Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-23Bitstream added on 2014-06-13T19:03:05Z : No. of bitstreams: 1 facanali_r_dr_botfca.pdf: 1292070 bytes, checksum: fc222ca05687506f190346fc26dc872d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho teve por objetivo geral o estudo de populações de Ocimum selloi Benth. sob o ponto de vista da biologia reprodutiva, da variabilidade genética e química dos óleos essenciais, visando fornecer informações para seu uso inequívoco como planta medicinal e aromática em estudos futuros de melhoramento genético vegetal, cultivo e preservação da espécie. O material vegetal utilizado foi coletado na região de Piquete e Apiaí, estado de São Paulo, em Colombo, estado do Paraná e em Camanducaia, estado de Minas Gerais. O estudo da variabilidade populacional foi realizado pela análise de polimorfismo do DNA do tipo RAPD e a química por meio da análise da composição química dos óleos essenciais das folhas das populações naturais e cultivadas por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas. Os resultados revelaram uma forte estrutura genética entre as populações avaliadas, que também pôde ser verificada pelas diferenças observadas nos perfis químicos das plantas. O estudo da biologia reprodutiva revelou a existência predominante de autopolinização explicando o fato das análises da variabilidade genética das quatro populações (Apiaí/SP; Piquete/SP; Colombo/SP e Camanducaia/MG), demonstrarem que a diversidade está localizada entre as populações (variabilidade interpopulacional). A composição química dos óleos essenciais revelou divergências na proporção relativa das substâncias mais abundantes, onde para a população nativa de Piquete/SP, a substância mais abundante foi o germacreno D (26,22%), enquanto que plantas da mesma região cultivadas em Campinas/SP apresentaram elemicina (38,70%, 35,46% e 26,22%) na 1ª, 3ª e 4ª colheita, respectivamente, e transbergamoteno (21,13%) na 2ª colheita como principal composto. Para a população nativa de Apiaí/SP e para as plantas cultivadas em Campinas/SP... / The general goal of the present study was to investigate Ocimum selloi Benth. populations from the standpoints of reproductive biology, genetic and essential oil chemical variability; in order to provide information for its safe use as medicinal and aromatic plant, for future breeding studies, the species cultivation and its preservation. Plant material was collected from the regions of Piquete and Apiaí, in the state of São Paulo; Colombo, state of Paraná and Camanducaia, state of Minas Gerais. The population variabiliy was studied by DNA polymorphism analysis using RAPD markers and the chemical diversity was investigated through composition analyses of the essential oils from leaves of natural and theis corresponding cultivated populations, using gas chromatography-mass spectrometry. The results revealed a strong genetic structure among the populations, so that it agrees with the differences in the chemical profile of the plants. Reproductive biology studies revealed the predominance of self-pollination, in accordance to the genetic variation data from the four populations (Apiaí/SP; Piquete/SP; Colombo/SP e Camanducaia/MG); therefore demonstrating that the diversity is among the populations (interpopulation variability). The chemical composition of the essential oils was divergent in the relative proportion of the major compounds; the native population in Piquete/SP exhibited germacrene D (26.22%) as the most abundant component, whereas its corresponding individuals grown in Campinas/SP presented elemicine (38.70%, 35.46% and 26.22%) at the 1st, 3rd and 4th harvesting season and trans- - bergamotene (21.13%) at the 2nd harvesting season as main compounds. The native population from Apiaí/SP and its corresponding cultivated plants in Campinas/SP presented elemicine (22.68%, 28.70% and 32.90%, respectively) as the ...(Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-17T19:43:31Z No. of bitstreams: 1 LucianaMariaAraujoRabelo_TESE.pdf: 3802625 bytes, checksum: 997bf48b7638b7c1490b5a664ca3194e (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-02-20T18:59:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 LucianaMariaAraujoRabelo_TESE.pdf: 3802625 bytes, checksum: 997bf48b7638b7c1490b5a664ca3194e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T18:59:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LucianaMariaAraujoRabelo_TESE.pdf: 3802625 bytes, checksum: 997bf48b7638b7c1490b5a664ca3194e (MD5) Previous issue date: 2016-10-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O c?ncer ? um termo utilizado para representar um conjunto de mais de 200 patologias, incluindo tumores malignos de diferentes localiza??es. V?rios s?o os mecanismos que contribuem para a carcinog?nese: sinal proliferativo sustentado, desregula??o da energia celular, evas?o a apoptose, indu??o a angiog?nese, replica??o ilimitada, entre outros. Dentre os principais tipos de c?ncer existentes, o c?ncer de pele se destaca: surge nos melan?citos e ? o mais frequente no Brasil, correspondendo a 30% de todos os tumores malignos registrados no Pa?s. Melanomas em est?gio inicial podem, na maioria das vezes, ser tratados apenas com cirurgia, por?m os c?nceres mais avan?ados requerem outros tratamentos. Neste trabalho, um inibidor de tripsina do tipo Kunitz foi purificado de sementes da leguminosa Mimosa regnellii Benth (ITJ), parcialmente caracterizado e avaliado quanto sua toxicidade frente a linhagens de c?lulas tumorais, atuando especificamente com um IC50 de 0,65 ?M em linhagem celular B16-F10, n?o apresentando toxicidade frente a linhagens de c?lulas n?o transformadas. Sua capacidade de induzir morte celular pela via de apoptose em c?lulas de melanoma de camundongo B16-F10 tamb?m foi avaliada, atrav?s de citometria de fluxo com os marcadores Anexina V-FITC/PI, induzindo cerca de 45% das c?lulas a apoptose. Al?m disso, o inibidor tamb?m foi avaliado quanto a sua capacidade de: alterar o potencial de membrana mitocondrial, visualizado por experimentos em citometria de fluxo utilizando a sonda Rodamina123 e microscopia confocal com o marcador Mitotracker Red, onde foi capaz de alterar de forma significativa o ??m; Liberar esp?cies reativas de oxig?nio e nitrog?nio, atrav?s de sondas espec?ficas visualizadas por t?cnicas de microscopia, causando libera??o de ROS na concentra??o de IC50, por?m n?o influenciando libera??o de ERNs; Liberar c?lcio citos?lico, evento que influencia na ativa??o de apoptose, com efeito