Orientador: Antônio Carlos Alessi / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Banca: Maria Cecília Rui Luvizotto / Resumo: Os tumores mamários representam aproximadamente 52%, de todas as neoplasias observadas em cadelas. Lecitinas são proteínas naturais de origem não imune, que se ligam a carboidratos. Por existir um grande número de lecitinas com capacidade de ligação com diferentes carboidratos, esta versátil molécula tem sido utilizada em diversos segmentos da pesquisa biológica. O presente trabalho tem por objetivo investigar, em tecido mamário canino, receptores das lecitinas UEA - Ulex europaeus (carqueja), PNA - Arachis hypogaea (amendoim), HPA - Helix pomatia (caracol romano) e DBA - Dolichos biflorus (faveira) presentes em tecido mamário normal, em neoplasias mamárias e em metástases dessas neoplasias. Para tanto, foram utilizadas 125 amostras de mama, classificadas de acordo com Cassali et al., (2011). Para a quantificação da frequência da marcação foram aleatoriamente selecionados quatro campos por corte e estabelecido um valor para o percentual de células marcadas, utilizando-se objetiva de 40x. Os resultados foram submetidos às análises de variância e à comparação de médias pelo teste de Tukey (p<0,05). Para a lecitina UEA, não foi observada diferença significativa entre nenhum dos tipos histológicos. Para PNA, foi observada menor marcação no carcinoma sólido grau II, que diferiu significativamente dos demais tipos histológicos. Para HPA, observou-se menor marcação do grupo carcinossarcoma, que diferiu significativamente dos demais tipos histológicos. Para DBA, houve menor marcação do carcinoma papilar grau II com relação aos demais tipos histológicos. Na comparação das lecitinas utilizadas no presente estudo, por tipo histológico, não foi observado nenhum padrão. Quanto à formação de glicoconjugados em estruturas celulares (tipo celular e marcação de membrana, citoplasmática ou nuclear), as lecitinas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mammary tumors represent approximately 52% of all malignancies observed in dogs. Lectins are natural proteins of non-immune origin which bind to carbohydrates. Because there is a large number of lectins, with binding affinity for different carbohydrates, this versatile molecule has been used in several segments of biological research. The present study aims to investigate, in canine mammary tissue, lectins receptors UEA - Ulex europaeus (gorse), PNA - Arachis hypogaea (peanut), HPA - Helix pomatia (Roman snail) and DBA - Dolichos biflorus (horse gram) present in normal breast tissue, in breast neoplasms and metastases in these neoplasms. Thus, we used 125 samples of breast, classified according Cassali et al., (2011). To quantify the frequency of marking, four fields per section were randomly selected and a value for the percentage of labeled cells was set, using a 40x objective. The results were submitted to analysis of variance and comparison of means by Tukey test (p <0.05). For lectin UEA, there was no significant difference between any of histological types. For PNA, the lowest marking was observed in solid carcinoma grade II, which differed significantly from other histologic types. For HPA, a lower markup in carcinosarcoma group was observed, which differed significantly from other histological types. For DBA the smaller markup was for grade II papillary carcinoma in relation to other histologic types. Comparison the lectins used in this study for histological type showed no observable pattern. None of lectins had more or less marking in all groups, marking or different histological types between more and less aggressive. Lectins PNA and HPA have shown promise for the diagnostic evaluation of canine mammary neoplasms. The formation of glycoconjugates for PNA varied between different histological types and HPA was... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Maria Lúcia Gomes Lourenço / Banca: Moacir Leomil Neto / Resumo: Tumores mamários expressam a enzima cicloxigenase (Cox-2), que caracteriza um processo inflamatório intenso e pode também demonstrar a presença de alterações paraneoplásicas. Este trabalho teve por objetivo estudar a expressão de Cox-2 em tumores mamários de cadelas e avaliar o efeito do anti-inflamatório firocoxibe sobre a mesma. Os animais selecionados foram divididos em dois grupos: controle (9 animais) e tratado (10 animais). As cadelas foram avaliadas por exame clínico, bioquímica sérica, tamanho, volume, localização e avaliação TNM dos tumores e avaliação da qualidade de vida. O grupo tratado recebeu o firocoxibe na dosagem de 5mg/kg ao dia por sete dias e após este período todos os animais foram novamente avaliados e submetidos à mastectomia. As amostras obtidas nos dois momentos foram avaliadas por exame histológico e imunoistoquímica para expressão de Cox-2. Os resultados mostraram que, embora não tenha havido diferença