A doação de órgãos e tecidos para pesquisa é fundamental para uma melhor compreensão das doenças que afetam o sistema nervoso central. No estudo das doenças mentais, a pesquisa com tecido cerebral humano tem se tornado essencial para a investigação de patologias centrais através de métodos de pesquisa cada vez mais sofisticados. Mesmo assim, pouco se sabe sobre o que as pessoas que sofrem destas doenças pensam sobre a doação de órgãos e tecidos para pesquisa. Portanto, nosso objetivo foi descobrir quais são as opiniões e atitudes de pessoas que sofrem de transtorno bipolar – e seus familiares – sobre a doação de órgãos, especialmente quando a finalidade é pesquisa. Com o objetivo de investigar o que já se sabia sobre o comportamento do brasileiro frente à prática da doação de órgãos e tecidos para pesquisa, a primeira parte deste trabalho compreende uma revisão sistemática sobre o tema nas principais bases de dados (Scopus, Medline, Lilacs, Web of Science). Na segunda, foi conduzido um estudo qualitativo com entrevistas semiestruturadas em profundidade sobre doação de órgãos e tecidos para pesquisa. Os participantes possuíam diagnóstico de transtorno bipolar e estavam sendo tratados em um serviço terciário de saúde no sul do Brasil. Foi utilizada amostragem teórica. Após atingir saturação, dois casos discrepantes e os familiares dos pacientes foram incluídos para controle de qualidade. A grounded theory de Strauss & Corbin foi o método de análise de dados escolhido. Considerando os resultados da revisão sistemática, não foi possível localizar estudos que abordassem atitudes, opiniões ou conhecimento que o brasileiro pudesse ter sobre doação de tecidos e órgãos para pesquisa no Brasil nas principais bases de dados especializadas. Em relação ao estudo qualitativo, embora todos os participantes tivessem conhecimento sobre doação de órgãos para transplante, eles ficavam surpresos com a ideia da doação para pesquisa. Mesmo assim, após conversar sobre o tema e adquirir um melhor entendimento, a maioria se declarou a favor da doação. Mesmo que os participantes não tivessem conhecimento prévio sobre a doação de órgãos e tecidos para pesquisa, eles manifestaram o desejo de saber mais sobre o tema, sendo o desejo de ajudar outras pessoas e ajudar no avanço da medicina as principais razões para considerar uma doação. Acreditamos que facilitar o acesso do público em geral à doação para pesquisa é fundamental para a construção de um processo de doação ético e racional para os estudos post mortem que utilizam amostras biológicas humanas. / Organ and tissue donation for research is fundamental for the comprehension of central nervous system disorders. In mental illness, brain donation is essential for the biological investigation of central pathology through an ever increasing and progressively sophisticated availability of research means. Nevertheless, little is known regarding the thoughts of people with mental disorders regarding organ and tissue donation for research. Here, our objective was to understand attitudes and opinions of people treated for bipolar disorder – and their relatives – regarding donation in general and especially donation for research. The first part of this dissertation is dedicated to a systematic review focusing organ and tissue donation for research purposes in Brazil in main databases. The second part is a qualitative study using in-depth interviews through a semi-structured guide to gather attitudes and opinions regarding organ and tissue donation for research. Participants had a diagnosis of bipolar disorder, for which they were being treated in a tertiary facility in the south of Brazil. Theoretical sampling was used for recruitment. After we reached saturation, two outliers as well as family members of the participants treated for bipolar disorder were recruited for quality control. Strauss & Corbin’s grounded theory was used as framework for content analyses of the interviews. Considering data provided by the systematic review, there were no studies focusing population knowledge, attitudes or opinions about organ and tissue donation for research purposes in Brazil. Reflecting about data provided by the qualitative part of this dissertation, although all participants were aware of organ donation for transplant, they were surprised that tissue could be donated for research. Nevertheless, once they understood the concept they were usually favorable to the notion. While participants demonstrated a general lack of knowledge on donation for research, they were willing to learn more, with the desire to help others and to help further our knowledge about medical science often cited as motives for donation. We speculate that bridging this knowledge gap in the public can be a fundamental step towards a more ethical postmortem tissue donation process and ultimately for the investigation of central nervous system disorders.

