Submitted by Heitor Rapela Medeiros (heitor.rapela@ufpe.br) on 2015-03-04T14:19:02Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO FINAL CATALOGADA pdf.pdf: 1854643 bytes, checksum: 5ab49e0673ca1166ac07779b3cf8e0b0 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T14:19:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO FINAL CATALOGADA pdf.pdf: 1854643 bytes, checksum: 5ab49e0673ca1166ac07779b3cf8e0b0 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / CAPES / Este trabalho teve como objetivo a obtenção de novos derivados aril-tioureidocicloalquil[ b]tiofenos e 2[(4-tiazolidinona)-amino]-cicloalquil[b]tiofenos (LPSF/ZA), por estratégia de hibridação molecular afim de reunir características estruturais em uma única estrutura para alcançar um novo composto com propriedades farmacológicas mista, dual ou dupla. A síntese consiste na reação de Gewald para obtenção de 2-aminotiofeno, seguida de reações comarilisotiocinatos fornecendo os derivados aril-tioureido-cicloalquil[b]tiofenos que por ciclização com ácido monocloroácetico forneceu os derivados híbridos 4-tiazolidina- 2-amino-cicloalquil[b]tiofenos. Todos os compostos tiveram suas estruturas comprovadas por RMN1H, RMN 13C e IV. Os compostos foram testados frente aos seus potenciais antimicromianos em testes de sensibilidade antifúngica frente a 6 cepas fúngicas, Candida albicans (ATCC – 76485 e LM – V42), Candida tropicalis (ATCC – 13803 e LM – 14), e Cryptococcus neoformans (ICB – 59 e LM – 0310). Para os testes antifúngicos os resultados obtidos não apresentaram grande relevância biológicas ficando as CIM (concentração inibitória mínima) estabelecidas entre β56 e 1048 g/ mL, comparado miconazol a 50 μg/mL como controle antifúngico. Diante dos resultados obtidos os derivados foram classificados como inativos e a maioria das cepas bacterianas apresentaram resistência. Com os resultados obtidos foi possível verificar que a associação cicloalquitiofeno e 4-tiazolidinona não apresentaram resultados satisfatórios para atividade antimicrobiana, no entanto, a literatura indica a possibilidade de resultados promissores em testes antiinflamatórios e antitumorais.

Objetivo general Estudiar la potencialidad de los microorganismos del gránulo de kefir y sus metabolitos para inhibir el desarrollo de hongos filamentosos, toxicogénicos y no toxicogénicos y para secuestrar micotoxinas. Objetivos específicos - Estudiar el efecto antifúngico de bacterias, levaduras y productos fermentados con kefir sobre los hongos toxicogénicos y no toxicogénicos. - Analizar el efecto que ejercen los ácidos orgánicos puros y en mezclas en concentraciones similares a las presentes en los productos fermentados con kefir, en la inhibición del crecimiento de hongos filamentosos toxicogénicos y no toxicogénicos. - Determinar la capacidad de los microorganismos totales del kefir y de los lactobacilos y las levaduras aislados del gránulo de kefir para capturar aflatoxina AFB1 bajo diferentes condiciones de cultivo. - Evaluar la aplicación de diferentes microorganismos del kefir en la extensión de la vida útil y en las propiedades sensoriales de arepas de maíz y alimento para pollos.

