Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-05-02T17:37:14Z No. of bitstreams: 1 2016_PriscilaRiosTeixeira.pdf: 2158818 bytes, checksum: a6425652b4715500add9537755a9a5a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2016-05-04T14:39:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_PriscilaRiosTeixeira.pdf: 2158818 bytes, checksum: a6425652b4715500add9537755a9a5a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-04T14:39:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_PriscilaRiosTeixeira.pdf: 2158818 bytes, checksum: a6425652b4715500add9537755a9a5a6 (MD5) / O traballho descreve a sintese de nanoparticulas de ouro (np-Au) na presença de estabilizantes poliméricos, a caracterização da estrutura e algumas propriedades. As np-Au foram sintetizadas tanto por método químico, via redução de ácido cloroaurico (HAuCl4) com citrato e na presença do poli liquido iônico, hidrocloreto de poli(1-vinil-3-N-carboximetilimidazólio) (PVAIE), quanto por método fotoquímico, empregando-se luz UV (254 nm), na presença do polímero poli(etileno imina) ramificado (PEI).As soluções coloidais resultantes de np-Au-PVAIE e np-Au-PEI foram caracterizadas por espectroscopia UV-vis, espalhamento de luz dinâmico (DLS) e mobilidade eletroforética, e a morfologia investigada por microscopia eletrônica de transmissão (MET). As np-Au-PVAIE foram posteriormente depositadas em filmes ultrafinos pela técnica de automontagem Layer-by-Layer (LbL) e por meio da voltametria cíclica, os filmes de np-Au-PVAIE depositados sobre eletrodo de ITO são capazes de conduzir a interconversãoferricianetoferrocianeto com taxas de transferência eletrônica maiores que aquelas determinadas com eletrodo de ITO sem filme. Da mesma forma, tais filmes permitem conduzir a oxidação e detecção de cisteína. As amostras de np-Au-PEI sãoformadas também por partículas esféricas. Essas nanopartículas podem ser obtidas sob luz ambiente, apenas pela ação redutora dos fótons de luz incidente. No entanto, nessa condição são necessárias cerca de 5 h de reação. Por outro lado, a luz UV acelera o processo que pode ser concluído num intervalo de 10 minutos. As np-Au-PEI não apresentam toxicidade quando avaliadas em ensaio de viabilidade celular com células de adenocarcinoma da mama humano (MCF - 7, American Type Culture Collection EUA) e células do tecido conjuntivo humano normais. ______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This work describes the synthesis of gold nanoparticles (np-Au) in presence of polymeric stabilizers and characterization of their structure and some properties. The np-Au were synthesized by either chemical method, via reduction of HAuCl4 with citrate in presence of the poly ionic liquid, poly(1-vynil-3-N-carboxymethyl imidazolium) hydrochloride (PVAIE) or by photochemical method, employing UV light (254 nm) in presence of the ramified poly(ethylenimine) (PEI). The structure and morphology of the resulting colloidal solutions of np-Au-PVAIE and np-Au-PEI were investigated by UV-vis absorption spectroscopy, dynamic light scattering and electroforetic mobility, and transmission electron microscopy. The np-Au-PVAIE samples are composed of spherical particles of 12 nm. Even negative, the zeta potential of np-Au-PVAIE is lower than that exhibited by naked np-Au (without polymer) due to ionic pairing of citrate ions with the imidazolium cation of PVAIE. The np-Au-PVAIE were further deposited as ultrathin films via the layer-by-layer technique. The amount of nanoparticles is greater in films deposited with np-Au-PVAEI than that found in films made with naked np-Au. While the films deposited with naked np-Au show significant particle agglomeration, the np-Au-PVAIE remain as individuals in their respective films. By means of cyclic voltammetry, the np-Au-PVAIE films deposited onto ITO electrodes are capable of conducting the ferricyanideferrocyanide interconversion at much higher electron transfer rates. Furthermore, such films allow one to oxidize and detect cystein. The np-Au-PEI samples are also formed by spherical particles with diameters ranging from 35.6 nm to 8.6 nm, which depends on the concentration of PEI. Their colloidal solutions exhibit a positive zeta potential since HAuCl4 protonates PEI amino groups and there is not citrate in the medium. These nanoparticles can be prepared under ambient illumination solely by the reductive action of incident fóton light. Nonetheless, in this condition the reaction takes about 5h to be completed. By the other hand, the UV light shortens the process to about 10 minutes. The np-Au-PEI samples are non-toxic when evaluated in cell viability tests performed with MCF-7 and human connective tissues.