Vários estudos demonstraram que o estrógeno exerce um papel fundamental na manutenção da estrutura da cartilagem articular, e que a deficiência em mulheres podem causar um aumento na incidência de degeneração articular. Sabe-se também que a atividade física é capaz de trazer benefícios para este tipo de tecido, reduzindo os riscos de lesão articular. Contudo, existem poucos os trabalhos que relacionam estes dois fatores: deficiência estrogenica e atividade física regular. O objetivo deste trabalho é verificar os efeitos da deficiência estrogênica sobre a cartilagem articular, suas implicações, e se a atividade física regular e moderada é capaz de reverter este processo natural de degeneração articular. Foram utilizadas 12 ratas Wistar adultas, divididas em quatro grupos de três animais, de modo aleatório e sistematizado, sendo eles: ratas controle sedentárias (RCS), ratas controle treinadas (RCT), ovariectomizadas sedentárias (ROS) e ovariectomizadas treinadas (ROT). Cada grupo foi analisado pelas técnicas de microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados foram obtidos a partir do método estereológico. Os valores foram estatisticamente significantes em relação a deficiencia estrogenica para os parametros: peso, condicionamento físico, densidade numérica de condrócitos, número total de condrócitos, densidade de volume dos condrócitos, densidade de volume da matriz extracelular, volume total de matriz extracelular e densidade de volume de colágeno. Em relação aos efeitos concomitantes da atividade física e da deficiência estrogênica, os resultados foram significativamente diferentes em relação a densidade numérica, volume total da cartilagem, volume médio dos condrócitos e densidade de volume de colágeno. Estes dados nos levam a concluir que a diminuição dos níveis de estrógeno afeta profundamente a cartilagem articular da cabeça do fêmur, enquanto a atividade fisica contínua é benéfica para esta cartilagem, incluseve quando há deficiência estrogênica. / Several studies show that estrogen has an important function in maintaining the structure of articular cartilage and that deficiency in women can cause an increase in the incidence of joint degeneration. It is also known that physical activity can bring benefits to this type of tissue, reducing the risk of joint damage. However, there are few works that relate these two factors: continuous physical activity and estrogen deficiency. The aim of this study is to verify the effects of estrogen deficiency on joint cartilage, its implications, and if frequent and moderate physical activity is able to reverse the natural process of joint degeneration. A total of 12 adult female rats were divided into four groups of three animals in a random and systematic way, as follows: sedentary control rats (RCS), trained control rats (RCT), ovariectomized sedentary rats (ROS) and trained ovariectomized rats (ROT). Each group was analyzed by light microscopy and transmission electron microscopy. Results were obtained from the stereological method. The values were statistically significant in relation to estrogen deficiency for the parameters: weight, physical condition, numerical density of chondrocytes, total number of chondrocytes, chondrocyte volume density, volume density of extracellular matrix, the total volume of the extracellular matrix and volume density of collagen. Regarding the concomitant effects of physical activity and estrogen deficiency, the results were significantly different in numerical density, total volume of cartilage, mean volume of chondrocytes and volume density of collagen. These data take us to conclude that the decrease in estrogen levels profoundly affects the articular cartilage of the femoral head, while the continuous physical activity is beneficial to this cartilage, also in estrogen deficiency.

O resveratrol (RES), um composto natural, é encontrado em diversas plantas, mas pode ser observado em altas concentrações na uva e nos vinhos tintos, apresentando propriedades antioxidantes e condroprotetoras capazes de proteger a cartilagem articular, no entanto, os efeitos do resveratrol frente à subnutrição ainda são desconhecidos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da suplementação com resveratrol sobre o tecido cartilagíneo do joelho de ratos submetidos a uma subnutrição protéica. Para tanto, foram formados 6 grupos experimentais de animais subnutridos e nutridos nos períodos pré e pós-natal com 21 e 60 dias de vida (Grupos S21 e N21; e S60 e N60, respectivamente). Dois grupos de 60 dias, um submetido à recuperação protéica e outro suplementado com resveratrol (ambos a partir do 22º dia) formaram, respectivamente os grupos RN60 e RES60. Após o desmame, foram mensurados os parâmetros metabólicos de ingestão hídrica e alimentar, bem como os de excreção de fezes e urina. As amostras da articulação do joelho foram processadas com técnicas rotineiras de histologia e submetidas a colorações que permitam evidenciar os componentes cartilagíneo e de colágeno. Os aspectos tridimensionais e ultraestruturais da cartilagem articular também foram analisados. Para as avaliações relativas aos dados metabólicos foi utilizada a Análise de Variância - ANOVA com dois fatores (idade e dieta) e quando necessário aplicou-se pós-teste de Bonferroni. Para as demais variáveis empregou-se a Análise de Variância - ANOVA com dois fatores (idade e dieta) e a Análise de Variância ANOVA com um fator e, quando necessário, aplicaram-se comparações múltiplas pelo método de Tukey. Os nossos resultados mostram que a subnutrição é capaz de modificar as propriedades biomecânicas das cartilagens articulares do fêmur e da tíbia, causando atraso no seu desenvolvimento. Quanto às dietas aqui empregadas, mostram que a renutrição protéica melhora os efeitos da subnutrição sobre a cartilagem articular, mas não recupera em comparação ao grupo controle, enquanto que, a renutrição suplementada com resveratrol, reestabelece os parâmetros analisados. Conclui-se que o resveratrol auxiliou na recuperação dos efeitos deletérios da subnutrição, melhorando os aspectos metabólicos, estruturais e ultraestruturais da cartilagem articular do fêmur e da tíbia em fases precoces do desenvolvimento. / Resveratrol (RES), a naturally occurring compound is found in several plants, but can be observed at high concentrations in grapes and red wines having antioxidant and chondroprotective properties and able to protect the articular cartilage, however, the effects of resveratrol front malnutrition are still unknown. Thus, this study aimed to evaluate the effects of supplementation with resveratrol on the cartilage tissue of the knee of rats submitted to protein malnutrition. Thus, we formed six experimental groups of malnourished and nourished animals pre- and postnatal 21 and 60 days (Groups S21 and N21, and N60 and S60, respectively). Two groups of 60 days, one submitted to protein recovery and other supplemented with resveratrol (both from the 22nd day) formed respectively the RN60 and RES60 groups. After weaning, metabolic parameters of water and food intake and the excretion of faeces and urine were measured. The