Moderate consumption of red wine has been widely associated with reduced cardiovascular risk, mainly due to its composition in phenolic compounds with antioxidant activity, such as trans-resveratrol. Our aim was to compare the effect of red wine vs trans-resveratrol consumption on the prevention and regression of atherosclerosis in LDLr (-/-) mice. This study consisted of two protocols: \"PREVENTION\" (PREV) and \"REGRESSION\" (REGR). Both protocols included four groups: red wine (WINE), dealcoholized red wine (EXT), trans-resveratrol (RESV), and control (CONT). In PREV protocol, animals received a normal diet for 8 weeks and then switched to an atherogenic diet for the following 8 weeks, while the opposite was performed during REGR protocol. Animals that received atherogenic diet after an initial period on a normal diet (PREV) gained more body weight (39.25 ± 2.30%) than the opposite (29.27 ± 1.91%, p=0.0013), suggesting an interaction between age and weight gain. Trans-resveratrol showed the highest hypocholesterolemic effect in PREV protocol, reducing total cholesterol, LDL-C and VLDL-C, but also HDL-C. The supplementation with trans-resveratrol and dealcoholized red wine changed the fatty acids profile in the liver in both protocols, leading to an increase of MDA concentrations and SOD activity in PREV protocol. All three forms of supplementation altered biomarkers of oxidative stress and lipidemia but presented no effect on the prevention or regression of fatty streaks. These results suggest that the cardiovascular protection associated with the \"French Paradox\" may be a result of synergistic effects between wine and the Mediterranean diet. / O consumo moderado de vinho tinto tem sido amplamente associado à redução do risco cardiovascular, principalmente devido à sua composição em compostos fenólicos com atividade antioxidante, como o trans-resveratrol. Nosso objetivo foi o de comparar o efeito do consumo de vinho tinto vs trans-resveratrol na prevenção e regressão da aterosclerose em camundongos LDLr (-/-). Este estudo consistiu em dois protocolos: \"PREVENÇÃO\" (PREV) e \"REGRESSÃO\" (REGR). Ambos os protocolos incluíram quatro grupos: vinho tinto (WINE), vinho tinto sem álcool (EXT), transresveratrol (RESV) e controle (CONT). No protocolo PREV, os animais receberam uma dieta normal durante 8 semanas e trocaram para uma dieta aterogênica durante as 8 semanas seguintes, enquanto o oposto foi realizado no protocolo REGR. Os animais que receberam dieta aterogênica após um período inicial em dieta normal (PREV) ganharam mais peso corporal (39.25 ± 2.30%) do que o oposto (29.27 ± 1.91%, p=0.0013), sugerindo uma interação entre idade e ganho de peso. O trans-resveratrol mostrou efeito hipocolesterolêmico mais elevado no protocolo PREV, reduzindo colesterol total, LDL-C e VLDL-C, mas também o HDL-C. A suplementação com trans-resveratrol e vinho tinto sem álcool alterou o perfil de ácidos graxos do fígado em ambos os protocolos, levando a um aumento das concentrações de MDA e da atividade da SOD no protocolo PREV. Todas as três formas de suplementação alteraram biomarcadores do estresse oxidativo e lipidemia, mas não apresentaram efeito sobre a prevenção ou regressão de estrias gordurosas. Esses resultados sugerem que a proteção cardiovascular associada ao \"Paradoxo francês\" pode ser resultado de efeitos sinérgicos entre o vinho e a dieta mediterrânea.

FUNDAMENTO: O suco de laranja (Citrus sinensis) é rico em vitami-na C, folatos e seu principal flavonóide, a hesperidina, cuja conformação es-pacial é semelhante à genisteína de soja que tem ação favorável sobre o aparelho cardiovascular. A vitamina C é conhecida como potente inibidor da peroxidação lipídica. Mas sua capacidade por possuir efeitos terapêuticos no tratamento da aterosclerose é pouco estudada. OBJETIVO: O presente tra-balho visa a determinar se o suco de laranja pode ter efeito aditivo no trata-mento com estatinas e fibratos, reduzindo placas ateroscleróticas e a quanti-dade de LDL Oxidado (LDL ox). MÉTODOS: Análise do efeito do suco nas dimensões de cortes histológicos e na quantidade de anticorpos anti LDL oxidado (antiLDLox) em lesões ateroscleróticas na aorta de coelhos. RE-SULTADOS: O suco de laranja potencializou a redução de área de placas ateroscleróticas e a quantidade de LDL(ox) em relação às reduções obtidas com rosuvastatina e gemfibrozil. CONCLUSÕES: O suco de laranja tem efei-to sinérgico ao tratamento convencional da aterosclerose de coelhos / Statins and fibrates have been used as anti-atherosclerotic drugs. However, a high number of treated patients still present acute events and death by atherosclerotic complications. Flavonoid ingestion has been associ-ated with lower risk of death, lower incidence of coronary artery disease and more preserved endothelial function in atherosclerotic patients. Orange juice is rich in C vitamine, a well known potent inhibitor of lipidic peroxidation, and in flavonoids, mainly the hesperidine that seems the soy bean genisteine, which is associated with decrease LDL and increase HDL. Objective: In this work we studied if orange juice has addictive effect to statin and gemfibrozil in the treatment of rabbit atherosclerosis, reducing plaque area and oxidate LDL (LDLox). Methods: Five group of atherosclerotic rabbits, fed with 1% cholesterol enriched diet during 12 weeks, were analyzed: GI - received no treatment, GII Gemfibrozil 600mg/day, GIII treated with Gemfibrozil 600mg/day + orange juice, GIV - rosuvastatin/10mg / day and GV - rosu-vastatin/10mg / day + orange juice. The most severe atherosclerotic cross section in ascendant aorta was analyzed in H&E and anti-oxidated LDL (oxLDL) immunostained slides, obtaining intimal area, total vessel area, % luminal obstruction and % oxLDL area in intima. Results: The means (stan-dard deviations) of plaque area and % plaque area of oxLDL in GI were 1.05 (0.91) and 0.12 (0.13), with no significant difference with GII animals, respec- tively 3.85 (5.27) and 0.18 (0.22), but significantly reduced in GIII, 0.64 (1.56) and 0.03 (0.05). Similar data were seen in GIV, 2.11 (2.77) and 0.19 (0.25), compared with GV, 0.04 (0.09) and 0.00 (0.00). Conclusion: This work de-monstrates that orange juice has a potential synergistic action with statin and fibrates in reducing atherosclerosis and the mechanism seems to involve in-hibition of oxLDL concentration and migration of smooth muscle cells in the subendothelial space