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-05T22:48:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Larissa Chaves Costa.pdf: 1912892 bytes, checksum: ca8ed0a252bc273c0b96b2cd3778733e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-05T22:48:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Larissa Chaves Costa.pdf: 1912892 bytes, checksum: ca8ed0a252bc273c0b96b2cd3778733e (MD5) Previous issue date: 2013-02-25 / CAPES / A glutamina é um aminoácido que apresenta, dentre varias funções, uma importante influência nas células do sistema imunológico. Em determinadas situações, a sua síntese não supre a demanda exigida pelo organismo, repercutindo na imunodeficiência. Assim, a suplementação da glutamina vem sendo utilizada para ativar o sistema imune e melhorar a recuperação de pacientes. No entanto, a administração da mesma na sua forma livre pode promover nefropatias, principalmente em pacientes diabéticos. Deste modo, a utilização da glutamina encapsulada em nanosistemas, como os lipossomas convencionais, pode ser uma alternativa para reduzir os possíveis efeitos tóxicos, além de promover uma potencialização na eficácia terapêutica, uma vez que estes lipossomas são reconhecidos e capturados pelas células do sistema imune. Neste contexto, o objetivo do trabalho foi nanoencapsular a glutamina em lipossomas convencionais, desenvolver um método analítico em CLAE para a quantificação da glutamina encapsulada e avaliar a viabilidade dos neutrófilos. As formulações foram preparadas utilizando a técnica de hidratação do filme lipídico seguido de sonicação e caracterizadas segundo pH, tamanho das vesículas, potencial zeta e eficiência de encapsulação, além de avaliação da estabilidade ao armazenamento. Um planejamento fatorial foi realizado com a finalidade de estudar a influência da concentração dos constituintes lipídicos e da glutamina na formulação e assim escolher a preparação ideal. A viabilidade celular foi avaliada por citometria de fluxo, a partir de neutrófilos provenientes de ratos wistar sadios, 2h após administração por via intraperitoneal de glutamina livre (Gln), nanoencapsulada em lipossomas (LG), lipossomas branco (LB) e solução salina como controle (C). A formulação escolhida apresentou tamanho médio de 114,65 ± 1,82 nm com índice de polidispersão de 0,300 ± 0,00 e pH 7,69. O potencial zeta foi positivo (36,30 ± 1,38 mV) e a eficiência de encapsulação foi de 39,49 ± 0,74 %. O método cromatográfico desenvolvido foi eficiente para a quantificação da glutamina encapsulada, obtendo pico no tempo de retenção em torno de 3,8 minutos. Após tratamento, apesar dos neutrófilos permanecerem viáveis em todos os grupos testados, uma maior viabilidade foi observada no grupo tratado com glutamina encapsulada em relação ao grupo controle (20%). Assim, a glutamina encapsulada em lipossomas é capaz de manter os neutrófilos viáveis, tornando-se uma nova e promissora estratégia para aumentar a resposta em situações de imunodeficiência, com possível redução de sua toxicidade. / Glutamine is an amino acid that has, among several functions, an important influence on immune cells. In certain situations, their synthesis does not supply the demand required by the body, resulting in immunodeficiency. Thus, glutamine supplementation has been used to activate the immune system and improve the recovery of patients. However, the administration in its free form can promote kidney disease especially in diabetic patients. In that way, the use of glutamine encapsulated into nanosystems, such as conventional liposomes, may be an alternative to reducing possible toxic effects, and promote a potentiation in therapeutic efficacy, since these liposomes are recognized and captured by the immune system cells. In this context, the goal of this research work was nanoencapsulate glutamine into conventional liposomes, develop an analytical HPLC method for the quantification of encapsulated glutamine and evaluate the viability of neutrophils. Liposomes were prepared using the technique of thin-film hydration followed by sonication and characterized according to pH, size, zeta potential and encapsulation efficiency. The stability of liposomes was evaluated for at least 45 days. An experimental design was performed to study experimental conditions such as the concentration of lipids and glutamine, as well as choose the ideal preparation. Viability of neutrophils, from healthy wistar rats, was assessed, by using a flow cytometer, 2 hours after intraperitoneal administration of free glutamine (Gln), glutamine-loaded liposomes (GL), unloaded-liposome (UL) and saline solution as control (C). The chosen formulation presented a mean diameter of 114.65 ± 1.82 nm with a polydispersion index of 0.30 ± 0.00, and pH 7.69 . The zeta potential was positive (36.30 ± 1.38 mV) and the encapsulation efficiency was 39.49 ± 0.74 %. The chromatographic method developed was efficient for the quantification of encapsulated glutamine, obtaining a peak at retention time around 3.8 minutes. After treatment, although neutrophils remain viable in all groups, greater viability was observed in the group treated with glutamine encapsulated compared with control group (20%). Thus, glutamine encapsulated into liposomes is able to maintain viable neutrophils becoming a new and promising strategy to increase the response in immunodeficiency conditions, with a possible reduction of glutamine toxicity.