Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-18Bitstream added on 2014-06-13T18:19:58Z : No. of bitstreams: 1 sampaio_ph_me_jabo.pdf: 692117 bytes, checksum: 3c437fb5bb356c636b004d7e3732942b (MD5) / Em bovinos o protozoário Trypanosoma vivax causa enfermidade que pode levar à redução dos índices produtivos ou a morte do animal. O diagnóstico deste protozoário pode ser realizado por testes parasitológicos, sorológicos e moleculares. Entretanto estes testes não são capazes de fornecer prognóstico, indicar a fase da infecção e a responsividade ao tratamento instituído. Por outro lado, o proteinograma sérico pode fornecer tais informações. O objetivo do estudo foi determinar o perfil eletroforético de proteínas de fase aguda de bovinos Girolando naturalmente infectados com T. vivax (NIF), utilizando-se como matriz gel de acrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Foram estudados dois grupos de animais, NIF (n=507) e grupo de bovinos não infectados (NI; n=50). Amostras de soros de ambos os grupos foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e Ensaio de Imunoadsorção Enzimática (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. vivax e realização do fracionamento eletroforético. A porcentagem de soros positivos pela RIFI foi de 89,74% e pelo ELISA 93,09%, sendo que este método mostrou-se capaz de detectar mais amostras positivas do que a RIFI para detecção de anticorpos anti-T. vivax em fases iniciais da infecção. No fracionamento proteico foram consideradas 12 proteínas; sendo elas IgA, ceruloplasmina, proteínas de 95 KDa, 88 KDa, transferrina, albumina, antitripsina, IgG, haptoglobina, glicoproteína ácida e proteínas de 23 KDa e 20,5 KDa. No grupo NIF observou-se aumento de proteína total, IgA, proteína de 88 KDa, albumina, antitripsina, IgG, haptoglobina, 20,5 KDa e diminuição de ceruloplasmina, proteína de 95 KDa e 23 KDa e transferrina. Glicoproteina ácida não apresentou diferença significativa entre os grupos NIF e NI. A antitripsina pode ser utilizada como indicador da... / The protozoan T. vivax can cause an important disease in cattle, which is responsible for death or low index productive. The diagnosis is based on parasitologic, molecular and sorological tests. However, these tests are not able to provide prognostic, infection phase and response of treatment. On the other hand, serum proteinograms can accomplish these features. The present work aimed to assess the acute phase proteins eletrophoretic profile in Girolando cattle naturally infected by T. vivax (NIF) by SDS-Page. For this purpose, two groups of animals were utilized: one naturally infected by T. vivax (NIF; n=507) and another one by noninfected cattle (NI; n=50). Serum samples were submitted to IFA and ELISA for detecting IgG antibody to T. vivax. SDS-Page was only performed in samples which showed positive results in serological testes. The percentage of positive samples by IFA and ELISA were 89,74% and 93,09%, respectively. ELISA showed a higher number of seropositive samples when compared to IFA. In eletrophoretic fractioning 12 proteins were evaluated, including IgA, ceruloplasmin, 95 KDa and 88 KDa proteins, transferrin, albumin, antitrypsin, IgG, haptoglobin, acidic glycoprotein, and 23 KDa and 20,5 KDa proteins. NIF animals showed an increase of serum concentration of IgA, 88 KDa, albumin, antitrypsin, IgG, haptoglobin, 20,5 KDa when compared to NI animals; on the other hand, serum concentration of ceruloplasmin, 95 KDa and 23 KDa proteins, and transferrin were lower in NIF animals when compared to NI animals. Acidic glycoprotein serum concentration did not shown differences when both groups of sampled animais were compared. Since Antitrypsin was only detected in NIF animals, this protein may be used as a marker of T. vivaxinfection in cattle. More studies should be performed aiming to clarify the identity of 95, 88, 23, 20,5 KDa... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-19Bitstream added on 2014-06-13T19:51:39Z : No. of bitstreams: 1 000732128.pdf: 1845052 bytes, checksum: 8a61d1ec584ab68f087995ac86705c8d (MD5) / As leishmanioses são zoonoses que acometem o homem e outras espécies de mamíferos silvestres e domésticos. É uma doença causada por protozoários intracelulares do gênero Leishmania. O agente causador da leishmaniose visceral no Novo Mundo é Leishmania infantum (syn. L. chagasi), sendo Lutzomya longipalpis o principal vetor responsável pela sua transmissão. O gato doméstico também desenvolve a infecção, geralmente de forma assintomática, podendo atuar também como reservatório destes protozoários. Tendo em vista a inespecificidade dos achados clínicos da leishmaniose felina (LF), a ausência de sinais e a semelhança dos aspectos clínicos dessa enfermidade com outras