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Caracterização bioquímica e especifidade ao substrato de uma tripsina-símile da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus)

NASCIMENTO, Lidiane Cristina Pinho 24 February 2016 (has links)
Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-13T16:48:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Lidiane (versão final).pdf: 2079756 bytes, checksum: 59bb3bdcf001b436d125cd653b130aea (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T16:48:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Lidiane (versão final).pdf: 2079756 bytes, checksum: 59bb3bdcf001b436d125cd653b130aea (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / CAPES / A tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) é um dos peixes mais importantes para a aquicultura brasileira, apresentando-se como o mais cultivado no país. Suas vísceras têm sido estudadas para obtenção de biomoléculas, especialmente as proteases digestivas que apresentam alta eficiência catalítica e estabilidade em diferentes condições. Dentre as proteases digestivas da tilápia do Nilo, destaca-se a tripsina, que apresenta características favoráveis a sua aplicação na área biotecnológica e industrial. Com o propósito de ampliar o conhecimento acerca desta enzima, o presente trabalho objetivou purificar e caracterizar bioquimicamente uma tripsina-símile do intestino de O. niloticus. A purificação da enzima foi realizada seguindo quatro etapas: aquecimento a 45 °C, fracionamento com sulfato de amônio e cromatografias de exclusão molecular e afinidade. A pureza da tripsina foi verificada através da técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e o peso molecular de 23,9 kDa foi confirmado a partir da espectrometria de massa (MALDI-TOF). A atividade da enzima foi testada na presença de inibidores específicos para proteases, com forte inibição de sua atividade por TLCK e PMSF. Ademais, a tripsina da tilápia apresentou atividade em ampla faixa de pH (7,0 a 12,0) e manteve-se ativa a altas temperaturas, conservando sua atividade até 60 °C. O íon cálcio e o polietilenoglicol (PEG), em diferentes concentrações, apresentaram efeito ativador da enzima. A tripsina manteve atividade residual acima de 70 % na presença de surfactantes (Tween 20, Triton x-100, Triton X-450 e saponina), exceto na presença de SDS, que foi responsável por uma redução acima de 50% na atividade da enzima. A tripsina-símile da tilápia apresentou eficiência na hidrólise de substratos com asparaginina (N) e treonina (T) na posição P1’ e isoleucina (I), leucina (L) e ácido aspártico (D) na posição P2. Considerando os resultados, foi possível verificar o potencial da tripsina da tilápia do Nilo para aplicações industriais e biotecnológicas, que necessitem da presença de agentes surfactantes, íons e ampla faixa de pH e temperaturas. / Nile tilapia (Oreochromis niloticus) is the most farmed fish in Brazil. Its viscera had been studied to obtain biomolecules, mainly digestive proteases which present high catalytic efficiency and stability at different conditions. Among Nile tilapia digestive proteases, with emphasis to a trypsin, which shows favorable characteristics for its biotechnological and industrial application. In order to increase the knowledge about this enzyme, the present work aimed to purify and characterize biochemically a trypsin-like from O. niloticus intestine. The enzyme purification was carried out following four-step: heating at 45 °C, ammonium sulphate fractionation and size exclusion and affinity chromatography. Trypsin purity was checked by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and the molecular weight of 23.9 kDa was confirmed by mass spectrometry (MALDI-TOF). The enzyme activity was tested on the presence of specific protease inhibitors, with stronger inhibition by TLCK and PMSF. Furthermore, tilapia’s trypsin showed activity in a wide pH range (7.0 to 12.0) and high temperatures, keeping its activity until 60 °C. Calcium ion and polyethylene glycol (PEG), at different concentrations presented activator effect on the enzyme. The trypsin kept over 70 % of its activity in surfactants (Tween 20, Triton x-100, Triton X-450 and saponin). SDS was an exception, since it diminished the enzyme activity below 50 %. Moreover, trypsin-like from tilapia showed efficiency by hydrolyzing substrates presenting asparaginine (N) and treonine (T) residues at P1’ position and isoleucine (I), leucine (L) and aspartic acid (D) at P2 position. Considering these results, it was possible to determine the potential of Nile tilapia trypsin to industrial and biotechnological applications that require surfactants agents and ion presence, wide pH range and high temperature.