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-01-18T17:18:13Z No. of bitstreams: 1 2015_DanieleXavierAssad.pdf: 1566424 bytes, checksum: 728a2d112e73fda4777bdd37174e8280 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-04-07T18:04:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_DanieleXavierAssad.pdf: 1566424 bytes, checksum: 728a2d112e73fda4777bdd37174e8280 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-07T18:04:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_DanieleXavierAssad.pdf: 1566424 bytes, checksum: 728a2d112e73fda4777bdd37174e8280 (MD5) / A via de sinalização PI3K/AKT/mTOR está frequentemente ativada nos carcinomas de células escamosas HPV-positivos, nos quais se inclui o câncer escamoso do colo do útero. Assim, esse trabalho propõe-se avaliar os efeitos biológicos dos inibidores do mTOR associados ou não à radioterapia em células de câncer do colo do útero HPV positiva. Foram utilizadas linhagens de células de câncer do colo do útero (HeLa) e queratinócito humano (HaCaT), usada como controle. Os inibidores de mTOR utilizados foram o temsirolimus, o everolimo, o resveratrol, a curcumina e o EGCG. O ensaio de viabilidade celular com o MTT foi realizado para obter a curva dose-resposta e determinação do IC50 para cada inibidor do mTOR. Para efeito de comparação entre os medicamentos, realizou-se análise da viabilidade celular em concentrações fixas de 50µM para os inibidores derivados da dieta e de 10µM para o everolimo e o temsirolimus. O pré-tratamento das células com os inibidores do mTOR no IC50 seguido por radioterapia foi realizado para avaliar efeito de radiossensibilização. O teste de lesão em monocamada foi realizado pós-tratamento com a curcumina e o everolimo. O perfil de morte celular induzido pelo tratamento com o temsirolimus, o resveratrol e a curcumina na linhagem HeLa foi avaliado pelo ensaio de citometria de fluxo. Os resultados mostraram que os inibidores do mTOR rapanálogos na concentração de 10µM e os derivados da dieta na concentração de 50µM induziram citoxicidade leve ou moderada nas 2 linhagens. Quando associados à radioterapia, os inibidores do mTOR apresentaram maior citotoxicidade em relação à radioterapia isolada. A curcumina interferiu no fechamento das feridas com as 2 linhagens de forma mais intensa que o everolimo. Observou-se ainda que o temsirolimus pode levar à apoptose tardia ou necrose após 24h de tratamento na linhagem HeLa. Dessa forma, podemos inferir que os inibidores do mTOR são ativos no tratamento do câncer do colo do útero e em especial associados à radioterapia. / The PI3K/AKT/mTOR signaling pathway is frequently activated in HPV-positive, squamous cell cancers, such as cervical cancer. This study aims to investigate the biological effects of mTOR inhibitors associated or not with radiotherapy in a HPV-positive cervical cancer cell (Hela). A human keratinocytes cells (HaCaT) was used as control. Temsirolimus, everolimus, resveratrol, curcumin and EGCG were the mTOR inhibitors evaluated. The MTT cell viability assay was performed in order to obtain the dose response curves and the IC50 for each mTOR inhibitor. As comparison among the mTOR inhibitors, a cell viability analysis was done in a fixed concentration of 50µM for the diet derived mTOR inhibitors and 10µM for everolimus and temsirolimus. The cells were also pre-treated with the mTOR inhibitors at IC50 followed by radiotherapy to evaluate the radiosensitization. The scratchy assay was performed with curcumin and everolimus. The cell death profile after treatment of HeLa cells with temsirolimus, resveratrol and curcumin was assessed with flow cytometry. The results showed that the rapanalogs in a a fixed concentration of 10 µM and the diet derived mTOR inhibitors in a fixed concentration of 50µM caused mild and moderate citotoxicity in both cell lines. The association of mTOR inhibitors with radiotherapy resulted in more intense citotoxicity than radiotherapy alone. Curcumin interferes more with wound closure than everolimus in both cell lines. After 24h, temsirolimus treatment can cause late apoptosis or necrosis in HeLa cells. Based on these data, mTOR inhibitors are active in thre treatment of cervical cancer, specially in association with radiotherapy.