no tamanho do maior nódulo ou na expressão de COX -2 entre os grupos após o tratamento, o aumento na expressão de COX-2 observado no grupo controle não foi verificado no grupo tratado e que os animais que receberam o tratamento por 7 dias apresentaram diminuição dos níveis de proteínas séricas totais (p=0.00588) e aumento dos níveis séricos de uréia (p=0.01388). Estes resultados sugerem que o uso do firocoxibe como coadjuvante no tratamento de cadelas com neoplasia mamária submetidas à mastectomia pode ser benéfico para deter a evolução da doença, embora seja indicado o acompanhamento dos animais para garantir que não haja sangramento gastrintestinal e que a saúde seja preservada / Abstract: Breast tumors express the enzyme cycloxygenase (COX-2), characterizing an inflammatory process and also demonstrate the presence of paraneoplastic alterations. This experiment aimed to study the expression of Cox-2 in mammary tumors of dogs and to evaluate the effect of anti-inflammatory firocoxib on it. The selected animals were divided into two groups: control (9 animals) and treated (10 animals). The animals were evaluated by clinical examination, serum biochemistry, size, volume, location and TNM evaluation of tumors and assessment of quality of life. The treatment group received firocoxib at dosage of 5mg/kg daily for seven days and after this period all animals were re-evaluated and submitted to mastectomy. The samples obtained at both moments were evaluated by histology and immunohistochemistry for the expression of Cox-2. The results showed that, although there was no difference in size of the largest tumor or in the expression of COX-2 between the groups after treatment, increased expression of COX-2 seen in the control group was not observed in the treated group and that those animals that received firocoxib for 7 days showed decreased levels of total serum protein (p = 0.00588) and increased serum levels of urea (p = 0.01388). These results suggest that the use of firocoxib as adjuvant therapy for dogs with breast cancer submitted to mastectomy can be beneficial to halt the progression of the disease, although monitoring of animals is indicated to ensure there is no gastrointestinal bleeding and health is preserved / Mestre

Orientador: Carlos Roberto Daleck / Coorientador: Andrigo Barboza de Nardi / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Renée Laufer Amorim / Resumo: Nas cadelas, os tumores de mama representam em média 40% de todos os tumores, e sua carcinogênese é atribuída a interação complexa de fatores individuais da paciente. A enzima ciclooxigenase-2 (COX-2) apresenta-se como um marcador potencial para o câncer de mama, uma vez que é expressa em resposta a processos inflamatórios, que frequentemente acompanham as neoplasias e alterando o seu prognóstico. A caspase-3 é foco de estudos relacionados ao mecanismo da apoptose, tornando-se peça-chave no entendimento dos mecanismos de morte celular. O VEGF está envolvido na angiogênese e linfangiogênese, apresentando papel importante na progressão do câncer. O objetivo deste trabalho foi investigar a imunorreatividade da ciclooxigenase-2, do VEGF e da Caspase-3 nas neoplasias mamárias de cadelas, e correlacionar a expressão da COX-2 com o VEGF e com a Caspase-3, nesses tumores. Para a realização deste estudo foram selecionadas 60 amostras de tumores mamários de cadelas e 10 amostras de tecido mamário livre de malignidade que foram divididas em seis grupos compostos por 10 tumores de mesma classificação histológica cada grupo, e um grupo composto por 10 amostras de tecido mamário livre de malignidade. Os grupos foram denominados Adenomas, Carcinomas de prognóstico bom, Carcinomas de prognóstico ruim, Carcinomas primários metastáticos, Metástases pulmonares, Carcinomas inflamatórios e Controle. Os 7 grupos foram agrupados em micro-arranjo tecidual em lâmina de microscopia, e analisados através de imunoistoquímica pela técnica estreptavidina-biotina-peroxidase. A avaliação da intensidade de marcação foi obtida por densitometria com auxílio do programa ImageJ. A intensidade da marcação da Cox-2 foi maior nos casos de metástase pulmonar e fraca nos casos de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In bitches, breast tumors represent an average of 40% from all tumors, and its carcinogenesis is attributed to a complex interaction of individual patient's factors. The enzyme cyclooxygenase-2 (COX-2) is presented as a potential marker for breast cancer, since it is expressed in response to inflammation, which are often associated with neoplasms, changing its prognosis. Caspase-3 has been investigated as a key-protein associated with the mechanism of apoptosis, becoming a key part in understanding the mechanisms of cell death. VEGF is involved in angiogenesis and lymphangiogenesis, presenting important role in cancer progression. The objective of this study was to