knee joint specimens were processed for routine histology staining techniques and submitted to which emphasize the collagen and cartilage components. Three-dimensional and ultrastructural aspects of articular cartilage were also analyzed. For assessments of the metabolic data was used analysis of variance - ANOVA with two factors (age and diet) and when necessary applied Bonferroni post-test. For the other variables we used analysis of variance - ANOVA with two factors (age and diet) and analysis of variance - ANOVA with one factor and, when necessary, we applied multiple comparisons by the Tukey method. Our results show that malnutrition is able to modify the biomechanical properties of articular cartilage of the femur and tibia, causing delays in their development. The diets used here, show that the protein renutrition improves the effects of malnutrition on the articular cartilage, but does not recover as compared to the control group, while renutrition supplemented with resveratrol, restores the parameters analyzed. We conclude that resveratrol helped him overcome the deleterious effects of malnutrition, improving metabolic, structural and ultrastructural aspects of the articular cartilage of the femur and tibia in the early stages of development.

Damage to articular cartilage, whether through degeneration (i.e. osteoarthritis) or acute injury, is particularly debilitating due to the tissue's limited regenerative capacity. These impairments are common: nearly 27 million Americans suffer from osteoarthritis and 36% of athletes suffer from traumatic cartilage defects. Allografts are the preferred treatment for large cartilage defects, but demand for these tissues outweighs their supply. To generate additional replacement tissues, tissue engineering strategies have been studied as a cell-based alternative therapy. Our laboratory has had great success repeatedly achieving native or near-native mechanical and biochemical properties in grafts engineered from chondrocyte-seeded agarose hydrogels. The most common iteration of this technique yields a disk of ~4 mm diameter and ~2.3 mm thickness. However, much work is still needed to increase the potential for clinical translation of this product. Our laboratory operates under the premise that in vivo success is predicated on replicating native graft properties in vitro. Compared to these engineered grafts, native grafts are larger in size. They consist of cartilage, which has properties varying in a depth-specific manner, anchored to a porous subchondral bone base. They are able to be stored between harvest and transplantation. This dissertation presents strategies to address a subset of the remaining challenges of reproducing these aspects in engineered grafts. First, graft macrostructure was addressed by incorporating a porous base to generate biomimetic osteochondral grafts. Previous studies have shown advantages to using porous metals as the bony base. Likewise, we confirmed that osteochondral constructs can be cultured to robust tissue properties using porous titanium bases. The titanium manufacturing method, selective laser melting, offers precise control, allowing for tailoring of base shape and pore geometry for optimal cartilage growth and osteointegration. In addition to viability studies, we investigated the influence of the porous base on the measured mechanical properties of the construct's gel region. Through measurements and correlation analysis, we linked a decrease in measured mechanical properties to pore area. We promote characterization of such parameters as an important consideration for the generation of functional grafts using any porous base. Next, we investigated a high intensity focused ultrasound (HIFU) denaturation of gel-incorporated albumin as a strategy for inducing local tissue property changes in constructs during in vitro growth. HIFU is a low cost, non-contact, non-invasive ultrasound modality that is used clinically and in the laboratory for such applications as ablation of uterine fibroids and soft tissue tumors. Denaturing such proteins has been shown to increase local stiffness. We displayed the ability incorporate albumin into tissue engineering relevant hydrogels, alter transport properties, and visualize treatment with its denaturation. HIFU treatment is aided by the porous metal base, allowing for augmented heating. Though heating cartilage is used in the clinic, it is associated with cell death. We investigated this effect, finding that the associated loss of viability remains localized to the treatment zone over time. This promotes the option of balancing desired changes in tissue properties against the concomitant cell viability loss. In order to match clinically utilized allografts, engineered constructs must be scaled up in size. This process is limited by diffusional transport of nutrients and other chemical factors, leading to preferential extracellular matrix deposition in the construct periphery. Many methods are being investigated for overcoming this limitation in fixed-size constructs. In this chapter, we investigated a novel strategy in which small constructs are cultured for future assembly. This modular assembly offers coverage of variable sized defects with more consistent growth with more uniform distribution of biochemical constituents than large constructs cultured on their own. Physiologic failure testing showed that integration of these tissues may be strengthened by increased subunit strength or assembled culture. It is expected that bioadhesive caulking and/or the incorporation of osteochondral bases would further increase integration of the assembled large graft. Finally, we sought to provide a preservation/storage protocol for engineered cartilage constructs. Such a technique is critical for clinical translation, providing the engineered graft with a “shelf-life.” We adopted and evaluated the Missouri Osteochondral Allograft Preservation System (MOPS), which had been shown to maintain cell viability in native grafts for at least 63 days at room temperature without serum or growth factors. Within the current clinical of 28 days, MOPS maintained chondrocyte viability and 75% of the pre-preservation Young's modulus without significant decline in biochemical content, however it did not extend the clinical window as it had with native grafts. Refrigeration with MOPS did not show any benefit at day 28, but proved better with longer preservation times. These results are the first evaluating engineered cartilage storage. Further optimization is necessary to extend storage tissue property maintenance in storage. Overall, this dissertation presents four strategies for increasing the translation potential of engineered articular cartilage grafts by better matching the clinically utilized native allograft system. Combining these techniques, one could ideally engineer small, interlocking ostechondral constructs with HIFU modified interface properties, which could be stored from maturity to implantation. Future optimization is required to better understand and utilize these methods to engineer fully functional, clinically relevant grafts.