O Diabete tipo 2 é uma síndrome heterogênea caracterizada por resistência à insulina e /ou diminuição relativa da função secretora das células &#946; pancreáticas. Os Diabéticos têm risco maior de desenvolver aterosclerose, que é uma doença inflamatória crônica que envolve a resposta imune. Os TLRs sinalizadores da resposta imune inata que ativam vias que participam na regulação da inflamação podem estar associados com a patogênese da aterosclerose. Além disso, são capazes de induzir a resistência à insulina. Estudos sugerem que a inflamação é um fator chave na aterogênese em diabéticos tipo 2. Citocinas pró-inflamatórias, como a IL-6 e o TNF-&#945;, são produzidas pelo tecido adiposo em grande quantidade em indivíduos obesos, especialmente em pacientes com DM2. Este estudo tem por objetivo avaliar a associação dos genes do TLR2, TLR4, TNF-&#945; e IL-6 com o diabetes tipo 2 e com a aterosclerose. Foram selecionados sessenta e um indivíduos DM2 e trinta e nove indivíduos normoglicêrmicos (grupo controle) na seção de Coronárias do Instituto Dante Pazzanese de Cardiologia (São Paulo, Brasil). O ultra-som de carótida foi utilizado para avaliar a presença de aterosclerose. Os polimorfismos dos genes TLR4 (Thr399lle), TLR2 (Arg753Gln), and IL6 (-174G>C) foram identificados pela PCR-RFLP. O polimorfismo dos genes TLR4 (Asp299Gly) and TNF-&#945; (-308G>A) foram detectados por HRM. A expressão do mRNA nos leucócitos do sangue periférico foi mensurado pela PCR em tempo real utilizando o gene GAPD como gene referência. No grupo diabéticos, indivíduos portadores do alelo IL-6 -174C apresentaram colesterol total, VLDL-C e triglicérides que os portadores do genótipo GG (respectivamente, p=0,007, p=0,006 e p= 0,030). A expressão de TLR4 foi maior em indivíduos do grupo diabéticos que no grupo controle (p=0,029). Em DM2, o genótipo TNF-&#945; -308GG foi associado com o aumento da expressão do mRNA do gene TNF-&#945; (p=0,031) e maiores concentrações de fibrinogênio que os portadores do alelo -308A (genótipo GA+AA) (p=0,020). Em indivíduos com aterosclerose o alelo TLR4 299Gly foi associado com altas concentrações de glicemia pós 75g de glicose (p=0,012). E portadores do alelo IL6 -174C apresentaram maiores concentrações de colesterol total e LDL-C que nos portadores do genótipo GG (ambos p<0,001). O polimorfismo -174G>C (alelo C) e o DM2 mostraram serem fatores de risco para a aterosclerose (odds ratio respectivamente: 3,0 and 16,962). E, o sexo masculino e a menopausa mostraram serem fatores de risco para o DM2. / Type 2 diabetes is an heterogeneous syndrome characterized by the resistance to insulin and/or relative decrease of the secretion of insulin of the pancreatic &#946; cells. T2DM are in high risk of develop atherosclerosis, that is a chronic inflammatory disease involving immune response. Many existing in the atherosclerotics plaques the TLRs are signaling for immune innate response, that activate inflammatory cells involved in progression of atherosclerotic disease. TLRs can be also associated with induction of the resistance to insulin. Many studies have been suggesting that inflammation is a key factor of the progression of atherosclerotic disease in type 2 diabetes. Proinflammatory cytokines, such as IL-6 and TNF-&#945;, are produced by the adipose tissue in high concentration in obese individuals, mainly among patients with T2DM. This study aims to investigate the relationship between TLR2, TLR4, TNF-&#945; and IL-6 gene expression and polymorphisms with T2DM and atherosclerosis. Sixty-one T2DM and thirty nine normoglycemic (control group) individuals were selected at the Coronary Session of the Instituto Dante Pazzanese de Cardiologia (Sao Paulo, Brazil). Carotid artery ultrassonography was used to evaluate the atherosclerotic status. Polymorphisms of TLR4 (Thr399lle), TLR2 (Arg753Gln), and IL6 (-174G>C) genes were detected by PCR-RFLP. TLR4 (Asp299Gly) and TNFA (-308G>A) gene polymorphisms were detected by HRM. Blood leukocytes mRNA expression was measured by real time PCR using GAPD as a reference gene. In T2DM, individuals carrying IL6 -174C allele had higher total cholesterol, VLDL-c and triglycerides than the genotype GG carriers (respectively, p=0,007, p=0,006 and p= 0,030). TLR4 mRNA expression was higher in T2DM than in control individuals (p=0,029). In T2DM group, TNF-&#945; -308GG genotype was associated with increased TNF-&#945; mRNA expression levels (p=0,031) and higher fibrinogen levels than those carrying -308A allele (GA+AA genotypes) (p=0,020). In individuals with atherosclerosis TLR4 299Gly allele was associated with high post-test glucose levels (p=0,012). And carrying IL6 -174C allele had higher total cholesterol and LDL-C than the genotype GG carriers (both p<0,001). The polymorphism -174G>C and the T2DM was related with risk for atherosclerosis (odds ratio respectively: 3,0 and 16,962) and, the male sex and menopause was related with risk for T2DM (odds ratio respectively: 3,401 and 3,025).