O Passiflora edulis Sims (maracujá-amarelo) pertence à família Passifloraceae que possui cerca de 16 gêneros e 600 espécies. O gênero Passiflora é considerado o mais representativo, com 135 espécies vegetais. O presente estudo teve como objetivo avaliar o perfil fitoquímico e a atividade antimicrobiana in vitro do extrato das sementes de Passiflora edulis Sims e desenvolver formulações farmacêuticas. Observou-se na triagem fitoquímica a presença de fenóis como flavonoides, taninos condensados e cumarinas além de saponinas e alcaloides. A quantificação de polifenóis totais e flavonoides foram realizadas totalizando 480 ± 4,833 (mgGA)/g e 12,4 ± 0,014 (mgQE)/g respectivamente. Foram identificadas nas análises de CCD o aparecimento sugestivo de óleo fixo na fração hexânica revelada com vapores de iodo e presença de compostos fenólicos nas frações diclorometano e acetato de etila utilizando fase móvel hexano e acetato de etila (Hex:AcOEt) quando revelada com FeCl3. As análises por LC-MSn forneceram os perfis de fragmentação do composto fenólico (CF) confirmando a existência de uma nova molécula orgânica Isoflavona. O extrato apresentou quinze vezes maior potencial antioxidante quando comparado ao padrão trolox (mg/g). Utilizou-se as técnicas de perfuração em ágar e macrodiluição com o extrato e as formulações farmacêuticas desenvolvidas: gel 5%, solução 1% e sabonete íntimo 5% com suas estabilidades verificadas por três dias, além da avaliação do controle de qualidade microbiológico. O extrato apresentou maior potencial de inibição contra bactérias Gram-positivas para o isolado clínico de Enterococcus faecalis (10,50 mm) e as formulações não manifestaram atividade pela técnica em ágar. As análises quantitativas confirmaram melhor potencial bactericida do extrato contra Enterococcus faecalis CBM (0,6 mg/mL) e o gel apresentou melhor atividade contra Corynebacterium diphtheriae ATCC 27010 CBM (0,017 mg/mL). A melhor ação do extrato foi contra o sorotipo EAEC 042 (11,33 mm) de todas as bactérias Gram-negativas estudas pela técnica em ágar. A resposta do extrato com melhor ação bactericida nas análises quantitativas foi contra Morganella morganii (0,6 mg/mL). Neste estudo as melhores respostas observadas foram contra os isolados clínicos de Candida albicans, Candida tropicalis e Candida glabrata, onde o extrato e as formulações apresentaram forte potencial antifúngico. Houve resistência de Candida parapsilosis sobre o extrato e as formulações farmacêuticas. E apenas a solução 1% não apresentou nenhuma atividade sobre os micro-organismos analisados pelas técnicas descritas. / Passiflora edulis Sims (Passion fruit) belongs to Passifloraceae family which has about 16 genera and 600 species. The Passiflora genus is considered the most representative, with 135 plant species. This study aimed to evaluate the phytochemical profile, and the in vitro antimicrobial activity of extract from the seed of Passiflora edulis Sims, and to develop pharmaceutical formulations. It was observed in phytochemical screening, the presence of phenols, such as flavonoids, condensed tannins, and coumarins, also saponins and alkaloids. Quantification of total polyphenols and flavonoids were held totaling 480 ± 4,833 (mgGA)/g e 12,4 ± 0,014 (mgQE)/g, respectively. It was found in the Thin Layer Chromatography Analysis, the suggestive appearance of fixed oil in hexane fraction revealed, with iodine vapor, and presence of phenolic compounds in the dichloromethane and ethyl acetate fractions by using the mobile phase of hexane and ethyl acetate (Hex:AcOEt) when revealed using FeCl3. The LC-MSn analysis provided the fragmentation profile of the phenolic compound (PC) confirming the existence of a new Isoflavone organic molecule. The extract showed potential antioxidant fifteen times greater when compared to standard trolox (mg/g). It was used diffusion in agar and microdilution techniques, with the extract and pharmaceutical formulations developed: 5% gel, 1% solution, and 5% intimate soap with its stability checked for three days, also with the evaluation of the microbiological quality control. The extract has shown greater inhibition potential on Gram-positive bacteria for the clinical isolate of Enterococcus faecalis (10.50 mm), and formulations have not shown activity by agar method. Quantitative analysis has confirmed better bactericidal potential of extract on Enterococcus faecalis MBC (0.6mg/mL), and the gel has shown better activity on Corynebacterium diphtheriae ATCC 27010 MBC (0.017mg/mL). The extract has shown better effect on 042 EAEC serotype (11.33 mm) of all Gram-negative bacteria studied by the technique in agar. The response of the extract with better bactericidal effect on quantitative analysis was on Morganella morganii (0.6mg/mL). In this study, the best responses were observed on clinical isolates of Candida albicans, Candida tropicalis and Candida glabrata, wherein the extract and the formulations showed strong antifungal potential. There was resistance from Candida parapsilosis on the extract, and the pharmaceutical formulations. Only 1% of the solution haven’t showed activity on the microorganisms analyzed by the techniques described.

