Observa-se, atualmente, um aumento no interesse por alimentos funcionais e isto tem levado pesquisadores a investigar o potencial antioxidante de diversas frutas e de diversos compostos fenólicos presentes nos alimentos. As pesquisas a cerca da atividade antioxidante de pêssegos e nectarinas são escassas quando comparada às frutas vermelhas, apesar de aqueles frutos conterem importantes compostos fenólicos, como o ácido clorogênico, que apresenta efeitos potencialmente benéficos à saúde derivados de sua ação antioxidante. Entretanto, dados a respeito do seu conteúdo em frutas, vegetais, alimentos processados e sua distribuição em diferentes tecidos de plantas são escassos. O potencial antioxidante reativo total (TRAP) é um dos métodos mais utilizados para estimar a capacidade antioxidante de amostras in vitro. Entretanto, este método apresenta limitações quando a amostra não apresenta a fase lag (ou tempo de indução) necessária para obter o valor do TRAP pelo método original. Esse comportamento é obtido em algumas amostras e em substâncias isoladas, mas não em muitos extratos, os quais possuem diversas substâncias antioxidantes. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi otimizar e validar o método TRAP original e propor outro método de avaliação utilizando a Área Sob a Curva (AUC) e empregar essa ferramenta para avaliar o potencial antioxidante de extratos de pêssego (cascas e polpas) de três cultivares e do ácido clorogênico na mesma concentração encontrada no extrato. Para desenvolver esse trabalho, o primeiro passo foi otimizar e validar o método TRAP alternativo utilizando 2,2'-azo-bis (2- amidinopropano) (AAPH) como fonte de radical livre e um cintilador líquido para monitorar a quimiluminescência amplificada pelo luminol após a adição da amostra antioxidante. O método cromatográfico para quantificar o ácido clorogênico foi realizado usando uma coluna C-18 e sistema gradiente de eluição com acetonitrila-água-ácido trifluoracético. A detecção foi realizada por ultravioleta a 327 nm e a identificação do pico foi baseada no tempo de retenção, por coinjeções com a substância de referência e por LC-MS-MS. A principal condição estabelecida para o método TRAP foi a necessidade de estabilização do sistema (7000 segundos) antes da adição do antioxidante a ser testado. Todos os parâmetros da validação mostraram resultados satisfatórios: especificidade, linearidade (r > 0,99), precisão (intra e inter-dia – desvio padrão relativo menos que 5%), robustez e os limites de detecção (LOD) e quantificação (LOQ) foram baixos e similares para ambos os métodos de avaliação. O método cromatográfico para quantificar o ácido clorogênico apresentou boa linearidade (r > 0,99), repetibilidade (RSD < 2%) e recuperação (96,3%, RSD = 1,96%) e foi robusto para pequenas variações nos parâmetros testados (RSD < 2%). Os resultados obtidos usando a AUC mostraram que os extratos de cascas e polpas das cultivares Maciel, Leonense e Eldorado apresentaram atividade de seqüestro de radicais livres em todas as concentrações testadas, com uma ação concentraçãodependente. A inibição imediata da quimiluminescência e a duração desta inibição foram significativamente maiores no extrato em relação ao composto majoritário (ácido clorogênico) isolado e isto pode ser devido a um efeito sinérgico ou aditivo de outros antioxidantes presentes no extrato. O IC50 para o extrato de pêssego e ácido clorogênico foi 1,19 μg/mL e 8,43 μg/mL, respectivamente, quando o TRAP foi avaliado e um IC50 de 0,41 μg/mL e 1,89 μg/mL foi obtido quando o TAR (Reatividade Antioxidante Total) foi avaliado com o extrato de pêssego e com o ácido clorogênico, respectivamente. O ácido clorogênico apresentou uma importante contribuição ao potencial e à reatividade antioxidantes, mas os extratos do fruto contribuem com uma ação antioxidante mais duradoura. A principal vantagem da utilização da AUC para avaliar a atividade antioxidante é a maior precisão desse método e seu uso em amostras que não apresentam fase lag, como os extratos de pêssego, os quais apresentaram importante atividade antioxidante e, portanto, podem proporcionar vantagens à saúde de consumidores que ingerem essa fruta. / Increasing recent interest in nutraceuticals and functional foods has led researchers to investigate the antioxidant potential of several fruits and of several phenolic compounds. The researches about antioxidant activity of peaches and nectarines are scarce when compared to red fruits despite of they contain important phenolic compounds as chlorogenic acid, which present potential beneficial effect in humans derived from its antioxidant activity. However, data on its content in fruits, vegetables, foods processing, and its distribution in different tissues of plants is scarce. The total reactivity antioxidant potencial (TRAP) method is one of the methods most employed to estimate the antioxidant capacity of samples in vitro. However, this method can presents limitations when the sample does not present a lag phase (or induction time) which is necessary to get TRAP value by original method. This behavior is got in some samples and to isolated substances, but not in many extracts which have several antioxidants. In this context, the aim of this work was to optimize and validate the original TRAP method, and to propose another evaluation method utilizing the area under curve (AUC) and to use this tool to evaluate antioxidant potential and reactivity from peach extracts (peels and fleshes) from three cultivars and from chlorogenic acid in the same concentration founded in extract. To developed this work, the first step was to optimized and to validated the alternative method to get TRAP value using 2,2'-azo-bis (2-amidinopropane) (AAPH) as the free radical source and a liquid scintillator counter to monitored the luminol-enhanced chemiluminescence after addition of the antioxidant sample. The chromatographic method to quantifiy chlorogenic acid was performed using a C-18 column with acetonitrile-watertrifluoracetic acid gradient elution. The detection was carried out by UV at 327 nm and the peak identification was based on the retention times, by cochromatography with reference substances and by LC-MS-MS. The main condition established to TRAP method was the need for the stabilization of the system, at 7000 s, before the addition of the antioxidant to be tested. All validations parameters showed satisfactory results: specificity, linearity (r >0.99), precision (intra- and interassay - relative standard deviation were both less than 5 %), robustness, and the limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) were low and similar to both evaluation methods. The chromatographic method to quantify chlorogenic acid presented good linearity (> 0.99), good repeatability (RSD < 2 %) and accuracy (96.3%, RSD = 1.96% ) and was robust to small variations in parameters tested (RSD < 2 %). The results obtained using AUC showed that the extracts of peels and fleshes of Maciel, Leonense and Eldorado peach cultivars present free radical scavenging activity in all concentrations tested, with a concentration-dependent action. The immediate inhibition of chemiluminescence and the duration of this inhibition were significantly higher in the extracts than in the major compound (chlorogenic acid) alone and it can be due to a synergistic or additive effect of other antioxidants present in the extracts. The IC50 for peach extract and chlorogenic acid were 1.19 μg/mL and 8.43 μg/mL, respectively, when TRAP was evaluated and an IC50 of 0.41 μg/mL and 1.89 μg/mL was found when TAR was evaluated in peach extract and chlorogenic acid, respectively. Chlorogenic acid presented a good contribution to antioxidant reactivity and potential, but the fruit extracts provide better antioxidant action. The main advantage of utilization of AUC to evaluate antioxidant activity is the higher precision of this method and its use in samples that do not present lag phase, as peach extracts which presented important antioxidant activity and therefore, it may provide health-promoting advantages to consumers by intake of this fruit.