investigate the immunoreactivity of cyclooxygenase-2, VEGF and Caspase-3 in mammary neoplasms in bitches, and correlate the expression of COX-2 and VEGF and the Caspase-3 in these tumors. For this study we selected 60 samples of bitches's mammary tumors and 10 samples of breast tissue malignancy's free, which were divided into six groups of 10 tumors of the same histological grade of each group and one group of 10 breast tissue samples malignancy's free. The groups were called adenomas, carcinomas good prognosis, carcinomas with poor prognosis, metastatic primary carcinomas, lung metastases, inflammatory carcinomas and Control. The seven groups were grouped into tissue micro-array on a microscope slide, and analyzed by immunohistochemistry technique streptavidin-biotin-peroxidase. The evaluation of the intensity of staining was obtained by densitometry using the program ImageJ. The intensity of COX-2 labeling was higher in cases of pulmonary metastasis and poor in cases of adenoma. In the assessment of marking of Caspase-3, there was a significant correlation between the control and carcinoma with poor prognosis (p <0.001) Furthermore, there was significant difference... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Maria Angélica Dias / Banca: Marcia Ferreira da Rosa Sobreira / Resumo: Tendo em vista a alta incidência das neoplasias mamárias e metástases em cadelas e objetivando contribuir com a oncologia veterinária na padronização de um teste simples, eficaz e acessível no diagnóstico precoce destas metástases, esse estudo teve como meta avaliar o marcador tumoral CA 15.3 no soro de cadelas saudáveis e investigar a viabilidade da quimioluminescência e do kit de reagentes desenvolvido para a espécie humana como ferramenta neste processo. Numa primeira etapa avaliou-se o soro de 100 cadelas saudáveis, de raças e idades variadas. Numa segunda etapa o soro de 10 cadelas saudáveis foi submetido ao processo de concentração de proteínas e posteriormente avaliado. Nas amostras não concentradas os níveis do marcador ficaram abaixo do limiar de detecção do kit. Nas amostras concentradas, o valor médio e respectivo desvio padrão observados foram 0,4140 ± 0,25 U/mL nas amostras com o dobro da concentração inicial e 0,5170 ± 0,25 U/mL nas amostras quatro vezes mais concentradas. Com base nos resultados obtidos neste estudo concluiu-se que o método empregado, ensaio imunoluminométrico por quimioluminescência e o kit de reagentes desenvolvido para a detecção do CA 15.3 na espécie humana mostram-se viáveis para utilização na espécie canina, necessitando entretanto de adequação da técnica / Abstract: Given the high incidence of mammary tumors and metastases in female dogs and trying to contribute with the veterinary oncology in standardization of a simple, effective and affordable technique in the early diagnosis of these metastases, this study was aimed to evaluate the tumor marker CA 15.3 in serum of healthy dogs and to investigate the feasibility and the chemiluminescence reagent kit designed for the human species as a tool in this process. In a first step we evaluated the serum of 100 healthy female dogs of different breeds and ages. In a second step, the serum of 10 healthy female dogs was subjected to the process of proteins concentration and subsequently evaluated. In samples not concentrated, the levels were below the detection of the kit. In concentrated samples, the average value and its standard deviation observed were 0.4140 ± 0.25 U/mL in the samples with at double the initial concentration, and 0.5170 ± 0.25 U/mL in samples four times more concentrated. Based on the results of this study it is concluded that the method employed, chemiluminescent immunoluminometric assay, and the reagents kit designed for detection of the CA 15.3 in humans appear to be viable for use in dogs, however requiring adjustment of the technique / Mestre

Orientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Sabrina dos Santos Costa / Resumo: O mastocitoma é a neoplasia cutânea de maior incidência nos cães e embora existam diversos fatores prognósticos, o comportamento clínico e biológico altamente variável desta neoplasia, faz como que a previsão da evolução e a escolha do melhor tratamento a ser utilizado sejam ainda um desafio. Desta forma, a utilização de técnicas moleculares que avaliam uma grande quantidade de genes envolvidos no processo neoplásico, pode ser uma ferramenta importante na determinação do prognóstico e até mesmo na eleição de genes candidatos a terapia alvo molecular. Uma das formas de se identificar os genes associados ao desenvolvimento ou a progressão tumoral é a investigação das alterações numéricas e estruturais em DNA isolado de células neoplásicas através da técnica de CGHarray (hibridação genômica comparativa baseada em arrays). Este estudo foi delineado com o objetivo de comparar as alterações do número de cópias