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Caracterização histoquimica de folhas de mentas infectadas por Puccinia menthae e Erysiphe biocellataConceição, Danila Monte [UNESP] 30 September 2009 (has links) (PDF)
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conceicao_dm_me_botfca.pdf: 648319 bytes, checksum: 402d279e48ec4dd5e8449a08fd3d9141 (MD5) / Outra / O objetivo do trabalho foi analisar, de forma comparativa, os efeitos dos fungos Puccinia menthae e Erysiphe biocellata na anatomia e histoquímica de Mentha spicata, Mentha piperita, Mentha suaveloens e Mentha arvensis, verificar o efeito de óleos essenciais de plantas medicinais sobre os fungos e constatá-los como fontes de controle alternativo e averiguar prováveis fatores de resistência às doenças presentes na estrutura anatômica e histoquímica. As plantas foram inoculadas com os esporos dos fungos na face abaxial de suas folhas e submetidas às condições adequadas ao desenvolvimento do patógeno. Após 10 a 15 dias da inoculação, folhas doentes e sadias foram submetidas às análises anatômicas e histoquímicas. Os reagentes empregados para evidenciar as substâncias apolares foram: sudan III para lipídios totais; sulfato azul do nilo para diferenciação de lipídios ácidos e neutros; reagente de NADI para identificação de óleos essenciais e oleoresinas; tricloreto de antimônio para identificação de esteróides e ácido sulfúrico para a identificação de lactonas sesquiterpênicas e para substâncias polares: vanilina clorídrica para a identificação de taninos; lugol para a identificação de amido; e azul brilhante de comassie para identificar proteínas totais. Os testes ‘in vitro’ constaram de óleos essenciais de Cymbopogan martini, Corymbia citriodora, Syzygium aromaticum e Citrus limonum nas concentrações 0; 0,01; 0,02; 0,03 e 0,04%, além do padrão químico, sobre esporos dos dois patógenos em 4 repetições. Os óleos essenciais foram homogeneizados em meio de cultura ágar-água com Tween 80 e vertidos em placas de Petri. Após a solidificação do meio os esporos foram inoculados e depois de 24 horas contados de 50 esporos germinados. O estudo anatômico das folhas infectadas por P.menthae revelou desestruturação da cutícula, colonização... / The objective of the study was to analyse, compared the effects of E. biocellata and P. menthae in the anatomy and in the histochemistry of the mentha species M. spicata, M. piperita, M. suavelones e M. arvensis, to verify the effects of essential oils on the fungi spores as sources of alternative control and to investigate possibles resistance factors present in the anatomy and in the histochemistry. The plants were inoculated with the fungi spores in the lower face of the leaf, they were submitted to appropriate conditions for the development of the pathogen. After 10 to 15 days of inoculation, the infected and health leaves were submitted to the anatomic cuts and histochemistry study. The employed reagents to evidence the apolar substances were: sudan III for identify total lipids, blue nilo sulfate for acid and neutral lipids, NADI reagent to identify resins and essential oils, antimony trichloride, to identify steroids and sulphuric acid/glycerine to identify sesquiterpenes lactones. For polar substances were used: vanillin hydrochloric, for identify tannins, lugol, to identify starches and comassie bright blue to identify proteins. The in vitro tests consisted in four treatments of essential oils of Cymbopogan martini, Corymbia citriodora, Syzygium aromaticum and Citrus limonum in concentrations of: 0%; 0,01%; 0,02%; 0,03% and 0,04%, chemical pattern, in 4 repetition. The essential oils were homogenized in agar-water medium with tween 80 and flowed in Petri plates. After the medium solidification, the spores were inoculated in the medium, by passed 24 hours, the germinated spores were counted. The anatomic study of health menthas, when compared with infected species, with P. menthae resulted in cuticule disrupting and tissue colonization, similar in all species. For E. biocellata there were no disruting of the tissues or visible anatomic changes. The histochemistry study identified... (Complete abstract click electronic access below)
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Caracterização epidemiológica e manejo da podridão pós-colheita por Aspergillus em uva de mesaDAMBRÓS, Daniela 27 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The grapevine is one of the oldest plants cultivated by human and has significant social and economic importance worldwide. The Submedio San Francisco Valley has a key role in the production and export of the grape, however, the culture has a high susceptibility to postharvest fungal infections generating significant losses from cultivation to marketing. Aspergillus niger is a common fungal species in the region today, especially when harvesting occurs during rainy periods. In general, there is darkening and softening of the berries, in the fruit storage period, resulting in depreciation of the commercial value of the grape. There is a strong need to explore alternative measures in the postharvest that are safe and effective to reduce decay and increase shelf life. Thus, the objective of this study was to evaluate the inoculum concentration (102, 103, 104, 105, 106 e 107 conídia.mL-1), the wetness period (0, 12, 24, 36 e 48 h) and temperature (2, 5, 10, 15, 20 e 25 °C) that are optimal for disease establishment in table grape cv. Italy, evaluate the effect of Ca, K, Cu, Mg and Zn phosphites salts applied at postharvest by dipping the clusters in solutions at different concentrations (0,3; 0,9; 1,25; 1,7 and 2,0 g.L-1) in two inoculation periods of A. niger (12 and 24 h), and in vitro tests, by mycelial growth and conidia germination as well the chemical characteristics of the grape. The highest inoculum concentrations (106 and 107 conídia.mL-1), wetness period 48 h and temperature 25 °C showed the greatest mean lesion size, it means, that these are optimal conditions for the development of Aspergillus rot in Italy table grape. The phosphites inhibit mycelial growth and germination of conidia. Zn phosphite had significantly lower EC50 values to the others, as well as phosphite Ca for micelial growth. The lowest EC50 values are represented by K and Ca phosphite for conidial germination. There was no significant interaction between the salts in the applied concentrations and is not effective in reducing the severity of the disease in table grape. The Ca phosphite showed lower average size values of the lesion when the berries were treated 12 hours before inoculation, and could be relevant in future research. / A videira é uma das mais antigas plantas cultivadas pelo homem e apresenta significativa importância social e econômica no mundo todo. O Submédio do Vale do São Francisco tem papel primordial na produção e exportação da uva. Porém, essa cultura apresenta grande suscetibilidade a infecções fúngicas pós-colheita gerando perdas significativas desde o cultivo até a