CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The species Lippia alba (erva cidreira) is widely used in folk medicine. The composition of essential oil varies quantitative and qualitative, leading to the classification of different chemotypes. A rich pharmacological potential is related to the wide variation in chemical composition of these oils, which arouses the interest of researchers in establishing scientific explanations for such activities. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial and antioxidant activities of essential oils of chemotype I, II and III, leaves of L. alba, and to investigate their possible relationships with the chemical composition of their essential oils. The chemical characterization of constituents of essential oils was performed using GC-MS by determining the percentage of constituents present in the samples. The antimicrobial activity of oils was determined by agar diffusion, and MIC and CLM methods by microdilution broth culture and plated on agar, respectively. The antioxidant activity was assessed by measurement of TBARS and by determining the activity of removal of free radicals by DPPH. Essential oils from leaves of L. alba were recognized by the presence of its major constituents in chemotype I (citral-myrcene), chemotype II (citral-limonene) and chemotype III (carvone-limonene). The three essential oils showed activity against S. aureus, even resistant, and C. albicans. For Gram-negative bacteria, the three chemotypes present action on the A. lwoffi; the chemotypes II and III inhibited the growth of A. baumannii, and only the chemotype II was that acted on E. coli ATCC 10536. The lowest MIC obtained for CLM and essential oils of chemotypes I, II and III were 0,312 and 0,625mg/mL, 0,312 and 0,312mg/mL and 0,625 and 0,625mg/mL, respectively. The diffusion technique in agar served as a preliminary step in determining the antimicrobial activity and MIC determination by broth dilution accompanied by reading of optical densities of cultures showed absorbance values similar to the positive control group by a certain concentration and then increased indicating a higher microbial growth. Three chemotypes of OELA reduced lipid peroxidation induced in the hippocampus and brain of rats, but showed no scavenging activity of free radicals measured by the DPPH test. Thus, the results suggest that essential oils of chemotype I, II and III of L. alba, have excellent antimicrobial activity, especially on S. aureus and C. albicans, whereas the diffusion method is an excellent screening method, the dilution method, by visual inspection and reading of absorbance, in addition to determine the MIC, the CLM and evaluate the kinetics of inhibition of microbial growth, the antioxidant potential shown OELA by the hippocampus and cortex of rats makes these products a potential pharmacological tool in the treatment of neurodegenerative diseases, however, for that additional studies are needed, and that differences in the composition of the oil is a factor to be considered important in studies pharmacological. / A espÃcie Lippia alba (erva-cidreira) à muito usada na medicina popular. A composiÃÃo de seu Ãleo essencial apresenta variaÃÃes quantitativas e qualitativas, levando à classificaÃÃo de diferentes quimiotipos. Um rico potencial farmacolÃgico està relacionado à ampla variaÃÃo na composiÃÃo quÃmica desses Ãleos, o que desperta o interesse de pesquisadores em estabelecer explicaÃÃes cientÃficas para tais atividades. O objetivo do trabalho foi avaliar as atividades antimicrobiana e antioxidante dos Ãleos essenciais dos quimiotipo I, II e III, de folhas, de L. alba, bem como investigar suas possÃveis relaÃÃes com a composiÃÃo quÃmica de seus Ãleos essenciais. A caracterizaÃÃo quÃmica dos constituintes dos Ãleos essenciais foi realizada utilizando a CG-MS, determinando-se a porcentagem dos constituintes presentes nas amostras. O potencial antimicrobiano dos Ãleos foi determinado pelo mÃtodo de difusÃo em Ãgar, e as CIM e CLM pelos mÃtodos da microdiluiÃÃo em caldo de cultura e do plaqueamento em Ãgar, respectivamente. A atividade antioxidante foi avaliada pela dosagem de TBARS e pela determinaÃÃo da atividade de remoÃÃo de radicais livres pelo DPPH. Os Ãleos essenciais das folhas de L. alba foram reconhecidos pela presenÃa de seus constituintes majoritÃrios em quimiotipo I (citral-mirceno); quimiotipo II (citral-limoneno) e quimiotipo III (carvona-limoneno). Os trÃs Ãleos essenciais apresentaram atividade sobre S. aureus, mesmo as multirresistentes, e C. albicans. Para as bactÃrias Gram-negativas, os trÃs quimiotipos apresentaram aÃÃo sobre o A. lwoffi; os quimiotipos II e III inibiram o crescimento do A. baumannii; e apenas o quimiotipo II foi que teve aÃÃo sobre E. coli ATCC 10536. As mais baixas CIM e CLM obtidas para os Ãleos essenciais dos quimiotipos I, II e III, foram de 0,312 e 0,625mg/mL, 0,312 e 0,312mg/mL e 0,625 e 0,625mg/mL, respectivamente. A tÃcnica de difusÃo em Ãgar serviu como uma etapa preliminar na determinaÃÃo do potencial antimicrobiano e a determinaÃÃo da CIM por diluiÃÃo em caldo acompanhada de leitura das densidades Ãticas das culturas, mostrou valores de absorbÃncias semelhantes ao grupo controle positivo atà uma determinada concentraÃÃo e entÃo aumentaram, indicando um maior crescimento microbiano. Os trÃs quimiotipos do OELA reduziram a peroxidaÃÃo lipÃdica induzida no hipocampo e cÃrebro de ratos, contudo nÃo apresentaram atividade seqÃestradora de radicais livres mensuradas atravÃs do teste do DPPH. Assim, os resultados sugerem que os Ãleos essenciais dos quimiotipo I, II e III de L. alba, possuem excelente atividade antimicrobiana, principalmente sobre S.aureus e C. albicans; que o mÃtodo de difusÃo à um excelente mÃtodo de triagem; que o mÃtodo da diluiÃÃo, por inspeÃÃo visual e leitura de absorbÃncia, permite determinar alem da CIM, a CLM e avaliar a cinÃtica de inibiÃÃo de crescimento microbiano; o potencial antioxidante mostrado pelo OELA no hipocampo e cÃrtex de rato, torna esses produtos uma ferramenta farmacolÃgica em potencial no tratamento de doenÃas neurodegenerativas, contudo, para isso estudos adicionais sÃo necessÃrios; e que as diferenÃas na composiÃÃo do Ãleo à um fator que deve ser considerado importante nos estudos farmacolÃgicos.