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-14T12:16:03Z No. of bitstreams: 1 josefernandopereiramesquita.pdf: 385112 bytes, checksum: a5fa839a6e884999adc84c3ba76f4c42 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-07-19T14:53:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 josefernandopereiramesquita.pdf: 385112 bytes, checksum: a5fa839a6e884999adc84c3ba76f4c42 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T14:53:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 josefernandopereiramesquita.pdf: 385112 bytes, checksum: a5fa839a6e884999adc84c3ba76f4c42 (MD5) Previous issue date: 2011-08-26 / Introdução: A doença renal crônica é uma síndrome clínica frequentemente associada à diversas comorbidades, sendo a doença cardiovascular sua principal causa de mortalidade e a aterosclerose uma condição presente na maioria dos pacientes. A disfunção sexual é complicação com alta prevalência nestes pacientes, tendo na disfunção erétil sua principal causa de queda de qualidade de vida, via comum dos processos ateroscleróticos. Objetivo: Avaliar a prevalência de disfunção erétil em pacientes portadores de doença renal crônica em tratamento conservador e correlacionar sua presença com fatores de risco cardiovascular e metabólico e avaliar se a doença renal crônica é fator de risco independente para disfunção erétil. Pacientes e Métodos: Avaliou-se 81 pacientes com idade média de 61,7+ 11,6 anos (extremos de 21 e 84 anos), acompanhados regularmente em ambulatório de nefrologia com caracterização da presença de comorbidades, hábitos e medicação em uso e aplicação do questionário específico (International Index of Erectile Function) para o diagnóstico clínico da presença de disfunção erétil. Realizou-se análise bivariada pelo teste do Qui-quadrado e regressão logística para análise do peso relativo das variáveis com significância estatística, sobre a variável desfecho. O nível de significância adotado foi menor ou igual a 0,05. Resultados: A prevalência de disfunção erétil foi de 76,5%. Pela análise multivariada, a presença de diabetes mellitus, seja como causa, seja como comorbidade foi considerada fator de risco para disfunção erétil (razão de chance - RC - 4,05 e intervalo de confiança de 95% - IC 95% - de 1,017 a 25,085), assim como menor tempo de conhecimento da condição de portador de doença renal crônica (tempo de doença menor que 60 meses com RC de 3,5 – IC 95% de 1,40 a 14,489). Conclusão: Concliu-se que a presença de disfunção erétil não apresentou relação estatística com a presença de comorbidades de risco cardiovascular, exceto para diabetes mellitus. Além disso, observou-se que o menor tempo de conhecimento da condição de portador de doença renal crônica foi condição de risco para a prevalência de disfunção erétil, talvez por condições clínico-metabólicas e inflamatórias comuns nesses pacientes. Entretanto, no presente estudo, não foi possível considerar a doença renal crônica como fator de risco independente para disfunção erétil. / Introduction: The chronic kidney disease (CKD) consists of a clinical syndrome consequential to a wide variety of illness wich, in direct or indirect ways, provokes imbalance of basics kidney’s functions. Frequently associated to many comorbidities , the CKD has as its major cause of mortality the cardiovascular illness. Furthermore, the aterosclerosis is normaly present in the majority of patients with functional kidney failure. Sexual dysfunction is a higly prevalent complication among these patients, and takes the erectile dysfunction (ED) as its main cause of falling quality of life, sharing the same course with the aterosclerotic process. Objective: The main goal of this study was to evaluate the prevalence of erectile dysfunction among patients with chronic kidney disease (phases III, IV and V) in conservative treatment , correlate it to cardiovascular and metabolic risk factors and analyze the CKD as a possible independent risk factor to ED or whether it correlates with the kind of comorbidity established. Methods: Eighty one patients, ranging from 21 to 84 years (mean 61.7 +/- 11.6 years), were randomly analyzed and followed-up through the ambulatory service of PrevenRim from IMEPEN Foundation with application of the questionnaire “Sexual Health Inventory for Men – SHIM (IIEF/5)” for clinical diagnosis of erectile dysfunction, after all patients gave informed consent. Statistical analysis were exploratory and descriptive; bivariate were done using the Chi-Square test and logistic regression was used to characterize the relative weight of different variables. Level of significance adopted was lesser or equal to 0,05 (p < 0,05). Results: Our data points towards a prevalence of 76.5% of erectile dysfunction among this group of patients, increasing with the age of these individuals and the phase of the disease, without reaching, however, a value for statistical significance. The presence of Diabetes mellitus (DM), whether being the cause or an associated comorbidity, was considered to be a risk factor for ED, with a substantial statistical meaning. Moreover, the time of knowing condition to be a carrier of CKD was, in this research, considered to be a risk factor for ED, when the patient has a short period of this knowledge, with statistical significance. Conclusions: The present study was able to demonstrate that the ED didn’t show any statistical relation with the major part of the comorbidities stablished, wich were considered to be of great importance in cardiovascular risk, except for DM. Also, we observed that the time of knowing condition to be a carrier of CKD, maybe for clinical-metabolic and inflamatory reasons in common among these patients, interfered in the prevalence of the ED in this group. However, considering the achievements of this research, none can be said about CKD being an independent risk factor for ED.

Orientadores: Andrei Carvalho Sposito, Eliana Cotta de Faria / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T15:58:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Virginio_VitorWilsondeMoura_M.pdf: 2355466 bytes, checksum: 77d04b1ff5936c26cd64f6d516447ff7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Atualmente aproximadamente 17 milhões de pessoas morrem por doenças cardiovasculares (DCV). No Brasil durante 2011 ocorreram cerca de 200 mil óbitos por DCV principalmente em decorrência da aterosclerose, classificada como uma doença imuno-inflamatória crônica que causa estreitamento luminal e gera diversas fatalidades como infarto agudo do miocárdio (IAM), acidente vascular encefálico (AVE), doença arterial periférica (DAP), entre outras. A DAP prediz outras DCV e é a principal causa de amputação devido a obstrução das artérias de membros inferiores. Análises histológicas indicam que a ruptura da placa, capa fibrosa do ateroma, erosão da placa e nódulo calcificado geram as principais fatalidades nas DCV. Até o momento não há biomarcadores plasmáticos para uso clínico afim de avaliar a estabilidade e a gravidade das placas ateroscleróticas, esse fato motiva a exploração de componentes envolvidos em doenças imuno-inflamatórias e no metabolismo lipídico tais como oxisteróis e marcadores da síntese e absorção do colesterol (MSAC). Os oxisteróis, principalmente 27-hidroxicolesterol (27-HDC) e 7-ketocolesterol estão envolvidos em mecanismos fisiopatológicos da aterosclerose e desempenham um papel na inflamação, citotoxicidade e necrose, além de funções no metabolismo lipídico. É relatado que os oxisteróis 24S- e 25-hidroxicolesterol (24S- e 25-HDC) estão envolvidos em doenças neurodegenerativas como Alzheimer. Estudos apontam uma causa em comum entre Alzheimer e aterosclerose, ambas são doenças inflamatórias crônicas, assim são necessárias mais investigações desses oxisteróis na doença aterosclerótica. A proteína de transferência de éster de colesterol (CETP) e proteína de transferência de fosfolípides (PLTP), assim como as lipoproteínas, podem mediar a transferência desses lípides. O objetivo desse trabalho foi quantificar concentrações de oxisteróis (24S-, 25-, 27-HDC e 7-ketocolesterol) e marcadores de síntese (desmosterol e latosterol) e absorção (?