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Cultivo multifásico da tilápia nilótica (Oreochromis niloticus,Linnaeus,1757) em tanques-rede, com diferentes regimes de alimentação

COSTA, Marcelo Luis da Silva 30 August 2006 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-16T12:52:41Z No. of bitstreams: 1 Marcelo Luis da Silva Costa.pdf: 352913 bytes, checksum: 8cf28dc6805387560a395f6db19fb59c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-16T12:52:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo Luis da Silva Costa.pdf: 352913 bytes, checksum: 8cf28dc6805387560a395f6db19fb59c (MD5) Previous issue date: 2006-08-30 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The evaluation of different regimes of feeding in a multiphases culture of the tilápia Chitralada, Oreochromis niloticus, was made in a period of four months. The aim this experiment was to optimize the regimen of feeding with reduced protein levels in the diverse phases of growth. The tilápias had been cultivated in fifteen useful cages of 4 m3 (2 x 2 x 1,0m), using diets with three levels of crude protein (36, 32 and 28%) in three phases of size (I - 80 300g; II - 300 650g and III - 650 1000g), being therefore, the experimental delineation with protein levels was: control I) 36, 32 and 32%; II) 32, 32 and 32%; III) 32, 32 and 28%. The fishes were fed with ration extruded in different levels of crude protein. Weekly the ration quantity was readjusted according to the feeding rates, the consumption and water quality. Daily it measures temperature, pH, oxygen and transparency. Monthly other variable as ammoniac nitrogen, nitrate, amongst others. Variance analysis was applied - (ANOVA) between the treatments in the different phases, to the level of significance of 5% in the variables of growth and production. The results obtained in phase I had not identified statistics difference (P≤0,05) in the treatments of the diet 36% and 32%PB, occurring only difference for ration of protein efficiency (TPE). In phase II, it was observed statistics differencebetween the fishes, specially on those that had been feed in the previous phase of diet 36% PB (P≤0,05). In phase III, was detected one better performance for the fish that were fed of diet 32% PB. Thus, it concluded that the regime of feeding more efficient for the three size phases is the utilization of the ration extruded with 32% of crude protein. / A avaliação de diferentes regimes de alimentação no cultivo multifásico da tilápia Chitralada, Oreochromis niloticus, foi efetuada num período de quatro meses. O objetivo deste trabalho foi otimizar o regime de alimentação com níveis reduzidos de proteína nas diversas fases de crescimento. As tilápias foram cultivadas em 15 tanques-rede de 4 m3, utilizando dietas contendo três níveis de proteína bruta (36, 32 e 28%) em três fases de tamanho (I – 80 a 300g; II – 300 a 650g e III – 650 a 1000g), sendo portanto, o delineamento experimental com os níveis protéicos: I) 36 e 32%; II) 32 e 32%; e III) 32, 32 e 28% de PB. Os peixes foram alimentados com ração extrusada de diferentes níveis de proteína bruta e a quantidade de ração foi reajustada semanalmente conforme as taxas de alimentação, o consumo e a qualidade de água. Diariamente, avaliaram-se as variáveis da água como temperatura, oxigênio dissolvido e transparência, enquanto que mensalmente avaliou-se o nitrito, nitrato, nitrogênio amoniacal, fósforo total, alcalinidade e dureza total. Com a obtenção dos resultados, aplicou-se análise de variância (ANOVA) entre os tratamentos nas diferentes fases, ao nível de significância de 5% nas variáveis de crescimento e produção. Os resultados obtidos na fase I não identificaram diferença estatística (P≤0,05) entre ostratamentos da dieta 36 e 32% PB, ocorrendo apenas diferença (P>0,05) para taxa de eficiência protéica (TEP). Na fase II foi verificado diferença estatística entre os tratamentos, resultando em um melhor crescimento para os peixes que se alimentaram na fase anterior com a dieta 36% PB. Na fase III, houve um melhor desempenho para os peixes que se alimentaram da dieta 32% PB. Dessa forma, concluiu-se que o regime de alimentação mais eficiente para as três fases de tamanho é a utilização da ração extrusada com 32% de proteína bruta.