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Neste trabalho apresenta-se o estudo da composiÃÃo quÃmica de Senna martiana (Benth) Irw. e Barn. pertencente à famÃlia das Leguminosas (subfamÃlia Papilonoideae, sinÃnimo Fabaceae). Norteou-se este estudo para o conhecimento dos constituintes quÃmicos volÃteis das folhas e dos constituintes fixos das inflorescÃncias e do caule. Outro objeto de interesse foi a avaliaÃÃo da atividade antioxidante dos extratos hidroalcoÃlicos dos ÃrgÃos da planta acima citados. O levantamento bibliogrÃfico revelou a ausÃncia de estudos fitoquÃmicos, biolÃgicos ou farmacolÃgicos realizados com esta espÃcie, motivo pelo qual a planta foi selecionada para estudo. O estudo fitoquÃmico da planta foi realizado utilizando tÃcnicas como cromatografia por adsorÃÃo em coluna aberta (CC); cromatografia em camada delgada (CCD), e na determinaÃÃo das estruturas tÃcnicas espectroscÃpicas tais como: absorÃÃo na regiÃo do infravermelho (IV); RessonÃncia MagnÃtica Nuclear de HidrogÃnio (RMN 1H); RessonÃncia MagnÃtica Nuclear de Carbono 13 (RMN 13C) uni e bidimensionais. A extraÃÃo dos constituintes volÃteis foi realizada por hidrodestilaÃÃo usando-se forno de microondas como fonte de aquecimento e na avaliaÃÃo da atividade antioxidante utilizou-se como tÃcnicas de anÃlise, a capacidade seqÃestradora de radicais livres (mÃtodo DPPH) e a medida do potencial antioxidante (mÃtodo DHBA). O estudo do Ãleo fixo das sementes de Senna martiana, resultou na identificaÃÃo de quatorze Ãcidos graxos, sendo majoritÃrios, o Ãcido hexadecanÃico (37%) e o Ãcido 9,12-octadecanÃico (34,1%). O estudo cromatogrÃfico do extrato etanÃlico do caule de Senna martiana possibilitou o isolamento e identificaÃÃo do Ãcido triacontanÃico (Ãc. melÃssico), -sitosterol, de trÃs antraquinonas 1,8-dihidroxiladas, crisofanol, fisciona e aloe-emodina, cujas identidades quÃmicas foram confirmadas pela anÃlise de seus espectros e comparaÃÃo com os dados da literatura. Dentre os constituintes isolados obteve-se um heterosÃdeo de uma biantrona do crisofanol inÃdito na literatura. / This work presents the study of the chemical composition of Senna martiana (Benth) Irw. and Barn. belonging to the family of Leguminosas (subfamily Papilonoideae, synonym Fabaceae). this study was orientated for the volatile chemical representatives of the leaves knowledge and of the fixed representatives of the flowers and of the stem. Another object of interest was the evaluation of the antioxidant activity of the extracts hidroalcoÃlicos of the organs of the plant above mentioned. The bibliographical rising revealed the absence of studies phytochemistry, biological or pharmacolÃgics accomplished with this species, reason for which the plant was selected for study. The study phytochemistry of the plant was accomplished using techniques as cromatographic for adsorption in open column (CC); cromatographic in thin layer (CCD), and in the determination of the structures technical such espectroscopic as: absorption in the area of the red band (IV); Nuclear Magnetic Resonance of Hydrogen (RMN 1H); Nuclear Magnetic Resonance of Carbon 13 (RMN 13C) united and bidimensionais. The volatile representatives extraction was accomplished by hidrodestilacion being used microwave oven as heating source and in the evaluation of the antioxidant activity it was used as analysis techniques, the capacity kidnapper of free radicals (method DPPH) and the measure of the antioxidant potential (method DHBA). The study of the fixed oil of the seeds of Senna martiana, resulted in the identification of fourteen graxos acids, being majority, the hexadecanoic acid (37%) and the 9,12-octadecanoic acid (34,1%). The study cromatographic of the extract ethanolic of the stem of Senna martiana made possible the isolation and identification of the triacontanoic acid (melÃssico ac.), -sitosterol, of three anthraquinones 1,8-dihidroxylad, crysophanol, phyiscion and aloe-emodin, whose chemical identities were confirmed by the analysis of your spectra and comparison with the data of the literature. Among the isolated representatives it was obtained a heterosÃdeo of a bianthrone of the unpublished crysophanol in the literature.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O objetivo deste trabalho foi avaliar parÃmetros fisiolÃgicos e bioquÃmicos em trÃs espÃcies vegetais com graus diferenciados de tolerÃncia ao estresse salino, a fim de melhor entender suas diferenÃas na tolerÃncia à salinidade. Para isto, sementes de algodÃo, feijÃo-de-corda e sorgo foram semeadas em copos plÃsticos contendo vermiculita umedecida com soluÃÃo nutritiva de Hoagland  forÃa (SNH Â), sendo o experimento conduzido em casa de vegetaÃÃo. PlÃntulas de cinco dias de idade foram transferidas para meio hidropÃnico (SNH Â), onde permaneceram por um perÃodo de seis dias para aclimataÃÃo. ApÃs esse perÃodo, as plantas foram submetidas a trÃs tratamentos salinos com valores de condutividade elÃtrica (CE) de 0,9 dS m-1 (baixa salinidade), 4,0 dS m-1 (mÃdia salinidade) e 8,0 dS m-1 (alta salinidade). A coleta foi realizada aos 25 dias apÃs o inÃcio do estresse. A salinidade reduziu significativamente a Ãrea foliar e a massa seca da parte aÃrea das trÃs espÃcies estudadas, especialmente as das plantas de feijÃo-de-corda e em menor proporÃÃo as do algodÃo. O potencial osmÃtico de folhas e raÃzes das trÃs espÃcies foram significativamente reduzidos nos tratamentos a 4,0 e 8,0 dS m-1 em comparaÃÃo com o de 0,9 dS m-1, exceto nas raÃzes de sorgo. Jà o teor relativo de Ãgua foliar nÃo apresentou alteraÃÃes com o aumento da CE do meio de crescimento. Os Ãons Na+ e Cl- aumentaram nas folhas e raÃzes das trÃs espÃcies, sendo