Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, Programa de Pós-Graduação em Nutrição Humana, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-07-18T13:59:07Z No. of bitstreams: 1 2017_AdrianaBarbosaCosta.pdf: 815061 bytes, checksum: 69e016c95d746ad329d9a30774043f13 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-09-20T12:08:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_AdrianaBarbosaCosta.pdf: 815061 bytes, checksum: 69e016c95d746ad329d9a30774043f13 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-20T12:08:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_AdrianaBarbosaCosta.pdf: 815061 bytes, checksum: 69e016c95d746ad329d9a30774043f13 (MD5) Previous issue date: 2017-09-20 / A melancia, Citrullus lanatus Schrad., é um fruto rico em fitonutrientes como licopeno, ácidos fenólicos e carotenóides, os quais lhe atribui uma alta capacidade antioxidante, além de vitaminas, minerais e fibras. Está entre as curcubitáceas mais consumidas no mundo e também mais visadas pela indústria de minimamente processados, porém o seu processamento está ligado à grande quantidade de resíduos gerados pelas partes consideradas não comestíveis da fruta, como as cascas e sementes. As partes usualmente consideradas não comestíveis de frutas e hortaliças como a melancia apresentam, na sua maioria, uma maior quantidade de compostos funcionais comparadas com o restante do fruto, além de uma abundante fonte de compostos antioxidantes como os polifenóis, o que justificaria o uso desses resíduos como aditivos alimentares além de diminuir o dano ambiental causado pela quantidade de resíduo orgânico produzido. Este estudo visou quantificar os compostos fenólicos e minerais além de avaliar a capacidade antioxidante das cascas das cultivares de melancia Manchester, mais cultivada no Brasil, e Smile, recém introduzida no mercado nacional. Os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizados, com 2 tratamentos e 30 repetições. As análises foram feitas em triplicata. Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e as médias foram testadas pelo teste de Tukey ao nível de significância de 5%. As cascas das cultivares de melancias apresentaram diferenças significativas nos valores de pH, sólidos solúveis, % de inibição e fenólicos e sem diferença significativa nos valores de acidez titulável. A cultivar Manchester apresentou valores superiores de pH (5,88), sólidos solúveis (4,17 ˙Brix) e de acúcares totais (2,09 g kg -1) comparada com a cultivar Smile que obteve valor de 5,72, 1,98 e 1,55 para pH, sólidos solúveis e açúcares totais, respectivamente. Os teores de fenólicos totais na cultivar Manchester foram 10,7 vezes maior ao encontrado na cultivar Smile e a capacidade antioxidante da cultivar Smile foi significativamente inferior à Manchester, correspondendo à 20,53% e 31, 78% de proteção, respectivamente. Quanto ao conteúdo de minerais, a cultivar Smile obteve maiores concentrações nos teores de Fe (52,32 mg kg-1), Mn (23,98 mg kg -1), P (5,85 mg kg-1) e Na (1,07 mg kg-1) e a cultivar Manchester com concentrações superiores de K (81,87 g kg -1), Ca (5, 00 g kg -1) e Mg (2,34 g kg-1). Não houve diferenças significativas entre as cultivares quanto ao teor de Zn. A cultivar Manchester destacou-se em relação a cultivar Smile na maioria dos parâmetros analisados. Apenas no conteúdo de acidez e zinco não houve diferença estatística entre os tratamentos. O conteúdo de minerais de ambas as cultivares foram superiores ao encontrado em outras frutas e corresponde a um percentual considerável das Recomendações Dietéticas de Referência. / The watermelon, Citrullus lanatus Schrad., is a fruit rich in phytonutrients such as lycopene, phenolic acids and carotenoids, which gives it a high antioxidant capacity, as well as vitamins, minerals and fibers. It is among the most consumed curcubitáceas in the world and also more targeted by the minimally processed industry, but its processing is linked to the large amount of waste generated by the parts considered inedible of the fruit, such as peels and seeds. The parts usually considered inedible of fruits and vegetables like the watermelon present, in the majority, a greater amount of functional compounds compared with the rest of the fruit, in addition to an abundant source of antioxidant compounds as the polyphenols, what would justify the use of these Waste as food additives in addition to reducing the environmental damage caused by the amount of organic waste produced. This study aimed to quantify the phenolic and mineral compounds in addition to evaluating the antioxidant capacity of the bark of the most cultivated Manchester watermelon cultivars in Brazil and Smile, recently introduced in the national market. The experiments were conducted in a completely randomized design with 2 treatments and 30 replicates. The analyzes were done in triplicate. The results were submitted to analysis of variance (ANOVA) and the means were tested by the Tukey test at a significance level of 5%. The bark of the watermelon cultivars presented significant differences in pH, soluble solids, % inhibition and phenolics, with no significant difference in the values of titratable acidity. The highest values of pH (5.88), soluble solids (4.17 ˙Brix) and total sugars (2.09 g kg -1) were found in the Manchester cultivar, compared to the Smile cultivar, which obtained a value of 5.72, 1 , 98 and 1.55 for pH, soluble solids and total sugars, respectively. The total phenolic content in the Manchester cultivar was 10.7 times higher than that found in the Smile cultivar and the antioxidant capacity of the Smile cultivar was significantly lower than Manchester, corresponding to 20.53% and 31, 78% protection, respectively. As regards mineral content, Smile showed higher concentrations of Fe (52.32 mg kg-1), Mn (23.98 mg kg -1), P (5.85 mg kg-1) and Na 1.07 mg kg-1) and Manchester cultivar with higher concentrations of K (81.87 g kg -1), Ca (5.00 g kg -1) and Mg (2.34 g kg -1). There were no significant differences between the cultivars regarding the Zn content. The cultivar Manchester was distinguished in relation to the cultivar Smile in the majority of the analyzed parameters. Only in the acidity and zinc content there was no statistical difference between the treatments. The mineral content of both cultivars was higher than that found in other fruits and corresponds to a considerable percentage of the Dietary Reference Recommendations.

