145 f. / Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-04-12T15:21:11Z No. of bitstreams: 1 (RIBEIRO, P.R._ 2011).pdf: 2212488 bytes, checksum: f89af1ba3d50eb7729003c14dba84912 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-05-14T16:54:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 (RIBEIRO, P.R._ 2011).pdf: 2212488 bytes, checksum: f89af1ba3d50eb7729003c14dba84912 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-14T16:54:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 (RIBEIRO, P.R._ 2011).pdf: 2212488 bytes, checksum: f89af1ba3d50eb7729003c14dba84912 (MD5) Previous issue date: 2011 / CAPES / O presente trabalho descreve o estudo fitoquímico e a avaliação da atividade antimicrobiana dos extratos e substâncias obtidas da espécie vegetal Clusia burlemarxii, coletada nos municípios de Rio de Contas e Mucugê, Chapada Diamantina - Bahia. Da fase em acetato de etila, obtida por partição do extrato etanólico das folhas, foram isoladas cinco substâncias, a friedelina, o ácido 2Z-δ-tocotrienolóico, a 4-hidroxi-5,5-dimetildi-hidrofuran-2-ona, a quercetrina e a afzelina. Da fase em acetato de etila, obtida por partição do extrato metanólico do caule foram isoladas quatro substâncias, o ácido protocatechuíco, a lignana (+)-lioniresinol, o ácido betulínico e o bifenilo 2,2- dimetil-3,5-di-hidroxi-7-(4-hidroxifenil)cromano. Da fase em diclorometano, obtida por filtração em coluna de gel do extrato metanólico do caule foram isoladas quatro substâncias, as xantonas 6-desoxiisojacareubina, burlemarxiixantona e brasilixantona B, bem como, o ácido betulônico. A elucidação estrutural das substâncias baseou-se nos dados obtidos através de experimentos como IESEM, RMN 1H e RMN 13C, NOEDIF, DEPT 135, HMBC, HMQC. A atividade antimicrobiana dos extratos e substâncias isoladas foi avaliada frente a quatro bactérias Gram positivas (Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Bacillus subtilis e Micrococcus luteus) e três Gram negativas (Escherichia coli, Salmonella choleraesuis e Pseudomonas aeruginosa), bem como, frente a dois fungos (Aspergillus niger e Cladosporium cladosporioides). O extrato etanólico das folhas mostrou atividade frente S. aureus (62,50 μg.mL-1) e B. subtilis (31,25 μg.mL-1). A fase obtida com hexano mostrou atividade, em menor grau, frente S. aureus (250μg.mL-1) e B. subtilis (125 μg.mL-1). A fase obtida com acetato de etila mostrou atividade frente S. aureus (500 μg.mL-1) e M. luteus (500 μg.mL-1). O extrato metanólico do caule apresentou atividade frente S. mutans (62,5 μg.mL-1), B. subtilis (62,5 μg.mL-1) e M. luteus (31,2 μg.mL-1). Das substâncias isoladas, o bifenilo inédito apresentou atividade frente um maior número de micro-organismos: B. subitilis (100 μg.mL-1), S. aureus (50 μg.mL-1), S. mutans (100 μg.mL-1), M. luteus (25 μg.mL-1). / Salvador

Made available in DSpace on 2018-08-02T00:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9607_Dissertação Completa - Alessandro B. Gomes - versão BC.pdf: 1054817 bytes, checksum: e05206eb2c77d1cf48e978caf2fcb5e5 (MD5) Previous issue date: 2016-03-30 / Como forma de atender a demanda ambiental, objetivou-se estudar o potencial alelopático da palmeira aricanga, espécie da família Arecaceae, nativa da Mata Atlântica e endêmica do Brasil, como possível alternativa ao uso de herbicidas sintéticos altamente poluentes e persistentes no ambiente. Foram usados extratos foliares da Geonoma schottiana na germinação de uma planta cultivada e outra daninha (alface e capim colonião, respectivamente). As folhas foram maceradas utilizado-se como extratores o metanol, acetato de etila e hexano durante uma semana. Após este procedimento, o solvente foi evaporado, e foram preparadas três concentrações (200 mg/L, 400 mg/L e 800 mg/L) dos extratos, os quais foram comparados aos efeitos da água destilada, considerada como controle (0 mg/L). Foram postas para germinar 100 sementes de alface e Capim Colonião distribuídas em 4 placas de Petri forradas com duas folhas de papel germitest umedecidos com os diferentes extratos e concentrações. Os testes foram conduzidos em temperatura constante de 20oC para germinação da alface e 25ºC para germinação do capim colonião e luz constante com quatro lâmpadas fluorescentes (20W) em câmara de germinação tipo BOD. O número de sementes germinadas foi contado