significativo em c?lulas B16-f10; Inibir atividade angiog?nica de c?lulas endoteliais de coelho, atrav?s de experimentos de inibi??o de forma??o de novos vasos em matrigel, an?lise da express?o de VEGF por t?cnicas de western Blotting e redu??o da express?o de IL-6 analisado por microscopia confocal; Inibir o processo de migra??o celular em ensaio de indu??o de ferimento e an?lise em microscopia e, por fim, a alterar a morfologia celular de B16-F10, analisada por incuba??o com anticorpos espec?ficos para componentes da matriz extracelular e filamentos intermedi?rios das c?lulas de melanoma, realizados em microscopia de fluoresc?ncia. Todos esses resultados reunidos favorecem a proposi??o de um poss?vel mecanismo de a??o de ITJ na indu??o de morte celular por apoptose em c?lulas B16-F10, onde o inibidor atuaria inicialmente aumentando os n?veis de c?lcio citos?lico e ROS, alterando posteriormente a express?o de p53 em 36h de incuba??o, que agiriam alterando o metabolismo mitocondrial, ativando vias de apoptose dependentes da participa??o de caspases; ITJ tamb?m atuaria inibindo processos migrat?rios at? 18 horas de exposi??o, al?m de influenciar de forma tardia na inibi??o do processo angiog?nico in vitro. Estes resultados sugerem que ITJ apresenta potencial para ser utilizado como f?rmaco em tratamento adjuvante contra melanomas, devido a sua especificidade e baixa dosagem quando comparado a outras mol?culas bioativas. / Cancer is a term used to represent a set of more than 200 diseases, including malignant tumors of different localizations. There are several mechanisms that contribute to carcinogenesis: sustained proliferative signals, deregulation of cellular energy, evasion of apoptosis, angiogenesis induction and unlimited replication, among others. Among the main types of cancer, skin cancer stands out: arises in melanocytes and is the most common in Brazil, accounting for 30% of all malignant tumors registered in the country melanomas at an early stage can, in most cases,. It is treated with surgery, but the most advanced cancers require other treatments. In this work a Kunitz-type trypsin inhibitor was purified from Mimosa regnellii Benth (ITJ) legume seeds, partially characterized and evaluated for their toxicity front tumor cell lines, specifically acting with an IC50 of 0.65 ?M in B16-F10 cell line, showing no toxicity compared to non-transformed cell lines. Its ability to induce cell death by apoptosis pathway in mouse B16-F10 melanoma cells was evaluated by flow cytometry with Annexin V-FITC / PI markers, inducing about 45% apoptosis of cells. In addition, the inhibitor was also evaluated for their ability to: change the mitochondrial membrane potential, visualized by flow cytometry experiments using Rhodamine123 probe and confocal microscopy with Mitotracker Red marker, which was able to significantly change the ??m; Release of ROS and RNs through specific probes visualized by microscopy techniques, causing release of ROS in the concentration of IC50, but not influencing release RNS; Liberation of cytosolic calcium, an event that influences the apoptosis activation, with significant effect on B16-F10 cells; Inhibition of angiogenic activity on rabbit endothelial cells through experiments of inhibition of new vessel formation in Matrigel, analysis of VEGF expression by western blotting techniques and reduction of IL-6 expression analyzed by confocal microscopy; Inhibition of cell migration process in wound induction assay and microscopy analysis and, finally, to alter the cellular morphology of B16-F10 analyzed by incubation with specific antibodies to extracellular matrix components and intermediate filaments of melanoma cells, conducted in fluorescence microscopy. All these combined results favor the proposal of a possible ITJ action mechanism in the induction of cell death by apoptosis in B16-F10 cells, where the inhibitor initially act by altering the p53 expression in 36h of incubation, increasing calcium cytosolic levels and ROS, which would act changing the mitochondrial metabolism, activating dependent apoptosis pathways of caspase participation; ITJ also act by inhibiting migration processes up to 18 hours of exposure, as well as influence belatedly in inhibiting the angiogenic process in vitro. These results suggest that ITJ has the potential to be used as a drug adjuvant treatment for melanomas, due to their specificity and low-dose when compared to other bioactive molecules.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-04-24T14:27:02Z No. of bitstreams: 1 Joelma de Lira Freire.pdf: 571347 bytes, checksum: d2c37ede4ff6420a7cab27e56ccc9240 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-24T14:27:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Joelma de Lira Freire.pdf: 571347 bytes, checksum: d2c37ede4ff6420a7cab27e56ccc9240 (MD5) Previous issue date: 2008-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this experiment was to evaluate the deposition, chemical composition, and decomposition of litter in a sabiá (Mimosa caesalpiniifolia Benth) canopy. The experiment was carried out at the Experimental Station of Itambé-IPA. The evaluation of existing and deposited litter was carried through the period of August of 2006 until July of 2007, every 28 days. Twenty squares with 1m² were used, in random points to each evaluation. The nylon bag technique was used for litter decomposition evaluation, incubating the following litter fractions: just-fallen leaves, “aging” leaves already deposited and in the beginning of the mineralization, and branches. The incubation periods were 0, 4, 8, 16, 32, 64, 100, and 256 days, being the same procedure carried through in 2006 and 2007. Treatments were distributed in randomized block design with five replications. Leaf deposition reached the value of 15,167 kg OM/ha, presenting greater deposition in the rainy period. Leaves represented the greater proportion of litter deposited, with average ratio of 87% of predominance in the majority of the evaluations. Branches and leaves presented average nitrogen concentration of 1.4% and 2. 