Durante a respiração celular, cerca de 1 a 3% do oxigênio metabolizado produz espécies reativas de oxigênio (ERO). Entretanto, para defender o organismo do efeito dessas espécies, existem vários sistemas antioxidantes, dependendo do organismo, da célula ou do tecido em questão. A Vitamina A (retinol) e seu derivados exercem uma infinidade de efeitos em diversos processos biológicos, destacando-se a embriogênese, visão, regulação de processos inflamatórios, crescimento, proliferação e diferenciação de células normais e neoplásicas. Embora o potencial antioxidante da vitamina A e carotenóides tenha sido descrito primeiramente, sabe-se hoje que, sob diferentes condições, essas moléculas podem se comportar de uma maneira pró-oxidante. Por isso, atualmente são melhores descritas como moléculas redox ativas. Apesar dos nossos trabalhos anteriores demonstrarem um efeito pró-oxidante do retinol em culturas de células de Sertoli, o mecanismo exato pelo qual esse efeito é verificado permanece a ser elucidado. Uma vez que o ácido retinóico (AR) é o metabólito mais ativo do retinol, foram verificados os efeitos da suplementação de AR em culturas de células de Sertoli, com o objetivo de verificar se os efeitos anteriormente observados com o retinol devem-se à metabolização do mesmo a AR. Nossos resultados mostraram que o AR em baixas doses não aumentou os níveis de TBARS. Além disso, na concentração de 1 nM o AR foi capaz de diminuir os níveis de TBARS. Entretanto, quando as células foram tratadas com altas doses de AR foi observado um aumento destes níveis, além de uma diminuição da viabilidade celular. Uma vez que altas doses de AR induziram um aumento na lipoperoxidação e diminuíram a viabilidade celular, nós decidimos investigar somente os efeitos de doses fisiológicas (nM) de AR. Foram dosadas as atividades da SOD, CAT e GPx em células de Sertoli tratadas com AR. A atividade da SOD encontrou-se aumentada em todas as doses testadas. A atividade da GPx mostrou-se aumentada nas células tratadas com 0,1 nM, 1 nM e 10 nM e a atividade da CAT aumentou somente com 1 nM de AR. Esses resultados sugerem que o AR em doses fisiológicas aumenta a atividade das enzimas antioxidantes, protegendo, assim, as células do estresse oxidativo, como pode ser observado nos índices de lipoperoxidação e viabilidade celular. Todavia, o mecanismo pelo qual o AR induz a geração de ERO é desconhecido. Então nós decidimos verificar a ação anti ou pró-oxidante in vitro do AR. Na concentração suprafisiológica de 10 M, AR foi capaz de degradar a 2-deoxiribose, um substrato específico do radical hidroxil, sugerindo que a auto-oxidação do mesmo é capaz de gerar radicais livres. Além disso, o potencial antioxidante total do AR foi avaliado: altas concentrações de AR (1–10 M) aumentaram a geração de radicais livres. Esses resultados demonstram, pela primeira vez, que o ácido retinóico é capaz de gerar radicais livres e sugerem, pelo menos em parte, que alguns efeitos induzidos por AR podem ser mediados por ERO geradas a partir da degradação espontânea do ácido retinóico. Classicamente, os efeitos biológicos dos retinóides estão relacionados à sua conversão em ácido retinóico através da modulação da expressão de genes. Entretanto, recentes trabalhos têm demonstrado que os retinóides possuem ações biológicas que não envolvem sua interação com receptores nucleares. Assim, alguns autores sugerem que o mecanismo de regulação dos retinóides também seja por modificação do estado redox celular. As concentrações de AR utilizadas nesse trabalho variaram de faixa do fisiológico até a do farmacológico. Sabe-se que as células de Sertoli sintetizam AR a partir do retinol circulante; isso pode ser uma das explicações dos efeitos observados em células de Sertoli tratadas com altas doses de retinol, uma vez que a metabolização de grandes concentrações de retinol poderia acarretar uma grande formação de ácido retinóico.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Nutrição Humana, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-09-26T15:49:57Z No. of bitstreams: 1 2016_MarcelaBerckmansViegasCostaDantas.pdf: 1767043 bytes, checksum: b16e159621d41adcdd9ca75c276e7f18 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-11T19:30:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_MarcelaBerckmansViegasCostaDantas.pdf: 1767043 bytes, checksum: b16e159621d41adcdd9ca75c276e7f18 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-11T19:30:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_MarcelaBerckmansViegasCostaDantas.pdf: 1767043 bytes, checksum: b16e159621d41adcdd9ca75c276e7f18 (MD5) / Entre os frutos comestíveis do cerrado brasileiro, o tucum-do-cerrado (Bactris setosa Mart) se destaca devido ao seu alto potencial antioxidante e conteúdo de polifenóis. Nós investigamos o extrato aquoso de tucum-do-cerrado quanto ao seu mecanismo de ação e o potencial antioxidante de suas frações. O extrato aquoso foi fracionado por HPLC e as frações analisadas em termos da sua atividade antioxidante por meio da degradação oxidativa de 2-desoxirribose. Cinco frações foram selecionadas com base na atividade antioxidante observada in vitro e os componentes de três delas foram identificados como cianidina, peonidina e quercetina. No entanto, as amostras de HPLC selecionadas apresentaram um efeito prejudicial sobre o crescimento de células de levedura na presença de H2O2. Assim, nossos resultados avançam na identificação de compostos tucum-do-cerrado com atividade antioxidante. Os resultados mostram ações dicotômicas dos compostos tucum-do-cerrado que devem ser investigadas cuidadosamente para descobrir as reais possibilidades de tucum-do-cerrado em contribuir para a boa saúde humana. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Among the edible fruits of the Brazilian savanna, tucum-do-cerrado (Bactris setosa Mart) stands out due to its high antioxidant potential and polyphenol content. We investigated the aqueous extract of tucum-do-cerrado regarding its mechanism of action and the antioxidant potential of its fractions. The aqueous extract was fractionated by HPLC and the fractions analyzed in terms of their antioxidant activity by means of the oxidative degradation of 2-deoxyribose. Five fractions were selected based on the antioxidant activity observed in vitro and components of three of them were identified as cyanidin, peonidin and quercetin. The selected HPLC samples, on the other hand, showed a detrimental effect on yeast cell growth in the presence of H2O2. Thus our results advance in identifying tucum-do-cerrado compounds with antioxidant activity. The results show dichotomous actions of the tucum-do-cerrado compounds that should be investigated thoroughly to uncover the real possibilities of tucum-do-cerrado in contributing to good human health.

Dissertação (mestrado em Ciências Farmacêuticas)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Pós-graduação em Ciências Farmacêuticas, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-02-17T14:54:16Z No. of bitstreams: 1 2015_NathaliadeAlmeidaMorais.pdf: 1755891 bytes, checksum: 714c9f72e26dfe72ba08c891eff3632f (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2016-05-26T16:36:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_NathaliadeAlmeidaMorais.pdf: 1755891 bytes, checksum: 714c9f72e26dfe72ba08c891eff3632f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-26T16:36:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_NathaliadeAlmeidaMorais.pdf: 1755891 bytes, checksum: 714c9f72e26dfe72ba08c891eff3632f (MD5) / Erythroxylum suberosum A.St.-Hil. (Erythroxylaceae) é conhecida popularmente como “cabelo de negro” e utilizada popularmente como antidiarreico, adstringente, antirreumático, anestésico e para indigestão. Esta espécie pode ser encontrada em ambientes úmidos como a Mata Atlântica, nas regiões semiáridas e Cerrado. No presente trabalho, foi avaliada a sazonalidade da atividade antioxidante da espécie E. suberosum A.St.-Hil. correlacionada com o teor de hiperosídeo e isoquercitrina. Foram feitas 4 coletas de folhas no período compreendido entre novembro de 2013 a maio de 2014 e preparados extratos aquosos (EA), etanólicos (EE) e hexânicos (EH) a partir das folhas secas. A avaliação do perfil cromatográfico dos extratos permitiu a identificação de isoquercitrina e hiperosídeo nos extratos EA e EE. No período avaliado, o teor de flavonoides nos extratos EA variou de 41, 8 μg/mg a 23,3 μg/mg (hiperosídeo) e 18,0 μg/mg a 12,9 μg/mg (isoquercitrina). Nos extratos EE, hiperosídeo e isoquercitrina foram quantificados entre 25,5 a 19,0 μg/mg e 10,9 a 14,4 μg/mg, respectivamente. Para o ensaio de atividade sequestradora de radicais DPPH•, todos os extratos mostraram atividade. O extrato mais ativo foi o EA2, referente à coleta em novembro de 2013 (CI50= 4,45 μg/mL), semelhante ao padrão BHT. Para o método de redução do complexo fosfomolibdênio, os extratos referentes à coleta em agosto de 2013 EA1 (186,28 μg/mL equivalente AA) e EE1 (206,39 μg/mL equivalente AA) foram os mais ativos. As correlações relativas ao EA indicaram que à medida que os teores de isoquercitrina e hiperosídeo aumentaram, o poder antioxidante dos extratos pelo método do fosfomolibdênio também aumentou, sendo encontradas correlações fortes positivas significativas. Desta forma, a atividade antioxidante de EA pôde ser atribuída em grande parte à presença destes flavonoides. As correlações relativas ao EE indicaram que à medida que os teores de isoquercitrina e hiperosídeo aumentaram, o poder antioxidante dos extrato EE pelo ensaio de atividade redutora de DPPH• reduziu. Desta forma, a atividade redutora de DPPH• de EE pode não ser atribuída a estes flavonoides. Foi também observado que à medida que a umidade relativa aumentou, o teor de hiperosídeo e isoquerctrina tendeu a diminuir, bem como a atividade antioxidante. Por outro lado, o teor de hiperosídeo e isoquercitrina foi inversamente proporcional à redução da temperatura e diretamente proporcional que ao aumento da radiação. Essa tendência foi observada também no que se refere à atividade antioxidante, o aumento da temperatura e da radiação global incrementaram a atividade redutora de fosfomolibdênio. Quanto à atividade sequestradora dos radicais DPPH•, à medida que a radiação aumentou, a atividade tendeu a diminuir, apesar do aumento do teor dos flavonoides. Os resultados obtidos revelaram que para obter um extrato a partir das folhas de E. suberosum A.St.-Hil., o melhor período de coleta, para se obter melhores teores de isoquerctrina e hiperosídeo e maior atividade antioxidante, é no mês de agosto. E o melhor solvente extrativo foi a água, utilizando processo de infusão. / Erythroxylum suberosum A.St.