A cultura do mamão exerce uma grande importância para a fruticultura nacional em função de aspectos sociais e econômicos, destacando o Brasil como um dos grandes produtores mundiais da fruta. Entre os fatores biológicos destacam-se a ação de fitopatógenos que provocam grandes prejuízos em condições de campo e também em pós-colheita. Com isso, aumenta-se a procura por novos produtos de base natural que auxiliem na redução dessas perdas. Desta forma, objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito de diferentes óleos essenciais associados a biofilmes no controle da antracnose do mamoeiro e na melhoria da qualidade dos frutos em póscolheita. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado em todos os ensaios. Dentre os tratamentos, biofilmes foram utilizados: gelatina, parafina e óleo de girassol os quais foram incorporados aos óleos essenciais de noni (Morinda citrifolia), Alecrim pimenta (Lippia sidoides) e seus respectivos compostos majoritários representados pelo ácido octanóico e timol. Após os tratamentos e decorridos 24 h, os frutos foram inoculadas com discos de 6 mm de diâmetro de C. gloeosporioides, e mantidos em câmara úmida por dez dias em temperatura ambiente de 27 ± 3ºC. Os óleos essenciais apresentara efici ncia significativa na m ê inibição da germinação de conídios de Colletotrichum gloeosporioides. O controle da doença, foi avaliado de acordo com a Área Abaixo da Curva de Progresso da Doença (AACPD), onde constatou-se que o biofilme mais eficiente foi o de parafina com noni. Verificou-se que todos os óleos essenciais reduziram a germinação de conídios de C. gloeosporioides, em função do aumento das concentrações. Com relação ao crescimento micelial observou-se que os óleos essenciais de noni e lippia obtiveram maior efeito inibitório. Na avaliação da perda de massa dos frutos foram observados menores perdas no tratamento utilizando parafina incorporado ao óleo essencial de alecrim pimenta e parafina incorporado ao óleo essencial de noni. Com relação à influência do tratamento sobre o período de amadurecimento dos frutos o óleo de girassol + noni seguido de óleo de girassol + ácido octanóico mantiveram os frutos sem amadurecer por maior tempo. Através dos resultados foi possível concluir que os biofilmes incorporados com óleos essenciais são uma opção viável para o controle de C. gloeosporioides em mamão e para manutenção de sua qualidade póscolheita. / The papaya culture has great importance for national fruit growing due to its social and economic aspects, highlighting Brazil as one of the world's great fruit producers. Among the biological factors are the action of phytopathogens that cause great damage in field conditions and also in post-harvest. This will increase the demand for new natural-based products to help reduce these losses. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of different essential oils associated with biofilms in the papaya anthracnose control and in the post-harvest quality of fruits. A completely randomized design was used in all trials. Among the treatments, biofilms were used: gelatin, paraffin and sunflower oil which were incorporated into the essential oils of noni (Morinda citrifolia), rosemary pepper (Lippia sidoides) and their respective major compounds represented by octanoic acid and thymol. After treatments and after 24 h, the fruits were inoculated with disks of 6 mm diameter of C. gloeosporioides, and kept in a humid chamber for ten days at room temperature of 27 ± 3ºC. The essential oils presented significant efficiency in the inhibition of the conidial germination of Colletotrichum gloeosporioides. Disease control was assessed according to the Area Under the Disease Progression Curve (AACPD), where it w u h h m biofilm was paraffin with noni. It was verified that all the essential oils reduced the germination of conidia of C. gloeosporioides, due to the increase of the concentrations. Regarding mycelial growth, it was observed that the essential oils of noni and lippia had a greater inhibitory effect. In the evaluation of the loss of mass of the fruits were observed lower losses in the treatment using paraffin incorporated into the essential oil of rosemary pepper and paraffin incorporated into essential oil of noni. Regarding the influence of the treatment on the ripening period of the fruits, the sunflower oil + noni followed by sunflower oil + octanoic acid maintained the fruits without maturing for a longer time. Through the results it was possible to conclude that biofilms incorporated with essential oils are a viable option for the control of C. gloeosporioides in papaya and for maintenance of its post-harvest quality.