-sitosterol e campesterol) do colesterol em ateromas e plasma de 10 indivíduos com DAP (grupo DAP) e comparar com artérias sem ateroma de 13 voluntários (grupo CTL). Também relacionar esses esteróis com outros parâmetros como histórico clínico e proteínas de transferência de lípides. Foram realizadas análises clínicas e bioquímicas, classificações histológicas dos ateromas e quantificações de esteróis em artérias e plasma. Para interpretação dos dados obtidos foram usados testes estatísticos de comparação e correlação. Os dois grupos apresentaram uma similaridade nos dados clínicos e bioquímicos, diferenciando apenas em pressão arterial sistólica, atividade da PLTP, glicose e proteína C reativa (PCR), maiores no grupo DAP. A PCR se correlacionou positivamente com 24S-HDC, 25-HDC e 27-HDC plasmáticos. Comparação entre os grupos em relação a concentração de oxisteróis em artérias mostraram o 24S-HDC e o 27-HDC maiores no ateroma do grupo DAP, curiosamente o 25-HDC esteve maior em CTL. Quantificações de oxisteróis em plasma do grupo DAP mostrou um aumento do 25-HDC em relação ao grupo CTL. Não houve diferença significante para os MSAC. Os ateromas classificaram-se em 50% ruptura da placa, 20 % capa fibrosa do ateroma, 10% nódulo calcificado e 10% lesão fibrocálcica. Em conclusão mostramos o acumulo do 24S-HDC em placas de aterosclerose. O 27-HDC assim como outros estudos esteve em maior concentração nos ateromas indicando fortemente sua ação na patogênese dessa doença. Todos os oxisteróis sintetizados enzimaticamente dosados em plasma se correlacionaram positivamente com atividade inflamatória sistêmica, assim como 24S-HDC e 27-HDC em ateromas. Finalmente a atividade da PLTP esteve maior no grupo DAP / Abstract: Currently around 17 million people die from cardiovascular diseases (CVD). In Brazil, durant 2011 nearly 200.000 deaths occur mainly due atherosclerosis, classified as a chronic, immune-inflammatory disease that causes luminal narrowing and generates several outcomes as myocardial infarction, cerebrovascular accidents (stroke), peripheral arterial disease (PAD) and others. DAP predict other CVDs and is the leading cause of amputation due the clogged arteries in inferior members. Histological analysis indicates that plaque rupture, fibrous cap atheroma, plaque erosion and calcified nodules generate major CVD fatalities. So far, no plasma biomarkers for clinical use are available in order to evaluate the stability and extend of atherosclerotic plaques, therefore is necessary the investigation of the components involved in immune-inflammatory diseases and lipids metabolism such as oxysterols and cholesterol synthesis and absorption markers (CSAM). Oxidized sterols or oxysterols, manly 27-hidroxycholesterol and 7-ketocholesterol are involved in pathophysiological mechanisms of atherosclerosis and play a role in inflammation, apoptosis, necrosis and cytotoxicity, in addiction to lipid metabolism. Oxysterols 24S- and 25-hidroxycholesterol are involved with neurodegenerative diseases such Alzheimer¿s and resemble with atherosclerosis development since are chronical inflammatory diseases, for this reason is necessary an investigation of these oxysterols in atherosclerosis is needed. Cholesteryl ester transfer protein (CETP) and phospholipid transfer protein (PLTP) as well as lipoproteins, could mediate the transfer of the oxysterols. The aim of this work was quantified the levels of oxysterols (24S- 25-, 27- hidroxycholesterol and 7-ketocholesterol) and cholesterol synthesis (desmosterol and lathosterol) and absorption markers (?-sitosterol and campesterol) in atheroma and plaques from 10 individuals with PAD (PAD group) and compare with arteries without atheroma of 13 volunteers (CTL group). Also, relate these sterols with other parameters as clinical history, lipid transfer proteins and histological scores. Clinical and biochemical data were collected and sterols were quantified in arteries and plasma by gas chromatography coupled to a mass spectrophotometer (GCMS) and histological atheroma classification were determined. Comparison anlysis were performed using Mann-Whitney and correlations by Spearman¿s test. Both groups were not different regarding clinical and biochemical data, differencing only for systolic blood pressure, alcohol intake, PLTP activity, glucose and CRP, increased in PAD group. CRP was positively correlated with 24S-HDC, 25-HDC e 27-HDC from plasma. The comparisons of oxysterols levels in atheroma showed that 24-HDC and 27-HDC were increased in PAD group; interestingly, the 25-HDC was higher in CTL group. No significant differences were observed for CSAM between groups. The atheroma were classified as 50% plaque rupture, 20% fibrous cap, 10% calcified nodules and 10% of fibrocalcific injury. From the oxysterols from plasma of PAD group, only 25-HDC was increased compared to the CTL group. In conclusion, we demonstrated the accumulation of 24S-HDC in atherosclerotic plaques. The 27-HDC, as well as other studies, present higher levels in atheroma¿s, strongly indicating is role in the disease pathogenesis. All oxysterols measured in plasma were positively correlated with the systemic inflammatory activity. Finally, all atherosclerotic plaques were classified as lesions of advanced extension, according to the histological analysis / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Cristina Pontes Vicente / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T00:19:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Godoy_JulianaAparecidaPretode_D.pdf: 5686269 bytes, checksum: 95147a9fe0fec8d741716bf7ed2bd30e (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A aterosclerose é uma doença que acomete os vasos sanguíneos através da formação exacerbada de placas de gordura, interrompendo o fluxo de sanguíneo. A intervenção cirúrgica mais utilizada nesses casos é a angioplastia coronária percutânea, entretanto, esse procedimento pode ocasionar uma lesão ao endotélio, onde os processos trombótico e inflamatório são iniciados. Neste processo ocorre o recrutamento de células inflamatórias e a migração e adesão das células progenitoras endoteliais (CPE) para o local da lesão de modo a recuperar o dano endotelial. As CPE são células existentes na população de células mononucleares (MNC) da medula óssea e podem estar envolvidas no processo de reparo endotelial. Os glicosaminoglicanos, como o dermatan sulfato (DS) e o condroitin sulfato fucosilado (CSF), são moléculas que atuam como agentes antitrombóticos, anticoagulantes e anti-inflamatórios. Neste estudo, analisamos a influência do DS e CSF e da terapia com CPE na inflamação e trombose após lesão arterial em camundongos selvagens (C57BL06) e deficientes em apolipoproteína E (ApoE-/-). Todos os animais foram submetidos a um procedimento cirúrgico na