enfermidades em gatos, como a micoplasmose, leucemia felina (FIV) e síndrome da imunodeficiência felina (FeLV), esta zoonose deve ser sistematicamente incluída nas suspeitas clínicas de gatos em áreas endêmicas para leishmanioses canina e humana. Foram utilizadas amostras de sangue de 55 gatos procedentes da Associação Protetora dos Animais (APAISA) de Ilha Solteira, co-habitantes com cães portadores de leishmaniose visceral. À técnica de hemocultura, 16,4% (9/55) dos gatos apresentaram protozoários flagelados. A Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para L. infantum (syn. L. chagasi) foi testada em 51 gatos, revelando 62,7% (32/51) de animais reagentes. Testando-se a técnica de RIFI para Trypanosoma cruzi, 54,9% (28/55) dos animais foram reagentes. Pela busca de anticorpos anti-Leishmania e anti-Trypanosoma, pela técnica de ELISA indireto com antígeno bruto, encontrou-se 72,5% (37/51) e 39,2% (20/55) de animais reagentes, respectivamente. Com o teste de ELISA indireto com rK39 para Leishmania infantum (syn. L.chagasi), obteve-se a positividade em 21,6% (11/51) dos felinos testados. Pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), das 55 amostras de sangue total testadas, cinco (9,1%) foram positivas... / The leishmaniasis are zoonoses that affect humans and other species of wild and domestic mammals. It is a disease caused by intracellular protozoa of the genus Leishmania. Leishmania infantum (syn. L. chagasi) is the causative agent of visceral leishmaniasis in the New World, Lutzomyia longipalpis is the main vector responsible for transmission. The cat, besides living closely with humans, also develops infection, usually asymptomatic and may also act as a reservoir of these protozoa. Given the specificity of clinical feline leishmaniasis (LF), the absence of pathognomonic signs and symptoms, and the similarity of the clinical aspects of this disease with other very common in cats, as mycoplasmosis, feline leukemia virus (FIV) and immunodeficiency syndrome FeLV (Feline), this zoonosis should be systematically considered in the clinical suspicions of cats in of the areas endemic for canine and human leishmaniasis. Samples of blood from 55 cats coming from the Association for the Protection of Animals (APAISA) of Ilha Solteira, co-inhabitants with dogs with visceral leishmaniasis, were collected. The blood culture technique showed 16,4% (9/55) flagellate protozoa. The technique of indirect fluorescent antibody (IFA) for L. infantum (syn. L. chagasi) was tested on 51 cats, showing 62,7% (32/51) of animals reagents. Testing the technique of IFA for Trypanosoma cruzi, 54,9% (28/55) of animals were reactive. The search for anti-Leishmania antibodies and anti-Trypanosoma, the technique of ELISA with crude antigen, we found 72,5% (37/51) and 39,2% (20/55) of animals reagents, respectively. By ELISA with indirect rK39 for Leishmania infantum (syn. L.chagasi) gave a positive result in 21,6% (11/51) of tested cats. For the PCR, the 55 whole blood samples tested, five (9.1%) were positive for Leishmania spp. Confronting all the results obtained with the diagnostic techniques , is possible to determine the ...

Orientador: Simone Baldini Lucheis / Coorientador: Wilma Aparecida Starke Buzetti / Banca: Denise Saraiva Bresciani / Banca: Virginia Bodelão Richini Pereira / Resumo: As leishmanioses são zoonoses que acometem o homem e outras espécies de mamíferos silvestres e domésticos. É uma doença causada por protozoários intracelulares do gênero Leishmania. O agente causador da leishmaniose visceral no Novo Mundo é Leishmania infantum (syn. L. chagasi), sendo Lutzomya longipalpis o principal vetor responsável pela sua transmissão. O gato doméstico também desenvolve a infecção, geralmente de forma assintomática, podendo atuar também como reservatório destes protozoários. Tendo em vista a inespecificidade dos achados clínicos da leishmaniose felina (LF), a ausência de sinais e a semelhança dos aspectos clínicos dessa enfermidade com outras enfermidades em gatos, como a micoplasmose, leucemia felina (FIV) e síndrome da imunodeficiência felina (FeLV), esta zoonose deve ser sistematicamente incluída nas suspeitas clínicas de gatos em áreas endêmicas para leishmanioses canina e humana. Foram utilizadas amostras de sangue de 55 gatos procedentes da Associação Protetora dos Animais (APAISA) de Ilha Solteira, co-habitantes com cães portadores de leishmaniose visceral. À técnica de hemocultura, 16,4% (9/55) dos gatos apresentaram protozoários flagelados. A Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para L. infantum (syn. L. chagasi) foi testada em 51 gatos, revelando 62,7% (32/51) de animais reagentes. Testando-se a técnica de RIFI para Trypanosoma cruzi, 54,9% (28/55) dos animais foram