-Hil (Erythroxylaceae), is popularly known as "cabelo-de-nego" and used for indigestion and as antidiarrheal, astringent, antirheumatic, anesthetic remedy. This species can be found at Atlantic Forest, at the Semi-Arid and Savannah regions. In this study, we evaluated the seasonality of the antioxidant activity of the species E. suberosum A.St.-Hil correlated to hyperoside and isoquercitrin content. Leaves were collected during August 2013, and May 2014. Aqueous (EA), ethanol (EE) and hexane (EH) extracts were prepared from the dried leaves. The chromatographic profile of extracts shows isoquercitrin and hyperoside. The flavonoid content on EA extracts varied from 41, 8 μg/mg to 23,3 μg/mg (hyperoside), and from 18,0 μg/mg to 12,9 μg/mg (isoquercitrin), while EE extracts show ranges of 25,5-19,0 μg/mg and 10,9-14,4 μg/mg to hyperoside and isoquercitrin, respectively. All extracts presented antioxidant activity. For DPPH• assay, the most active extract was an EA2, obtained from leaves collected in November 2013 (CI50 = 4.45 μg/mL), similar to standard (BHT). For the reduction of phosphomolybdenum complex method, EA1 and EE1 extracts (August 2013) - 186.28 μg/mL AA equivalent and 206.39 μg/mL AA equivalent, respectively – were the most active. The correlations for the EA extracts indicated that as higher isoquercitrin and hyperoside content, as higher antioxidant activity in both methods. Regarding DPPH• assay, in EE, the concentration of isoquercitrin and hyperoside is inversely proportional to antioxidant activity. It was also observed that as the rainfall was increased, flavonoid content tended to decrease, as well as antioxidant activity measured by both DPPH• and phosphomolybdenum methods. Also, as the temperature decayed, the flavonoid content tended to increase. Moreover, as the temperature and global radiation increased, the activity by phosphomolybdenum method tended to increase, while for the DPPH• scavenging, as the radiation is increased, the activity tended to decrease, despite the increased content of flavonoids isoquercitrin, and hyperoside. The lack of correlation between radiation and activity (by DPPH• method) confirmed the negative correlation between the observed radical scavenging activity and content of flavonoids. The results showed that the best collection period to obtain an extract from the leaves of E. suberosum A.St.-Hil, with high isoquercitrin and hyperoside content, is August (dry weather). The extractive solvent to give best-improved yields of these flavonoids was water, by using the infusion process.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Curso de Ciências Farmacêuticas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2015. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2016-03-21T16:12:34Z No. of bitstreams: 1 2015_PedroGoesMesquita_Parcial.pdf: 1129403 bytes, checksum: a14387088014ab4785724b9f6134d718 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-03-22T14:35:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_PedroGoesMesquita_Parcial.pdf: 1129403 bytes, checksum: a14387088014ab4785724b9f6134d718 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-22T14:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_PedroGoesMesquita_Parcial.pdf: 1129403 bytes, checksum: a14387088014ab4785724b9f6134d718 (MD5) / O diabetes mellitus é uma desordem metabólica que acomete milhões de pessoas no Brasil e no mundo. As tiazolidinadionas melhoram a sensibilização à insulina e a homeostase da glicose mediada pela ativação de receptores ativados por proliferadores peroxissomais γ(PPARγ) em indivíduos com diabetes tipo 2. Entretanto, efeitos adversos graves, como perda da massa óssea, retenção de fluidos corporais, problemas no fígado, no coração e aumento no risco de câncer de bexiga estão associados ao seu uso. Apesar de não haver esclarecimento completo do mecanismo relacionado ao efeito adverso, em parte, ele é atribuído à ativação exagerada do receptor. Agonistas parciais de PPARγ são capazes de promover os efeitos positivos das tiazolidinadionas, mas com menor efeito adverso. Estudos prévios mostraram que extratos das folhas da Bauhinia variegata são capazes de ativar o PPARγ e que ligantes de PPAR podem interferir no estresse oxidativo relacionado a espécies reativas do oxigênio. Sabendo que fungos endofíticos são colonizadores dos tecidos de plantas e possuem um metabolismo particularmente ativo por causa dessa interação, levando à produção de produtos naturais com efeitos biológicos importantes e, muitas vezes similares aos da planta hospedeira, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial dos metabólitos de fungos endofíticos isolados das folhas de Bauhinia variegata como fonte de moléculas antioxidantes e agonistas de receptores nucleares PPAR α, β/δ e γ. Sete extratos de culturas dos fungos endofíticos das folhas de Bauhinia variegata foram avaliados. Todos apresentaram atividade antioxidante no ensaio do sequestro do radical superóxido e seis deles foram capazes de inibir a peroxidação lipídica. Um dos extratos apresentou atividade pan-agonista sobre os PPAR e outro mostrou atividade nas isoformas PPARα e PPARβδ. Os extratos não foram capazes de estimular a diferenciação de pré-adipócitos 3T3-L1. O estudo conjunto da atividade agonista a receptores nucleares e da atividade antioxidante caminha na mesma direção dos achados recentes sobre a relação PPAR/espécies reativas do oxigênio nos processos patológicos do diabetes. A melhor compreensão desta relação poderia auxiliar no entendimento do mecanismo de ação dos antioxidantes no tratamento de diabetes e suas complicações. Além disso, novos compostos com ambas as atividades, antioxidante e agonista de PPARγ, poderiam ser bastante úteis no desenvolvimento de novos medicamentos para tratamento do diabetes. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diabetes mellitus is a metabolic disorder that affects millions of people in Brazil and worldwide. Tiazolidinediones (TZD) improve insulin sensitization and glucose homeostasis mediated by the activation of peroxisome proliferator activated receptors γ (PPARγ) in patients with type 2 diabetes. However, severe adverse effects such as loss of bone mass, retention of body fluids, liver and heart problems and increased risk of bladder cancer are associated with their use. Although there is no complete explanation of the mechanism related to TZD side effects, in part, it is attributed to excessive activation of the receptor. Partial PPARγ agonists are capable of promoting the beneficial effects of tiazolidinediones with less adverse effects. Previous studies have shown that extracts of Bauhinia variegata leaves are able to activate the PPARγ and that PPAR ligands can interfere with the oxidative stress related to reactive oxygen species. Knowing that endophytic fungi colonize plant tissues and have a particularly active metabolism caused by this interaction, which lead to the production of natural products with important biological effects, and usually similar to that of the colonized plant, the objective of this study was to evaluate the potential of the metabolites of endophytic fungi isolated from Bauhinia variegata leaves as source of antioxidant molecules and agonists of nuclear receptors PPAR αβδ and γ. Seven extracts produced by endophytic fungi from Bauhinia variegata leaves were evaluated; all of them showed antioxidant activity by scavenging superoxide radical and six of them were able to inhibit lipid peroxidation. One of extracts tested presented pan-agonist activity on PPAR and another one showed activity in PPARα and PPARβδ. The extracts were not able to stimulate the differentiation of 3T3-L1 pre-adipocytes cells. The complete study involving evaluation of agonism to nuclear receptors and antioxidant activity comply with the recent findings about the PPAR/reactive oxygen species relationship in pathological processes of diabetes. A better understanding of this relationship could help to comprehend the mechanism of action of antioxidants in the treatment of diabetes and its complications. In addition, novel compounds having both activities, antioxidant and PPARγ agonist, could be quite useful in the development of new drugs for diabetes treatment.

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Maqui (Aristotelia chilensis) es una planta nativa chilena cuyos frutos son utilizados en la preparación de productos que se comercializan como alimentos funcionales y fitofármacos por su alto contenido de antioxidantes en comparación con otros berries, además de sus propiedades antiinflamatorias y antibacterianas. Las hojas constituyen en general, la parte de las plantas que contiene mayor cantidad de antioxidantes. Los estudios acerca de las propiedades benéficas de las hojas del maqui sin embargo, son escasos. Es por esto que nos interesó comparar las propiedades antioxidantes de extractos de fruto y hojas de esta planta. Para ello, se utilizó como sistema biológico microsomas hepáticos de rata, y como sistema prooxidante, Cu2+/ascorbato. Ambos extractos: 1) previnieron la lipoperoxidación microsómica, 2) previnieron y revirtieron la oxidación de los tioles microsómicos. Estos fenómenos fueron dependientes de las concentraciones de polifenoles y tioles de ambos extractos, pero la potencia antioxidante del extracto de hojas fue mayor que la del extracto de fruto. La calidad y cantidad de los antioxidantes presentes en estos extractos podría explicar esta diferencia. Por otra parte, ambos extractos fueron capaces de quelar el ion Cu2+ e inhibir la actividad de la GSH-transferasa microsómica, enzima cuya forma activa es un dímero –S-S-. Cabe destacar que extractos polivalentes como los ensayados, ejercen su poder antioxidante por diversos mecanismos actuando de manera sinérgica. Todas las patologías en mayor o menor grado están asociadas a estrés oxidativo. Por lo tanto, las propiedades antioxidantes de extractos herbales justifican por si solas las coterapias que involucran fármacos sintéticos y fitofármacos. No debemos olvidar sin embargo, que los fitofármacos deben tener estudios farmacológicos que aseguren su seguridad y eficacia como también su posología / Maqui (Aristotelia chilensis) is a native Chilean plant whose fruits are used in the preparation of products that are marketed as functional foods and phytodrugs with a high antioxidant content compared to other berries, in addition to its anti-inflammatory and antibacterial properties. The leaves generally constitute the part of plants that contains the most amounts of antioxidants. Studies on the beneficial properties of the leaves of the maqui, however, are scarce. This is why we were interested in comparing the antioxidant properties of fruit extracts and leaves of this plant. For this, liver microsomes