A artroscopia tem função diagnóstica e terapêutica na doença articular. Mesmo com as modalidades de imagem mais modernas, ainda é considerada como padrão ouro no diagnóstico de problemas articulares em equinos. Sabe-se que as características físico-químicas das diferentes soluções de infusão podem determinar alterações estruturais na superfície da cartilagem. Apesar da existência de estudos baseados na busca de um fluido ideal para irrigação durante a artroscopia, com principal foco nas características bioquímicas do líquido, poucos trabalhos testaram características físicas destes fluidos, como a temperatura. Na primeira etapa deste trabalho foram avaliadas 24 articulações de ovinos submetidas à irrigação articular com solução de Ringer com lactato condicionado a quatro diferentes temperaturas (5, 12, 25 e 38 ºC). Para avaliação de cada grupo foram coletadas biopsias comparativas de membrana sinovial e de cartilagem com osso subcondral da articulação femoropatelar visando análise histológica e por microscopia eletrônica de varredura, respectivamente, imediatamente antes do início da infusão do líquido e após uma hora de infusão. Apesar de alterações na ultraestrutura da superfície articular terem sido observadas após lavagem das articulações, nenhuma diferença estatística entre os grupos foi identificada. Na segunda etapa do experimento foram testadas as temperaturas 5, 25 e 38 °C do Ringer com lactato utilizado para irrigação articular durante procedimentos artroscópicos em 12 articulações radiocárpicas de seis equinos. As articulações foram divididas em três grupos de quatro, sendo avaliados, além da membrana sinovial e cartilagem, o líquido sinovial previamente ao início da infusão com fluido condicionado e 12, 24 e 48 horas após o término da irrigação, visando análise comparativa das concentrações de IL-1β, PGE2, TNF-α, condroitim sulfato (CS) e ácido hialurônico (AH). As alterações da superfície articular dos equinos decorrentes da irrigação também foram independentes da temperatura utilizada. Houve um aumento significativo das concentrações de PGE2 e IL-1β no líquido sinovial às 12 horas em todos os grupos, exceto para IL-1β no grupo de articulações irrigadas com fluido a 38 °C, que não apresentou alteração nas concentrações. A análise de TNF-α não revelou diferença significativa entre os grupos. As concentrações de CS aumentaram às 24 horas nos três grupos e foi estatisticamente maior no grupo irrigado a 38 °C. Não houve diferença significativa das concentrações de AH no líquido sinovial do grupo de articulações irrigadas a 25 °C, o que não ocorreu nos grupos 5 e 38 °C, havendo diminuição às 24 e 12 horas, respectivamente, retornando aos valores basais na coleta subsequente. As biopsias de membrana sinovial coletadas em ambas as etapas do experimento não demonstraram alteração estrutural ou migração celular que inferissem em resposta inflamatória ao insulto. As alterações da ultraestrutura da superfície da cartilagem estão mais relacionada ao fator mecânico da passagem do líquido que à temperatura de acondicionamento. Apesar de mais análises serem necessárias para definição da melhor temperatura a ser utilizada durante as artroscopias, a detecção de menores concentrações de IL-1β nas articulações de equinos irrigadas com Ringer com lactato a 38 °C sugerem de que essa seja a temperatura menos deletéria para o ambiente articular. / Arthroscopy has a diagnostic and a therapeutic function in joint disease. Even with modern imaging modalities, it is still considered the gold standard for diagnosing equine joint problems. It is known that the physicochemical characteristics of different infusion solutions could influence structural modifications on cartilage surface. A number of studies have described the search for the ideal fluid to be used for irrigation during arthroscopy, focusing on the biochemical characteristics of the various liquids. However, few works have taken temperature into consideration when studying the physical characteristics of these fluids. Therefore, in the first phase of this study four different temperatures of Ringer lactate used for articular irrigation were assessed into four groups of six ovine joints each (5, 12, 25 and 38 ºC). To evaluate each group, comparative synovial membrane and osteochondral samples were collected from the patellofemoral joints for histological analysis and Scanning Electron Microscopy, respectively, immediately before and 1 hour after starting fluid infusion. Ultrastructural changes of the joint surfaces after irrigation were observed, but no statistical differences between groups were identified. In the second phase of this study, lactated Ringers solution was assessed at three different temperatures: 5, 25 and 38°C, for irrigation of 12 radiocarpal joints of six horses during arthroscopy. Three groups of four joints were studied to evaluate synovial membrane, cartilage and synovial liquid immediately before and 12, 24 and 48 hours after joint irrigation. These samples were subjected to comparative analysis of IL-1&beta, PGE2, TNF-&alpha, condroitin sulfate (CS) and hyaluronic acid (HA) concentrations. Changes of equine joint surfaces were also independent of temperature. There was a significant increase in the PGE2 and IL-1β concentrations in the synovial liquid at 12 hours in all groups except for IL-1β on the joints irrigated with fluid at 38°C, which did not show concentrations changes. There was no statistical difference of TNF-&alpha between groups. CS concentrations had a significant increase at 24 hours in all groups, meanwhile in the 38 °C group this increased was statistically greater. There was no statistical difference for HA concentrations on synovial liquid of the irrigated joints at 25 °C. In the 5 and 38 °C groups there were synovial fluid HA decrease at 24 and 12 hours, respectively, returning to basal values at the subsequent collect. The synovial membrane biopsies collected in the both steps of this study did not show any structural alterations or cellular migration that might interfere in response to inflammatory insult. Ultrastructural changes in articular most superficial zone are more related to mechanic action of fluid lavage than irrigation solutions temperature. Although more tests needs to be done, the lowest concentrations of IL-1β in equine joints irrigated with Ringer lactate at 38 °C give some evidence that this is the less deleterious temperature to articular environment.