gênômicas (ganhos/perdas) em mastocitomas cutâneos caninos de animais que sobreviveram um período menor que seis meses (SV<6), com aqueles com sobrevida superior a um ano (SV>12). Para isto foram selecionados 10 cães com mastocitoma cutâneo. A técnica de CGHarray foi utilizada em 4 mastocitomas do grupo SV>12 e em 6 do grupo SV<6. Os DNAs genômicos foram extraídos e os dados de alterações nos números de cópias de DNA foram gerados utilizando-se a plataforma Canine Genome CGH Microarray 4x180. A análise dos dados foi realizada utilizando o programa Nexusversion 5.0. Os resultados mostraram a média de 55,5 alterações no numero de cópias (CNA) nos casos avaliados. Os mastocitomas do grupo SV>12 apresentaram média de CNA de 11,25, enquanto que os tumores do grupo SV<6 apresentaram média de 85,0 CNA. No grupo SV<6 houve 75 genes caracterizados que... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mast cell tumours are the most common cutaneous malignant tumours in the dogs. Although there are several prognostic factors, the clinical and biological behavior of this tumor is highly variable, making the choice of the best treatment to be used, a challenge. Thus, the use of molecular techniques to evaluate a large number of genes involved in the neoplastic process, as it can be a valuable tool in determining prognosis and the election of candidate genes to molecular targeted therapy in the future. One way to identify the genes associated with the development or tumor progression is the investigation of numerical and structural changes in DNA isolated from tumor cells using the technique of CGHarray (comparative genomic hybridization). This study was designed in order to compare changes in the number of gene copies (gains / losses) in canine cutaneous mast cell tumors of animals that survived a period less than six months (SV <6) to those with a higher survival, more than one year (SV> 12). For this, 10 animals were selected. The CGH array technique was used in 4 mast cell tumor from group SV> 12 and six animals from group SV <6. Genomic DNA was extracted and the data for changes in copy number of DNA were generated using the platform Canine Genome CGH Microarray 4x180 (ID-252 552 - Agilent). Data analysis was performed using the Nexus program version 5.0 (Biodiscovery). We were detected an mean of 55.5 changes in copy number (CNA) in the cases evaluated. The group SV> 12 present an average of 11.25 CNA while the SV<6 group present a mean of 85.0 CNA. In group SV <6 there were 75 genes that had characterized gain and 16 genes that showed copy number loss. The group SV> 12 show 24 genes with copy number gain and there were no loss in this group. The mast cell tumors with a worse... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O Papilomavírus Bovino do tipo 1 (BPV-1) causa fibropapilomas em bovinos e sarcóide em equinos, associados à expressão de oncoproteínas virais, principalmente E6 e E7. A purificação de oncoproteínas a partir de sistema recombinante possibilita seu estudo. Os objetivos foram expressar o gene E6 do BPV-1, purificar e analisar in silico a proteína recombinante obtida. O amplificado foi clonado em E. coli e os plasmídeos foram sequenciados, confirmando a matriz correta de leitura. Após indução da expressão, a proteína recombinante foi identificada e purificada. A microscopia eletrônica mostrou a formação de corpúsculos de inclusão. As análises in silico apontaram as mutações das sequências gênica e proteica de E6-1 em relação às depositadas. Foi realizada a predição tridimensional da estrutura da proteína recombinante e identificadas as regiões conservadas, antigênicas e capazes de realizar ligações cátion-<font face=\"Symbol\">p. Logo, a proteína recombinante E6 do BPV-1 foi obtida e purificada com sucesso, possibilitando o início de novos experimentos e estudos mais detalhados. / Bovine Papillomavirus type 1 (BPV-1) causes fibropapillomas in cattle and sarcoid in equines, associated with the expression of viral oncoproteins, E6 and E7 particularly. Purification of oncoproteins from recombinant system allows their study. The aim of this study was cloning and expressing BPV-1 E6 gene, purify and analyze in silico recombinant protein. Amplicon was cloned into E. coli and the plasmids were sequenced to confirm the correct reading frame. After induction of expression, the recombinant protein was identified and purified. Electron microscopy showed the inclusion bodies formation. In silico analysis showed mutations in E6-1 gene and protein sequences when there were compared to sequences available in current database. Three-dimensional structure prediction of the recombinant protein was performed and conserved, antigenic and cation-<font face=\"Symbol\">p interaction regions were identified. Therefore, BPV-1 E6 recombinant protein was obtained and successfully purified enabling new experiments and more detailed studies.