artéria carótida comum esquerda, mimetizando a lesão causada por angioplastia em humanos. Proteínas/fatores envolvidos nos processos iniciados logo após a lesão endotelial foram analisados por western blotting (ICAM-1, P-selectina, eNOS e SDF-1) e por Elisa (TNF-?, IL-10, SDF-1 e TGF-?); as artérias carótidas lesionadas foram analisadas histologicamente para se verificar a formação de trombo e a atividade de gelatinases por zimografia `in situ¿. Todas as análises foram realizadas 1 e 3 dias após a lesão arterial. Observamos nos camundongos C57BL/6 que o tratamento com DS foi capaz de diminuir a reação inflamatória inicial e, ao mesmo tempo, estimular a migração de células progenitoras para o local da lesão; tal resultado foi observado em relação ao uso de CSF, apesar deste não prevenir a formação de trombo. A terapia utilizando MNC isoladas ou em conjunto com DS ou CSF aumentou a resposta inflamatória inicial. O uso de CPE também ocasiona essa resposta, mas quando utilizamos a EPC junto com DS obtemos uma menor resposta inflamatória e, ao mesmo tempo, aumento da expressão de eNOS, melhorando o tônus vascular. Nos camundongos ApoE-/-, os tratamentos não foram capazes de melhorar a resposta inflamatória; o tratamento com CPE e CSF foi o mais eficaz, diminuindo a resposta inflamatória e melhorando o tônus vascular. Concluímos que as terapias com os glicosaminoglicanos (DS ou CSF) foram capazes de diminuir as respostas trombóticas e inflamatórias iniciais. Além disso, que a injeção de MNC leva a um aumento da resposta inflamatória provavelmente devido ao caráter inflamatório destas células. Concluímos, que os GAGs podem estar atuando como moléculas de quimioatração das células ao mesmo tempo em que evitam a trombose e inflamação iniciais exacerbadas e que podem ser utilizados como agentes coadjuvantes na terapia celular para a recuperação de dano endotelial / Abstract: Atherosclerosis is a disease that undertakes blood vessels by exacerbated atheroma plaque formation, and blocking blood flow. The most used surgical intervention in these cases is the angioplasty, however, this procedure can cause a lesion to the endothelium, where thrombotic and inflammatory processes are initiated, recruiting inflammatory cells to the lesion site and also promoting migration and adhesion of endothelial progenitor cells (EPC) in order to recovery endothelial damage. Glycosaminoglycans (GAGs), like dermatan sulfate (DS) and fucosilated chondroitin sulfate (FCS), are molecules that act as antithrombotic, anticoagulant and anti-inflammatory agents. EPC are cells that exist in bone marrow mononuclear (MNC) cells fraction population and can be involved in vascular repair. In this study, we analyzed the influence of DS and FCS and cellular therapy using EPC in inflammation and thrombosis after arterial lesion in wild-type (C57BL6) and apolipoprotein E deficient (ApoE-/-) mice. All animals were submitted to a surgical procedure in the left common carotid artery, mimicking the lesion caused by angioplasty in humans. Proteins/factors involved in the initial process after an endothelial lesion were analyzed by western blotting (ICAM-1, P-selectina, eNOS and SDF-1) and by Elisa (TNF-?, IL-10, SDF-1 and TGF-?); lesioned carotid artery were analyzed histologically to verify thrombus formation and gelatinase activity by zimography `in situ¿. All analyzes were done 1 and 3 days after arterial lesion. We observed that C57BL6 mice treatment with DS was able in decrease the initial inflammatory reaction and, at the same time, stimulate progenitor cells migration to the lesion site; this result was also observed in relation to FCS use, despite its did not prevent thrombus formation. Therapy using MNC alone or with DS or FCS increased the initial inflammatory response. Use of EPC also promoted this response but when used together with DS, we can obtain a decreased inflammatory response and, at the same time, an increased in the eNOS expression, improving vascular tonus. In ApoE-/- mice, treatments were not able in improving inflammatory response; treatment with EPC and FCS was the one with best action, decreasing inflammatory response and improving the vascular tonus. GAGs (DS or FCS) therapy was able to decrease the initial inflammation. Besides, MNC injection leads to an increase in inflammation probably due to its inflammatory characteristics. We conclude that GAGs can be acting quimio-atracting molecules to the cells and, at the same time, avoiding the initial thrombosis and inflammation after injury and they can be used as supporting agents in cellular therapy use to help in vascular recovery after injury / Doutorado / Biologia Celular / Doutora em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Helena Coutinho Franco de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T02:49:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dorighello_GabrielGabriel_D.pdf: 2214607 bytes, checksum: 7a41589e85de887e50c2754bb08542c4 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: As doenças cardiovasculares permanecem como a maior causa de mortalidade no mundo ocidental. A aterosclerose é o principal responsável pela patogênese dessas doenças. Distúrbios metabólicos como as dislipidemias, hipertensão arterial, resistência à insulina e obesidade são considerados fatores de risco aterogênico. Atualmente, intervenções dietéticas e farmacológicas são utilizadas na tentativa de prevenir ou reduzir a incidência desses distúrbios. Uma dessas intervenções é o uso de regimes de restrição calórica, que está relacionada com o aumento da longevidade e a diminuição da incidência de doenças crônicas ligadas ao envelhecimento. Drogas que mimetizam alguns efeitos metabólicos da restrição calórica também estão sendo estudadas como, por exemplo, o 2,4-dinitrofenol (DNP), que promove o desacoplamento mitocondrial. Em nosso laboratório, demonstramos que os camundongos hipercolesterolêmicos, deficientes do receptor de LDL (R0), apresentam alterações importantes no metabolismo e no estado redox. Com isso, o objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos da restrição calórica e do tratamento com DNP sobre o metabolismo e a aterosclerose em camundongos R0. Os camundongos R0 foram separados em 3 grupos: R0 controles com alimentação ad libitum, R0 com restrição calórica (R0-RC) alimentados em dias alternados e R0 tratados com 1 mg/L de 2,4 dinitrofenol na água de beber (R0-DNP). A restrição calórica apesar de diminuir o consumo alimentar, gerou diversos efeitos metabólicos não esperados como o aumento na concentração do colesterol total e das frações VLDL e LDL plasmáticas, dos depósitos adiposos viscerais e subcutâneos, assim como, tornou os camundongos hiperglicêmicos e hiperinsulinêmicos, intolerantes à glicose e resistentes à insulina. Além disso, os camundongos R0 sob restrição calórica apresentaram aumento de marcadores inflamatórios plasmáticos como o TNF? e a proteína C-reativa. Apesar da diminuição observada em alguns parâmetros no estado redox sistêmico e tecidual, os camundongos R0 restritos caloricamente apresentaram um aumento de quase 3 vezes na área de lesão aterosclerótica, o qual pôde ser explicado devido à piora dos diversos fatores de risco aterosclerótico. Por outro lado, o tratamento com DNP, causou uma diminuição na concentração dos ácidos graxos plasmáticos, sem alterar os níveis plasmáticos de outros lipídeos, a homeostase glicêmica, a massa dos depósitos adiposos e os marcadores inflamatórios. No entanto, o