comercialização. Aspergillus niger é uma espécie fúngica freqüente na região principalmente quando a colheita ocorre em períodos chuvosos e os sintomas geralmente aparecem no período de armazenamento dos frutos. É um patógeno de grande importância, pois causa escurecimento e amolecimento das bagas depreciando o valor comercial da uva e resultando em sérios prejuízos. Há uma forte necessidade de explorar medidas alternativas na pós-colheita que sejam seguras e eficazes para reduzir os danos e aumentar o tempo de conservação de frutas e hortaliças em geral. Desta forma, o objetivo do trabalho foi avaliar, para dois isolados de A.niger, a concentração de inóculo (102, 103, 104, 105, 106 e 107 conídios.mL-1), o período de molhamento (0, 12, 24, 36 e 48 h) e a temperatura (2, 5, 10, 15, 20 e 25 °C) ideais para o estabelecimento da doença em uva de mesa cv. Itália, verificar o efeito de sais de fosfitos de Ca, K, Cu, Mg e Zn aplicados na pós colheita através da imersão dos cachos nas soluções em diferentes concentrações (0,3; 0,9; 1,25; 1,7 e 2,0 g.L-1) em dois tempos de inoculação do A. niger (12 e 24 h), bem como, avaliar o efeito desses sais in vitro através da mensuração do crescimento micelial e da germinação de conídios, sendo também avaliados os atributos químicos da uva. Em relação aos aspectos epidemiológicos verificou-se que as maiores concentrações de inóculo (106 e 107 conídios.mL-1), período de molhamento de 48 h e temperatura de 25 °C apresentaram as maiores médias de tamanho da lesão, ou seja, são as condições ótimas para o desenvolvimento da podridão em uva de mesa cv. Itália. As aplicações dos fosfitos inibiram o crescimento micelial e a germinação dos conídios. O fosfito de Zn apresentou valor de CE50 significativamente menor aos demais, assim como o fosfito de Ca para o crescimento micelial. Os menores valores de CE50 foram representados pelos fosfitos de K e Ca para a germinação de conídios. Em relação a aplicação dos fosfitos como manejo alternativo na pós-colheita, não houve interação significativa entre os sais com as concentrações aplicadas e não foram eficientes em reduzir a severidade da doença. O fosfito de Ca apresentou menores valores de tamanho médio da lesão quando tratados 12 h antes da inoculação podendo ser relevante em pesquisas futuras.
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Potencial da taxtomina parcialmente purificada no controle de Colletotrichum truncatum e reação de cultivar de soja ao patógeno / Potencial of parcially purifief thaxtomin in the control of C. truncatum and test reaction of soybean cultivars to the pathogenMarcelino, Wesler Luiz 06 February 2019 (has links)
A antracnose da soja é uma doença que causa danos na cultura, principalmente na fase vegetativa. Devido aos danos causados pela doença, métodos de controle integrado estão sendo estudados. Um desses métodos é o controle biológico, no qual agentes bióticos ou seus metabólitos são usados para controlar o patógeno. Esses agentes podem atuar diretamente no patógeno ou como indutores de resistência nas plantas e, assim, contribuir para o desenvolvimento de produtos biológicos. A bactéria Streptomyces scabies produz uma toxina que pode induzir resistência em plantas, a taxtomina A. O objetivo desta pesquisa foi avaliar os efeitos diretos e indiretos da taxtomina parcialmente purificada (TPP) no controle de Colletotrichum truncatum (C. truncatum). O efeito direto da TPP na germinação de esporos e no crescimento micelial do fungo foi testado in vitro. Nos testes in vivo foram realizados a padronização do método de inoculação de C. truncatum, a escolha da cultivar a partir da reação de cultivares e o efeito de indutores na resistência sistêmica e local. Análises bioquímicas da atividade da peroxidase (POX) e teor de fenóis livres e ligados também foram conduzidos. Como resultado, observou-se que a TPP autoclavada ou não teve efeito inibitório na germinação de esporos de C. truncatum Por outro lado, a TPP não afetou o crescimento micelial do patógeno. O melhor método para inoculação de C. truncatum em soja foi via micelial, com 72 h de umidade foliar e utilizando-se o isolado CMES 1059. No teste de reação das cultivares, a DS5916IPRO foi uma das cultivares mais suscetíveis dentre as 16 testadas. No tocante a indução de resistência local, as cultivares tratadas com TPP, Bion (Acibenzolar - S - Metil) e o fungicida Priori Xtra® (azostrobina+citroconazol) apresentaram a menor severidade entre os tratamentos testados. Na avaliação da indução de resistência sistêmica, os tratamentos não diferiram (p> 0,05) do controle. As análises bioquímicas também não diferiram. Assim, pode-se concluir que a TPP na dose de 100 μg equivalentes de taxtomina/L é termoestável e tem efeito direto sob a germinação de conídios de C. truncatum. Além disso, a TPP e o ASM têm o potencial de induzir resistência local em plantas de soja contra o patógeno. / The anthracnose of soybean is a disease that causes severe damages in the crop, mainly in the vegetative phase. Due to disease damage, methods of integrated control has been studied. One of these methods is the biological control, in which a biotic agent or its metabolites are used to control a pathogen. These agents can act directly on the pathogen and/or act as resistance inducers in plants and thus contribute to the development of biological products. The bacterium Streptomyces scabies produces a toxin called thaxtomin that can induce resistance in plants. The objective of this research was to evaluate the effects of the partially purified thaxtomin (TPP) on the activation of biochemical defense mechanism in the soybean plants. Thus, the direct effect of TPP on spore germination and mycelial growth was tested in vitro. The in vivo test included standardization of inoculation of C. truncatum, cultivars reaction and the effect of inducers in the systemic and local resistance. Biochemical analyzes of peroxidase activity (POX) and content of free and bound phenols were also performed. It was observed that autoclaved or non-autoclaved TPP exhibited inhibitory effects on the germination of C. truncatum. On the other hand, TPP did not affect the mycelial growth of the pathogen. The best method for inoculation of C. truncatum was by using mycelium, with 72 h of leaf wetness and with the isolate CMES 1059. In the cultivar reaction test, it was determinate that the cultivar DS5916RR was the most susceptible out among the 16 cultivars tested. Regarding local induction resistance, the cultivars treated with TPP, Acibenzolar - S - Methyl (ASM) and fungicide Priori Xtra® exhibited the lowest severity among the treatments tested. In the evaluation of systemic resistance induction, the treatments didn\'t differ (p> 0.05) of the control. The biochemical analyses also didn\'t differ among then. Thus, it can be concluded that TPP is thermostable and has direct effect on conidium germination of C. truncatum. Besides that, the TPP and ASM have the potential to induce local resistance in soybean plants against the pathogen.