O Papilomavírus bovino (BPV) gera prejuízos à pecuária. O trabalho buscou isolar vírions de BPV de papilomas cutâneos previamente diagnosticados e avaliar o potencial clastogênico do vírus através do ensaio cometa (EC). O DNA tecidual foi extraído e submetido a PCR. As bandas foram purificadas e sequenciadas. As sequências foram analisadas através de bioinformática. A tipagem mostrou a prevalência de BPV-2. A análise histopatológica revelou acantose, coilocitose e hiperqueratose. Foi possível detectar a presença de fibroblastos transformados, sugerindo uma via de infecção através do sangue. A imuno-detecção das proteínas L1 e E7 no estroma sugere atividade transformadora do BPV em fibroblastos. O EC mostrou a ação clastogênica estatisticamente igual entre os tipos virais BPV-2, 5 e 9. O isolamento viral foi realizado através de ultracentrifugação em densidade única de cloreto de césio, empregando uma nova metodologia, que se mostrou menos laboriosa do que as já descritas, permitindo o isolamento de vírions de BPV-2, iniciando o banco de vírus proposto. / The Bovine papillomavirus (BPV) generates losses to livestock. The study sought to isolate BPV virions from cutaneous papillomas previously diagnosed and evaluate the clastogenic potential of the virus through the comet assay (EC). The tissue DNA was extracted and subjected to PCR. The bands were purified and sequenced. Sequences were analyzed using bioinformatics. The typing showed the prevalence of BPV-2. Histopathology showed acanthosis, hyperkeratosis and koilocytosis. It was possible to detect the presence of transformed fibroblasts, suggesting a route of infection through the blood. Immunohistochemical detection of L1 and E7 proteins in the stroma suggests transforming activity of BPV in fibroblasts. The EC clastogenic action showed statistically equal among the virus types BPV-2, 5 and 9. Viral isolation was performed by ultracentrifugation in a single cesium chloride density, using a new method that was less laborious than those already described, allowing the isolation of BPV-2 virions, starting the proposed stock virus.

Thesis--Amsterdam. / Summary in English and Dutch. Includes bibliographical references.

O Papilomavírus bovino (BPV) gera prejuízos à pecuária. O trabalho buscou isolar vírions de BPV de papilomas cutâneos previamente diagnosticados e avaliar o potencial clastogênico do vírus através do ensaio cometa (EC). O DNA tecidual foi extraído e submetido a PCR. As bandas foram purificadas e sequenciadas. As sequências foram analisadas através de bioinformática. A tipagem mostrou a prevalência de BPV-2. A análise histopatológica revelou acantose, coilocitose e hiperqueratose. Foi possível detectar a presença de fibroblastos transformados, sugerindo uma via de infecção através do sangue. A imuno-detecção das proteínas L1 e E7 no estroma sugere atividade transformadora do BPV em fibroblastos. O EC mostrou a ação clastogênica estatisticamente igual entre os tipos virais BPV-2, 5 e 9. O isolamento viral foi realizado através de ultracentrifugação em densidade única de cloreto de césio, empregando uma nova metodologia, que se mostrou menos laboriosa do que as já descritas, permitindo o isolamento de vírions de BPV-2, iniciando o banco de vírus proposto. / The Bovine papillomavirus (BPV) generates losses to livestock. The study sought to isolate BPV virions from cutaneous papillomas previously diagnosed and evaluate the clastogenic potential of the virus through the comet assay (EC). The tissue DNA was extracted and subjected to PCR. The bands were purified and sequenced. Sequences were analyzed using bioinformatics. The typing showed the prevalence of BPV-2. Histopathology showed acanthosis, hyperkeratosis and koilocytosis. It was possible to detect the presence of transformed fibroblasts, suggesting a route of infection through the blood. Immunohistochemical detection of L1 and E7 proteins in the stroma suggests transforming activity of BPV in fibroblasts. The EC clastogenic action showed statistically equal among the virus types BPV-2, 5 and 9. Viral isolation was performed by ultracentrifugation in a single cesium chloride density, using a new method that was less laborious than those already described, allowing the isolation of BPV-2 virions, starting the proposed stock virus.