reagentes. Pela busca de anticorpos anti-Leishmania e anti-Trypanosoma, pela técnica de ELISA indireto com antígeno bruto, encontrou-se 72,5% (37/51) e 39,2% (20/55) de animais reagentes, respectivamente. Com o teste de ELISA indireto com rK39 para Leishmania infantum (syn. L.chagasi), obteve-se a positividade em 21,6% (11/51) dos felinos testados. Pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), das 55 amostras de sangue total testadas, cinco (9,1%) foram positivas ... / Abstract: The leishmaniasis are zoonoses that affect humans and other species of wild and domestic mammals. It is a disease caused by intracellular protozoa of the genus Leishmania. Leishmania infantum (syn. L. chagasi) is the causative agent of visceral leishmaniasis in the New World, Lutzomyia longipalpis is the main vector responsible for transmission. The cat, besides living closely with humans, also develops infection, usually asymptomatic and may also act as a reservoir of these protozoa. Given the specificity of clinical feline leishmaniasis (LF), the absence of pathognomonic signs and symptoms, and the similarity of the clinical aspects of this disease with other very common in cats, as mycoplasmosis, feline leukemia virus (FIV) and immunodeficiency syndrome FeLV (Feline), this zoonosis should be systematically considered in the clinical suspicions of cats in of the areas endemic for canine and human leishmaniasis. Samples of blood from 55 cats coming from the Association for the Protection of Animals (APAISA) of Ilha Solteira, co-inhabitants with dogs with visceral leishmaniasis, were collected. The blood culture technique showed 16,4% (9/55) flagellate protozoa. The technique of indirect fluorescent antibody (IFA) for L. infantum (syn. L. chagasi) was tested on 51 cats, showing 62,7% (32/51) of animals reagents. Testing the technique of IFA for Trypanosoma cruzi, 54,9% (28/55) of animals were reactive. The search for anti-Leishmania antibodies and anti-Trypanosoma, the technique of ELISA with crude antigen, we found 72,5% (37/51) and 39,2% (20/55) of animals reagents, respectively. By ELISA with indirect rK39 for Leishmania infantum (syn. L.chagasi) gave a positive result in 21,6% (11/51) of tested cats. For the PCR, the 55 whole blood samples tested, five (9.1%) were positive for Leishmania spp. Confronting all the results obtained with the diagnostic techniques , is possible to determine the ... / Mestre

Orientador: Luiz Sebastião Prigenzi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T15:50:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_CelsoPaulinoda_M.pdf: 5690792 bytes, checksum: 27711e35c9b82250c2cd587269f4097a (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: Considerando níveis de parasistemia e mortalidade, a resistencia e suscetibilidade das raças C3H e C57/BL6 infectados por t. cruzi foram estudados em ralação a cepa y deste parasita. Lotes de camundongos de ambas as raças, foram inoculados respectivamente com 50.000, 5.000 e 500 T. cruzi forma tripomastigota, por via intra peritioneal. A parasitemia foi determinada em diferentes dias de infecção através de amostras de sangue colhidos na estremidade da cauda dos camundongos. A produção de anticorpos específicos anti T cruzi, na fase inicial da infecção, que poderia estar relacionada a resistência e suscetibilidade deste animais foi estudada através de reação de aglutinação e imunoflurescencia. No soro destes camundongos foram também estudados o título e natureza de anticorpos heterófilos. O comportamento do peso do baço, assim como observações histológicas de baço, fígado e coração foram realizadas nestes camundongos. Os resultlados obtidos sugerem que: 1- A resistência de camundongos da raça C57/BL6 é dependente do número de parasitas inoculados. Assim para inóculos de 50.000 T. cruzi estes camundongos são suscetíveis. 2- Quando foram utilizados inóculos de 5.000 e 500 T. cruzi respectivamente, os camundongos da raça C57/BL6 se comportaram como resistentes e os CH3 como suscetíveis. 3- Com todos os inóculos estudados, camundongos da raça C57/BL6 apresentaram níveis de parasistemia mais elevadoas que os da raça C3H ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed the evaluation of the trypanocidal activity of terpinen-4-ol, γ-terpinene and α-terpinene against Trypanosoma evansi in vivo and in vitro. The in vitro assay was performed in culture medium of T. evansi, using three different concentrations of each compound (0.5, 1.0 and 2.0%), individually and in synergism. Motile (live) trypomastigotes were counted using a Neubauer chamber after 1, 3, 6 and 9 hours of incubation. Death of parasites occurred in a concentration-dependent manner, except for α-terpinene that was able to eliminate all parasites after 1 hour of