A doença degenerativa da cartilagem articular, ou osteoartrose, pode ser causada por diversos fatores, dentre eles o envelhecimento. Com o aumento da longevidade no Brasil, a prevalência da osteoartrose vai aumentar com o aumento progressivo da idade média da população nas próximas décadas. O estresse do dia a dia, com o avanço da vida moderna, são acompanhados pela má alimentação, sendo essa caracterizada por uma subnutrição ou até uma nutrição excessiva. Utilizando ratos Wistar, como modelo experimental, o objetivo deste trabalho é verificar se a alimentação com baixo nível calórico ameniza ou acelera as alterações na estrutura da cartilagem articular das epífises distal do fêmur e proximal da tíbia, causadas pelo envelhecimento. Para tanto foram utilizadas 15 ratos, separados em três grupos, com 5 animais cada: C- animais de 06 meses alimentados com dieta normal (A); SR- animais de 18 meses alimentados dieta normal (A); RC- animais de 18 meses submetidos à restrição calórica de 31% alimentados com dieta B. A avaliação foi realizada pela microscopia de luz em cortes histológicos corados pela Hematoxilina-Eosina, Picrossírius e por imunohistoquímica com marcação do colágeno tipo II. Foram feitas medidas da espessura das zonas da cartilagem articular, contado o número de condrócitos por área, determinados os volumes dos núcleos dos condrócitos, a morfometria do colágeno, a identificação dos tipos de colágeno e a análise imunohistoquímica. Os resultados mostram que os animais do grupo RC ganharam massa corpórea de maneira significativamente mais lenta que os do SR a partir dos 8 meses. Os animais do SR apresentaram na tíbia, aumento da espessura total bicondilar provocado pelo aumento da zona profunda, aumento do número de condrócitos no côndilo lateral, manutenção do volume dos núcleos e da proporção volumétrica de colágeno, marcação mais heterogenea do colágeno tipo II no côndilo lateral, predominância desse tipo de fibras na zona média do côndilo medial. No fêmur os animais do SR mostraram diminuição da espessura total bicondilar provocada pela diminuição da zona profunda, sendo menor no côndilo medial, diminuição do número de condrócitos causado por diminuição da zona profunda, sendo menor no côndilo medial, diminuição do volume total dos núcleos dos condrócitos no côndilo medial, diminuição da proporção volumétrica do colágeno bicondilar, marcação heterogênea do colágeno tipo II, predomínio desse tipo de fibras nas zonas média e profunda bicondilar. Os animais do RC apresentaram na tíbia, manutenção da espessura, aumento do número de condrócitos bicondilar, manutenção do volume nuclear, aumento da densidade de colágeno, marcação menos heterogênea do colágeno tipo II no côndilo lateral, predominância desse tipo de fibras nas zonas média e profunda do côndilo lateral. No fêmur, os animais do RC mostraram aumento da espessura total pelo aumento da zona profunda no côndilo medial, aumento do número de condrócitos pelo aumento da zona profunda, sendo maior no côndilo medial, aumento do volume total dos núcleos dos condrócitos bicondilar, aumento da proporção volumétrica de fibras colágenas no côndilo medial, marcação heterogênea do colágeno tipo II e predomínio desse tipo de fibras nas três zonas da cartilagem. Dessa maneira, concluímos que os efeitos do envelhecimento e da restrição calórica são diferentes nas cartilagens articulares da tíbia e do fêmur. As alterações naturais do envelhecimento são amenizadas pela restrição calórica na cartilagem articular do fêmur, porém na cartilagem articular da tíbia, essas alterações são compatíveis com início de doença degnerativa sendo intensificadas pela restrição com sinias de avanço de osteoartrose. / A degenerative disease of articular cartilage, or osteoarthritis, can be caused by several factors, including aging. With increased longevity in Brazil, the prevalence of osteoarthritis will increase with the progressive increase of the average age of the population in the coming decades. The stress of everyday life, with the advance of modern life, are accompanied by poor diet, this being characterized by malnutrition or even excessive nutrition. Using Wistar rats as experimental model, the aim of this work is to verify if feeding with low calorie softens or accelerates changes in the structure of articular cartilage of the epiphysis of the distal femur and proximal tibia, caused by aging. For this purpose were used 15 rats divided into three groups with five animals each: C, 6 month animals fed with normal diet (A), SR-18 month animals fed with normal diet (A), RC-18 month animals submitted to calorie restriction of 31% fed with diet B. The evaluation was performed by light microscopy in histological sections stained with Hematoxylin-Eosin, Picrossirius and by immunohistochemistry with tagging of type II collagen. Measurements were made of thick zones of articular cartilage, counted the number of chondrocytes per area, the volumes of certain nuclei of chondrocytes, collagen morphometry, the identification of the types of collagen and immunohistochemical