que o algodÃo foi a espÃcie que mais reteve esses Ãons nos tratamentos a 4,0 e 8,0 dS m-1. As concentraÃÃes de K+ nas folhas de algodÃo e feijÃo-de-corda foram aumentadas pelos nÃveis crescentes de salinidade, enquanto nas plantas de sorgo foram diminuÃdas. Jà nas raÃzes as concentraÃÃes desse Ãon foram significativamente reduzidas nas trÃs espÃcies. De maneira geral, nos tratamentos de mÃdia e alta salinidade comparados com o de baixa salinidade, as concentraÃÃes de NO3- foram reduzidas em folhas e raÃzes das trÃs espÃcies. Os tratamentos a mÃdia e alta salinidade reduziram as concentraÃÃes de carboidratos solÃveis no algodÃo, enquanto aumentaram no feijÃo-de-corda e no sorgo. A concentraÃÃo de proteÃna solÃvel nÃo se alterou no feijÃo-de-corda em funÃÃo da salinidade, enquanto foi reduzida nas outras duas espÃcies. Os N-aminossÃluveis foram aumentados nas trÃs espÃcies, enquanto para a prolina, esses aumentos sà foram observados a 8,0 dS m-1. De modo geral, os parÃmetros de emissÃo de fluorescÃncia da clorofila a e a leitura SPAD nÃo foram alterados pela salinidade. Os nÃveis de peroxidaÃÃo lipÃdica foram significativamente aumentados nos tratamentos de mÃdia e alta salinidade no feijÃo-de-corda, nÃo sofreram alteraÃÃo no sorgo, enquanto foram reduzidos no algodÃo, quando comparados com o de baixa salinidade. A atividade das enzimas dismutase do superÃxido (SOD), catalase (CAT), peroxidases do ascorbato (APX) e do guaiacol (GPX) em folhas, nÃo foi alterada pelos tratamentos salinos a 4,0 e 8,0 dS m-1, com exceÃÃo de reduÃÃes nas atividades da SOD e GPX no algodÃo e da CAT no feijÃo-corda e, aumentos para a GPX no sorgo. Nas raÃzes, foram observados aumentos para a SOD no algodÃo e aumentos para a GPX no sorgo e feijÃo-de-corda, enquanto houve reduÃÃes da APX e GPX para o algodÃo. Os dados de crescimento aqui apresentados confirmam a maior tolerÃncia do algodÃo e a maior sensibilidade do feijÃo-de-corda ao estresse salino, enquanto que as alteraÃÃes na peroxidaÃÃo dos lipÃdios e nas enzimas antioxidativas nos levam a sugerir que o sistema enzimÃtico antioxidativo do algodÃo parece ser mais eficiente do que o das outras duas espÃcies estudadas, na eliminaÃÃo dos danos oxidativos ocasionados pela salinidade. à possÃvel, tambÃm, que a maior capacidade do algodÃo de acumular Ãons tÃxicos (Na+ e Cl-) nos tecidos fotossintetizantes contribua, pelo menos em parte, para sua maior tolerÃncia à salinidade. / The objective of this study was to evaluate physiological and biochemical parameters in three plant species with different degrees of salt tolerance in order to better understand their differences in salinity tolerance. For this, cotton seed, bean-to-string and sorghum were sown in plastic cups containing vermiculite moistened with  Hoagland solution strength ( SNH), the experiment being conducted in a greenhouse. Seedlings of five days of age were transferred to hydroponic medium (SNH Â), where they remained for a period of six days for acclimatization. After this period, the plants were subjected to three saline treatments with values ​​of electrical conductivity (EC) of 0.9 dS m-1 (low salinity), 4.0 dS m -1 (mean salinity) and 8.0 dS m 1 (high salt). Data were collected at 25 days after the onset of stress. Salinity significantly reduced leaf area and shoot dry mass of all species, especially, bean-to-string and to a lesser extent those of cotton. The osmotic potential of leaves and roots of the three species were significantly reduced in the treatments at 4.0 and 8.0 dS m-1 compared to 0.9 dS m-1 except the root sorghum. Since the leaf relative water content did not change with the increase in the EC medium. The Na + and Cl-increased in leaves and roots of three species, and cotton was the species that most of these ions retained in treatments 4.0 and 8.0 dS m-1. The concentrations of K + in leaves of cotton and bean-to-string were increased by increasing salinity levels, while in sorghum plants were decreased. Since the roots of this ion concentrations were significantly reduced in all three species. In general, the treatment of medium and high salinity compared with the low salinity, the concentrations of NO3-were reduced in leaves and roots of three species. Treatments at medium and high salinity reduced concentrations of soluble carbohydrates in cotton, while increased in the-string-beans and sorghum. The soluble protein concentration did not change the jack bean-string a function of salinity was reduced while the other two species. The N-aminossÃluveis were increased in all three species while for proline, the increases were only observed at 8.0 dS m-1. In general, the parameters of emission of fluorescence of chlorophyll SPAD readings were not affected by the salinity. Levels were significantly increased lipid peroxidation in the treatment of medium and high salinity of the bean-string, the sorghum did not change while the cotton were reduced compared with that of low salinity. The activity of the enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), ascorbate peroxidase (APX) and guaiacol (GPX) in leaves was not affected by saline treatments at 4.0 and 8.0 dS m-1, except for reductions in the activities of SOD and GPX in cotton and string beans in CAT and GPX to increases in sorghum. In roots, increases were observed for SOD in cotton and increases for sorghum and beans in GPX-of-string while there were reductions of APX and GPX for cotton. The growth data presented here confirm the increased tolerance of cotton and the higher sensitivity of the jack bean-string to salt stress, whereas changes in lipid peroxidation and antioxidant enzymes lead us to suggest that the antioxidant enzyme system appears to be cotton more efficient than the other two species, the removal of oxidative damage caused by salinity. It is also possible that the greater ability of cotton to accumulate toxic ions (Na + and Cl-) in photosynthetic tissues contributes at least in part to its greater tolerance to salinity.