incubation at all concentrations tested. Seventy mice were equally assigned into 10 groups (A to J) for the in vivo tests. Group A served as a negative control (healthy animals); groups B - J were infected with 0.1 mL of blood containing 105 T. evansi trypomastigotes. Group B served as a positive control; groups C, D and E received oral doses of 1.0 mL kg-1 of terpinen-4-ol, γ-terpinene and α-terpinene, respectively. Associations of the three compounds were orally administered to groups F I: terpinen-4-ol + γ-terpinene to group F, terpinen-4-ol + α-terpinene to group G, α-terpinene + γ-terpinene at 1.0 mL kg-1 (0.5 mL kg-1 for each compound) to group H, terpinen-4-ol + γ-terpinene + α-terpinene at 1.0 mL kg-1 (0.335 mL kg-1 of each compound) to group I. A therapeutic dose of diminazene aceturate (single dose of 3.5 mg kg-1, intraperitoneally) was administered to Group J aiming test validation. Animals in group E (treated with α-terpinene) showed an increase of longevity when compared to animals in group B. However, no curative effectiveness was observed, since all animals in this group died during the observation period. In order to evaluate the association between α-terpinene and diminazene aceturate, twenty-eight mice were assigned into 4 groups (A, B, C and D, n = 7). Group A included animals uninfected (negative control); group B was composed by infected animals (positive control); group C consisted of infected animals treated with diminazene aceturate (single dose of 3.5 mg kg-1, im); and group D consisted of infected animals treated with an association of diminazene aceturate (single dose of 3.5 mg kg-1, im) and α-terpinene (1.0 ml kg-1, orally administered for 10 days). It was observed, as a result of this experiment, an increase in the curative effectiveness (57.14%) in group D when compared to group C, which showed only 14.28% of curative effectiveness. Based on these results, α-terpinene was the compound present in M. alternifolia essential oil that showed trypanocidal activity. / O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade tripanocida do terpinen-4-ol, gama-(γ)-terpinen e alfa-(α)-terpinen contra o Trypanosoma evansi in vitro e in vivo. Os testes in vitro foram realizados em meio de cultura contendo T. evansi, utilizando-se três concentrações de cada composto (0.5, 1.0 e 2.0%) de forma individual e em associação. A contagem de tripomastigotas vivas foi realizada em câmara de Neubauer após 1, 3, 6 e 9 horas pós-incubação. A partir dos testes in vitro, foi possível observar a morte dos parasitos de forma concentração-dependente, exceto o composto α-terpinen que foi capaz de eliminar todos os parasitos 1 h pós-incubação em todas as concentrações testadas. Para realização dos ensaios in vivo, primeiramente foram utilizados 70 camundongos divididos em 10 grupos (A ao J), com sete animais cada grupo. O grupo A serviu como controle negativo (animais sadios); grupos de B a J foram infectados com 0,1 mL de sangue contendo 105 tripomastigotas com T. evansi. O grupo B serviu como controle positivo; grupos C, D e E receberam terpinen-4-ol, γ-terpinen e α-terpinen via oral na dose de 1.0 mL kg-1, respectivamente. O grupo F recebeu a associação dos compostos terpinen-4-ol + γ-terpinen, grupo G recebeu a associação dos compostos terpinen-4-ol + α-terpinen; grupo H recebeu a associação do γ-terpinen + α-terpinen via oral na dose de 1.0 mL kg-1 (0.5 mL kg-1 de cada composto). O grupo I recebeu a associação dos compostos terpinen-4-ol + γ-terpinen + α-terpinen via oral na dose de 1.0 mL kg-1 (0.335 mL kg-1 de cada composto). O grupo J foi tratado com aceturato de diminazeno na dose terapêutica (dose única de 3.5 mg kg-1, via intramuscular) para validação do teste. Foi possível verificar que os animais do grupo E (tratados com α-terpinen) apresentaram um aumento da longevidade quando comparados ao grupo B, porém sem eficácia curativa, pois todos os animais deste grupo morreram durante o período de observação da parasitemia. A partir disto, um segundo experimento foi realizado testando a associação entre o α-terpinen e o aceturato de diminazeno. Foram utilizados 28 camundongos divididos em 4 grupos (A, B, C e D; n=7). O grupo A foi formado por animais não infectados (controle negativo), o grupo B foi formado por animais infectados (controle positivo), o grupo C foi formado por animais infectados e tratados com aceturato de diminazeno (dose única de 3.5 mg kg-1, via intramuscular), e o grupo D foi formado por animais infectados e tratados com associação de aceturato de diminazeno (dose única de 3.5 mg kg-1, via intramuscular) mais α-terpinen (1.0 mL kg-1 via oral durante 10 dias). A partir deste resultado, foi possível observar um aumento da eficácia curativa (57.14 %) no grupo D quando comparado ao grupo C, que obteve apenas 14.28 % de eficácia curativa. Baseado nestes resultados, o α-terpinen foi o composto presente no óleo essencial de M. alternifolia que apresentou atividade tripanocida.