analysis. The results show that the RC group animals gained body mass significantly slower than the SR from 8 months. The SR animals showed increasing of total thickness bicondylar of the tibia caused by the increase in the deep zone, increasing of the number of chondrocytes in the lateral condyle, maintaining the volume of the cores and the volumetric proportion of collagen, the most heterogeneous labeling of type II collagen in the lateral condyle, predominance of such fibers in the middle zone of the medial condyle. In the femur the SR animals showed decreased of total bicondylar thickness caused by the decrease of deep zone, being lower in the medial condyle, decreasing the number of chondrocytes caused by decreased deep zone, being lower in the medial condyle, decreased total volume of nuclei chondrocytes in the medial condyle, decreased volumetric proportion of collagen bicondylar, marking heterogeneous collagen type II predominance of such fibers in the middle and deep zones bicondylar. The RC animals showed in the tibia, maintaining thickness, increasing the number of chondrocytes bicondylar, maintenance of nuclear volume, increased collagen density, less heterogeneous marking of type II collagen in the lateral condyle, the predominance of this type of fiber areas and average deep lateral condyle. In the femur, the animals RC showed increased of total thickness caused by increasing of the medial condyle deep zone, increasing the number of chondrocytes by increasing the deep zone, being greater in the medial condyle, increasing the total volume of the nuclei of chondrocytes bicondylar, increased volumetric proportion of collagen fibers in the medial condyle, heterogeneous marking of type II collagen and prevalence of this type of fiber in the three zones of cartilage. Thus, we conclude that the effects of aging and caloric restriction are different in the articular cartilage of the tibia and femur. The natural changes of aging are attenuated by caloric restriction in the articular cartilage of the femur, but in the articular cartilage of the tibia, these changes are consistent with early degenerative disease being intensified by restriction with signs of advanced osteoarthritis.

O objetivo do presente estudo foi comparar dois métodos utilizados para determinar a posição do disco articular em boca fechada por meio de imagens sagitais corrigidas de Ressonância Magnética (RM). Um método analisa a localização da banda posterior em relação aos ponteiros de um relógio, e o outro analisa a localização da zona intermediária do disco articular em relação à cabeça da mandíbula e o tubérculo articular. Este estudo também avaliou a correlação entre o diagnóstico clínico e o diagnóstico obtido por cada método. Uma amostra de 20 pacientes com sinais e sintomas de disfunção temporomandibular foi examinada clinicamente e um diagnóstico clínico foi obtido. Imagens sagitais corrigidas de RM foram obtidas de ambas as articulações utilizando um aparelho de 0,3T com bobinas de superfície bilaterais. O método baseado nos ponteiros de horas de um relógio resultou numa maior percentagem de discos articulares com deslocamento anterior (52,5%) quando comparado ao segundo método (30,0%). Foi encontrada diferença estatisticamente significante entre os dois métodos. A concordância geral entre ambos os métodos foi de 77,5%, a concordância entre o diagnóstico clínico e o método do relógio foi de 70,0%, e a concordância entre o diagnóstico clínico e o método da zona intermediária foi de 87,5%. Não foi encontrada diferença estatisticamente significante entre o diagnóstico clínico e o método baseado na localização da zona intermediária. / The purpose of the present study was to compare two methods used to determine disc position with the mouth closed based on corrected sagittal Magnetic Resonance (RM) images. One method analyzes the posterior band location in terms of hours on a clock face, and the other analyzes the location of the intermediate zone of the disc in relation to the mandibular head and the articular tubercle. This study also evaluated the correlation between the clinical diagnosis with the diagnosis obtained by each method. A series of 20 patients with signs and symptoms of temporomandibular dysfunction was clinically examinated and a clinical diagnosis was reached. Corrected sagittal RM images were acquired for both joints using a 0.3T equipment with bilateral surface coils. The method based on the posterior band location in terms of hours on a clock face yielded a higher percentage of anterior displaced discs (52.5%) when compared with the second method (30.0%). Statistically significant difference between the two methods was found. The overall agreement between both methods was 77.5%, the agreement between the clinical diagnosis and the clock face method was 70.0%, and the agreement between the clinical diagnosis and the intermediate zone method was 87.5%. No statistically significant difference was found between the clinical diagnosis and the method based on the location of the intermediate zone.