O transtorno bipolar (TB) é uma doença crônica e debilitante frequentemente associada a comorbidades psiquiátricas e múltiplas doenças clínicas. Estudos recentes têm apontado para um impacto significativo das condições médicas gerais no curso e prognóstico do TB, bem como há um corpo crescente de evidências demonstrando as influências dos episódios de humor e de seu tratamento na incidência e morbidade das comorbidades físicas. No entanto, os estudos ainda são iniciais e ainda há uma carência de dados epidemiológicos e clínicos acerca dessas associações, particularmente no nosso meio. A presente tese é composta por três estudos: 1) um estudo da prevalência e dos correlatos clínicos associados a fatores de risco cardiovascular em duas amostras de pacientes bipolares; 2) uma avaliação da associação entre obesidade e suicidalidade em pacientes bipolares; 3) um estudo da prevalência e dos fatores associados às comorbidades clínicas em pacientes bipolares. Em conjunto, os resultados dos estudos apontam para uma elevada prevalência de fatores de risco cardiovasculares e condições médicas gerais em pacientes bipolares, além da relação entre doenças físicas e características demográficas, clínicas e fatores de gravidade, tais como idade, gênero, tempo de duração da doença, suicidalidade, padrão de uso de medicação e comorbidades psiquiátricas. Nossos achados fornecem dados adicionais para a compreensão da relação entre transtorno bipolar e comorbidades clínicas, enfatizando a necessidade tanto de uma abordagem mais ampla e integral do transtorno quanto do desenvolvimento de estratégias mais eficazes de prevenção e tratamento. / Bipolar disorder (BD) is a chronic and debilitating illness frequently associated to multiple psychiatric comorbidities and clinical diseases. Recent studies have pointed out the significant impact o general medical conditions on BD course and prognosis and there is a growing body of evidence showing the influence of mood episodes and their treatment on incidence and morbidity of medical comorbidities. However, most studies are preliminary and there is still a lack of epidemiological and clinical data about these relationships, particularly in Brazil. This thesis comprises three studies: 1) a study on the prevalence and clinical correlates of cardiovascular risk factors in two samples of BD patients; 2) an evaluation about the association of obesity and suicidality in patients with BD; 3) a study on the prevalence and clinical correlates of clinical comorbidities in BD patients. Taken together, the results show an elevated prevalence of cardiovascular risk factors and general medical conditions in BD patients and stress the associations among physical disease, demographic and clinical variables and correlates of severity such as age, gender, duration of illness, medication prescription pattern and psychiatric comorbidities. Our findings provide additional data to the undestanding of the relationship between BD and clinical comorbidities emphasizing the need for both a comprehensive approach to BD and the development of more effective prevention and treatment strategies.

CASTELO, Milena Sampaio. Validação da "escala diagnóstica espectro bipolar", do "questionário transtornos do humor" e sua utilização para o rastreio de pacientes com transtorno bipolar em unidades de atenção básica. 2012. 199 f. Tese (Doutorado em Ciências Médicas) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-19T11:59:12Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_mscastelo.pdf: 2134481 bytes, checksum: 106d891897ec0bbdc8494a82d0e1ab42 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-05-19T12:01:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_mscastelo.pdf: 2134481 bytes, checksum: 106d891897ec0bbdc8494a82d0e1ab42 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-19T12:01:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_mscastelo.pdf: 2134481 bytes, checksum: 106d891897ec0bbdc8494a82d0e1ab42 (MD5) Previous issue date: 2012 / This study was conducted in two different step he first one consisted on the development and validation of Brazilian Portuguese version of two screening instruments (the Mood Disorder Questionnaire-MDQ and the Bipolar Spectrum Diagnostic Scale-BSDS) for bipolar spectrum disorders in an adult outpatient psychiatric population. Two recent studies conducted in the US and in France found an unexpectedly high prevalence of a positive screen for bipolar disorder (BD) in primary care (PC). There are few studies of the prevalence of BD in PC and there is no information about the epidemiology of BD in Brazilian PC services. The MDQ was used to investigate the prevalence of a positive screen for bipolar disorder (BD) in patients attending one of three Brazilian primary care (PC) centers. The impact of a positive screen for BD on variables such as depressive symptoms, quality of life, medical comorbities, functioning and PC service utilization was determined. Methods. Phase one - 114 consecutive patients attending an outpatient psychiatric clinic completed the MDQ and 120 patients completed the BSDS. A research psychiatrist, blind to MDQ and BSDS results, interviewed patients by means of the mood module of the Structured Clinical Interview for DSM-IV (‘gold standard’). Phase two - This cross-sectional survey recruited a systematic sample of 720 patients between 18 and 70 years of age who were seeking PC treatment. Study measures