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study aimed to evaluate the electrophoretic pattern of serum proteins in Trypanosoma evansi-infected cats during different periods of infection. Thirteen adult female non-breeding Felis catus were separated into two groups. Cats from the infected group (n=7) were intraperitoneally inoculated with a strain of T. evansi, and cats from the control group (n=6) received a physiological solution. Blood samples were collected at days 0, 7, 21, and 35 for evaluation total protein and protein fractious by electrophoresis. Albumin (P < 0.01), alpha-2 globulin and gamma globulin (P < 0.05) concentrations were statistically different from the seventh day post-inoculation. Beta globulin levels were increased from day 21 (P < 0.05). Alpha-1 globulin fraction did not statistically differ. These results indicate that the infection by T. evansi in cats alters the serum protein electrophoretic profile. Thus, the increase in γ-globulin fraction is a common finding in infection by T. evansi, caused mainly by increased IgM and IgG. However, the α2-globulin subfraction showed increase throughout the experimental period and, possibly, the proteins of this subfraction are directly involved in host defense against flagellate. Thereby, further studies is essentials to define the true role of each protein fraction in the control of infection. / O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil eletroforético das proteínas séricas de gatos experimentalmente infectados pelo Trypanosoma evansi, em diferentes períodos de infecção. Utilizaram-se 13 felinos (Felis catus) adultos, fêmeas e sem raça definida. Os gatos foram divididos em dois grupos homogêneos, sendo um o grupo controle (seis animais) e o outro o grupo infectado (sete animais). Os sete animais foram inoculados por via intraperitoneal, com um isolado de T. evansi. Nos outros seis animais, foi administrada pela mesma via solução fisiológica. Realizaram-se coletas de sangue nos dias 0, 7, 21 e 35 para avaliação das proteínas totais e fracionamento protéico através da técnica de eletroforese. Observou-se que os valores de albumina (p < 0,01), alfaglobulina 2 e gamaglogulinas (p < 0,05) diferiram significativamente a partir do sétimo dia de infecção e que as betaglobulinas (p < 0,05) apresentaram diferença estatística a partir do 21° dia. Não houve diferença estatística na fração alfaglobulina 1. Pode-se concluir que a infecção pelo T. evansi em gatos acarreta mudanças no perfil eletroforético das proteínas séricas. Assim, o aumento na fração γ-globulina é um achado frequente na infecção pelo T. evansi, causado principalmente pelo aumento da IgM e IgG. Contudo, a subfração α2-globulina apresentou aumento em todo o período experimental e , possivelmente, as proteínas dessa fração estejam diretamente envolvidas na defesa do hospedeiro contra o flagelado. Desse modo, é fundamental que novos estudos sejam realizados para definir o verdadeiro papel de cada proteína dessa fração no controle da infecção.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Trypanosoma evansi is the causative agent of the disease known as Mal das cadeiras or Surra in horses. Has a wide geographical distribution and is commonly found parasitizing several species of domestic and wild animals. Anemia is a common feature and perhaps the most important in infections with T. evansi, however, the mechanisms by which it originates has not been fully elucidated. Considering that iron deficiency may play a crucial role in anemia caused by trypanosomiasis, due to their involvement in hematopoietic, the aim of this study was to evaluate the possible effects of experimental infection with Trypanosoma evansi in Wistar rats on the iron status and of its forms of storage and carting, and also storage in the bone marrow level, establishing a correlation with hematologic findings. To that end, 32 male Wistar rats were divided into four groups, two control groups (C5 and C30) composed by six non-inoculated animals and two test groups (T5 and T30) inoculated with T. evansi, with 10 animals in each group. Blood samples were collected at 5 days post-inoculation (C5 and T5) and 30 days post-inoculation (C30 and T30). Iron status was determined in serum using commercial kits of ferrozine and cromazurol iron, ferritin, transferrin and iron binding capacity. The transferrin saturation index was calculated from the results obtained. The bone marrow was also evaluated for the presence of iron, by the reaction of Pearls. It was observed that the levels of iron, cromazurol