A incidência de osteoartose, ou degeneração da cartilagem articular aumenta na pós-menopausa, condição esta relacionada à deficiência de estrógeno. Por outro lado, tem sido demonstrado que a atividade física regular e moderada tem efeitos benéficos sobre o sistema esquelético, em qualquer condição, mas especialmente na menopausa. Utilizando ratos Wistar, como modelo experimental, os objetivos deste trabalho são: a) verificar se a ooforectomia produz alterações na estrutura da cartilagem articular da epífise proximal da tíbia e b) verificar se a realização de exercícios físicos aeróbicos tem efeito sobre estas alterações. Para a realização deste estudo foram utilizadas 24 ratas com 6 meses de idade, da linhagem Wistar, distribuídas em 3 grupos de oito ratas cada: GC-Ratas com seis meses de idade, não submetidas à ooforectomia nem atividade física; GOS-Ratas com seis meses de idade, que sofreram ooforectomia bilateral, mas que não fizeram atividade física e, GOT-Ratas com seis meses de idade que foram submetidas à ooforectomia bilateral mais atividade física (corrida em esteira) durante 3 meses. Todos os animais foram eutanasiados com 9 meses de idade. A avaliação foi realizada através de microscopia de luz em cortes histológicos corados pela Hematoxilina-Eosina e pelo Picrossírius e estudos à microscopia eletrônica de varredura. À microscopia de luz, foram feitas medidas da espessura das zonas da cartilagem articular, contado o número de condrócitos por área, determinados os volumes dos núcleos dos condrócitos e a densidade de volume das fibras colágenas e à microscopia eletrônica de varredura foi analisada a superfície da cartilagem nos três grupos. Os dados quantitativos foram comparados estatisticamente pelo ANOVA e teste de Tukey. Os resultados mostraram que houve um aumento de peso nos animais do GOS e GOT em relação ao GC. Quanto ao treinamento, os animais do GOT tiveram melhor rendimento nos TEMs. Quanto à espessura da cartilagem observamos um aumento da espessura da zona superficial no côndilo medial da tíbia no GOS em relação ao GC. O número de condrócitos por campo foi alterado apenas no GOS, que mostrou um aumento de 34% em relação ao GC, o que, ao que parece, se deveu ao aumento do número de condrócitos da camada profunda. O volume nuclear dos condrócitos da zona superficial foi menor no GOS que no GC. O mesmo ocorreu na zona média do côndilo medial. Quanto aos valores da cartilagem da epífise proximal como um todo, observamos que o volume nuclear dos condrocitos do GOS e também do GOT foram menores do que do GC. Para o colágeno observamos um aumento da densidade de volume do colágeno no GOS e no GOT em relação ao GC. A microscopia eletrônica revelou a presença de lesões degenerativas semelhantes tanto para o GOS, quanto para o GOT. Podemos concluir que a depressão dos níveis de estrógeno acarreta alterações importantes na cartilagem articular da epífise proximal da tíbia tanto no componente celular, quanto na matriz e que a realização de exercícios físicos, isoladamente, parece não influenciar essas alterações. / The incidence of osteoarthritis increase in women in the post-menopausal period. This condition is relationed with the estrogen deficiency. Otherwise, it\'s being demonstrated that regular or moderate physical activity have beneficial effects on the skeletal system, in any condition, but especially in the menopause. Using Wistar rats, as an experimental model, the aims of this work are: a) to check if the ovariectomy produces alterations in the articular cartilage structure of the tibial proximal epiphysis and b) To check if aerobic physical exercises have effects on this alterations. To achieve these goals it was used 24 Wistar rats of 6 months of age, distributed in 3 groups of eight rats each: Control group- Rats with six months of age without ovariectomy and physical activity; GOS- Rats with six months of age with ovariectomy bilateral and without physical activity and, GOT- Rats with six months of age with ovariectomy bilateral and physical activity during 3 months. Al rats were euthanasied with 9 months of age. The results were obtained by using light microscopy to observe the histological sections stained with Hematoxylin and Eosin, and Picrosirius stain and the Scanning Electron Microscope. For light microscopy, were measured the thickness of cartilage, counted the number of chondrocytes, determined the volumes nuclei of chondrocytes and the density of volume of the collagens fibers. For the Scanning Electron Microscope, was analyzed the cartilage surface in the three groups. The data were statistically compared for the ANOVA and Tukey´s test. The results showed that there was an increase in the weight in the animals of GOS and of GOT. In relation to training, the animals of GOT obtained the best income in the TEMs. In relation to the thickness of the articular cartilage it was observed a decrease in the superficial layer of the medial condyle in the GOS and GOT. The number of chondrocytes was altered only in the GOS, that obtained an increase of the 34% on GC in the deep layer. The nuclear volume of chondrocytes in the superficial layer was higher in the GC than the GOS .The same occurred in the medium layer when the two tibial condyles, lateral and medial were assessed separately, but when the values of the epiphysial cartilage was considered as a whole, we found that the volume nuclei of chondrocytes in the GC was higher than the GOS and the GOT. For the collagen, the values of density of volume of the collagen fibers was higher in the GOS and in the GOT than the GC. The Scanning Electron microscopy showed the presence of degenerative lesions in both GOS and GOT. We can conclude that the depression levels of estrogen produced important changes in the tibial cartilage and that the physical activity doesn\'t have effects on these changes.

