Made available in DSpace on 2015-04-14T13:58:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 429417.pdf: 639044 bytes, checksum: a88bdea459c9c4b430c5126a98f86bb6 (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / O g?nero Eucalyptus possui centenas de esp?cies. Os m?ltiplos usos em que essas s?o empregadas fazem desse g?nero um dos mais valiosos e amplamente utilizados no mundo. O melhoramento gen?tico dessas plantas vem sendo estudado, principalmente pela ind?stria papeleira, com o intuito de se obter ?rvores com crescimento mais r?pido, maior quantidade de celulose, menor teor de lignina e resist?ncia a doen?as e intemp?ries. O presente trabalho teve por objetivo estudar os ?leos essenciais que foram extra?dos por arraste a vapor de eucaliptos geneticamente modificados e n?o geneticamente modificados da esp?cie h?brida E. grandis versus E. urophylla aplicadas na produ??o de papel. Entre as vari?veis de interesse neste estudo, associadas aos compostos vol?teis, encontram-se a composi??o qu?mica, o rendimento e a a??o antif?ngica frente a alguns fungos patog?nicos de eucaliptos. O ?leo essencial n?o representa um produto de interesse na ind?stria de papel e celulose, contudo ? necess?ria a avalia??o deste composto visando determinar a exist?ncia de equival?ncia entre plantas geneticamente modificadas e convencionais. A partir do estudo deste metab?lito secund?rio produzido pelas plantas, busca-se fornecer subs?dios que garantam a biosseguran?a ambiental, humana e animal. Os resultados mostram que a composi??o qu?mica dos ?leos essenciais n?o apresentou varia??o significativa entre os eucaliptos geneticamente modificados e seus controles isog?nicos. Todos os ?leos apresentaram a??o antif?ngica para os fungos testados. O ?nico par?metro que sofreu altera??o foi o rendimento, por?m, mais estudos devem ser feitos para verificar se esta varia??o est? relacionada com a modifica??o gen?tica sofrida pelas plantas.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:34:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 462829.pdf: 283798 bytes, checksum: 56e8c4bd1ff9723fec4ee2d7551b4fe4 (MD5) Previous issue date: 2014-08-22 / This paper develops a critical-legal examination on the subject of industrial property protection of plant varieties in the context of agricultural biotechnology. From the design of the context of legal, regulatory and constitutional protection of industrial property rights for plant varieties, the study aims to answer which are the limits of protection of the patents on genetically modified seeds process and if it is applicable the law of patent exhaustion in the case of transgenic soybean Roundup Ready? due to its technology self-replication nature. From the analysis of the case Monsanto v. Bowman judged by the U.S. Supreme Court, and made the necessary caveats regarding the legal system in the field of industrial property in Brazil, the work investigates whether the application - or not - of the doctrine of exhaustion of patent rights, depending on the specific case, is intrinsically related to the very social function of intellectual property, which in this work is considered as a limiting principle of the exclusive right that allows, ultimately, the reconciliation of fundamental rights in collision. / O presente trabalho desenvolve uma reflex?o cr?tico-jur?dica acerca do tema da prote??o da propriedade industrial das variedades vegetais no contexto da biotecnologia agr?cola. A partir do delineamento do contexto de prote??o jur?dico-normativo e constitucional da propriedade industrial de variedades vegetais, o estudo objetiva responder quais os limites de prote??o do processo de patenteamento de sementes transg?nicas e se aplic?vel a doutrina de exaust?o de patente no caso da soja Transg?nica Roundup Ready? em face da natureza autorreplic?vel de sua tecnologia. A partir da an?lise do caso Bowman versus Monsanto julgado pela Suprema Corte Americana, feitas as devidas ressalvas em rela??o ao sistema legal em mat?ria de propriedade industrial do Brasil, o trabalho investiga se a aplica??o ou n?o da doutrina de exaust?o de patente, a depender do caso concreto, est? intrinsecamente relacionada ? pr?pria fun??o social da propriedade industrial, considerada neste trabalho como princ?pio limitador do direito de exclusividade que permite, em ?ltima inst?ncia, a concilia??o de direitos fundamentais em colis?o.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:34:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 391270.pdf: 221785 bytes, checksum: 12717d779c05b3d574a25fd83e05dcbd (MD5) Previous issue date: 2007-03-28 / Os organismos geneticamente modificados representam um novo desafio tecnol?gico para a sociedade, na medida em que caracterizam patamar de riscos que eleva a incerteza cient?fica quanto a prote??o do ambiente e da sa?de humana. Os princ?pios gerais da Pol?tica Nacional de Biosseguran?a devem ser deduzidos de uma abordagem constitucional que possibilite a harmoniza??o entre o desenvolvimento ecologicamente sustent?vel e biotecnologia, observado o respeito aos direitos fundamentais ao meio ambiente e ? diversidade e integridade do patrim?nio gen?tico, a partir de afirma??o ?tica da responsabilidade da pessoa humana pelo mundo em que vivemos