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-02-06T20:30:27Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Felipe Souto Araújo - 2014..pdf: 3055145 bytes, checksum: 201375acf3007e213c1265f0cae0ff5e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-19T14:44:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Felipe Souto Araújo - 2014..pdf: 3055145 bytes, checksum: 201375acf3007e213c1265f0cae0ff5e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-19T14:44:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Felipe Souto Araújo - 2014..pdf: 3055145 bytes, checksum: 201375acf3007e213c1265f0cae0ff5e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-06-02 / Paracoccidioides spp, dimorphic pathogenic fungi, is the etiologic agent of paracoccidioidomycosis (PCM). PCM is an endemic disease that affects at least 10 million people in Latin America, causing severe public health problem. The drugs used against pathogenic fungi have various side effects and have limited efficacy, therefore there is an inevitable and urgent medical needing for the development of new antifungal drugs. In the present study, we evaluated the transcriptional profile of Paracoccidioides spp exposed to argentilactone, a constituent of the essential oil of Hyptis ovalifolia. A total of 1,058 genes were identified, of which 208 were up-regulated and 850 down-regulated. The cell rescue, defense and virulence, with a total of 26 genes, was a functional category with a large number of genes induced, among them, heat shock protein 90 (hsp 90), cytochrome c peroxidase (ccp), hemoglobin ligant RBT5 (rbt5) and superoxide dismutase (sod). Quantitative real-time PCR revealed an increase in the expression level of all those genes. Enzymatic assay showed a significant increase in SOD activity. The reduced growth of Pbhsp90-aRNA, Pbccp-aRNA, Pbsod-aRNA, Pbrbt5-aRNA isolates in the presence of argentilactone indicates the importance of these genes in Paracoccidioides spp responding to argentilacone. Paracoccidioides spp cell wall was also evaluated. The results showed that argentilactone causes a decrease in the levels of polymers of the cell wall. These results suggest that argentilactone is a potential candidate for antifungal therapy. / Paracoccidioides spp, fungo patogênico dimórfico, é o agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM). PCM é uma doença endêmica que afeta pelo menos 10 milhões de pessoas na América Latina, causando grave problema de saúde pública. Os medicamentos usados contra fungos patogênicos têm vários efeitos secundários e têm eficácia limitada, por conseguinte, existe uma inevitável e urgente necessidade médica para o desenvolvimento de novas drogas anti-fúngicas. No presente estudo, foi avaliado o perfil transcricional de Paracoccidioides spp expostos a argentilactona, um componente do óleo essencial de Hyptis ovalifolia. Um total de 1.058 genes foram identificados, dos quais 208 foram induzidos e 850 reprimidos. Resgate celular, defesa e virulência, com um total de 26 genes, foi uma categoria funcional com um grande número de genes induzidos, entre eles, proteína de choque térmico 90 (HSP 90), citocromo c peroxidase (CCP), hemoglobina ligante RBT5 (rbt5) e superóxido dismutase (SOD). Quantitative real-time PCR revelou um aumento do nível de expressão de todos esses genes. Ensaio enzimático mostrou um aumento significativo na atividade de SOD. O crescimento reduzido de Pbhsp90-aRNA, Pbccp-aRNA, Pbsod-aRNA, Pbrbt5-aRNA na presença de argentilactona indica a importância desses genes em Paracoccidioides spp respondendo a argentilacona. Parede celular de Paracoccidioides spp também foi avaliada. Os resultados mostraram que argentilactona provoca uma diminuição nos níveis de polímeros da parede celular. Estes resultados sugerem que argentilactona é um candidato potencial para a terapia antifúngica.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-02-09T11:45:00Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamila Pereira da Silva - 2014.pdf: 1336089 bytes, checksum: 2658c99debc59b350392edc7239568d9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-20T10:55:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamila Pereira da Silva - 2014.pdf: 1336089 bytes, checksum: 2658c99debc59b350392edc7239568d9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-20T10:55:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamila Pereira da Silva - 2014.pdf: 1336089 bytes, checksum: 2658c99debc59b350392edc7239568d9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-05-14 / Fungal infections caused by yeasts of Cryptococcus neoformans complex have increased considerably among immunosuppressed especially in patients infected with human immunodeficiency virus (HIV). Antifungal drugs available to treat these infections have a wide spectrum of action, but the high costs, side effects, besides the acquisition of resistance of fungi make their limited effectiveness. In these circumstances, the search for new drugs is needed. In the present study, we evaluated the antifungal activity of tamoxifen, bisabolol, indinavir, didanosine, UFMG, Labiocon 241, solasodine, Labiocon 237, Clonazepam, semicarbonado Benzaldehyde, Cardanol, AB 36 and three natural extracts of Psychotria spp, Sclerolobium paniculatum, Hymenaea courbaril and cell viability and mechanism of action of the compound showed antifungal activity of 20 isolates of Cryptococcus neoformans. To evaluate the antifungal activity , we used the in vitro susceptibility to yeast broth microdilution protocol M27 - A3 ( CLSI 2008) and to verify the mechanism of action, flow cytometry was performed with the cellular marker Propidium Iodide ( PI ) and cell viability assay with MTT salt. Among the compounds analyzed, only tamoxifen and olanzapine showed inhibitory action on fungal samples at concentrations 128-256 μg/mL. Analysis by flow cytometry was performed with tamoxifen and showed that the compound did not alter the cell membrane of Cryptococcus neoformans ATCC 28957 , however, the cell viability test showed that tamoxifen was able to inhibit the metabolism of the fungus in