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Taxtomina parcialmente purificada e preparações de Streptomyces scabies na indução de resistência em soja à Phakopsora pachyrhizi / Partially purified thaxtomin and Streptomyces scabies preparation in the induction resistance in soybean plants to Phakopsora pachyrhiziPaula, Samuel de 06 February 2019 (has links)
Atualmente a ferrugem-asiática da soja é a doença mais importante da cultura e desde o seu surgimento vem causando diversos prejuízos. Devido a sua importância, faz-se necessário buscar alternativas que possam contribuir com o manejo tradicional com fungicidas. Neste sentido, surge a indução de resistência como uma alternativa para o seu controle. Dentre os indutores de resistência, as fitotoxinas apresentam potencial como ativadoras de plantas e neste caso, mais especificamente a taxtomina, produzida por Streptomyces scabies. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial da fitotoxina taxtomina parcialmente purificada (TPP) e preparações de Streptomyces scabies como potenciais indutores de resistência em soja à Phakopsora pachyrhizi. Foram realizados ensaios para avaliar o efeito direto dos potenciais indutores deresistência a base de suspensão de células de Streptomyces scabies, filtrado de meio de cultivo de Streptomyces scabies, TPP e acibenzolar-S-metílico sobre a germinação de urediniósporos através do teste de microgotas em placas de Petri de poliestireno. Também foram realizados ensaios em folha destacada, onde fez-se a aplicação dos potenciais indutores e depois de determinado tempo fez-se a inoculação com P. pachyrhizi, sendo posteriormente avaliado o potencial dos compostos na redução da severidade. Ensaios em casa de vegetação foram conduzidos com plantas de soja que receberam a aplicação dos indutores e, posteriormente, foram inoculadas, onde avaliou-se a redução da severidade. Em casa de vegetação também foram conduzidos experimentos para a coleta de amostras para a realização de análises bioquímicas como peroxidase e fenóis, visando monitorar a atividade e o acúmulo de compostos relacionados a defesa de plantas a patógenos. Ensaio de campo foi realizado para verificar o potencial em reduzir a severidade da ferrugem da soja, onde foi avaliada a produtividade e a qualidade fisiológica das sementes produzidas. A expressão de genes relacionados as vias defesa como resposta a aplicação de taxtomina também foi monitorada. Como resultados, observou-se que a TPP tem efeito direto sobre urediniósporos de P. pachyrhizi, inibindo a germinação em 61%. A TPP reduziu a severidade da doença em folha destacada, mas não em plantas em condições de casa de vegetação. A TPP também aumentou a atividade de peroxidase e alterou o acúmulo de fenóis ligados. Em condições de campo, apenas o tratamento com fungicidas reduziu a severidade da doença. Nenhum dos tratamentos utilizados afetou a germinação e o vigor das sementes produzidas. A TPP foi capaz de alterar a expressão gênica e regular positivamente o gene ACC, envolvido na síntese do etileno. Conclui-se que a TPP apresenta, além de efeito direto sobre o patógeno, potencial para alterar compostos e a expressão de genes relacionados as vias de defesa das plantas. / Asian soybean rust is the most important disease of the crop today and since its inception has caused several damages. Due to its importance, it is necessary to look for alternatives that can contribute to the traditional management with fungicides. In this sense, induction of resistance appears as a promising alternative for the control of diseases. Among the resistance inducers, phytotoxins have the potential as plant activators and in this case, more specifically thaxtomin, produced by Streptomyces scabies. Therefore, the objective of this work was to evaluate the potential of the partially purified phytotoxin thaxtomin (TPP) and preparation of Streptomyces scabies as potential inducers of resistance in soybean to Phakopsora pachyrhizi. For this, tests were carried out to evaluate the direct effect of potential resistance inducers on the germination of urediniospores through the test of microdrops on polystyrene Petri dishes. Detached leaf assay also carried out, where the potential inducers were applied and after a certain time the inoculation with P. pachyrhizi was done, being evaluated the potential of the compounds in reducing the severity. Greenhouse tests were also carried out with soybean plants that received the application of the inducers and later inoculated, where the reduction of severity was evaluated. Greenhouse experiments were also carried out for the collection of samples for biochemical analyzes such as peroxidase and phenolic compounds, aiming to monitor the activity and the accumulation of compounds related to plant defense to pathogens. In addition, preliminary field trials were carried out to verify the potential of the inducers in reducing the severity of soybean rust, where the productivity and physiological quality of the seeds were also evaluated. Expression of genes related to the defense pathways as a response to thaxtomin application was also monitored. As results, it was observed that the partially purified thaxtomin had a direct effect on P. pachyrhizi uredinospores, inhibiting germination by 61%. In addition, it was also able to reduce the severity in detached leaves but not in seedlings under greenhouse conditions. Partially purified thaxtomin was also able to increase peroxidase activity and alter the accumulation of bound phenols. At field conditions, only the treatment that used fungicides was able to reduce the severity of the disease. However, although only one of the treatments reduced the disease, none of the treatments used was able to affect the germination and vigor of the seeds produced. Finally, the partially purified thaxtomin was able to alter gene expression and positively regulate the ACC gene, that is involved in ethylene metabolism. In general, it is concluded that TPP has, in addition to a direct effect on the pathogen, potential to alter plant defense related compounds and the expression of genes related to defense pathways.