Ilex paraguariensis A. St.-Hil., conhecida como erva-mate, é uma árvore nativa da América do Sul onde as folhas e pequenos ramos secos são usados para preparar o chimarrão. Possui uma composição química complexa, da qual pode-se vislumbrar muitas aplicações potenciais, que poderiam vir a ampliar o emprego da erva-mate e, conseqüentemente, do mercado para esta matériaprima. As folhas de I. paraguariensis contem xantinas, flavonóides, derivados do ácido cafeoilquínico e uma quantidade significativa de saponinas triterpenóides (cerca de 10%). Neste estudo foram investigados quimicamente extratos hidroetanólicos de I. paraguariensis, de suas frações, e de algumas substâncias de referência, como também os efeitos desses na atividade antioxidante, no acúmulo de gordura (TG) e na atividade lipolítica em cultura de células 3T3-L1. Neste sentido obtivemos extratos brutos hidroetanólicos de folhas verdes (EBV) e secas (EBS) maceradas, os quais foram fracionados originando 8 frações. Ácido ursólico, ácido clorogênico e rutina foram quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Também foi realizada a determinação de fenóis por catequinas e pela precipitação por proteínas. A fração fenólicos da folha verde apresentou atividade antioxidante superior às substâncias de referência rutina e ácido clorogênico, enquanto que o ácido ascórbico apresentou a melhor atividade. O ensaio com brometo de 3- (4,5-dimetil)difenil tetrazólio (MTT) demonstrou que os extratos e padrões testados entre 50 μg/mL e 1000 μg/mL não foram citotóxicos para as células 3T3-L1. Dentre as frações testadas para a atividade na adipogênese, a fração resíduo aquoso da folha verde (RAV) apresentou maior inibição (24%) no teor de TG na concentração de 100 μg/mL. Dentre as substâncias de referência testadas, os melhores resultados foram obtidos com o ácido caféico nas concentrações de 300 μg/mL e da rutina na concentração de 100 μg/mL. Em relação à ativividade na lipólise, a fração RAV apresentou o melhor resultado nas concentrações de 50 e 75 μg/mL. Entre as substâncias de referência, o ácido gálico apresentou resultado significativo em relação à atividade antilipolítica nas concentrações de 500 e 1000 μg/mL. Para elucidar em qual estágio da adipogênese e da lipólise os extratos, frações e padrões atuam, são necessários a investigação da avaliação da ação desses extratos e frações através de análise de expressão de genes ligados a adipogênese e a atividade lipolítica. / Ilex paraguariensis A. St.-Hil., known as maté, is a native tree from South América which leaves and twigs are used to prepare the traditional beverage “chimarrão”. It has a complex chemical composition that might have many potential applications in order to increase the use of maté and then, in consequence, increase the market demand of this raw material. Leaves from I. paraguariensis have xanthines, flavonoids, cafeoylquinic acid derivatives and triterpenoid saponins (ca. 10%). Herein, it was investigated, both chemically and biologically, the hydroethanolic extracts of leaves from I. paraguariensis, its fractions, and some reference substances, as the antioxidant activity, the adipogenesis (TG) and lipolytic activities in 3T3-L1 cell culture. So, it was prepared hydroethanolic extracts of fresh (EBV) and dried leaves (EBS) by maceration, which submitted to further fractionation furnished 8 fractions. Ursolic acid, chlorogenic acid and rutin were determined in these samples by liquid chromatography (HPLC) Also, phenolic constituents were determined using catequines and protein precipitation methods. The phenolic fraction from fresh leaves presented better antioxidant activity than the tested reference substances (rutin and chlorogenic acid), while ascorbic acid presented the best activity. The MTT assay showed that the tested extracts and fractions among 50 μg/mL and 1000 μg/mL did not present citotoxicity to 3T3-L1 cells. Among the tested fractions to adipogenesis, the aqueous residue fraction from fresh leaves (RAV) presented best inibition (24%) of TG at 100 μg/mL. Among tested reference substances, cafeic acid at 300 μg/mL, and rutin at 100 μg/mL presented the best results. In relation to the lipolytic activity, the RAV fraction presented best results at 50 e 75 μg/mL and, among the tested reference substances, galic acid presented best results at 500 e 1000 μg/mL. In order to understand the mechanim of action of these fractions and reference substances at the adipogenesis and lipolysis further studies will be performed specially those about the influence on the gene expression.