different concentrations ranging 4-1024 μg/mL. / As infecções fúngicas causadas por leveduras do complexo Cryptococcus neoformans tem sido reduzida entre os imunossuprimidos principalmente nos pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Os antifúngicos disponíveis para o tratamento destas infecções apresentam um amplo espectro de ação, porém os altos custos, efeitos colaterais, além da aquisição de resistência dos fungos tornam sua eficácia limitada. Nestas circunstâncias, a busca por novos fármacos é necessária. No presente trabalho, foi avaliada a atividade antifúngica de tamoxifeno, bisabolol, indinavir, didanosina, Olanzapina, UFMG, Labiocon 241, Solasodina, Labiocon 237, Clonazepam, Benzaldeído semicarbonado, Cardanol, AB 36 e três extratos naturais obtidos de Psychotria spp, Sclerolobium paniculatum, Hymenaea courbaril. A viabilidade celular e o mecanismo de ação do composto que apresentou ação antifúngica sobre 20 isolados de Cryptococcus neoformans formam determinados. A atividade antifúngica foi realizada utilizando-se o método microdiluição em caldo para leveduras. Para verificar do mecanismo de ação, foi realizada a citometria de fluxo com o marcador celular Iodeto de Propídio (PI), enquanto que o teste da viabilidade celular foi obtido usando-se o sal MTT. Dentre os compostos analisados, apenas o tamoxifeno e olanzapina apresentaram ação inibitória sobre as amostras fúngicas, em concentrações de 128 a 256 μg/mL. Pela análise por citometria de fluxo com o tamoxifeno não se verificou alteração da membrana celular de Cryptococcus neoformans ATCC 28957. Entretanto, o tamoxifeno inibiu o metabolismo do fungo em diferentes concentrações, variando de 4 a 1024 μg/mL verificado pelo teste da viabilidade celular.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-27Bitstream added on 2014-06-13T20:24:16Z : No. of bitstreams: 1 diniz_jnm_dr_arafcf.pdf: 718250 bytes, checksum: ad07abef21dc44356500905c93cbf5e5 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cryptococcus neoformans é levedura capsulada saprobiota que acomete principalmente indivíduos com o sistema imunológico comprometido. Seu habitat está relacionado com algumas espécies de árvores, madeira em decomposição e fezes de pássaros, em especial de pombos do gênero Columba livia. Nas grandes cidades estas aves vêm causando diversos problemas devido a sua multiplicação intensa. Desta maneira, medidas saneantes serão de grande auxílio para controlar a população desta levedura. Assim, este estudo teve como objetivo reidentificar 67 isolados de C. neoformans de fontes ambientais e caracterizá-los quanto ao seu genótipo e perfil de sensibilidade aos antifúngicos anfotericina B, cetoconazol, itraconazol e fluconazol, utilizando o método da difusão em ágar seguindo o documento M44A e determinando a concentação inibitória mínima frente a fluconazol pelo método M27-A2, ambos preconizados pelo CLSI (Clinical Laboratory Standard Institute). Por outro lado, verificar o efeito antifúngico de extratos de plantas e sua atividade saneante em fezes de pombos comprovadamente contaminadas com isolado ATCC 90012 de C. neoformans. Todos isolados foram Mating Type α e tipo VNI. Pelo método de microdiluição, 21% (14/67) dos isolados ambientais apresentaram sensibilidade diminuída ao fluconazol com CIM de 16 μg/mL e mais de 50% (34/67) apresentaram CIM de 8 μg/mL.O extrato de Alibertia macrophylla apresentou efeito saneante com índice de eficiência de mais de 80% após 24 horas, na grande maioria dos isolados de C. neoformans. Este extrato foi estável... / Cryptococcus neoformans is a saprobiote capsuled yeast that proliferates mainly in individuals who have the immunologic system compromised. It natural habitat is related to some species of trees, decaying wood and bird excrement, in special Columba livia doves. In big cities, these birds have caused many problems due to its intense proliferation and the cleaning measures will be of great help in controlling this yeast. The aim of this study was to re-identify 67 C. neoformans isolates and characterize them according to their genotype and susceptibility to antifungal amphotericin B, cetoconazole, itraconazole e fluconazole, using the method of agar diffusion following the M44A document and determining the minimum inhibitory concentration to fluconazole by method M27-A2, both recommended by the CLSI (Clinical Laboratory Standard Institute). On the other hand, the verification of the effect of plant extracts e and their cleaning activity on dove excrement previously contaminated with isolate ATCC 90012 of C. neoformans. All the isolates were Mating Type α and VNI. For the microdilution method, 21% (14/67) of the environmental isolates showed decreased susceptibility to fluconazole with MIC of 16 mg/mL and more than 50% (34/67) had MICs of 8 mg/mL. The extract of Alibertia macrophylla presented clean effect with index of efficiency of 80% after 24 hours, in the great majority of C. neoformans isolates. This extract was stable to the light incidence, to the heat and variation of pH. Our results are of great use for the development and utilization of active natural compounds in the fight against C. neoformans from environmental and the study of other variables are necessary for the viability of its use as a domestic cleaner.