pressão (HPLC). Os indivíduos do GI apresentaram menores níveis de danos oxidativos no DNA e menores níveis de dano no DNA induzidos pela H2O2 quando comparados aos indivíduos do GII. Quanto aos subgrupos de micronutrientes: Indivíduos do subgrupo percentil 75 para todos os micronutrientes tiveram maior nível de danos no DNA do que os indivíduos... / Not available

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-11Bitstream added on 2014-06-13T19:45:09Z : No. of bitstreams: 1 sudano_mj_dr_botfmvz.pdf: 2445410 bytes, checksum: b31fdea0d1a6b4b576d49b7e856ede8a (MD5) / Objetivo deste experimento foi estudar os mecanismos envolvidos na sobrevivência à criopreservação de embriões Bos taurus indicus (Nelore) e Bos taurus taurus (Simental) produzidos in vitro (PIV) e in vivo (TE). Em um arranjo fatorial 2 x 2, duas subespécies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) e duas origens (PIV vs TE) foram utilizadas para testar a hipótese de que a capacidade de sobrevivência após a criopreservação é um evento multifatorial, e que a composição lipídica e o padrão de expressão gênica global afetam a criotolerância embrionária. Vacas Nelore (N=14) e Simental (N=14) foram submetidas a OPU e os oócitos recuperados (N=840 e 450, respectivamente) foram submetidos a MIV, FIV e CIV. Além disso, vacas Nelore (N=7) e Simental (N=8) foram submetidas a superestimulação ovariana, IATF e lavagem uterina. Os embriões PIV (N=349 e N=105) e TE (N=80 e N=74), respectivamente Nelore e Simental, foram submetidos as técnicas de vitrificação (N=70-94), coloração de Sudan Black (n=30), espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-MS; N=8 por grupo), microarray genômico (Nelore PIV N=4, Nelore TE N=4, Simental PIV N=3, Simental TE N=3) e validação no qPCR (N=8 por grupo). Modelos univariados (PROC LOGISTIC e PROC GLIMMIX- SAS 9.2) e multivariados (análise dos componentes principais-PCA- Piruete v.3.11 e MetaboAnalyst) foram utilizados na análise estatística. A análise do Microarray genômico procedeu-se no FlexArray 1.6.1.1. Genes com “fold change” de 1,5 e P≤0,05 foram considerados diferentemente expressos. Embriões Simental apresentaram maior sobrevivência após a vitrificação que os Nelore (34,6 vs 20,2%; P<0,05). Apesar disso, os embriões Simental apresentaram maior conteúdo lipídico do que os Nelore (3,4±0,3 vs 2,4±0,3 intensidade de cinza x 10-4 / μm3 ; P<0,05)... / The objective was to study mechanisms involved in the post-cryopreservation survival of Bos taurus indicus (Nellore) and Bos taurus taurus (Simmental) in vitro (IVP) and in vivo (ET) produced embryos. In a 2x2 factorial experimental design, two subspecies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) and two origins (PIV vs ET) were used to test the hypotheses that the postcryopreservation embryo survival capacity is a multifactorial event and that the lipid composition and the global gene expression pattern affect embryo cryotolerance. Nellore and Simmental cows (N=14) were submitted to OPU sessions and recovered oocytes (840 and 450, respectively) underwent IVM, IVF and IVC. Moreover, Nellore (N=7) and Simmental (N=8) cows were submitted to ovary superstimulation, FTAI, and uterine flushing. The IVP (N=349 and N=105) and ET (N=80 and N=74) embryos, Nellore and Simmental respectively, were used in the vitrification (N=70-94), Sudan Black B stain (N=30), matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDIMS) (N=8 per group), genomic microarray (Nellore IVP N=4, Nellore ET N=4, Simmental IVP N=3, Simmental ET N=3) and qPCR (N=8 per group) techniques. Univariate (PROC LOGISTIC and PROC GLIMMIX, SAS 9.2) and multivariate (PCA - Piruete v.3.11 and MetaboAnalyst) models were used for the statistical analysis. Microarray data analysis was performed in FlexArray 1.6.1.1 software. Genes with a fold change of at least 1.5 and a probability of P<0.05 were considered differentially expressed. Simmental embryos had higher post-vitrification survival (34.6 vs 20.2%; P<0.05) compared with Nellore. Nevertheless, Simmental embryos had higher lipid content than Nellore (3.4±0.3 vs 2.4±0.3 gray intensity x 10-4 / μm3; P<0.05). When compared ET with PIV embryos, it was observed that the former had higher post-vitrification... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-21Bitstream added on 2015-04-09T12:48:05Z : No. of bitstreams: 1 000814238.pdf: 438890 bytes, checksum: f7cc8219db858e87f195b5d08dbb8b04 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / itochondrial dysfunction is associated with the manifestation and origin of diseases and disorders. The new paradigm complements the current mitochondrial dogma, whereby molecules present on or inside the mitochondria may act as immune regulators in response to stress or pathogens. Canine distemper virus infection (CDV) is responsible to immunosuppressive stage when the virus replicates among immune cells. For this purpose, canine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) collected from healthy dogs were cultured and infected by CDV vaccine strain (Onderstepoort) and after 24 h post-infection (p.i.) superoxide dismutase (SOD1), antioxidant like protein 1 (AOP-1) and heat shock protein 70 (Hsp-70) enzymes were search in PBMC by immunofluorescence. The expression of mRNA of respective genes was performed in infected and uninfected canine PBMC at 24 h post-infection