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:12:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005- Camila Moreno.pdf: 773163 bytes, checksum: a0f615c8421820319c67af6265ee6496 (MD5) Previous issue date: 2005-12-08 / This work seeks to relate the ressurgence and protagonism of the peasant movements on the space of world articulation and alternatives building to neoliberalism, identified with the World Social Forum (WSF) process. On the peasants discourse to globalization in this context, the opposition to the genetically modified organisms (transgenics) in its introduction in agriculture has served as a catalytic element and mobilized other movements and segments of civil society, beyond the farms and rural areas. Such effect is due to the political characterization in framing the introduction of this technology; this has been obtained exceedingly by the peasant s discourse on defense of its territories and the Food Sovereignty of peoples and States, facing the control of the global agro-food systems by some few transnational corporations of the sector, as in the emblematic case of transgenic soy, the Monsanto company. Located within the macro debate on agriculture liberalization in the World Trade Organization (WTO); the juridical international framework to protect intellectual property; and the risks of genetic contamination of ecosystems, the opposition to transgenics in agriculture offers a red thread to comprehend the dynamics of how capitalism operates today. In the process through peasants became proletarians, the genetic control and privatization of the seeds serve as a corner stone. In this sense, transgenics update and give new meaning to the nucleus of themes and problems known for the marxist tradition as the Agrarian Question. Also, the peasant movements restate to theoretical framing the centrality of the labor process in apprehending the contradictions in reality, highlighting the ecological dimensions, and qualifying the productive activity that directly transforms nature; from there it is associated a critic to the ideology of technological progress as if dissociated of a political project. These imbrications are specially suitable to recover Marx today, freed from Marxism, seeking to update the critical perspective of political economy in relation to the contemporary concept of environmental rationality, thus incorporating the ecological dimension to politics as to economy. In this view, the peasant movements would be on the avant-garde of contesting the capitalist structures of production, as would they be pointing to on the interface of politics and ecology the ways to build a socialist project for the XXI century. / Este trabalho trata de relacionar a emerg?ncia e o protagonismo dos movimentos camponeses no espa?o de articula??o mundial de constru??o de alternativas ao neoliberalismo, identificado no processo do F?rum Social Mundial (FSM). No discurso ? globaliza??o dos camponeses nesse contexto, o tema da oposi??o aos organismos geneticamente modificados (transg?nicos) em sua introdu??o na agricultura tem servido de elemento catalisador e mobilizado outros movimentos e grupos da sociedade civil, para al?m do campo e do rural. Este efeito deve-se ? caracteriza??o pol?tica da introdu??o dessa tecnologia, lograda sobremaneira no discurso campon?s em defesa dos territ?rios e da soberania alimentar dos povos e dos Estados nacionais frente ao controle do sistema agroalimentar mundial por algumas empresas transnacionais do setor, como no caso emblem?tico da soja transg?nica, a Monsanto. Inserida no debate macro das negocia??es agr?colas no ?mbito da Organiza??o Mundial do Com?rcio (OMC), do marco jur?dico internacional de prote??o da propriedade intelectual e dos riscos ambientais da contamina??o gen?tica dos ecossistemas, a oposi??o aos transg?nicos na agricultura oferece um fio condutor para compreender a din?mica de funcionamento do capitalismo hoje, onde a proletariza??o dos camponeses, com o controle gen?tico e a privatiza??o das sementes, serve de pedra de toque. Dessa forma, os transg?nicos atualizam e ressignificam o n?cleo de temas e problemas que ficou conhecido na tradi??o marxista como a Quest?o Agr?ria. Ainda, os movimentos camponeses reafirmam para a problematiza??o te?rica a centralidade do trabalho na apreens?o das contradi??es da realidade, ressaltando a dimens?o ecol?gica, na qualifica??o do processo produtivo que diretamente transforma a natureza, incluindo desde a? a cr?tica ? ideologia do progresso tecnol?gico como dissociado de um projeto pol?tico. Esta imbrica??o ? especialmente oportuna para recuperar Marx hoje, depurado do marxismo, buscando atualizar a perspectiva cr?tica da economia pol?tica em rela??o ao conceito contempor?neo de racionalidade ambiental, incorporando a dimens?o da ecologia ? pol?tica tanto como ? economia. Nessa leitura, os movimentos camponeses estariam na vanguarda da contesta??o ?s estruturas de produ??o capitalistas hoje, bem como apontariam, na indissociabilidade entre ecologia e pol?tica, os rumos de constru??o de um projeto socialista para o s?culo XXI.