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 12262121 bytes, checksum: 2c0c8aa4e0b4b5920d10e406ad12ef1a (MD5) Previous issue date: 2012-08-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Trichophyton rubrum is the main responsible microorganism of chronic cases of dermatophytosis on nails, feet, hands, torso, neck and scalp, with high rates of resistance to antifungal agents. The clinical and epidemiological importance concerned dermatophytosis encourage studies for searching of new antifungal agents. In this context, attention has been drawn to the products from aromatic plants, especially essential oils and their components. The monoterpenes stands out due to widespread recognition of its antimicrobial activity. Therefore, it was investigated the antifungal activity of the monoterpenes citronellal, geraniol and citronellol against 14 strains of T. rubrum. For this, it was determined the minimum inhibitory concentration (MIC) of each drug, as well as their effects on mycelial growth (dry weight), the viability (logCFU/mL), conidial germination and morphogenesis. The action of the drugs on the fungal cell wall (test with sorbitol) and on the fungal cell membrane (release of cellular material, complex with ergosterol and ergosterol synthesis) were also investigated. Moreover, it was analyzed the interference on the infectivity of T. rubrum (in vitro nail infection). Among the tested monoterpenes, geraniol and citronellol were the most potent, since they showed lower MIC values. Assays were performed with geraniol (MIC = 32 μg/mL and MICx2 = 64 μg/mL) and citronellol (MIC = 128 μg/mL and MICx2 = 256 μg/mL), they significantly inhibited the mycelial growth and conidial germination. The monoterpenes showed fungicidal effect and caused caused abnormalities in morphogenesis showing large, short and twisted hyphal in the strains ATCC1683 and LM422. With sorbitol, the MIC values of these monoterpenes increased against the strain ATCC1683, suggesting action on the fungal cell wall. The results of the assays on the cell membrane showed that geraniol and citronellol released intracellular material, formed complexes with the ergosterol and decreased content of ergosterol. Therefore, the results suggest that that geraniol and citronellol act on the membrane of T. rubrum by a mechanism that appears to involve a complex with ergosterol and inhibition its biosynthesis, indirectly affecting the cell wall and causing cell lysis. Moreover, geraniol and citronellol at MIC and MICx2 also prevented infection of T. rubrum on nail fragments. Thus, the monoterpenes geraniol and citronellol are presented as promising antifungal agents, with potential applicability in the treatment of dermatophytosis, especially against the agent T. rubrum. / Trichophyton rubrum é o principal agente responsável por quadros crônicos de dermatofitoses em unhas, nos pés, nas mãos, no tronco, pescoço e couro cabeludo, com altos índices de resistência aos antifúngicos. A importância clínica e epidemiológica dispensada às dermatofitoses impulsionam estudos que visam à descoberta de novos agentes antifúngicos. Neste contexto, grande atenção vem sendo dada aos produtos oriundos de plantas aromáticas, especialmente os óleos essenciais e seus componentes. Entre estes, os monoterpenos se destacam por possuírem amplo reconhecimento do seu poder antimicrobiano. Por isso, foi investigada a atividade antifúngica dos monoterpenos citronelal, geraniol e citronelol frente a 14 cepas de T. rubrum. Para tal, foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) de cada produto, como também os seus efeitos sobre o crescimento micelial (massa seca), a viabilidade (LogUFC/mL), a germinação de conídios e a morfogênese de T. rubrum. A ação dos produtos sobre a parede celular fúngica (ensaio com sorbitol) e sobre a membrana plasmática fúngica (perda de material citoplasmático, complexação com ergosterol e síntese de ergosterol) também foi investigada. Além disso, foi analisada a interferência sobre a infectividade de T. rubrum (infecção in vitro em unhas). Entre os monoterpenos testados, geraniol e citronelol foram os mais potentes, pois apresentaram menores valores de CIM. Ensaios foram realizados com geraniol (CIM = 32 μg/mL e CIMx2 = 64 μg/mL) e citronelol (CIM = 128 μg/mL e CIMx2 = 256 μg/mL), nos quais eles inibiram significativamente o desenvolvimento micelial e a germinação dos conídios. Os monoterpenos apresentaram efeito fungicida e provocaram alterações na morfogênese formando hifas largas, curtas e tortuosas nas cepas ATCC1683 e LM422. Com sorbitol, os valores de CIM desses monoterpenos aumentaram frente à cepa ATCC1683, sugerindo ação sobre a parede celular fúngica. Os resultados dos ensaios sobre a membrana plasmática mostraram que geraniol e citronelol provocaram liberação de material intracelular, formaram complexos com o ergosterol e diminuíram o conteúdo de ergosterol. Diante dos resultados, sugere-se que o geraniol e citronelol atuam sobre a membrana de T. rubrum por um mecanismo que parece envolver a complexação com o ergosterol e inibição de sua biossíntese, afetando indiretamente a parede celular e ocasionando lise celular. Além do mais, geraniol e citronelol, na CIM e CIMx2, também inibiram a infecção de T. rubrum em fragmentos ungueais. Dessa maneira, os monoterpenos geraniol e citronelol se apresentam como promissores agentes antifúngicos, com potencial aplicabilidade no tratamento das dermatofitoses, em especial contra o agente T. rubrum.