desacoplamento mitocondrial brando, promovido pelo DNP, gerou efeitos significativos sobre o estado redox tecidual, tais como a diminuição na geração mitocondrial de espécies reativas de oxigênio e no conteúdo de proteínas carboniladas hepáticas. O desenvolvimento espontâneo da aterosclerose foi significativamente diminuído nos camundongos R0 tratados com DNP, independentemente de outros fatores de risco já bem estabelecidos, como o colesterol e marcadores inflamatórios plasmáticos. Deste modo, o regime de restrição calórica, que é amplamente correlacionado com a longevidade e a menor incidência de doenças crônicas relacionadas com o envelhecimento, não é indicado para condição de hipercolesterolemia causada por deficiência do receptor de LDL. Em contrapartida, o tratamento com DNP, possivelmente via desacoplamento mitocondrial brando, promoveu a redução do desenvolvimento da aterosclerose, independentemente, de outros fatores de risco, demonstrando com isso, a relevância da fonte mitocondrial de oxigênio reativo no processo da aterogênese / Abstract: Cardiovascular diseases (CVD) are the major cause of death in the occidental world. Atherosclerosis is the main process responsible for the pathogenesis of these diseases. Metabolic disturbances such as dyslipidemias, hypertension, insulin resistance and obesity are well established atherosclerosis risk factors. Currently, different pharmacological and dietetic interventions have been used to reduce and avoid CVD. Caloric restriction is one of these strategies, which is associated with increases in life span and reductions of age related chronic diseases. The mitochondrial uncoupler 2,4 dinitrophenol (DNP) has been considered as a caloric restriction mimetic tool. We have demonstrated that a mouse model of human familial hypercholesterolemia exhibits metabolic and redox disturbances highly relevant for metabolic syndrome and atherosclerosis. Thus, the aim of this study was to evaluate the effects of caloric restriction and mild mitochondrial uncoupling induced by DNP on the metabolism and atherosclerosis development in hypercholesterolemic LDL receptor deficient mice (R0). Thus, R0 mice were compared after 3 months in three conditions: R0 fed ad libitum (control), R0 under caloric restriction (R0-RC) obtained by providing food in alternate days, and R0-DNP fed ad libitum and treated with DNP 1 mg/L in the drinking water. The caloric restriction regimen, despite reducing food intake, induced unexpected adverse metabolic effects, namely, increased plasma total-, VLDL- and LDL-cholesterol, and increased visceral and subcutaneous adipose tissue masses. In addition, R0-RC mice became hyperglycemic, hyperinsulinemic, glucose intolerant and insulin resistant. Moreover, R0-RC mice presented elevated plasma levels of the inflammatory markers TNF? and C-reactive protein. Some benefits regarding systemic and tissue redox state were observed in R0-RC, however, atherosclerosis lesion areas were increased about 3 fold in R0-RC mice. DNP treatment had minimal effects on the lipid and glucose metabolism of R0-DNP mice. It decreased plasma free fatty acids, but did not change other plasma lipids, inflammatory markers, glucose homeostasis, and the size of adipose depots. On the other hand, marked effects of DNP treatment on the tissue redox state were observed, namely, reduction in the generation of mitochondrial oxidative reactive species and in the liver content of carbonyl protein. The spontaneous atherosclerosis development was significantly reduced in the R0-DNP mice, independently other well established risk factors such as plasma cholesterol and inflammatory mediators. Therefore, the caloric restriction regimen is not indicated for the condition of familial hypercholesterolemia due to LDL receptor deficiency. On the other hand, DNP treatment, possibly via mild mitochondrial uncoupling, evidences the relevance of mitochondrial source of reactive oxygen for the atherosclerosis development independently of other risk factors / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores: Benito Pereira Damasceno, Valder Roberval Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:17:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Voetsch_Barbara_D.pdf: 55176396 bytes, checksum: f274efe61664e0541b7ed17b893440eb (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Introdução e Objetivo: A etiologia de acidentes vasculares cerebrais isquêmicos (AVCi) em pacientes jovens permanece desconhecida em um terço dos casos, justificando a procura por novos fatores de risco protrombóticos. Causas comuns de trombofilia hereditária incluem o fator V de Leiden, a mutação G20210A no gene da protrombina, e hiperhomocisteinemia moderada secundária à variante termolábil da metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR-T). A atividade da paroxonase (PON1), uma esterase associada a lipoproteínas de alta densidade (HDL) com propriedades antioxidantes e antiaterogênicas, é determinada pelos polimorfismos Q192R e L55M da região codificadora e pelas substituições C(-107)T e G(-824)A no promotor do seu gene. A correlação destes fatores genéticos com o risco de AVCi é controversa. Além disso, foi recentemente descrita em crianças com AVCi uma deficiência hereditária de glutationa peroxidase plasmática (GPx-3), uma enzima com função de inativar espécies reativas de oxigênio que limitam a biodisponibilidade e os efeitos antiplaquetários do óxido nítrico. Porém, a base molecular dessa alteração ainda não foi identificada. Métodos: Analisamos e 118 a 167 pacientes jovens (< 45 anos) com AVCi não-fatal de etiologia indeterminada e um número equivalente de controles pareados por sexo e idade quanto à presença de fatores de risco protrombóticos. O fator V de Leiden, a variante da protrombina, homozigose para MTHFR-T, e as substituições Q192R, L55M e G(-824)A no gene da PON1 foram determinados através de PCR e digestão com enzimas de restrição. O polimorfismo PON1 C(-1O7)T foi detectado através de análise por single-strand conformational polymorphism (SSCP). Rastreamento do gene da GPx-3 foi realizado através de análise por SSCP, seguido de seqüenciamento de fragmentos com shift eletroforético. Resultados: A prevalência do genótipo 192RR da PON1 foi significativamente mais elevada em pacientes jovens com AVCi que controles (P=0.006), sendo o fator de risco que demonstrou a associação mais forte com AVCi de todos os fatores genéticos estudados (OR=4.1, 95% CI, 1.14 to 14.73). A presença isolada do alelo de baixa expressão -107T causou um aumento modesto no risco de AVCi, porém demonstrou ação sinergística com o genótipo 192RR, elevando a estimativa de risco de AVCi em portadores de ambas as variantes para 17 (95% CI, 1.74 to 166.35; P=0.015). Através de rastreamento do gene da GPx-3 por SSCP, identificamos quatro polimorfismos novos, ligados, no promotor do gene, associados ao risco de AVCi: A(-68)T, A(-622)T, T(-688)C e A(-703)C. Portadores do haplótipo combinando os nucleotídeos -622T, -688C e -703C foram significativamente mais prevalentes entre pacientes que controles (27.6% vs. 15.4%; P=0.020) e tiveram um risco de AVCi duas vezes maior quando comparado a não-portadores (OR=2.09, 95% CI, 1.12 to 3.92). O risco de AVCi associado ao genótipo PON1 192RR e aos polimorfismos do promotor da GPx-3 foi potenciado em indivíduos simultaneamente expostos a fatores de risco vasculares convencionais. Nenhuma diferença significativa na prevalência de fator V de Leiden, da variante