Esta dissertaÃÃo relata os resultados obtidos na avaliaÃÃo do potencial protÃico, lipÃdico e antioxidante das sementes de acerola (Malphigia glabra), graviola (Annona muricata), maracujà (Passiflora edulis), oiti (Moquilea tomentosa), manga (Mangifera indica), sapoti (Achras sapota), goiaba (Psidium guajava), ameixa (Prunus domestica), mamÃo (Carica papaya), ciriguela (Spondias purpÃrea), morango (Fragaria vesca), murici (Byrsonyma crassifolia), abacaxi (Ananas comosus) e tamarindo (Tamarindus indica) e estudo de metabÃlitos secundÃrios das sementes de maracujà empregando CO2 supercrÃtico como processo de extraÃÃo seletiva. O teor protÃico foi avaliado pelo mÃtodo de bradford, trata-se de um mÃtodo espectrofotomÃtrico que consiste em avaliar a variaÃÃo da absorbÃncia do corante comassie brilliant blue. O potencial antioxidante foi determinado pelas tÃcnicas de DHBA (baseado na inibiÃÃo da formaÃÃo do Ãcido di-hidrÃxibenzÃico) e DPPH (consiste na captura do radical livre DPPH). O teor lipÃdico foi avaliado pela anÃlise em CG/EM e CG/DIC dos Ãsteres dos Ãcidos graxos obtidos por extraÃÃo hexÃnica e em CO2 supercrÃtico. As amostras apresentaram considerÃvel teor protÃico e lipÃdico, bem como, atividade antioxidante em ambos os mÃtodos. Estudaram-se os metabÃlitos secundÃrios das sementes de maracujà que foram extraÃdos seletivamente por CO2 em estado supercrÃtico, alterando-se condiÃÃes de temperatura, pressÃo e teor de co-solvente para selecionar classes de compostos na extraÃÃo. / This work presents the results obtained in the evaluation of the purport of protein, lipid and antioxidant potential of the acerola seeds (Malphigia glabra), graviola (Annona muricata), passion fruit (Passiflora edulis), oiti (Moquilea tomentosa), mango (Mangifera indica), sapoti (Achras sapota), guava (Psidium guajava), plum (Prunus domestica), papaya (Carica papaya), ciriguela (Spondias purpurea), strawberry (Fragaria vesca), murici (Byrsonyma crassifolia), pineapple (Ananas comosus) and tamarind (Tamarindus indica) and study of secondary metabolites of the passion fruit seed using supercritical CO2 as process of selective extraction. The tenor of protein was evaluated by the bradford method, it is treated of a spectrofotometric method that consists of evaluating the variation of the absorbance of the comassie brilliant blue color. The antioxidant potential was certain by the techniques of DHBA (based on the inhibition of the formation of the acid di-hidrÃxibenzÃico) and DPPH (it consists of the capture of the free radical DPPH). The tenor of lipid was evaluated by the analysis in GC/MS and GC/FID of the fatty acids obtained by extraction in hexane and in supercritical CO2. The samples presented considerable tenor of protein and lipid, as well as, antioxidant activity in both methods. Was studied the secondary metabolites of the passion fruit seed that they were extracted selectivity for CO2 in supercritical state, changing conditions of temperature, pressure and co-solvent content to select classes of compositions in the extraction.

Setenta e sete vacas distribuídas em três propriedades foram divididas em três grupos: G1 (sem suplementação vitamínica), G2 (suplementação com 1000 UI de vitamina E durante 30 dias antes do parto previsto e 30 dias após o parto), G3 (suplementação com 1000 UI de vitamina E de 30 a 15 dias antes do parto previsto e 3000 UI de 15 dias antes do parto a 30 dias após o parto). Todas as propriedades continham os três grupos, sendo que as vacas foram sorteadas para cada grupo de acordo com a ordem de parição e a data prevista para o parto, para que ficassem homogeneamente distribuídas. Na interrupção da lactação que antecedeu o experimento, os quartos mamários foram tratados com antibióticos específicos para o tratamento de vacas secas. Os animais foram alimentados com silagem de milho e concentrado, permanecendo confinados com acesso a piquetes de descanso. Foram efetuados os exames: tamis, CMT e microbiológico do leite de cada quarto mamário, logo após a fase colostral e uma vez por mês durante a lactação, para o diagnóstico de mastite. Foram colhidas amostras de soro de 20% dos animais e dos alimentos fornecidos para a análise de selênio. Os resultados obtidos mostraram que a ocorrência de mastite clínica foi maior (p<0,05) no grupo não suplementado do que nos grupos suplementados. Não foram verificadas diferenças estatísticas entre os três grupos quanto à ocorrência de mastite subclínica. Os principais microrganismos isolados foram Staphylococcus sp, Streptococcus sp, Corynebacterium sp. A ocorrência de infecções intramamárias foi maior (p<0,05) no grupo G3 do que nos grupos G2 e G1 e maior (p<0,05) no grupo G2 do que no grupo G1. Em relação à ocorrência de mastite nas fazendas, foi verificado maior (p<0,05) ocorrência da forma clínica no grupo G1 do que nos demais grupos apenas em uma delas e quanto às infecções intramamárias, o grupo G3 apresentou maior (p<0,05) ocorrência que o grupo G1 em todas as fazendas. Os resultados das análises sorológicas de selênio mostraram que as concentrações do elemento nos animais estavam adequadas. / Seventy seven dairy cows, kept in three herds were randomly allocated in three homogeneous groups: Group 1, control group (without vitamin E supplementation), Group 2 (supplementation of 1,000 UI of vitamin E during 60 days, thirty days prior and 30 days post-parturition) and Group 3 (supplementation of 1,000 UI of vitamin E from the thirtieth day to the fifteenth day before parturition, and, then, a supplementation of 3,000 UI from the fourteenth day before parturition until the thirtieth day after it). All the cows in the groups received a long-action intramammary antibiotic at the drying off. Animals were fed with corn silage and concentrate-mixture, and they were confined in a free stall system with grass paddock. Examinations were performed at the drying off, in the first week of lactation and once a month during lactation. Strip cup, CMT and the microbiological exams were used. Twenty percent of the animals of each group were randomly assigned for selenium analysis. The obtained results showed that clinical mastitis occurrence in Group 1 was significantly higher than in Groups 2 and 3. In relation to subclinical mastitis cases, no significant differences were detected among the groups. Microorganisms that were most frequently isolated were: Staphylococcus sp, Streptococcus sp, Corynebacterium sp. Results obtained for mammary gland infections showed a higher level of infections in supplemented groups compared to the control group. The occurrence of clinical mastitis in Group 1 was significantly higher than in Groups 2 and 3 only in one of the dairy herds. The occurrence of the intramammary infections was significantly higher in Group 3 than in Group 1 in all herds. The results obtained from selenium analysis demonstrated to be range of recommended levels.