Submitted by Eduarda Figueiredo (eduarda.ffigueiredo@ufpe.br) on 2015-03-13T12:49:26Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_Final_Heberton Ferreira.pdf: 1985672 bytes, checksum: 7607f426cd267321d8ccb816f6922f36 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T12:49:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_Final_Heberton Ferreira.pdf: 1985672 bytes, checksum: 7607f426cd267321d8ccb816f6922f36 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-07-30 / CAPES / O câncer de laringe é a segunda neoplasia maligna mais comum no trato respiratório. Na fase inicial desta doença, a radioterapia é uma das principais opções de tratamento e cura desses tumores. Submetidos ao mesmo protocolo de tratamento, os pacientes irradiados apresentam efeitos colaterais cujas intensidades variam em função da radiossensibilidade individual. Alguns dos efeitos colaterais comuns da radioterapia de câncer de laringe são: eritema, rouquidão, disfagia e odinofagia. Neste contexto, a existência de testes pré-tratamento para caracterização da sensibilidade individual contribuiria para minimização desses efeitos, bem como para melhoraria da qualidade de vida do paciente. Esta pesquisa analisou a taxa de viabilidade de linfócitos do sangue periférico, após irradiados in vitro, como bioindicador de radiossensibilidade de pacientes encaminhados para radioterapia de câncer de laringe (estadios clínicos T1 e T2), objetivando comparar o percentual de viabilidade celular (VC) pré-tratamento com a intensidade dos efeitos colaterais apresentados por pacientes, pós-tratamento. Para tanto, foram coletadas amostras de sangue periférico de 16 indivíduos portadores de tumores de laringe, as quais foram irradiadas com doses de 2 e 2,5 Gy, a partir de um acelerador linear. Para cada indivíduo, foi mantida uma alíquota não irradiada, como controle. A viabilidade dos linfócitos foi analisada utilizando o corante azul de Tripan. Por outro lado, os diferentes graus dos efeitos colaterais foram avaliados logo após a última sessão de radioterapia, com base nos critérios do Grupo Oncológico de Terapia das Radiações. Os resultados não apresentaram correlação entre percentual de viabilidade celular e eritemas, principalmente devido à falta de controle no uso de substâncias hidratantes receitadas aos pacientes, como o Dersani, que tem efeito radioprotetor. Entretanto, foram encontradas boas correlações entre os percentuais de viabilidade celular e níveis de rouquidão, disfagia e odinofagia a partir da percepção do próprio paciente, provavelmente devido a estreita relação desses efeitos com inflamações e edemas na região da laringe. De forma geral, os resultados sugerem que o método proposto para análise da viabilidade de linfócitos irradiados in vitro auxilia no prognóstico de efeitos colaterais resultantes da radioterapia de pacientes com câncer de laringe, contribuindo na definição de medidas preventivas para minimizar os efeitos adversos do tratamento.