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-06T20:28:39Z No. of bitstreams: 1 SoniaSoares_TESE.pdf: 3014929 bytes, checksum: 28ded32b676619d3b1e9f34c0e2f9349 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-07-07T21:55:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 SoniaSoares_TESE.pdf: 3014929 bytes, checksum: 28ded32b676619d3b1e9f34c0e2f9349 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-07T21:55:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SoniaSoares_TESE.pdf: 3014929 bytes, checksum: 28ded32b676619d3b1e9f34c0e2f9349 (MD5) Previous issue date: 2015-11-20 / Esta tese defende a ado??o de uma perspectiva filos?fico-pr?tica para o debate sobre o tema da alimenta??o saud?vel, tendo em vista os problemas atuais de sa?de (da fome ? obesidade) que afetam a seguran?a alimentar e nutricional e constituem objeto de pol?ticas p?blicas. Utiliza, para isso, elementos pol?ticos, ?ticos, pedag?gicos e antropol?gicos da filosofia de Immanuel Kant, como contribui??es ? pr?tica do profissional Nutricionista comprometido com a defesa e a realiza??o do direito humano ? alimenta??o adequada (DHAA). Pressuposto este direito, pretende avan?ar em rela??o ? perspectiva dominante nas pol?ticas e programas sociais que utilizam o argumento da utilidade, propondo considerar a alimenta??o saud?vel tamb?m um dever de virtude, segundo a doutrina kantiana dos deveres para consigo. Apresenta o caso da libera??o de sementes transg?nicas no Brasil como um exemplo de viola??o do direito ? alimenta??o que afeta negativamente a seguran?a alimentar, fruto do desacordo entre a pol?tica e a moral na atua??o do governo. Conclui que a realiza??o do DHAA exige o compromisso tanto do Estado como de cada cidad?o e que a filosofia de Kant pode trazer importantes contribui??es para a fundamenta??o da pr?tica do profissional Nutricionista que precisa estar esclarecido acerca do tema. / This thesis proposes the adoption of a practical and philosophic approach to the discussion about what should be a healthy food, in view of the actual problems concerning this subject (from famine to obesity), which affect food and nutritional security and constitute target of many official policies. In order to handle this task, this work resorts to ethic, pedagogical and anthropological concepts inherent to Immanuel Kant?s philosophy, as valuable contributions to the practice of the professional nutritionist committed to the support and accomplishment of the human right to adequate nutrition (DHAA). Under this assumption, it intends to surpass the prevailing idea inside the social programs and policies favoring the utilitarian argument. It considers rather that a healthy food is also a duty of virtue, according to the Kantian duties to one-self. The liberation of transgenic seeds in Brazil comes up as an example of the violation of the right to food security and affects it negatively, resulting from the conflict between politics and moral faced by the Brazilian government. This paper concludes that DHAA realization requires not only a committed state, but also committed citizens and suggests that Kant?s philosophy should offer important contributions to supporting the practice of the professional nutritionist, awarding him the necessary information about this matter.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JairMS.pdf: 604378 bytes, checksum: 8f3220e89d5c178954aadb5186b98f52 (MD5) Previous issue date: 2009-02-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Hybrids among transgenic plants and related species are expected to occur if they are sympatric and when there are not crossing barriers; as is the case, in Brazil, of cry1Ac transgenic cotton and Gossypium barbadense. This species has been maintained as dooryard plants, and should be preserved as a genetic resource. Hybrids were evaluated about traits related to fitness, leading to infer about its chances of survivor and selection. A barbadense genotype collected at the state of Mato Grosso was outcrossed to the variety DP 404, containing the gene cry1Ac, and to the isoline DP 404. All the F1 individuals and 122 among 170 F2 individuals expressed the toxin, and presented levels of resistance to pink bollworm (Pectinophora gossypiella) and cotton leafworm (Alabama argillacea) equivalent to the transgenic parent and superior to the isoline, barbadense or non transgenic hybrids. The percentage of germination and number of days to germinate did not differ among genotypes. Anthesis of the first flower and opening of the first cotton boll occurred earlier for herbaceous cotton and F1 hybrids than F2 population in average; all the populations presented a number of days to flower and opening of the first boll smaller then barbadense. The highest plants were barbadenses, and herbaceus the smallest, with F1 and F2 populations presenting intermediary heights. The number of seeds per plants were superior for F1 hybrids an herbaceous cotton, F2 populations were in average intermediary; the barbadense genotype produced the smallest number of seeds per plant. Pink bollworm, mainly, and also cotton leafworm, are important barbadense pests, so the transgene positive effect could favor the selection of hybrids, and hence G. hirsutum genome, against the maintenance of pure G. barbadense genome. The selection may be influenced by the plant uses: the smaller size of hybrids when compared to the barbadense may lead them to be differentiated from these parents to which medicinal properties are attributed; on the other hand, the greater boll production may favor hybrids maintenance with the purpose of producing lamp wicks, or use as an ornamental or swab / Espera-se que hibrida??es entre plantas transg?nicas e esp?cies pr?ximas ocorram sempre que haja simpatria e n?o existam barreiras de cruzamento, como ? o caso, no Brasil, do algodoeiro contendo o gene cry1Ac e a esp?cie Gossypium barbadense. Os barbadenses v?m sendo mantidos em quintais, e ? importante sua preserva??o como recurso gen?tico. H?bridos foram avaliados para caracteres relacionados com a adaptabilidade, inferindo sobre suas chances de sobreviv?ncia e sele??o. Para isto, obtiveram-se plantas F1 e F2 do cruzamento entre um algodoeiro barbadense coletado no estado de Mato Grosso com as cultivares DP404, contendo cry1Ac, e de sua isolinha DP4049. Todos os 37 indiv?duos F1 e 122 dentre 170 indiv?duos F2 avaliados expressaram cry1Ac, e apresentaram n?veis de resist?ncia ?s lagartas rosada (Pectinophora gossypiella) e curuquer?