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Efeito do transporte sobre o estresse e a qualidade da carne de tilápia do nilo (oreochromis niloticus) = (Effect of stress on transportation and meat quality of Nile tilapia (Oreochromis niloticus)) / Jorge Daniel Mikos ; orientador, Gaberz Kirschnik ; coorientadores, Paulo César Falanghe Carneiro, Ana Paula Baldan / (Effect of stress on transportation and meat quality of Nile tilapia (Oreochromis niloticus))

Mikos, Jorge Daniel January 2011 (has links) (PDF)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, São José dos Pinhais, 2011 / Inclui bibliografias / Na criação de peixes, o manejo de captura e transporte é um dos momentos que promovem o estresse, sendo um procedimento traumático que se dá numa sucessão de estímulos adversos no qual, quando mal conduzido, causa perda da qualidade final dos pescados, ta / In fish breeding management of capture and transport is one of the moments that promote stress, is a traumatic procedure that takes place in a succession of adverse stimulus, in which, if poorly conducted, cause loss of the final quality of fish, both pro
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Níveis de fósforo total em dietas para alevinos de tilápia do Nilo / Levels of total phosphorus in diets of Nile tilapia fingerlings

Ribeiro, Felipe Barbosa 13 July 2005 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-17T14:52:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 167309 bytes, checksum: 21c964374866c417598ee2e3b69cbdf1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T14:52:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 167309 bytes, checksum: 21c964374866c417598ee2e3b69cbdf1 (MD5) Previous issue date: 2005-07-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Objetivando-se determinar a exigência de fósforo em dieta para alevinos de tilápia do Nilo (Oreochromis Niloticus), foram utilizados 432 alevinos com peso inicial de 0,60± 0,02g , mantidos em 36 aquários de 150 litros dotados de abastecimento de água, temperatura controlada, e aeração individual. O experimento foi planejado em delineamento inteiramente ao acaso, composto por seis tratamentos (0,55; 0,73; 0,94; 1,14; 1,37 e 1,59% de fósforo total), seis repetições por tratamento e doze peixes por unidade experimental. Os peixes foram alimentados Os peixes foram alimentados a partir do oferecimento de seis refeições diárias, durante 40 dias., durante 40 dias. Avaliaram-se o ganho de peso, consumo de ração aparente, conversão alimentar aparente, taxa de crescimento especifico, taxa de eficiência protéica, taxa de eficiência de fósforo, composição química corporal (teores de umidade, proteína, gordura, cálcio e fósforo, relação cálcio: fósforo) e taxa de eficiência de retenção de fósforo no ganho de peso. Avaliaram-se o ganho de peso, consumo de ração aparente, conversão alimentar aparente, taxa de crescimento especifico, taxa de eficiência protéica, taxa de eficiência de fósforo, composição química corporal (teores de umidade, proteína, gordura, cálcio, fósforo e relação cálcio: fósforo) e taxa de eficiência de retenção de fósforo no ganho de peso. Para a conversão alimentar aparente e taxa de eficiência protéica verificou-se efeito quadrático e para a taxa de eficiência de retenção de fósforo e taxa de eficiência de fósforo verificou-se efeito linear em função dos níveis de fósforo na dieta. As demais variáveis não houve efeito dos níveis de fósforo da dieta. Concluiu-se que a exigência de fósforo em dietas para alevinos de tilápia do Nilo é de 1,10%, por proporcionar as melhores respostas em conversão alimentar aparente e taxa de eficiência protéica. / Four hundred and thirty two of Nile tilapia fingerlings (Oreochromis Niloticus), with initial weight of 0,60 ± 0,02g, placed in 36 aquaria (150L) with water renewal, controlled temperature and individual aeration, were used to determine phosphorus requirements. The experiment was carried out according to a completely randomized design, with six treatments (0,55; 0,73; 0,94; 1,14; 1,37 and 1,59% total phosphorus), six replicates and twelve fishes per experimental unit. The fishes were fed offering six daily meals, during 40 days. They were evaluated the weight gain, apparent diet consumption, apparent feed: gain ratio, specific growth rate, protein efficiency rate, phosphorus of efficiency of rate, corporal chemical composition (humidity tenors, protein, fat, phosphorus, calcium, calcium: phosphorus ratio) and phosphorus of retention of efficiency of rate. For the apparent alimentary conversion and protein efficiency rate was verified quadratic effect and for the phosphorus of retention of efficiency of rate and phosphorus of efficiency of rate was verified lineal effect in function of the phosphorus levels in the diet. The other variables didn't have effect of the phosphorus of levels of the diet. It was concluded that total phosphorus requirement for diets of Nile tilapia corresponds to 1,10%, since this level provides the best responses in apparent feed:gain ratio and protein efficiency rate.