7%, respectively, demonstrating that leaves were the maincontributors of nutrients via litter. The C/N ratio of leaves was below 30, branches presented C/N ratio between 30 and 40, likely favoring the nitrogen immobilization by ground microorganisms. The relationship between litter deposition and litter accumulation in the last month of evaluation was 0.30 indicating that it presented greater accumulation than deposition. In the decomposition assay, branches presented lesser mineralization than leaves both for total biomass and nitrogen, with leaf and branch decomposition varying with the incubation periods. The decomposition of substrata was influenced by the rainfall amount occurred in the evaluation period. In a general way, it was concluded that the litter component is essential in the process of nutrient recycling in a sabiá canopy, however, the mineralization occurs in relatively slow taxes, being this fact relevant in the reduction of nutrient losses by leaching, contributing for the maintenance of this ecosystem. / O objetivo deste trabalho foi avaliar a deposição, composição química e decomposição de liteira em um bosque de sabiá (Mimosa caesalpiniifolia Benth). O experimento foi realizado na Estação Experimental de Itambé-IPA. A avaliação de liteira existente e depositada foi realizada no período de agosto de 2006 a julho de 2007 a cada 28 dias. Foram utilizados 20 quadrados com 1m2, em pontos aleatórios a cada avaliação. Para avaliação da decomposição de liteira, foram utilizadas bolsas de “nylon”, sendo incubadas as seguintes frações: folhas recém-caídas, folhas senescentes já depositadas e no início da mineralização e ramos. Os tempos de incubação foram 0, 4, 8, 16, 32, 64, 100 e 256 dias, sendo o mesmo procedimento realizado em 2006 e 2007. Os tratamentos foram distribuídos em delineamento de blocos ao acaso com 5 repetições. A deposição de folhas atingiu valor de 15.167 kg MO/ha, tendo maior deposição no período chuvoso. As folhas representaram a maior contribuição na deposição de liteira, com proporção média de 87% predominando na maioria das avaliações. Os ramos e folhas apresentaram teores médios de nitrogênio de 1,4% e 2,7% respectivamente, demonstrando assim que as folhas foram os principais contribuintes de nutrientes da liteira. A relação C/N de folhas ficou abaixo de 30; os ramos apresentaramrelação mais elevada entre 30 e 40, favorecendo assim a imobilização de nitrogênio pelos microorganismos do solo. A relação entre a deposição e o acúmulo de liteira no último mês de avaliação foi de 0,30 indicando assim que houve maior acúmulo do que deposição. No ensaio de decomposição, os ramos apresentaram taxa de mineralização menor que as folhas tanto para biomassa total como para nitrogênio, tendo as decomposições de folhas e ramos variando de acordo com os períodos de incubação. A decomposição dos substratos foi influenciada pela quantidade de chuvas ocorridas ao longo do período de avaliação. De maneira geral, conclui-se que o componente liteira é essencial no processo de reciclagem de nutrientes em um bosque de sabiá, todavia a mineralização ocorre a taxas relativamente lentas, sendo esse fato relevante na redução de perdas de nutrientes por lixiviação, contribuindo para a manutenção desse sistema

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-16T10:51:57Z No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Parcial - Mayane Pereira de Souza.pdf: 754803 bytes, checksum: 1b946393dc083801355cfcf33a74990c (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-16T10:52:12Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Parcial - Mayane Pereira de Souza.pdf: 754803 bytes, checksum: 1b946393dc083801355cfcf33a74990c (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-16T10:52:46Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Parcial - Mayane Pereira de Souza.pdf: 754803 bytes, checksum: 1b946393dc083801355cfcf33a74990c (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-16T10:52:46Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Parcial - Mayane Pereira de Souza.pdf: 754803 bytes, checksum: 1b946393dc083801355cfcf33a74990c (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2016-06-06 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Mari-mari (Cassia leiandra Benth), pajurá (Couepia bracteosa) and pitomba (Talisia esculenta) are fruits easily found in Amazon urban neighbouring and also in the Amazon forest. They are commonly consumed fresh and their chemical composition and antioxidant capacity have never been studied. Extracts in acetone and methanol pulp, fruit peel and seed of fruits were obtained and analyzed by LC-MS leading to identify flavonoid glycosides, dimer flavonoid, phenolic acids and one organic acid present in the pulp, peel and fruit seed. The scavenger capacity and total phenolic content were also evaluated. The total phenolic of extracts of the edible part of marimari presented total phenolic content of 0.036 and 40.12 μg GAEq/100 g for methanolic and ketonic extracts respectively. The antioxidant activity evaluated by DPPH method revealed values of IC50 of 620.30 ± 0.01 and 364.94 ± 0.01 μg/ to mari-mari extracts pulp (methanolic and ketonic respectively). The best result was seeds pajurá extracted in methanol. Iron reduction capacity of the edible part of the fruit was 629.88 ± 0.01 and 634.46 ± 0.08 μmol FeSO4 g− 1 DW. Additionally, engeletin (1) and astilbin (2) were isolated and identified by RMN and comparison with literature. This is the first report about the chemical characterization and antioxidant activity from mari-mari and a contribution to studies from pajurá e pitomba fruits. / Mari-Mari (Cassia leiandra Benth), pajurá (Couepia bracteosa) e pitomba (Talisia esculenta) são frutas facilmente encontradas nos arredores da cidade e também na floresta amazônica. A composição química e informações sobre a capacidade antioxidante do mari-mari é desconhecida e do pajurá e pitomba pouco exploradas. Neste trabalho, foram produzidos extratos de polpa, cascas e sementes destes frutos utilizando acetona e metanol, para realização de análises por LC-MS para a identificação de compostos, especialmente da classe de flavonoides, quantificação do teor de fenólicos totais, avaliação da capacidade de sequestro de radicais DPPH e redução de Fe3+. Os resultados de quantificação dos fenólicos totais dos extratos da parte comestível de mari-mari apresentou teor de fenólicos totais de 0,036 e 40,12 mg GAEq/100 g de extrato seco nos extratos metanólico e cetônico, respectivamente. O extrato de polpa pajurá apresentou o maior teor de fenólicos no extrato metanólico. A atividade antioxidante avaliada pelo método de DPPH para os extratos metanólico e cetônico de polpa de mari-mari foi CS50 de 620,30 ± 0,01 e 364,94 ± 0,01 μg/mL respectivamente. Entre os frutos, o destaque foi para o extrato metanólico da amêndoa de pajurá (63,69 μg/mL ± 0,002). A capacidade de redução de Fe3+ da parte comestível do fruto foi 629,88 ± 0,01 e 634,46 ± 0,08 μmol FeSO4/g extrato seco. Além disso, engeletina (1) e astilbina (2) foram isolados e identificados por espectrometria de RMN e EM e comparação com a literatura. Este é o primeiro relato sobre a caracterização química e atividade antioxidante do fruto mari-mari e uma contribuição aos estudos de pajurá e pitomba.