Submitted by Leonardo Freitas (leonardo.hfreitas@ufpe.br) on 2015-04-15T13:09:26Z No. of bitstreams: 2 Dissertação João Ricardo Camaroti.pdf: 1001054 bytes, checksum: a7d1c8398c5b57b1aabd98518b8861d2 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-15T13:09:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação João Ricardo Camaroti.pdf: 1001054 bytes, checksum: a7d1c8398c5b57b1aabd98518b8861d2 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-03-14 / No intuito de analisar o efeito da administração in vitro de substâncias serotoninérgicas (SS) sobre a produção de óxido nítrico (PNO) e a viabilidade celular em macrófagos, foi realizado um estudo experimental com cultura de células da linhagem RAW 264.7, adquiridas no Banco de Células do Rio de Janeiro. As células foram cultivadas em meio de cultura em placas de 24 poços a 37C com 5% de CO2 em ar umidificado. As células foram tratadas com lipopolissacarídeo (LPS de E. coli, sorotipo 055B5) na presença de várias concentrações de SS. As SS incluíram: inibidores seletivos da recaptação da serotonina-ISRS (Fluoxetina-FLX, paroxetina-PRX e escitalopran-ESC); facilitador seletivo da recaptação de serotonina (Tianeptina-TNP); aminoácido precursor da serotonina (Triptofano-TRP); agonista do receptor 5-HT1B (CP-93,129). Após 24 h, o sobrenadante de cultura foi removido para mensuração da concentração de nitrito, um metabólito estável do NO, pela reação de Griess. A seguir, as células foram incubadas por 2h com MTT, a fim de que aquelas viáveis o convertessem em formazam, cuja concentração foi quantificada espectrofotometricamente a 540 nm. As respostas das células estimuladas com LPS e tratadas com as SS foram sempre comparadas as das células não tratadas com SS. A coincubação das células com FLX e PRX a 10-4 M reduziu de maneira drástica a PNO (0% em ambos), acontecimento explicado pela citotoxicidade (98,2% para FLX e 99,2% para PRX). FLX aumentou a PNO a 10-6 (22,53%) e 10-7 M (21,71%). O mesmo foi observado para ESC apenas a 10-4 M (49,9%), apesar de ter havido redução na viabilidade celular nesta concentração (22,6%). PRX reduziu a PNO a 10-5 M (22,98%). Da mesma forma, CP diminuiu a PNO a 10-7 M (22,18%). A administração de TNP não interferiu na PNO. Um aumento na PNO foi observado nas células tratadas com TRF a 10-6 (40,03%) e 10-8 M (33,39%). Este resultado parece ter sido independente do aumento na viabilidade celular (observado a 10-7 M [10%]). A viabilidade das células tratadas com FLX e PRX entre 10-5 e 10-8 M variou de 81 a 92,5% (para FLX) e de 78,8 a 104,6% (para PRX). Este efeito foi inversamente proporcional à dose. Em conclusão, os resultados do presente trabalho indicam que ISRS interferem na PNO por macrófagos de maneira heterogênea, estimulando ou deprimindo dependendo da dose. A redução da PNO por macrófagos parece estar associada ao receptor 5-HT1B. Triptofano apresenta atividade promotora da PNO em macrófagos, contudo não se sabe se por via relacionado ao metabolismo da serotonina.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2653_1.pdf: 3219087 bytes, checksum: e49263700ce90bf224851971f1039607 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A radiossensibilidade celular está diretamente relacionada às falhas no mecanismo de reparo dos danos causados ao DNA. Nesse mecanismo, a molécula considerada como chave é a proteína p53. Neste contexto, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a correlação entre os níveis de expressão da proteína p53 com a radiossensibilidade individual. Para tanto, amostras de sangue periférico de 23 indivíduos sadios foram divididas em alíquotas e, separadamente, irradiadas com doses de 0,5; 1; 2 e 4 Gy. Em seguida, células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) foram obtidas e cultivadas durante 72 horas, tanto na presença quanto na ausência de mitógenos (Fitohemaglutinina PHA e Pokeweed PKW). Em paralelo, a viabilidade celular foi determinada utilizando o corante azul de trypan (0,4%). Os resultados obtidos demonstraram que a expressão da proteína p53 em PBMCs aumenta com a dose absorvida sendo inversamente proporcional à viabilidade celular. O maior índice da expressão de p53 foi observado em culturas estimuladas com PHA durante 72 horas. O aumento na expressão da p53, em resposta à radiação, foi significativamente diferente entre os indivíduos estudados, o que pode ser relacionado a variabilidade na radiossensibilidade individual. Os resultados desse trabalho sugerem estudos adicionais no sentido de correlacionar os níveis de expressão de p53 com efeitos adversos graves em pacientes submetidos à radioterapia

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-05T13:19:57Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Anne Cecília da Cruz.pdf: 1272280 bytes, checksum: 6236134bc2affa7b3416cf930afc5838 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T13:19:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Anne Cecília da Cruz.pdf: 1272280 bytes, checksum: 6236134bc2affa7b3416cf930afc5838 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-08 / A maioria dos fármacos utilizados na quimioterapia do câncer não possui especificidade para as células tumorais, e em geral, são tóxicos aos tecidos de rápida proliferação. Esse é o motivo, pelo qual muitos pacientes submetidos à quimioterapia sofrem com alopecia, estomatite, necrose da mucosa do cólon, anorexia, náuseas e vômitos. Dessa forma, uma preocupação constante dos pesquisadores é encontrar um tratamento eficaz, com o mínimo de efeitos colaterais para curar o câncer. Nesse contexto, este trabalho teve como objetivo a avaliação da atividade