by real time polymerase chain reaction. Mitochondrial dysfunction was evaluated by the use of MitoTracker™Green and JC-1 probes at the same post-infection time. The vaccine strain induced loss of PBMC viability in more than 80% of infected cells in comparison to control group (p<0.001) at 24h post-infection. The mitochondrial membrane permeability (Δψ) searched by MitoTracker™ Green and JC-1 probes revealed an increase of Δψ in the CDV + group (p<0.0012) in comparison to uninfected PBMC. In contrast, the expression of mRNA of AOP-1 and SOD 1 were considered higher, whereas the Hsp-70 has no difference in its expression between CDV+ and CDV- groups. PBMC infected by CDV increased AOP-1 and SOD1 gene transcription, an antioxidant cell defense, concomitant to a reduce level of PBMC viability. The viral replication also seems to regulate mitochondrial function by modify the membrane potential. However, at this point, host cells have developed an defense producing mediators related to protect against oxidative insult. This is the first... / FAPESP: 2012/06897-0

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-08Bitstream added on 2015-04-09T12:48:01Z : No. of bitstreams: 1 000814570.pdf: 325846 bytes, checksum: 38c71d9ed63b85ebabb85fe53a185b6e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Oxidative stress occurs due to an imbalance between oxidants and antioxidant defenses. Considering that dogs with leishmaniasis may develop uremia, which affects the oxidative metabolism and apoptosis of neutrophils, we proposed to investigate the hypothesis that oxidative stress, alteration of oxidative metabolism and apoptosis of neutrophils in dogs varies according to stage of leishmaniasis and that uremia, commonly occurs in late stages of disease, would contribute to such variations. To this, we evaluated plasma markers of oxidative stress (total antioxidant capacity, lipid peroxidation, glutathione, uric acid, bilirubin and albumin), superoxide production (method of nitroblue tetrazolium reduction and flow cytometry with the probe hydroethidine), and viability and apoptosis rate (morphological method and flow cytometry using annexin V-PE system) on neutrophils from dogs with leishmaniasis classified according to the LeishVet Consensus in moderate stage of the disease, very severe stage when uremia is installed and dogs with uremia negative for leishmaniasis, comparing them to healthy dogs. Leishmaniasis regardless of stage and uremia cause oxidative stress with reduced total antioxidant capacity, which may be related to greater induced production of superoxide and stimulated apoptosis observed in these groups. While spontaneously, neutrophils of dogs in very severe stage and with uremia had lower viability, increased apoptosis and higher lipid peroxidation, suggesting that uremia is the cause of such changes. Can be concluded that the intensity of oxidative stress does not vary with the stage of leishmaniasis, however uremic condition contributes to reduce the viability of neutrophils in late-stage dogs. Changes of neutrophil oxidative metabolism occur concomitant with oxidative stress and increased neutrophil apoptosis in both leishmaniasis and in uremia alone / FAPESP: 2011/14083-0

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-11-26Bitstream added on 2015-04-09T12:47:48Z : No. of bitstreams: 1 000815387_20160101.pdf: 143415 bytes, checksum: b06ec919cb81af73b49422947e7c1e51 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:39Z: 000815387_20160101.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:29Z : No. of bitstreams: 1 000815387.pdf: 725212 bytes, checksum: 8671b2c9eb067044b7e468cdc2529d0a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: O suco de laranja contém açúcares e flavonoides que podem influenciar a saciedade, o consumo energético e de macronutrientes e o peso corporal, podendo ser um coadjuvante no tratamento e prevenção da obesidade e das doenças crônicas relacionadas. Objetivo: investigar o efeito da ingestão aguda do suco de laranja fresco e integral pasteurizado sobre a glicemia, marcadores da saciedade (insulina, leptina, adiponectina), no consumo alimentar e estresse oxidativo de indivíduos com peso normal e excesso de peso. Metodologia: Foi realizado um ensaio clínico com intervenção dietética aguda em 36 indivíduos saudáveis, com estado nutricional adequados ou acima do peso, de ambos os sexos. Os indivíduos foram submetidos a 3 etapas experimentais: 1) ingestão de suco de laranja fresco, 2) ingestão do suco de laranja pasteurizado e, 3) ingestão da bebida controle com sabor de laranja. Antes e após o consumo das bebidas testes foram feitas coletas de sangue (0, 30, 60, 120 e 300 min) para analise dos parâmetros bioquímicos (glicose, insulina, leptina, adiponectina) e posterior cálculo da resistência à insulina. Logo após a ingestão das bebidas os voluntários recebiam um café da manhã “ad libitum” onde eram anotados os alimentos consumidos nesta refeição e também nas outras realizadas durante o dia experimental. As análises da composição corporal (peso, estatura, índice de massa corporal, percentual de gordura e circunferência da cintura) e metabólicas (colesterol total, LDL-C, HDL-C, triglicérides) foram realizadas no primeiro dia do estudo. Os hormônios (leptina e adiponectina) foram dosados pelo método ELISA. O estresse oxidativo foi quantificado