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-21T14:16:41Z No. of bitstreams: 1 Paulo Geovani Silva Martins.pdf: 3068367 bytes, checksum: a2b6a221541b1632f6a29c5025ee09e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-21T14:16:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Geovani Silva Martins.pdf: 3068367 bytes, checksum: a2b6a221541b1632f6a29c5025ee09e4 (MD5) Previous issue date: 2011-02-21 / Leguminosae is the third largest angiosperm family, with around 700 genera, of which the Mimosoideae subfamily comprehends 78 genera, with emphasis to Acacia, Mimosa and Inga. Mimosa caesalpiniifolia Benth., known as “sabiá” or “sansão do campo” is considered to be one of the most important native tree species of the Brazilian semiarid due to its multiuse capability, and high potential for degraded area recovery, since it fixes nitrogen in symbiosis with diazotrophic bacteria. Diazotrophic bacteria taxonomy has been changing due to joint use of phenotypic, physiologic and molecular tools. This work aimed to evaluate “sabiá” and its symbiotic bacteria diversity in five Northeastern municipalities. It was conducted from April, 2010 to March, 2011, at Pernambuco Federal Agricultural University and the Genome Laboratory of the Pernambuco Agronomic Institute. For “sabiá” phylogenetic studies, leaves from native or naturalized plants were collected at Crato, Gravatá, Itambé, Mossoró and Serra Talhada, with their genomic DNA extracted with a commercial kit. The intergenomic atpB-rcbL region of chloroplastic DNA was amplified and used to construct Bayesian Inference phylogenesis of the accesses. Soil samples were collected at the same time of plant collection, and “sabiá” plants were used as bait for rhizobial nodules using Leonard jars, at a greenhouse. Nodule bacteria were isolated and purified in YMA media with Congo Red, and morpho-physiologically characterized on YMA media with Bromothymol Blue. The isolates were later grown in liquid TY media for DNA extraction with a commercial kit. Amplifications were conducted with REP, ERIC and BOX primers, and 16S rDNA was amplified and sequenced. Intergenic atpB-rbcL chloroplast DNA sequences did not match any NCBI entry. CRATO 4 and SERRA TALHADA 20 accesses formed an external group indicated they may be genetically closer to a Mimosa ancestor. The high segregation of the species affected diversity within and among the different areas, and plant biogeography was not confirmed. Genomic fingerprinting of the 47 isolates had different patterns for REP, ERIC and BOX elements, but compilation of the results created the dendrogram with the most groups. The 16S rDNA sequences were blasted in GenBank, and the isolates had 68 to 99% similarity with Burkholderia strains. The phylogenetic tree constructed with the 16S rDNA, combined with sequences from strains recommended for legume inoculation, show these isolates to be diverse from the currently recommended. Isolates PE-MO01, PE-MO02 and PE-MO04 were the most different among the isolates. The lack of molecular phylogeny data for “sabiá” shows the need of using other taxonomic markers to evaluate this species diversity, and the 16S rDNA sequences confirm the Mimosa symbiosis preference for Burkholderia strains. / A família Leguminosae é a terceira maior família de angiospermas com aproximadamente 700 gêneros, dos quais a subfamília Mimosoideae compreende 78 gêneros, destacando-se Acacia, Mimosa e Inga. A espécie Mimosa caesalpiniifolia Benth., conhecida como sabiá ou sansão do campo, é considerada uma das espécies arbóreas nativas mais importantes do semiárido brasileiro por apresentar múltiplo uso e grande potencial para recuperação de áreas degradadas por fixar nitrogênio em simbiose com bactérias diazotróficas. A taxonomia das bactérias diazotróficas vem mudando pela utilização em conjunto de aspectos fenotípicos e fisiológicos e de ferramentas moleculares. Objetivou-se avaliar a filogenia de plantas de sabiá (Mimosa caesalpiniifolia Benth.) e a diversidade e filogenia de suas bactérias simbióticas em cinco municípios nordestinos. O trabalho foi conduzido de abril de 2010 a março de 2011, na Universidade Federal Rural de Pernambuco e no Laboratório de Genoma do Instituto Agronômico de Pernambuco. Para os estudos filogenéticos do sabiá, folhas de plantas nativas ou naturalizadas foram coletadas em Crato, Gravatá, Itambé, Mossoró e Serra Talhada, e tiveram o DNA genômico extraído utilizando-se kit comercial. Foram realizadas amplificações da região espaçadora intergênica atpB-rcbL do genoma cloroplastidial que foram usadas para construir a Inferência Bayesiana da filogenia entre os acessos. Amostras de solo foram coletadas à mesma época das coletas das folhas e plantas de sabiá foram usadas como plantas-isca para obtenção de nódulos de rizóbios utilizando-se Vasos de Leonard, em casa de vegetação. As bactérias presentes nos nódulos foram isoladas e purificadas em meio YMA com Vermelho Congo e a caracterização morfofisiológica dos isolados foi realizada em meio YMA com Azul de Bromotimol. Posteriormente os isolados foram crescidos em meio TY líquido para extração do DNA com kit comercial. Foram realizadas amplificações com os oligonucleotideos BOX, ERIC e REP e amplificação e sequenciamento do 16S DNAr. As sequências do espaço intergênico cloroplastidial atpB-rbcL não corresponderam com qualquer outra sequência depositada no NCBI. Os acessos CRATO 4 e SERRA TALHADA 20 formaram um grupo externo indicando que podem ser as mais próximas geneticamente. A alta taxa de segregação da espécie influenciou na diversidade dentro e entre as diferentes áreas estudadas e a origem geográfica não determina a variação dos observados nos acessos das plantas estudadas. Os fingerprints genômico dos 47 isolados utilizando os elementos BOX, ERIC e REP apresentaram padrões de amplificações distintos, porém a compilação dos resultados criou o dendrograma com maior número de grupos. As sequências 16S DNAr foram comparadas no GenBank através do programa BLAST, e os isolados apresentam identidade variando entre 68 e 99% com estirpes do gênero Burkholderia. A árvore filogenética construída com as sequências da região 16S DNAr dos isolados, juntamente com as sequências da região 16S DNAr de estirpes tipo recomendadas para inoculação de leguminosas, indica que os isolados obtidos são geneticamente distintos das estirpes recomendadas. Os isolados PE-MO01, PE-MO02 e PE-MO04 destacaram-se por serem os mais distintos dentro do grupo de isolados. A escassez de dados de filogenia molecular da espécie Mimosa caesalpiniifolia Benth. revela a necessidade da utilização de outros marcadores taxonômicos para conhecimento da filogenia e da diversidade desta espécie e as sequências do gene 16S DNAr confirmam a preferência de simbiose entre espécies de leguminosas do gênero Mimosa com bactérias diazotróficas do gênero Burkholderia.

Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-07-21T13:11:39Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AbordagemFitoquimicaDeterminacao.pdf: 2599690 bytes, checksum: 0968a3faa969681e73e4bfc3c74a9337 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-09-08T13:10:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AbordagemFitoquimicaDeterminacao.pdf: 2599690 bytes, checksum: 0968a3faa969681e73e4bfc3c74a9337 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-08T13:10:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AbordagemFitoquimicaDeterminacao.pdf: 2599690 bytes, checksum: 0968a3faa969681e73e4bfc3c74a9337 (MD5) Previous issue date: 2011 / A malária é uma doença causada por protozoários do gênero Plasmodium. O tratamento da malária está se tornando cada vez mais difícil com a expansão dos casos de parasitas resistentes aos fármacos utilizados na terapêutica. Neste contexto, produtos isolados a partir de plantas têm dado importante contribuição, representando importante fonte para a obtenção de novos fármacos antimaláricos. A atividade antiplasmódica de alcalóides de origem vegetal tem sido amplamente relatada na literatura. Plantas da família Apocynaceae, ricas em alcalóides indólicos, apresentam amplas propriedades medicinais e algumas espécies do gênero Aspidosperma já demonstraram potencial antimalárico. Assim, este trabalho teve como objetivo realizar uma abordagem fitoquímica, avaliar a atividade antiplasmódica in vitro e a toxicidade preliminar do extrato hidroetanólico concentrado das cascas de A. excelsum, nativa da Região Amazônica, onde é usada tradicionalmente para tratar várias enfermidades, inclusive malária. A atividade antiplasmódica in vitro de diferentes concentrações do extrato e frações alcaloídica e metanólica foi avaliada em culturas de P. falciparum W2 pela percentagem de inibição da parasitemia e determinação da concentração inibitória média (CI50) em intervalos de 24, 48 e 72 h. O ensaio de citotoxicidade do extrato e fração alcaloídica foi realizado em fibroblastos L929 de camundongo pelo método do MTT e o teste de toxicidade aguda oral do extrato foi realizado de acordo com o Procedimento de Dose Fixa adotado pela OECD com pequenas adaptações. A prospecção fitoquímica revelou a presença de saponinas, açúcares redutores, fenóis e taninos e alcalóides e estes foram confirmados em quantidades significativas na fração alcaloídica extraída com clorofórmio (C2). Através de cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta eficiência do extrato, foi caracterizada a presença do alcalóide indólico ioimbina. O extrato e as frações apresentaram atividade antiplasmódica in vitro. O extrato apresentou a melhor atividade em 24 h (CI50= 5,2 ± 4,1 μg/mL), indicando uma boa atividade esquizonticida. Apenas a fração alcaloídica C2 apresentou uma pequena, porém significativa citotoxicidade (concentrações superiores a800 μg/mL). O extrato não só não apresentou citotoxicidade como também nenhum sinal evidente de toxicidade aguda oral na dose de 5000 mg/mL. Os resultados obtidos indicam que o extrato de Aspidosperma excelsum Benth apresenta promissor potencial antimalárico, merecendo estudos mais detalhados sobre sua atividade antiplasmódica, com vistas no isolamento de compostos ativos e elucidação de seu(s) mecanismo(s) de ação. / Malaria is a disease caused by protozoa of the genus Plasmodium. The treatment of malaria is becoming increasingly difficult with the expansion of the cases of parasites resistant to drugs used in therapy. In this context, products isolated from plants have give an important contribution, representing an important source for obtaining new antimalarial drugs. Antiplasmodial activity of alkaloids of plant origin has been widely reported in the literature. Plants of the Apocynaceae family, rich in indole alkaloids have medicinal properties and some large species of the genus Aspidosperma have demonstrated antimalarial potential. Thus, this study aimed to perform a phytochemical approach, evaluate the antiplasmodial activity and toxicity in vitro preliminary of the hydroethanolic extract from the bark of A. excelsum, native of the Amazon region, where it is traditionally used to treat various diseases, including malaria. Antiplasmodial activity in vitro of different concentrations of the extract and alkaloidal and methanolic fractions was evaluated in cultures of P. falciparum W2 by the percentage of inhibition of parasitaemia and the mean inhibitory concentration (IC50) was determined at intervals of 24, 48 and 72 h. The cytotoxicity assay of the extract and alkaloidal fraction was carried out on L929 mouse fibroblasts by MTT method and the testing of acute oral toxicity of the extract was carried out according to the Fixed Dose Procedure adopted by the OECD with small modifications. The phytochemical approach revealed the presence of saponins, reducing sugars, phenols and tannins and alkaloids, and these were confirmed in significant amounts in the alkaloidal fraction with chloroform fraction (C2). Through thin layer chromatography and high performance liquid chromatography of the extract characterized the presence of the indole alkaloid yohimbine. The extract and fractions showed antiplasmodial activity in vitro. The extract showed the best activity in 24 h (IC50 = 5.2 ± 4.1 μg / mL), indicating a good activity schizonticide. Only C2 alkaloidal fraction showed a small but significant cytotoxicity (concentrations higher than 800 μg/mL). The extract not only cytotoxicity but also did not showed any obvious sign of toxicity in acute oral dose of 5000 mg/mL. The results indicate that the extract of Aspidosperma excelsum Benth presents promising potential antimalarial and deserves more detailed studies on antiplasmodial activity, aiming the isolation of active compounds and elucidation of their mechanisms of action.