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Fosfito de potássio no controle de doenças pós-colheita em bagas de uva ´Itália´ e possíveis mecanismos de ação à Rhizopus stolonifer / Potassium phosphite on postharvest disease control in ´Itália´ grape berries and possible mode of action to Rhizopus stoloniferRoma, Rafaela Carolina Constantino 10 March 2014 (has links)
A ocorrência de doenças em uvas de mesa gera perdas desde o cultivo até a comercialização, o que afeta diretamente o potencial de exportação do Brasil. A prevenção na realização de injúrias nos frutos é essencial para garantir a eficácia dos tratamentos aplicados tanto em pré- quanto em pós-colheita. Visando o emprego de produtos alternativos que auxiliem no manejo sustentável da cultura, o fosfito de potássio encontra-se como ferramenta útil. O efeito do fosfito no controle de doenças causadas por oomicetos já foi relatado, porém, como este ingrediente ativo atua sobre microrganismos do reino Fungi ainda é desconhecido. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar o fosfito de potássio no controle das doenças podridão mole, mofo cinzento e podridão da uva madura, causadas por Rhizopus stolonifer, Botrytis cinerea e Colletotrichum gloeosporioides, respectivamente, em bagas de uva ´Itália´ e seus efeitos na qualidade físico-química dos frutos. Também objetivou-se estudar os mecanismos de ação envolvidos na inibição do desenvolvimento do micélio de R. stolonifer na presença do produto e na indução de respostas de defesa em bagas de uva. Foram realizados ensaios in vitro para avaliação do efeito do fosfito sobre o crescimento micelial, esporulação e germinação dos esporos para R. stolonifer, B. cinerea e C. gloeosporioides. Experimentos utilizando-se de bagas foram conduzidos, visando avaliar o efeito no uso do fosfito como fungicida produtor ou curativo para os três patógenos. Cachos foram utilizados para se determinar os efeitos da aspersão do fosfito sobre a qualidade físico-química dos frutos. Para avaliação dos mecanismos de ação do fosfito sobre o micélio de R. stolonifer, foram determinados os efeitos sobre a permeabilidade da membrana plasmática, a síntese de parede celular e a síntese de proteínas. A atividade de guaiacol peroxidase e de compostos fenólicos totais foi determinada em bagas de uva tratadas ou não com fosfito. Houve inibição do crescimento micelial, da esporulação e da germinação dos esporos dos patógenos desenvolvidos em diferentes concentrações de fosfito de potássio. O tratamento protetor e curativo das bagas evidenciou reduções significativas na área abaixo da curva de progresso das doenças estudadas. Não houve efeito do produto sobre a qualidade físico-química dos cachos de uva. Quanto aos mecanismos de ação, foram observados efeitos do fosfito sobre a permeabilidade de membrana, devido à elevada perda de eletrólitos do micélio. O fosfito proporcionou elevação na síntese de proteínas totais no micélio do patógeno e redução na atividade de ?-1,3- glucanase e quitinase, que são enzimas relacionadas à síntese de parede. A atividade de guaiacol peroxidase e a concentração de compostos fenólicos totais não aumentou com a aplicação do fosfito nas bagas. Desta forma, pode-se concluir que o fosfito de potássio controlou a podridão mole, o mofo cinzento e a podridão da uva madura e não teve efeito sobre a qualidade físico-química dos frutos. Ainda, o fosfito atuou sobre a permeabilidade de membrana, síntese de proteínas e de parede celular do micélio de R. stolonifer e não proporcionou indução da atividade de guaiacol peroxidase e compostos fenólicos totais em bagas de uva. / The occurrence of table grape diseases causes losses from the field to the commercialization, which affects the Brazil potential to export. The prevention of injuries in fruits is essential to ensure the pre- and postharvest treatment efficiency. In order to use alternative products to support the crop sustainable management, phosphite may be a useful tool. The phosphite effect on control of diseases caused by oomycetes has been reported, however, how the active ingredient acts on microorganisms from the Fungi kingdom is unknown. Thus, the objective was to evaluate potassium phosphite on the control of soft rot, grey mold and ripe rot, caused by Rhizopus stolonifer, Botrytis cinerea e Colletotrichum gloeosporioides, respectively, in ´Itália´ grape berries and its effect on physico-chemical properties of the fruits. Moreover, the objective was to study the mode of action involved on the inhibition of R. stolonifer grown in the presence of phosphite and on the induction of defense responses in grape berries. In vitro assays were carried out to evaluate the effect of phosphite on mycelial growth, sporulation and spore germination in R. stolonifer, B. cinerea e C. gloeosporioides. Single berries were used in order to evaluate the effect of phosphite as a protective or curative fungicide against the three pathogens. Grape clusters were used to determine the effects of phosphite spraying on physico-chemical properties. To evaluate the mode of action of phosphite on R. stolonifer mycelium the plasma membrane permeability, the protein synthesis and the cell wall synthesis were monitored. The guaiacol peroxidase activity and phenolic compound concentration were evaluated in grape berries treated or not with phosphite. There were inhibition on mycelial growth, sporulation and spore germination on the three pathogens in different potassium phosphite concentrations. The protective and curative treatment in grape berries showed significant reductions on the area under disease progress curve of the studied diseases. There was no effect on physico-chemical properties of the grapes. Regarding the mode of action, the phosphite affected membrane permeability what was seen as high electrolyte leakage from the mycelium. Phosphite caused high protein synthesis in the mycelium and reduction on ?-1,3-glucanase and chitinase activities, which are enzymes related to cell wall synthesis. The guaiacol peroxidase activity and phenolic compound concentration did not increase due the phosphite application. Thus, it may be concluded that potassium phosphite controlled soft rot, grey mold and ripe rot in grape berries and did not affect the physico-chemical properties of the fruits. Besides that, phosphite still acted on membrane permeability, protein synthesis and cell wall synthesis on the R. stolonifer mycelium and did not changes in guaiacol peroxidase activity and phenolic compound concentration in the grape berries.