Orientador: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Isabel Cristina Boleli / Banca: Cristiane Soares da Silva Araújo / Resumo: Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do sulfato de glucosamina, de condroitina e da associação de ambos no sistema locomotor e no desempenho de frangos de corte de 1 a 42 dias de idade. Foram utilizados 900 pintos de corte machos de um dia, da linhagem Cobb-500®, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos e cinco repetições de 30 aves cada. Os tratamentos utilizados foram: T1 - controle negativo, T2 - 25% sulfato de glucosamina e 75% condroitina, T3 - 50% sulfato de glucosamina e 50% condroitina, T4 - 75% sulfato de glucosamina e 25% condroitina, T5 - 100% sulfato de 100% glucosamina e T6 - 100% sulfato de condroitina. As rações experimentais para fase de criação foram formuladas à base de milho e farelo de soja, seguindo-se as recomendações de Rostagno et al. (2011), para as respectivas fases de criação: inicial (1-21 dias) e crescimento (22-42 dias). Foram avaliados os parâmetros de desempenho zootécnico, rendimento de carcaça e partes, densitometria óssea dos tibiotarsos, histoquímica das cartilagens das tíbias localizadas nas epífises proximais e morfometria hepática, analisadas aos 21 e 42 dias. As análises estatísticas dos dados foram realizadas pela análise de variância com o auxílio do procedimento General Linear Model do SAS (2002) e em caso de significância estatística, as médias foram comparadas pelo teste de Tukey, ao nível de 5% de probabilidade. Os diferentes níveis de sulfato de glucosamina e de condroitina não determinaram efeito significativo sobre os parâmetros de desempenho das aves, rendimento de carcaça e partes e morfometria hepática. Entretanto, foi observado que o tratamento com o nível de 100% de sulfato de glucosamina proporcionou maior número de condrócitos nas cartilagens articulares de aves com 21 e 42 dias de idade. Para os parâmetros de densitometria, o nível de 100% de ... / Abstract: This study aimed to evaluate the effects of glucosamine sulfate, chondroitin and combination of both in the locomotor system and the performance of broiler chickens during 1-42 days of age. It was 900 Cobb - 500 ® line chicks, in a completely randomized design with six treatments and five replicates of 30 birds each design. The treatments were: T1 - negative control, T2 - 25 % glucosamine sulfate and 75% chondroitin, T3 - 50 % glucosamine sulfate and 50% chondroitin, T4 - 75 % glucosamine sulfate and 25 % chondroitin, T5 - 100 % of glucosamine sulfate and T6 - 100% chondroitin sulfate. The experimental diets for creation phase were formulated based on corn and soybean meal, following the recommendations of Rostagno et al. (2011), for the respective phases of creation: initial (1-21 days ) and grower ( 22-42 days). Parameters of growth performance, carcass and parts, bone densitometry of tibiotarsos, staining of cartilage located in the proximal tibia epiphysis and liver morphology, analyzed at 21 and 42 days were evaluated. Statistical analyzes of the data were performed by analysis of variance method with the aid of the General Linear Model of SAS  (2002 ) and in case of statistical significance, the means were compared by Tukey test at 5 % probability. The different levels of glucosamine and chondroitin sulfate did not cause significant effect on the parameters of broiler performance, carcass yield and liver parts and morphometry. However, it was observed that the treatment with the level of 100% glucosamine sulfate yielded a greater number of chondrocytes in articular cartilage in birds 21 and 42 days of age. For the parameters of densitometry, the level of 100 % of glucosamine sulfate provided greater bone mineral density at 21 days, but at 42 days of age, the level of 100 % of chondroitin sulfate provided higher income densitometry, outperforming the locomotors system / Mestre

O objetivo deste trabalho foi avaliar a membrana de celulose bacteriana associada a células mesenquimais, que foram inoculadas juntamente com derivado do ácido hialurônico, hylano G-F 20, em patelas lesadas de suínos. Foram utilizados 12 suínos (24 joelhos) submetidos à raspagem das superfícies articulares das patelas até osso esponjoso; joelhos esquerdos sem tratamento, grupo controle (GC). Joelhos direitos, grupo tratado (GT), tiveram membranas de celulose bacteriana fixadas às superfícies de suas patelas, sendo que as mesmas foram preparadas com inoculação de células mesenquimais, ósseas e cartilaginosas, provenientes das raspagens das superfícies, lavadas em solução fisiológica 0,9%, filtradas e diluídas em 5 ml de solução fisiológica à 0,9% e posteriormente acrescentados 2 ml de hylano G-F 20. Colhidos 5 ml dessa papa que teve contido o volume de 16,35 x \'10 POT.8\' células na sua totalidade, e foram infiltrados na membrana de celulose revestindo a patela, obedecendo a distribuição de 3,27 x \'10 POT.8\' por 1,2 \'CM POT.3\'. Após 2, 4 e 6 meses os animais foram sacrificados para avaliações macroscópicas e histológicas. As superfícies patelares apresentaram aspecto de neoformação de cartilagem aos dois meses; essas membranas evoluíram para tecido fibroso de altíssima resistência, com densidade de fibras conjuntivas aumentando proporcionalmente ao tempo de cirurgia, quatro ou seis meses conforme as células do infiltrado tiveram alterações morfológicas para fibroblastos Ao mesmo tempo, parte do volume dessas células sofreu processo de degeneração e morte celular, semelhante ao mecanismo de apoptose celular. Dessa forma, ofereceu substratos para as células remanescentes, colaborando para a neoformação desse tecido conjuntivo. Não ocorreram processos inflamatórios ou agressão às cartilagens em contigüidade à membrana. Pelo contrário, em relação ao grupo controle não tratado, a membrana de celulose bacteriana utilizada segundo a metodologia aplicada, atuou com uma