Orientador: André Gonzaga dos Santos / Resumo: Murraya paniculata L. Jack (Rutaceae) é uma árvore amplamente utilizada nas Américas como ornamental. Porém, esta espécie vegetal nativa da Índia é considerada medicinal na Ásia e reconhecida pelas propriedades adstringentes, estimulantes, analgésicas e anti-inflamatórias. Diversos estudos revelam a presença de alcaloides, flavonoides, cumarinas e componentes do óleo essencial, fundamentalmente, e as propriedades antibacterianas, antifúngicas, anti-inflamatórias e analgésicas foram observadas para extratos de M. paniculata. Fitoterápicos derivados da planta estão disponíveis no Sistema Nacional de Saúde cubano, como anti-inflamatórios, porém é limitado o conhecimento dos metabólitos secundários majoritários da espécie coletada em Cuba e sua relação com a atividade farmacológica. Neste contexto, foi desenvolvido este trabalho que teve como objetivo realizar o estudo químico do extrato etanólico de folhas de M. paniculata, a fim de contribuir com sua padronização e com o estabelecimento de especificações de qualidade com base na composição química e atividade anti-inflamatória. O fracionamento do extrato etanólico foi iniciado por extração em fase sólida fornecendo 4 frações. A fração EFSMp4 foi fracionada utilizando-se cromatografia em coluna. A purificação final das substâncias majoritárias obtidas a partir de EFSMp4 foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência preparativa de fase reversa. As frações, subfrações e substâncias purificadas foram analisadas por CCD... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Objetivo. A busca por produtos de alho prontos para consumo cresceu na última década. O alho contém compostos fenólicos e organosulfurados, que são responsáveis pelo odor característico, sabor, aroma e ação antioxidante. Este estudo teve como objetivo avaliar a atividade antioxidante e determinar os compostos fenólicos totais em alho in natura e em seus produtos comercializados, além de avaliar o impacto dos aditivos (ácido cítrico, metabisulfito de sódio e benzoato de sódio) sobre a atividade antioxidante. Métodos. Extratos metanólicos de alho in natura (AIN) e seus produtos picado com sal (APS), picado sem sal (AP), frito (AF) e misto – mistura de alho in natura com alho desidratado (AM) foram analisados pela vida de prateleira (em três momentos), nos parâmetros: teor de fenólicos totais e atividade antioxidante por três métodos: ensaio DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazil), sistema &#946;-caroteno/ácido linoléico e capacidade protetora da oxidação lipídica utilizando o aparelho Rancimat®. Resultados. O teor de fenólicos totais do extrato em relação ao resíduo seco foi maior para o produto frito, nos três momentos. Em relação à atividade antioxidante, o alho frito foi o produto que apresentou melhor atividade para todos os testes. Ao longo da vida de prateleira, a atividade antioxidante diminuiu com o ensaio DPPH, sendo que para os demais testes, aumentou. Os produtos com aditivos apresentaram melhor atividade antioxidante, apesar de apresentarem menor teor de fenólicos totais. Conclusões. Este estudo reforçou o potencial antioxidante do alho, portanto o seu consumo pode ser recomendado como parte de uma dieta saudável. Além disso, observou-se que a presença de aditivos melhorou o efeito antioxidante das amostras. / Objective. The interest for ready-to-eat garlic byproducts increased in the last decade. Garlic has phenolic and sulfur compounds, which are responsible for the singular flavor and antioxidant activity. This study aimed to evaluate the antioxidant activity (AA) of in natura garlic and its commercialized byproducts, and to correlate the data with phenolics contents. The impact of additives (citric acid, sodium metabisulfite and sodium benzoate) on the AA was also evaluated. Methodology. Methanolic extracts of in natura garlic (ING) and its products, i.e., chopped with salt (CWP), chopped without salt (CS), fried (FG) and mixed garlic - in natura garlic with dehydrated garlic (MG) were evaluated in three different moments of the shelf life. This evaluation based on the measurement of the following parameters: total phenolic compounds and AA. The AA were evaluated using three different methods: DPPH (1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl) assay, &#946;-carotene/linoleic acid system and Rancimat® method. Results. The total phenolics content of the extract in relation to the dried residue was higher in the fried product, in the three moments. Regarding the AA, fried garlic showed the best activity in all tests. Throughout the shelf life, the AA decreased with the DPPH assays. In contrast, when the other tests were applied, the AA increased. The products with additives showed better antioxidant activity when compared to those without the additives, although the samples with additives showed lower content of total phenolics. Conclusion. This study strengthened the antioxidant potential of garlic, therefore its consumption should be recommended as part of a healthy diet. Moreover, it was observed that the presence of additives improved the antioxidant effect of the samples.