-doalgodoeiro (Alabama argillacea) equivalentes ao parental transg?nicos e superiores a isolinha, barbadense e h?bridos que n?o continham o transgene. N?o foram observadas diferen?as significativas para a porcentagem de germina??o ou quantidade de dias para germina??o. O florescimento e abertura do primeiro capulho ocorreram mais cedo nos algodoeiros herb?ceos e nos h?bridos que nas popula??es F2 em m?dia; todas as popula??es apresentaram um n?mero de dias para o florescimento e abertura do primeiro capulho significativamente mais baixo que os barbadenses. As plantas mais altas na matura??o eram os barbadenses, e os herb?ceos as mais baixas, sendo as popula??es F1 e F2 intermedi?rias. O n?mero de sementes por planta foi superior nos h?bridos F1 e algodoeiros herb?ceos, sendo as popula??es F2 intermedi?rias em m?dia, e os barbadenses aqueles que produziram menor n?mero de sementes. A lagarta rosada, principalmente, e tamb?m a curuquer?-do-algodoeiro s?o importantes pragas de G. barbadense, portanto o efeito positivo do transgene pode favorecer a sele??o de h?bridos contendo o transgene, e deste modo favorecer plantas que cont?m genoma de G. hirsutum, em detrimento da pureza do genoma de barbadense. A sele??o deve ser influenciada pelos usos da planta: o fato de os h?bridos serem mais baixos pode diferenci?-los dos pais barbadenses aos quais a propriedades medicinais s?o atribuidas; por outro lado, a produ??o bem maior de capulhos pode favorecer a manuten??o dos h?bridos quando se visa confec??o de pavios ou ornamenta??o de quintais e jardins

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-10-20T16:27:57Z No. of bitstreams: 1 DIS_ELISAMAR_SANTOS_MARIN_WAGNER_COMPLETO.pdf: 909420 bytes, checksum: 855d83fc62f091978eab516fd6b1df35 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T16:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_ELISAMAR_SANTOS_MARIN_WAGNER_COMPLETO.pdf: 909420 bytes, checksum: 855d83fc62f091978eab516fd6b1df35 (MD5) Previous issue date: 2016-03-01 / Gaucher disease, first described in 1882, is a rare autosomal recessive genetic disorder characterized by a deficiency of glucocerebrosidase, an enzyme that catalyses the hydrolysis of lysosomal glucocerebroside into glucose and ceramide. The presence of two mutant alleles located on chromosome 1 q21 region confirms the diagnosis of Gaucher disease, with N370S and L444P being the most common mutations. Clinical characteristics commonly associated with Gaucher disease include hepatosplenomegaly, anemia, thrombocytopenia and bone involvement, hematological and neurological impairment in type II and III. The accumulation of mutant enzyme and subsequent depletion of normal enzyme can be treated with enzyme replacement therapy using recombinant glucocerebrosidase. Enzyme replacement therapy is quite effective in the treatment of this disease, often reversing the cascade of biochemical events that lead to clinical manifestations and improving many of the patient's signs and symptoms. There are three recombinant enzymes for enzyme replacement therapy in Gaucher disease: Velaglucerase alfa, Alfataliglucerase and Imiglucerase. These enzymes differ from each other mainly in relation to the form of production, the amino acid sequence, and the glycosylation pattern. Currently, enzyme replacement therapy is administered by a drug called Cerezyme? (imiglucerase), produced by recombinant DNA technology using cell cultures obtained from Chinese hamster ovary. The imiglucerase differs from natural glucocerebrosidase, from placental origin, by an amino acid at position 495, where histidine is replaced with arginine. However, the cost of Cerezyme? is very high, hindering access to therapy. In Brazil, there are nearly 600 carriers of the disease. Although the treatment is guaranteed by law to all patients, the expenses on the purchase of the medicine are very high. The cost could be considerably reduced if the enzyme could be produced in an alternative way. Studies have shown that advanced reproductive techniques allow transgenic animals to be used as bioreactors for production of recombinant proteins of high potential biological and pharmaceutical interest. The Molecular Biology Laboratory and the development of University of Fortaleza in partnership with Quatro G developed the first Latin America transgenic goat clone, whose mammary gland is used as a bioreactor for producing recombinant protein human glucocerebrosidase. This study presented an alternative of glucocerebrosidase enzyme purification. The alternative method was achieved by using milk obtained through an induced lactation of the transgenic and cloned goat. According to the results, one can create a positive expectation for glucocerebrosidase through the procedure cited throughout this study. The confirmation of the presence of glucocerebrosidase enzyme activity was carried out by fluorimetry test. Cerezyme? and goat?s milk