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Tecnicas estatisticas e de engenharia da qualidade para avaliar o desempenho de diferentes niveis de levedura na criação de tilapia (Oreochromis niloticus)

Medri, Vandir January 1997 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnologico / Made available in DSpace on 2016-01-08T22:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 110034.pdf: 23536212 bytes, checksum: bbb76b1b510478559ee4a388e99a6fc7 (MD5) Previous issue date: 1997 / O objetivo do trabalho foi o de avaliar o efeito da substituição de 10%, 20%, 30% de ração por levedura de destilaria sobre o ganho de peso, comprimento, eficiência alimentar, incrementos diários em comprimento e em peso, sobrevivência, composição de nutrientes das carcaças e filés de tilápia , grau de aceitabilidade e a função perda de Taguchi. Não houve diferenças estatísticas significativas (P0,05) entre os tratamentos para o ganho de peso, comprimento, eficiência alimentar, incrementos diários em comprimento e em peso. Para a sobrevivência, constatou não haver diferença estatística (P0,05) entre os tratamentos e o padrão para as caixas de amianto. Os diferentes níveis de inclusão de levedura promoveu um aumento do teor protéico e houve uma diminuição de lipídios nas carcaças e filés de tilápia. Revelou também que a inclusão de até 20% de levedura, resultou em melhoria da aceitabilidade dos filés de tilápia. As perdas de Taguchi não revelou uma correlação positiva para os diferentes níveis de inclusão de levedura de destilaria na ração.
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Automação do fornecimento de ração e fracionamento da ração diária para tilápias criadas em ambiente controlado com dieta balanceada

Martineli, Gabriel Moreno January 2017 (has links)
Orientador: Claudio Angelo Agostinho / Resumo: O objetivo desde estudo foi avaliar o efeito da frequência alimentar sobre o desempenho produtivo, morfologia intestinal e digestibilidade da proteína de tilápias (Oreochromis niloticus) criadas em ambiente controlado. Para realização do experimento foram utilizadas 180 tilápias da linhagem Supreme com peso médio de 114 ± 1,8g, distribuídas em 18 aquários de 300 litros, com temperatura controlada a 28 ± 0,9 ºC. Todas as tilápias foram microchipadas e cada uma representou uma repetição dentro de cada tratamento experimental. Três frequências alimentares (2, 4 e 24 refeições/dia) ao dia foram testadas, em delineamento inteiramente casualizado com 60 repetições por tratamento. Uma dieta balanceada foi fornecida por alimentadores automáticos, com taxa de alimentação inicial de 4% de peso vivo e a quantidade fornecida ajustada diariamente por Controlador Lógico Programável (CLP). O experimento teve duração de 56 dias. Ao final do período experimental foram avaliados o desempenho produtivo (ganho médio de peso, peso médio final, sobrevivência e conversão alimentar); índices hepatossomático, lipossomático e repleção gástrica, concentração de glicose sanguínea; morfologia intestinal (vilo, profundidade de cripta e relação vilo:cripta) e bromatólogia da carcaça. Os animais alimentados com 24 refeições/dia apresentaram peso médio final e maior ganho médio de peso, menores índices de repleção gástrica, menores níveis de glicose sanguínea e maior relação vilo:cripta. O ensaio de digestib... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre
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Análise de perigo e pontos críticos de controle associado à detecção de Pseudomonas sp. no processamento da tilápia (Oreochromis niloticus)

Carbonera, Nádia January 2007 (has links)
Dissertação(mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Engenharia e Ciência de Alimentos, Escola de Química e Alimentos, 2007. / Submitted by Caroline Silva (krol_bilhar@hotmail.com) on 2012-10-22T16:47:04Z No. of bitstreams: 1 anlise de perigos e pontos crticos de controle.pdf: 1012043 bytes, checksum: a178ea7de80daa5097795f55e1f95573 (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2012-11-06T15:05:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 anlise de perigos e pontos crticos de controle.pdf: 1012043 bytes, checksum: a178ea7de80daa5097795f55e1f95573 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-06T15:05:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 anlise de perigos e pontos crticos de controle.pdf: 