Submitted by KARINE CUSTÓDIO GARCIA null (kak_garcia@hotmail.com) on 2016-12-21T11:55:53Z No. of bitstreams: 1 Dissertação repositorio.pdf: 3376488 bytes, checksum: 8bc9d4cb78c9af3b01d3dc21a7312a4d (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-12-22T12:00:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 garcia_kc_me_arafcf.pdf: 3376488 bytes, checksum: 8bc9d4cb78c9af3b01d3dc21a7312a4d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-22T12:00:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 garcia_kc_me_arafcf.pdf: 3376488 bytes, checksum: 8bc9d4cb78c9af3b01d3dc21a7312a4d (MD5) Previous issue date: 2016-10-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As infecções do trato urinário (ITU) são afecções comuns, que podem resultar em níveis significantes de morbidade. Os agentes etiológicos associados a ITU são bactérias Gram-negativas e Gram-positivas, além do fungo comensal Candida albicans. Além dos parâmetros clássicos associados à infecção, as ITU proporcionam o aumento na formação de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, o que também acarreta injúria tecidual, bem como, também ocorre um alto índice de micro-organismos resistentes aos fármacos disponíveis na clínica médica, o que demanda na prospecção por novas abordagens terapêuticas complementares. No Brasil, a espécie Eugenia brasiliensis Lam. é conhecida como “berry brasileira” ou grumixama, e existem poucos relatos na literatura demonstrando sua atividade biológica. Este fator associados à escassez de estudos sobre a espécie brasileira E. brasiliensis, despertou o interesse em novos estudos relacionados à sua ação sobre microrganismos relacionados a ITU e atividade antioxidante. Os extratos utilizados neste estudo foram obtidos a partir da polpa do fruto liofilizado de E. brasiliensis com diferentes solventes, com objetivo de obter dados de sua composição fitoquímica, avaliar suas atividades antioxidantes, antimicrobianas e citotóxicas. Foram utilizados como padrões para os ensaios de atividade antioxidante o ácido elágico, quercetina, ácido gálico, ácido cafeico e trolox. Na caracterização química dos extratos foram determinados, os teores de flavonoides totais, compostos fenólicos totais, antocianinas totais e açúcares totais e realizados testes de identificação para taninos; além disso, um perfil cromatográfico por CLAE-UV foi obtido. O extrato etanólico apresentou atividade antimicrobiana para cepas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus e Candida albicans ATCC18804, enquanto o extrato aquoso demonstrou atividade antimicrobiana apenas frente ao S. aureus. Em relação à atividade antioxidante observou-se que os “padrões” ácido elágico, ácido gálico, ácido cafeico e quercetina foram mais eficientes do que as amostras para todos os ensaios, e entre os extratos de E. brasiliensis, o extrato etanólico demonstrou ter maior eficiência para a capturadas espécies reativas O2•-, ABTS•+, HOCl/OCl- e TauCl; enquanto que o extrato aquoso apresentou maior eficiência para o ensaio de clareamento da crocina na captura do radical ROO• e maior potencial redutor do íon férrico. Para o ensaio do NO•e H2O2 nenhum dos extratos apresentou atividade. Quanto ao potencial citotóxico, os extratos de E. brasiliensis não apresentaram citotoxicidade frente as linhagens celulares de origem não tumoral (macrófagos, linfócitos e células VERO). / The urinary tract infections (UTI) are common disorders, which may result in significant levels of morbidity. The etiological agents associated with UTI are Gram-negative and Gram-positive, plus commensal Candida albicans fungus. In addition to the classics associated with infection parameters, the ITU provide increased formation of reactive oxygen and nitrogen species, which also causes tissue damage, as well as a high rate of resistant microorganisms to drugs available in clinical practice, which requires the prospecting for new medicinal approaches. In Brazil, the specie Eugenia brasiliensis Lam. are known as “brazilian berry” or grumixama, and there are few reports in the literature demonstrating your biologic activity. This factor associated with the lack of studies on the brazilian specie E .brasiliensis stir up interest in new research related to the activities of microorganisms related to ITU and antioxidant activity. The extracts used in this study were obtained from the fruit pulp lyophilized of E. brasiliensis with different solvents in order to get data from their phytochemical composition, evaluate their antioxidant activity, antimicrobial and cytotoxicity. For the evaluation of antioxidant activity it was used like standards acid elagic, quercetina, acid gallic, acid cafeico and trolox. In the chemical characterization of the extracts were determined, the contents of total flavonoids, total phenolics, total anthocyanins and total sugars were determined and were performed to tannins; moreover, a profile by HPLC-UV chromatogram was obtained. The ethanol extract showed activity antimicrobial for the strains of Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus and Candida albicans ATCC18804, while the aqueous extract only demonstrated activity antimicrobial for S. aureus. In relation to the antioxidant activity it is observed that the “standards” ellagic acid, gallic acid, caffeic acid and quercetin were more efficient and among extracts of E. brasiliensis ethanolic extract showed greater efficiency for capture of reactive species O2•-, ABTS•+, HOCl/OCl- and TauCl; while the aqueous extract was more efficient for crocina bleaching assay in capturing the radical ROO• and higher potential reducer of ferric ion. For the test of NO• and H2O2 none of the extracts showed activity. As to the cytotoxic potential, E. brasiliensis extracts showed no cytotoxicity on cell lines of non-tumor origin (macrophages, lymphocytes and VERO).

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MichelineCRS.pdf: 1923375 bytes, checksum: cf891ecec41e4ead3be8cf1db2224eed (MD5) Previous issue date: 2008-05-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Studies made with polysaccharides of seaweed have demonstrated that these present important biological and pharmacological activities. These composites had presented "scavenging" activity of free radicals, which is important in the mediation of the inflammatory process and in the pathology of diverse disease. Recently, this "scavenging" property has taken some researches to evaluate the antioxidant capacity from various polysaccharides. Considering the limited research with polysaccharides and knowing its largely employed by the pharmaceutical and foodstuffs industries, we have objective to verify the actions from fucans and galactans as antioxidants. The fucans are found in brown seaweed and the galactans (carrageenans) in red seaweed. The fucans were obtained from seaweed Padina gymnospora (F0.5 e F1.1 fractions), common to our coastline and one another fucan, fucoidan, was of origin commercial and extracted from seaweed Fucus vesiculosus. The &#955;, &#954; e &#953; carrageenans