control (not genetically modified) were used with positive and negative control, respectively. The objective of this study was to establish protocols for purification of glucocerebrosidase enzyme from the cloned and transgenic goat's milk and confirm the enzyme activity, to evaluate the expression of the enzyme by electrophoresis, and to characterize the recombinant protein by mass spectrometry. / A doen?a de Gaucher, descrita pela primeira vez em 1882, ? uma rara desordem gen?tica autoss?mica recessiva caracterizada pela defici?ncia da atividade da glucocerebrosidase, uma enzima lisossomal que catalisa a hidr?lise de glucocerebros?deo em glicose e ceramida. A presen?a de dois alelos mutantes localizado na regi?o q21 do cromossomo 1 confirma o diagn?stico, sendo as muta??es mais comuns s?o N370S e L444P. O ac?mulo desta enzima pode ser tratada com terapia de reposi??o enzim?tica, usando glucocerebrosidase recombinante, bastante eficaz no tratamento da doen?a, revertendo toda a cascata de eventos bioqu?micos que acabam por ocasionar as manifesta??es cl?nicas apresentadas pelos pacientes ou melhorando muitos dos seus sinais e sintomas. As caracter?sticas cl?nicas comumente associados com a doen?a de Gaucher incluem hepatoesplenomegalia, anemia, trombocitopenia e envolvimento ?sseo, hematol?gico e comprometimento neurol?gico no tipo II e III. H? tr?s enzimas recombinantes para a terapia de reposi??o enzim?tica na doen?a de Gaucher: Velaglucerase alfa, Alfataliglucerase e Imiglucerase que diferem entre si principalmente em rela??o ? forma de produ??o, ? sequ?ncia de amino?cidos e ao padr?o de glicosila??o. Atualmente, a terapia de reposi??o enzim?tica ? administrada por um medicamento chamado Cerezyme? (imiglucerase), produzido atrav?s da tecnologia do DNA recombinante utilizando culturas de c?lulas obtidas do ov?rio de hamster chin?s. A imiglucerase difere da glucocerebrosidase natural, de origem placent?ria, por um amino?cido na posi??o 495, onde a histidina ? substitu?da por arginina. Entretanto, o custo do medicamento dispon?vel ? muito alto, dificultando o acesso ? terapia. No Brasil, h? aproximadamente 600 portadores da doen?a e o tratamento ? garantido por lei a todos os pacientes, embora os gastos com a compra do medicamento sejam muito elevados. Este custo poderia ser consideravelmente reduzido se a enzima pudesse ser produzida de forma alternativa. Estudos demonstraram que t?cnicas reprodutivas avan?adas permitem que animais transg?nicos possam ser usados como biorreatores para a produ??o de prote?nas recombinantes de elevado potencial biol?gico e interesse farmac?utico. O Laborat?rio de Biologia Molecular e do Desenvolvimento da Universidade de Fortaleza em parceria com a Quatro G Pesquisa e Desenvolvimento desenvolveu o primeiro clone transg?nico de cabras da Am?rica Latina cuja gl?ndula mam?ria ? usada como um biorreator para a produ??o da prote?na glucocerebrosidase humana recombinante. Neste presente estudo, foi apresentado uma alternativa de purifica??o da enzima glucocerebrosidase a partir do leite obtido atrav?s da lacta??o induzida da cabra transg?nica e clonada. De acordo com os resultados, pode-se criar uma expectativa positiva para a obten??o da glucocerebrosidase atrav?s do procedimento citado ao longo deste estudo. A confirma??o da presen?a de atividade enzim?tica de glucocerebrosidase foi realizada pelo ensaio fluorim?trico, Cerezyme? e leite da cabra controle (n?o transg?nica) foram usados com controle positivo e negativo, respectivamente. O objetivo deste estudo foi estabelecer protocolos de purifica??o da enzima glucocerebrosidase a partir do leite da cabra clonada e transg?nica e confirmar a atividade enzim?tica, avaliar a express?o da enzima por eletroforese e caracterizar a prote?na recombinante atrav?s da espectrometria de massa.

Made available in DSpace on 2016-04-28T14:56:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Henrique Trevisan.pdf: 1994656 bytes, checksum: b5a115311e3e101d5598cd132ea99a14 (MD5) Previous issue date: 2010-05-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / This study was conducted in two stages, with different experiments and culminating in two chapters. The first focuses on the evaluation of the influence of the complex technology used in transgenic soybean in the biological aspects of Urbanus acawoios (Williams, 1926) (Lepidoptera: Hesperiidae). Four plots of soybeans were grown, three of genetically modified soybean cultivar P98R62 (soybean GMRR) and with a conventional soybean cultivar BRS 232 (Soybean conv.). Only two plots with transgenic herbicide were applied at a concentration of 1200 g ai ha-1, the Roundup Ready ? and Roundup ? WG, both applied twice, 25 and 45 days after emergence. 