The fully developed and functional Drosophila midgut comprises two layers, the visceral mesoderm and the endoderm. The visceral muscle of the midgut is formed by the fusion of founder cells with fusion competent cells to form the muscle syncytia. The specification of these cells and thus the fusion and the formation of the midgut muscle is dependent on the  Receptor tyrosine kinase (RTK) Alk (Loren et al., 2003). The endoderm underlies the visceral muscle and is formed from cells that originate from the anterior and the posterior parts of the embryo. These cells use the visceral mesoderm as a substrate for their migration. Using Alk mutant animals, we have studied endoderm migration during embryonic development. While the initial migration of the endoderm is not affected in the absence of the visceral mesoderm, we observe that the later dorsal-ventral endodermal migration does not take place. The development of the visceral muscle and its dependence on the endoderm is poorly understood.  We have analysed gürtelchen (gurt) mutant animals, originally identified in a genetic screen for mutations affecting visceral muscle formation. Gurt mutants are so named due to their belt-like phenotype of the visceral muscle (gürtelchen is German for belt). Mapping of the genomic locus identified gurt as a mutation in a previously described gene - huckebein (hkb) which is known to have an important function in endoderm development. Gurt (hkb) mutants were used to further study the interaction between the endoderm and the visceral muscle during development. The initial specification of founder cells and fusion competent myoblasts as well as fusion events are unaffected in gurt (hkb) mutants, however, the elongation and stretching of the visceral muscle does not proceed as normal. Moreover, ablation of the visceral mesoderm disrupts endoderm migration, while ablation of the endoderm results in a delayed disruption of visceral muscle formation. Signaling between the two tissues was investigated in detail. Since Alk is a critical player in visceral muscle development, we employed Alk mutant embryos for this task. In addition to the role of Alk in specifying the founder cells and initiating the visceral muscle fusion, we have shown that Alk mediated signaling has a role in the induction of the midgut constriction process by regulating dpp expression in the developing embryonic gut.  Finally, we wished to identify genes in the founder cells/fusion competent myoblasts that might be regulated by Alk. C3G is a gunaine nucleotide exchange factor expressed in the visceral muscle founder cells. Deletion of the Drosophila C3G locus resulted in the generation of null mutants in C3G which are viable, but display decreased longevity, fitness and are semi-lethal. Further analysis of C3G mutants indicated that C3G is essential for normal larval musculature development, in part by regulating integrin localization at muscle attachment sites.

Mestre -- Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Medicina, Rio de Janeiro, 2003.

Made available in DSpace on 2016-05-17T16:51:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-12. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-17T16:54:16Z : No. of bitstreams: 1 000863700.pdf: 3931000 bytes, checksum: 1e9e80714f2702d4fc189cd6a85f0b6e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Visceral leishmaniasis is an important parasitic disease, with worldwide distributions that affects humans and animals. There are reports of brain involvement during the infection; however, its pathogenesis has not been completely elucidated. Therefore, with this study, we aimed the evaluation of the inflammatory response in the brain and the integrity of the blood-brain barrier in naturally infected dogs, and the establishment of an experimental mice model that could allow the evaluation of the infection dynamics, as well as the localization of the parasite and the inflammatory response in vivo. Naturally infected dogs presented a specific chemokine profile in the brain, highly attractive to T-lymphocytes, besides the evident blood-brain barrier disruption, with increased albumin quota and elevated concentrations of anti-Leishmania