da protrombina, ou homozigose para MTHFR-T foi encontrada entre pacientes e controles, com exceção de uma freqüência elevada de MTHFR-T em um grupo pequeno de indivíduos de origem negróide (OR=5.9, 95% CI, 0.88 to 49.2). Conclusões: Estes dados demonstram que variantes genéticas em enzimas antioxidantes predispõem ao desenvolvimento precoce de AVCi e sugerem um novo mecanismo para trombose arterial que envolve a biodisponibilidade diminuída de óxido nítrico. Além disso, a interação dos fatores genéticos com fatores de risco convencionais concordam com o conceito atual de que as doenças aterotrombóticas, incluindo AVCi em jovens, têm etiologia multifatorial / Abstract: Background and Purpose: The etiology of arterial ischemic stroke (AIS) in the young remains unknown in up to one-third of patients, warranting the search for novel prothrombotic risk factors. Common causes of inherited thrombophilia inc1ude factor V Leiden, the prothrombin G20210A mutation, and mild hyperhomocysteinemia due to the thermolabile variant ofmethylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR-T). Activity levels of paraoxonase (PON1), an antioxidant and antiatherogenic HDL-bound esterase, are determined by the Q192R and L55M coding region polymorphisms and the C(-107)T and G(-824)A substitutions in the gene promoter. The correlation of these genetic factors with the risk of AIS is controversial. In addition, a heritable deficiency of plasma glutathione peroxidase (GPx-3), a reactive oxygen species scavenger that protects the bioavailability and antiplatelet effects of nitric oxide (NO), was recently described in association with childhood stroke, yet a molecular basis for this defect has not been identified. Methods: We analyzed up to 167 young patients (< 45 years ofage) with non-fatal AIS of undetermined etiology and an equivalent number of age- and gender-matched controls for the presence of inherited prothrombotic risk factors. Factor V Leiden, the prothrombin variant, homozygosity for MTHFR-T, and the Q192R, L55M, and G(-824)A substitutions in the PON1 gene were determined by PCR amplification and restriction digestion. The PON1 C(-107)T polymorphism was detected by single-strand conformational polymorphism (SSCP) analysis. Screening ofthe GPx-3 gene for genetic abnormalities was performed by SSCP, followed by sequencing offtagments with electrophoretic shifts. Results: The prevalence of the PONl 192RR genotype was significantly higher among patients than controls (P=0.006),showing the strongest independent association with the risk of AIS among all the genetic risk factors studied (OR=4.1, 95% CI, 1.14 to 14.73). The presence of the low expressor PON1 -107T allele was only modest1yassociated with AIS when ana1yzed alone, yet further increased the risk conferred by the 192RR genotype, yielding an adjusted risk estimate of 17 in carriers ofboth variants (95% CI, 1.74 to 166.35; P=0.015). By SSCP screening of the GPx-3 gene we identified four novel linked polymorphisms in the promoter associated with the risk of AIS: A(-68)T, A(-622)T, T(-688)C, and A(-703)C. Carriers ofthe haplotype combining nucleotides -622T, -688C, and -703C were significantly more frequent among patients than controls (27.6% vs. 15.4%; P=0.020) and had twice the risk of AIS as compared to non-carriers (OR=2.09, 95% CI, 1.12 to 3.92). The risk associated with the PON1 192RR genotype and the GPx-3 promoter polymorphisms was potentiated in individuaIs simultaneously exposed to conventional vascular risk factors. No significant difference in the prevalence of factor V Leiden, the prothrombin variant, and homozygosity for MTHFR-T was found between patients and controls, with the exceptio~ of a higher frequency of MTHFR-T in a small group ofindividuals of African descent (OR=5.9, 95% CI, 0.88 to 49.2). Conclusions: These data indicate that genetic variants in antioxidant enzymes predispose to the early development of AIS and support a novel mechanism for arterial thrombosis that involves reduced bioavailablity ofNO. In addition, the interaction ofthese genetic markers with conventional vascular risk factors support the current concept that atherothrombotic disease is a complex trait and multifactorial in nature / Doutorado / Neurologia / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Marta Helena Krieger / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T14:03:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_Leandrodos_M.pdf: 960822 bytes, checksum: 9255ee8c26bde6d271eafcb384a31cef (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Objetivos: Várias vias inflamatórias têm participação no processo aterosclerótico. Diferentes marcadores do processo inflamatório e da disfunção endotelial têm sido utilizados para predizer o risco de futuro desenvolvimento ou complicação das doenças cardiovasculares. Atualmente, marcadores como o CD40L tem se mostrado importante no prognóstico de risco clínico. Os efeitos antiinflamatórios do nitrosotiol, doador de ¿NO, S-nitroso-N-acetilcisteína (SNAC) foram verificados em camundongos LDLr-/-, com objetivo de testá-lo na prevenção precoce do desenvolvimento da placa aterosclerótica, bem como nas mudanças de pressão arterial e de expressão das ¿NO sintases. Métodos e Resultados: Camundongos LDLr-/- alimentados com dieta enriquecida com 0,5% de ácido cólico e 1,25% de colesterol apresentaram aumento na expressão aórtica de CD40L, tanto nas fases iniciais (HC15d) quanto nas fases mais avançadas da aterosclerose (HC60d) e em uma relação inversa com a expressão de a-actina. Camundongos LDLr-/- alimentados com dieta comercial (CT) apresentaram aumento na expressão de eNOS e nNOS em relação aos camundongos selvagens (C57BL6). Foi também verificado aumento na expressão das 3 isoformas de NOS nos camundongos alimentados com dieta hipercolesterolêmica em relação ao CT. Pressão arterial aumentada foi determinada em camundongos LDLr-/- em relação aos selvagens. A administração de SNAC (0,51 mmol/Kg/dia i.p. por 15 dias) promoveu uma redução de 49% na área de lesão aterosclerótica, associada a uma diminuição na expressão aórtica das NOS e de CD40L, mas sem alteração no aumento pressórico. Conclusão: Concluímos que a deleção gênica do receptor de LDL nos camundongos produziu alteração nos marcadores propostos para inflamação e disfunção endotelial, mostrando-se responsável pela hipertensão, sendo que ambas foram caracterizadas neste modelo animal. O tratamento com SNAC mostrou-se eficaz na prevenção do estabelecimento do ateroma, por meio de processo antiinflamatório. Entretanto, a administração de SNAC não foi capaz de promover alterações no aumento pressórico verificado nos camundongos LDLr-/- / Abstract: Background: Several inflammatory pathways have been shown to participate in the atherosclerotic process. Different markers for inflammation and endothelial dysfunction have been found to predict the future risk for developing cardiovascular disease. Newer markers such as CD40 ligand appear to provide important information regarding clinical risk. In hypercholesterolemic LDLr-/- mice, we addressed anti-inflammatory effects of the nitrosothiol ¿NO donor S-nitroso-N-acetylcysteine (SNAC) in the early prevention of plaque development as well as changes in blood pressure and ¿NO synthase expression. Methods and Results: LDLr-/- mice fed with 0.5 % colic acid and 1.25 % cholesterol-enriched diet showed increased aortic expression of CD40L that was related to initial (HC 15d) and advanced (HC 60d) phases