125 eggs coming from a butterfly rearing in the open air, and from the same female, were used to assembly the five treatments each with 25 larvae, which are made of larvae fed on leaves of Soybean conv., Soy GMRR without herbicide application, soy GMRR treated with glyphosate in Roundup Ready ?, GMRR treated with glyphosate in Roundup ? WG and leaves of C. fairchildiana. The mortality rate of larvae was higher in treatments containing soy GMRR, with or without herbicide, when compared with the mortality of larvae fed with C. fairchildiana and soybean conv. The pupae originated from larvae fed on soy conv. and C. fairchildiana were shown 100% viable, as coming from the GMRR treated with Roundup Ready ?, Roundup ? WG and without herbicide, were shown up 84.6%, 87.5% and 88.2% viable, respectively. The second chapter deals with an assessment of the influence of pollen from transgenic corn resistant to insects on Galleria mellonella (Linnaeus, 1758) (Lepidoptera: Pyralidae). This is a lepidopteran pyralids associated with beehives; their larvae feed on old wax, pollen, exuviae, etc. There are conflicting opinions about its safety to bees, beekeeping and therefore, to consider a pest of apiaries, others to classify as an important organism in the recycling of organic matter inside the hive. This last view may be considered beneficial to bees. Within this context, the adoption of transgenic crops resistant to insects by expressing the Bt protein from Bacillus thuringiensis, may cause disease of the larvae of G. mellonella. Bees to collect pollen and store in the hives can expose this lepidopteran to intoxication by Bt proteins present in pollen. This study aims to evaluate the influence of Bt corn pollen on G. mellonella and then trace a discussion about the possibility of the condition field of Lepidoptera. For this a bioassay was performed, where it was offered to the larvae pollen Bt, conventional and commercial. The duration of the larval stage of G. mellonella was affected by the supply of pollen, and the corn by conventional or transgenic, provided the biggest records. Mortality was higher in individuals fed with transgenic pollen and bee wax, but did not differ from other foods, when pollen from Bt was offered honeycomb of Apis mellifera. The width and length of larvae originated from larvae fed with bee wax added to conventional or transgenic pollen were lower than other treatments. The corn pollen, conventional or GM alone is a less suitable food for the development of G. mellonella, in relation to a diet consisting of pollen from various plants. / O presente trabalho foi realizado em duas etapas, com experimentais distintos, e que resultaram em dois cap?tulos. O primeiro versa sobre a avalia??o da influ?ncia do complexo tecnol?gico empregado na soja transg?nica, em aspectos biol?gicos de Urbanus acawoios (Williams, 1926) (Lepidoptera: Hesperiidae). Quatro canteiros de soja foram cultivados, sendo tr?s com soja geneticamente modificada cultivar P98R62 (soja GMRR) e um com soja convencional, cultivar BRS 232 (soja conv.). Somente em dois canteiros com plantas transg?nicas foi aplicado o herbicida na concentra??o de 1200 g ia ha-1, nas formula??es Roundup Ready? e Roundup WG?, ambos aplicados duas vezes, aos 25 e 45 dias ap?s a emerg?ncia das pl?ntulas. Ovos provindos de uma cria??o em borbolet?rio ao ar livre, e oriundos de uma mesma f?mea, foram utilizados para montagem de cinco tratamentos com 25 lagartas cada, sendo estes constitu?dos por lagartas alimentadas com folhas de soja conv. soja GMRR sem aplica??o do herbicida, soja GMRR tratada com glifosato na formula??o Roundup Ready?, GMRR tratada com glifosato na formula??o Roundup WG? e folhas de C. fairchildiana. A mortalidade de larvas foi superior nos tratamentos que continham soja GMRR, com ou sem aplica??o de herbicida, quando comparada com a mortalidade das larvas alimentadas com C. fairchildiana e soja conv. As pupas provindas de lagartas alimentadas com soja conv. e C. fairchildiana apresentaram-se 100% vi?veis, j? as provindas de GMRR tratada com Roundup Ready?, Roundup WG? e sem aplica??o de herbicida, apresentaram-se 84,6%; 87,5% e 88,2% vi?veis, respectivamente. O segundo cap?tulo versa sobre a avalia??o da influ?ncia do p?len do milho transg?nico resistente a insetos, sobre Galleria mellonella (Linnaeus, 1758) (Lepidoptera: Pyralidae). Esse piral?deo ? um lepid?ptero associado ? colm?ias de abelhas, suas larvas se alimentam de cera velha, p?len, ex?vias etc. Existem opini?es contr?rias quanto a sua inocuidade ?s abelhas, e conseq?entemente a produ??o ap?cola, certos investigadores o consideram pragas de api?rios, j? outros o classificam como um organismo importante na reciclagem de mat?ria org?nica dentro das colm?ias. Nessa ultima vis?o, podem ser considerados ben?ficos ?s abelhas. Dentro desse contexto, a ado??o de cultivos transg?nicos resistentes a insetos pela a express?o da prote?na Bt, de Bacillus thuringiensis, poder? causar afec??o das larvas de G. mellonella. As abelhas ao coletarem p?len e armazenar nas colm?ias podem expor esse lepid?ptero a intoxica??o pela prote?na Bt presente no p?len. O presente trabalho tem o objetivo de avaliar a influ?ncia do p?len do milho Bt sobre G. mellonella e com isso tra?ar uma discuss?o sobre a possibilidade de afec??o ? campo deste lepid?ptero. Para isso foi realizado um ensaio biol?gico, onde foi ofertado ?s larvas p?len Bt, convencional e comercial. A dura??o da fase larval de G. mellonella foi afetada pela oferta de p?len, sendo que o do milho, convencional ou transg?nico, forneceu os maiores registros na dura??o. A mortalidade foi superior nos indiv?duos alimentados com cera virgem e p?len transg?nico, no entanto n?o diferiu dos demais alimentos, quando junto ao p?len Bt, foi ofertado favo de Apis mellifera. A largura e comprimento das pupas provindas de lagartas alimentadas com cera virgem adicionada ao p?len transg?nico ou convencional, foram inferiores aos demais tratamentos. O p?len do milho, convencional ou transg?nico, por si s? ? um alimento menos adequado ao desenvolvimento de G. mellonella, em rela??o a uma dieta composta por p?len de v?rias plantas.

