Orientador: João Ernesto de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T01:37:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Figueiredo_MarianaCecchetto_M.pdf: 1623001 bytes, checksum: 8e3ade8e07506ea16870f8811c85daa3 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo realizar uma triagem inicial da ayahuasca em cultura de células e em modelos de nocicepção e ansiedade. A ayahuasca é uma decocção de duas plantas (Banisteriopsis caapi e Psychotria viridis) com ação alucinógena, utilizada por diversas religiões no Brasil. As principais substâncias relacionadas com as atividades no sistema nervoso central são a DMT(dimetiltriptamina), agonista serotoninérgico dos receptores 5HT1A, 2A/2C e as ?-carbolinas, inibidoras da monoaminoxidase-A (MAO), encontradas na P. viridis e B. caapi, respectivamente. Nos últimos anos, a ayahuasca se espalhou pela Europa e Estados Unidos, chamando a atenção dos pesquisadores quanto aos seus efeitos. Desta forma, o presente trabalho revelou que a ayahuasca possui atividade sobre a nocicepção em modelos de contorção abdominal e placa quente, atividade ansiolítica em ratos submetidos aos testes de labirinto em cruz elevado (LCE) e efeito citostático leve em cultura de células tumorais humanas de mama (MCF-7), rim (786-0), pulmão (NCI-H460), próstata (PC-3), ovário (OVCAR-3), cólon (HT-29), mama resitente a múltiplas drogas (NCI-ADR) / Abstract: This study aimed to perform an initial screening of ayahuasca in cultured cells and in models of nociception and anxiety. Ayahuasca is a decoction of two plants (Banisteriopsis caapi and Psyvhotria viridis) with hallucinogenic action, used by various religions in Brazil. The main activities related substances in the central nervous system are DMT ( dimethyltryptamine ) , serotonin 5HT1A receptor agonist, 2A/2C and ? - carbolines , inhibiting monoamine oxidase -A ( MAO ) , found in P. viridis and B. caapi , respectively. In recent years, ayahuasca has spread to Europe and the United States, calling the attention of researchers for their effects. Thus , the present study showed that ayahuasca has activity on nociception in models writhing and hot plate , anxiolytic activity in rats submitted to the elevated maze tests (EPM ) and light cytostatic effect on cultured human tumor cells breast ( MCF -7) , kidney ( 786-0 ) , lung ( NCI- H460 ) , prostate (PC -3), ovarian ( OVCAR -3) , colon ( HT -29) , breast , multidrug resistente ( NCI- ADR ) / Mestrado / Ensino em Saúde / Mestra em Clínica Médica

Orientador: Ronaldo Aloise Pilli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-19T04:40:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_VanessaCaixeta_M.pdf: 3243379 bytes, checksum: e0935d08b333881437e8413863fa0ff7 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A goniotalamina (9), produto natural isolado de diversas plantas do gênero Goniothalamus, vem se destacando por sua potência em teste de triagem in vitro contra linhagens de células tumorais, bem como pelos resultados positivos em modelos tumorais in vivo. Isso faz com que a goniotalamina sirva como modelo para a síntese e avaliação de novos compostos. Com base nisso, propomos sintetizar e avaliar a atividade citotóxica de duas classes de derivados de 9. A primeira classe são os derivados com substituintes oxigenados na posição 4 da 5,6-di-hidropiran-2-ona. Os derivados alquil e acil (17,24-28) foram obtidos a partir da kavalactona (23) através de reações clássicas de alquilação e acilação em rendimentos que variaram de baixo a excelente. Por sua vez, a kavalactona (23) foi obtida através de uma reação de aldol seguida de lactonização in situ entre o cinamaldeído (10) e acetoacetato de etila (29) em 15% de rendimento. O ensaio de atividade antiproliferativa in vitro mostrou que nenhum dos derivados avaliados foi mais citotóxico que a goniotalamina (9) e que nenhum dos compostos apresentou seletividade para as linhagens avaliadas. Outra classe de compostos avaliada foram os derivados nitrogenados da goniotalamina (9) que apresentam a substituição do anel lactônico por um anel lactâmico. Os derivados lactâmicos 46 a 51 foram sintetizados em 3 etapas e rendimentos globais que variaram de 18 a 60%. A primeira etapa consistiu na formação da imina a partir do respectivo aldeído (10,52-56) seguida de alilação com brometo de alilmagnésio para a formação da amina primária 57. Esta foi convertida em uma amida 58 através da reação com cloreto de acriloíla ou crotonoíla. E por fim, a lactama foi obtida após o tratamento da amida 58 com 6 mol% do catalisador de Grubbs de segunda geração. A avaliação da atividade antiproliferativa in vitro desses derivados mostrou que nenhum deles apresentou citotoxicidade maior que 9. Entretanto, o derivado 49 apresentou seletividade para duas linhagens de células tumorais PC-03 (próstata) e K562 (leucemia) / Abstract: Goniothalamin (9), a natural product isolated from several plants of the Goniothalamus genus, has been highlighted in the literature for presenting good potency against human tumor cell lines in in vitro assays, as well as good results in in vivo models. This makes goniothalamin a promising model for designing new compounds. Herein, we propose the synthesis and the cytotoxic evaluation of two classes of goniothalamin derivatives. The first class comprises derivatives with substituents at position 4 of the 5,6-di-hydropyran-2-one moiety. Alkyl and acyl derivatives (17,24-28) were obtained from kavalactone (23) after well-known alkylation and acylation reaction in bad to good yields. Kavalactone (23) was obtained from cinnamaldehyde (10) and ethyl acetoacetate (29) via an aldol reaction followed by in situ lactonization, in 15% yield. The antiproliferative assay showed that none of these derivatives was more cytotoxic than goniothalamin and none presented selectivity for tumor cell lines. The second class of compounds presents the substitution of the lactone by a lactam moiety. Lactam derivatives 46 - 51 were synthesized in 3 steps and overall yields ranging from 18 to 60%. The first step was the imine formation from the respective aldehyde (10,52-56) followed by allylmagnesium bromide addition to form primary amine 57. This was reacted with acryloyl or crotonoyl chloride to generate amide 58. Finally, the desired lactam was obtained by treating amide 58 with 6 mol% of Grubbs¿ second generation catalyst. The in vitro antiproliferative evaluation showed that 9 was more cytotoxic than the derivatives. However, derivative 49 presented selectivity for two tumor cell lines PC-03 (prostate) and K562 (leukemia) / Mestrado / Quimica Organica / Mestre em Química

Orientador: Marcos José Salvador / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T10:39:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pascoal_AislanCristinaRhederFagundes_M.pdf: 4510440 bytes, checksum: 168a21e640dc3b31d66e0351b69fee87 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Campomanesia adamantium (Cambess.) O. Berg (Myrtaceae) é uma planta popularmente conhecida como gabiroba ou guaviroba, cujos frutos são comestíveis. Suas folhas e cascas são usadas na medicina popular como antiinflamatórias, antidiarréicas, anti-sépticas das vias urinárias e para o tratamento da gripe. Como parte de um programa de bioprospecção que visa à descoberta de produtos naturais bioativos, o presente estudo teve por objetivo a prospecção de metabólitos secundários com atividade antioxidante e antiproliferativa acumulados no extrato etanólico das folhas de C. adamantium. Para tanto, adequou-se a metodologia para a avaliação in vitro da atividade antioxidante (redução do radical DPPH e ORACFL) e antiproliferativa, frente a linhagens de células tumorais humanas e procedeu-se o estudo fitoquímico, buscando-se a identificação dos constituintes majoritários ativos. Inicialmente obteve-se o perfil dos extratos ativos (HPLC-DAD e ESI-MS), identificando algumas substâncias conhecidas diretamente no extrato bruto e frações (desreplicação). Os extratos ativos foram submetidos ao fracionamento guiado pela atividade antioxidante e antiproliferativa e para a substância isolada e purificada realizou-se a elucidação estrutural utilizando-se métodos espectroscópicos de análise (RMN (1D e 2D ) e espectrometria de massas). Ainda, buscou-se avaliar se a substância purificada induz a morte celular por apoptose frente à linhagem de célula de câncer de próstata (PC-3) com análise de expressão do RNAm por PCR semiquantitativo do genes BAX e BCl-2 e a fragmentação do DNA por citometria de fluxo. Com base nos resultados sugere-se que: (1) o extrato bruto etanólico das folhas de C. adamantium e suas frações butanólica e acetato de etila apresentaram atividade antiproliferativa frente a linhagens tumorais humanas; (2) o extrato bruto etanólico das folhas de C. adamantium e suas frações butanólica e acetato de etila apresentaram atividade antioxidante tanto pelo método indireto DPPH (baseado em mecanismos de transferência de elétrons), quanto pelo ensaio ORACFL (método direto, cinético, baseado em mecanismos de transferência de hidrogênio). A atividade antioxidante destas amostras pode ser relacionada com o alto teor de substâncias fenólicas totais solúveis estimado pelo método colorimétrico Folin Ciocalteu; (3) análises empregando HPLC-DAD e ESI-MS e MS-MS dos extratos e frações com atividade antioxidante sugeriram a presença dos flavonóides isoquercitrina (Ca1), quercitrina (Ca2), miricetina (Ca3), quercetina (Ca4) e das chalconas 2',4'-diidroxi-6'-metoxichalcona (Ca5), 2',4'-diidroxi-5'-metil-6'-metoxichalcona (Ca6) e 2',4'-diidroxi-3',5'-dimetil-6'-metoxichalcona (Ca7); (4) o estudo fitoquímico da fração acetato de etila levou ao isolamento e identificação da chalcona Ca5, que apresentou promissora atividade antiproliferativa frente a algumas das linhagens de células tumorais humanas estudadas; (5) as análises de expressão dos genes BAX e BCl-2 não apresentaram alterações significativas em relação às células controles que indicassem indução de apoptose. Porém, com a análise por citometria de fluxo da fragmentação do DNA pode-se observar que as células que foram tratadas com a chalcona isolada (Ca5) tiveram um aumento significativo da fragmentação, indicando indução do processo apoptótico. Assim, procedeu-se o estudo com C. adamantium para a busca de compostos com atividade antioxidante e antiproliferativa de origem vegetal, o que pode vir a contribuir para a quimioprevenção de doenças relacionadas com o estresse oxidativo (doenças degenerativas, câncer, cardiovasculares, inflamatórias) e para obter novas fontes de insumos farmacêuticos / Abstract: Campomanesia adamantium (Cambess.) O. Berg (Myrtaceae) is a plant popularly known as gabiroba or guaviroba, whose fruits are edible. Its leaves and bark are used in folk medicine as anti-inflammatory, antidiarrheal, antiseptic of the urinary tract and treatment of flu. As part of a bioprospecting program aimed at the discovery of bioactive natural products, this study aims at prospecting with phyto-derived antioxidant and antiproliferative activity accumulated in the ethanol extract from leaves of C. adamantium. To this end, it has adapted methods for in vitro evaluation of antioxidant activity (DPPH radical reduction and ORACFL assays) and antiproliferative activity against human tumor cell lines and proceeded to the phytochemical study, seeking to identify the major constituents active. Initially, we obtained the profile of the active extracts (HPLC-DAD and ESI-MS), identifying some known substances directly into the crude extract and fractions (dereplication). The active extracts were subjected to fractionation guided by the antioxidant and antiproliferative activities and the compound isolated and purified held structural elucidation using spectroscopic analysis (NMR (1D and 2D) and mass spectrometry). Still, we sought to assess whether the purified substance induces cell death by apoptosis front of the cell line of prostate cancer (PC-3) with analysis of mRNA expression by semiquantitative PCR of the genes BAX and BCL-2 and DNA fragmentation by flow cytometry. The results suggest that: (1) the crude ethanol extract of leaves of C. adamantium and its fractions in butanol and ethyl acetate showed antiproliferative activity against human tumor lines; (2) the crude ethanol extract of leaves of C. adamantium and its fractions butanol and ethyl acetate showed antioxidant activity proved both by DPPH method (based on mechanisms of electron transfer), and by the ORACFL assay (kinetic method based on mechanisms of hydrogen transfer). The antioxidant activity of these samples may be related to the high content of total soluble phenolic substances estimated by the Folin Ciocalteu colorimetric assay; (3) analysis employing HPLC-DAD, ESI-MS and MS-MS of extracts and fractions with antioxidant activity suggested the presence of flavonoids isoquercitrin (Ca1), quercitrin (Ca2), myricetin (Ca3), quercetin (Ca4) chalcones and 2 ', 4'-dihydroxy- 6'-metoxichalcona (Ca5), 2', 4'-dihydroxy-5'-methyl-6 '-metoxichalcona (Ca6) and 2', 4'-dihydroxy-3 ', 5'-dimethyl-6'-metoxichalcona (Ca7); (4) the phytochemical study of ethyl acetate fraction led to the isolation and identification of the chalcone Ca5 which showed promising antiproliferative activity against some human tumor cell lines studied; (5) analysis of gene expression of BAX and BCL-2 showed no changes, but DNA fragmentation can be observed apoptosis in cells that were treated with chalcone Ca5. Thus, we proceeded the study of C. adamantium to search of natural products with antioxidant and antiproliferative activities, to contribute to the chemoprevention of diseases related to oxidative stress (degenerative diseases, cancer, cardiovascular, inflammatory) and to obtain new sources of pharmaceutical products / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Biologia Vegetal

Orientador: Gláucia Maria Pastore / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-26T10:07:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dantas_EricaMara_D.pdf: 2161426 bytes, checksum: aba5b3802cfe09e4d134b209a2879a7c (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Considerando a necessidade de consumo de quantidade significativa de frutas e hortaliças para alcançar a ingestão diária de nutrientes e compostos bioativos, o presente estudo teve como objetivo desenvolver e caracterizar duas bebidas funcionais liofilizadas a base de frutas e hortaliças (Green Smoothies). Na composição centesimal, vitamínica e mineral, a BMFH (1) obteve os maiores valores para a maior parte das determinações, exceto para o teor de fibra alimentar, sódio, vitamina B2, vitamina C e zinco. As duas bebidas destacaram-se pelos baixos valores calóricos e por conterem alto teor de fibra alimentar, por serem fonte de vitamina A, manganês e, além disso, a BMFH (1) por ser fonte de magnésio. Em relação ao equivalente de porções de frutas e vegetais supridos no valor diário recomendado, as BMFHs apresentaram menores quantidades do que de uma porção de banana apenas para os conteúdos de magnésio e de vitaminas B6 e C e iguais em vitamina B2. Obtiveram quantidades equivalentes a 3 porções de frutas e vegetais em relação aos lipídios, fibras, manganês, fósforo e zinco, e a 4 porções em relação a carboidratos, cálcio, ferro, potássio e cobre. Quando comparadas a bebidas comerciais similares, o teor de 6 composições das duas bebidas foram maiores do que a maioria das bebidas comerciais analisadas, e menores em conteúdo 4 determinações. Entre as duas bebidas formuladas, não foram encontradas diferenças significativas para o pH, ºbrix, glicose e pectina; a % acidez titulável, sacarose, flavonoides totais e fibras solúveis foram maiores na BMFH (1); a relação ratio, frutose e fibras insolúveis foram maiores na BMFH (2); para ambas as bebidas, as maiores concentrações de mono- e dissacarídeos se deram para a sacarose, e em ambas foram identificados fruto- e maltooligossacarídeos, sendo que o primeiro foi encontrado em maior quantidade na BMFH (1) e o último em maior concentração na BMFH (2). Na avaliação da cor, não houve diferenças em relação à luminosidade, mas a BMFH (1) apresentou tonalidades mais tendentes ao verde e ao amarelo, pela maior concentração de clorofilas e de ?-caroteno. Antes da digestão in vitro, ambas as amostras apresentaram 6 dos 17 flavonoides testados, mas diferiram com a presença de outras duas na BMFH (1) e de outras 3 na BMFH (2). Foram obtidos maiores resultados de Fenóis Totais para a couve fresca e hortelã liofilizada, no teste de DPPH-trolox pelo extrato aquoso de couve fresca, na análise de TEAC e ORAC o extrato aquoso de hortelã fresca. Entre as bebidas, a amostra digerida de BMFH (1) obteve os maiores resultados de Fenóis Totais, DPPH-trolox e TEAC, e na análise de ORAC, pela amostra digerida de BMFH (2). Sugere-se uma atividade citostática muito fraca, sendo que as BMFHs são praticamente inativas para atividade antiproliferativa. Na análise de CAA, o maior resultado foi encontrado na amostra BMFH (2) antes da digestão. Comprovou-se que o processamento, armazenamento e digestão in vitro afetam a composição de flavonoides dos alimentos e os resultados de fenólicos totais e capacidade antioxidante, através da perda ou produção de alguns compostos, além de demonstrar que a eficiência da extração é dependente das condições do processo e da matriz testada / Abstract: Considering the need for consumption of significant amounts of fruits and vegetables to achieve the daily intake of nutrients and bioactive compounds, this study aimed to develop and characterize two lyophilized fruit and vegetables functional beverages (Green Smoothies). Proximate, vitamin and mineral composition, MFVD (1) obtained higher values for most determinations, except for the dietary fiber, sodium, Vitamin B2, Vitamin C and zinc. Both beverages highlighted by the low calorific values and high value of dietary fiber, and because they are sources of vitamin A and manganese and furthermore MFVD (1) to be a source of magnesium. When evaluated in relation to the equivalent servings of fruits and vegetables supplied in recommended daily value, MFVDs showed only minor amounts for the contents of magnesium and vitamins B6 and C, and equal to vitamin B2. Obtained amount equivalent to 3 portions of fruits and vegetables relative to fiber, lipids, manganese, phosphorus and zinc, and 4 servings compared to carbohydrates, calcium, iron, potassium and copper. When compared to similar commercial beverages, the amount of 6 compositions of the two beverages were higher than most commercial beverages analyzed, and lower in 4 content determinations. Between the two formulated drinks, no significant differences were found for pH, ºbrix, glucose and pectin; the titratable acidity %, sucrose, total flavonoids and soluble fiber were higher in MFVD (1); the ratio relation, fructose and insoluble fiber were higher in MFVD (2); for both drinks, the higher concentrations of mono- and disaccharides are given for sucrose, and both fruit- and maltooligosaccharides were identified, the first of which was found in greater quantities in MFVD (1) and the latest in high concentration in the MFVD (2). In the evaluation of color, there were no differences in relation to brightness, but the MFVD (1) showed more conducive to green and yellow tones, caused by the highest concentration of chlorophyll and ?-carotene. Prior to in vitro digestion, both samples showed 6 of 17 flavonoids tested, but differ in the presence other 2 in MFVD (1) and other 3 in MFVD (2). Higher total phenolic results were obtained for fresh kale and lyophilized mint, in the DPPH-trolox test by aqueous extract of fresh kale, in the analysis of TEAC and ORAC by aqueous extract of fresh mint. Between MFVDs, the digested sample of MFVD (1) obtained the highest results of Total Phenols, DPPH-trolox and TEAC, and in ORAC analysis, by the digested sample of MFVD (2). A very weak cytostatic activity is suggested, while the samples of MFVD are practically inactive for antiproliferative activity, and in CAA analysis the best result was found in the sample MFVD (2) before digestion. It was shown that the processing, storage and in vitro digestion affect the composition of flavonoids from food, total phenolic content and antioxidant capacity, through loss or production of some compounds, and demonstrate that the extraction efficiency is dependent on the process conditions and tested array / Doutorado / Ciência de Alimentos / Doutora em Ciência de Alimentos

Orientador: Mary Ann Foglio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-26T10:27:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lloret_FelipeCyrillo_M.pdf: 3758612 bytes, checksum: 7002aac1760fd55833ce91a085d63599 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A Pterodon pubescens Benth, conhecida como sucupira é nativa das regiões que consiste o cerrado brasileiro, nos estados de Minas Gerais, São Paulo, Goiás e Mato Grosso do Sul. Nosso grupo iniciou estudos com a espécie Pterodon pubescens Benth em 1998. Inicialmente foram desenvolvidos estudos relacionado a eficácia dos seus extratos e determinação dos princípios ativos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do calor sobre o processo de formação e degradação dos componentes vouacapanos nos frutos de Pterodon pubescens Benth. e sua influência sobre a atividade antiproliferativa in vitro em células tumorais humanas. Os frutos de P. pubescens foram coletados no município de São Carlos, localizado no estado de São Paulo, e no município de Ponto Chique, localizado no estado de Minas Gerais no período de agosto e setembro de 2012. Mensalmente foram preparados extratos por sistema Soxhlet e maceração dinâmica com as amostras de frutos provenientes dos municípios de São Carlos e de Ponto Chique armazenados em estufa, analisados por cromatografia gasosa capilar acoplada a um detector seletivo de massas e tiveram suas atividades antiproliferativas contra linhagem tumoral humana (PC-3) avaliadas por método de sulforrodamina B. Todos os resultados de teores dos compostos de interesse obtidos por CG-EM foram submetidos a análise de variância de uma única via (ANOVA), considerando-se como nível crítico p? 0,05 para que seja considerados diferença significante entre os grupos estudados, seguidos do Teste de Duncan. Para a análise dos compostos que possuem uma maior influência na atividade antiproliferativa do nos extratos obtidos foi utilizado a Análise de Componentes Principais. Foi possível concluir que há uma possível variação genética das espécies de Pterodon pubescens Benth., e que o calor não influenciou na formação do 6?- hidróxi- 7?- acetoxivouacapano, porém influencia no teor dos outros compostos estudados / Abstract: Pterodon pubescens Benth (Fabeacea) chemical variability was investigated to understand if the secondary metabolites 6?-acetoxi 7?-hydroxy-vouacapan content variability, was produced as an artefact overtime or was characteristic of genotype variability. The oil was extracted both by soxhlet system and at room temperature with stirring. The chemical composition was monitored by gas chromatography-mass spectrometry. The samples were tested in an anticancer assay against prostate (PC-03) human cancer cell line. The response parameter (TGI) was calculated. The chemical variability data was evaluate using the statistical analysis using Principal Component Analysis (PCA) to understand which of the extract's components had a real impact on the in vitro antiproliferative activity. Hierarchical Cluster Analysis (HCA) was performed to visualize the similarities among the extracts components with TGI values. Unscrumbler® v. 9.7 software was employed for analysis. The chemical composition of samples from São Carlos, São Paulo and Ponto Chique, Minais Gerais were monitored monthly during one year for Geranilgeraniol, 6?-acetoxi 7?-hydroxy-vouacapan, 6?- hydroxy-7?-acetoxy-vouacapan-17?-oate methyl ester and 6?-acetoxy-7?-hydroxyvouacapan- 17?-oate methyl ester. In vitro cytotoxicity screening against human prostate cancer cell line displayed higher selectivity and potent anticancer activity with TGI 11.43 mg ml?1 when higher 6?-acetoxi 7?-hydroxy-Vouacapan over total Voaucapan ratio (3.14) was achieved. Nevertheless 6?-acetoxi 7?-hydroxyvouacapan maintained approximately the same content throughout the year among the samples in opposition to overall Voaucapan content. The total Vouacapan total content was directly proportional to Geranygeraniol content decrease content. Samples from São Carlos at time zero had 26% geranylgeraniol content whereas Minas Gerais samples contained the highest content of 1.3%. Throughout the stability test geranylgeraniol concentration decreased with a straight relationship of overall increase of vouacapan content. This study highlights the complexity of factors involved in the production of secondary metabolites in plants. To enable the development of an herbal medicine, one of the greatest challenges is plant input standardization in order to meet efficacy, safety and reproducibility final product's requirements as recommended by Brazilian Sanitary Regulatory Agency (ANVISA). Data presented herein suggest that 6?-acetoxi 7?-hydroxy-vouacapan content variability has a straight relationship with genotype other than produced as artefact overtime / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Plantas da família Euphorbiaceae, são produtoras de um grande e diversificado número de compostos secundários. Os gêneros Croton e Astraea são destaque nessa família, pois, possuem grande importância econômica devido ao seu elevado número de metabólitos secundários. O presente trabalho teve por objetivo ampliar o conhecimento sobre a composição química dos extratos de folhas e caules de seis espécies nativas (gêneros Croton e Astraea) e avaliar as atividades antioxidante e antiproliferativa. Entre os principais compostos encontrados estão α-cubebeno, β-cariofileno, aromadendreno, óxido de cariofileno, espatulenol, β-eudesmol, elixeno e o 8-isoproprenil-1,5-dimetilciclodeca-1,5-dieno e ledol, nos óleos voláteis; e os tilirosídeo, rutina e vitexina em flavonóides. Os extratos das folhas apresentaram maior eficiência antioxidante do que os extratos dos caules. C. triqueter foi a espécie que demonstrou maior atividade antioxidante tanto para os extratos das folhas quanto para os extratos dos caules. Todas as espécies demonstraram potencial biológico antioxidativo, incentivando assim novas pesquisas com essas espécies. Dos extratos analisados, os mais promissores para atividade antiproliferativa são os de C. campestris (folhas) e A. comosa (folhas e caules), pois apresentaram maior potencial antiproliferativo para as linhagens MCF-7 - mama, NCI-H460 - pulmão e K562 - leucemia. Este trabalho ajudou a ampliar o conhecimento químico e das atividades antioxidante e antiproliferativa sobre o gênero Croton e o gênero Astraea, que possuem enorme potencial biológico e mais de mil espécies distribuídas pelo mundo / Plants of the family Euphorbiaceae are producers of a great and varied number of secondary compounds. The genus Croton and Astraea are highlights in this family because they have great economic importance due to their high number of secondary metabolites. This present work aimed to expand the knowledge about the chemical composition of extracts of leaves and barks of six native species (genus Croton and Astraea) and evaluate the antioxidant and antiproliferative activities. Amongst the main compounds that were found are α-cubebene, β-cariophyllene, aromadendrene, cariophyllene oxide, spathulenol, β-eudesmol, ledol, elixene and 8-isoproprenyl-1,5-dimethyl-ciclodeca-1,5-diene, in the volatile oils; and the X,Y and Z in flavonoids. The extracts of the leaves presented more antioxidant efficiency than the extracts of the barks. C. triqueter was the species that demonstrated more antioxidant activity for the extracts of both the leaves and the barks. All the species demonstrated antioxidative biological potential, thereby encouraging new researches with these species. ). From the analyzed extracts, the most promising ones for antiproliferative activity are C. campestris (leaves) and A. comosa (leaves and barks), because they presented the highest antiproliferative potential for the cell lines MCF-7 - mammary, NCI-H460 - lung and K562 - leukemia. This work helped to expand the chemical knowledge and the antioxidant and antiproliferative activities of the genus Croton and the genus Astraea, that have great biological potential and more than one thousand species distributed around the world

Plantas da família Euphorbiaceae, são produtoras de um grande e diversificado número de compostos secundários. Os gêneros Croton e Astraea são destaque nessa família, pois, possuem grande importância econômica devido ao seu elevado número de metabólitos secundários. O presente trabalho teve por objetivo ampliar o conhecimento sobre a composição química dos extratos de folhas e caules de seis espécies nativas (gêneros Croton e Astraea) e avaliar as atividades antioxidante e antiproliferativa. Entre os principais compostos encontrados estão α-cubebeno, β-cariofileno, aromadendreno, óxido de cariofileno, espatulenol, β-eudesmol, elixeno e o 8-isoproprenil-1,5-dimetilciclodeca-1,5-dieno e ledol, nos óleos voláteis; e os tilirosídeo, rutina e vitexina em flavonóides. Os extratos das folhas apresentaram maior eficiência antioxidante do que os extratos dos caules. C. triqueter foi a espécie que demonstrou maior atividade antioxidante tanto para os extratos das folhas quanto para os extratos dos caules. Todas as espécies demonstraram potencial biológico antioxidativo, incentivando assim novas pesquisas com essas espécies. Dos extratos analisados, os mais promissores para atividade antiproliferativa são os de C. campestris (folhas) e A. comosa (folhas e caules), pois apresentaram maior potencial antiproliferativo para as linhagens MCF-7 - mama, NCI-H460 - pulmão e K562 - leucemia. Este trabalho ajudou a ampliar o conhecimento químico e das atividades antioxidante e antiproliferativa sobre o gênero Croton e o gênero Astraea, que possuem enorme potencial biológico e mais de mil espécies distribuídas pelo mundo / Plants of the family Euphorbiaceae are producers of a great and varied number of secondary compounds. The genus Croton and Astraea are highlights in this family because they have great economic importance due to their high number of secondary metabolites. This present work aimed to expand the knowledge about the chemical composition of extracts of leaves and barks of six native species (genus Croton and Astraea) and evaluate the antioxidant and antiproliferative activities. Amongst the main compounds that were found are α-cubebene, β-cariophyllene, aromadendrene, cariophyllene oxide, spathulenol, β-eudesmol, ledol, elixene and 8-isoproprenyl-1,5-dimethyl-ciclodeca-1,5-diene, in the volatile oils; and the X,Y and Z in flavonoids. The extracts of the leaves presented more antioxidant efficiency than the extracts of the barks. C. triqueter was the species that demonstrated more antioxidant activity for the extracts of both the leaves and the barks. All the species demonstrated antioxidative biological potential, thereby encouraging new researches with these species. ). From the analyzed extracts, the most promising ones for antiproliferative activity are C. campestris (leaves) and A. comosa (leaves and barks), because they presented the highest antiproliferative potential for the cell lines MCF-7 - mammary, NCI-H460 - lung and K562 - leukemia. This work helped to expand the chemical knowledge and the antioxidant and antiproliferative activities of the genus Croton and the genus Astraea, that have great biological potential and more than one thousand species distributed around the world

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeandroSC_DISSERT_1-68.pdf: 3005513 bytes, checksum: 4d385177273793fb97add8fa79a198b9 (MD5) Previous issue date: 2012-03-08 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The coast of Rio Grande do Norte has more than 100 species of seaweed, mostly unexplored regarding their pharmacological potential. The sulfated polysaccharides (PS) are by far the more seaweed compounds studied, these present a range of biological properties, such as anticoagulant activity, anti-inflammatory, antitumor and antioxidant properties. In this study, we extract sulfated polysaccharide rich-extracts of eleven algae from the coast of Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; Dictyota mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Gracilaria caudata; Caulerpa cupresoides; Caulerpa prolifera; Caulerpa sertularioides e Codim isthmocladum), and these were evaluated for the potential anticoagulant, antioxidant and antiproliferative. All polysaccharide extracts showed activity for anticoagulant, antioxidant and/or antiproliferative activity, especially D. delicatula and S. filipendula, which showed the most prominent pharmacological potential, thereby being chosen to have their sulfated polysaccharides extracted. By fractionating method were obtained six fractions rich in sulfated polysaccharides to the algae D. delicatula (DD-0,5V, DD-0, 7V, DD-1,0v, DD-1,3v, DD-1,5v and DD-2,0) and five fractions to the alga S. filipendula (SF-0,5V, SF-0,7V, SF-1,0v, SF-1,5v and SF-2,0v). For the anticoagulant assay only the fractions of D. delicatula showed activity, with emphasis on DD-1, 5v that presented the most prominent activity, with APTT ratio similar to clexane? at 0.1 mg/mL. When evaluated the antioxidant potential, all fractions showed potential in all tests (total antioxidant capacity, hydroxyl and superoxide radicals scavenging, ferrous chelation and reducing power), however, the ability to chelate iron ions appears as the main mechanism antioxidant of sulfated polysaccharides from seaweed. In antiproliferative assay, all heterofucanas showed dose-dependent activity for the inhibition of cell proliferation of HeLa, however, with the exception of SF-0,7V, SF- 1,0v and SF-1,5v, all fractions showed antiproliferative activity against MC3T3, a normal cell line. The heterofucana SF-1,5V had its antiproliferative mechanism of action evaluated. This heterofucan induces apoptosis in HeLa cells by a pathway caspase independent, promoting the release of apoptosis Inducing Factor (AIF) in the cytosol, which in turn induces chromatin condensation and DNA fragmentation into 50Kb fragments. These results are significant in that they provide a mechanistic framework for further exploring the use of SF-1.5v as a novel chemotherapeutics against human cervical cancer. / O litoral do Rio Grande do Norte apresenta mais de 100 esp?cies de macroalgas marinhas, a maioria delas ainda n?o explorada quanto ao seu potencial farmacol?gico. Os polissacar?deos sulfatados (PS) s?o de longe os compostos de macroalgas marinhas mais estudados, sendo atribu?da a estes uma gama de propriedades biol?gicas, como: atividade anticoagulante, antiinflamat?ria, antitumoral e antioxidante. Neste trabalho, obteve-se extratos ricos em polissacar?deos de onze algas do litoral do Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; Dictyota mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Gracilaria caudata; Caulerpa cupresoides; Caulerpa prolifera; Caulerpa sertularioides e Codium isthmocladum), e estas foram avaliadas quanto ao seu potencial anticoagulante, antioxidante e antiproliferativo frente ? linhagem celular tumoral HeLa. Todos os extratos polissacar?dicos apresentaram atividades anticoagulante, antioxidante e/ou antiproliferativa, com destaque para os das algas D. delicatula e S. filipendula, que apresentaram os maiores ?ndices de potencial farmacol?gico, sendo, portanto, escolhidas para serem submetidos a passos posteriores de purifica??o de seus polissacar?deos sulfatados. Atrav?s do fracionamento com volumes crescentes de acetona foram obtidas seis fra??es ricas em polissacar?deos sulfatados da alga D. delicatula (DD-0,5v, DD-0,7v, DD-1,0v, DD-1,3v, DD-1,5v e DD-2,0v) e cinco fra??es da alga S. filipendula (SF-0,5v, SF- 0,7v, SF-1,0v, SF-1,5v e SF-2,0v). An?lises f?sico-qu?micas mostraram que estas s?o ricas em heterofucanas sulfatadas. Apenas as fra??es da alga D. delicatula apresentaram atividade anticoagulante, com destaque para DD-1,5v que apresentou a atividade mais proeminente com raz?o de APTT semelhante ? clexane?, f?rmaco anticoagulante comercial. Quando avaliadas com rela??o ao potencial antioxidante todas as fra??es apresentaram atividade em todos os testes realizados (Capacidade antioxidante total, sequestro de radicais super?xido e hidroxila, quela??o f?rrica e atividade redutora), entretanto, a capacidade de quela??o de ?ons ferro aparece como o principal mecanismo antioxidante dos polissacar?deos sulfatados dessas macroalgas marinhas. No ensaio antiproliferativo, todas as heterofucanas apresentaram atividades dose-dependente para a inibi??o da prolifera??o celular de HeLa, entretanto, as fra??es SF-0,7v, SF-1,0v e SF-1,5v apresentaram atividade espec?fica para esta linhagem celular, n?o inibindo a prolifera??o da linhagem celular normal MC3T3, sendo a heterofucana SF-1,5v escolhida para ter seu mecanismo de a??o antiproliferativo determinado. SF-1,5v induz a apoptose em c?lulas HeLa principalmente atrav?s de uma via independente da ativa??o das caspases, promovendo a libera??o do Fator Indutor da Apoptose (AIF) no citosol, que por sua vez induz a condensa??o da cromatina e fragmenta??o do DNA em fragmentos de 50Kb. Este trabalho ? o primeiro relato mostrando uma heterofucana cujo principal mecanismo antiproliferativo ? a libera??o de AIF mitocondrial para o citosol, o que torna SF-1,5v um promissor f?rmaco na terapia antitumoral, possibilitando uma alternativa aos quimioter?picos tradicionais.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:10:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DayaneLG_DISSERT.pdf: 2239805 bytes, checksum: 7c5ca3d63f1b06cc836a0c3ae876316c (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds are organisms known to exhibit a variety of biomolecules with pharmacological properties. The coast of Rio Grande do Norte has over 100 species of seaweeds, most of them not yet explored for their pharmacological potential. Sugars and phenolic compounds are the most studied of these being assigned a range of biological properties, such as anticoagulant , antiinflammatory, antitumor and antioxidant activities. In this work, we obtained methanolic extracts from thirteen seaweeds of the coast of Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; D. mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Acanthophora specifera; Botryocladia occidentalis; Caulerpa cupresoides; C. racemosa; C. prolifera; C. sertularioides e Codium isthmocladum). They were evaluated as anticoagulant and antioxidant drugs, as well as antiproliferative drugs against the tumor cell line HeLa. None of the methanolic extracts showed anticoagulant activity, but when they were evaluated as antioxidant drugs all of extracts showed antioxidant activity in all tests performed (total antioxidant capacity, sequestration of superoxide and hydroxyl radicals, ferric chelation and reductase activity), especially the algae D. mentrualis, D. cilliolata and C. prolifera, who had the greatest potential to donate electrons.In addition, the ability of iron ions chelation appears as the main antioxidant mechanism of the methanolic extracts of these seaweeds mainly for the extract of the C. racemosa seaweed, which reached almost 100% activity. In the MTT assay, all extracts showed inhibitory activity at different levels againts HeLa cells. Moreover, D. cilliolata (MEDC) and D. menstrualis (MEDM) extracts showed specific activity to this cell line, not inhibiting the viability of 3T3 normal cell line, so they were chosen for detailing the antiproliferative mechanism of action. Using flow cytometry, fluorescence microscopy and in vitro assays we demonstrated that MEDC and MEDM induced apoptosis in HeLa cells by activation of caspases 3 and 9 and yet, MEDC induces cell cycle arrest in S phase. Together, these results showed that the methanolic extracts of brown seaweed D. menstrualis and D. cilliolata may contain agents with potential use in combatting cells from human uterine adenocarcinoma. This study also points to the need for more in-depth research on phytochemical and biological context to enable the purification of biologically active products of these extracts / Macroalgas marinhas s?o organismos conhecidos por apresentar uma diversidade de biomol?culas com propriedades farmacol?gicas. O litoral do Rio Grande do Norte apresenta mais de 100 esp?cies de macroalgas marinhas, a maioria delas ainda n?o explorada quanto ao seu potencial farmacol?gico. A??cares e compostos fen?licos s?o os compostos de macroalgas marinhas mais estudados, sendo atribu?da a estes uma gama de propriedades biol?gicas, como: atividade anticoagulante, antiinflamat?ria, antitumoral e antioxidante. Neste trabalho, foram obtidos extratos metan?licos de treze algas do litoral do Rio Grande do Norte (Dictyota cervicornis; Dictiopterys delicatula; Dictyota menstruallis; Dictyota mertensis; Sargassum filipendula; Spatoglossum schr?ederi; Acanthophora specifera;Botryocladia occidentalis;Caulerpa cupresoides; C. racemosa; C. prolifera; C. sertularioides e Codium isthmocladum), e esses foram avaliados quanto ao seu potencial anticoagulante, antioxidante e antiproliferativo. Nenhum dos extratos metan?licos apresentaram atividades anticoagulante, por?m quando avaliados com rela??o ao potencial antioxidante todos os extratos apresentaram atividade em quase todos os testes realizados (capacidade antioxidante total, sequestro de radicais super?xido e hidroxila, quela??o f?rrica e atividade redutora). Os extratos apresentaram resultados mais expressivos no teste de quela??o f?rrica, principalmente para o extrato da alga C. racemosa que chegou a quase 100% de atividade. Destaca-se tamb?m a capacidade de doar el?trons dos extratos, em especial, dasalgas D. mentrualis,D. cilliolata e C. prolifera que apresentaram os maiores potenciais. Nosestudos de citotoxidade, todos os extratos apresentaram atividades em diferentes n?veis frente as c?lulas tumorais HeLa, entretanto, os extratos de D. cilliolata (MEDC) e D. menstrualis (MEDM) apresentaram atividade espec?fica para esta linhagem celular, n?o apresentando citotoxidadepara as c?lulas3T3. Estudos com estes dois extratos utilizando t?cnicas de citometria de fluxo, microscopia de fluoresc?ncia e testes in vitro mostraram que MEDC e MEDM induzem a apoptose em c?lulas HeLa atrav?s da ativa??o das caspases 3 e 9 e ainda, MEDC induz a parada do ciclo celular na fase S. Juntos, esses resultados mostraram que os extratos metan?licos de algas marrom D. mentrualis e D. cilliolata podem conter agentes com potencial utiliza??o no combate de c?lulas de adenocarcinoma uterino humano. O presente estudo tamb?m aponta para a necessidade de investiga??es mais aprofundadas no ?mbito fitoqu?mico e biol?gico para se identificar produtos biologicamente ativos presentes nos extratos

Croton (Euphorbiaceae), é um gênero promissor para pesquisa de compostos bioativos, tanto pela variedade de compostos químicos encontrados, quanto pela diversidade de uso na medicina tradicional/popular. Estudos farmacológicos comprovaram atividades antimicrobianas, antivirais, anti-inflamatórias, antioxidantes e citotóxicas. Neste trabalho, foram obtidos extratos fracionados em Soxhlet (hexano, diclorometano, acetato de etila e metanol) de folhas e caules de C. pallidulus Baill var. pallidulus (Baill.) L.B. Smith & S.F. Smith. Esses extratos foram avaliados quanto às atividades 1) antibacteriana pelo método de microdiluição em caldo, utilizando Staphylococcus aureus - cepas sensível e resistente à vancomicina, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e Salmonella choleraesuis; 2) antioxidante (sequestro do radical livre DPPH); e quanto à toxicidade frente à Artemia salina. A fração mais ativa neste último ensaio foi selecionada para a avaliação da atividade citotóxica utilizando as células de sarcoma uterino humano. Os fenóis totais, e flavonóis e flavonas totais foram quantificados por métodos colorimétricos. O fracionamento dos extratos hexânico e diclorometânico foi feito por cromatografia em coluna de sílica, enquanto o dos extratos de acetato de etila e metanol, em coluna de PVPP. O isolamento das substâncias das frações ativas nos ensaios de atividade antibacteriana (S. aureus - sensível) e de toxicidade frente à A. salina foi realizado por CLAE semipreparativo. O teor de fenóis totais de C. pallidulus var. pallidulus foi de 1,95 g EAG/100g MS e de flavonóis e flavonas totais foi de 0,56 g EQ/100g MS. Todos os extratos apresentaram atividade contra S. aureus (sensível e resistente), com CBM de 2048 mg/L, exceto o extrato metanólico que apresentou atividade apenas contra S. aureus (sensível). Nenhum extrato apresentou atividade contra as demais cepas. As frações FH-5A - hexano (CBM de 256mg/L) e FA-7 - acetato de etila (CBM de 1024mg/L) foram as que apresentaram maior atividade antibacteriana. A fração FH-5A foi separada em coluna de sílica, e suas subfrações apresentaram atividades antibacterianas menores que a fração que lhe deu origem. Das sete substâncias majoritárias isoladas da fração FA-7, nenhuma apresentou atividade antibacteriana. Seis delas são flavonoides: três C-glicosídeos de apigenina, um O-glucosídeo de campferol, um O-galactosídeo de isoramnetina e um O-rutinosídeo de isoraminetina. Apenas o extrato diclorometânico apresentou atividade no ensaio de toxicidade frente à A. salina, com CL50 de 385mg/L. A fração com maior toxicidade foi a FD-4A, com CL50 de 101mg/L. As substâncias mais abundantes nesta fração foram isoladas e identificadas como 8,9-secocauranos, derivados da kongensina F. Quanto a atividade citotóxica, a atividade de FD-4A foi três vezes maior que a atividade do extrato diclorometânico. Os extratos de acetato de etila e de metanol apresentaram os maiores valores de atividade antioxidante: 12,11 e 11,77 gEQ/100g, respectivamente. Verificou-se que os flavonoides foram as substâncias fenólicas que mais influenciaram na atividade antioxidante das frações dos extratos de acetato de etila e de metanol. Com esses resultados verifica-se que C. pallidulus var. pallidulus possui ação antibacteriana, citotóxica e antioxidante, sendo uma potencial fonte para novos fármacos para tratamento de doenças infecciosas e câncer. Conseguiu-se também isolar três 8,9-secocauranos, derivados da kongensina F, que aparentemente não haviam ainda sido descritos / Croton (Euphorbiaceae), is a promising genre for investigation of bioactive compounds, both for the variety of compouds, as for the diversity of use in traditional medicine. Pharmacological studies have demonstrated antimicrobial, antiviral, anti-inflammatory, cytotoxic, and antioxidant activities. In this study, fractionated extracts of leaves and stems of C. pallidulus Baill var. pallidulus (Baill.) L.B. S.F. Smith & Smith were obtained throught Soxhlet (hexane, dichloromethane, ethyl acetate and methanol). The following activities of these extracts were tested: 1) antibacterial activity, through microbroth dilution assay using: Staphylococcus aureus - sensitive and vancomycin-resistant strains, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Salmonella choleraesuis; 2) antioxidant activity (free radical DPPH scavenging) and Artemia salina toxicity evaluation. The most active fraction in the latter test was selected to evaluate the cytotoxic activity using human uterine sarcoma cells. The total phenols, and total flavonols and flavones were quantified by colorimetric methods. The fractionation of hexane and dichloromethane extracts was done through silica column chromatography, while PVPP column was used for the ethyl acetate and methanol extracts. The isolation of the active fractions major compounds in the antibacterial activity (S. aureus - sensitive) and A. saline toxicity assays were performed by semipreparative HPLC. The total phenolic content of C. pallidulus var. pallidulus was 1.95 g GAE/100g DM and total flavonols and flavones was 0.56 g QE/100g MS. All extracts showed activity against S. aureus (sensitive and resistant), with MBC of 2048 mg/L, except for the methanol extract, which showed activity only against S. aureus (sensitive). Extracts showed no activity against the other strains. Fractions FH-5A-hexane (MBC: 256mg/L) and FA-7-ethyl acetate (MBC: 1024mg/L) showed the highest antibacterial activity. The fraction FH-5A was separated on a silica column, and its subfractions showed smaller antibacterial activity than FH-5A. The seven major compounds isolated from the FA-7 fraction, showed no antibacterial activity. Six of them are flavonoids, three apigenin C-glycosides, one kaempferol O-glucoside, one isorhamnetin O-galactoside and one isorhamnetin O-rutinoside. Only the dichloromethane extract showed activity in the A. salina toxicity assay, LC50: 385mg/L. The fraction with the highest toxicity was the FD-4A, LC50: 101mg/L. The most abundant substances in this fraction were isolated and identified as 8,9 - secokauranes derived from kongensin F. As for the cytotoxic activity, the FD-4A activity was three times higher than the dichloromethane extract activity. The extracts of ethyl acetate and methanol showed the highest antioxidant activity: 12.11 and 11.77 gQE/100g, respectively. It was observed that flavonoids were the phenolic substances that most influenced the antioxidant activity of the fractions of the ethyl acetate and methanol extracts. With these results we suggest that C. pallidulus var. pallidulus has antibacterial activity, cytotoxic and antioxidant properties, being a potential source of new drugs for treatment of infectious diseases and cancer. We also isolated three 8,9-secokauranes derived from kongensin F, which apparently had not been described yet