1012043 bytes, checksum: a178ea7de80daa5097795f55e1f95573 (MD5) Previous issue date: 2007 / O programa de qualidade Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle – APPCC, segundo a NBR/ANVISA no 14.900, estabelece como princípios, a prevenção de riscos à saúde humana, bem como a redução ou eliminação de alterações nos alimentos através da aplicação de práticas de controles operacionais ao longo da cadeia produtiva. Desta maneira, a aplicação deste programa é considerada uma importante ferramenta para a segurança alimentar e controle de qualidade dos alimentos destinados ao consumo humano. São pré-requisitos fundamentais, as Boas Práticas de Fabricação - BPF, constituindo-se na base higiênico-sanitária para implantação do sistema. A implantação destas práticas simplifica e viabiliza o plano, assegurando sua integridade e eficiência operacional. Como partes da metodologia de avaliação do programa, foram identificadas as fases operacionais relacionadas ao processamento e estabelecido um sistema de vigilância para cada Pontos Críticos de Controle-PCC. Foram determinados os limites críticos e suas medidas preventivas e corretivas. Em função dos perigos de natureza biológica, associados à saúde pública deve ser avaliada a presença de microrganismos relacionados com a segurança alimentar, deterioradores e/ou patogênicos: Salmonella sp., coliformes a 45 oC, Staphylococcus coagulase positiva e Pseudomonas sp. As Pseudomonas sp. são as bactérias de maior incidência neste tipo de matéria-prima e indicadoras da extensão da deterioração. A decomposição por este microrganismo produz sabores e odores sulfidrílicos. O odor de frutas podres é produzido pela Pseudomonas fragi através da decomposição de aminoácidos monoamínicos ou monocarboxílicos com formação de aldeídos, sulfitos voláteis, cetonas e ésteres. Foi realizado o monitoramento deste microrganismo, através de uma avaliação microbiológica durante o recebimento, no pescado in natura, nos filés processados e pré-embalados e no produto final, congelado. O trabalho objetiva a avaliação dos PCC no processamento do filé congelado de tilápia (Oreochromis niloticus) na modalidade Individual Quick Frozen – IQF, produzido pela Costa Sul Pescados Ltda. /SC. / The quality program Analysis of Dangers and Critical Points of Control - HACCP, according to NBR/ANVISA no.14.900, establishes as principles, the prevention of risks to the human health, as well as the reduction or elimination of alterations to food via the application of practices of operational controls along the productive chain. Thus, the application of this program is considered an important tool for the alimentary safety and control of quality of food destined to human consumption. They are fundamental requirements, the Good Practices of Production – GPP, making up the hygienic-sanitary base for implantation of the system. The implantation of these practices simplifies and it makes possible the plan, assuring its integrity and operational efficiency. As part of the methodology of evaluation of the program, it was identified the operational phases related to processing and established a surveillance system for each CPC. The critical limits were established and its preventive and corrective measures. Concerning to the dangers of biological nature, associated to the public health the presence of microorganisms related with the alimentary safety, deteriorating and/or pathogenic agents should be evaluated: Salmonella sp., coliforms to 45 oC, Staphylococcus positive coagulase and Pseudomonas sp. The Pseudomonas sp. are bacteria of large incidence in this type of raw material and indicative of the extension of deterioration. The decomposition for Pseudomonas sp. produces sulfidrilic flavors and scents. The scent of rotten fruits is produced by the Pseudomonas fragi through the decomposition of monoamine or monocarboxyl aminoacids with formation of aldehydes, volatile sulfites, acetones and esters. It was intended, through an microbiological evaluation, to monitor this microorganism, during the process of receiving fish in natura, in the filets processed and pre-packed and final product under storage. The work aims at the evaluation of the Critical Points of Control in the processing of the frozen filet of tilapia (Oreochromis niloticus) in the Individual modality Quick Frozen - IQF, produced by Costa Sul Pescados Ltd. /SC.