included the Mood Disorder Questionnaire, the Center for Epidemiologic Studies Depression Scale, the World Health Organization Quality of Life Instrument (abbreviated version), the Functional Comorbidity Index, the Functioning Assessment Short Test, data on past mental health care, service utilization and a review of medical records for coded diagnosis. Results. Phase one: A B-MDQ screening score of 8 or more items yielded: sensitivity of 0.91 (95% CI; 0.85-0.98), specificity of 0.70 (95% CI; 0.62-0.75), a positive predictive value of 0.82 (95% CI; 0.75- 0.88) and a negative predictive value of 0.84 (95% CI; 0.77-0.90). A B-BSDS screening score of 16 or more items yielded: sensitivity of 0.79 (95% CI; 0.72-0.85), specificity of 0.77 (95% CI; 0.70-0.83), a positive predictive value of 0.85 (95% CI; 0.78-0.91) and a negative predictive value of 0.70 (95% CI; 0.63-0.75). Phase two. The prevalence for having positive screen for BD was 7.6% (n=55; 95% CI: 5.6-9.5%), but only 2 patients (3.6%) were recognized as having the disorder by general practitioners. A positive screen for BD was associated with significant depressive symptoms (CES-D score ≥ 16; 70.9%), with more general medical conditions and a higher primary care utilization. Patients who screened positively for BD reported worse health-related quality of life as well as impaired functioning, compared to those who screened negatively. Limitations. The psychometric properties of the MDQ for the screening of BDs in primary care are yet to be determined. Co-morbid mental disorders were not assessed. The cross-sectional design does not allow cause-effect inferences. Conclusions. B-MDQ and B-BSDS are valid instruments for the screening of bipolar disorders. The prevalence of a positive screening for BD is high, clinically significant and underrecognized in Brazilian PC settings. / Introdução. Esse estudo foi realizado em duas etapas. A primeira consistiu no desenvolvimento e na adaptação das versões brasileiras de dois instrumentos de rastreio (o Questionário de Transtorno de Humor, B-QTH e a Escala Diagnóstica do Espectro Bipolar, B-EDEB) para transtornos do espectro bipolar em população psiquiátrica adulta. Dois estudos recentes realizados nos Estados Unidos e na França encontraram, inesperadamente, alta prevalência de rastreio positivo para transtorno bipolar na atenção primária. Existem poucos estudos sobre prevalência do transtorno bipolar nos serviços brasileiros de atenção primária. Na segunda etapa do estudo, o QTH foi utilizado para investigar a prevalência de rastreio positivo para transtorno bipolar em pacientes atendidos em três centros de cuidados primários brasileiros. O impacto de rastreio positivo para transtorno bipolar em variáveis como sintomas depressivos, qualidade de vida, comorbidades médicas, funcionalidade e utilização do serviço, foi determinado. Métodos. Fase 1–114 pacientes atendidos, consecutivamente, em ambulatório psiquiátrico, completaram o QTH e 120 completaram a EDEB. Um psiquiatra pesquisador, cego para os escores do QTH e da EDEB, entrevistou os participantes através do módulo de transtornos de humor da entrevista clínica estruturada para o DSM-IV (“padrão-ouro”). Fase 2 – Esse estudo transversal selecionou uma amostra sistemática de 720 pacientes entre 18 e 70 anos que procuraram atendimento nos serviços de atenção primária de saúde. Medidas do estudo incluíram o Questionário de Transtorno de Humor, a Escala de Depressão do Centro de Estudos Epidemiológicos (CES-D), a versão Abreviada do Instrumento de Avaliação de Qualidade de Vida da Organização Mundial de Saúde (WHOQOL - Breve), o Índice de Comorbidade Funcional, o Teste Rápido de Avaliação Funcional, dados passados sobre cuidados em saúde mental, utilização dos serviços de saúde e revisão dos prontuários para diagnostico codificado. Resultados. Fase 1 - Um escore do QTH maior ou igual a 8 apresentou uma sensibilidade de 0,91 (IC 95%; 0,85-0,98), especificidade de 0,70 (IC 95%; 0,62-0,75), valor preditivo positivo de 0,82 (IC 95%; 0,75-0,88) e valor preditivo negativo de 0,84 (IC 95%; 0,77-0,90). Um escore B-EDEB de 16 ou mais itens produziu os seguintes resultados: sensibilidade de 0,79 (IC 95%; 0,72-0,85), especificidade de 0,77 (IC 95%; 0,70-0,83), valor preditivo positivo de 0,85 (IC 95%; 0,78-0,91) e valor preditivo negativo de 0,70 (IC 95%; 0,63-0,75). Fase 2 – A prevalência de rastreio positivo para transtorno bipolar foi de 7,6% (n=55; IC 95%: 5,6-9,5), no entanto, apenas 2 (3,6%) foram identificados pelos médicos de família. Um rastreio positivo para transtorno bipolar foi associado a sintomas depressivos significativos (pontuação CES-D ≥ 16; 70,9%) , mais condições médicas gerais e maior utilização dos serviços de atenção primária. Pacientes com rastreio positivo para transtorno bipolar relataram pior qualidade de vida, assim como comprometimento da funcionalidade quando comparados aos pacientes com rastreio negativo. Limitações. As propriedades diagnósticas do QTH, em atenção primária, ainda estão para ser determinadas. Comorbidades psiquiátricas não foram avaliadas. O desenho do estudo transversal não permite inferências de causa-efeito. Conclusões. As versões brasileiras do QTH e da EDEB são instrumentos válidos para o rastreio de transtorno bipolar. A prevalência de rastreio positivo para transtorno bipolar é alta, clinicamente significativa e pouco identificada em serviços brasileiros de atenção primária.