Os neutrófilos ou leucócitos polimorfonucleares (PMNs) são células fagocíticas com funções bactericida e fungicida altamente potentes. A destruição dos microrganismos invasores é realizada através da liberação de substâncias tóxicas presentes em seus grânulos e das espécies reativas de oxigênio (EROs) produzidas durante o metabolismo oxidativo dessas células. Apesar dos benefícios da atividade antimicrobiana, em situações de intensa ativação celular, a grande produção e liberação de compostos citotóxicos podem causar efeitos deletérios sobre os tecidos do hospedeiro, como parece ocorrer em doenças por imunocomplexos. O grande potencial dos antioxidantes para o tratamento e prevenção dessas doenças tem levado à pesquisa de novos compostos que atuam no processo inflamatório em que estão envolvidos os neutrófilos ativados. Dentre estes, destacam-se os naturais, em que se encontra a planta Baccharis dracunculifolia (Asteraceae), principal fonte botânica da própolis verde, sendo que a própolis possui diversas atividades biológicas conhecidas. Entretanto, a produção de metabólitos secundários pelas plantas pode ser modificada de acordo com fatores sazonais o que dificulta os estudos e pode acarretar em alterações de atividade biológica. Desta forma, este trabalho avaliou o efeito da sazonalidade no perfil químico de B. dracunculifolia e na atividade desta planta sobre o metabolismo oxidativo de PMNs. Para isso, extratos etanólicos brutos das folhas de B. dracunculifolia (EEBBd), colhidas mensalmente durante 14 meses foram submetidos à ensaios de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), e avaliados quanto à capacidade de inibir a quimioluminescência dependente de luminol (QLlum) e de lucigenina (QLluc) produzida por PMNs estimulados. Além disso, para desvendar o(s) possível(is) mecanismo(s) de ação responsável(is) pela atividade antioxidante, foram realizados, com a amostra mais ativa em inibir a QL, ensaios para avaliar a citotoxicidade, a atividade scavenger de radicais livres (DPPH) e a ação sobre a atividade da enzima NADPH oxidase. Os resultados mostraram que todos os EEBBd inibiram tanto a QLlum quanto a QLluc de forma dependente da concentração e que para ambos os ensaios houve variação na eficiência deste efeito biológico ao longo do período de tempo estudado, demonstrando que a sazonalidade desempenhou um papel importante na intensidade da atividade antioxidante dos extratos. O ensaio de CLAE permitiu análise dos seguintes compostos: ácido caféico, ácido p-cumárico, aromadendrina-4-metil éter, isosakuranetina e artepilin C, e revelaram que apesar de não haver notória variação qualitativa entre os componentes, foi observada grande diferença quantitativa. As análises com a amostra do mês de maior atividade antioxidante (Maio/07) revelou que esta foi colhida durante um período de baixo índice pluviométrico, temperaturas amenas e apresentou a menor concentração da maioria dos compostos fenólicos estudados, evidenciando que tais compostos não foram os maiores responsáveis pela atividade biológica da amostra e que alguns desses compostos podem ter atuado como pró-oxidantes. Além disso, foi verificado que esta amostra atuou de forma não tóxica sobre as células, através da captação de parte das EROs geradas no meio reacional e de inibição parcial da atividade da NADPH oxidase. / Neutrophils or polymorphonuclear (PMN) are phagocytic cells with potent bactericidal and fungicidal functions. The destruction of invading microorganisms is made by the release of toxic substances contained within their granules and by the reactive oxygen species (ROS) produced during the oxidative metabolism of these cells. Despite the benefits of antimicrobial activity, in situations of intense cellular activation, large production and release of toxic compounds may cause deleterious effects on host tissue, as it seems to occur in immune complex diseases. The great potential of the antioxidants for the treatment and prevention of these diseases has led to the search of new compounds that act in the inflammatory process where are involved the activated neutrophils. Within this context, natural products are highlighted, mainly plants, among which is the Baccharis dracunculifolia (Asteraceae), the main botanical source of green propolis, which has several activities already known. However, secondary metabolites of plants can be modified according to seasonal factors, what can difficult the studies and alter the biological activity results. Thus, this study evaluated the effect of seasonality in the chemical profile of B. dracunculifolia and in the activity of this plant on the oxidative metabolism of PMNs. For this, crude ethanolic extracts of B. dracunculifolia leaves (CEEBd), harvested monthly for 14 months were analyzed in high performance liquid chromatography (HPLC) and evaluated for their ability to inhibit the luminol- and lucigenin-dependent chemiluminescence (CLlum and CLluc, respectively) produced by stimulated PMNs. In addiction, to understand the possible mechanisms of action responsible for antioxidant effect, the most active sample in the CL test was evaluated for the following proprieties: cytotoxic, scavenger of free radicals (DPPH) and action on the NADPH oxidase activity. The results showed that all CEEBd inhibited both CLlum and CLluc in a concentration-dependent manner and that in both trials it was found variation in the biological effect over the study period, indicating that the seasonality played an important role on the intensity of the antioxidant activity of the extracts. The HPLC assay allowed the analysis of the following compounds: caffeic acid, p-coumaric acid, aromadendrin-4\'-methyl ether, isosakuranetin and artepillin C, and showed that although there was no evident variation in qualitative profile, it was observed large quantitative differences. The analysis of the sample of greatest antioxidant activity (May/07) revealed that it was harvested during a period of low rainfall, mild temperatures and had lower concentrations of most compounds studied, indicating that these compounds were not the most responsible for the biological activity of the sample and that some of these substances may have acted as pro-oxidants molecules. Furthermore, it was found that this sample works in a non-toxic manner on cells, by capturing some of the ROS generated in the reaction medium and by partial inhibition of NADPH oxidase activity.