diariamente, obtendo-se ao final de 7 dias, a porcentagem de germinação e o índice de velocidade de germinação (IVG). Houve interação significativa entre os diferentes extratores, concentrações e plantas testadas para todos os parâmetros avaliados de acordo com o teste de Scott nott ao nível de 1% de probabilidade. Observou-se uma diminuição na porcentagem de germinação tanto das sementes de alface quanto de capim colonião em relação ao controle em todos os extratos testados, sendo que a menor taxa de germinação foi observada quando as sementes foram expostas aos extratos de hexânicos nas concentrações de 400mg/l e 800mg/l. O IVG foi reduzido significativamente por todos os extratos, tendo o extrato de acetato de etila 800mg/l promovido a maior redução sobre o IVG. Além disso, observa-se também uma maior inibição da germinação das sementes do capim colonião do que da alface quando submetidas aos extratos hexânicos. Extratos de folhas de Geonoma schottiana provocaram redução no comprimento das folhas de alface a partir de 200mg/L em todos os extratos, sendo que há uma redução significativa no extrato de acetato de etila, na qual se observa na concentração de 800mg/L um menor desenvolvimento no comprimento foliar. No capim colonião notamos uma redução significativa do comprimento foliar nos extratos de acetato de etila e hexânico, na qual se observa na concentração de 800mg/L um menor comprimento foliar, sendo que há uma relação de dose dependente. Observando o comprimento da raiz, notamos que extrato de acetato de etila provocou uma maior redução no comprimento da radícula tanto da alface quanto do capim colonião, sendo observada a redução do comprimento da radícula com o aumento da concentração. Na prospecção fitoquímica dos metabólitos secundários dos extratos de folhas de Geonoma schottiana foram encontrados cumarinas, alcalóides, esteróides e flavonóides. Na análise do índice mitótico, observou-se uma alteração nos três tratamentos, principalmente no extrato hexânico, sendo que o aumento da concentração promovia uma maior redução do índice mitótico. Tais resultados indicam um efeito promissor dos extratos foliares de Geonoma schottiana para uso agrícola sustentável no controle de plantas invasoras e potencialidade para estudos futuros de identificação dos compostos bioativos, presentes nos extratos testados. Dessa forma, além do maior conhecimento acerca do efeito alelopático, pode-se também melhor conhecer a biologia de espécies florestais nativas pouco estudadas.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-09-05T12:47:02Z No. of bitstreams: 1 2012_VespasianoYojiKanzakiSousa.pdf: 935953 bytes, checksum: bbc412b68b250152b2b5b7d4e66efc49 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2012-09-06T11:50:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_VespasianoYojiKanzakiSousa.pdf: 935953 bytes, checksum: bbc412b68b250152b2b5b7d4e66efc49 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-06T11:50:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_VespasianoYojiKanzakiSousa.pdf: 935953 bytes, checksum: bbc412b68b250152b2b5b7d4e66efc49 (MD5) / A diversidade biótica amazônica rendeu o isolamento de bactérias, do solo e de frutos e sementes da castanha-do-pará (Bertollethia excelsa), produtoras de substâncias antimicrobianas, assim como de extratos aquosos de plantas medicinais amazônicas, frente a cepas patogênicas para o homem e animais, de Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis. Do solo, foram isolados Burkholderia pseudomallei e Dermacoccus nishinomiyaenses, e dos frutos e sementes de B. excelsa foram isolados, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris, Kocuria varians, Granulicatella elegans, Staphylococcus lentus, Staphylococcus intermedius, Escherichia coli, Oligella ureolytica, Acinetobacter spp e Bacillus cereus, todos produzindo substâncias que apresentaram atividade inibitória frente ao crescimento de Staphylococcus aureus. As plantas medicinais amazônicas, Hymenelobium petraeum (angelim-pedra) exibiu atividade inibitória sobre colônias de Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis, enquanto Vatairea guianensis (faveira) e Symphonia globulifera (anani) apresentaram atividade inibitória unicamente sobre colônias de Staphylococcus aureus. Ensaios de citotoxicidade das substâncias produzidas por bactérias do solo, utilizando-se células estabelecidas transformadas de rim de gato (CrFK) demonstraram que o filtrado do bacilo gram- negativo (em identificação) e os isolados bacterianos de frutos e sementes de castanha-do-pará, Kocuria varians, Granulicatella elegans, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp,, Oligella ureolytica e Bacillus cereus apresentaram atividade citotóxica sobre as células em ensaio, enquanto que células linfoblásticas em suspensão malignizadas (HUT-78) não sofreram ação tóxica quando tratadas com as substâncias filtradas produzidas pela mesma bactéria isolada. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The amazonian biotic diversity rendered bacterial isolation from soil and fruits and seeds of the brazilian nut (Bertollethia excelsa), which produced antimicrobial substances, as also aqueous extracts of amazonian medicinal plants, against human and animal pathogenic strains of Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis. Burkholderia pseudomallei and Dermacoccus nishinomiyaenses were isolated from soil, and also, from fruits and seeds of B. excelsa, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris, Kocuria varians, Granulicatella elegans, Staphylococcus lentus, Staphylococcus intermedius, Escherichia coli and Oligella ureolytica, Acinetobacter spp e Bacillus cereus were isolated, all producing antimicrobial substances, which inhibited Staphylococcus aureus colony growth. The amazonian medicinal plants, Hymenelobium petraeum (angelim-pedra) showed inhibitory activity over Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis’ colony growth, while Vatairea guianensis (faveira) and Symphonia globulifera (anani) presented inhibitory activity exclusively for Staphylococcus aureus’ colonies. Citotoxicity assays of the substances produced by soil bacteria, utilizing established and transformed cat’s kidney cells (CrFK) showed that filtered substances of gram negative bacilli (under identification) and bacterial isolates from fruits and seeds of the brazilian nut, Kocuria varians, Granulicatella elegans, Pseudomonas aeruginosa, Oligella ureolytica, Acinetobacter spp e Bacillus cereus presented cytotoxic activity, while the lymphoblastic cell line (HUT-78) did not show toxic activity when treated with the filtered substances produced by the same isolated bacteria.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:24:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1090_1.pdf: 1446820 bytes, checksum: b2b33c760ccd1e811530aa5fcc0e948e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho teve como objetivo analisar as formas de abordagem na seleção de plantas medicinais, em comunidades tradicionais, para isso usou como modelo a Hipótese da aparência, interpretando que tipo de influência, quanto ao seu hábito e estratégia de vida, será determinantes na constituição dos compostos bioativos nas espécies vegetais de ambiente secos (Caatinga) e ambientes úmidos (Floresta Atlântica). Usou-se a etnobotânica como ferramenta de seleção das espécies a serem estudadas, contemplando três vertentes: apresentar de forma geral a importância das espécies nativas e exóticas conhecidas como medicinais em Cachoeira, Barrocas e Bom Sucesso, no município de Soledade/PB, onde estão inseridas em região de vegetação do tipo Caatinga; testar as predições da Hipótese da aparência em dois diferentes ambientes, para entender se o hábito e estratégia de vida são preditores das ocorrências de fitocompostos, além de questionar se a Importância Relativa pode estar envolvida com o seu hábito, estratégia de vida e composição química; comparar o potencial da atividade antimicrobiana dos extratos brutos de espécies citadas nas comunidades estudadas, para avaliar quais das duas regiões apresentam melhor potencial para a descoberta de plantas com propriedades antimicrobianas. O presente estudo foi realizado em dois municípios, no Nordeste brasileiro, para abranger duas diferentes áreas vegetacionais: Caatinga e Floresta Atlântica. Na Caatinga, o estudo foi realizado no município de Soledade localizado na Microrregião de Soledade e na Mesorregião do Agreste no estado da Paraíba. Devido ao clima quente e seco, sua vegetação é formada por florestas espinhosa e caducifólia, apresentando estrato arbustivo dominante e poucos indivíduos