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Fosfito de potássio no controle de Phytophthora spp. em citros e faia e seu modo de ação / Potassium phosphite in the control of Phytophthora spp. in citrus and beech plants and its mode of actionRezende, Dalilla Carvalho 29 January 2015 (has links)
A citricultura brasileira ocupa lugar de destaque no agronegócio nacional, sendo o país o maior produtor de laranja e suco de laranja do mundo. A faia (Fagus sylvatica) é uma das principais espécies das florestas na Europa, sendo usada como ornamental e por possui alto valor econômico devido à produção de madeira. Um dos principais entraves no cultivo dessas espécies é a ocorrência de doenças principalmente as causadas por espécies de Phytophthora que além de causar grandes prejuízos, os métodos de controle são difíceis e onerosos. Existem trabalhos na literatura que apontam os fosfitos como alternativa sustentável, eficaz e economicamente viável para o controle de doenças causadas por oomicetos. Entretanto, o Comitê de Ação a Resistência à Fungicidas (FRAC) classifica os fosfitos, como produtos com ingrediente ativo sem mecanismo de ação definido. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar o produto comercial à base de fosfito de potássio, Phytogard® no controle das doenças causadas por Phytophthora nicotianae em citros e Phytophthora plurivora em faia, bem como avaliar através de análises bioquímicas se esse produto induz resistência em plântulas de citros. Além disso, foram realizados estudos in vitro para avaliar o efeito direto do Phytogard® sobre o desenvolvimento de P. nicotianae e P. plurivora e verificar os possíveis mecanismos de ação desse produto sobre esses patógenos. Foram utilizadas plântulas de citros e faia que foram aspergidas com diferentes concentrações de Phytogard® e, posteriormente, inoculadas com os patógenos. Foram avaliadas a incidência das doenças, o consumo de água e a quantidade de DNA dos patógenos nos tecidos das raízes dos hospedeiros. Ao final do experimento, foram realizadas análises bioquímicas dos tecidos das plântulas de citros. Nos experimentos in vitro, o micélio dos patógenos foi exposto a concentrações crescentes de Phytogard® sendo determinado o crescimento micelial, produção de massa fresca de micélio e de zoósporos. Avaliou-se a perda de eletrólitos, peroxidação de lipídios e a atividade da enzima β-1,3 glucanase do micélio exposto ao produto. Foi avaliada também a morfologia das hifas tratadas ou não com o Phytogard® através da técnica de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Os resultados mostraram que o Phytogard®, em todas as concentrações aplicadas controla de maneira preventiva as doenças causadas por P. nicotianae e P. plurivora em citros e faia, respectivamente. Em citros, o produto altera a atividade de algumas proteínas relacionadas à patogênese, mas não é possível concluir que o controle seja mediado por indução de resistência. O Phytogard® inibe o crescimento micelial e a produção de zoósporos de P. nicotianae e P. plurivora. Além disso, o produto modifica a morfologia das hifas, atua na permeabilidade de membrana e na síntese de parede celular do micélio dos patógenos. / The Brazilian citrus production is important to national agribusiness, and the country is the largest orange and orange juice world producer. Beech (Fagus sylvatica) is one of the main forest species in Europe and is used as ornamental and also it has a high economic value due to the production of wood. One of the main problems in the cultivation of these species is the occurrence of diseases, mainly caused by Phytophthora species. Besides causing extensive damage control methods are difficult and costly. There are studies in the literature that show phosphites as a sustainable alternative, effective and economically viable for the control of diseases caused by oomycetes. However, the Fungicide Resistance Action Committee (FRAC), classifies the phosphites as products with the active ingredient with no defined mode of action. In this context, this work aimed to evaluate the commercial product based on potassium phosphite Phytogard® on the control of diseases caused by Phytophthora nicotianae in citrus plants and Phytophthora plurivora in beech plants and evaluate through biochemical assays whether this product induces resistance in citrus seedlings. In addition, in vitro studies were carried out to evaluate the direct effect of Phytogard® on the development of P. nicotianae and P. plurivora and to understand the possible mode of action of the product on these pathogens. Citrus seedlings were sprayed with different concentrations of Phytogard® and then inoculated with the pathogen. We evaluated the diseases incidence, water uptake and the amount of pathogens DNA in the host roots. At the end of the experiment, biochemical assays with citrus seedlings were made. In in vitro experiments, the pathogen mycelium was exposed to increasing concentrations of Phytogard® and mycelial growth, production of fresh mycelium and zoospores by these pathogens were determined. We also evaluated the electrolyte leakage, lipid peroxidation and the β-1,3 glucanase activity in the mycelium exposed to the product. It was also evaluated the hyphae morphology from mycelium treated or not with Phytogard® by using scanning electron microscopy. The results showed that in all concentrations of Phytogard® preventively controled diseases caused by P. nicotianae and P. plurivora in citrus and beech plants, respectively. In citrus, the product changed the activities of some pathogenesis-related proteins, but it is not possible to conclude that the control was mediated by resistance induction. The Phytogard® inhibited mycelial growth and zoospore production by P. nicotianae and P. plurivora. Furthermore, the product modified the hyphae morphology, changed membrane permeability and mycelium cell wall synthesis in the pathogens.
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Óleos essenciais no manejo da ferrugem na cultura do figoJasper, Mônica 27 July 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-07-27 / A ferrugem do figo (Ficus carica L) é causada por Cerotelium fici (Cast.) Arth., doença que causa desfolha prematura e danos significativos na produtividade de frutos de figo. O objetivo geral do trabalho é estudar a epidemiologia de C. fici, assim como métodos de controle da doença para o manejo em sistemas orgânicos. Avaliou-se a melhor temperatura e fotoperíodo para a germinação in vitro de uredósporos de C. fici, através da utilização de temperaturas de 10, 20, 23, 30 e 35ºC, e fotoperídos de escuro contínuo de 12 horas de luz, em BOD, com diferentes quantidades de suspensão de esporos. A temperatura ótima para a germinação dos uredósporos de C. fici situou-se entre 20 e 30ºC. O fotoperíodo de 12 horas proporcionou menores porcentagens de germinação de esporos do que o escuro contínuo. A germinação dos esporos foi favorecida pelo aumento da quantidade de suspensão de 0,5 mL para 1 mL, devido ao secamento da gota de suspensão quando as quantidades são menores. Depois, foram testadas diferentes concentrações de óleos essenciais extraídos de plantas para inibição da germinação de uredósporos de C. fici em placas de poliestireno contendo supensão de esporos na concentração de 104 esporos mL-1 e meio de cultura ágar-água a 2%. Foram avaliadas as concentrações de 1, 10, 100 e 1000 ppm de óleo essencial, em duas repetições de experimento. Depois, avaliou-se as concentrações de 5, 10, 15 e 20 ppm dos mesmos óleos essenciais, também em duas repetições do experimento. Os óleos essenciais utilizados foram os de alecrim, alfazema, camomila, canela, capim limão, citronela, coentro, cravo da índia, erva cidreira, erva doce, eucaliptos, gengibre, hortelã, laranja, lima, manjericão, melaleuca, orégano e tomilho. Utilizando concentrações de 1 a 1000 ppm de cada óleo, destacaram-se os óleos de canela, orégano, alecrim, citronela, capim limão, alfazema, coentro e cravo da índia com efeitos superiores aos demais na inibição da germinação de uredósporos. Concentrações maiores de óleo essencial apresentam melhor controle da germinação dos uredósporos de ferrugem. Nas concentrações