SILVA, E. P. Interação do fosfato de rocha, matéria orgânica e microbiota do solo na produção de mudas de arbóreas nativas de interesse econômico e ambiental no Nordeste brasileiro. 2013. 77 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Solos e Nutrição de Plantas) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-08-25T17:43:02Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_epsilva.pdf: 864372 bytes, checksum: d724b068a9da505aa33b2deaecd414a0 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-08-27T23:06:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_epsilva.pdf: 864372 bytes, checksum: d724b068a9da505aa33b2deaecd414a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-27T23:06:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_epsilva.pdf: 864372 bytes, checksum: d724b068a9da505aa33b2deaecd414a0 (MD5) Previous issue date: 2013 / Natural regeneration of vegetation is the procedure cheaper to rehabilitate degraded areas, however, is slow. The planting of native tree seedlings may be a solution. In this context, an experiment was carried out in a greenhouse for 120 days, testing 5 P rates (0, 75, 150, 300 and 600 mg L-1) with rock phosphate colonization by AMF and native rhizobia in development of seedlings embaúba (Cecropia pachystachya Trécul) and sabiá (Mimosa caesalpiniaefolia Benth), grown in natural soil (NS), natural soil sterilized with 50% (NSS) and natural soil added with 25% organic compost (NSC). We analyzed the length, dry matter weight, N, P, K aerial part and the stem diameter of the plant, number of spores and mycorrhizal colonization, dry matter weight of nodules rhizobia, microbial biomass carbon, basal respiration and metabolic quotient soil. The growth in length, stem diameter and dry matter weight of embaúba not affected by the treatments. The substrates NS and NSS provided the greatest colonization and sporulation of AMF, favoring the input of P in shoots of these plants. This activity was reduced at the highest levels of P. The soil basal respiration and microbial biomass carbon (MBC) were lower in the NSS and not influenced by P fertilization. The substrate NSS provided major input of N in shoots, not influenced by P fertilization. Whereas the NSC provided major input of P and K in shoots of embaúba plants. The AMF favored the input of P in shoots of embaúba plants, but this activity was reduced at the highest levels of P. The growth of sabiá was not affected by treatments, but stem diameter and dry mass weight showed better results in substrate NSC. However, were not affected by the rates of P. The NSC had the lowest number of spores, the highest colonization of AMF at rate of 75 mg of P, however with reduction in higher rates, and higher MBC, but without influence of P rates. The NSS and native rhizobia provided major input of N in shoots and increased nodular mass in sabiá and levels of phosphorus influenced these parameters. The NSC provided major input of P and K in shoots of sabiá, in rate of 600 mg P, favored higher values of these nutrients. AMF provided a mild increase the levels of P in the shoots of sabiá plants. / A regeneração natural da vegetação é o procedimento mais barato para reabilitar áreas degradadas, porém, é lento. O plantio de mudas de arbóreas nativas pode ser uma solução. Nesse contexto, conduziu-se o presente trabalho em casa de vegetação por 120 dias, testando 5 doses de P (0, 75, 150, 300 e 600 mg L-1) com fosfato de rocha natural na colonização por FMA e por rizóbio nativos, e no desenvolvimento de mudas de embaúba (Cecropia pachystachya Trécul) e de sabiá (Mimosa caesalpiniaefolia Benth), cultivadas em solo natural (SN), solo natural com 50 % esterilizado (SND) e solo natural adicionado de 25 % de material orgânico (SNM). Analisou-se o comprimento, massa da matéria seca, teores de N, P, K da parte aérea e o diâmetro do colo das plantas, número de esporos e colonização micorrízica, massa da matéria seca dos nódulos de rizóbios, carbono da biomassa microbiana, respiração basal e quociente metabólico do solo. O crescimento em comprimento, o diâmetro do colo e a produção de massa da matéria seca da parte aérea das plantas de embaúba não sofreram efeito dos tratamentos. Os substratos SN e SND proporcionaram a maior esporulação e colonização de FMA, favorecendo o aporte de P na parte aérea dessas plantas. Essa atividade foi reduzida nas maiores doses de P. A Respiração Basal e o carbono da biomassa microbiana do solo (CBMS) foram menores no SND e não sofreram influência das doses de P. O substrato SND proporcionou maior aporte de N na parte aérea das plantas, mas sem influência das doses de P. Enquanto que o SNM proporcionou maior aporte de P e K na parte aérea das plantas. Os FMA favoreceram o aporte de P na parte aérea das plantas de embaúba, mas com redução nas maiores doses de P. O crescimento em comprimento das plantas de sabiá não sofreu efeito dos tratamentos, porém o diâmetro do colo e a massa da matéria seca da parte aérea das plantas apresentaram melhores resultados no substrato SNM, mas sem influência das doses de P. O SNM apresentou o menor número de esporos, maior colonização de FMA na dose de 75 mg de P, todavia com redução nas maiores doses, e maior CBMS, mas sem influência das doses de P. O SND e o rizóbio nativo proporcionaram maior aporte de N na parte aérea e maior massa nodular nas plantas de sabiá, sendo influenciados pelas doses de P. O SNM proporcionou maior aporte de P e K na parte aérea das plantas de sabiá, tendo a dose de 600 mg de P favorecido os maiores valores desses nutrientes. Os FMA proporcionaram um discreto incremento no teor de P na parte aérea das plantas de sabiá.