anticâncer in vitro e in vivo da nitrofurantoína, um antibiótico, derivado do nitrofurano, comumente prescrito para prevenir e tratar infecções do trato urinário. Para isso, foram realizadas as atividades citotóxicas em células tumorais HT-29, MCF-7, HL-60 e NCI-H292 (através do método do brometo de 3-(4,5-dimetiltizol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio), viabilidade celular através do azul tripan e análise morfológica. A determinação da atividade antitumoral in vivo foi realizada em camundongos albinos suíços (Mus musculus) frente ao Carcinoma de Ehrlich. A nitrofurantoína apresentou efeitos citotóxicos nas linhagens testadas, com CI50 de 72 horas variando de 0,8 a 7,2 μg/mL frente às células HT-29, MCF-7 e NCIH292; e CI50 de 24 horas frente a células tumorais HL-60 no valor de 5,0 μg/mL. No ensaio de viabilidade por azul de tripan a nitrofurantoína reduziu significativamente o número de células viáveis nas concentrações testadas. A redução foi de 62,1% e 52,7% nas concentrações de 10 e 5 μg/mL, respectivamente. A análise morfológica das alterações celulares avaliada pelo método de coloração Hematoxilina/Eosina revelou características típicas de apoptose (membrana íntegra, condensação da cromatina e desintegração do material nuclear) e necrose (picnose e desintegração citoplasmática). A nitrofurantoína não foi capaz de causar hemólise em eritrócitos de camundongos. Em todas as doses testadas a nitrofurantoína inibiu o crescimento tumoral in vivo de forma significativa em relação ao controle. O tratamento com a nitrofurantoína não provocou alteração sobre a maioria a parâmetros hematológicos estudados em camundongos adultos. Os animais tratados com as diferentes doses não apresentaram alteração no índice do baço, mas houve redução significativa nos índices do fígado e do rim em relação ao grupo controle negativo, porém essa redução foi menor que a provocada pela doxorrubicina, fármaco utilizado na clínica para tratar o câncer. Com base nesses resultados foi possível concluir que a nitrofurantoína possuí potencial citotóxico frente às linhagens de células testadas e significante redução do crescimento do carcinoma de Ehrlich in vivo, podendo representar um protótipo para a síntese de análogos contra o câncer.

A procura por novas alternativas terapêuticas, como as que utilizam as plantas medicinais, tem despertado grande interesse da comunidade científica na busca por tratamentos mais eficientes para as doenças causadas por microrganismos patogênicos e terapias mais eficazes contra o câncer. Terminalia fagifolia Mart. et Zucc é uma planta medicinal encontrada no Cerrado brasileiro, usada popularmente no tratamento de aftas e tumores. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana e antioxidante dos extratos brutos etanólicos da casca e das folhas da Terminalia fagifolia, avaliar a atividade citotóxica dos extratos em linhagens celulares normais NIH 3T3 e L929 e em linhagens celulares tumorais PC3 e B16F10. A atividade antibacteriana foi determinada pelo método de difusão em ágar pela técnica dos poços e pela Concentração Inibitória Mínima (CIM). No método de difusão em ágar pela técnica dos poços o extrato da casca da Terminalia fagifolia apresentou melhor atividade antibacteriana do que o extrato das folhas. Na determinação da Concentração Inibitória Mínima, tanto o extrato da casca quanto o extrato das folhas apresentaram CIM de 75 mg/mL, possuindo dessa forma uma boa atividade antimicrobiana, pois nessa concentração inibiram o crescimento de 100% e mais de 90% do inoculo bacteriano, respectivamente. A avaliação da atividade citotóxica foi investigada através do ensaio MTS. Os resultados adquiridos mostraram que os extratos apresentam viabilidade celular para as células normais NIH 3T3 e L929 e citotoxicidade para as células tumorais PC3 e B16F10. Dessa forma, tornase necessária a continuidade dos estudos com essa planta, pois ambos os extratos apresentaram atividades antimicrobianas e antitumorais muito promissoras. / The search for new therapeutic approaches, such as the ones with medicinal plants, has been raising great interest of the scientific community in the search for more effective treatments for diseases caused by pathogenic microorganisms and more effective cancer therapies. Terminalia fagifolia Mart. et Zucc is a medicinal plant found in the Brazilian Cerrado, commonly used in the treatment of cancer sores and tumors. This study aimed to evaluate the antibacterial and antioxidant activity of the rough ethanolic extracts of the barks and leaves of Terminalia fagifolia and assay the cytotoxic activity of the extracts in normal cell lineages NIH 3T3 and L929 and tumor cell lineages PC3 and B16F10. The antibacterial activity was determined by agar diffusion method by well technique and by the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). In the agar diffusion technique the Terminalia fagifolia bark extract showed better antibacterial activity than the extract of the leaves. In the determination of Minimum Inhibitory Concentration, both bark and leave’s extract showed MIC of 75 mg/ml, having thus a good antimicrobial activity, once, in this concentration, they inhibited the growing of bacterial inoculum in 100% and more than 90%, respectively. The evaluation of the cytotoxic activity was investigated by MTS assay. The obtained results showed that the extracts has cell viability for normal cells NHI 3T3 and L929 and cytotoxicity for tumor cells PC3 and B16F10. Thus, it becomes necessary to continue the studies with this plant, once both extracts showed very promising antimicrobial and antitumor activities.