O Transtorno Bipolar (TB) é uma doença psiquiátrica grave, altamente incapacitante que está associada com diversas comorbidades médicas e altas taxas de suicídio. Embora sua fisiopatologia não esteja completamente elucidada, inúmeros estudos têm mostrado alterações no sistema imune de indivíduos com TB. A resposta crônica destes indivíduos ao estresse parece gerar um aumento da inflamação sistêmica bem como da neuroinflamação. A micróglia ativada devido aos estímulos inflamatórios contínuos deve ocasionar diferentes prejuízos tanto bioquímicos quanto funcionas. Os macrófagos, primeira linha de defesa, são células de característica plástica de extrema importância do sistema imune e podem ser estimulados a polarizar para diferentes formas com liberação de fatores pró e antiinflamatórios, estimulando ou mantendo a homeostase no ambiente agredido de alguma forma. Desta forma, nosso trabalho buscou investigar a resposta fenotípica dos macrófagos contra o meio ambiente pró-inflamatório sistêmico observado no plasma de pacientes bipolares eutímicos, maníacos e depressivos em comparação aos controles. A amostra incluiu 5 controles saudáveis, 8 pacientes bipolares remetidos, 5 pacientes maníacos e 5 pacientes depressivos. As citocinas e quimiocinas de RNAm em células U937 tratadas com plasma mostraram um padrão de expressão diferente relativo entre controles saudáveis e pacientes com TB. As citoquinas inflamatórias tais como IL-1β e TNF-α, em pacientes bipolares maníacos e depressivos demonstram maiores quantidades de IL-1β mRNA do que os pacientes eutímicos e pacientes depressivos induziram maiores quantidades de RNAm de TNF-α do que os pacientes eutímicos em células U937. Já a expressão das quimiocinas CXCL9 e CXCL10 no plasma de pacientes com TB depressivos, demostraram ser de menor expressão significativa no grupo de pacientes maníacos quando comparados a controles e pacientes bipolares eutímicos. Nossos resultados sugerem que as citocinas periféticas devem modular a polarização M1 ou M2 de macrófagos no TB. / Bipolar Disorder (BD) is a severe and highly incapacitating psychiatric disorder which is associated with the presence of medical comorbidities. The progression of BD is related to an important cognitive deficit and also to biological and clinical manifestations that lead to treatment resistance and worse prognosis. Immune disturbances have been widely observed and investigated in BD patients. Chronic inflammatory responses induce neuroinflammation, mainly by pro-inflammatory microglial activation, and result in biochemical and functional impairment. Macrophages are the first line of defense of the immune system and exhibit cell plasticity. As well, microglia represents the resident macrophage of the central nervous system been responsible for its protection. Both cells can be stimulated to polarize into two different phenotypes, mainly pro- and anti-inflammatory, maintaining the homeostasis under physiologic and pathologic conditions. Therefore, we aimed to investigate macrophages phenotypical response when submitted to BD patients plasma in different episodes, which is considered a pro-inflammatory environment, and healthy controls plasma. Subjects included healthy controls (n=5), remitted BD patients (n=8), manic patients (n=5) and depressive patients (n=5). The mRNA expression of chemokynes and cytokines from U937 cells treated with BD patients plasma were different from those submitted to healthy controls plasma. Higher mRNA expression of IL-1β was observed in those cells submitted to manic and depressive BD patients plasma when compared to euthymic patients. Also, depressive BD patients plasma induced higher expression of TNF-α compared to euthymic patients. However, chemokynes expression, such as CXCL9 and CXCL10, were reduced in depressive BD patients. However, chemokynes expression, such as CXCL9 and CXCL10, were reduced in depressive BD patients. Inflammatory cytokines such as IL-1β and TNF-α in bipolar manic and depressive patients demonstrate higher amounts of IL-1β mRNA that euthymic patients and depressive patients induced higher amounts of TNF-α mRNA levels than the patients in euthymic U937. Since the expression of CXCL9 and CXCL10 chemokines in plasma from patients with depressive TB, proved less significant expression in the group of manic patients when compared to controls and euthymic bipolar patients.

Objetivo: Esta dissertação tem por objetivo avaliar as relações entre marcadores inflamatórios e o transtorno bipolar (TB), avaliando de forma prospectiva os níveis séricos de diversas citocinas de uma mesma amostra de pacientes com transtorno de humor bipolar em mania e após seu tratamento. Métodos: Para a avaliação dos níveis séricos de citocinas em diferentes fases do TB, foi acompanhado um grupo de vinte e três pacientes antes e após o tratamento de um episódio de mania. O diagnóstico foi definido conforme critérios da Entrevista Clínica Estruturada para DSM-IV, SCID-I. A análise das variáveis foi realizada através do teste de Wilcoxon para amostras pareadas. Resultados: Não foram observadas diferenças nos níveis de citocinas antes e após o tratamento dos pacientes em episódio maníaco. Conclusões: Estes achados devem ser interpretados com cautela. Devido ao pequeno tamanho amostral não é possível controlar possíveis fatores de confusão, como, por exemplo, índice de massa corpórea e fármacos utilizados para o episódio maníaco. Estudos maiores poderiam elucidar se o tratamento do episódio maníaco não está associado a alterações nos níveis de citocinas. / Objectives: This report aims to evaluate the relation between inflammatory markers and bipolar disorder, assessing prospectively cytokines serum levels of a group of bipolar patients in acute mania and after treatment. Methods: In order to assess changes in cytokines serum levels of BD patients during acute mania and after treatment, twenty three bipolar patients were prospectively compared during and after treatment of a manic episode. Diagnoses were made using the Structured Clinical Interview for DSM-IV, SCID-I. Analysis were made using paired samples Wilcoxon signed rank test. Results: No differences were found in cytokine serum levels before and after treatment for acute mania Conclusion: These findings should be interpreted with caution. Due to small sample size, it was not possible to control possible bias, such as body mass index and prescribed medications.