of rat were used as biological system and as a prooxidant Cu2+/ascorbate system. Both extracts: 1) prevented microsomal lipid peroxidation, 2) prevented and reversed the oxidation of microsomal thiols. These phenomena were dependent on polyphenol and thiol concentrations of both extracts, but antioxidant potency of leaves extract was higher than that of fruit extract. La calidad y cantidad de los antioxidantes presentes en estos extractos podría explicar esta diferencia. On the other hand, both extracts were able to chelate the Cu2+ ion and inhibit the activity of the microsomal GSH-transferase, enzyme whose active form is an -S-S- dimer. It is noteworthy that polyvalent extracts exert their antioxidant power by various mechanisms acting synergistically. All pathologies to a greater or lesser degree are associated with oxidative stress. Therefore, the antioxidant properties of herbal extracts alone justify the co-therapies involving synthetic drugs and phytodrugs. We cannot forget, however, that phytodrugs must have pharmacological studies that ensure their safety and efficacy as well as their dosage

Orientador : Prof. Dr. Júlio C. de Carvalho / Coorientadores : Soccol, Carlos Ricardo, Profa. Dra. Adriane B. Pedroni Medeiros / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia. Defesa: Curitiba, 27/04/2016 / Inclui referências : f. 55-62 / Resumo: O conhecimento popular brasileiro de botânica lista diversas ervas utilizadas para a produção de chás e também no tratamento de enfermidades, onde muitas delas com uma sabor diferenciado. São exemplos destas ervas o chá mate (Ilex paraguariensis St. Hil); carqueja (Baccharis trimera); chapéu-de-couro (Echinodorus grandiflorus); macela (Achryrocline satureioides); picão-preto (Bidens pilosa). Nesse estudo, as ervas foram adicionadas a cerveja do tipo ale em diferentes etapas do processo de produção de modo a obter uma bebida com características sensoriais diferenciadas e elevada atividade antioxidante. Diferentes métodos foram selecionados para mensurar a capacidade antioxidante, como o método de Folin-Ciocalteu, CUPRAC (Cupric Reducing Antioxidant Capacity) e ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity). A erva que apresentou a maior capacidade antioxidante segundo os métodos CUPRAC e ORAC foi o Echinodorus grandiflorus, seguido da Achryrocline satureioides. Palavras-chave: Cerveja, Antioxidante, ORAC, CUPRAC, Folin-ciocalteu, Ilex paraguariensis, Baccharis trimera, Echinodorus grandiflorus, Bidens pilosa, Achryrocline satureioides / Abstract: The common knowledge of Brazilian botanicals lists a great diversity of herbs utilized as infusion for the treatment of common diseases or for beverages, many of these with distinc sensory characteristics. Herbs as Mate tea (Ilex paraguariensis St. Hill), carqueja (Baccharis trimera), chapéu-de-couro (Echinodorus grandiflorus), macela (Achryrocline satureioides) picão-preto (Bidens pilosa). In this study, the herbs were added to beer at different stages of the production process in order to develop a beverage with desirable sensory characteristic and high antioxidant capacity. Different methods were selected for the evaluation of the antioxidant capacity, methods as Folin-Ciocalteu, CUPRAC (Cupric Reducing Antioxidant Capacity) and ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity). The herb that presented the most antioxidant capacity according to the CUPRAC and ORAC methods was Echinodorus grandiflorus, followed by Achryrocline satureioides. Key-words: Beer, Antioxidant, ORAC, CUPRAC, Folin-ciocalteu, Ilex paraguariensis, Baccharis trimera, Echinodorus grandiflorus, Bidens pilosa, Achryrocline satureioides

Orientador: Olga Maria Mascarenhas Faria de Oliveira / Coorientador: José Carlos Rebuglio Vellosa / Banca: Taís Maria Bauab / Banca: Mariza Pires de Melo / Resumo: O excesso na geração de espécies reativas como os radicais livres pode resultar num desequilíbrio que, embora benéfico em situações como o combate a micro-organismos patógenos, está implicado com diversas patologias crônicas e com o envelhecimento. Assim é comum a indicação de compostos antioxidantes para a prevenção destas patologias e inclusive, algumas pesquisas com substâncias antioxidantes já resultaram no desenvolvimento de novos medicamentos. Desta forma, o estudo de fontes naturais que apresentam substâncias ativas sobre as diferentes espécies oxidantes geradas em nosso organismo é de grande importância, visto as implicações destas em várias patologias. Entre estas fontes, Agaricus blazei Murrill é um cogumelo comestível e medicinal, popularmente utilizado na prevenção do envelhecimento e no tratamento de diversas doenças, como câncer, artrite reumatóide, artrose, aterosclerose, diabetes e hipertensão. Tem sido relatado também, o uso de outros cogumelos como Agaricus bisporus (champignon), Lentinus edodes (shiitake) e Pleurotus ostreatus (shimeji ou hiratake), de forma similar ao Agaricus blazei. Além da função nutricional desse cogumelo é importante verificar possíveis atividades biológicas, o que poderia render novos produtos com alegações de propriedades funcionais ou terapêuticas, como as já existentes para o A. blazei. Assim, este projeto objetivou o estudo do perfil de atividade antioxidante (químico, enzimático e ex vivo) e análise de atividade antibacteriana de três cogumelos cultivados no Brasil em comparação