iron and total and latent iron binding capacity decreased significantly (P <0.05) at 5 and 30 days pi in animals in the infected group when compared to the control group. Since the levels of transferrin and ferritin increased (P <0.05). The transferrin saturation index increased to 5 days pi, observing the decline of the index at 30 days pi. Infected animals showed a greater tendency to accumulate iron in bone marrow. Infection with T. evansi in rats caused anemia and changes in iron metabolism, as those related to the peaks of parasitemia. These results suggest that changes in iron metabolism may be related to body's immune response to infection and anemic status of infected animals. / O Trypanosoma evansi é o agente etiológico da doença conhecida como Mal das Cadeiras ou Surra em equinos. Apresenta ampla distribuição geográfica e é comumente observado parasitando diversas espécies de animais domésticos e silvestres. A anemia é uma característica comum e talvez a mais importante nas infecções por T. evansi, porém, os mecanismos pelos quais ela se origina ainda não foram completamente elucidados. Considerando-se que deficiência de ferro pode desempenhar um papel crucial na anemia causada pela tripanossomose, devido ao seu envolvimento nos processos hematopoiéticos, o objetivo deste estudo foi avaliar os possíveis efeitos da infecção experimental por Trypanosoma evansi em ratos Wistar sobre o status do ferro e de suas formas de armazenagem e carreamento e, ainda, estocagem em nível de medula óssea, estabelecendo uma correlação com os achados hematológicos. Para isso foram utilizados 32 ratos machos da linhagem Wistar, distribuídos em quatro grupos, sendo dois grupos controle (C5 e C30) compostos de seis animais não inoculados em cada grupo e dois grupos teste (T5 e T30), inoculados com T. evansi, com 10 animais em cada grupo. Amostras de sangue foram coletadas no dia 5 pós-inoculação (C5 e T5) e dia 30 pós-inoculação (C30 e T30). O status do ferro foi determinado em soro, utilizando-se kits comerciais de ferro cromazurol e ferrozine, ferritina, transferrina e capacidade de ligação do ferro. Os índices de saturação da transferrina foram calculados a partir dos resultados obtidos. A medula óssea também foi avaliada, quanto à presença de ferro, através da reação de Pearls. Foi observado que os níveis de ferro, ferro cromazurol e capacidade total e latente de fixação do ferro diminuíram significativamente (P<0,05) aos 5 e 30 dias pi nos animais infectados em relação ao grupo controle. Já os níveis de transferrina e ferritina aumentaram (P<0,05). O índice de saturação da transferrina aumentou aos 5 dias pi, observando-se declínio do índice aos 30 dias pi. Os animais infectados apresentaram tendência a um maior acúmulo de ferro na medula óssea. A infecção por T. evansi em ratos causou anemia e alterações no metabolismo do ferro, estando estas relacionadas aos picos de parasitemia. Estes resultados sugerem que as alterações no metabolismo do ferro podem estar relacionadas à resposta imune do organismo à infecção e ao estado anêmico dos animais parasitados.

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-07. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:51:10Z : No. of bitstreams: 1 000865801_20171231.pdf: 1061346 bytes, checksum: efe45af74713a03a299062d24c3f7820 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-01-02T17:04:40Z: 000865801_20171231.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-01-02T17:05:44Z : No. of bitstreams: 1 000865801.pdf: 3646553 bytes, checksum: e4296295ee6540afe7731bb02d9b4994 (MD5) / A tripanossomíase Americana, mais conhecida por doença de Chagas, é transmitida por triatomíneos infectados pelo agente etiológico Trypanosoma cruzi. Desde que foi descrita pela primeira vez em 1909, a doença tem se expandido pelo mundo infectando milhões de pessoas, principalmente na America Latina, onde ela é endêmica. Atualmente, apenas dois fármacos estão disponiveis para o tratamento, o nifurtimox, que não é usado no Brasil, e o benzonidazol, que teve sua produção industrial bastante reduzida. No entanto, ambos os fármacos tem ações limitadas. Assim, a busca de novas substâncias e a compreensão do mecanismo de resistência aos fármacos tripanossomicidas disponíveis e aos que ainda estão em fase de pesquisa, tem sido motivo de vários estudos. Alguns estudos relatam um aumento na produção de enzimas que atuam na defesa celular, as quais, provavelmente, poderiam ser responsáveis pela resistência do parasito. Algumas enzimas têm funções importantes na sobrevivência e crescimento dos parasitos: superóxido dismutase (SOD), metaloenzima que elimina radicais superóxido ao convertê-los em peróxido de hidrogênio e oxigênio molecular; old yellow enzyme (OYE), uma NADPH flavina