O sistema purinérgico tem sido amplamente implicado em condições médicas, entre elas, o transtorno bipolar (TB). Até onde sabemos, nenhum estudo foi realizado com o objetivo de esclarecer a possível contribuição do receptor P2X7 (P2X7R) na patofisiologia do TB ou mesmo com o objetivo de revisar o que já fora previamente publicado sobre este assunto. Nos presentes trabalhos, nosso objetivo foi em primeiro lugar explorar a relação entre o receptor e esse transtorno e identificar os mecanismos pelos quais o P2X7R desempenha um papel no TB e por fim revisar a literatura, focando na sinalização purinérgica no TB, com ênfase na sinalização por ATP e adenosina, destacando o potencial papel do P2X7R na modulação da inflamação e ativação microglial em pacientes bipolares. Para o primeiro objetivo, analisamos o efeito de moduladores do P2X7R (BzATP, BBG e A438079) sobre o comportamento (atividade locomotora) e sobre marcadores de neuroinflamação (IL-1 , TNF- e IL-6), excitotoxicidade (GFAP, TBARS) e neuroplasticidade (BDNF) em um modelo farmacológico de mania induzido pelo tratamento agudo e crônico com D – anfetamina (AMPH) (2mg/kg). Demonstramos na atividade locomotora uma aparente falta de capacidade de resposta à AMPH por animais com P2X7R bloqueado ou ausente (P2X7R-/-). Da mesma forma, observamos que o P2X7R participa do aumento do ambiente próinflamatório e excitotóxico induzido pela AMPH, demonstrado pelo papel de reversão do bloqueio do P2X7R ou pela perda de resposta dos animais P2X7R-/-. Em conclusão, nossos resultados suportam a hipótese de que o P2X7R possui um papel na patofisiologia do TB, como sugerido pelo nosso modelo animal, principalmente por mediar a neuroinflamação e a excitotoxicidade e finalmente levando a mudanças comportamentais. Assim, acreditamos que o P2X7R possui potencial para se tornar um alvo terapêutico do TB. Baseado neste cenário, estudos mais detalhados do papel do P2X7R no TB são necessários, especialmente devido à sua capacidade de agir sobre a microglia e modular a neuroinflamação e a excitotoxicidade. / The purinergic system has been increasingly implicated in medical conditions, among them bipolar disorder (BD). Up to date, no study has been conducted in order to clarify the possible contribution of the P2X7 receptor (P2X7R) to BD pathophysiology or even to review the previously data about this subject. In the presents works, we aim firstly to explore the association between the receptor and the disorder and identify the mechanisms by which the P2X7R plays a role in BD and lastly to review the literature focused on purinergic signaling in BD, with an emphasis on ATP and adenosine signaling, highlighting the potential role of P2X7R in modulating inflammation and microglia activation in bipolar patients. For the first aim, we analyzed the P2X7R modulatory effect (BzATP, BBG and A438079) on behavior (locomotor activity) and on markers of neuroinflammation (IL-1 , TNF- and IL-6), excitotoxicity (GFAP, TBARS), and neuroplasticity (BDNF) in a pharmacological model of mania induced by acute and chronic D-amphetamine (AMPH) treatment (2 mg/kg). We demonstrate in the locomotor activity an apparent lack of responsiveness to AMPH by animals with blocked or absent P2X7R (P2X7R-/-). Likewise, we observed that the P2X7R participates in the AMPH-induced increase of proinflammatory and excitotoxicity environment, demonstrated by the reversal role of P2X7R blockage or the lack of response by P2X7R-/- mice. In conclusion, our results provide support for the hypothesis that P2X7R plays a role in BD pathophysiology, as suggested by our animal model, mainly by mediating neuroinflammation and excitotoxicity and ultimately leading to behavioral changes. Thus, we believe that P2X7R has the potential to become a therapeutic target of BD. Based on this scenario, a more detailed study of the role of P2X7R in BD is warranted, especially due to its ability to act on microglia and modulate neuroinflammation and excitotoxicity.

A disfunção do sistema imune inato e a neuroinflamação tem sido cada vez mais reconhecidas como elementos importantes na fisiopatologia do transtorno bipolar (TB). Como componentes essenciais da imunidade inata, os macrófagos tem múltiplas funções tanto na inibição como na promoção da proliferação celular e na reparação tecidual, sendo a diversidade e a plasticidade características marcantes deste tipo celular. A polarização M1 clássica e a polarização alternativa M2 de macrófagos representam dois extremos de um estado dinâmico na mudança da ativação dos mesmos. Os macrófagos do tipo M1 sintetizam citocinas próinflamatórias que inibem a proliferação de células circundantes e danificam tecidos, enquanto os macrófagos do fenótipo M2 liberam citocinas antiinflamatórias que podem promover reparo tecidual. Um desequilíbrio da polarização M1-M2 dos macrófagos é frequentemente associado a várias doenças ou condições inflamatórias. O objetivo desta tese foi, além de revisar a importância da inflamação sistêmica na modulação da resposta inflamatória da microglia/macrófagos e consequentemente seu potencial envolvimento na fisiopatologia do TB, avaliar o perfil de polarização M1/M2 em cultura de macrófagos de sujeitos com TB comparados a indivíduos saudáveis. Monócitos foram isolados a partir de sangue periférico de dez sujeitos com TB e dez indivíduos saudáveis e diferenciados em macrófagos através da adição de fator estimulante de colônia de macrófagos (MCSF) ao meio de cultura. Para induzir a polarização M1 ou M2, as culturas foram incubadas com IFN-y e LPS ou IL-4 respectivamente. Após a incubação, recolheram-se os sobrenadantes e mediram-se as citocinas (IL-1β, IL-6, IL-10 e TNF-α) por ensaio multiplex. A secreção das citocinas IL-1β, TNF-α e IL-6 características do protótipo M1 e citocinas IL-10 do protótipo M2 foram semelhantes entre os pacientes e os controles. Utilizou-se a razão TNF-α / IL-10 do fenótipo M1 para refletir o estado inflamatório dos participantes. Não foi observada diferença entre os grupos (p=0,627). Duas hipóteses diferentes poderiam explicar esses resultados: todos os pacientes incluídos neste estudo representam um estágio inicial da doença como evidenciado pela pontuação FAST total inferior a 11. De acordo com o modelo de estadiamento em TB, as alterações biológicas (incluindo