antibodies in the cerebrospinal fluid. Using molecular techniques and state-of-the-art in vivo imaging tools, we could determine the presence of parasites in the brain of experimentally infected Balb/c mice, as well as its intracranial localization. Brain inflammation, evaluated during four months post-infection, presented two distinct phases, one acute phase in the first fourteen days, and one phase of re-inflammation after three months of infection. Altogether, the data from this study allow us to confirm that the brain is affected during visceral leishmaniasis, and reinforce the fact that the brain involvement has been neglected during visceral leishmaniasis / FAPESP: 2012/23950-1 / FAPESP: 12/10415-0 / FAPESP: 2014/03078-3

Orientador:Caris Maroni Nunes / Co-orientador:David Anthony Orin Courtenay / Banca:Márcia Dalastra Laurenti / Banca:Mary Marcondes / Resumo:As estratégias de controle da leishmaniose visceral (LV) no Brasil estão baseadas no diagnóstico e tratamento precoce de casos humanos, no controle dos vetores, através do uso de inseticidas e na triagem sorológica com posterior eutanásia de cães positivos para leishmaniose. Assim, o diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) deve ser capaz de identificar adequadamente o reservatório canino, garantindo a eficiência desta medida de controle. Considerando-se que a resposta imune humoral desenvolvida por cães à infecção natural por Leishmania spp. é dependente da carga parasitária, o objetivo desta pesquisa foi avaliar se o resultado dos testes diagnósticos atualmente utilizados em inquéritos soro epidemiológicos no Brasil (teste rápido-DPP BioManguinhos® e teste ELISA indireto EIE-ELISA BioManguinhos®) apresentam relação com a carga parasitária do sangue de cães. Para tal foram avaliadas amostras de 610 cães da região noroeste do Estado de São Paulo a qual é endêmica para LV. A positividade variou de 15,9 a 68.4% acordo com as técnicas utilizadas, devido às diferenças na sensibilidade e especificidade dos testes. De modo geral, cães sorologicamente positivos apresentaram carga parasitária média maior que a dos cães negativos. Entretanto, a avaliação do potencial de transmissão dos cães sorologicamente negativos faz-se necessária / Abstract:Visceral leishmaniasis (VL) control strategies in Brazil are based on the early detection and treatment of the patients, vector control by insecticide and the serological screening and euthanasia of positive dogs. Thus, canine visceral leishmaniasis (CVL) diagnosis must accurately identify canine reservoir hosts to ensure the efficiency of screening. Considering that the humoral immune response of dogs to natural Leishmania spp. infection is dependent on parasite load, our aim was to evaluate if outcomes of the diagnostic kits currently used in canine seroepidemiological surveys in Brazil (DPP-BioManguinhos™ rapid test and EIA-ELISA Indirect ELISA BioManguinhos™) could be related to the blood parasite loads in dogs. Six hundred and 10 dogs from the VL endemic region of Northwest São Paulo State were sampled for this evaluation. Positivity varied from 15.9 to 68.4% between diagnostic techniques, due to differences in test sensitivity and specificity. Overall, positive dogs had higher mean parasite loads than negative dogs. Nevertheless, the potential of transmission of the negative dogs shall be investigated / Mestre

Orientador: Maria Jaqueline Mamprim / Banca: Sheila Canavese Rahal / Banca: Raquel Sartor Marcelino / Resumo: O presente estudo teve como objetivo descrever as imagens ultrassonográficas realizadas pelo modo B, dopplerfluxometria dos vasos hepáticos, juntamente com o perfil bioquímico e a analise histopatológica do fígado de cães naturalmente acometidos pela Leishmaniose visceral canina. Foram avaliados 46 cães, naturalmente infectados, com diagnóstico sorológico ou parasitológico positivo para Leishmania spp., oriundos do município de Bauru, São Paulo. Como resultado do exame histopatológico apresentou característica processo inflamatório crônico presente em todos os animais. No ultrassom ecogenicidade do fígado diminuída em 56,5% dos casos e característica espectral das veias hepáticas alterada em 