de 5 a 20 ppm, o melhor controle da germinação de esporos foi constatado com óleo de canela, seguido dos óleos de capim limão e alfazema, diferindo dos óleos de manjericão, erva doce, hortelã, coentro, lima, camomila, melaleuca, citronela, gengibre e alecrim. Posteriormente, foram testados 9 tratamentos para controle de ferrugem em mudas de figo em casa de vegetação (óleos essenciais de alecrim, alfazema, canela, capim limão, citronela, cravo da índia, coentro e orégano mais a testemunha com aplicação de água), em quatro concentrações (5, 10, 15 e 20 ppm), com duas repetições do experimento. Foi avaliada a severidade da ferrugem e calculada a Área Abaixo da Curva de Progresso da Doença (AACPD). Os óleos essenciais extraídos de canela, alfazema, capim limão, alecrim, citronela, orégano, cravo da índia e coentro obtiveram resultados na diminuição da severidade de ferrugem da figueira, com os melhores resultados associados ao óleo essencial de canela, seguido do óleo de alfazema, nas maiores concentrações. O aumento da concentração dos óleos essenciais, de 5 para 20 ppm, mostrou tendência linear de incremento no controle da ferrugem. / Rust fig (Ficus carica L) is caused by Cerotelium fici (Cast.) Arth., a disease that causes premature defoliation and significant damage to fruit production. The general objective is to study the epidemiology of C. fici, as well as disease control methods for the management in organic systems. We evaluated the best temperature and photoperiod for in vitro germination of C. fici urediniospores, through the use of temperatures of 10, 20, 23, 30 and 35 ° C, and the fotoperídos of 12-hours of light ou dark complete, in BOD with different amounts of spore suspension. The optimum temperature for germination of urediniospores was between 20 and 30 ° C. The 12-hour photoperiod provided smaller spore germination percentages than the continuous darkness. Germination of spores was favored by increasing the amount of suspension 0.5 mL to 1 mL, due to the suspension droplet drying while the amounts are smaller. Then, different concentrations of essential oils extracted from plants were tested for inhibition of germination of urediniospores in microtiter plates containing spores in this suspension concentration of 104 spores mL-1 and agar- water 2% culture. Concentrations of 1, 10, 100 and 1000 ppm of essential oil were evaluated, in two repeats of the experiment. Then we assessed concentrations of 5, 10, 15 and 20 ppm of these essential oils also into two repetitions of the experiment. The essential oils used were those of rosemary, lavender, chamomile, cinnamon, lemon grass, lemongrass, coriander, clove, lemongrass, fennel, eucalyptus, ginger, mint, orange, lime, basil, melaleuca, oregano and thyme. Using concentrations of 1-1000 ppm of each oil, stood out the cinnamon oil, oregano, rosemary, citronella, lemongrass, lavender, coriander and cloves with effects superior to others in inhibiting urediniosporal germination. Higher concentrations of essential oil have better control of germination of rust urediniospores. In concentrations of 5-20 ppm, better control of spore germination was found in cinnamon oil, followed by lemon grass oil and lavender, differing from basil oil, fennel, mint, cilantro, lime, chamomile, melaleuca, lemongrass, ginger and rosemary. Subsequently, we tested nine treatments for rust control in fig seedlings in the greenhouse (essential oils of rosemary, lavender, cinnamon, lemongrass, citronella, clove, coriander and oregano over the witness with application of water), in four concentrations (5, 10, 15 and 20 ppm) with two replications of the experiment. The severity of rust and calculated the area under disease progress curve were evaluated. The essential oils from cinnamon, lavender, lemon grass, rosemary, lemongrass, oregano, clove and coriander obtained results in the reduction of the fig tree rust severity, with the best results associated with cinnamon essential oil, followed by lavender oil, in higher concentrations. Increasing the concentration of essential oils from 5 to 20 ppm, showed linear trend of increment in controlling the disease
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Taxtomina A no controle dos vírus do mosaico do pepino e do mosaico amarelo em abobrinha de moita e da podridão mole (Rhizopus stolonifer) em uva / Thaxtomin A on the control of Cucumber mosaic virus (CMV) and Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) on zucchini squash and the rot (Rhizopus stolonifer) on grapesPinto, Luiz Rafael 28 January 2014 (has links)
Existe uma crescente demanda por alternativas de controle de doenças para se reduzir o uso do controle químico, como por exemplo, o estudo da indução de resistência em plantas, através de fitotoxinas como a taxtomina A e outras substâncias. O vírus do mosaico do pepino (Cucumber mosaic virus - CMV) e o vírus do mosaico amarelo da abobrinha (Zucchini yellow mosaic virus - ZYMV) têm causado grandes prejuízos em culturas importantes, assim como o fungo Rhizopus stolonifer, que pode atacar diversos hospedeiros. Este trabalho foi conduzido com o objetivo de se avaliar os efeitos do uso da taxtomina A como indutor de resistência em plantas. Como resultado preliminar a produção de taxtomina A pode ser aumentada utilizando-se como fonte de inóculo amostra de uma cultura liquida pré-estabelecida de Streptomyces scabies. Foram testados a aspersão de taxtomina A em plantas de abobrinha de moita, para se avaliar a proteção contras os vírus CMV e ZYMV. Também foi aspergida taxtomina A em bagas de uva \"Itália\" para se avaliar o desenvolvimento da podridão pós-colheita causada por R. stolonifer. As plantas de abobrinha de moita, mantidas em casa de vegetação, tratadas com taxtomina A não apresentaram sintomas de mosaico característico do CMV. O teste ELISA apresentou resultados negativos indicando a não presença de partículas virais em níveis detectáveis nas plantas. Com relação ao ZYMV, a taxtomina A não foi capaz de controlar o desenvolvimento da doença, pois apareceram sintomas em todas as plantas. A taxtomina A apresentou efeito in vitro sobre R. stolonifer retardando o crescimento do fungo principalmente nas duas maiores concentrações usadas. Porém, a aplicação de taxtomina A não foi capaz de proteger as bagas de uva contra o patógeno. Finalizando a taxtomina A foi capaz de controlar em 100% a incidência de CMV em abobrinha, porém não foi capaz de controlar o ZYMV em abobrinha e a podridão nas uvas causada por R. stolonifer. / There is an increasing demand for alternative control of diseases to reduce the use of chemical control, for example the induced resistance studies on plants with phytotoxins like thaxtomin A and other substances. The Cucumber mosaic virus (CMV) and the Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) cause a lot of losses on important crops and also the fungus Rhizopus stolonifer that can cause disease in different hosts. This work was carried out to evaluate the use of thaxtomin A to induce resistance. Thus, as a preliminary result, the thaxtomin A production could be increased by using as inoculum an established Streptomyces scabies liquid culture. It was tested the spraying of thaxtomin A on zucchini plants to evaluate the protection against the viruses CMV e ZYMV. On the other hand, grape berries cv \"Italia\" were also sprayed with thaxtomin A to evaluate the development of the postharvest rot caused by R. stolonifer. The zucchini plants were maintained in the greenhouse and the treatment with thaxtomin A inhibited mosaic symptom development by the CMV. The ELISA test showed negative results indicating that there was no detectable virus particles inside the plants. The thaxtomin A was not able to control the ZYMV development since all plants exhibited symptoms. The thaxtomin A showed in vitro control of R. stolonifer as it reduced the fungal growing at the two highest concentrations used. However, the thaxtomin A was not able to control the postharvest rot in grapes. Finally, the thaxtomin A was able of controlling 100% of the incidence of CMV on zucchini plants, but was not able of controlling ZYMV in zucchini and the grape berrie rot caused by R. stolonifer.