a inflamação) parecem estar relacionadas com os episódios de humor e progressão da doença. Juntamente com estudos anteriores, os nossos dados sugerem que os pacientes nos estágios iniciais ainda preservam a função do sistema imunológico sem apresentar um desequilíbrio a favor do perfil de macrófagos M1 como tem sido observado em pacientes no estágio tardio, destacando a relevância da intervenção precoce no TB. Ainda, estes pacientes estavam em tratamento com estabilizadores de humor e é plausível especular que esses fármacos exerçam efeitos sobre a polarização de macrófagos. Estudos futuros em pacientes drug-free são essenciais para avaliar esta questão. Em conclusão, nossos achados sugerem que os pacientes TB não apresentam desequilíbrio na polarização dos macrófagos em favor do fenótipo pró-inflamatório M1. O fato de todos estes pacientes estarem em estágios iniciais da doença reforça os efeitos protetores da intervenção precoce no TB na prevenção de alterações do sistema imune e, consequentemente, na progressão da doença. / Innate immune system dysfunction and neuroinflammation have been recognized as important elements in the pathophysiology of bipolar disorder (BD). As essential players of innate immunity, macrophages have multiple roles in inhibition and promotion of cell proliferation and tissue repair. The classical M1 polarization and the M2 alternative polarization of macrophages represent two extremes of a dynamic state in their change of activation. M1 macrophages synthesize proinflammatory cytokines that inhibit the proliferation of surrounding cells and damage tissues, whereas macrophages of the M2 phenotype release antiinflammatory cytokines that may promote tissue repair. An imbalance of the M1-M2 polarization of macrophages is often associated with various diseases or inflammatory conditions. The aim of this thesis was to review the importance of systemic inflammation in modulating the inflammatory response of microglia/ macrophages and consequently their potential involvement in the pathophysiology of BD, and also evaluate the M1/M2 polarization profile in macrophages of patients with BD compared to healthy individuals. Blood monocytes were obtained from ten BD patients and ten healthy controls. These cells were activated/polarized into the M1 (IFNγ + LPS) or M2(IL-4) phenotype. Supernatants were collected and the cytokines (IL-1β, IL-6, IL-10 and TNF-α) were measured by multiplex assay. Secretion of the IL- 1β, TNF-α, IL-6 and IL-10 were similar between patients and controls. The TNF-α/IL- 10 ratio of the M1 phenotype was used to reflect the inflammatory state of the participants. There was no difference between groups (p = 0.627). Two hypotheses could explain these results: all patients included in this study represent an early stage of disease as evidenced by the FAST score below 11. According to the BD staging model, biological changes (including inflammation) appear to be related to mood episodes and disease progression. Together with previous studies, our data suggest that patients in early stages of BD still preserve immune system function without presenting an imbalance in favor of M1 macrophages as has been observed in latestage patients, highlighting the relevance of early intervention. Moreover, these patients were under treatment with mood stabilizers and it is plausible to speculate that these drugs have effects on macrophage polarization. Future studies in drug-free patients are essential to assess this issue. In conclusion, our findings suggest that BD patients do not present imbalance in macrophage polarization in favor of the M1 proinflammatory phenotype. The fact that all these patients are in the early stages of the disease reinforces the protective effects of early intervention in BD to prevent changes in the immune system and, consequently, prevent the progression of the disease.

INTRODUÇÃO O Transtorno Bipolar Pediátrico (TBP) é um transtorno mental grave que afeta o desenvolvimento e o crescimento emocional dos pacientes acometidos. O Fator Neurotrófico Derivado do Cérebro (Brain-Derived Neurotrophic Factor – BDNF) é reconhecido como um dos possíveis marcadores do quadro e de sua evolução. Esta neurotrofina tem reconhecido papel na sobrevivência, diferenciação e crescimento neuronal durante a infância e a idade adulta, atuando em áreas cerebrais envolvidas na patogênese dos transtornos de humor, como a amígdala e o hipocampo. Anormalidades na sinalização do BDNF no hipocampo poderiam explicar o declínio cognitivo visto em pacientes com TB. OBJETIVOS O estudo de possíveis correlações entre BDNF sérico e volume do hipocampo em pacientes com transtorno bipolar pode trazer importantes contribuições para a compreensão da neurobiologia do Transtorno Bipolar (TB). Assim, nosso objetivo com este estudo é avaliar possíveis mudanças no volume do hipocampo em crianças e adolescentes com TB e avaliar sua associação com os níveis séricos do BDNF. Além disso, avaliamos o desempenho de pacientes com TB em tarefas cognitivas relacionadas ao hipocampo e verificamos se houve correlação com os fatores mencionados acima, ou com o tempo de duração da doença. MÉTODOS A amostra incluiu 30 pacientes com idade de sete a dezessete anos, participantes do ProCAB (Programa para Crianças e Adolescentes com Transtorno Bipolar). Processo de avaliação: Pacientes e seus familiares passaram por uma triagem com os critérios do DSM-IV para TB, uma entrevista semi-estruturada, (K-SADS-PL), e finalmente por uma avaliação clínica seguida da aplicação de escalas para mensuração de sintomas de humor. Dos pacientes com diagnóstico confirmado de TB foram coletadas amostras de sangue para avaliação dos níveis do BDNF, e realizada a ressonância magnética do encéfalo. RESULTADOS A média observada (mm3) dos volumes de hipocampo direito e esquerdo foi, respectivamente, de 41910.55 e 41747.96. A média dos valores encontrados de BDNF periférico foi de 19.58pg ⁄ μg proteína, com desvio-padrão de 6,33. Não foram encontradas correlações estatisticamente significativas entre os níveis periféricos de BDNF e volume de hipocampo. Também não foram encontradas correlações significativas entre o desempenho cognitivo e volume de hipocampo, nem entre os demais fatores e duração da doença. CONCLUSÃO Ao contrário do que é observado em estudos