Submitted by Helmut Patrocinio (hell.kenn@gmail.com) on 2017-11-24T03:31:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Cl?udio_Queiroz_TESE.pdf: 3430647 bytes, checksum: cd4fc13e7f5364c58653d2f2c6808b34 (MD5) / Approved for entry into archive by Ismael Pereira (ismael@neuro.ufrn.br) on 2017-11-27T16:14:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Cl?udio_Queiroz_TESE.pdf: 3430647 bytes, checksum: cd4fc13e7f5364c58653d2f2c6808b34 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-27T16:15:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Cl?udio_Queiroz_TESE.pdf: 3430647 bytes, checksum: cd4fc13e7f5364c58653d2f2c6808b34 (MD5) Previous issue date: 2005 / As epilepsias do lobo temporal s?o as que apresentam maior refratariedade ao tratamento farmacol?gico e perfazem 2/3 das interven??es cir?rgicas de epilepsia, sendo portanto de grande custo social, econ?mico e psicol?gico. Assim, modelos animais de epilepsia do lobo temporal s?o de grande relev?ncia n?o s? para o entendimento das bases neurais dessa patologia, mas tamb?m para o desenvolvimento de abordagens terap?uticas capazes de evitar a instala??o da doen?a. Esses s?o os objetivos da presente disserta??o de doutorado. Ap?s um evento traum?tico (no caso deste trabalho, um estado de mal epil?ptico), diversas altera??es morfol?gicas e fisiol?gicas acontecem, caracterizando a g?nese da s?ndrome epil?ptico (epileptog?nese). Dentre as altera??es podemos destacar a intensa fosforila??o de prote?nas em res?duos de tirosina e a ativa??o de diferentes segundos mensageiros. Os dois primeiros cap?tulos desta tese descrevem a tentativa de bloquear os processos de epileptog?nese por meio da inibi??o da fosforila??o de res?duos de tirosina atrav?s do tratamento farmacol?gico com inibidores das tirosina cinases, a herbimicina A e o K-252a. O terceiro cap?tulo analisa eletrofisiologicamente o circuito neural do giro denteado em animais que apresentavam uma muta??o em um s?tio inibit?rio da prote?na c?lcio/calmodulina cinase do tipo II (CaMKII). No primeiro cap?tulo, mostramos que o tratamento agudo com herbimicina A (348?M, 5?L, icv), ? capaz de bloquear a potencia??o duradoura (LTP) induzida por um est?mulo tet?nico bem como de atenuar (~40%) a ativa??o neuronal (express?o de c-Fos) decorrente de um estado de mal epil?ptico induzido pela administra??o sist?mica de pilocarpina (SE). Apesar dos significativos efeitos agudos, este tratamento mostrou-se incapaz de atenuar a freq??ncia de crises espont?neas, bem como o padr?o de morte neuronal observado ap?s o estado de mal epil?ptico induzido pela pilocarpina. Entretanto, o tratamento com herbimicina A alterou o padr?o de marca??o de metais pesados (Zn+2) no hilo do giro denteado e na regi?o de CA3 do hipocampo, por?m n?o apresentou efeito sobre o padr?o de brotamento das fibras musgosas observado na camada molecular do giro denteado. No segundo cap?tulo, mostramos que a herbimicina e o K- 252a modificam a atividade epileptiforme induzida pela administra??o intra-hipocampal de ?cido ca?nico, sem alterar o padr?o de morte neuronal. Esses resultados sugerem que o tratamento com inibidores de prote?nas tirosina cinases ? capaz de modificar o padr?o de ativa??o agudo do hipocampo ap?s um est?mulo (i.e., o estado de mal epil?ptico ou a LTP), por?m sem qualquer efeito sobre o processo de epileptog?nese. No terceiro cap?tulo, estudamos a excitabilidade e a plasticidade do giro denteado ? estimula??o da via perfurante (principal afer?ncia da forma??o hipocampal) em animais que apresentam uma CaMKII geneticamente modificada. Essa prote?na uma vez ativada n?o pode ser inibida. A caracteriza??o eletrofisiol?gica demonstrou que esses animais apresentam potenciais de campo evocados no giro denteado aparentemente semelhante aos animais controle (wild-type), por?m sua responsividade a padr?es de estimula??o em salvas e sua plasticidade apresentaram clara altera??o. Essa modifica??o foi caracterizada por uma maior variabilidade nas respostas ? trens de estimula??o (freq??ncias de 1 e 2 Hz) e maior inibi??o do pulso pareado em trens de estimula??o (para pulsos pareados aplicados a freq??ncia de 5 Hz). Al?m disso, conforme j? descrito na literatura, mostramos que a susceptibilidade a atividade epileptiforme depende do padr?o de estimula??o utilizado para os diferentes animais (mutantes vs. wild-type). Assim, utilizando o modelo cl?ssico do abrasamento demonstramos que a muta??o n?o altera a evolu??o da epileptog?nese. Entretanto, ao utilizarmos duas variantes de um padr?o de estimula??o similar ? freq??ncia teta (5Hz, Intermittent vs. Continuous theta-burst stimulations), demonstramos a import?ncia da muta??o na manuten??o da excitabilidade do giro denteado. Esses resultados destacam a import?ncia da CaMKII na atividade epileptiforme al?m de sugerir novas abordagens experimentais (i.e., sensibilidade ? padr?es de estimula??o eletrofisiol?gica) no estudo da epileptog?nese. Em resumo, os resultados apresentados nessa tese contribuem para um melhor entendimento dos fen?menos subjacentes aos processos de plasticidade neuronal e da contribui??o destes para o fen?meno de epileptog?nese, al?m de sugerir / Temporal lobe epilepsies are highly refractory to pharmacological treatment. Up to 70% of these patients undergo chirurgical resection of temporal region, procedure with important consequences for the social, economic and psychological spheres. Experimental animal models that mimic temporal lobe epilepsy provide an insightful approach to study the neural basis of epilepsy as well as create opportunities to test promising therapeutic drugs. The present thesis tests the antiepileptogenic activity of two protein tyrosine kinase inhibitors and the relevance of Ca+2/calmodulin kinase type II (CaMKII) mutants. Multiples morphological and physiological alterations take place after a traumatic brain injury (in this thesis, the status epilepticus) leading the animal to an epileptic conditions. During this period, the epileptogenesis process, there is strong tyrsine phosphorylation with the activation of many second messengers. The first two chapters of the thesis describe experiments in which herbimycin A and K-252a, two protein tyrosine kinase inhibitors, were used to attenuate synaptic plasticity and epileptogenesis. The third chapter, the dentate gyrus network was studied after angular bundle stimulation in animals presenting one punctual mutation at the