were also of origin commercial. The antioxidant activities were tested in superoxide and hydroxyl systems to generated free radicals and for the inhibition of the lipid peroxidation. The results obtained to inhibition of formation the superoxide radicals demonstrated that all polysaccharides presented scavenging activity of superoxide radicals. The fucoidan, F0.5 and F1.1 fractions presented IC50 of 0.058; 0.243 and 0.243 mg/mL, respectively, while IC50 of the &#955;, &#954; and &#953; carrageenans were 0.046; 0.112 and 0.332 mg/mL, respectively. The results to inhibition of formation the hydroxyl radicals demonstrated that all sample had low effect in the inhibition of the formation of these radicals, except the F0.5. For these radicals the IC50 were 0.157 and 0.353 mg/mL to the fucoidan and F1.1, respectively and 0.357; 0.335 and 0.281 mg/mL to &#955;, &#954; and &#953; carrageenans, respectively. All the samples were capacity to inhibition the peroxidation, it present the IC50 of 1.250; 2.753 and 2.341 mg/mL to fucoidan, F0.5 and F1.1, respectively. Already the &#955;, &#954; and &#953; carrageenans presented the IC50 of 2.697; 0.323 and 0.830 mg/mL, respectively. With these findings, we conclude that polysaccharides used in this study presented activity antioxidant, and that fucoidan and the &#955; carrageenan show a significant "scavenging" activity for the radicals superoxide and the &#954; carrageenan a significant inhibitory activity for the lipid peroxidation / Estudos feitos com polissacar?deos de algas t?m demonstrado que esses apresentam atividades biol?gicas e farmacol?gicas importantes. Estes compostos apresentaram atividade varredora de radicais livres, os quais s?o importantes na media??o do processo inflamat?rio e na patologia de diversas doen?as. Recentemente, essa propriedade varredora tem levado alguns pesquisadores a avaliar a capacidade antioxidante de diversos polissacar?deos. Considerando o reduzido n?mero de pesquisas com estes compostos e sabendo-se de seu largo emprego pela ind?stria farmac?utica e aliment?cia, objetivamos neste trabalho, verificar as a??es de fucanas e galactanas como antioxidantes. As fucanas s?o encontradas em algas marrons e as galactanas (carragenanas) em algas vermelhas. As fucanas foram obtidas da alga Padina gymnospora (fra??es F0,5 e F1,1), comum em nosso litoral, e uma outra fucana, o fucoidan, foi de origem comercial e extra?do da alga Fucus vesiculosus. As carragenanas &#955;, &#954; e &#953; tamb?m foram comerciais. A atividade antioxidante foi testada em sistemas geradores de radicais super?xidos e hidroxilas, e pela inibi??o da peroxida??o lip?dica. Os resultados obtidos para inibi??o da forma??o de radicais super?xidos demonstraram que todos os polissacar?deos apresentaram atividade varredora de radicais super?xidos. O fucoidan, as fra??es F0,5 e F1,1 apresentaram IC50 de 0,058; 0,243 e 0,243 mg/mL, respectivamente; enquanto o IC50 das carragenanas &#955;, &#954; e &#953; foi de 0,046; 0,112 e 0,332 mg/mL, respectivamente. Os resultados para inibi??o da forma??o de radicais hidroxilas demonstraram que todas as amostras inibiram a forma??o destes radicais, exceto a F0,5. Para estes radicais o IC50 foi de 0,157 e 0,353 mg/mL para o fucoidan e F1,1, e de 0,357; 0,335 e 0,281 mg/mL para carragenanas &#955;, &#954; e &#953;, respectivamente. Todas as amostras foram capazes de inibir a peroxida??o lip?dica com IC50 de 1,250, 2,753 e 2,341 mg/mL para o fucoidan, F0,5 e F1,1, respectivamente. J? as carragenanas &#955;, &#954; e &#953; apresentaram o IC50 de 2,697, 0,323 e 0,830 mg/mL, respectivamente. Com estes achados, conclu?mos que os polissacar?deos usados neste estudo apresentam atividade antioxidante, e que o fucoidan e a carragenana &#955; exibem uma significante atividade varredora para os radicais super?xido e a carragenana &#954; uma significante atividade inibit?ria da peroxida??o lip?dica

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeandroSC_DISSERT_1-68.pdf: 3005513 bytes, checksum: 4d385177273793fb97add8fa79a198b9 (MD5) Previous issue date: 2012-03-08 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The coast of Rio Grande do Norte has more than 100 species of seaweed, mostly unexplored regarding their pharmacological potential. The sulfated polysaccharides (PS) are by far the more seaweed compounds studied, these present a range of biological properties, such as anticoagulant activity, anti-inflammatory, antitumor and antioxidant properties. In this study, we extract sulfated polysaccharide rich-extracts of eleven algae from the coast of Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; Dictyota mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Gracilaria caudata; Caulerpa cupresoides; Caulerpa prolifera; Caulerpa sertularioides e Codim isthmocladum), and these were evaluated for the potential anticoagulant, antioxidant and antiproliferative. All polysaccharide extracts showed activity for anticoagulant, antioxidant and/or antiproliferative activity, especially D. delicatula and S. filipendula, which showed the most prominent pharmacological potential, thereby being chosen to have their sulfated polysaccharides extracted. By fractionating method were obtained six fractions rich in sulfated polysaccharides to the algae D. delicatula (DD-0,5V, DD-0, 7V, DD-1,0v, DD-1,3v, DD-1,5v and DD-2,0) and five fractions to the alga S. filipendula (SF-0,5V, SF-0,7V, SF-1,0v, SF-1,5v and SF-2,0v). For the anticoagulant assay only the fractions of D. delicatula showed activity, with emphasis on DD-1, 5v that presented the most prominent activity, with APTT ratio similar to clexane? at 0.1 mg/mL. When evaluated the antioxidant potential, all fractions showed potential in all tests (total antioxidant capacity, hydroxyl and superoxide radicals scavenging, ferrous chelation and reducing power), however, the ability to chelate iron ions appears as the main mechanism antioxidant of sulfated polysaccharides from seaweed. In antiproliferative assay, all heterofucanas showed dose-dependent activity for the inhibition of cell proliferation of HeLa, however, with the exception of SF-0,7V, SF- 1,0v and SF-1,5v, all fractions showed antiproliferative activity against MC3T3, a normal cell line. The heterofucana SF-1,5V had its antiproliferative mechanism of action evaluated. This heterofucan induces apoptosis in HeLa cells by a pathway caspase independent, promoting the release of apoptosis Inducing Factor (AIF) in the cytosol, which in turn induces chromatin condensation and DNA fragmentation into 50Kb fragments. These results are significant in that they provide a mechanistic framework for further exploring the use of SF-1.5v as a novel chemotherapeutics against human cervical cancer. / O litoral do Rio Grande do Norte apresenta mais de 100 esp?cies de macroalgas marinhas, a maioria delas ainda n?o explorada quanto ao seu potencial farmacol?gico. Os polissacar?deos sulfatados (PS) s?o de longe os compostos de macroalgas marinhas mais estudados, sendo atribu?da a estes uma gama de propriedades biol?gicas, como: atividade anticoagulante, antiinflamat?ria, antitumoral e antioxidante. Neste trabalho, obteve-se extratos ricos em polissacar?deos de onze algas do litoral do Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; Dictyota mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Gracilaria caudata; Caulerpa cupresoides; Caulerpa prolifera; Caulerpa sertularioides e Codium isthmocladum), e estas foram avaliadas quanto ao seu potencial anticoagulante, antioxidante e antiproliferativo frente ? linhagem celular tumoral HeLa. Todos os extratos polissacar?dicos apresentaram atividades anticoagulante, antioxidante e/ou antiproliferativa, com destaque para os das algas D. delicatula e S. filipendula, que apresentaram os maiores ?ndices de potencial farmacol?gico, sendo, portanto, escolhidas para serem submetidos a passos posteriores de purifica??o de seus polissacar?deos sulfatados. Atrav?s do fracionamento com volumes crescentes de acetona foram obtidas seis fra??es ricas em polissacar?deos sulfatados da alga D. delicatula (DD-0,5v, DD-0,7v, DD-1,0v, DD-1,3v, DD-1,5v e DD-2,0v) e cinco fra??es da alga S. filipendula (SF-0,5v, SF- 0,7v, SF-1,0v, SF-1,5v e SF-2,0v). An?lises f?sico-qu?micas mostraram que estas s?o ricas em heterofucanas sulfatadas. Apenas as fra??es da alga D. delicatula apresentaram atividade anticoagulante, com destaque para DD-1,5v que apresentou a atividade mais proeminente com raz?o de APTT semelhante ? clexane?, f?rmaco anticoagulante comercial. Quando avaliadas com rela??o ao potencial antioxidante todas as fra??es apresentaram atividade em todos os testes realizados (Capacidade antioxidante total, sequestro de radicais super?xido e hidroxila, quela??o f?rrica e atividade redutora), entretanto, a capacidade de quela??o de ?ons ferro aparece como o principal mecanismo antioxidante dos polissacar?deos sulfatados dessas macroalgas marinhas. No ensaio antiproliferativo, todas as heterofucanas apresentaram atividades dose-dependente para a inibi??o da prolifera??o celular de HeLa, entretanto, as fra??es SF-0,7v, SF-1,0v e SF-1,5v apresentaram atividade espec?fica para esta linhagem celular, n?o inibindo a prolifera??o da linhagem celular normal MC3T3, sendo a heterofucana SF-1,5v escolhida para ter seu mecanismo de a??o antiproliferativo determinado. SF-1,5v induz a apoptose em c?lulas HeLa principalmente atrav?s de uma via independente da ativa??o das caspases, promovendo a libera??o do Fator Indutor da Apoptose (AIF) no citosol, que por sua vez induz a condensa??o da cromatina e fragmenta??o do DNA em fragmentos de 50Kb. Este trabalho ? o primeiro relato mostrando uma heterofucana cujo principal mecanismo antiproliferativo ? a libera??o de AIF mitocondrial para o citosol, o que torna SF-1,5v um promissor f?rmaco na terapia antitumoral, possibilitando uma alternativa aos quimioter?picos tradicionais.

Submitted by JUAN DAVID SOLANO MENDONZA null (juan.solanomendoza@gmail.com) on 2017-04-19T18:30:02Z No. of bitstreams: 1 dissertaçao JUAN MENDOZA.pdf: 1111206 bytes, checksum: 0b4a862173ec55a33d92959d7331d935 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-19T19:56:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 solanomendoza_jd_me_bot.pdf: 1111206 bytes, checksum: 0b4a862173ec55a33d92959d7331d935 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-19T19:56:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 solanomendoza_jd_me_bot.pdf: 1111206 bytes, checksum: 0b4a862173ec55a33d92959d7331d935 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A batata-doce é uma das principais hortaliças cultivadas no mundo, as suas raízes tuberosas têm múltiplos usos na alimentção humana e animal e na produção industrial de farinha, amido e etanol. Os teores de compostos biativos, caracteristicas fisico-quimicas de quailidade pós-colheita e produtividade, podem diferir entre genótipos e idade da planta. O Vale do Ribeira é uma região de comunidades tradicionais que mantêm diferentes acessos de batata-doce. Este estudo foi realizado de fevereiro a outubro de 2015, o objetivo principal foi realizar a caracterização físico-química e de produtividade de três acessos de batata-doce pertencentes ao Banco de Germplasma da Universidade Estadual Paulista.Registro. As análises do experimento foram feitas nos acessos VR 13-01 (casca roxa e polpa roxa fortemente pigmntada), VR13-11 (casca rosa e polpa branca) e VR13-50 (casca creme e polpa branca). O delineamento experimental foi em blocos casualizados com seis repetições por tratamento e cada parcela tinha 5 plantas.O espaçamento de plantio entre plantas foi de 0,25 m e 0,80 m entre linhas. As avaliações das analises físico-químicas, compostos bioativos e produtividade foram feitas aos 120,150 e 180 dias após o plantio. Foram determinados a produçao total de matéria fresca da parte aérea, produçao total de matária seca da raiz, produtividade total de raizes, produtividade comercial de raízes, produção de raizes não comercias , teor de sólidos solúveis , teor de amido, comteúdo de compostos fenólicos totais, flavonoides totais, antocianinas totais e capacidade antioxidante. As características selecionadas pela PCA foram submetidas a análise de variância, complementadas pelo teste de Scott-Knott, a 5% de probabilidade. Considerou-se significativo quando p<0,05. Comparando os três acessos o VR 13­ 01 mostrou os maiores teores de sólidos solúveis (16,6 ° Brix), antocianinas totais (111,6 mg 100 g;1 e o VR13­50 apresentou o maior teor de amido (25,3%) e produtividades mais elevadas ( 43.011kg ha-1). / The sweet potato is one the most grown vegetable crops in the world, its storage roots have multiple uses as human and animal foods and in industrial production of flour, starch and ethanol. The starch and sugar content may differ genotypes and harvest season. The Vale do Ribeira region has traditional communities keep different accessions of sweet potato. This study was conducted from February to October 2015, and main objetive was the physico-chemical characterization, bioactive compounds and productivity of three accessions of sweet potato belonging to the Germplasn Bank of Universidad Estadual Paulista. Accession were VR 13-01 (purple skin and strongly purple pulp).VR13-11( lightly purple skin and white pulp) and VR13-50 ( cream skin and white pulp).The experimental design was randomized blocks with six replications per treatment and each plot had 5 plants. The planting distance between plants was 0.25 m and 0.80 m between rows. The biochemical , physico chemical characterization and production yields was made 120,150 and 180 days after planting. The total productions yield, soluble solids content, and starch content were determined and significant differences among accessions obtained by ANOVA and means separated by a Scott-Knott test. Comparing all three accessions. VR13-01 showed highhest soluble solid content (16,6° Brix), anthocyanin content (111,6 mg 100-1 and accessions VR13-50 showed the highest starch content (25,3 %) and the highest production yields (43.011 Kg ha 1).

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:10:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DayaneLG_DISSERT.pdf: 2239805 bytes, checksum: 7c5ca3d63f1b06cc836a0c3ae876316c (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds are organisms known to exhibit a variety of biomolecules with pharmacological properties. The coast of Rio Grande do Norte has over 100 species of seaweeds, most of them not yet explored for their pharmacological potential. Sugars and phenolic compounds are the most studied of these being assigned a range of biological properties, such as anticoagulant , antiinflammatory, antitumor and antioxidant activities. In this work, we obtained methanolic extracts from thirteen seaweeds of the coast of Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; D. mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Acanthophora specifera; Botryocladia occidentalis; Caulerpa cupresoides; C. racemosa; C. prolifera; C. sertularioides e Codium isthmocladum). They were evaluated as anticoagulant and antioxidant drugs, as well as antiproliferative drugs against the tumor cell line HeLa. None of the methanolic extracts showed anticoagulant activity, but when they were evaluated as antioxidant drugs all of extracts showed antioxidant activity in all tests performed (total antioxidant capacity, sequestration of superoxide and hydroxyl radicals, ferric chelation and reductase activity), especially the algae D. mentrualis, D. cilliolata and C. prolifera, who had the greatest potential to donate electrons.In addition, the ability of iron ions chelation appears as the main antioxidant mechanism of the methanolic extracts of these seaweeds mainly for the extract of the C. racemosa seaweed, which reached almost 100% activity. In the MTT assay, all extracts showed inhibitory activity at different levels againts HeLa cells. Moreover, D. cilliolata (MEDC) and D. menstrualis (MEDM) extracts showed specific activity to this cell line, not inhibiting the viability of 3T3 normal cell line, so they were chosen for detailing the antiproliferative mechanism of action. Using flow cytometry, fluorescence microscopy and in vitro assays we demonstrated that MEDC and MEDM induced apoptosis in HeLa cells by activation of caspases 3 and 9 and yet, MEDC induces cell cycle arrest in S phase. Together, these results showed that the methanolic extracts of brown seaweed D. menstrualis and D. cilliolata may contain agents with potential use in combatting cells from human uterine adenocarcinoma. This study also points to the need for more in-depth research on phytochemical and biological context to enable the purification of biologically active products of these extracts / Macroalgas marinhas s?o organismos conhecidos por apresentar uma diversidade de biomol?culas com propriedades farmacol?gicas. O litoral do Rio Grande do Norte apresenta mais de 100 esp?cies de macroalgas marinhas, a maioria delas ainda n?o explorada quanto ao seu potencial farmacol?gico. A??cares e compostos fen?licos s?o os compostos de macroalgas marinhas mais estudados, sendo atribu?da a estes uma gama de propriedades biol?gicas, como: atividade anticoagulante, antiinflamat?ria, antitumoral e antioxidante. Neste trabalho, foram obtidos extratos metan?licos de treze algas do litoral do Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; Dictyota mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Acanthophora specifera;Botryocladia occidentalis;Caulerpa cupresoides; C. racemosa; C. prolifera; C. sertularioides e Codium isthmocladum), e esses foram avaliados quanto ao seu potencial anticoagulante, antioxidante e antiproliferativo. Nenhum dos extratos metan?licos apresentaram atividades anticoagulante, por?m quando avaliados com rela??o ao potencial antioxidante todos os extratos apresentaram atividade em quase todos os testes realizados (capacidade antioxidante total, sequestro de radicais super?xido e hidroxila, quela??o f?rrica e atividade redutora). Os extratos apresentaram resultados mais expressivos no teste de quela??o f?rrica, principalmente para o extrato da alga C. racemosa que chegou a quase 100% de atividade. Destaca-se tamb?m a capacidade de doar el?trons dos extratos, em especial, dasalgas D. mentrualis,D. cilliolata e C. prolifera que apresentaram os maiores potenciais. Nosestudos de citotoxidade, todos os extratos apresentaram atividades em diferentes n?veis frente as c?lulas tumorais HeLa, entretanto, os extratos de D. cilliolata (MEDC) e D. menstrualis (MEDM) apresentaram atividade espec?fica para esta linhagem celular, n?o apresentando citotoxidadepara as c?lulas3T3. Estudos com estes dois extratos utilizando t?cnicas de citometria de fluxo, microscopia de fluoresc?ncia e testes in vitro mostraram que MEDC e MEDM induzem a apoptose em c?lulas HeLa atrav?s da ativa??o das caspases 3 e 9 e ainda, MEDC induz a parada do ciclo celular na fase S. Juntos, esses resultados mostraram que os extratos metan?licos de algas marrom D. mentrualis e D. cilliolata podem conter agentes com potencial utiliza??o no combate de c?lulas de adenocarcinoma uterino humano. O presente estudo tamb?m aponta para a necessidade de investiga??es mais aprofundadas no ?mbito fitoqu?mico e biol?gico para se identificar produtos biologicamente ativos presentes nos extratos