de adultos com TB, não foram encontradas correlações entre os níveis periféricos de BDNF e volume de hipocampo. O mesmo ocorreu em relação à memória de trabalho e duração da doença. Acreditamos que a ausência de correlação observada neste estudo se deve ao curto tempo de evolução do TB em crianças e adolescentes. Além de estudos com maiores tamanhos amostrais para confirmar os presentes achados, investigações longitudinais, avaliando o desenvolvimento cerebral tendo um grupo de controles, e incluindo pacientes em diversos estados de humor, virgens de tratamento podem auxiliar no esclarecimento do papel do BDNF nas alterações cerebrais decorrentes do TB. / INTRODUCTION Pediatric Bipolar Disorder (PBD) is a serious mental disorder that affects the development and emotional growth of affected patients. The Brain Derived Neurotrophic Factor (Brain-Derived Neurotrophic Factor - BDNF) is recognized as one of the possible markers of the framework and its evolution. This neurotrophin has recognized role in the survival, differentiation and neuronal growth during childhood and adulthood, acting on brain areas involved in the pathogenesis of mood disorders, such as the amygdala and the hippocampus. Abnormalities in BDNF signaling in the hippocampus could explain the cognitive decline seen in patients with TB. OBJECTIVES The study of possible correlations between serum BDNF and hippocampal volume in patients with bipolar disorder can provide important contributions to the understanding of the neurobiology of Bipolar Disorder (BD).Thus, our aim with this study was to evaluate possible changes in hippocampal volume in children and adolescents with BD, and associate them to serum BDNF. Additionally, we evaluated the performance of cognitive tasks related to the hippocampus and verified if they presented a correlation with the factors mentioned above, or disease duration. METHODS Subjects included 30 patients aged seven to seventeen years from the ProCAB (Program for Children and Adolescents with Bipolar Disorder). Evaluation process: Patients and their families underwent a screening in which are applied the DSM-IV criteria for TB, and a semi-structured interview (K-SADS-PL).Finally, the patients underwent clinical evaluation, followed by the application of scales to measure mood symptoms. Of the patients with confirmed diagnosis of TB blood samples were collected to evaluate the levels of BDNF and performed magnetic resonance imaging. RESULTS We observed mean right and left hippocampal volumes of 41910.55 and 41747.96 mm3, respectively. The mean value found for peripheral BDNF levels was 19.58 pg/μg protein, with a standard deviation of 6.33. No statistically significant correlations between peripheral BDNF levels and hippocampal volumes were found. Also no significant correlations between cognitive performance and hippocampal volume, or between other factors and disease duration were found. CONCLUSION We believe that the lack of correlation observed in this study is due to the short time of evolution of BD in children and adolescents. Besides studies with larger sample sizes to confirm the present findings, longitudinal assessments, addressing brain development versus a control group, and including drug-naive patients in different mood states may help clarify the role of BDNF in the brain changes consequent from BD.

Objetivos: Comparar os níveis séricos de citocinas entre voluntários saudáveis e em pacientes bipolares tipo 1 em mania, depressão e eutimia. Comparar os níveis séricos de quimiocinas entre voluntários saudáveis e pacientes bipolares tipo 1 em eutimia. Metodologia: Sessenta e um pacientes bipolares foram recrutados para a avaliação dos níveis séricos de citocinas. Desses, 24 estavam eutímicos, e 23 e 24 estavam em mania e depressão, respectivamente. Este grupo foi comparado a outro, composto por 25 voluntários saudáveis. As seguintes citocinas foram exainadas através de citometria de fluxo: TNF-alfa, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-gama e comparadas entre os grupos. Além dessa análise, 30 pacientes bipolares tipo 1 foram comparados a igual número de voluntários saudáveis para estudar os níveis séricos das seguintes quimiocinas: CCL2, CCL3, CCL8, CCL 9, CCL10, CCL11 e CCL24, dosadas através de ELISA sandwich. Resultados: Duarnte a mania, as citocinas pró-inflamatórias IL-2, IL-4 e IL-6 estavam elevadas nos pacientes com TB em comparação com o grupo de voluntários saudáveis. Já os pacientes em episódio depressivo, apresentavam somente elevação da IL-6. Não houve modificação dos níveis de citocinas nos pacientes eutímicos, exceto pelo aumento da IL-4. Quanto as quimiocinas, enquanto os níveis séricos de CXCL10 estavam elevados nos pacientes bipolares, os níveis de CCL24 estavam diminuídos. / Objectives: Compare serum levels of cytokines between healthy volunteers and patients with bipolar disorder type 1 in mania, depression and euthymia. Compare serum levels of chemokines between healthy volunteers and bipolar patients in euthymia. Methods: Sixty-one bipolar patients were recruited for assessment of serum cytokine levels. Of these, 14 were in euthymic state, 23 and 24 were in manic and depressive episodes, respectively. A healthy comparison group included 25 healthy volunteers. Cytokines involved in Th1/Th2 balance, such as TNF- , IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN- , were examined by flow cytometry. In addition, serum chemokine levels of 30 euthymic patients with BD type I and 30 healthy volunteers were investigated and compared. The chemokines assessed were CCL2, CCL3, CCL8, CCL 9, CCL10, CCL11, and CCL24. Results: During mania, proinflammatory cytokines, IL-2, IL-4 and IL-6, were increased in comparison with healthy subjects. Patients in depressive episode showed only increased IL-6 levels. There were no significant differences in cytokine levels between patients in remission and healthy subjects, except for IL-4. Regarding chemokines, patients with BD showed significant differences in chemokine levels when compared with healthy subjects. While serum levels of CXCL10 were increased, CCL24 levels were lower in bipolar patients when compared with controls. There was no statistical difference in the serum levels of CCL2, CCL3, CCL24, CXCL9, and CXCL11 between patients and controls.