Submitted by CAMILA SOUZA SANTOS null (cssantos12@gmail.com) on 2016-03-26T15:11:36Z No. of bitstreams: 1 dissertação final camila.pdf: 6327362 bytes, checksum: be4f63024f7b4a50aa4f8f1e10987053 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-28T14:44:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_cs_me_araiq_par.pdf: 796529 bytes, checksum: 5e16538a32b063bcef781b76b10382c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-28T14:44:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_cs_me_araiq_par.pdf: 796529 bytes, checksum: 5e16538a32b063bcef781b76b10382c2 (MD5) Previous issue date: 2016-03-14 / O presente trabalho apresenta os resultados obtidos sobre o estudo químico e biológico dos fungos endolíticos Nodulisporium sp. e Microascus sp. associados à alga vermelha Asparagopsis taxiformis. Para tanto, fez-se uso das técnicas cromatográficas de separação CLAE (cromatografia líquida de alta eficiência), CG-EM (cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas) e cromatografia em coluna (CC), além da avaliação dos potenciais antifúngico, anticolinesterásico e citotóxico dos extratos brutos, frações e subfrações de Nodulisporium sp. e Microascus sp. O estudo químico levou ao isolamento de quatro substâncias pertencentes à classe das diidroisocumarinas (substâncias S1, S2, S10 e S11), duas dicetopiperazinas (substâncias S3 e S4), um composto fenólico (S12), uma isoflavona (S8), um derivado hidroxiimino (S9), uma mistura contendo uma amida (S5) e um diol vicinal (S6), além do isolamento de um composto aromático (substância S7), ainda em fase de identificação. As estruturas das substâncias isoladas foram identificadas com base nos dados espectroscópicos de ressonância magnética nuclear uni e bidimensional (RMN de 1H, RMN de 13C, TOCSY-1D, HSQC, HMBC, COSY e HSQC-TOCSY), UV-Vis e espectrometria de massas (EM). Comporta ressaltar que o diol vicinal (S6) está sendo descrito pela primeira vez na literatura e que as demais substâncias isoladas não haviam sido relatadas para os gêneros Nodulisporium ou Microascus. A avaliação das atividades antifúngica e anticolinesterásica evidenciaram o potencial de bioatividade de extratos e frações de Nodulisporium sp. e Microascus sp, sendo reveladas atividades forte e moderada frente às enzimas acetilcolinesterase humana e de enguia elétrica. Este é o primeiro estudo químico e biológico relatado na literatura para os endófitos Nodulisporium sp. e Microascus sp. associados à alga vermelha Asparagopsis taxiformis e seus resultados promissores destacam a elevada quimiodiversidade dos extratos e frações dos fungos endofíticos obtidos do ambiente marinho, bem como seu potencial de bioatividade. Evidenciam ainda a importância de se aprofundar os estudos destas linhagens fúngicas visando contribuições relevantes na busca de protótipos para novos agentes terapêuticos através da exploração sustentável da biodiversidade marinha brasileira. / This work presents results from the chemical and biological study of endophytic fungal strains of Nodulisporium sp and Microascus sp associated to the red alga Asparagopsis taxiformis. Chromatographic separation techniques as HPLC, GC-MS and CC have been used in addition to bioassays for evaluation of the antifungal, anticholinesterasic and cytotoxic potential of crude extracts, fractions and subfractions of Nodulisporium sp and Microascus sp fungal strains. The chemical study led to the isolation of four dihydroisocoumarins (compounds S1, S2, S10 and S11), two diketopiperazines (compounds S3 and S4), one phenolic compound (S12), one isoflavone (S8), one hydroxyl-imino derivative (S9), a mixture containing one amide (S5) and one novel vicinal diol (S6), in addition to one aromatic compound (compounds S7) still under structural investigation. Their structures were identified based on 1D and 2D NMR spectroscopic data (1H and 13C NMR, TOCSY-1D, HSQC, HMBC, COSY and HSQC-TOCSY), UV-Vis and mass spectrometry (MS). Compound S6 is an aliphatic vicinal diol and is herein described as a novel compound whereas the remaining compounds had not been described before neither for Nodulisporium nor Microascus genera. Antifungal and anticholinesterase activities evaluation of extracts and fractions of Nodulisporium sp e Microascus sp evidenced their strong and moderate potential against human and electric eel acetylcholinesterase enzymes. This is the first report on the chemical and biological studies of endophytic fungi Nodulisporium sp and Microascus sp, associated to the red algae Asparagopsis taxiformis. Their promising results highlight the outstanding chemodiversity of extracts and fractions from such fungal strains from marine environment as well as their bioactivity potential. They also evidence the importance of further investigating such fungal strains aiming at relevant contributions in the search for novel therapeutic agents through sustainable exploration of Brazilian marine biodiversity.