73,9% dos animais. Nos valores quantitativos a velocidade media da veia porta foi de 22,06cm/s, do pico sistólico da artéria hepática foi de 76,8cm/s e o índice de resistividade da artéria hepática 0,65 demonstrando uma correlação positiva entre as duas variáveis. O perfil bioquímico do fígado se mostrou inconclusivo, pois não demonstrou valores relevantes, mesmo os animais com alterações significativas nos exames de ultrassom e histopatológico. Não foram caracterizadas lesões especificas para a leishmaniose visceral canina, porém pode-se confirmar o curso crônico da doença, e que o ultrassom, principalmente o modo Doppler, tem se mostrado precoce na detecção de alterações hepáticas em cães / Abstract: O presente estudo teve como objetivo descrever as imagens ultrassonográficas realizadas pelo modo B, dopplerfluxometria dos vasos hepáticos, juntamente com o perfil bioquímico e a analise histopatológica do fígado de cães naturalmente acometidos pela Leishmaniose visceral canina. Foram avaliados 46 cães, naturalmente infectados, com diagnóstico sorológico ou parasitológico positivo para Leishmania spp., oriundos do município de Bauru, São Paulo. Como resultado do exame histopatológico apresentou característica processo inflamatório crônico presente em todos os animais. No ultrassom ecogenicidade do fígado diminuída em 56,5% dos casos e característica espectral das veias hepáticas alterada em 73,9% dos animais. Nos valores quantitativos a velocidade media da veia porta foi de 22,06cm/s, do pico sistólico da artéria hepática foi de 76,8cm/s e o índice de resistividade da artéria hepática 0,65 demonstrando uma correlação positiva entre as duas variáveis. O perfil bioquímico do fígado se mostrou inconclusivo, pois não demonstrou valores relevantes, mesmo os animais com alterações significativas nos exames de ultrassom e histopatológico. Não foram caracterizadas lesões especificas para a leishmaniose visceral canina, porém pode-se confirmar o curso crônico da doença, e que o ultrassom, principalmente o modo Doppler, tem se mostrado precoce na detecção de alterações hepáticas em cães / Mestre

Orientador: Hélio Langoni / Coorientador: Marcia Almeida Melo / Banca: Rodrigo Costa da Silva / Banca: Virginia Bodelão Richini Pereira / Resumo: A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma zoonose que acomete canídeos, constituindo-se um grave problema de saúde pública, tendo em vista que é o cão a principal fonte de infecção da doença para humanos no ciclo doméstico. A proximidade do cão tem sido referenciada como um importante fator de risco para a doença. É endêmica em diversas regiões do Brasil, incluindo o Estado da Paraíba. Em Campina Grande-PB, no período de dezembro de 2011 a fevereiro de 2012 foi realizado inquérito soroepidemiológico para Leishmania spp. em cães por meio de sorologia e pesquisa do DNA do parasita pela biologia molecular, enfocando a sua distribuição geográfica e correlacionando os fatores de riscos e socioeconômicos. Dos 391 cães estudados, 33% apresentaram resultado positivo para a pesquisa de anticorpos para leishmania spp. na RIFI e 4,34% ao ELISA, e 2% para a pesquisa de DNA do parasita no sangue pela PCR. Houve diferença estatística significante para contactantes (P=0,02) e (OR=4,1). A RIFI com antígeno de L. major, mostrou-se como um bom teste confirmatório, podendo ser utilizado como contra prova do ELISA, que apresentou sensibilidade de 39,4%. A associação entre os dois testes e a co-positividade foi de apenas 52%, necessitando de outra prova confirmatória. Já para a confirmação de negatividade na RIFI, o ELISA foi considerado seguro, apresentando um índice de 96,7%. O uso da PCR de sangue total apresentou baixa sensibilidade e baixa concordância com a RIFI, não sendo indicado como teste primário e mostrou-se eficiente na contra prova. Os estudos mostram que a LVC tem-se adaptado à zona urbana, portanto de forma endêmica, concluindo-se que a diversidade de provas diagnósticas, melhora a detecção de animais positivos, aspecto excelente para o controle da LVC em determinadas áreas, além de evitar a eutanásia de cães falsos positivos / Abstract: The Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is a canidae