com o Agaricus blazei Murrill. Foram utilizadas metodologias de análise de atividade antioxidante como os ensaios de ação scavenger do DPPH·, ABTS·+, O2 ·-, NO, H2O2 e HOCl, e também por análise do sistema oxidativo catalisado por mieloperoxidase (MPO) e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The excessive generation of reactive oxygen species, like free radicals, can lead to an imbalance which, although benefical in such situations to combat pathogenic microorganisms, is involved with various chronic diseases and aging. Thus, it is common to indicate the use of antioxidants for prevention of these diseases, and some research about antioxidant products have already resulted in the development of new medicines. Thus, the study of natural sources that contain active compounds over the different oxidant species, generated in our bodies, is of great importance, due their implications in various pathologies. Among these sources, Agaricus blazei Murrill is an edible and medicinal mushroom, commonly used in the prevention of aging and the treatment of various diseases such as cancer, rheumatoid arthritis, osteoarthritis, atherosclerosis, diabetes and hypertension. It has also been reported, the use of other Agaricus bisporus (champignon), Lentinus edodes (shiitake) and Pleurotus ostreatus (shimeji or hiratake), similar to Agaricus blazei. Besides its nutritional properties, it is important to check possible biological activities, which could render functional property claims as those existing for the A. blazei. Thus, mushrooms such as this project aims to study the profile of antioxidant activity (chemical, enzymatic and ex vivo) of mushrooms cultivated in Brazil, comparing to Agaricus blazei Murrill. Antioxidant activities were evaluated through DPPH·, ABTS·+, O2 ·-, NO, H2O2 and HOCl and also by analysis of the oxidative system catalyzed by myeloperoxidase (MPO) and horseradish peroxidase (HRP). In relation to cellular analysis and antibacterial, it was determined toxicity erythrocytes and neutrophils, and activity in relation to Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Novas metodologias eletroanaliticas em meios resistivos têm sido propostas alargando assim seu campo de aplicação para a quantificação de analitos em combustíveis. Alquil ésteres de ácidos graxos, também conhecidos como biodiesel tem conquistado considerável importância econômica. No entanto, a autoxidação de biodiesel puro (B100) dá origem a produtos de oxidação secundários, isto é, epóxidos, álcoois, aldeídos e ácidos carboxílicos, que podem causar danos aos motores de combustão. Por essa razão a estabilidade à oxidação do B100 é um critério de qualidade que tem de ser monitorado regularmente. Atualmente, o método utilizado para caracterizar a estabilidade oxidativa é o período de indução de oxidação acelerada, Rancimat, o qual, no entanto, requer várias horas para sua execução. Portanto, a quantificação rápida e direta de antioxidantes adicionados ao B100 é importante para permitir ajustes na sua composição durante o processamento, visando minimizar os processos oxidativos. Neste estudo, microemulsões de água em óleo (MEs A/O) e álcool etílico foram empregados como meio solvente para viabilizar a determinação eletroanalítica direta de antioxidantes em B100. Medidas de viscosidade, condutividade e espalhamento de raios X a baixo ângulo (SAXS) foram empregadas na caracterização das MEs. Amostras de B100 em meios microemulsão A/O e etanol, contendo ferroceno (Fc) como sonda, foram analisadas com sucesso empregando o método de adição de padrão e voltametria de pulso diferencial (VPD) em ultramicroeletrodo (UME) de Pt. Os resultados mostraram uma excelente correlação com os do ensaio Rancimat, viabilizando o monitoramento da estabilidade oxidativa do biodiesel na linha de produção. / New electroanalytical methodologies in resistive media have been proposed thus broadening their field of application for the quantization of analytes in fuels. Fatty acid alkyl esters, also known as biodiesel, have gained considerable economic importance. However, oxidation of pure biodiesel (B100) gives rise to secondary oxidation products, i.e., epoxides, alcohols, aldehydes and carboxylic acids, which can cause damage to combustion engines. That is why B100 oxidation stability is an important quality criterion that has to be regularly monitored. Currently, the method used to characterize oxidative stability is the rapid oxidation induction period, Rancimat, which, however, requires several hours for execution. Therefore, rapid and direct quantification of antioxidants added to B100 is important to enable adjustments in its composition during processing. In this investigation, water in oil microemulsions (W/O MEs) and ethyl alcohol were employed as B100 solvent media in order to perform direct electroanalytical determinations of antioxidants. Viscosity, conductivity and small angle X-ray scattering (SAXS) measurements were employed in characterizing MEs. Samples of B100 in W/O ME and in ethyl alcohol media, containing ferrocene (Fc) as a probe, were successfully analyzed using the standard addition method and differential pulse voltammetry (DPV) at a Pt ultramicroelectrode (UME). The results showed an excellent correlation with the Rancimat test, enabling the monitoring of the oxidative stability of biodiesel in the production line.