arbóreos. Na Floresta Atlântica, o município estudado foi Igarassu, localizado na Microrregião de Itamaracá e na Mesorregião do Recife, no estado de Pernambuco. A vegetação predominante é de resquícios de Mata Atlântica, Capoeiras, Mangues e áreas de agricultura comercial e subsistência. Com base no que foi exposto, é possível inferir algumas observações, as quais se correlacionam estreitamente. Onde os achados sinalizam algumas implicações, com padrões para a bioprospecção nas diferentes regiões estudadas, mesmo não havendo resultados estatísticos significativamente. Espécies de porte arbóreo em especial de regiões semi-árida tendem a apresentar forte vocação para acumular compostos considerados como quantitativos, sendo então mais provável encontrar plantas medicinais com atividade biológica ligada a esses compostos e, espécies de regiões úmidas, são as espécies herbáceas que apresentam maior importância e tendem a ocorrência na maioria dos casos de compostos qualitativos. Possivelmente, devido às espécies de Caatinga apresentar um padrão de compostos quantitativos, tais como, taninos e saponinas, suas espécies tenderam a melhores inibições e maiores versatilidades de microrganismos sensíveis. Neste sentido, a Caatinga pode ser um ambiente promissor em estudos de bioprospecção para compostos antimicrobianos. Mas, deixando claro que esses padrões devem ser melhor investigados

Orientador: Gabriela Alves Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-24T20:11:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_EricaBenjamimda_M.pdf: 2288195 bytes, checksum: 5e5ae636ebf8e0749f7cc42bc309a508 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A bioprospecção de micro-organismos nativos capazes de produzir enzimas com diferentes propriedades catalíticas é essencial para o desenvolvimento do setor biotecnológico brasileiro. A lipase é uma enzima com vasta aplicação biotecnológica, utilizada na resolução de fármacos quirais, modificação de gorduras, produção de biocombustíveis, cosméticos, agroquímicos, oleoquímicos e realçadores de sabor. A tanase é outra enzima com grande potencial de aplicação industrial por ser capaz de catalisar a hidrólise de taninos hidrolisáveis e de ésteres de ácido gálico. Desse modo, o objetivo desse trabalho foi isolar novas linhagens de micro-organismos capazes de produzir as enzimas tanase e lipase extracelulares e caracterizar, bioquimicamente, as enzimas selecionadas. Foram isoladas 131 linhagens de fungos e 109 linhagens de leveduras da Região Amazônica e da região da Mata Atlântica. Tais linhagens fúngicas juntamente com outras linhagens da Coleção de Micro-organismos do Laboratório de Bioquímica FEA-UNICAMP (n=348) foram analisadas em meio sólido diferencial. Foram obtidas 26 linhagens positivas para lipase e 105 para tanase. As linhagens positivas foram testadas quanto à capacidade de produzir lipase e tanase por fermentação em estado sólido. A atividade enzimática da tanase foi quantificada por espectrofotometria e a da lipase por titulometria de neutralização. A lipase da linhagem de Colletotrichum sp. apresentou atividade enzimática específica igual a 25,97 U/mg; Km= 6,3 %; Vm= 19,5 U/mg; pH ótimo de atividade de 6,5 a 7,0 e temperatura ótima de atividade de 25 °C à 35 °C. A tanase da linhagem de Aspergillus niger apresentou atividade enzimática de 0,79 U/mL e a produzida pela linhagem de Paecilomyces sp. atingiu atividade específica de 2,14 U/mg, pH e temperatura ótima de atividade de 5,5 e 60°C, respectivamente / Abstract: The bioprospection of native microorganisms capable of producing enzymes with diverse catalytic properties is essential to the development of the Brazilian biotechnological sector. Lipase is an enzyme with wide biotechnological application, it is used on chiral drugs resolution, fat modification and on the production of biofuels, cosmetics and flavor enhancers. Tannase is another enzyme with large potential to be applied at industries, it is capable of catalyze the hydrolysis of hydrolysable tannins and galic acid esters. Therefore, this work goal is to isolate novel microorganisms strains capable of producing extracellular lipase and tannase, and to characterize biochemically the selected strains. 