Muitas espécies de animais vivenciam situações nas quais há uma profunda depressão metabólica, como na anóxia, na hipóxia e na hibernação. Durante a reoxigenação ou o despertar, ocorre aumento da produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), que tendem a causar danos oxidativos. Diferentes enzimas antioxidantes protegem o organismo contra as ROS, porém não se sabe qual a real importância de cada uma delas durante a reoxigenação. A hibernação é uma das formas de hipometabolismo menos estudadas, fazendo com que haja questionamentos sobre como os hibernantes se protegem das ROS durante o despertar. A análise dos dados existentes é complexa devido à existência de variáveis não controladas, como o efeito do jejum associado à hibernação. Nesta tese, foram desenvolvidos dois projetos. Em um, investigou-se a importância da catalase num ciclo de anóxia e reoxigenação em caramujos pulmonados. No segundo, investigou-se o efeito da hibernação e da privação alimentar no intestino de lagartos teiús. Com base nos resultados, foi possível concluir que a catalase exerce um papel complementar contra os danos oxidativos causados pelas ROS e em conjunto com os demais componentes do sistema antioxidante. Porém, sua função não parece ser essencial, sendo em grande parte compensada pela atividade de glutationa peroxidase. Também foi possível concluir que a hibernação, estudada sem a interferência de drásticas quedas da temperatura, causa nítidas alterações no metabolismo de radicais livres no intestino de lagartos, com queda de atividades enzimáticas e de concentração de glutationa. A ausência de grandes danos oxidativos durante o despertar dos animais mostra que eles têm um sistema antioxidante eficiente. A privação alimentar resultou em respostas semelhantes as da hibernação, mas parece ter causado um certo grau de estresse oxidativo. Os resultados apresentados nesta tese respondem dois questionamentos no estudo do metabolismo de radicais livres em situações que envolvem flutuações na disponibilidade e no consumo de oxigênio. / Many species of animals experience situations in which occurs a profound metabolic depression, like anoxia, hypoxia and hibernation. During reoxygenation or arousal, there is an increase of the production of reactive oxygen species (ROS), which tend to cause oxidative damage. Different antioxidant enzymes protect the organims against the ROS, however the real importance of each one of them during reoxygenation is not known. Hibernation is one of the types of hypometabolism less studied, and questions about how the hibernators protect themselves from ROS during the arousal have not yet been answered. The analysis of the existent data is complex due to the existence of uncontrolled variables. In this thesis were carried out two studies in which were investigated: the importance of catalase in a cycle of anoxia and reoxygenation in pulmonate snails, and the effect of hibernation and of food deprivation in the intestine of tegu lizards. Considering the results, it was possible to conclude that catalase plays an complementary role against the damages caused by ROS and in association with the other components of the antioxidant system. However, its function seems to be non-essential, being greatly compensated by the glutathione peroxidase activity. It was also possible to conclude that hibernation, studied without the interference of drastic falls in temperature, causes clear alterations in free radicals metabolism in the lizards intestine, with a reduction in enzymes activities and in glutathione concentration. The absence of big oxidative damage during the arousal of the animals shows that they have an efficient antioxidant system. Food deprivation resulted in similar responses of those from hibernation, but seemed to cause some degree of oxidative stress. The results presented in this thesis answer two questions in the study of the free radical metabolism in situations that involve fluctuations in oxygen availability and consumption.