Submitted by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-01-16T17:25:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO THALES ALTOE.pdf: 3213727 bytes, checksum: 96d2b70431eff46b0a70195326e6e2b1 (MD5) / Approved for entry into archive by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-03-04T19:27:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO THALES ALTOE.pdf: 3213727 bytes, checksum: 96d2b70431eff46b0a70195326e6e2b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO THALES ALTOE.pdf: 3213727 bytes, checksum: 96d2b70431eff46b0a70195326e6e2b1 (MD5) Previous issue date: 2014 / Este trabalho descreve a investigação química e biológica do extrato bruto e das partições hexano e acetato de etila, das folhas de Pyrostegia venusta (Ker Gawl.) Miers, popularmente conhecida como “cipó de São João”. P. venusta é classificada botanicamente como uma liana de porte mediano, tendo como característica uma exuberante floração vermelha, e por isso, sendo utilizada como planta ornamental. Essa planta possui uma larga utilização na medicina popular, sendo utilizada no tratamento de vitiligo, diarreia, bronquite, resfriado, icterícia e infecções. Os objetivos deste trabalho foram identificar as classes de metabólitos secundários presentes, avaliar o potencial antioxidante das amostras de P. vesnuta (extrato bruto, frações acetato de etila e hexano), quantificar o teor de flavonoides no extrato bruto, verificar a segurança do uso dessa planta, em termos de viabilidade celular (VC) frente à macrófagos murinos (RAW 264.7) (ensaio de imunotoxicidade). Adicionalmente os resultados de viabilidade celular foram comparados com quatro compostos anti-inflamatórios comerciais (ácido acetilsalicílico, indometacina, betametasona e piroxicam), e testar o extrato bruto quanto à inibição de catepsinas K e V. Os testes de identificação fitoquímica confirmaram a presença de flavonoides, cumarinas e esteroides nas amostras. A metodologia cromatográfica associada à análises por espectrometria de massas, levou a identificação dos compostos: fitol (1), sitosterol (2), estigmasterol (3) e campesterol (4). O extrato bruto demonstrou ter atividade inibitória frente as duas catepsinas testadas (K e V). A fração acetato de etila foi a que apresentou maior atividade antioxidante nas metodologias de inibição do radical DPPH (IC50 38,62 μg/mL) e radical ABTS (IC50 27,58 μg/mL). O teor de flavonoides total para o extrato bruto foi de 148,5±7,65 μg/mg (14,85 % (m/m)), o que justifica a observada atividade antioxidante, já que estes possuem atividade antioxidante. As amostras de P. venusta obtiveram valores de VC maiores do que os anti-inflamatórios comerciais, estes apresentaram VC abaixo do controle negativo, assim como o extrato bruto e a fração acetato de etila, a fração hexano obteve valores acima do controle negativo, sendo estes os maiores resultados de VC entre as amostras de P. venusta. / This paper describes the chemical and biological investigation of the crude extract and the hexane and ethyl acetate partitions, of the leaves of Pyrostegia venusta (Ker Gawl.) Miers, popularly known as "cipó de São João". Pyrostegia venusta is classified botanically as a median size vine, having a characteristically exuberant red flowering and so, being used as an ornamental plant. This plant has a wide use in folk medicine, being used in the treatment of vitiligo, diarrhea, bronchitis, flu, icterus and infections. The objectives of this work were to identify the classes of secondary metabolites present, identify secondary metabolites of this species, evaluate the antioxidant potential of samples of P. venusta (crude extract, ethyl acetate and hexane fractions), to quantify the amount of flavonoids in the crude extract, verify safety use of this plant in terms of cell viability (CV) front of murine macrophages (RAW 264.7) (immuno assay). Additionally, the viability results were compared with four commercial anti-inflammatory compounds (acetylsalicylic acid, indometacin, piroxicam and betamethasone), and test crude extracts for