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Análise do polimorfismo nos genes CYP19a e CYP19b em Oreochromis niloticus da linhagem Supreme e suas relações com caracteres reprodutivos.

Nunes, Marília Danyelle 27 February 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Marilia_Danyelle_Nunes.pdf: 2251889 bytes, checksum: 70b649c990ada42de45d8b20813f9a4d (MD5) Previous issue date: 2011-02-27 / The aromatase enzyme complex is responsible for converting androgens into estrogens in vertebrates. One of the key enzymes of this complex is the cytochrome P450arom gene expression and regulation of this enzyme is directly linked to sexual differentiation. Estrogen is essential for the development of the gonads and various physiological processes, ranging from normal growth to reproductive behavior. This study aimed to correlate the polymorphisms in the genes CYP19a CYP19b. In a first moment with three strains used in aquaculture (Chitralada, Supreme and GIFT) using thirty animals of each strain and, a second time only with the Supreme strain which has also the objective of analyzing the sex ratios found in both treatments at different temperatures of water and to establish possible relationships between them, analyzing the 122 animals treated at 25 ° C and 129 animals of treatment at 35 ° C. After extraction of DNA samples were subjected to PCR using primers designed to flank a region of interest. After confirmation of amplification samples were subjected to electrophoresis on Origins apparatus for identification of alleles. In the first study was identified that there is a polymorphism in the promoter region of CYP19b in the three strains. Were observed three alleles, ranging from 141 to 123 bp. Thus the primers for amplification of microsatellites in the regulatory region of the gene CYP19b were efficient, and therefore its use for identification of mutations in this region can be employed in the typical analysis of microsatellites. In the second study was identified that there is a polymorphism in the regulatory region of the gene 10 CYP19a, 5 alleles were observed. The proportion of females and males found in the treatment at 25 ° C was 1:2,3 1:2,88 and treatment at 35 ° C. However, it can be assumed that the polymorphism present in this portion of the regulatory region may be related to sex reversal found. Whereas the attempt to select individuals with polymorphisms in the regulatory region of the aromatase gene (and CYP19a CYP19b) is an essential study to evaluate the expression levels of both, so you can see how it is being expressed in individuals that will reverse or not , allowing for the reversal temperature with a higher proportion. / O complexo enzimático da aromatase é responsável pela conversão de andrógenos em estrógenos nos vertebrados. Uma das principais enzimas deste complexo é o citocromo P450arom e a regulação da expressão gênica desta enzima está diretamente ligada à diferenciação sexual. O estrogênio é essencial para o desenvolvimento das gônadas e diversos processos fisiológicos, que vão desde o crescimento normal até o comportamento reprodutivo. Este estudo teve como objetivo correlacionar o polimorfismo nos genes CYP19a e CYP19b. Em um primeiro momento com três linhagens utilizadas na piscicultura brasileira (Chitralada, Supreme e GIFT) utilizando trinta animais de cada linhagem e, em um segundo momento somente com a linhagem Supreme a qual tem-se o objetivo também de analisar as proporções de sexo encontrado em dois tratamentos com temperaturas diferentes da água e estabelecer possíveis relações entre eles, analisando 122 animais do tratamento a 25°C e 129 animais do tratamento a 35°C. Após a extração de DNA as amostras foram submetidas a PCR utilizando os primers desenhados para flanquear uma região de interesse. Após confirmação da amplificação as amostras foram submetidas à separação eletroforética no aparato Origins para identificação dos alelos. No primeiro estudo foi identificado que existe um polimorfismo na região