oxidoredutase que pode estar envolvida na redução de substâncias tripanossomicidas, e peroxiredoxina (Prx), que catalisa a redução de peróxidos. Por meio de Western blotting analisou-se as modificações em nível de expressão das enzimas SOD, OYE e Prx em cepas de T. cruzi tratadas ou não com um composto derivado benzofuroxânico, LAPDESF-BZFS (6-((metil)benzo[c](2-carbamoilidrazona)-1-Nóxido-1,2,5-oxadiazol). O IC50 (índice de citotoxicidade) desse composto foi de 6,88 µg/mL, e promoveu alterações na expressão das enzimas Prx e OYE, provavelmente promovendo o estresse oxidativo em formas epimastigotas. / The American trypanosomiasis, also known for Chagas disease, and transmitted for infected triatomine by etiological agent Trypanosoma cruzi. Since it was first described in 1909, this disease has expanded the world infecting millions of people, mostly in Latin America, where it is endemic. Currently only two drugs are available for Chagas disease treatment, nifurtimox, which is not used in Brazil, and benznidazole, which had its much reduced industrial production. However, both drugs have limited actions. Thus, the search for new compounds and to understand the mechanism of resistance to trypanocidal drugs available and that are still in the research phase, have been the subject of several studies. Some studies report an increase in the production of enzymes that action in cellular defense, which probably could be responsible for parasite resistance. Some enzymes have important functions in the survival and growth of parasites: superoxide dismutase (SOD), metalloenzyme that eliminates superoxide radicals to convert them hydrogen peroxide and molecular oxygen; old yellow enzyme (OYE) a NADPH- flavin oxidoreductase that may be involved in the reduction of trypanocidal substances and peroxiredoxin (Prx), which catalyzes the reduction of peroxides. By means of Western blotting analyzed for changes in expression level of SOD, Prx and OYE in strains of T. cruzi treated or not with a compound derived benzofuroxânico, LAPDESFBZFS ( 6 - (( methyl) benzo [c ] (2- carbamoilidrazona ) -1 -N-oxide -1,2,5- oxadiazol ). The CI50 (cytotoxicity index) of this compound was 6.88 µg/mL, and promoted changes in the expression of PRX and OYE enzymes, probably by promoting oxidative stress in epimastigotes .

Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Marcos Takashi Obara / Banca: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Resumo: A subfamília Triatominae conta com 18 gêneros e 151 espécies, sendo duas fósseis. As espécies são divididas em cinco tribos: Alberproseniini, Bolboderini, Cavernicolini, Rhodniini e Triatomini sendo essa última tribo agrupada em oito complexos e oito subcomplexos por suas características morfológicas, citogenéticas e moleculares. Triatoma rubrovaria pertence à tribo Triatomini e ao complexo Triatoma infestans e pode ser encontrada no Estado do Rio Grande do Sul (Brasil), Uruguai e em algumas regiões da Argentina. Triatoma rubrovaria possui hábitos rupestres sendo encontrada em buracos e fendas de locais rochosos, onde predominam rochas graníticas ou areníticas. Essa espécie alimenta-se do sangue de mamíferos, dessa maneira mantém o ciclo silvestre de Trypanosoma cruzi. No Rio Grande do Sul Triatoma carcavalloi, Triatoma pintodiasi, Triatoma circumamculata e T. rubrovaria podem compartilhar os mesmos ecótopos e apresentam coloração e algumas características morfológicas semelhantes, o que dificulta a identificação. Diante dessa constatação e servindo-se de estudos moleculares, geomorfométricos e morfométricos foram feitos estudos de seis populações silvestres e de cinco colônias laboratoriais de T. rubrovaria mantidas no Insetário de Triatominae da Faculdade de Ciências Farmacêuticas. Para o estudo de seis populações silvestres e de cinco colônias laboratoriais de T. rubrovaria foram utilizadas sequencias de genes mitocondriais Citocromo b e Citocromo Oxidase I. Também fora... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, the members of the subfamily Triatominae are represented by 18 genera and 151 species, including two fossils. These species are divided into five tribes: Alberproseniini, Bolboderini, Cavernicolini, Rhodniinie Triatomini which are grouped into eight complexes and eight subcomplexes by their morphological, cytogenetic and molecular characteristics. Triatoma rubrovaria belongs to the Triatomine tribe and to the complex Triatoma infestans and can be found in the state of Rio Grande do Sul (Brazil), Uruguay and some regions of Argentina. Triatoma rubrovaria has rupestrian habits, being found in holes and crevices of rocky places that are dominated by granite or sandstone rocks. This species feeds on the blood of mammals, maintaining the sylvatic cycle