O objetivo do presente estudo é o de verificar o efeito do diabetes na atividade de constituintes do sistema antioxidante das glândulas salivares submandibular (SM) e parótida (P) de ratos. Para indução do diabetes foi injetado em ratos, via intraperitonial, estreptozotocina (60mg/kg de peso corporal) dissolvido em tampão citrato de sódio 0,1M pH 4,5. Quarenta e oito horas após sua indução foi determinada a glicemia no sangue dos animais. Somente aqueles ratos que apresentaram glicemia superior a 350mg de glicose/100 ml de sangue foram considerados diabéticos. Após o período experimental, os animais foram sacrificados, sendo removidas as glândulas salivares e sangue para análise. Foram determinadas, através de espectrofotometria, as atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx). O conteúdo de glutationa reduzida (GSH) e oxidada (GSSG) foi determinado em HPLC. A peroxidação lipídica foi determinada no sangue e nas glândulas salivares SM e P usando o ácido tiobarbitúrico (TBARS), que reage com o malonaldeído (MDA) decorrente da peroxidação lipídica. Os resultados mostram um aumento na concentração de malonaldeído no sangue e na glândula submandibular, mas não na glândula parótida. A concentração de GSH e GSSG é maior na glândula SM em relação ao grupo controle, enquanto que a concentração de GSH é menor na glândula P. Não há diferença na atividade da enzima SOD em nenhuma das glândulas salivares. As enzimas CAT e GPx tem a sua atividade específica aumentada somente na glândula parótida. Na glândula submandibular, nenhuma destas duas enzimas sofrem alterações nas suas atividades. Podemos concluir que o sistema antioxidante das glândulas salivares respondem de forma diferente 30 dias após a indução do diabetes. Na glândula SM não há alteração na atividade das enzimas estudadas, porém há um aumento na peroxidação lipídica. Na glândula P, há um aumento na atividade das enzimas CAT e GPx, não sendo encontrado aumento da peroxidação lipídica. / The aim of the present study is to determine the effect of diabetes in the activity of some contents from the antioxidant system of submandibular (SM) and parotid (P) salivary glands. The diabetic state was induced by an injection of streptozotocin (60mg/kg body weight) dissolved in 0,1M sodium citrate buffer pH 4,5. Forty-eight hours after the injection, blood was collected and the glycemia determined. Only those animals presenting a blood glucose above 350mg glucose/100ml blood was used in the study. Thirty days after the induction of the diabetes, the animals were sacrificed, the salivary glands were removed and blood was collected and used in the determinations. The activity of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx) was determined in spectrofotometer. The content of reduced (GSH) and oxidized (GSSG) glutathione was determined in HPLC. The lipid peroxidation was determined in blood and in SM and P glands, measuring the tiobarbituric acid (TBARS) which reacts with malonaldeyde (MDA) from lipid peroxidation. The results show an increase in MDA concentration from SM and blood, but not on P gland. The content of GSH and GSSG from SM gland increase, and the content of GSH from P gland decreased. There is no difference in the activity of SOD in both salivary glands. The activity of CAT and GPx from P gland increase, but in SM gland there is no difference. We can conclude that the antioxidant system from the salivary glands have different responses in diabetes state after 30 days of the induction. In SM gland, there is no difference in the activity of the enzymes, but we have an increase in the MDA content. In P gland, we have an increase in the CAT and GPx activity, but not in MDA concentration.

Problems about greenhouse gas emissions attributed to cattle production and improvements in the productivity of these animals has been growing and becoming increasingly important. Cattle releases methane as part of their digestive process, and this represents loss of energy for the animal. The decomposition of feces releases methane and it can be recovered by digester and transformed into different types of energy. Thus, aiming to quantify the potential production of enteric methane and anaerobic fecal decomposition, as well as to evaluate ruminal and behavioral parameters of cattle fed with cottonseed and vitamin E. Six cannulated cows (864±16 kg) were distributed in a replicate 3x3 Latin square. Treatments were: 1) control diet; 2) CS: basal diet plus 30% cottonseed and 3) CSVitE: basal diet plus 30% of cottonseed plus 500 UI of vitamin E. Results were compared through orthogonal contrast and values were considered significant when P0,05. No differences were observed for dry matter intake (DMI), as well as digestibility of DM and neutral detergent fiber (NDF). Animals supplemented with cottonseed spent more time eating and ruminating and less time in idles. Reduction in the concentration and production of acetate, butyrate and the acetate: propionate ratio was observed in animals fed cottonseed compared to the control. Enteric methane mitigation was observed for the cottonseed treatments compared to the control. Changes in the substrates characteristics used to load the digesters were observed. However, no differences were verified for the total biogas production, methane yield and capacity to recover the energy of the feces in the form of methane. Inclusion of 30% cottonseed can be used as a strategy to mitigate enteric methane, without causing losses in the DMI, nutrients digestibility and anaerobic digestion of feces. In addition, it promoted favorable changes in the ingestive behavior, ruminal fermentation products, as well as in the energy partition of the gastrointestinal tract. Vitamin E when is used as antioxidant had not effect on ruminal fermentation, feeding behavior and feces anaerobic digestion, thus the inclusion is not advised due absence of positive results. / A problemática das emissões de gases de efeito estufa atribuída à produção de bovinos e melhorias na produtividade desses animais vem crescendo e se tornando cada vez mais importante. Bovinos emitem metano como parte do seu processo digestivo, e isto representa perda de energia para o animal. A decomposição das fezes gera metano, este pode ser recuperado por biodigestores e transformado em diferentes tipos de energia. Assim, objetivou-se quantificar o potencial de produção do metano entérico e da decomposição anaeróbia das fezes, bem como avaliar parâmetros ruminais e comportamentais de bovinos alimentados com caroço de algodão e vitamina E. Foram utilizadas seis vacas fistuladas não gestantes e não lactantes (876 kg±16). Os tratamentos foram: 1) Controle: dieta basal; 2) CA: dieta basal mais 30% de caroço de algodão; 3) CAVitE: dieta basal mais 30% de caroço de algodão mais 500 UI vitamina E. O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino. Os resultados foram comparados por contrastes ortogonais e foram considerados significantes valores de P0,05. Não foram verificadas diferenças para o consumo de matéria seca (MS), bem como digestibilidade da MS e da fibra em detergente neutro (FDN). Os animais suplementados com caroço de algodão passaram maior tempo comendo e ruminando e menor tempo em ócio. Houve redução na concentração e produção de acetato, butirato e da relação acetato:propionato dos animais que receberam caroço de algodão comparado ao controle. A inclusão do caroço de algodão provocou mitigação das emissões de metano entérico. Houve alteração nas características dos substratos utilizados para abastecer os biodigestores. No entanto, não foram verificadas diferenças para a produção total de biogás, rendimento de metano e capacidade dos biodigestores em recuperar a energia das fezes na forma de metano. A inclusão de 30% caroço de algodão pode ser utilizada como estratégia para mitigar metano entérico, sem causar perdas no consumo, digestibilidade dos alimentos e na biodigestão anaeróbia das fezes. Além disso, sua inclusão promoveu alterações favoráveis no comportamento ingestivo, nos produtos da fermentação ruminal, bem como na partição de energia do trato gastrointestinal. A vitamina E quando utilizada como antioxidante não possui efeitos sobre a fermentação ruminal, comportamento ingestivo e biodigestão anaeróbia das fezes, assim sua inclusão não é indicada devido a ausência de resultados favoráveis a sua utilização.