promotora de CYP19b nas três linhagens. Foram observamos três alelos, variando entre 141 e 123 pb. Assim os primers para a amplificação de microssatélite na região regulatória do gene CYP19b foram 8 eficientes e, portanto, seu uso para identificação de mutações nesta região pode ser empregada na análise típica de microssatélite. No segundo trabalho foi identificado que há um polimorfismo na região regulatória do gene CYP19a, onde foram observados 5 padrões de bandas (supostamente alelos). A proporção de fêmeas e machos encontrada no tratamento a 25°C foi de 1:2,3 e de 1:2,88 no tratamento a 35°C. Contudo, supõe-se que o polimorfismo presente nesta porção da região regulatória pode estar relacionado à reversão sexual encontrada. Considerando a tentativa de selecionar indivíduos que apresentem polimorfismo na região regulatória dos genes da aromatase (CYP19a e CYP19b), é indispensável um estudo para avaliar os níveis de expressão de ambos, para que se possa observar como está sendo expressado em indivíduos que revertem ou não, possibilitando assim a reversão por temperatura com uma proporção mais elevada.
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Atividade antimicrobiana do tianfenicol sobre bactérias patogênicas de peixes /

Assane, Inácio Mateus January 2018 (has links)
Orientador: Fabiana Pilarski / Banca: Jonas Augusto Rizzato Paschoal / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Resumo: Os surtos de bacterioses na piscicultura são imprevisíveis, por essa razão é necessário dispor de opções terapêuticas eficazes para reduzir a morbidade e mortalidade. Para que a terapia seja eficaz, a escolha do antimicrobiano deve se basear nas informações farmacocinéticas do fármaco no hospedeiro, nas condições de produção e na sensibilidade do patógeno. No Brasil, atualmente só dois antimicrobianos são legalizados para uso na aquicultura, a oxitetraciclina (OTC) e o florfenicol (FFC), os quais muitas vezes são ineficazes. Destes, somente o FFC é autorizado para tratar bacterioses em tilápia-do-Nilo, a espécie mais produzida no país. Este cenário nos levou a investigar a atividade antimicrobiana do tianfenicol (TAF) contra as principais bactérias patogênicas de peixes cultivados no Brasil. Foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM) do TAF para 49 cepas isoladas de surtos de bacteriose ocorridos no período 2011 a 2017 em três estados. Adicionalmente, avaliou-se a atividade antimicrobiana do TAF (G1: 10 mg/kg), do FFC (G2: 10 mg/kg) e da combinação do TAF com o FFC (G3: TAF+FFC: 5 + 2,5 mg/kg e G4: 2,5 + 1,25 mg/kg) no tratamento de aeromonose em tilápia-do-Nilo experimentalmente infectadas com Aeromonas hydrophila. Como resultado do estudo in vitro, mais da metade das cepas testadas foram sensíveis ao TAF, sendo que os gêneros Aeromonas, Lactococcus e Vibrio foram os mais sensíveis. No estudo in vivo, o TAF foi eficaz no ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Outbreaks of bacterial diseases in fish farm are unpredictable; therefore, it is necessary to have effective therapeutic options to reduce the morbidity and mortality. For effective therapy, the anticipated pharmacokinetics and antibacterial activity of the antimicrobial in the target fish species under the given conditions must be considered before decide which antimicrobial to use. In Brazil, only two antimicrobials are approved for use in aquaculture, oxytetracycline (OTC) and florfenicol (FFC), which are often innefective. Moreover, only FFC is approved for use to treat bacterial diseases in Nile tilapia, the main specie in Brazil. This scenario led us to investigate the antibacterial activity o thiamphenicol (TAP) against the main bacteria infecting fishes in Brazil. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of TAP were determined for 49 strains isolated from diseases outbreaks registered during 2011 - 2017 in three States. Additionally the antibacterial activity of TAP (10 mg kg-1), FFC (10 mg kg-1) and TAF combined with FFC (G3: TAF+FFC: 5 + 2.5 mg kg-1 e G4: 2.5 + 1.25 mg kg-1) against Aeromonas hydrophila in Nile tilapia aeromoniosi models were evaluated. More than half of the tested strains were in vitro sensitive to TAP, being TAP highly potent against Aeromonas, Lactococcus, and Vibrio. The in vivo therapy with TAP alone and combined with FFC was effective to treat aeromoniosis in Nile tilapia. Groups G1, G2, G3, G4 and co... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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β-Glucano na piscicultura : efeitos na incubação dos ovos, sistema imune inato e microbiota intestinal /