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MirelyFP_DISSERT_PARCIAL.pdf: 786643 bytes, checksum: 4acab041106a30bcf7d8494f27443eb4 (MD5) Previous issue date: 2010-11-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The main aim of this study was to compare the procedure for dehydration of Gracilaria birdiae prepared handmade and laboratory, collected in the northern coast of Rio Grande do Norte. The sample was collected in the Rio do Fogo beach in march 2009. The sample collected followed by two processing, the first the material prepared in laboratory was air-dried at 50?C for 24 hours in air-flow oven. The second the handmade sample was air-dried on the sun during three days. The extract was prepared in three different solvents: ethanol, hydroethanol and water, resulting in ethanol, hidroethanol and aqueous extracts from handmade and laboratory sample. In according with results only the ethanol extract was fractionated yielding the fractions hexane, dichloromethane and ethyl acetate fractions. The different process to obtain Gracilaria birdiae resulted in the samples with different shades. The soluble solids content was higher in the laboratory sample. The chemical composition the both samples were characterized by presenting a considerable amounts of carbohydrates, with amior percentage protein and ash, respectively, in the handmade and laboratory sample. In two samples showed a low content of lipids and the lipid profile showed a higher proportion of monounsaturated fatty acids, with the absence polyunsaturated handmade sample. The phytochemical screening by chemical reactions showed the presence of flavonoids, tannins, alkaloids and saponins the laboratory sample, presenting a greater diversity of bioactive compounds. Through of the analysis by thin layer chromatography was possible to identify the phytosterols ?-sitosterol and stigmasterol the both samples, also suggest the presence of ?-carotene and chlorophyll ? the laboratory sample. The levels of total phenolics and flavonoids were more significant in the ethanol extract of the laboratory sample. The in vitro lethality showed that extracts of the laboratory sample and handmade from 125 to 500 ?g/ mL, respectively, were highly lethal. In the evaluation of antioxidant capacity by the system ?-carotene/?cido linoleic method and by DPPH radical scavernging assay, the ethanol extract from the laboratory process showed significantly greater activity than the other extracts, being and the first and second methods, respectively, lower and equivalent to the synthetic antioxidant BHT. The handmade ethanol extract has not demonstrated skill in deactivating free radicals, but showed activity in inhibiting lipid peroxidation, although the values were significantly lower than the laboratory sample. We conclude that the dehydration process in the laboratory is the most efficient technique to maintenance of the chemical composition present in the seaweed, providing beneficial properties such as antioxidant capacity. We emphasize that this property can be explored with the objective of adding commercial value to the final product, which will promote the expansion of production of this seaweed in the community of Rio do Fogo / O presente estudo tem como finalidade analisar de forma comparativa o procedimento de desidrata??o de Gracilaria birdiae beneficiada laboratorialmente e artesanalmente, cultivada no litoral norte do Rio Grande do Norte. A coleta das amostras foi realizada na praia do Rio do Fogo em mar?o de 2009. Das amostras coletadas seguiram-se dois processamentos, no primeiro o material coletado foi mantido em estufa de ar circulante a 50?C, por 24 horas sendo obtida a amostra laboratorial. No segundo a amostra artesanal foi desidrata??o ao sol por um per?odo de tr?s dias. A extra??o consistiu em solu??es etan?lica, hidroetan?lica e aquosa, resultando em extrato etan?lico, hidroetan?lico e aquoso. De acordo com os resultados o extrato etan?lico foi fracionamento obtendo as fra??es hexano, diclorometano e acetato de etila. As distintas formas de processamento da Gracilaria birdiae promoveram a obten??o de amostras com tonalidades distintas. Quanto ao teor de s?lidos sol?veis a amostra laboratorial apresentou superioridade. A composi??o centesimal de ambas as amostras caracterizaram-se por apresentar um consider?vel teor de carboidratos, com maior percentual de res?duo mineral e prote?nas, respectivamente, na amostra laboratorial e artesanal. As duas amostras apresentaram um baixo conte?do de lip?deos e um perfil lip?dico caracterizado por uma maior propor??o de ?cidos graxos monoinsaturados, com aus?ncia de poliinsaturados na amostra artesanal. A triagem fitoqu?mica evidenciou a presen?a de flavon?ides, taninos, saponinas e alcal?ides na amostra laboratorial, apresentando uma maior diversidade de compostos bioativos. Por meio da cromatografia em camada delgada foi poss?vel identificar os fitoester?is ?-sitosterol e stigmasterol em ambas as amostras, al?m de sugerir a presen?a do ?-caroteno e da clorofila ? na amostra laboratorial. Os teores de compostos fen?licos totais e caroten?ides totais foram mais expressivos no extrato etan?lico da amostra laboratorial. A letalidade in vitro, demonstrou que os extratos etan?licos da amostra laboratorial e artesanal a partir de 500 e 125 ?g/mL, respectivamente, foram altamente letais. Na avalia??o da capacidade antioxidante pelo sistema ?- caroteno/?cido linol?ico e pelo m?todo de sequestro do radical livre DPPH , o extrato etan?lico proveniente do processo laboratorial apresentou atividade significativamente maior que os demais extratos, sendo no primeiro e segundo m?todo, respectivamente, inferior e equivalente ao antioxidante sint?tico BHT. O extrato etan?lico proveniente do processo artesanal n?o demonstrou habilidade na desativa??o de radicais livres, mas apresentou atividade na inibi??o da peroxida??o lip?dica, por?m com valores significativamente inferiores a amostra laboratorial. Conclui-se que o processo de desidrata??o em laborat?rio ? a t?cnica mais eficiente, por supostamente promover a manuten??o dos compostos qu?micos presentes na alga marinha, proporcionando propriedades ben?ficas como a capacidade antioxidante. Ressalta-se que esta propriedade pode ser explorada com o intuito de agregar valor comercial ao produto final, o que promover? a expans?o da produ??o desta alga na comunidade do Rio do Fogo / 2020-01-01