A sepse é uma síndrome inflamatória sistêmica decorrente de uma infecção que pode causar sérios danos a todos os órgãos do paciente, podendo levá-lo à morte. Dados epidemiológicos norte americanos estimam que 750.000 pacientes são acometidos a cada ano por sepse. A taxa de mortalidade varia de 20 a 60%, dependendo da severidade, sendo semelhante para o Brasil. A terapia utilizada é o tratamento com antibióticos, manutenção de pressão sanguínea e ventilação mecânica, que apesar de extremamente caros ainda se mostram com baixa eficiência, tornando a morte por sepse em UTI mais relevante que mortes por câncer de mama ou AIDS, nos EUA. Tratamentos que demandam grande soma de recursos tendem a ser um grande problema para países como o Brasil, que através do Sistema Único de Saúde, supre o paciente com a terapêutica disponível. Por isso, a compreensão da doença e o desenvolvimento de terapias alternativas mais eficazes e mais barata são de extrema importância. Neste sentido, diversas terapias alternativas têm sido propostas (insulinoterapia, administração de proteína C ativada - Drotrecogina alfa®, antioxidantes ou anticorpos anti-citoquinas). Radicais livres são fisiologicamente produzidos pela mitocôndria e por outras enzimas, como a NADPH oxidase e xantina oxidase. Os organismos contam com defesas antioxidantes enzimáticas e não-enzimáticas para não sofrer danos causados pela própria produção de radicais livres e assim, manter a homeostase celular. Na sepse, a primeira linha de defesa do organismo é o seu sistema imunológico inato mediado por fagócitos que possuem sistemas bactericidas compostos por enzimas produtoras de radicais livres e espécies reativas de oxigênio. Quando a resposta inflamatória à infecção é exagerada e a homeostase é perdida, verificam-se danos a biomoléculas dos tecidos do hospedeiro devido à própria produção de radicais livres. Estes danos podem levar a um comprometimento celular que pode progredir para disfunção orgânica e colaborar para a morte do indivíduo. Devido à importância dos radicais livres no estabelecimento e na progressão da sepse, nós formulamos a hipótese de que o balanço entre as enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), bem como os produtos de dano às biomoléculas (carbonilas e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico - TBARS), podem ser importantes marcadores de severidade e de prognóstico da sepse. Nossos resultados demonstram que há um aumento na atividade da SOD sem um aumento compensatório da CAT em todos os órgãos analisados (pulmão, diafragma, coração, fígado, rim), retirados de ratos submetidos a sepse. Este desequilíbrio resulta em dano a biomoléculas (lipídeos e proteínas). Os dados sugerem que os níveis de proteínas carboniladas, mas não de TBARS, estão correlacionados com a severidade da sepse. A conseqüência do aumento de carbonilas na resposta imunológica é discutida. Apesar da importância das proteínas carboniladas na progressão da sepse, nós demonstramos uma forte correlação positiva entre a relação SOD/CAT (pulmão e rim) vs. marcadores de falência desses órgãos bem como entre TBARS vs. marcadores de falência, em ratos submetidos a CLP. Estas correlações foram revertidas com a associação de tratamento antioxidante nesses animais. Estes dados sugerem que o equilíbrio entre a SOD e a CAT é muito importante para a manutenção da homeostase redox e que a suplementação antioxidante reverte o desequilíbrio visto na sepse, os níveis de TBARS bem como protege dano renal e respiratório. / Sepsis is a systemic inflammatory syndrome secondary to an infectious process that can progress to multiple organic failure and death. Epidemiological studies estimate that 750,000 cases of severe sepsis occurs per year in United States with mortality rate ranging between 20 and 60%, and these rates reflect the Brazilian reality. Sepsis is classically treated with antibiotics, pressure support and mechanic ventilation. However these treatments have little impact on mortality rate, which is higher for sepsis than for breast cancer or HIV. Thus, a better understanding of sepsis and the development of new therapeutic approaches are extremely important and several researches have been developed in this way (e.g. insulin-therapy, activated-protein C - Drotrecogin alfa®, antioxidants and anti-cytokine antibodies). Free radicals are released normally in cell physiology. Organisms have enzymatic antioxidant defenses as well as non-enzymatic antioxidant defenses to counteract the harmful effects of free radicals and to maintain cellular homeostasis. In the onset of an infectious process like sepsis, the innate immune system is the first defense against pathogen and is carried out by macrophages and neutrophils. These cells are potent phagocytes and their bactericidal compounds include free radicals and reactive oxygen species. When the response to infection is exacerbated the homeostasis is lost and oxidative damage takes place. This damage could compromise cell function and lead the organ dysfunction and death. Considering the importance of free radicals in the onset and progression of sepsis we hypothesized that balance between superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), as well as molecular damage (carbonyl and thiobarbituric acid reactive species - TBARS), could be important markers of severity and prognosis in sepsis. We show an increase in SOD activity without a compensatory increase in catalase in the lung, diaphragm, heart, kidney and liver from rat submitted to sepsis. This imbalance contributes to oxidative damage in lipids and proteins. The data suggests that carbonyl levels but not TBARS levels are linked to sepsis severity and the implication of carbonyl upon immune response is discussed. In spite of the relevance of carbonyl in sepsis progression we found a positive correlation between SOD/CAT ratio (in kidney and lung) and organ failure markers, as well as between TBARS and organ failure markers, in rats submitted to CLP. These are prevented treating animal with antioxidants. These data suggest the importance of a coupled enzymatic activity of SOD and CAT to maintain redox homeostasis. Moreover, the antioxidant treatment reversed the SOD/CAT imbalance, TBARS levels and organ impairment.