Jesus, Raphael Barbetta de. January 2019 (has links)
Orientador: Fabiana Pilarski / Coorientador: Geert Wiegertjes / Banca: Marianna Vaz Rodrigues / Banca: Fábio Sabbadin Zanuzzo / Banca: Leonardo Susumu Takahashi / Banca: Geovana Dotta Tamashiro / Resumo: O β-glucano é uma molécula estudada como aditivo alimentar na piscicultura há vários anos, sendo descritos na literatura como imunoestimulante e atuando positivamente de diversas formas, como no crescimento, resistência aos patógenos, expressão dos genes do sistema imune inato, entre outros parâmetros. No presente estudo, diferentes abordagens de utilização com diferentes moléculas de β-glucanos foram avaliadas. No primeiro estudo, avaliamos os efeitos do banho de solução de β-glucano (100 mg L-1) durante 8 dias, após o período de exposição ao β-glucano foi avaliado o desempenho (massa e comprimento) das larvas de tilápia do Nilo. O segundo estudo nos possibilitou avaliar o potencial de dois β-glucanos de leveduras residuais provenientes da fermentação alcoólica. Os peixes foram alimentados durante 21 dias com 1 g kg-1 de β-glucano e desafiados com Aeromonas hydrophila inativada. No terceiro estudo avaliamos a composição intestinal bacteriana de pacus alimentados com dois diferentes β-glucanos de leveduras provenientes do processo de fermentação alcoólica. Para avaliar a diversidade bacteriana intestinal, os peixes foram alimentados por 21 dias com 1 g kg-1 de β-glucano, o DNA da microbiota intestinal extraído e realizado o sequenciamento (16S rDNA) utilizando a plataforma Illumina MiSeq. Os resultados do primeiro experimento demonstraram que as larvas incubadas com β-glucano apresentaram melhor desempenho, sendo maiores e mais pesadas que às do tratamento controle. Os result... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: β-glucan is a molecule studied as a feed additive in fish farming for several years and is described in literature as immunostimulating, and acting positively in several ways, such as growth, resistance to pathogens, expression of innate immune system genes, among other parameters. In the present study, different approaches of use with different β-glucan molecules were evaluated. In the first study, we evaluated the effects of β-glucan bath solution (100 mg L-1) for 8 days, after the exposure period to β-glucan we evaluated the performance (mass and length) of Nile tilapia larvae. The second study allowed us to evaluate the potential of two yeast β-glucans from alcoholic fermentation. Fish were fed for 21 days with 1 g kg -1 of β-glucan and challenged with inactivated Aeromonas hydrophila. In the third study we evaluated the bacterial intestinal composition of pacu fed with two different yeast β-glucans from the alcoholic fermentation process. To evaluate intestinal bacterial diversity, the fish were fed during 21 days with 1 g kg -1 of β-glucan, the DNA of intestinal microbiota was extracted and sequencing (16S rDNA) was performed using the Illumina MiSeq platform. The results of the first experiment demonstrated that the larvae incubated with β-glucan presented better performance, being bigger and heavier than those of the control treatment. The results of our second study indicated that one of the β-glucans obtained from residual yeasts from the alcohol production evaluate... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

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