131 fungal strains and 109 yeast strains were isolated from Amazon and Atlantic Rainforest regions. These fungal strains summed with others strains from the Microorganisms Collection of the Biochemistry Laboratory/ FEA-UNICAMP (n=348) by differential solid media. It was found 26 lipase producing strains and 105 tannase producing strains. The positive strains were evaluated regarding their capacity to produce lipase and tannase by solid state fermentation. Tannase¿s enzymatic activity was measured by spectrophotometry and lipases¿s enzymatic activity by neutralization titration. Lipase from Colletotrichum sp. strain showed specific activity of 25.97 U/mg; Km= 6.3 %; Vmax= 19.5 U/mg; pH optimum between 6.5 to 7.0 and temperature optimum from 25 °C to 35 °C. Tannase from Aspergillus niger strain presented enzymatic activity of 0.79 U/mL and tannase from Paecilomyces sp. strain reached 2.14 U/mg, pH and temperature optimum of 5.5 and 60 °C, respectively / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestra em Ciência de Alimentos

Orientador: Marcos José Salvador / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T06:36:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Correa_WallaceRibeiro_D.pdf: 6338643 bytes, checksum: a9316650e99827e8384a1a7bacfa1c04 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Pfaffias são plantas da família Amaranthaceae, tribo Gomphreneae, conhecidas como ginseng brasileiro e "Paratudo". São plantas com importância na medicina popular, sendo empregadas no tratamento de várias patologias e algumas espécies de Pfaffia apresentam estudos farmacológicos reportando atividade analgésica, antinociceptiva, anti-inflamatória, antimicrobiana e antitumoral, sugerindo potencial para a busca de agentes biologicamente ativos nestas matrizes vegetais. Assim, este estudo teve por objetivo a prospecção de extratos, frações e substâncias bioativas em Pfaffia townsendii Pedersen e Pfaffia tuberosa (Spreng.) Hicken que apresentam poucos estudos documentados na literatura e são espécies praticamente intocadas sob o ponto de vista fitoquímico e de avaliação de atividades biológicas. O estudo foi monitorado pela avaliação da atividade antioxidante (ensaios Folin-Ciocalteu, redução do radical DPPH e ORACFL); antiproliferativa (frente a linhagens de células tumorais e não tumorais); antimicrobiana (frente a bactérias, leveduras e protozoários); anti-inflamatória (in vitro pelo ensaio da desnaturação da albumina bovina (BSA) e in vivo empregando o modelo de edema de pata e pleurisia em camundongos induzida por carragenina). No estudo fitoquímico, primeiramente, obteve-se o perfil químico dos extratos bioativos (CCDC, CG, CLAE e ESI-MS), sendo possível identificar algumas substâncias conhecidas diretamente nos extratos brutos (desreplicação). Os extratos bioativos com substâncias que não puderam ser identificadas na etapa de desreplicação foram submetidos ao fracionamento biomonitorado e as substâncias isoladas foram identificadas utilizando-se métodos espectroscópicos de análise (UV, RMN 1H e RMN 13C) e espectrometria de massas e as substâncias isoladas foram submetidas à avaliação das atividades biológicas. Os extratos brutos e fases de partição dos extratos etanólicos apresentaram considerável atividade antioxidante nos três ensaios realizados, observando correlação positiva da capacidade antioxidante com o conteúdo de fenólicos totais solúveis. Estas amostras mostraram atividade antiproliferativa frente a linhagens de células tumorais, com valores de concentração mínima necessária para inibição total do crescimento celular, TGI, variando entre 0,42 e 250 ?g/mL para as amostras bioativas e não se mostraram citotóxicas para linhagem de células controle, não tumoral, VERO (TGI ? 250 ?g/mL). Ainda, exibiram atividade antimicrobiana frente a bactérias (com valores de concentração biocida mínima, CBM, entre 0,5 e 2,0 mg/mL), frente a fungos (CBM de 1,0 mg/mL) e frente a protozoários com atividade tripanocida moderada para formas tripomastigotas de Trypanosoma cruzi (com % de tripomastigotas viáveis variando de 4,70 a 69,40% para os extratos brutos a 4,0 mg/mL e para as fases de partição a 2,0 mg/mL) e com atividade leishmanicida para formas amastigotas-like de Leishmania (L.) amazonensis (com % de amastigotas viáveis variando de 0 a 8,10% para os extratos brutos a 1,0 mg/mL e para as fases de partição a 0,5 mg/mL). Os flavonoides isolados patuletina 3-O-B-D-glucopiranosídeo