Submitted by Alison Vanceto (alison-vanceto@hotmail.com) on 2017-01-23T10:47:55Z No. of bitstreams: 1 DissACCA.pdf: 1129010 bytes, checksum: b80861cac806c1b3baecbc65e887e809 (MD5) / Approved for entry into archive by Camila Passos (camilapassos@ufscar.br) on 2017-01-23T15:47:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissACCA.pdf: 1129010 bytes, checksum: b80861cac806c1b3baecbc65e887e809 (MD5) / Approved for entry into archive by Camila Passos (camilapassos@ufscar.br) on 2017-01-23T15:47:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissACCA.pdf: 1129010 bytes, checksum: b80861cac806c1b3baecbc65e887e809 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-23T15:47:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissACCA.pdf: 1129010 bytes, checksum: b80861cac806c1b3baecbc65e887e809 (MD5) Previous issue date: 2016-06-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Maize can be intercropped with green manures, which in addition to performing the coverage and soil protection, the weeds control, also cycle nutrients and perform nitrogen biological fixation. This study aimed at evaluating the growth, yield of grains and straw, the content of macronutrients of maize and the weeds control in intercropping with perennial green manures sown at two different maize growth stages. The experiment was conducted in the agricultural year of 2014/2015, at UFSCar/Araras-SP, in randomized complete blocks in factorial scheme 3 x 2 + 1 with 4 repetitions. The factors were: 3 species of green manures (calopogonio (Calopogonium mucunoides Desv.); kudzu (Pueraria phaseoloides (Roxb) Benth.) and perennial soybean (Neonotonia wightii (Wight & Arn) Lackey.) and two green manures sowing times (sowing at the V4 - four expanded leaves and VT – bolting of maize). And a control treatment, maize monoculture. The evaluations were: in the R1/R2 of maize stage - milky/doughy grain (height (ALT); diameter (DIA); specific leaf area (AFE); leaf area index (IAF); stalk dry matter (MSC), leaves (MSF) and total (MST) of maize; Falker chlorophyll index (ICF); number of leaves above the upper ear (FAS)); in the R5 of maize stage – chalky grain (dry mass of green manure (MSA); total dry mass maize intercropping/green manure (MSTC); percentage of land cover (PC) and dry mass of weeds (MSE)); in the R6 – maize harvest (final plant stand (EST); prolificacy (PROL); number of rows per ear (NFE); number of kernels per row (NGF); yield of grain (PROD); weight of 100 grains (P100) and content of macronutrients of maize). It was found higher production of EF with the sowing of green manures in the V4 stage (69,814 plants ha-1), being the intercropping maize/calopogonio with higher values of MSA and PC, with 1002.00 kg ha-1 and 35.63%, respectively. The highest P100 occurred in the VT (32.89 g). There was not difference for the other variables. The PROD was 9.04 t ha-1 and 7.0 t ha-1 of MSTC. The smallest leaf N content was observed in the intercropping with calopogonio in V4 (22.75 g kg-1). The Ca had smallest levels for the perennial soybean in the VT and kudzu in the V4. The smallest Mg content was in intercropping with the soybean perennial in the VT, in the P was in the intercropping with calopogonio and S, when the sowing of the green manures occurred in V4 of maize. For K, there was not statistical difference. The MSTC production was not affected by green manures, with maize straw production in monoculture and in the intercropping systems exceeding the minimum amount recommended for ground cover (6.0 t ha-1). The green manures negatively affect the content of P, K, Ca, Mg and S in maize and calopogonio sown in the VT, the kudzu and the soybean perennial sowing in the V4 and VT, contributed to provide N to maize. / O milho pode ser consorciado com adubos verdes perenes, que além de realizarem a cobertura e proteção do solo, o controle de espontâneas, ciclam nutrientes e realizam a fixação biológica de nitrogênio. Objetivou-se com este trabalho avaliar o crescimento, a produtividade de grãos e de palhada, o teor de macronutrientes do milho e a supressão das plantas espontâneas em cultivo consorciado com adubos verdes perenes semeados em duas épocas distintas de desenvolvimento do milho. O experimento foi realizado na safra de 2014/2015, na UFSCar/Araras-SP, em blocos casualizados no esquema fatorial 3 x 2 + 1 com 4 repetições. Os fatores foram: 3 espécies de adubos verdes perenes (calopogônio (Calopogonium mucunoides Desv.); puerária (Pueraria phaseoloides (Roxb) Benth.) e soja-perene (Neonotonia wightii (Wight & Arn.) Lackey) e 2 épocas de semeadura (semeadura no V4 – quatro folhas expandidas e VT – pendoamento do milho). E a testemunha, o milho solteiro. Avaliaram-se: no estádio R1/R2 do milho - grão leitoso (altura (ALT), diâmetro (DIA), área foliar específica (AFE), índice de área foliar (IAF), massa de matéria seca do colmo (MSC), folhas (MSF) e total (MST) do milho, índice de clorofila Falker (ICF) e nº de folhas acima da espiga superior (FAE)); no estádio R5 do milho – grão farináceo (massa de matéria seca dos adubos verdes (MSA), massa de matéria seca total do consórcio milho/adubos verdes (MSTC), porcentagem de cobertura do solo (PC) e massa de matéria seca das plantas espontâneas (MSE)); no estádio R6 – colheita do milho (estande final de plantas de milho (EF), prolificidade (PROL), número de fileiras por espiga (NFE), número de grãos por fileira (NGF), produtividade de grãos (PROD), peso médio de 100 grãos (P100) e o teor de macronutrientes no milho). Foi encontrado maior EF com a semeadura dos adubos verdes no V4 (69.814 plantas ha-1), sendo o consórcio milho/calopogônio com maiores valores de MSA e PC, com 1002,0 kg ha-1 e 35,63%, respectivamente. O maior P100 ocorreu no VT (32,89 g). Não houve diferença para as outras variáveis. A PROD foi de 9,04 t ha-1 e 7,0 t ha-1 de MSTC. O menor teor de N foliar do milho foi observado no consórcio com calopogônio no V4 (22,75 g kg-1). O Ca teve menores teores para a soja perene no VT e a puerária no V4. O menor teor de Mg foi no consórcio com a soja perene semeada no VT, de P foi no consórcio com calopogônio e de S, ocorreu quando a semeadura dos adubos verdes ocorreu no V4 do milho. Para o K, não houve diferença estatística. A produção de MSTC não foi influenciada pelos adubos verdes, com a produção de palha do milho em cultivo solteiro e nos sistemas consorciados superior a quantidade mínima recomendada para cobertura do solo (6,0 t ha-1). Os adubos verdes afetaram de forma negativa o teores foliares de P, K, Ca, Mg e S do milho e o calopogônio semeado no VT, a puerária e a soja perene semeados no V4 e VT, contribuíram para o incremento de N ao milho.

Resumo: O presente trabalho teve por objetivo geral o estudo de populações de Ocimum selloi Benth. sob o ponto de vista da biologia reprodutiva, da variabilidade genética e química dos óleos essenciais, visando fornecer informações para seu uso inequívoco como planta medicinal e aromática em estudos futuros de melhoramento genético vegetal, cultivo e preservação da espécie. O material vegetal utilizado foi coletado na região de Piquete e Apiaí, estado de São Paulo, em Colombo, estado do Paraná e em Camanducaia, estado de Minas Gerais. O estudo da variabilidade populacional foi realizado pela análise de polimorfismo do DNA do tipo RAPD e a química por meio da análise da composição química dos óleos essenciais das folhas das populações naturais e cultivadas por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas. Os resultados revelaram uma forte estrutura genética entre as populações avaliadas, que também pôde ser verificada pelas diferenças observadas nos perfis químicos das plantas. O estudo da biologia reprodutiva revelou a existência predominante de autopolinização explicando o fato das análises da variabilidade genética das quatro populações (Apiaí/SP; Piquete/SP; Colombo/SP e Camanducaia/MG), demonstrarem que a diversidade está localizada entre as populações (variabilidade interpopulacional). A composição química dos óleos essenciais revelou divergências na proporção relativa das substâncias mais abundantes, onde para a população nativa de Piquete/SP, a substância mais abundante foi o germacreno D (26,22%), enquanto que plantas da mesma região cultivadas em Campinas/SP apresentaram elemicina (38,70%, 35,46% e 26,22%) na 1ª, 3ª e 4ª colheita, respectivamente, e transbergamoteno (21,13%) na 2ª colheita como principal composto. Para a população nativa de Apiaí/SP e para as plantas cultivadas em Campinas/SP ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The general goal of the present study was to investigate Ocimum selloi Benth. populations from the standpoints of reproductive biology, genetic and essential oil chemical variability; in order to provide information for its safe use as medicinal and aromatic plant, for future breeding studies, the species cultivation and its preservation. Plant material was collected from the regions of Piquete and Apiaí, in the state of São Paulo; Colombo, state of Paraná and Camanducaia, state of Minas Gerais. The population variabiliy was studied by DNA polymorphism analysis using RAPD markers and the chemical diversity was investigated through composition analyses of the essential oils from leaves of natural and theis corresponding cultivated populations, using gas chromatography-mass spectrometry. The results revealed a strong genetic structure among the populations, so that it agrees with the differences in the chemical profile of the plants. Reproductive biology studies revealed the predominance of self-pollination, in accordance to the genetic variation data from the four populations (Apiaí/SP; Piquete/SP; Colombo/SP e Camanducaia/MG); therefore demonstrating that the diversity is among the populations (interpopulation variability). The chemical composition of the essential oils was divergent in the relative proportion of the major compounds; the native population in Piquete/SP exhibited germacrene D (26.22%) as the most abundant component, whereas its corresponding individuals grown in Campinas/SP presented elemicine (38.70%, 35.46% and 26.22%) at the 1st, 3rd and 4th harvesting season and trans- - bergamotene (21.13%) at the 2nd harvesting season as main compounds. The native population from Apiaí/SP and its corresponding cultivated plants in Campinas/SP presented elemicine (22.68%, 28.70% and 32.90%, respectively) as the ...(Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Márcia Ortiz Mayo Marques / Coorientador: Carlos Augusto Colombo / Banca: Carmen Silvia Fernandes Boaro / Banca: Vera Maria Quecini / Banca: Maria Imaculada Zucchi / Banca: Maria das Graças Cardoso / Doutor