Submitted by Cristhiane Guerra (cristhiane.guerra@gmail.com) on 2017-02-01T12:59:21Z No. of bitstreams: 1 arquivotototal.pdf: 10138565 bytes, checksum: 12bbe7fe2ab950106307c9ed9db462d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-01T12:59:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivotototal.pdf: 10138565 bytes, checksum: 12bbe7fe2ab950106307c9ed9db462d2 (MD5) Previous issue date: 2016-08-12 / This study aimed to prepare a collection of benzylamides to-halogenated derivatives of structurally related benzoic and cinnamic acids by coupling reactions with 4- (chlorine, bromine and fluro) benzylamines using the Benzotriazol-1-yloxy)tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate (BOP) as coupling agent. All compounds prepared were subjected to antimicrobial testing the method broth microdilution, with the antimicrobial control gentamicin, amikacin, norfloxacin, penicillin and nystatin. Also, a study was conducted of quantitative structure-activity relationship (QSAR) using computational software like KNIME v. 3.1.0 and Volsurf v. 1.0.7. The study achieved the preparation of amides 22 and 10 derived ethers and esters of vanillic acid amide, with yields ranging from 29-89%, including 30 novel compounds in the literature and identified by spectroscopic methods such as Infrared and 1H and 13C Magnetic Resonance (NMR) as well as by high resolution mass spectrometry. The antimicrobial evaluation showed that eleven amides showed antifungal activity, an amide presented an antibacterial activity and no amide derivative of vanillic acid showed antimicrobial activity. The QSAR study showed that molecular descriptors related to hydrophobicity, hydrophilicity, pH change, energy interaction and energy difference as DRDRDR, DRDRAC, L4LgS, IW4 and DD2, respectively, influence the antifungal activity of haloamides. It follows that the NR14 amides (Gallic amide) and NR15 (vanillic amide) had considerable Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) in antifungal essays, and NR4 (4-methoxycinnamic amide) in the antibacterial test, considered the most active antimicrobial. This result shows that spacer groups as double bond of cinnamic derivatives and addition of hydroxyls in the position para and methoxyl in the meta position on the aromatic ring of the amide enhance the antifungal activity. / O presente trabalho teve como finalidade preparar uma coleção de benzilamidas para-halogenadas derivadas de ácidos cinâmicos e benzoicos estruturalmente relacionadas através de reações de acoplamento com 4-(cloro, fluro e bromo) benzilaminas, utilizando o benzotriazol-1-iloxi-tris-(dimetilamino)-fosfônio (BOP) como agente de acoplamento. Além disso, foram preparados derivados éteres e ésteres da amida do ácido vanílico. Todos os compostos preparados foram submetidos a testes antimicrobianos pelo método microdiluição em caldo, tendo como controle antimicrobiano a gentamicina, a amicacina, o norfloxacino, a penicilina e a nistatina. Também, foi realizado um estudo de relação estrutura-atividade quantitativo (QSAR) utilizando softwares computacionais como o KNIME v. 3.1.0 e Volsurf v. 1.0.7. O estudo realizado resultou na obtenção de 22 amidas e 10 derivados éteres e ésteres da amida do ácido vanílico, com os rendimentos variando entre 29-89%, sendo 30 compostos inéditos na literatura e identificados por métodos espectroscópicos de infravermelho e ressonância magnética de 1H e 13C bem como por espectrometria de massas de alta resolução. A avaliação antimicrobiana demonstrou que onze amidas apresentaram atividade antifúngica, apenas uma apresentou atividade antibacteriana e nenhum derivado da amida do ácido vanílico apresentou atividade antimicrobiana. O estudo QSAR demonstrou que descritores moleculares relacionados à hidrofobicidade, hidrofilia, variação de pH, momentos de interação de energia e diferença de energia como DRDRDR, DRDRAC, L4LgS, IW4 e DD2, respectivamente, influenciam na atividade antifúngica das haloamidas. Conclui-se que as amidas NR14 (amida gálica) e NR15 (amida vanílica) apresentam concentrações inibitórias mínimas antifúngicas consideráveis (CIM), assim como NR4 (amida 4-metoxicinâmica) no ensaio antibacteriano. Esse resultado demonstra que grupos espaçadores como a dupla ligação dos derivados cinâmicos e adição de hidroxilas na posição para e metoxila na posição meta no anel aromático da amida potencializam a atividade antifúngica.