inhibition of cathepsins K and V. The identification tests confirmed the presence of flavonoids, coumarins and steroids in the samples. The chromatographic method associated to mass spectrometry analysis, led to the identification of compounds: phytol (1), sitosterol (2), stigmasterol (3) and campesterol (4). The crude extract had inhibitory activity against both tested cathepsins (K e V). The ethyl acetate fraction showed the highest antioxidant activity in the methodologies of DPPH inhibition (IC50 38.62 mg/mL) and ABTS radical (IC50 27.58 mg/mL). The total flavonoids content in the crude extract was 148.5 ± 7.65 mg / mg (14.85% (w/w)), which explains the observed antioxidant activity, since these have antioxidant activity. Samples of P. venusta had CV values greater than the commercial anti-inflammatory, which showed CV below the negative control, as well as the crude extract and the ethyl acetate fraction, the hexane fraction obtained values above the negative control, being these larger VC results between samples of P. venusta.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1137_1.pdf: 1321687 bytes, checksum: 253b31bf70dd4ec1654c3742e9f3bb37 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A resposta imune inata em processos infecciosos é conhecida por sofrer alterações em decorrência de estados de desnutrição. Assim, o objetivo deste estudo foi de comparar a cinética da produção de óxido nítrico (ON) e a viabilidade de macrófagos alveolares (MA), após infecção celular in vitro, com Staphylococcus aureus meticilina-sensível (MSSA), e meticilina-resistente (MRSA) entre grupos de ratos nutridos (N) ou submetidos à desnutrição neonatal (D). Ratos machos Wistar (n=45) foram divididos em dois grupos distintos, de acordo com a dieta utilizada: N (ratos amamentados por mães submetidas à dieta com 17% de caseína) e D (ratos amamentados por mães submetidas à dieta nutricionalmente deficiente com 8% de caseína). Após o período de amamentação, os animais foram submetidos a um longo período de reposição nutricional, com Labina. Os MA foram coletados através da técnica do lavado broncoalveolar, após traqueostomia. O isolamento dos MA foi realizado por adesão em placas, sendo distribuídos na proporção de 106 células/mL de RPMI. Após o isolamento dos MA, foram estabelecidos quatro sistemas: controle negativo (CN), contendo apenas MA; controle positivo (CP), MA mais 10&#956;L de LPS (lipopolissacarídeo); MSSA, MA mais 100&#956;L de suspensão bacteriana (ATCC 29213) (densidade óptica de 0.15, equivalente a 10-6 CFUmL-1) e MRSA, MA mais 100&#956;L de suspensão bacteriana (ATCC 33591). As placas foram incubadas à 37ºC, com atmosfera úmida e 5% de CO2. A cada duas horas, num total de 24 horas de incubação, foram retirados 100&#956;L do sobrenadante das culturas. A quantificação do ON baseou-se na reação de Griess, através da determinação da concentração de nitritos. A leitura foi realizada em leitor de ELISA, filtro-550nm. A viabilidade dos MA foi analisada após 24 horas de incubação dos sistemas, e avaliada pela redução mitocondrial do 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5- brometo de difenil tetrazólico (MTT) à formazam. A quantificação do formazam solubilizado foi realizada em leitor de ELISA com filtro de 570nm. Utilizou-se teste t- Student e Mann-Whitney, admitindo-se p<0,05. A desnutrição acarretou diminuição do crescimento ponderal dos animais, da liberação de ON nos sobrenadantes das culturas e da viabilidade dos macrófagos. Houve menor produção de ON no MRSA quando comparado com MSSA, entretanto, a partir das 12h, não foi detectada diferença entre os sistemas, permanecendo até 24h. Ao avaliar a viabilidade dos macrófagos entre os sistemas, ocorreu maior redução no MRSA do grupo desnutrido. Pode-se concluir que o modelo de desnutrição neonatal adotado promoveu alteração na função das células fagocitárias, comprometendo o estresse nitrosativo e a viabilidade dos macrófagos alveolares. Além disto, há evidências de diferenças no mecanismo de evasão do sistema imune entre as cepas MSSA e MRSA