através dos métodos de determinação do estado antioxidante total (ABTS) e da peroxidação lipídica através da determinação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Resultados: Os resultados mostraram que os voluntários obesos ... / Introduction: Orange juice contains sugars and flavonoids that may influence satiety and energy and macronutrient intake, and body weight. Objective: investigating the effect of acute ingestion of fresh orange juice and pasteurized whole juice on blood glucose, markers of satiety and food intake in normal weight and overweight. Methods: A clinical study with acute dietary intervention in 36 healthy subjects with adequate nutritional status or overweight of both sexes was conducted. The subjects underwent three experimental steps: 1) intake of fresh orange (FOJ), 2) ingestion of pasteurized juice (POJ) and orange juice, 3) ingestion of the control beverage (CB) with orange flavor. Before and after consumption of the test beverage, bloods sampling (0, 30, 60, 120 and 300 min) were taken for analysis of biochemical parameters (glucose, insulin, leptin, adiponectin) and subsequent calculation of insulin resistance. Soon after ingestion of drinks volunteers received a breakfast of ad libitum where food consumption were noted in this meal and also the other made during the experimental day. Analyses of body composition (weight, height, body mass index, body fat percentage and waist circumference), parameters metabolic (total cholesterol, LDL-C, HDL-C, triglycerides) were performed on the first day of the study. Hormones (leptin and adiponectin) were measured by ELISA. Oxidative stress was quantified by measuring TBARS and ABTS methods. Results: The results showed that obese of both sexes volunteers have risk factors for developing metabolic syndrome, 61% have insulin resistance. For normal weight subjects, total concentration (AUC300min) of glucose and insulin was higher after CB, following by POJ (intermediate), and FOJ (lower). By it turn, normal weight subjects have shown total concentration of leptin (AUC300min) higher after FOJ intake, middle after POJ, and lower after CB. Adiponectin levels showed no change compared to the tested beverages.

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-27Bitstream added on 2015-04-09T12:48:20Z : No. of bitstreams: 1 000815802.pdf: 379971 bytes, checksum: 5c1eebb69ace1989d5a3aab6dcace168 (MD5) / Este estudo foi conduzido com o objetivo de o uso do meio diluente Botu-crio associado a vitamina E, em diferentes concentrações, que se demonstrem efetivas para a criopreservação de sêmen obtido de recuperado epididimário em felinos domésticos. Cinquenta e quatro gatos domésticos foram utilizados no experimento após serem submetidos à orquiectomia eletiva e os espermatozóides obtidos diretamente da cauda e ducto deferente do epidídimo. Foram constituídos 18 “pools”, com o material de três animais cada e estes, divididos em quatro grupos experimentais. No grupo controle (G0) o sêmen foi congelado com o diluente Botu-Crio®. Nos grupos G 0,3, G 0,6 e G 0,9, ao diluente Botu-Crio® foi acrescido vitamina E em três concentrações, 0,3, 0,6 e 0,9mM, respectivamente. Para cada grupo, as amostras de sêmen fresco foram inicialmente avaliadas quanto à motilidade, vigor, morfologia supravital e teste hiposmótico, para verificar a qualidade mínima exigida para a congelação (motilidade ≥70% e vigor ≥3). Os mesmos parâmetros foram reavaliados após a descongelação também para o TBARS. Na avaliação da motilidade e vigor, não foi observado diferença estatística entre o grupo controle e as concentrações de vitamina E. Nos testes supravital, hiposmótico, morfológico e teste TBARS, também não houve significância entre as três diferentes concentrações de vitamina E e o grupo controle. Pode-se concluir que as três concentrações de vitamina E, não ofereceram proteção antioxidante ao recuperado de epidídimo de felinos domésticos / This study was conducted with the objective of using the medium Botu-crio®, associated vitamin E, at different concentrations, which demonstrate effective for cryopreservation of epididymal semen obtained recovered from domestic cats. Fifty-four domestic cats were used in the experiment after undergoing elective orchiectomy and sperm obtained directly from the tail of the epididymis and vas deferens. 18 pools were made with the material of three animals each and these were divided into four experimental groups. In the control group (G0) semen was frozen with Botu-crio®. In the groups G 0.3, G 0.6 to G 0.9, the diluent was added at three concentrations of vitamina E, 0.3, 0.6 and 0.9 mM, respectively. For each group, the fresh semen samples were initially evaluated for motility, viability, morphology and supravital and hypoosmotic test to verify minimum quality required for freezing (≥ 70 % motility and vigor ≥ 3). The same parameters were reassessed after thawing also for TBARS. In the evaluation of motility and vigor, no statistical difference was observed between the control group and the concentrations of vitamin E. In supravital tests, hyposmotic, morphological and TBARS assay, there was no significance between the different concentrations of vitamin E and the control group. It can be concluded that the three concentrations of vitamin E, antioxidant protection not offered recovered from epididymis of domestic cats