Orientador : Prof. Dr. Roberto Andreatini / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 24/11/2016 / Inclui referências : f. 52-70 / Área de concentração / Resumo: O Transtorno de Humor Bipolar (THB) é uma desordem psiquiátrica que leva a sérios problemas de saúde para o paciente. Ele é caracterizado por oscilações cíclicas de humor manifestada por diversos sintomas (recorrências de mania, depressão e estados mistos), dificultando o desenvolvimento de um modelo animal adequado. Existem poucos modelos animais para o estudo da mania, sendo a indução do aumento da atividade locomotora pelo uso de substâncias estimulantes do sistema nervoso central (ex. anfetamina (AMP), um dos mais utilizados. Outros modelos já descrito na literatura para indução de mania são através de administrações sistêmicas de lisdexanfetamina (LDX) e quetamina; injeções de ouabaína agudamente via intracerebroventricular (ICV) e pelo modelo não farmacológico de privação de sono, todos esses modelos induzem hiperatividade que é revertida por drogas antimaníacas. Porém, avaliar somente a atividade locomotora nesses modelos já descritos teria suas limitações. As vocalizações ultrassônicas (USV) são emitidas por ratos em situações recompensadoras (ex. acasalamento, abuso de drogas), na frequência de 50-kHz e também em situações aversivas (ex. medo, dor), na frequência de 22-kHz. Foi demonstrado na literatura que animais tratados com AMP, além do aumento da atividade locomotora, esses animais aumentaram também a emissão de USV de 50 kHz e os tratamentos com lítio e tamoxifeno foram capazes de inibir essa vocalização. Sendo assim, nesse trabalho avaliamos as USV em outros modelos animais de mania. No presente estudo, no modelo de mania induzido por LDX, observamos um aumento significativo das USV de 50-kHz, que foram revertidas por tratamento com lítio. Os animais tratados com quetamina não apresentaram aumento significativo nas USV comparado ao seus controles. Quando o modelo de mania foi induzido por ouabaína ICV, observamos um estado misto na emissão das USV. Esses animais apresentaram um aumentos nas USV de 50-kHz e também na emissão das USV de 22-kHz. No modelo de mania induzido por privação de sono, os animais privados de sono por 24 horas (P24) quanto por 72 horas apresentaram um aumento na emissão das USV de 50-kHz. Esse aumento das vocalizações dos animais P24 foi revertida após o tratamento com lítio. Os resultados reportados sugerem que as USV podem ser uma variável de valor comportamental a ser adicionada em modelos animais de mania em ratos, refinando e aprofundando esses modelos e aumentando seus valor translacional. / Abstract: The Bipolar Disease (BD) is a psychiatry disorder that leads to several health problems and have great impact in the patient's life. The BD is characterized by cyclic humor oscillations manifested by several symptoms (manic recurrences, depression and mixed states), making difficult to develop a suitable animal model. There are few animal models to study mania, and the increase of locomotor activity induction by stimulants of the central nervous system, like amphetamine (AMP), is one of the most used. Other mania models already described on literatures are induced by systemic administration of lisdexamfetamine (LDX) and ketamine; injections of ouabain via intracerebroventricular (ICV) and the non pharmacological mania model induced by sleep deprivation, all these models induce hyperactivity and it is reverted by anti-manic drugs. However, to evaluate only the locomotor activity on these models would have some limitations. The ultrasonic vocalization (USV) are emitted by rats in rewarded situation (i.e. mating, drug abuse), on 50-kHz frequency, as well on aversive situation (i.e fear, pain), on 22-kHz frequency. Have been shown in literature that animals treated by AMP, besides the hyperactivity, increased the total number of USV of 50- kHz and treatments by lithium and tamoxifen were able to inhibit the USV. Therefore, in this work we evaluated the USV in other mania animal models. In the present study, on LDX induced model we observed a significant increase on 50-kHz USV, where was reverted by lithium treatment. Animals treated by ketamine did not showed signifcant increse on the number of USV compared to control group. When induced by ouabain ICV, we observed a mixed state on USV emission. These animals showed an increase on 50-kHz USV and also on 22-kHz USV. On mania model induced by sleep deprivation, the animals deprived for 24 hours (P24) and for 72 hours presented and increase on 50-kHz USV. The increase of the USV induced by P24 were reverted by lithium treatment. The results reported suggest that USV can be a valuable behavioral variable to be added in mania animal models in rats, refining and increasing the translational value.