and inversely related with a-actin expression. Expression of eNOS and nNOS was higher in the LDLr-/- than Wild Type (C57BL6) mice, as well as, there was a larger expression of three isoforms of NOS in LDLr-/- mice fed with HC diet. Increase in the blood pressure was present in LDLr-/- in relation to Wild Type mice. SNAC administration (0.51 mmol/Kg/day i.p. for 15 days) promoted 49% of reduction in atherosclerotic lesion area associated with the prevention of this increased NOS and CD40L expression but without alterations in the increased blood pressure. Conclusion: We concluded that the genetic deletion of LDL receptor in mice produced alterations on the markers proposed to the inflammation and endothelial dysfunction, and showed to be responsible for hypertension, both characterized in this animal model. The SNAC treatment showed efficacy in the prevention of atheroma establishment by anti-inflammatory process. Nevertheless, the SNAC treatment was not capable to promote alterations in the increased blood pressure, which was verified in these ko mice / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Marta Helena Krieger / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T20:20:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wanschel_AmarylisClaudineBonitoAzeredo_M.pdf: 1512032 bytes, checksum: 92d5d4fda32e196e08b7ee261c365152 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A incidência de riscos de doença aterosclerótica cardiovascular é maior em homens do que em mulheres na fase reprodutiva, essa diferença diminui quando diminui a produção de estrógenos após a menopausa. Uma série de estudos sugere que essa diferença em ambos os sexos pode ser causada em parte, pela ação pró-aterogênica dos andrógenos. O objetivo deste estudo foi verificar a participação do dimorfismo sexual em camundongos adultos LDLr-/- no efeito vasculoprotetor promovido pelo tratamento com a S-nitrosotiol-N-acetilcisteína (SNAC) na fase inicial da aterogênese por meio dos seguintes avaliações : a) expressão fenotípica da hipertensão; b) desenvolvimento de ateroma; c) perfil lipídico; d) imunorreatividade das isoformas das NOS vasculares. Camundongos machos e fêmeas com 3 meses de idade foram avaliados nos seguintes grupos experimentais: selvagens C57BL/6 (WT) sob dieta comercial; LDLr-/- sob dieta comercial com os controles (CT);LDLr-/-sob dieta hipercolesterolêmica (HC); LDLr-/- sob diet hiperlipidêmica associado ao tratamento com SNAC 0,51µm ip/dia ( HC+SNAC). Após 2 semanas de tratamento com administração de dieta hipercolesterolêmica, verificou-se que as fêmeas desenvolveram lesões ateroscleróticas na aorta proximal ascendente 50% menores em relação aos machos. Tais evidências sugerem o papel protetor do estrógeno presente nas fêmeas adultas no estágio inicial da aterosclerose. O tratamento com SNAC promoveu a redução em 50% na instalação do ateroma em ambos sexos, evidenciando não haver relação com o dimorfismo sexual. Contudo, o perfil lipídico das fêmeas mostrou valores mais elevados que os encontrados em machos, tanto de colesterol (COL), como de triglicérides (TG) plasmáticos nos camundongos sob dieta hipercolesterolêmica. Assim, o tratamento com SNAC não impediu o aumento dos teores lipidêmicos induzidos pela dieta hipercolesterolêmica em fêmeas, inferindo que a condição não está correlacionada ao tamanho da área de lesão desenvolvida. Camundongos fêmeas LDLr-/- sob dieta aterogênica evidenciaram aumento de cerca de 10% na pressão arterial, quando comparados aos respectivos camundongos selvagens (WT). O tratamento com SNAC preveniu totalmente a hipertensão induzida pela dieta hipercolesterolêmica. Contudo, nos machos tal hipertensão foi verificada ocorrer em camundongos LDLr-/- sem dieta hipercolesterolêmica, e o tratamento com SNAC não produziu efeito preventivo na hipertensão. Tais resultados indicam que a gênese da hipertensão é diferente nos dois sexos, sugerindo a participação das vias androgênicas. As fêmeas não apresentaram hipertrofia ventricular esquerda ou redução na frequência cardíaca associada à hipertensão, a qual foi evidenciada nos machos sob as mesmas condições. Assim o conjunto de alterações hemodinâmicas indica que as fêmeas sofreram um menor impacto do que camundongos machos nas alterações cardiovasculares estudadas. A expressão de NOS foi evidenciada na aorta das fêmeas LDLr-/- sob dieta comercial (CT), contudo ausente nas WT e, sob dieta hipercolesterolêmica (HC) a sua imunorreatividade foi menor que no animal controle porém expressiva e difusa , as expressões tanto no controle como no animal HC foram reduzidas pelo tratamento com a SNAC. Estas alterações indicaram a sua participação na disfunção endotelial presente neste modelo e o fato de que o efeito protetor promovido pela SNAC está associado às vias NO/NOS / Abstract: The incidence of risk of coronary artery disease (CAD) is greater in men than in woman during the reproducible years, and this gender difference diminishes after cessation of estrogen production after menopause (Kannel et al, 1976). Many studies have ben suggested also that this gender difference may be caused in part by proaterogenic actions of androgens. The aim this study was verify the role of the sexual dimorphism in LDLr-/- mice in the vasculoprotector effect treatment promoted by S-nitroso-N-acetilcisteína (SNAC) in the initial phase of atherogenesis valuation following:1- phenotypic expression of the hypertension; 2- lesion area development; 3- plasma lipid levels; 4- localization of NOS using immunohistochemistry; Male and female mice 3 months old were evaluated in experimental groups following: C57Bl/6 wild type (WT) chow diet; LDLr-/- control group (CT) chow diet; LDLr-/- hypercholesterolemic diet(HC); LDLr-/- hypercholesterolemic diet plus SNAC 0.51 µmol/Kg ip/daily (SNAC). After treatment for 2 weeks the female developed a 50% decrease lesion area in the proximal aortic as compared to males. This evidence indicated the protector role of the estrogen in female in the initial stage of atherosclerosis. The treatment with SNAC promoted a 50% reduction in installation of atherosclerosis in both sexes with no sexual dimorphism. In female the lesion area was not correlated with the average plasma cholesterol levels. Female mice LDLr-/- under a hypercholesterolemic diet showed an increase of 10% in blood pressure compared whith the background (WT). The treatment with SNAC prevented the hypertension induced by the hypercholesterolemic diet. Nevertheless male hypertension is associated with mice LDLr-/- and chow diet treatment does not prevent hypertension. These results showed that hypertension genesis is different in both sexes suggesting the participation of androgenic pathways. The males showed left ventricular hypertrophy and decreased heart rate associated with hypertension, but the female in the same conditions did not show. Thus is hemodynamic alteration set indicate that female have a less impact than male mice in the studied cardiovascular alterations. The expression of the three types of NOS was evident in aorta of the female LDLr-/- chow diet, although absent in WT. In female LDLr-/- hypercholesterolemic diet there was enhanced immunoreactivity. This overexpression was decreased by treatment with the SNAC. These alterations participated in endothelial dysfunction present in this model and the protector effect promoved by SNAC is associated with the NO/NOS pathways / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular