Orientador: Adalberto Farache Filho / Banca: Clarice Queico Fujimura Leite / Banca: João Bosco Faria / Banca: Clóvis Wesley Oliveira de Souza / Banca: Suzana Segura Muñoz / Resumo: O uso da contagem de heterotróficos em placa (CHP) como um parâmetro de qualidade para águas minerais engarrafadas ainda requer atenção e a variação quantitativa das bactérias durante a estocagem dessas águas precisa ser melhor entendida. Além disso, a hipótese da água mineral representar uma fonte de bactérias resistentes a antibióticos, dada a possibilidade de transmissão direta aos humanos, é preocupante. Este trabalho foi dividido em três capítulos; no primeiro capítulo temos uma introdução geral e revisão de literatura e no segundo e terceiro capítulos apresentamos os artigos resultantes das pesquisas realizadas. No segundo capítulo nosso trabalho teve como objetivo detectar variações quantitativas na CHP e na presença de microrganismos indicadores durante o período de validade de águas minerais brasileiras. Nenhuma variação foi detectada na presença de microrganismos indicadores (E. coli, coliformes totais, P. aeruginosa e enterococos), mas variações na CHP foram observadas em algumas marcas, o que sugere que a qualidade dessas águas podem estar sofrendo alterações. Embora nenhum limite seja estabelecido para CHP em água mineral, este estudo se baseou no limite de 500 unidades formadoras de colônias por mL de amostra (UFC/mL) e setenta e duas garrafas (22,22%) apresentaram níveis acima deste limite com valores de até 560.000 UFC/mL. Este estudo mostrou que o controle da CHP (<500 UFC/mL) em embalagem não retornável parece ser adequado para garantir a qualidade da água mineral durante o armazenamento. Os elevados valores de CHP e suas variações detectadas durante o armazenamento parecem justificar a necessidade de uma reavaliação do uso da CHP na gestão da qualidade da água mineral. Além disso, estudos mais detalhados sobre o risco... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of heterotrophic plate count (HPC) as a quality parameter for bottled mineral water still requires attention and the variation of the bacteria during storage of these waters must be better understood. Furthermore the hypothesis that bottled mineral waters may represent a source of antibiotic resistant bacteria, given the possibility of direct transmission of bacteria to humans is worrying. This work was divided into three chapters, the first chapter we have a general introduction and review of literature and the second and third chapters present the articles. In the second chapter of our work aimed to detect quantitative variations in the HPC and in the presence of indicator microorganisms during their shelf life of Brazilian mineral water. No variations were identified in the presence of indicator microorganisms (E. coli, coliformes totais, P. aeruginosa and enterococos), but variations in HPC were observed in some brands, which suggests that changes may be occurring in the water quality during storage. Although no limit is set for HPC in mineral water, this study relies on the limit of 500 colonyBforming units per mL of sample (CFU/mL) and seventyBtwo bottles presented levels above this limit and up to 560,000 CFU/mL. This study showed that the control of HPC (< 500 CFU/mL) for nonBreturnable packaging seems to be adequate to ensure the quality of mineral water during storage. The high values of HPC and the variations detected during storage seem to fully justify the need for a reevaluation of the use of HPC in bottled mineral water quality management. Furthermore, more detailed studies... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

DE LA TESIS:Desde la aparición de las quinolonas, las resistencias bacterianas a las mismas han evolucionado de forma paralela. Conforme han ido apareciendo nuevas moléculas con mayor capacidad bactericida y mejores parámetros farmacodinámicos y farmacocinéticos, también se han ido identificando nuevos y más sofisticados mecanismos de resistencia, que se han ido adaptando a las necesidades de cada momento. Es por ello que se hace necesaria una nueva metodología para el diseño y la síntesis de nuevos agentes antibacterianos con el objetivo de aumentar su potencia antibacteriana y, al mismo tiempo, disminuir la probabilidad de generar a corto plazo nuevos mecanismos de resistencia. Con este fin, es fundamental conocer todos los mecanismos de resistencia y cuál es, en detalle, su mecanismo de acción, para poder diseñar nuevas moléculas capaces de, manteniendo su capacidad bactericida, eludir dichos mecanismos.En esta tesis nos propusimos como objetivos fundamentales, en primer lugar, investigar las bases moleculares de los mecanismos de resistencia a quinolonas en bacterias Gram-negativas. En concreto, en Escherichia coli, Yersinia enterocolitica y Citrobacter freundii. Por otro lado, se llevaron a cabo cálculos de acoplamiento o "docking" mediante la utilización de programas informáticos con el fin de incrementar nuestros conocimientos respecto al modelo de interacción entra ADN-ADN girasa-quinolona, para de esta manera mejorar nuestra comprensión de los mecanismos de resistencia a fluoroquinolonas asociados a las mutaciones más comúnmente encontradas en el gen gyrA. Finalmente, el último de los objetivos que nos propusimos fue el de diseñar, sintetizar y evaluar diferentes derivados de ciprofloxacino y norfloxacino con el fin de encontrar entre ellos alguno que tuviera la capacidad de interaccionar con la enzima ADN girasa, poseyendo ésta uno o dos cambios aminoacídicos en su subunidad A.

El gènere Bifidobacterium adquireix una gran importància com a microorganisme indicador de contaminació fecal. És un dels gèneres predominants en la microbiota intestinal humana i d'alguns animals de sang calenta arribant a unes concentracions entre 109 i 1010 cèl·lules/g de femta. La fisiologia anaeròbia, els requeriments nutricionals complexes i la seva incapacitat de multiplicar-se per sota dels 30ºC, fan que Bifidobacterium no pugi replicar-se a nivell extraentèric.L'objectiu d'aquesta tesi ha estat la optimització de les tècniques presents per a la detecció de Bifidobacterium spp. en mostres d'aigua residual per a la possible utilització de certes espècies d'aquest gènere bacterià com a indicadores de la contaminació fecal i determinar l'origen d'aquesta:1. Avaluar l'enumeració de Bifidobacterium spp. en tres medis selectius diferents, i comparar les diferents poblacions bacterianes de Bifidobacterium analitzades amb altres indicadors microbians en aigües.2. Definir proporcions entre les diferents poblacions d'indicadors i les bifidobactèries que permetin diferenciar l'origen humà o animal de la contaminació fecal en aigües.3. Determinar quines espècies de Bifidobacterium que s'han associat prèviament com exclusives dels humans, es troben només en aigües residuals urbanes. 4. Desenvolupar una tècnica molecular per a la detecció de les espècies de Bifidobacterium associades exclusivament a aigües residuals d'origen humà.5. Analitzar l'ús combinat d'aquest nou mètode molecular amb la proporció de les bifidobactèries fermentadores de sorbitol i de les bifidobactèries totals en el medi selectiu HBSA.6. Desenvolupar una PCR quantitativa en temps real per a la detecció de les espècies B. adolescentis i B. dentium. 7. Comparar les dues tècniques moleculars desenvolupades, PCR múltiple ADO-DEN i PCR quantitativa en temps real en aigües residuals d'origen humà.8. Comparar la persistència de les poblacions indicadores de la contaminació fecal en aigües juntament amb el gènere Bifidobacterium en aigua de riu.Els medis selectius analitzats per a Bifidobacterium, Beerens, HBSA i BFM, van presentar unes enumeracions molt similars en aigües residuals, proporcionant una elevada especificitat per a les bifidobactèries. No obstant, el medi Beerens i HBSA van recuperar un nombre significativament igual i més elevat de bifidobactèries cultivables. La hibridació colonial amb la sonda Bif permet una confirmació pràctica de les enumeracions, donant una correcció de la fracció de creixement no específic que donen el medis utilitzats.La proporció de les colònies de Bifidobacterium fermentadores de sorbitol respecte el nombre de colònies totals crescudes en el medi HBSA és una eina eficaç per a la determinació de l'origen de la contaminació fecal. Les espècies B. adolescentis i B. dentium van presentar una elevada especificitat per a les aigües d'origen humà, tot i que no es pot descartar la presència de B. adolescentis en alguna espècie d'aviram.El desenvolupament de la PCR múltiple ADO-DEN per a les espècies B. adolescentis i B. dentium és una eina molecular complementària per a caracteritzar l'origen de la contaminació fecal en aigües. Presenta un llindar de detecció 103 UCF/100mL.Les PCRs quantitatives específiques desenvolupades permeten la quantificació de les espècies B. adolescentis i B. dentium proposades com a indicadores de la contaminació fecal humana en aigües residuals d'origen humà. Aquesta tècnica presenta un llindar de detecció més alt que la de la PCR múltiple ADO-DEN essent de 104 UCF/100mL. Hi ha una diferencia significativa (P<0,05) en les inactivacions de totes les poblacions bacterianes a l'estiu respecte les inactivacions a l'hivern on són més baixes. El gènere Bifidobacterium és potencialment un bon indicador de l'origen de la contaminació fecal recent en aigües. La seva baixa persistència en l'entorn fa però menys operatiu el seu ús quan la contaminació fecal és remota en el temps. / The genus "Bifidobacterium" is proposed as indicators to identify the source of fecal pollution, since certain "Bifidobacterium" spp. are found only in humans, since it is abundant in the intestinal microbiota of humans and other warm-blooded animals. These organisms could be used to distinguish between human and animal pollution. They are found at a concentration of between 109 and 1010 cells/g in feces. Additionally, their anaerobic physiology, complex nutritional requirements and inability to multiply below 30ºC mean that they are unlikely to reproduce in extraenteric environments.The objective of this thesis has been the optimization of the techniques presents for the detection of "Bifidobacterium" spp. in samples of residual water. The selective media analyzed for "Bifidobacterium", Beerens, HBSA and BFM, they presented some very similar enumerations in residual water, provided a high specificity for the detection of bifidobacteria. Nevertheless, the enumeration of bifidobacteria was evaluated using three selective media. Beerens and HBSA media showed similar recoveries, with no statistically significant difference and BFM showed statistically different recovery for Bifidobacterium than the recovery on Beerens and HBSA media.The confirmation by colony hybridization of colonies of "Bifidobacterium" grown on the selective media revealed that some colonies belong to anaerobic bacterial genera other than bifidobacteria. The HBSA medium allows the calculation of the ratio Y/T that showed to distinguish fecal pollution origin. Values of this ratio higher than 0.20 indicate human origin. Values below 0.20 indicate animal origin. These results support previous studies postulating the use of sorbitol-fermenting bifidobacteria as human fecal indicators in sewageIn this study a multiple PCR for "B. adolescentis" and "B. dentium" species was developed to be used as a complementary molecular tool to characterize the origin of the fecal contamination in water. The threshold of this technique is 103 CFU/100mL. In order to quantify both species a quantitative PCR for "B. adolescentis" and "B. dentium" (proposed as indicators for human fecal contamination in residual water of human origin) was developed. This technique presents a threshold higher than the PCR multiple ADO-DEN being of 104 UCF/100mL. The genus "Bifidobacterium" is potentially a good indicator of the origin of the recent fecal contamination in water. But its low persistence in the environmental waters is a handicap when the fecal pollution is not recent.

Els canvis a l'estructura i composició de les poblacions de coliforms fecals i enterococs al llarg de diferents processos de depuració de les aigües residuals a cinc plantes depuradores d'aigües residuals van ser analitzats amb la finalitat de determinar possibles eliminacions selectives entre soques d'aquests grups de bacteris. En aquest sentit, es van analitzar també les sub-poblacions d'enterococs resistents als antibiòtics vancomicina i eritromicina (VRE y ERE respectivament) com a marcadors per a valorar la seva persistència en els diferents processos de depuració. La elecció d'aquestes sub-poblacions com a marcadors va ser degut al seu interès clínic. Es va analitzar l'impacte de les aigües tractades en una de les cinc depuradores en les poblacions de coliforms fecals i enterococs del riu receptor. També es van comparar l'estructura i la composició de les poblacions d'aquests indicadors bacterians entre les aigües residuals i els fangs d'una altra del les 5 depuradores estudiades. Finalment es va comparar la diversitat i l'estructura poblacional dels entrerococs (inclosos VRE i ERE) a les aigües residuals de depuradores, de diversos hospitals i de les aigües de recepció de les emissions de les aigües tractades, entre zones geogràfiques situades en diferents països (Espanya, Suècia i Regne Unit). La diversitat i la similitud poblacional de coliforms fecals i enterococs es van estudiar mitjançant fenotipat bioquímic d'un nombre significatiu de soques i el seu posterior anàlisi estadístic mitjançant estudis de correlació i agrupació. Totes les mostres van presentar alts índex de diversitat per a totes les poblacions bacterianes estudiades. L'estructura i la composició d'aquestes poblacions va resultar molt semblant independentment del seu origen, sistema de tractament o tipus de mostra, tal i com demostraren els elevats índex de similitud poblacional obtinguts al comparar les diferents mostres. Tant els enterococs resistents a la vancomicina com els resistents a l'eritromicina es van trobar també en tots els tipus de mostra, quan es compararen les mostres d'aigües analitzades entre els diferents països. No es va observar una eliminació selectiva de clons poblacionals a les aigües residuals en cap de les plantes de tractament estudiades. Les poblacions de VRE i ERE persisteixen després dels tractaments de depuració de les aigües, així com també en els dos tipus de fangs analitzats. Aquestes poblacions es van detectar tant abans com després de l'emissari de la depuradora en els punts de riu estudiats. La persistència d'aquestes poblacions s'hauria de considerar en els programes de regeneració d'aigües residuals i l'aplicació dels fangs. / The changes in structure and composition of the bacterial faecal coliforms and enterococcal populations from different treatment plants, and the elimination of vancomycin- and erythromycin-resistant enterococci (VRE and ERE, respectively) in these treatment plants was analyzed to determine any selective reduction. Moreover, a rural sewage treatment plant and the effect of its effluent on the enterococci and faecal coliforms populations in the receiving river waters were evaluated. In the same way, the composition and structure of these two bacterial indicators were compared between municipal sewage (raw and treated) and sludge (in two stadiums of sewage treatment process) in a biological sewage treatment plant. Finally, enterococcal populations, including VRE and ERE, from hospital sewage, urban sewage, and river water, were analyzed and compared between Spain, Sweden and U.K. The diversity and similarity of faecal coliforms and enterococci populations were evaluated by biochemical fingerprinting and clustering analysis. All samples showed high values for diversity indexes, and high populations similarity were found for faecal coliforms and enterococci populations, independently of the origin, treatment process, or the kind of sample. VRE and ERE were found in all kind of samples and in the case of Spain, in the same proportion respect total enterococci (10% for ERE and between 0,1 - 0,01% for VRE). The enterococcal populations showed also high similarity between samples analyzed in Spain, Sweden and U.K.There is no changes on the structure and composition of the studied bacterial populations in sewages, receiving waters and sludges. It was observed the persistence of VRE and ERE populations in any kind of analysed sample. This should be considered in water reuse programmes and in the disposal of sludges. / RESUMEN:Los cambios en la estructura y composición de las poblaciones de coliformes fecales y enterococos a lo largo de los distintos procesos de depuración de las aguas residuales en cinco plantas depuradoras de aguas residuales fueron analizados con el fin de determinar posibles eliminaciones selectivas entre las cepas de estos grupos de bacterias. En este sentido, se analizaron también las sub-poblaciones de enterococos resistentes a los antibióticos vancomicina y eritromicina (VRE y ERE respectivamente) como marcadores para valorar su persistencia en los diferentes procesos de depuración. La elección de estas dos sub-poblaciones como marcadores fue debido a su interés clínico. También se analizó el impacto de las aguas tratadas de una de las cinco depuradoras sobre las poblaciones de coliformes fecales y enterococos del río receptor. Así también se compararon la estructura y la composición de las poblaciones de estos indicadores bacterianos entre las aguas residuales y los fangos de otra de las 5 estaciones estudiadas. Finalmente se comparó la diversidad y la estructura poblacional de los enterococos (incluidos VRE y ERE) en las aguas residuales de depuradoras, de diversos hospitales y de las aguas de recepción de los vertidos de aguas residuales tratadas, entre tres zonas geográficas situadas en distintos países (España, Suecia y Reino Unido). La diversidad y la similitud poblacional de coliformes fecales y enterococos fueron evaluadas mediante un fenotipado bioquímico de un número significativo de cepas, y su posterior análisis estadístico mediante estudios de correlación y agrupación. Todas las muestras presentaron altos índices de diversidad para las poblaciones bacterianas estudiadas. estructura y la composición de dichas poblaciones resultó muy parecida independientemente de su origen, sistema de tratamiento o el tipo de muestra, tal y como lo demostraron los elevados índices de similitud poblacional obtenidos al comparar las distintas muestras. Tanto los enterococos resistentes a la vancomicina como los resistentes a la eritromicina se encontraron también en todos los tipos de muestra, siendo mayor la proporción de las poblaciones de ERE. También se detectaron índices de similitud poblacional elevados para las poblaciones de enterococos estudiados y la presencia de VRE y ERE en todos los tipos de muestra, cuando se compararon las muestras de aguas analizadas de los distintos países.No se observó una eliminación selectiva de clones poblacionales en las aguas residuales para ninguna de las plantas de tratamiento estudiadas. Las poblaciones de VRE y ERE persisten después de los tratamientos de depuración de aguas, así como también en los dos tipos de lodos analizados. Dichas poblaciones se detectaron tanto antes como después del vertido de las aguas depuradas en todos los puntos muestreados del río. La persistencia de estas poblaciones de enterococos resistentes a antibióticos debe considerarse en los programas de regeneración de aguas residuales y en el vertido o aplicación de lodos.

O presente estudo teve por objetivo acompanhar um lote de suínos durante todas as fases zootécnicas de produção, de forma a demonstrar em que momento os animais eram expostos à contaminação por Salmonella sp. e quando observava-se a soroconversão nos mesmos. A unidade produtora de leitões foi escolhida por ter apresentado uma alta prevalência de leitoas de reposição positivas (32%), em avaliação bacteriológica prévia. As matrizes incluídas no estudo (n=19) foram selecionadas de acordo com a idade gestacional (100 dias), identificadas e amostradas para teste bacteriológico e sorológico. Aos 15 dias de lactação, 15 fêmeas deste grupo foram novamente amostradas, sendo 99 leitões, pertencentes às suas leitegadas, igualmente identificados e incluídos no estudo. Subseqüentemente, todos os leitões foram amostrados aos 38 dias e um subgrupo destes (n=56), aos 59 e 80 dias. Em todas as visitas foram coletados sangue e fezes dos animais, amostras de ração e suabe de arrasto das instalações. Ao abate, de 26 animais do grupo acompanhado no estudo foram coletados sangue, conteúdo intestinal e linfonodos mesentéricos. As baias de espera do frigorífico e o caminhão que transportou o lote de animais para o abate foram amostrados por suabes de arrasto. O isolamento de Salmonella sp. foi confirmado por caracterização bioquímica e sorotipificação. No teste de ELISA foi utilizado antígeno LPS de Salmonella Typhimurium e o ponto de corte foi definido por média de densidade ótica de uma população negativa somado a quatro desvios padrões. Entre as fêmeas da gestação, 94,7% (18/19) foram soropositivas, mas nenhuma apresentou isolamento de Salmonella. Por outro lado, aos 15 dias de lactação, a soroprevalência do grupo reduziu para 66,7% (10/15), mas duas fêmeas estavam excretando Salmonella nas fezes. Os leitões foram negativos no isolamento e na sorologia durante todo período de maternidade e creche. Entretanto, já na primeira coleta realizada na terminação (80 dias de idade), 28,6% (16/56) foram soropositivos e 75% (42/56) estavam excretando Salmonella. Ao abate, houve um aumento na soroprevalência 20/26 (76,9%), e 5/26 (19,2%) animais tiveram isolamento de Salmonella no conteúdo intestinal e/ou linfonodos mesentéricos. A avaliação da contaminação ambiental realizado na granja demonstrou que, apenas após o aparecimento de animais excretores no lote, foram encontrados suabes de arrasto positivos nas instalações. Ao lado disto, foi possível isolar Salmonella de 2/26 amostras de ração, sendo todas as amostras positivas provenientes do período final da terminação. As baias de espera do frigorífico apresentaram 25% dos suabes de arrasto positivos antes da entrada do lote. Em todos os animais positivos durante a terminação foi encontrado o sorovar Typhimurium; dois animais tiveram isolamento concomitante do sorovar Senftenberg. Ao abate, os sorovares Typhimurium e Senftenberg foram encontrados em três e dois animais, respectivamente. Todas as amostras de Salmonella isoladas de ração pertenciam ao sorovar Senftenberg, enquanto que as amostras de baias de espera eram S. Panama. A presença do sorovar Senftenberg em animais durante a terminação e ao abate demonstra a possível relação com a contaminação encontrada nas amostras de ração.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Agrarias / Made available in DSpace on 2012-10-17T01:30:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Em filés de peixe naturalmente contaminados, foi observada a sobrevivência e recuperação de Listeria spp durante armazenamento das amostras em temperatura de refrigeração (3°C) e congelamento (-18°C). A investigação da recuperação de Listeria foi realizada usando-se diferentes metodologias, baseadas nas etapas de enriquecimento e nos meios de cultura para o isolamento do microrganismo. Os procedimentos de enriquecimento foram realizados utilizando-se um e dois estágios de enriquecimento: 1- Caldo LEB (Listeria enrichment broth); 2- Caldo LEB, transferido após 24h de incubação para o caldo FRASER; 3- Caldo UVM I (University of Vermonth broth) e 4- Caldo UVM I seguido do caldo FRASER. O isolamento e contagem foram feitos nos meios sólidos PALCAM e LSA (Listeria selective agar). Estes procedimentos foram comparados quanto a eficiência na recuperação de Listeria spp em amostras armazenadas durante 10 dias a 3°C e durante 20 dias a -18°C. O intervalo entre as análises foi de 2 dias, para as amostras sob refrigeração, e de 5 dias para as amostras sob congelamento, considerando-se a primeira análise como dia 0. De acordo com a Análise de Variância Multivariada, o emprego de dois estágios de enriquecimento aumentou significativamente a recuperação de Listeria spp. Não houve diferença estatística entre os caldos de enriquecimento LEB e UVM I na recuperação de Listeria spp das amostras mantidas em refrigeração; porém, o caldo LEB foi superior ao caldo UVM I na recuperação de Listeria injuriada pelo congelamento. Os meios sólidos LSA e PALCAM foram equivalentes quanto ao número de colônias isoladas. A metodologia que utilizou o caldo de enriquecimento LEB e FRASER, seguido de plaqueamento no ágar LSA e PALCAM, apresentou maior homogeneidade dos resultados. Foi observado o aumento da população de Listeria spp, em aproximadamente 1 log, durante o armazenamento a 3°C e a sobrevivência do microrganismo após 20 dias de armazenamento a -1 8°C.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Agrarias / Made available in DSpace on 2012-10-17T09:56:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Agrarias / Made available in DSpace on 2012-10-17T10:00:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0

A segurança dos alimentos é uma preocupação mundial e um fator importante na comercialização de produtos de origem animal. A presença de Salmonella sp. em suínos ao abate e em produtos do tipo frescal podem representar um risco para a saúde do consumidor. A análise de risco prevê a avaliação de diferentes fatores, entre eles a quantificação do microrganismo presente no alimento. A partir disso, a contribuição do presente estudo foi buscar estabelecer um método confiável de quantificação de Salmonella sp. em produtos suínos, uma vez que uma das etapas da análise de risco prevê a quantificação do perigo. No caso de Salmonella sp., a técnica da estimativa do Número Mais Provável (NMP) tem sido adotada. Em uma primeira fase desse trabalho, amostras foram quantificadas, individualmente, com três amostras de Salmonella Typhimurium (ATTCC15290 e 2 amostras de suínos) em três diferentes contagens, 101, 102 e 103 UFC. Para o método A, as amostras quantificadas foram adicionadas a 225 mL de água peptonada tamponada, sendo, posteriormente, fracionadas em 3 alíquotas de 50mL, 5mL e 0,5mL. Para o método B, a amostra fortificada foi diluída em água peptonada tamponada até 10-3, sempre em triplicata. Na segunda fase, foram testadas amostras naturalmente contaminadas, utilizando as mesmas metodologias usadas na primeira fase. Todas as alíquotas de ambos métodos foram incubadas a 370C por 18 horas. Após, cada alíquota foi semeada em caldo Rappaport-Vassiliadis (RV) e incubadas à 420C por 24 h e após, em àgar Xylose-Lysine-Tergitol 4 (XLT4) à 370C por 48 h. Colônias suspeitas foram confirmadas por testes bioquímicos. O número de placas positivas para Salmonella sp. foi utilizado para o cálculo do Número Mais Provável, utilizando tabela apropriada. Na segunda fase, os dois métodos foram avaliados em 20 amostras naturalmente contaminadas, mantidas congeladas por até 115 dias. Em 45 ensaios conduzidos, para cada método, em amostras de lingüiça de carne suína contaminadas artificialmente, 38 do método A e 41 do método B resultaram em NMP (95% de intervalo de confiança) concordante com número de UFC de Salmonella inoculado. A maioria das amostras naturalmente contaminada de massa de embutido apresentaram contagens <10NMP/g. A variabilidade encontrada entre os valores de NMP médio foi bastante elevada, tanto entre os métodos como entre repetições de um mesmo método. Isto reflete uma das limitações do método de NMP para estimar a contagem de microrganismos e deverá ser considerada quando o método for aplicado em alimentos naturalmente contaminados e quando aplicado em um estudo de análise de risco. Uma vez que o método B foi o que demonstrou valores médios de NMP mais próximos das quantidades inoculadas, sugere-se que este seja adotado em estudos futuros de quantificação de Salmonella sp. em produtos de origem suína.

A presença de Salmonella sp. em suínos ao abate evidencia a necessidade da implantação de programas de controle nas granjas produtoras, tanto pela correção de fatores de risco como pela adoção de medidas auxiliares que contribuam para diminuir o número de animais portadores e excretores da bactéria. O objetivo desse estudo foi testar o efeito da adição de ácidos orgânicos e prebiótico à dieta de suínos infectados experimentalmente por Salmonella Typhimurium. Foram utilizados 46 leitões com 43 dias de idade, distribuídos em blocos casualizados e em quatro tratamentos: T1 – Dieta Basal; T2 - Dieta Basal + Ácido Orgânico Encapsulado; T3 - Dieta Basal + Ácido Orgânico não Encapsulado; T4 - Dieta Basal + Prebiótico (mananoligossacarídeo). As dietas foram administradas aos animais por oito semanas, sendo que após duas semanas todos os animais foram inoculados pela via oral com Salmonella Typhimurium (dia 0PI). Foram realizadas colheitas de sangue (-14, 0, 7, 14, 21, 28 e 35 PI) para pesquisa de IgG anti-Salmonella, e de fezes (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21 e 28) para pesquisa e quantificação de Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus e coliformes totais. No dia 35PI os animais foram eutanaziados e fragmentos de órgãos foram submetidos à pesquisa de Salmonella. Foram coletados segmentos do intestino delgado, de cada animal, para análise de morfometria e pesquisa de IgA de mucosa. Os resultados indicam que a adição de ácidos orgânicos e mananoligossacarídeo na dieta de suínos na fase de crescimento não foi capaz de impedir a infecção dos animais, e a soroconversão foi observada a partir do dia 7PI. Observou-se menor excreção de Salmonella no grupo tratado com mananoligossacarídeo, com diferença estatística no dia 28PI. No dia 35PI, os grupos tratados com ácidos orgânicos e com prebiótico apresentaram menor contagem de Salmonella no conteúdo cecal em um dos blocos do experimento. Apenas na população de Lactobacillus observou-se, em um dos blocos do experimento, aumento significativo nos grupos tratados (T2, T3 e T4) em relação ao grupo controle. Diferenças de morfometria de vilosidades e concentração de IgA na mucosa intestinal não foram observadas entre os grupos. A partir disso, conclui-se que a adição de mananoligossacarídeo na dieta pode contribuir para a menor excreção de Salmonella Typhimurium em suínos. / The presence of Salmonella sp. in pigs at slaughter highlights the need to implement control programs in producing farms, both for the correction of risk factors,and to adoptio measures, which are effective for reducing the number of carrier animals and excretion of the bacteria. The aim of this study was to assess the effect of the addition of organic acids and prebiotic to the diet of pigs experimentally infected with Salmonella Typhimurium. We used 46 piglets, with 43 days old, distributed in a randomized block design with four treatments: T1 - Basal Diet, T2 - BD + Encapsulated Organic Acid, T3 - BD + not Encapsulated Organic acid, T4 - BD + prebiotic (mannanoligosaccharide). The diets were fed to animals for eight weeks, and after two weeks all animals were inoculated orally with Salmonella Typhimurium (day 0 PI). Blood was collected (-14, 0, 7, 14, 21, 28 and 35 PI) for the detection of IgG anti-Salmonella, and feces (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21, 28) for detection and quantification of Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus and Coliforms. On 35PI, the animals were euthanized and organs samples were collected for Salmonella. Segments of the small intestine of each animal for morphometric analysis and mucosal IgA detection. The results indicate that the addition of mannanoligosaccharide and organic acids in the diet of pigs in the growing phase was not able to prevent infection of animals, and seroconversion occurred on the day 7PI. There was a lower excretion of Salmonella in the group treated with mannanoligosaccharides, with no statistical difference in the day 28PI. On day 35PI, the groups treated with both organic acids and prebiotics showed lower counts of Salmonella in cecal contents. A significant increase on the Lactobacillus population was observed in the treated groups (T2, T3 and T4), in are experimental block. No differences in morphology of villi and concentration of IgA in the intestinal mucosa were observed between the groups. We conclude that the addition of mannanoligosaccharides in the diet can contribute to decrease excretion of Salmonella Typhimurium in pigs.