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\"Efeito anti-helmíntico de taninos condensados sobre nematódeos gastrintestinais em ovinos\" / Anthelmintic effect of condensed tannins on gastrointestinal nematodes in sheepMinho, Alessandro Pelegrine 24 February 2006 (has links)
As helmintoses gastrintestinais estão entre as principais enfermidades na criação de ovinos, sendo importante causa de mortalidade e de redução na produtividade dos animais. O controle das infecções por nematódeos é baseado no uso de drogas anti-helmínticas, porém com a descrição emergente de parasitos resistentes, a eficácia deste tratamento tem diminuído. Portanto, métodos alternativos de controle são necessários para a diminuição ou, até mesmo, a substituição do uso de drogas para o controle das verminoses em pequenos ruminantes. O uso dos taninos condensados (TC) no controle das helmintoses gastrintestinais de ovinos em todo o mundo tem se mostrado promissor. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito anti-helmíntico dos TC sobre nematódeos gastrintestinais de ovinos. Durante o período de testes foram realizados quatro ensaios experimentais: ensaio A avaliação in vitro da ingestão por larvas de primeiro estágio (L1) de Haemonchus contortus, Trichostrongylus colubriformis e Teladorsagia circumcincta, para avaliar o efeito anti-helmíntico dos TC provenientes do extrato de acácia (Acacia mearnsii); ensaio B estudo sobre a infecção natural dos cordeiros a campo, animais infectados com H. contortus e T. colubriformis, sendo os mesmos divididos em dois grupos (tratados com extrato de acácia e não tratados); ensaios C e D realizados com infecção experimental dos animais por nematódeos gastrintestinais (H. contortus e T. colubriformis, respectivamente). Nos dois últimos ensaios, os animais foram divididos em cinco grupos, sendo: GI (controle infectado com nematódeo); GII (recebeu sorgo taninífero); GIII (recebeu extrato de acácia uma vez ao dia); GIV (recebeu extrato de acácia duas vezes ao dia) e GV (controle não infectado). Os resultados dos ensaios A (ingestão larval) e B (infecção natural) foram promissores e demonstraram o efeito direto dos TC sobre os nematódeos parasitas de ovinos, com diferença significativa (P < 0,05) entre os grupos. Observando-se os resultados do experimento com infecção experimental por H. contortus (ensaio C), não se detectou diferença estatística entre os grupos (P > 0,05), porém no experimento com infecção por T. colubriformis (ensaio D) foi evidenciada diferença (P < 0,01) nos valores de OPG entre os grupos tratados com sorgo (GI) e extrato de acácia por dois dias (GIV), quando comparados ao controle infectado (GI); sendo também evidenciada quando da comparação do número de fêmeas de helmintos do GI e GIV (P < 0,01). Redução na viabilidade dos ovos de helmintos (estágio de ovo até L1) e no número de larvas infectantes isoladas de coproculturas provenientes dos grupos tratados com TC foram evidentes nos ensaios C e D. Os resultados foram promissores demonstrando a ação direta dos TC sobre nematódeos gastrintestinais de ovinos e principalmente sobre a produção de larvas infectantes; porém mais estudos são necessários para a indicação de um controle de parasitos gastrintestinais baseado no uso de fontes de TC / Gastrointestinal nematodes are a major cause of economic loss in farm animals. Gastrointestinal parasite control programs based on chemotherapy are failing because of increased anthelmintic resistance; thus, alternative controls strategies are necessary to reduce the use of anthelmintic drug in animal production have been studied. Condensed tannins (CT) have shown potential for alternative control of gastrointestinal nematodes in sheep. The main objective of the present study was to investigate the anthelmintic effect of condensed tannin on sheep gastrointestinal nematodes. During the experimental period four experiments were carried out: Experiment A in vitro study of larval feed inhibition (first stage larvae-L1) of Haemonchus contortus, Trichostrongylus colubriformis and Teladorsagia circumcincta, to evaluate the anthelmintic effect of CT from acacia (Acacia mearnsii) condensed tannins extract (CTE); Experiment B study of the potential uses of CTE to control gastrointestinal parasites in sheep naturally infected with H. contortus e T. colubriformis, with animals divided into two groups (drenched and undrenched with CTE); Experiments C and D were carried out with sheep experimentally infected with gastrointestinal nematodes (H. contortus e T. colubriformis, respectively). In these experiments (C and D) the animals were divided into five groups GI (nematodes infect control); GII (supplemented with taniniferous sorghum); GIII (drenched with CTE once); GIV (drenched with CTE for two days) and GV (non-infect control). The results of experiment A (larval feed inhibition) and B (natural nematode infection) were promissory and showed the direct effect of CT on sheep gastrointestinal nematodes with significant difference (P < 0.05) between groups. The results of H. contortus experimental infections (experiment C) did not provide significant difference between groups (P > 0.05), however the T. colubriformis experimental infection results (experiment D) showed significant difference (P < 0.01) on EPG values of sheep supplemented with sorghum (GI) and drenched with CTE for two days (GIV), when compared with infect control (GI); Significant reduction of female worm burden was demonstrated between GI and GIV (P < 0.01) on experiment D. Reduction on nematode egg viability (from eggs to L1) and infective larvae (L3) from coprocultures made with faeces from CT treated groups were observed in experiments C and D. The results evidenced the direct action of CT on sheep gastrointestinal nematodes and mainly on L3 production; however more studies are necessary to indicate a strategic alternative parasite control based in CT sources
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Potencial anti-helmíntico de extratos proteicos de Leucaena leucocephala (Linn.) (Fabaceae) e Spigelia anthelmia (Linn.) (Loganiaceae) contra Haemonchus contortus (Rudolphi, 1803) / Anti-helminth potential of protein extracts of Leucaena leucocephala (Linn.) (Fabaceae) and Spigelia anthelmia (Linn.) (Loganiaceae) against Haemonchus contortus (Rudolphi, 1803)ARAÚJO, Sandra Alves de 04 April 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-04-04 / CAPES / FAPEMA / Haemonchus contortus (RUDOLPHI, 1803) is a species of gastrointestinal nematode of great importance due to the damages caused in livestock. Natural products have been studied as an alternative to the use of commercial anthelmintics, responsible for the development of resistance in parasites. This study has as main objective to verify the anthelmintic activity of protein extracts of Leucaena leucocephala (Linn.) and Spigelia anthelmia (Linn.) against the nematode H. contortus. The present work was divided in two chapters. In chapter 1, L. leucocephala seeds were ground and the resulting flour, homogenized in 100 mM sodium phosphate buffer, pH 7. The suspension obtained was centrifuged (15,000 x g at 4 ° C for 30 min). After centrifugation, the obtained supernatant was denominated: Total extract (TE), cotyledon extract (CE) and shell extract (SE). The protein content, proteolytic, protease inhibitory, chitinolytic and anthelmintic activity of L. leucocephala extracts on H. contortus were verified. For each treatment, the effective concentration (EC) of the samples on the nematode was calculated. The extracts TE and CE presented a high protein content, besides having proteolytic, chitinolytic and protease inhibitory activity and inhibiting egg hatching (EC50 0.33 and 0.48 mg mL -1, respectively). However, L. leucocephala samples did not inhibit the larvae of H. contortus. It is concluded that proteins are correlated with the action of L. leucocephala on H. contortus. In Chapter 2, the parts of S. anthelmia were separated into leaves, roots and stem and, washed with distilled water, lyophilized and subsequently crushed. Subsequently the proteins were solubilized in 100 mM sodium phosphate buffer, pH 7. The suspension was centrifuged (15,000 x g at 4 ° C for 30 min) and the supernatant collected for analysis. From the ammonium sulfate precipitation (0-90%) of S. anthelmia extracts and membrane dialysis with 14 kDa molecular exclusion, protein fractions were obtained and denominated: Leaf protein fraction (LPF), stem protein fraction (SPF), root protein fraction (RPF). The samples were submitted to analysis by high performance liquid chromatography for the detection of compounds of secondary metabolism and mass spectrometry to identify possible bioactive proteins present. The protein content, proteolytic, protease inhibitory, chitinolytic, haemagglutinating and anthelmintic action of S. anthelmia protein fractions on H. contortus were verified. For each treatment, the effective concentration (EC) of the samples on the nematode was calculated. Fractions of S. anthelmia had an inhibitory effect on egg hatching, and this effect was more pronounced by LPF (EC50 0.17 mg mL -1). In addition, greater inhibition of larvae by LPF and RPF (EC50 0.27 and 0.25 mg mL -1, respectively) was observed. The protein fractions of root, stem and leaf of S. anthelmia were effective on the inhibition of larval migration (EC50 0.11, 0.14 and 0.21 mg mL -1, respectively). No secondary metabolite compounds were detected in the S. anthelmia fractions, while several proteins with anthelmintic potential were identified by mass spectrometry. It is concluded that proteins are correlated with the
action of S. anthelmia on H. contortus, having potential for the development of anthelmintic products. Thus, the bioactive proteins present in L. leucocephala and S. anthelmia have promising pharmacological properties for the control of the H. contortus nematode. / Haemonchus contortus (RUDOLPHI, 1803) é uma espécie de nematoide gastrintestinal de grande importância devido aos prejuízos que causa na pecuária. Produtos naturais vêm sendo estudados como alternativa ao uso de anti-helmínticos comerciais, responsáveis pelo desenvolvimento de resistência nos parasitos. Este estudo tem como principal objetivo verificar a atividade anti-helmíntica de extratos proteicos de Leucaena leucocephala (Linn.) e Spigelia anthelmia (Linn.) contra o nematoide H. contortus. O presente trabalho foi dividido em dois capítulos. No capítulo 1, sementes de L. leucocephala foram trituradas e a farinha resultante, homogeneizada em tampão fosfato de sódio 100 mM, pH 7. A suspenção obtida foi centrifugada (15.000 x g a 4 ºC por 30 min). Após centrifugação, o sobrenadante obtido foi denominado: Extrato total (TE), extrato de cotilédone (CE) e extrato de casca (SE). O teor de proteínas, atividade proteolítica, inibitória de protease, quitinolítica e ação anti-helmíntica dos extratos de L. leucocephala sobre H. contortus foram verificados. Para cada tratamento foi calculada a concentração efetiva (EC) das amostras sobre o nematoide. Os extratos TE e CE apresentaram elevado teor proteico, além de possuírem atividade proteolítica, quitinolítica e inibitória de protease e inibirem a eclosão dos ovos (EC50 0,33 e 0,48 mg mL-1, respectivamente). No entanto, amostras de L. leucocephala não inibiram o desembainhamento larvar de H. contortus. Conclui-se que proteínas estão correlacionadas com a ação de L. leucocephala sobre H. contortus. No capítulo 2, as partes de S. anthelmia foram separadas em folhas, raízes e caule e, lavadas com água destilada, liofilizadas e subsequentemente trituradas. Posteriormente as proteínas foram solubilizadas em tampão fosfato de sódio 100 mM, pH 7. A suspensão foi centrifugada (15.000 x g a 4 ºC por 30 min) e o sobrenadante recolhido para análises. A partir da precipitação com sulfato de amônio (0-90%) dos extratos de S. anthelmia e diálise em membrana com exclusão molecular de 14 kDa, frações proteicas foram obtidas e denominadas: Fração proteica de folha (LPF), fração proteica de caule (SPF), fração proteica de raiz (RPF). As amostras foram submetidas a análise por cromatografia líquida de alta eficiência para detecção de compostos do metabolismo secundário e, espectrometria de massas para identificação de possíveis proteínas bioativas presentes. O teor de proteínas, atividade proteolítica, inibitória de protease, quitinolítica, hemaglutinante e ação anti-helmíntica das frações proteicas de S. anthelmia sobre H. contortus foram verificados. Para cada tratamento foi calculada a concentração efetiva (EC) das amostras sobre o nematoide. As frações de S. anthelmia apresentaram efeito inibitório sobre a eclosão dos ovos, sendo este efeito mais pronunciado pela LPF (EC50 0,17 mg mL-1). Além disso, foi verificada maior inibição do desembainhamento larvar por LPF e RPF (EC50 0,27 e 0,25 mg mL-1, respectivamente). As frações proteicas de raiz, caule e folha de S. anthelmia foram efetivas sobre a inibição da
migração larvar (EC50 0,11; 0,14 e 0,21 mg mL-1, respectivamente). Não foram detectados compostos do metabolismo secundário nas frações de S. anthelmia, enquanto diversas proteínas com potencial anti-helmíntico foram identificadas por espectrometria de massas. Conclui-se que proteínas estão correlacionadas com a ação de S. anthelmia sobre H. contortus, tendo potenciais para o desenvolvimento de produtos anti-helmínticos. Assim, as proteínas bioativas presentes em L. leucocephala e S. anthelmia possuem propriedades farmacológicas promissoras para o controle do nematoide H. contortus.
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