zoonosis, which infects dogs and other mammals, as humans, becoming a serious public health problem, owing the fact that dogs are the main source infection disease for human on domestic cycle. The closeness to dogs has been referenced as an important disease risk factor. This illness is endemic in several regions from Brazil, including the Paraiba state. In the period of December 2011 to February 2012, in Campina Grande, Paraiba, was conducted a seroepidemiological survey to Leishmania spp. in dogs, through serology study and research from the DNA of the parasite by the molecular biology. This study had a focus on the geographical distribution, correlating the socioeconomic and risk factors. From the 391 studied dogs, 33% showed a positive result to antibodies of Leishmania spp. by IFAT test, 4.34% by ELISA and 2% by PCR with detection of the parasite DNA in the animal blood. There was significant statistical difference to contactants (P = 0.02) and (OR = 4.1). The IFAT with L. major antigen, proved to be a proper confirm test that could be used as counterproof to ELISA test, which presented 39.4% of sensitivity. The combination of these two tests and its co-positivity was only 52%, which required another confirmatory test. However, for the negativity confirmation of IFAT, the ELISA test was considered reliable, with a 96.7% index. The use of PCR with total blood, showed low agreement and sensitivity with IFAT test, therefore not indicated as primary test, however efficient as counterproof. This research shown that CVL has adapted to urban areas, thus as endemic form and it concludes that a variety of diagnostic tests improves the detection of positive animals, becoming an excellent aspect to CVL control in certain areas, besides preventing euthanasia of false positives dogs / Mestre

Orientador: Marcia Aparecida Silva Graminha / Banca: Paulo Inácio da Costa / Banca; Rosangela Zacarias Machado / Resumo: Leishmania spp. são protozoários pertencentes à família Trypanosomatidae e agentes etiológicos das leishmanioses. Estima-se que estão em risco de contrair leishmanioses 350 milhões de pessoas em 98 países em diferentes continentes. Dentre as manifestações clínicas existentes, leishmaniose cutânea, mucocutânea e visceral, esta última é a mais severa e apresenta o maior número de óbitos. A Leishmania infantum é o agente causador da leishmaniose visceral nas Américas, na China e na bacia do Mediterrâneo, apresentando o cão como reservatório de importância epidemiológica. A Leishmania é um modelo experimental biológico que vem sendo explorado por vários pesquisadores ao redor do mundo, e isso tem proporcionado estudos por meio de tecnologias genômicas, proteômicas e metabolômicas. Muitas das sequências estudadas dentro desse grupo de parasitos são conservadas e são gênero ou, até mesmo, espécie específicas e têm sido utilizadas para diagnósticos moleculares. Para esse último são requeridos testes de alta sensibilidade e especificidade. De modo a proporcionar maior sensibilidade aos testes, novas ferramentas baseadas em métodos moleculares estão sendo desenvolvidas. Dentro desse contexto, este estudo visa avaliar a aplicação de um gene específico para L. infantum, denominado TGMACK na utilização em diagnóstico molecular de leishmaniose visceral canina, por meio de técnicas de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) convencional e em tempo real. Este trabalho revelou que o gene em est... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Leishmania spp. are protozoa belonging to the family Trypanosomatidae and etiological agents of leishmaniasis. It is estimated that 350 million people are at risk of contracting leishmaniasis in 98 countries on different continents. Among the existing clinical manifestations, cutaneous, mucocutaneous and visceral leishmaniasis, the latter is the most severe and presents the highest number of deaths. Leishmania infantum is the causative agent of visceral leishmaniasis in the Americas, China and the Mediterranean Basin, presents the dog as a reservoir of epidemiological importance. Leishmania is an experimental biological model that has been explored by several researchers around the world, and