autoinhibitory phosphorylation site of the CaMKII. In the first chapter, we showed that one single herbimycin A injection (348?M, 5?L, icv) was able to attenuate long-term potentiation (LTP) in the commissural CA3 neurons and also, to decrease status epilepticus- (SE-) induced neuronal activation (c-Fos expression) in almost 40%. Although markedly acute effects, the present herbimycin A treatment was not able to diminish spontaneous seizure frequency, cell death or aberrant mossy fiber sprouting observed after the pilocarpine-induced SE. Curiously, herbimycin-treated animals presented decreased neo-Timm staining in the hilus and CA3 region despite the epileptic condition. In the second chapter, we confirmed the ability of protein tyrosine kinase inhibitors to decrease SE-induced neuronal activation. Herbimycin A icv treatment altered the kainic acid-induced epileptiform profile in EEG recordings. Cell death pattern was not altered by any pharmacological treatment. These results suggest that protein tyrosine kinase inhibitiors are able to modify the acute neuronal activation and plasticity (ictogenesis or LTP) but is ineffective in attenuating the epileptogenesis process. In the third chapter, we studied the dentate gyrus excitability and plasticity after angular bundle stimulation in CaMKII mutant animals. Once in its self-sustained mode, this mutation does not allow the reduction of the catalytic activity of the kinase. These animals present normal electrophysiological profiles (similar to wild-type animals) but with reduced amplitude. Shortterm plasticity was clearly altered. Mutant animals presented increased variability in the responses to trains of stimulation at 1 and 2 Hz, and at at 5Hz stronger paired-pulse inhibition. Accordingly to the literature, we also showed that the epileptiform susceptibility depends on the stimulation pattern used in both animals (mutants vs. wild-type). Thus, although the mutation did not altered the behavior and the electrographic kindling evolution, we showed that mutant animals were prone to afterdischarges when stimulate by an intermittent theta-burst stimulation. On the other hand, the same animals needed more bursts to induce afterdischarges when the stimulation was set in the continuos mode. Taken together, the present results contribute to a better understanding of the protein tyrosine kinase and CaMKII function in neuronal plasticity underlying the epileptogenesis process and sum efforts in searching for a clinic antiepileptogenic drug.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-09T00:26:04Z No. of bitstreams: 1 StefanoPupeJohann_TESE.pdf: 36592987 bytes, checksum: f44357f3110776cf9f7cb628b2d65a95 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-09T00:36:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 StefanoPupeJohann_TESE.pdf: 36592987 bytes, checksum: f44357f3110776cf9f7cb628b2d65a95 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-09T00:36:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 StefanoPupeJohann_TESE.pdf: 36592987 bytes, checksum: f44357f3110776cf9f7cb628b2d65a95 (MD5) Previous issue date: 2015-03-20 / Os neurocientistas tem uma diversidade de perspectivas com as quais podem classificar diferentes partes do c?rebro. Com o surgimento de t?cnicas baseadas na gen?tica, como a optogen?tica, se torna cada vez mais importante identificar se um grupo de c?lulas, definidas atrav?s de morfologia, fun??o ou posi??o anat?mica possui um padr?o caracter?stico de express?o de um ou mais promotores gen?ticos. Isso permitiria melhores formas de estudar essas popula??es de neur?nios definidas geneticamente. Neste trabalho, eu apresento uma discuss?o te?rica e tr?s estudos experimentais nos quais essa foi a principal quest?o sendo abordada. O Estudo I discute as quest?es envolvidas em selecionar um promotor para estudar estruturas e subpopula??es na ?rea Tegmental Ventral. O Estudo II caracteriza uma subpopula??o de c?lulas na ?rea Tegmental Ventral que compartilha a express?o de um promotor, que ? anatomicamente muito restrita, e que induz avers?o quando estimulada. O Estudo II utiliza uma estrat?gia similar para investigar a subpopula??o no n?cleo subtal?mico que expressa PITX2 e VGLUT2 que, quando inativada, causa hiperlocomo??o. O Estudo IV explora o fato de que um grupo de c?lulas previamente identificadas no Hipocampo Ventral expressa CHRNA2, e indica que essa subpopula??o pode ser necess?ria e suficiente para o estabelecimento do ritmo teta (2-8 Hz) no Hipocampo Ventral de camundongos anestesiados. Todos esses estudos foram guiados pela mesma estrat?gia de identificar um promotor gen?tico capaz de permitir o controle de uma popula??o de neur?nios identificada geneticamente, e eles demonstram as diferentes formas em que essa abordagem pode generar novas descobertas. / Neuroscientists have a variety of perspectives with which to classify different parts of the brain. With the rise of genetic-based techniques such as optogenetics, it is increasingly important to identify whether a group of cells, defined by morphology, function or anatomical location possesses a distinct pattern of expression of one or more genetic promoters. This would allow for better ways to study of these genetically defined subpopulations of neurons. In this work, I present a theoretical discussion and threeexperimental studies in which this was the main question being addressed. Paper I discusses the issues involved in selecting a promoter to study structures and subpopulations in the Ventral Tegmental Area. Paper II characterizes a subpopulation of cells in the Ventral Tegmental Area that shares the expression of a promoter and is anatomically very restricted, and induces aversion when stimulated. Paper III utilizes a similar strategy to investigate a subpopulation in the subthalamic nucleus that expresses PITX2 and VGLUT2 which, when inactivated, causes hyperlocomotion. Paper IV exploits the fact that a previously identified group of cells in the ventral hippocampus expresses CHRNA2, and indicates that this population may be necessary and sufficient for the establishment of the theta rhythm (2-8 Hz) in the Local Field Potential of anesthetized mice. All of these studies were guided by the same strategy of characterizing and studying the role of a genetically defined subpopulation of cells, and they demonstrate the different ways in which this approach can generate new discoveries.