of Trypanosoma cruzi. In Rio Grande do Sul, Triatoma carcavalloi, Triatoma pintodiasi, Triatoma circumamculata and T. rubrovaria can share the same ecotypes, color patterns and some similar morphological characteristics, which often becomes difficult to differentiate these species. For this purpose, geomorphometric and morphometric studies were carried out using two wild populations and five colonies of T. rubrovaria from the laboratory which are kept in the Insectarium of Triatominae from the Faculty of Pharmaceutical Sciences. The six wild populations and five colonies of T. rubrovaria from the laboratory were used to the study of mitochondrial genes Cytochrome b and Cytochrome Oxidase I sequences. Furthermore, morphometric studies were performed by optical microscopy in order to measure six parameters of the head, length of the chest and abdomen of females and adult males. Through geometric morphometric studies were investigated the head parameters using previously determined reference points. The results obtained by classical morphometric and geometric morphometry methods... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Regina Maria Barretto Cicarelli / Banca: Luis Octávio Regasini / Banca: Claudia Solano Rocha / Resumo: A tripanossomíase Americana, mais conhecida por doença de Chagas, é transmitida por triatomíneos infectados pelo agente etiológico Trypanosoma cruzi. Desde que foi descrita pela primeira vez em 1909, a doença tem se expandido pelo mundo infectando milhões de pessoas, principalmente na America Latina, onde ela é endêmica. Atualmente, apenas dois fármacos estão disponiveis para o tratamento, o nifurtimox, que não é usado no Brasil, e o benzonidazol, que teve sua produção industrial bastante reduzida. No entanto, ambos os fármacos tem ações limitadas. Assim, a busca de novas substâncias e a compreensão do mecanismo de resistência aos fármacos tripanossomicidas disponíveis e aos que ainda estão em fase de pesquisa, tem sido motivo de vários estudos. Alguns estudos relatam um aumento na produção de enzimas que atuam na defesa celular, as quais, provavelmente, poderiam ser responsáveis pela resistência do parasito. Algumas enzimas têm funções importantes na sobrevivência e crescimento dos parasitos: superóxido dismutase (SOD), metaloenzima que elimina radicais superóxido ao convertê-los em peróxido de hidrogênio e oxigênio molecular; old yellow enzyme (OYE), uma NADPH flavina oxidoredutase que pode estar envolvida na redução de substâncias tripanossomicidas, e peroxiredoxina (Prx), que catalisa a redução de peróxidos. Por meio de Western blotting analisou-se as modificações em nível de expressão das enzimas SOD, OYE e Prx em cepas de T. cruzi tratadas ou não com um composto derivado benzofuroxânico, LAPDESF-BZFS (6-((metil)benzo[c](2-carbamoilidrazona)-1-Nóxido-1,2,5-oxadiazol). O IC50 (índice de citotoxicidade) desse composto foi de 6,88 µg/mL, e promoveu alterações na expressão das enzimas Prx e OYE, provavelmente promovendo o estresse oxidativo em formas epimastigotas. / Abstract: The American trypanosomiasis, also known for Chagas disease, and transmitted for infected triatomine by etiological agent Trypanosoma cruzi. Since it was first described in 1909, this disease has expanded the world infecting millions of people, mostly in Latin America, where it is endemic. Currently only two drugs are available for Chagas disease treatment, nifurtimox, which is not used in Brazil, and benznidazole, which had its much reduced industrial production. However, both drugs have limited actions. Thus, the search for new compounds and to understand the mechanism of resistance to trypanocidal drugs available and that are still in the research phase, have been the subject of several studies. Some studies report an increase in the production of enzymes that action in cellular defense, which probably could be responsible for parasite resistance. Some enzymes have important functions in the survival and growth of parasites: superoxide dismutase (SOD), metalloenzyme that eliminates superoxide radicals to convert them hydrogen peroxide and molecular oxygen; old yellow enzyme (OYE) a NADPH- flavin oxidoreductase that may be involved in the reduction of trypanocidal substances and peroxiredoxin (Prx), which catalyzes the reduction of peroxides. By means of Western blotting analyzed for changes in expression level of SOD, Prx and OYE in strains of T. cruzi treated or not with a compound derived benzofuroxânico, LAPDESFBZFS ( 6 - (( methyl) benzo [c ] (2- carbamoilidrazona ) -1 -N-oxide -1,2,5- oxadiazol ). The CI50 (cytotoxicity index) of this compound was 6.88 µg/mL, and promoted changes in the expression of PRX and OYE enzymes, probably by promoting oxidative stress in epimastigotes . / Mestre