this is an example for the genome, proteomics and metabolomics technologies. Many of the sequences studied within the parasite group are conserved and are genus or even specific species and have been difficult for molecular diagnostics. For the latter, tests of high sensitivity and specificity are required. In order to provide more information on testing, new tools based on molecular methods are being developed. In the context, this study aims to evaluate an application of a specific gene for L. infantum, denominated TGMACK in the use in molecular diagnosis of canine / human visceral leishmaniasis, by means of PCR (Polymerase Chain Reaction) techniques. This work revealed that the gene under study is specific especies for the L. infantum, and there is no cross-reaction with other parasit... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Raul Borges Guimarães / Banca: José Eduardo Tolezano / Banca: Vamilton Alvares Santarem / Banca: Samuel do Carmo Lima / Banca: Eduardo Augusto Werneck Ribeiro / Resumo: A questão central desenvolvida na presente tese é uma abordagem integrada de elementos que envolvem as ações de vigilância e o controle da leishmaniose visceral (LV), relacionando dados e análise do mundo microbiológico ao conjunto de informações espaciais existentes sobre o tema. Teve como principal objetivo, avaliar a distribuição espacial dos casos humanos com LV notificados e relacioná-los com a infecção na população canina nos municípios pertencentes à Rede Regional de Atenção à Saúde - RRAS 11 de Presidente Prudente - SP e as rotas de dispersão do agente patógeno. Para isto, foram utilizados conhecimentos geoepidemiológicos e de ferramentas de geoprocessamento e análise espacial para analisar as rotas de disseminação dos agentes e da infecção da doença na população canina na área urbana e rural. O estudo foi desenvolvido nos 45 municípios da macrorregião de Presidente Prudente - SP, com base populacional, no delineamento transversal e na coleta de dados in locu. Para entender o contexto da área foi realizado: levantamento de dados secundários, que constitui a criação de bases cartográficas que tenham sido elencadas como explicativas do fenômeno estudado (LV), com base na bibliografia sobre o tema; identificação das espécies de Leishmania circulantes na população canina, discutindo-se fatores de risco individuais para soropositividade de Leishmania em cães em áreas urbanas e rurais, bem como avaliando a prevalência de LV canina em assentamentos rurais da Região de Saúde ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The central issue developed in this thesis is an integrated approach of elements that involve actions of surveillance and controlling of the visceral leishmaniasis (VL), relating data and analysis of the microbiological world to the set of spatial information on this subject. The main objective was to evaluate the spatial distribution of human cases with reported VL and to relate them to infection in the canine population in the municipalities belonging to the Regional Network of Health Care - RRAS 11 of Presidente Prudente - SP and the pathogen's routes of dispersion. Geoepidemiological knowledge, geoprocessing tools and spatial analysis were used to analyze the agents' routes of dissemination and the disease's infection in the canine population in urban and rural areas. The study was carried out in the 45 municipalities of macroregion of Presidente Prudente - SP, with population base, in the cross - sectional design and in locu data collection. To understand the context of the area, were carried out: secondary data collection, for the creation of cartographic bases that have been listed as explanatory of the phenomenon studied (VL), based on the bibliography on the subject; identification of the circulating Leishmania species in the canine population, discussing individual risk factors for Leishmania seropositivity in dogs in urban and rural areas, as well as evaluating the prevalence of canine VL in rural settlements of the Health Region of Presidente Prudente - SP. Areas ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-07-11T13:41:05Z No. of bitstreams: 1 Tese final_Jairo Torres_.pdf: 2470015 