O mastocitoma (MCT) é um dos tumores mais frequentes em cães, compreendendo de 16 a 21% de todas as neoplasias cutâneas nesta espécie. A graduação histológica é considerada o padrão ouro na avaliação prognóstica dos MCTs, porém seu comportamento biológico variado ressalta a necessidade de métodos complementares para uma avaliação precisa. Atualmente, identifica-se na literatura indexada uma série de estudos propondo novos marcadores moleculares como fatores prognósticos em MCTs caninos, porém poucos estão consolidados na rotina clínica e/ou diagnóstica. Assim, este trabalho teve como objetivo principal investigar o valor prognóstico de marcadores imunohistoquímicos publicados em artigos científicos através de uma revisão sistemática e meta-análise, assim como avaliar o valor prognóstico do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) em MCTs caninos. O processo de revisão sistemática se iniciou com 124 estudos identificados em 5 bases de dados e, após a aplicação dos critérios de inclusão e exclusão, 7 artigos foram selecionados para a meta-análise. Os resultados demonstraram que o marcador de proliferação celular Ki67 pode ser considerado um bom fator prognóstico nos MCTs caninos. Porém, a baixa qualidade dos artigos e a insuficiência de dados publicados impossibilitaram a avaliação de outros marcadores, incluindo o receptor de tirosina quinase KIT. No estudo retrospectivo, a imunoexpressão dos marcadores KIT, Ki67 e VEGF foi avaliada em MCTs cutâneos de 43 cães. O marcador Ki67 apresentou correlação significativa com a taxa de mortalidade e sobrevida e o marcador KIT apresentou diferença significativa de sobrevida entre o padrão membranoso e citoplasmático difuso, porém não foram observadas diferenças no VEGF. Em conclusão, estes estudos validaram os marcadores de proliferação celular Ki67 e o receptor de tirosina quinase KIT como principais fatores prognósticos em MCTs caninos, enquanto o VEGF não foi indicado. Por fim, a revisão sistemática permitiu uma análise crítica da qualidade dos trabalhos publicados na área, ressaltando a importância da padronização de metodologias analíticas e da documentação completa de dados clínicos, patológicos e estatísticos empregados em estudos controlados na oncologia veterinária. / Mast cell tumor (MCT) is one of the most frequent tumors in dogs, accounting for 16 to 21% of all cutaneous tumors in this species. Histological grading is considered the standard evaluation method to access the prognostic of MCTs. However, its varied biological behavior highlights the need of complementary methods for an accurate evaluation. Currently, a number of studies proposing new molecular markers as prognostic factors in canine MCTs is identified in the indexed literature, but few are consolidated in the clinical and/or diagnostic routine. The aim of this study was to investigate the prognostic value of immunohistochemical markers published in scientific articles through a systematic review and meta-analysis, as well as to evaluate the prognostic value of vascular endothelial growth factor (VEGF) in canine MCTs. The systematic review process has started with 124 studies identified in 5 databases and, after applying the inclusion and exclusion criteria, 7 articles were selected for the meta-analysis. The results demonstrated that the cell proliferation marker Ki67 can be considered a good prognostic factor in canine MCTs. However, poor quality of the articles and insufficient published data made it impossible to evaluate other markers, including the tyrosine kinase receptor KIT. In the retrospective study, immunoexpression of KIT, Ki67 and VEGF markers was evaluated in cutaneous MCTs from 43 dogs. The Ki67 marker showed a significant correlation with the mortality and survival rates, and the KIT marker showed a significant difference in survival between the membranous and diffuse cytoplasmic patterns groups, but no differences were observed in VEGF. In conclusion, these studies validated the cell proliferation marker Ki67 and the KIT tyrosine kinase receptor as major prognostic factors in canine MCTs, whereas VEGF was not indicated. Finally, the systematic review allowed a critical analysis of the quality of the published studies in this area, emphasizing the importance of the standardization of analytical methodologies and the complete documentation of clinical, pathological and statistical data used in controlled studies in veterinary oncology.