Própolis é um material resinoso produzido por Apis mellifera constituído de exsudatos coletados de plantas e substâncias produzidas pelas abelhas, além de pequenas quantidades de aminoácidos, açúcares, pólen, etc. Na colméia, esse material é utilizado para diversos fins, como vedar aberturas no ninho e prevenir a decomposição de invasores mortos. Sua composição variada e rica em compostos biologicamente ativos tem sido amplamente reportada em ensaios de atividades antibacteriana, antifúngica, antiinflamatória, antitumoral, antioxidante e antiviral. Por isso, existe um grande interesse no estudo da composição química da própolis e das atividades biológicas de seus constituintes. De uma amostra de própolis vermelha, oriunda da região de Maceió (AL), obteve-se uma série de extratos de polaridade crescente: n-hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol. Com extrato metanólico foram realizados ensaios para determinação dos teores de fenóis e flavonóides, ensaios de atividade antioxidante, além de ensaios antimicrobianos contra bactérias e o fungo Candida albicans. Foi determinado o teor de ceras a partir de 3 g de própolis bruta, por extração com clorofórmio, evaporação do solvente, tratamento com metanol quente e precipitação após resfriamento. O teor de ceras obtido foi de 6,8%. Os fenóis totais foram determinados pelo método de Folin-Ciocaulteau, usando-se soluções de ácido gálico como referência. Para a determinação dos flavonóides, realizou-se a reação com cloreto de alumínio e soluções de quercetina como referência, fazendo-se leituras em 420 nm. Foram determinados 21,9% de fenóis totais e 8,4% de flavonóides. A atividade antioxidante foi avaliada segundo dois métodos, o de redução do radical estável DPPH e o de descoloração do sistema &#61538;-caroteno/ácido linoléico, usando-se a rutina como referência em ambos os métodos. Extratos metanólicos da amostra em concentrações de 8, 12,5 e 25 &#61549;g/mL reduziram o DPPH em 30,6%, 32,7% e 39,1% respectivamente, enquanto a solução de rutina nas mesmas concentrações reduziu 60,7% 64,3%, 100% e respectivamente. Com o sistema &#61538;-caroteno/ácido linoléico foram utilizadas concentrações de 2, 1,5 e 1 mg/mL tanto de amostra como de rutina. Os coeficientes de atividade antioxidante (CAO) das soluções da amostra nas concentrações 1, 1,5 e 2 mg/mL foram 672,2, 698,7 e 739,7, enquanto os valores de CAO para as soluções de rutina nas mesmas concentrações foram 787,2, 814,4 e 739,7. A proximidade dos resultados entre amostra e referência indicam a presença de substâncias altamente antioxidantes na própolis vermelha, em proporções elevadas. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo método de macrodiluição em caldo, seguida de crescimento em placa, usando cepas de Bacillus subtillis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela Typhimurium e Candida albicans. Observou-se inibição do crescimento de todos os microrganismos e atividade microbicida contra B. subtillis, P. aeruginosa, S. Typhimurium e C. albicans. / Propolis is a resinous material produced by Apis mellifera, made up of exsudates from plants collected by the bees and beeswax, in addition to small quantities of aminoacids, sugars, pollen, etc. Propolis is used in the hive for several purposes, such as to seal openings and prevent decomposition of the bodies of invading animals. Its composition is varied and rich in biologically active compounds. Many reports have been published about activities such as antibacterial, antifungal, antiviral, anti-inflammatory, antitumoral and antioxidant. There is, therefore, an increasing interest for studies about chemical composition and biological activity of propolis and its constituents. Extracts of increasing polarity (n-hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol) were obtained from a sample of red propolis from Maceió (state of Alagoas, northeast Brazil). Assays for determination of contents of phenolics and flavonoids and activities against bacteria and Candida albicans were carried out with the methanol extract. Waxes content was determined with 3 g of the sample by extraction with chloroform, evaporation of the solvent, treatment with hot methanol and precipitation upon cooling. The content obtained was 6.8%. The content of phenolic compounds was determined by the Folin-Ciocalteau method, using solutions of gallic acid as reference. The flavonoid content was determined by complexation with aluminum chloride and reading the absorbances at 420 nm, using quercetin as reference. The content of phenolic compounds was 21.9% and that of flavonoids 8.4%. The antioxidant activity was evaluated by the methods of reduction of the stable free radical DPPH and discoloration of the system &#61538;-carotene/linoleic acid, using rutin as reference in both methods. The percent of DPPH reduction of methanolic extracts at concentrations 8, 12.5 and 25 &#61549;g/mL were, respectively, 30.6%, 32.7% and 39.1%, and the values corresponding to rutin at the same concentrations were 60.7%, 64.3% and 100%. With regard to the system &#61538;-carotene/linoleic acid, solutions at concentrations 2, 1.5 and 1 mg/mL of the methanolic extract gave coefficients of antioxidant activity (CAO) of 672.2, 298.7 and 739.7, respectively, while solutions of rutin at the same concentrations gave CAO of 787.2, 814.4 and 739.7. The similarity of results comparing propolis extract and rutin indicate that the analyzed propolis sample contain high contents of substances with high antioxidant activity. The antimicrobial activity was evaluated by the method of macrodilution in broth, followed by plate growth, using lineages of Bacillus subtillis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela Typhimurium and Candida albicans. The growth of all microorganisms was inhibited, while microbicidal activity was observed against B. subtillis, P. aeruginosa, S. Typhimurium and C. albicans.