bytes, checksum: b0fd537776a686c0b25469acbe65ef15 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2016-07-13T01:15:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese final_Jairo Torres_.pdf: 2470015 bytes, checksum: b0fd537776a686c0b25469acbe65ef15 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T01:15:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese final_Jairo Torres_.pdf: 2470015 bytes, checksum: b0fd537776a686c0b25469acbe65ef15 (MD5) / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado da Bahia (FAPESB) / Leishmaniose Visceral é uma zoonose causada pelo protozoário Leishmania infantum e transmitida pelo flebotomíneo Lutzomyia longipalpis. O controle da doença é bastante complexo, sendo que atualmente sugere-se a necessidade de redirecionamento nas medidas de controle, sobretudo no que se refere à identificação de cães verdadeiramente transmissores e à necessidade de um refinamento no controle vetorial. Neste trabalho foi avaliada a infectividade de cães naturalmente infectados com L. infantum para a L. longipalpis, bem como a capacidade atrativa de diferentes compostos orgânicos voláteis para o mesmo vetor. A partir de testes xenodiagnósticos, foi observado que cães com maior manifestação de sinais clínicos são mais infectivos ao vetor que cães com pouco ou nenhum sinal clínico, entretanto não houve diferença na taxa de transmissibilidade quando diferentes protocolos de xenodiagnóstico foram confrontados. Sendo que, para cães infectados com L. infantum e agrupados conforme a presença de anormalidades clínicas e patológicas, a taxa de infectividade nos flebotomíneos foi significativamente menor (p=0,0098) , quando estes se alimentaram de cães com doença moderada (0,01%), comparativamente aos cães com doença severa (38,2%).Demonstrou-se também que machos e fêmeas de L. longipalpis são atraídos por compostos aldeídos e alcanos (octanal, decanal e heptadecano) identificados no pelo canino e álcoois (heptanol, octanol, octenol e nonanol) encontrados em plantas. Esses compostos químicos podem ser utilizados como iscas em armadilhas para captura dos insetos ou ainda associados com inseticidas de efeito residual. Mais estudos são necessários sobre a biologia e comportamento da L. longipalpis e sua relação com cães infectados com L. infantum, buscando melhor entender essa interface e identificar novas alternativas de controle para a leishmaniose visceral. / Visceral leishmaniasis is a zoonosis caused by the protozoan Leishmania infantum and transmitted by the phlebotominae sand fly Lutzomyia longipalpis. The control of the disease is quite complex, being suggested presently the necessity to redirect the control measures, especially concerning the identification of dogs truly transmitters and the necessity of a refinement of the vector control. This work was evaluated the infectivity of dogs naturally infected with L. infantum to L. longipalpis as well as the attractive ability of different volatile organic compounds to same vector. It was observed, by xenodiagnosis, that dogs with higher manifestation of clinical signs are more infective to the vector that dogs with few or no clinical signs, however there was no difference in the transmission rate when different xenodiagnosis methodologies were compared. Therefore for dogs infected with L. infantum and grouped according to presence of clinical and pathological abnormalities in the infectivity rate sandflies was significantly lower (p = 0.0098), when these were fed dogs with moderate disease (0, 01%) compared to dogs with severe disease (38.2%). It was also demonstrated that males and females of L. longipalpis are attracted by aldehyde and alkane (octanal, decanal and heptadecane) compounds identified on the canine hair and alcohols found in plants (octenol, octanol, heptanol and nonanol). These chemical compounds can be used as bait in traps to capture insects and even be associated with insecticides with residual effect. More studies are necessary about the biology and behavior of L. longipalpis and its relationship to dogs infected with L. infantum, searching to better understand this interface and identify new alternatives to control visceral leishmaniasis.

Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-07-11T10:46:54Z No. of bitstreams: 1 Dissert Paulo Bahiano.pdf: 1519247 bytes, checksum: 513f19cb7ab4130f97005a3280f2ff7b (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2016-07-13T01:17:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissert Paulo Bahiano.pdf: 1519247 bytes, checksum: 513f19cb7ab4130f97005a3280f2ff7b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T01:17:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert Paulo Bahiano.pdf: 1519247 bytes, checksum: 513f19cb7ab4130f97005a3280f2ff7b (MD5) / Programa de Demanda Social (CAPES) / No presente estudo, é descrita a padronização da técnica de imunoensaio enzimático (ELISA) para o sorodiagnóstico da infecção causada por Leishmania em canídeos silvestres brasileiros. Na América do Sul, a leishmaniose visceral (LV) é causada pela L. chagasi, sendo alguns canídeos considerados reservatórios naturais do parasito. A resposta imunológica à Leishmania é pouco estudada nos canídeos silvestres, que parecem apresentar resistência natural ao parasito. Foram estudadas amostras de soro/plasma obtidas de 12 canídeos cativos: sete lobos-guará (Chrysocyon brachyurus), três raposinhas (Lycalopex vetulus) e dois cachorros-do-mato (Cerdocyon thous). Dentre os canídeos estudados, um C. brachyurus e uma L. vetulus cativos em área endêmica para a LV, apresentavam em seu histórico clínico positividade na IFI e na técnica de PCR em aspirados de medula óssea para Leishmania sp. Foram então realizados diferentes ensaios imunoenzimáticos com o conjugado anti-IgG de cão e proteína A, que detectaram quatro (04/12) e três (03/12) C. brachyurus soropositivos para Leishmania sp. no ELISA com os respectivos conjugados. Os testes foram capazes de distinguir claramente as amostras positivas das negativas, uma vez que a média das densidades ópticas (DOs) das amostras negativas foram 4,8 vezes mais baixa do que a média das DOs dos positivos no ensaio com o conjugado anti-IgG de cão e 15,5 vezes nos testes com a proteína A. No Western Blot foi detectado um total de 22 bandas, com destaque para as de peso molecular 19, 22, 24, 45 e 66 kDa, presentes nas amostras de três C. brachyurus com soropositividade no ELISA indireto. Entretanto, as bandas 212, 32 e 23 kDa foram constatadas somente nos dois C. brachyurus com maiores valores de DOs. Os testes ELISA com a proteína A e o conjugado anti-IgG de cão apresentaram uma concordância excelente (Kappa = 1 p. 0,001) e moderada com o Western Blot respectivamente. O ensaio com a proteína A mostrou ser adequado a testes sorológicos de triagem, mas o ideal ainda seria o desenvolvimento de conjugados com anticorpos espécie-específico para padronização de ELISA indireto para as diferentes espécies silvestres. / In the present study, the standardization of an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the serodiagnosis of infection by Leishmania in brazillian species of wild canids is described. In South America, visceral leishmaniosis (VL) is caused by L. chagasi, being some wild canids considered natural reservoirs of the parasite. The immunological response to Leishmania is not studied enough in the wild canids, which seem to show natural resistance to the parasite. Samples of serum/plasma from 12 captive wild canids were studied: seven maned wolves (Chrysocyon brachyurus), three hoary foxes (Lycalopex vetulus) and two crabeating foxes (Cerdocyon thous). Among the canines studied, a C. brachyurus and L. vetulus captives in an area endemic for VL, presented in their clinical history a positivity in Indirect Immunofluorescence Reaction, RIFI, and Polymerase Chain Reaction, PCR, in bone marrow aspirates for Leishmania sp. Were then performed with different immunoassays conjugated anti-dog IgG and protein A, which detected four (04/12) and three (03/12) C. brachyurus seropositive for Leishmania sp. by ELISA with their conjugates respectively. The tests were able to clearly distinguish the negative and positive samples, as the mean optical density (OD) of the negative samples was 4.8 times lower than those of the average of the positive in test with anti-IgG conjugate dogs and 15.5 times in the tests with protein A. Western blot was detected in a total of 22 bands, especially those of molecular weight 19, 22, 24, 45 and 66 kDa present in the samples of three C. brachyurus with seropositivity in ELISA. However, bands 212, 32 and 23 kDa were observed in only two C. brachyurus with higher values of OD.. The ELISA with protein A and conjugated anti-dog IgG showed excellent agreement (Kappa = 1 p. 0.001) and moderate (Kappa = 0,8 p. 0,0015) with the Western Blot respectively.. Even though the test with protein A has shown adequate to screening tests, the ideal would be the development of conjugates with species-specific antibodies for the standardization of indirect ELISA for different wild species.