barreira protetora para agressões maiores à cartilagem da fossa intercondilar do fêmur que manteve a integridade de seus contornos articulares. Desta forma, segundo a metodologia utilizada, concluímos que a membrana de celulose bacteriana apresentou biocompatibilidade para uso articular, hábil para agregar condrócitos e fibroblastos. / The goal of this work was to evaluate the bacterial cellulose membrane associated with mesenchymal cells, which were inoculated with hyaluronic acid derivative, G-F 20 hylano in patelas injured pigs. 12 pigs were used (24 knees) submitted to the scraping of the articular surfaces of spongy bone patelas up; knees left without treatment, group controller (GC). Knees rights, treated group (GT), bacterial cellulose membranes had fixed on their surfaces patelas, being that they were prepared with inoculation of mesenchymal cells, bone and cartilage from sweeps of surfaces, washed in 0.9% saline solution, filtered and diluted in 5 ml of saline solution to 0.9% and subsequently added 2 ml hylano G-F 20. Collected 5 ml that Pope had contained the volume 16.35 x \'10 POT.8\' cells in its entirety, and were infiltrated in the membrane of cellulose coating the patella, obeying distribution 3.27 x \'10 POT.8\' per 1.2 \'CM POT.3\'. After 2, 4 and 6 months the animals were sacrificed to macroscopic and histological evaluations. The surfaces patellar components submitted aspect of neoplasm of cartilage to two months; These membranes evolved into fibrous tissue resistance of high density fibrous tears increasing in proportion to the time of surgery, four or six months as had infiltrated cells for morphological changes while fibroblasts, part of the volume of these cells suffered process of degeneration and cell death, similar to the mechanism of cellular apoptosis. This way, offered substrates for the remaining cells, collaborating for this connective tissue neoplasm. There were no inflammatory processes or aggression on cartilage in adjacency to the membrane. On the contrary, compared to the untreated control group, the bacterial cellulose membrane used according to the methodology applied, served with a protective barrier for larger aggressions of cartilage of the femur intercondilar trench that maintained the integrity of its articular contours. This way, according to the methodology, we found that the bacterial cellulose membrane biocompatibility presented for use articulate, skilled to aggregate condrócitos and fibroblasts.

A subnutrição tem sido ao longo dos anos um dos maiores problemas de saúde pública do mundo, que acomete principalmente crianças de países em desenvolvimento. Estima-se que em Moçambique na África Oriental, cerca de 40% das crianças são acometidas pela desnutrição crônica que resulta dentre outras afecções em baixa estatura e diminuição da capacidade física. Este estudo visa avaliar a estrutura óssea de ratos wistar submetidos à dieta básica da população de Moçambique (DM) reproduzida em laboratório. Para isso a DM foi oferecida aos animais em fase pré e pós-natal durante 42 dias. Para alguns desses animais foi fornecida a DM acrescida de 20% de caseína (DMC) subsequentemente os grupos subnutrido de Moçambique (SM) e nutrido de Moçambique (NM). Foi formado também um grupo denominado renutrido (RM) composto por animais que receberão a DMC a partir do 22&ordm; dia e até completarem 42 dias de vida. Após o desmame foram mensurados os parâmetros metabólicos da ingestão alimentar e hídrica, excreção de urina e fezes. A tíbia e o úmero do lado direito foram macerados quimicamente a fim de verificar as medidas ósseas. Esses ossos do lado esquerdo foram processados com técnicas rotineiras histológicas e corados de forma a evidenciar as estruturas cartilagineas. Os dados obtidos foram submetidos a análise de variância paramétrica seguida por comparações múltiplas pelo método de Tukey, com nível de significância p&lt;0,05. Os resultados apontam que a Subnutrição é capaz de modificar a espessura da CA e da LE e os componentes de sua MEC. Embora a inserção de caseína na dieta dos animais SM, tenha reestabelecido parâmetros da osteometria, na LE e na CA a melhora apresentada, não foi o suficiente para atingir seus parâmetros normais apresentados no grupo NM / Undernutrition has been over the years one of the major public health problems worldwide, which affects mainly children in developing countries. It is estimated that in Mozambique in East Africa, about 40% of children are affected by chronic undernutrition resulting from other conditions in stature and diminished physical capacity. This study aims to evaluate the bone structure of Wistar rats submitted to the staple diet of the population of Mozambique (DM) reproduced in the laboratory. To this DM was given to the animals in pre and postnatal 42 days. For some of these animals was provided to DM plus 20% casein (DMC) subsequently the undernourished groups of Mozambique (SM) and nursed Mozambique (NM). Also it has formed a group called renutrido (RM) consists of animals that receive the DMC from the 22nd day until completing 42 days of life. After weaning metabolic parameters were measured food and water intake, urine output and feces. The tibia and the humerus on the right side were chemically macerated in order to verify the bone measurements. These bones on the left side were processed with routine histological techniques, and stained to show the form cartilage structures. The data were subjected to parametric analysis of variance followed by multiple comparisons by the Tukey method, with significance level of p <0.05. The results show that the Malnutrition is able to modify the thickness of the CA and LE and the components of its MEC. Although the inclusion of casein in the diet of animals SM, has reestablished osteometria parameters in LE and CA improvement presented, was not enough to achieve their normal parameters presented in NM group