e tilirosídeo apresentaram promissora atividade antiprotozoário com efeito na viabilidade celular tanto para tripomastigotas de T. cruzi, quanto frente à amstigotas de L. (L.) amazonensis. Os extratos apresentaram atividade anti-inflamatória in vitro com inibição da desnaturação da proteína BSA (IC50 entre 41,1 e 400 µg/mL) e em modelo in vivo onde as fases etanólicas da partição do extrato etanólico das duas plantas estudadas e os flavonoides isolados patuletina 3-O-B-D-glucopiranosídeo e tilirosídeo inibiram o edema de pata induzido por carragenina e a migração de leucócitos na cavidade intrapleural induzido por carragenina, sendo também mensurado o extravasamento de proteínas pela reação de Bradford. O estudo fitoquímico monitorado pelas atividades biológicas e antioxidantes mostrou-se efetivo, sendo possível identificar cinco esteroides, três triterpenoides, três acetatos de triterpenoides, quatro ácidos orgânicos e três flavonoides nas amostras bioativas. Pode-se também isolar dois flavonoides (Patuletina 3-O-B-D-glucopiranosídeo e Tilirosídeo). Os resultados obtidos justificam, pelo menos em parte, a utilização popular de espécies do gênero Pfaffia e confirma o potencial da família Amaranthaceae como fontes de moléculas bioativas e insumos para a saúde, sendo importante a continuidade dos estudos com as amostras bioativas mais promissoras com vistas a aplicações farmacológicas, biotecnológicas e clínicas / Abstract: Pfaffias are plants of the Amaranthaceae family, Gomphreneae tribe, known as Brazilian ginseng and "paratudo". Plants have great importance in folk medicine, being used in the treatment of various diseases. Some species of Pfaffia exhibit pharmacological studies reporting anti-nociceptive, anti-inflammatory, antimicrobial, analgesic and antitumor activities and suggesting a potential for biologically active agents in these vegetable matrices. Thus, this study aimed to explore for extracts, fractions and bioactive compounds in Pfaffia townsendii Pedersen and Pfaffia tuberosa (Spreng.) Hicken, which show little documented data in the literature studies and are species virtually untouched from the point of view of phytochemical evaluation of biological activities. The study was monitored by the evaluation of the activities: antioxidant (Folin-Ciocalteu assays, reducing the DPPH and ORAC-FL); antiproliferative (against strains of tumor and non-tumor cells); antimicrobial (against bacteria, yeasts and protozoa); anti-inflammatory (in vitro assay for denaturation of bovine serum albumin (BSA) and in vivo study using the model of paw edema and carrageenan-induced pleurisy in mice). In the first step, the phytochemical, it was obtained the chemical profile of the bioactive extracts (TLC, GC, HPLC and ESI-MS), and it was possible to identify some known substances directly from crude extracts (dereplication). The bioactive extracts with substances that could not be identified in the dereplication step were subjected to bioassay-guided fractionation and isolated substances were identified using spectroscopic analysis methods (UV, 1H and 13C NMR) and mass spectrometry and isolated compounds were subjected to evaluation of bioactivity. Extracts and phases of partition of ethanol extracts showed significant antioxidant activity in the three trials, observing positive correlation between antioxidant capacities with the phenolic content. These samples showed antiproliferative activity against tumor cell lines with minimum concentration values required for complete inhibition of cell growth, TGI, ranging between 0.42 and 250 ug/mL for bioactive samples and were not cytotoxic to the cell line control, non-tumor VERO (TGI ? 250 ug/mL). They also showed antimicrobial activity against bacteria (with values of Minimum Biocidal Concentration, MBC, between 0.5 and 2.0 mg / ml), against fungi (MBC 1.0 mg mL) and trypanocidal moderate activity against protozoans such as trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi (% viable with trypomastigotes ranging from 4.70 to 69.40% for the gross 4.0 mg/mL and extract phases partition to 2.0mg/mL), leishmanicidal activity for axenic amastigotes of Leishmania (L.) amazonensis (% viable with amastigotes ranging from 0 to 8.10% for the crude at 1,0 and 0.5 mg/mL extracts). The flavonoids isolated patuletin 3-O-B-D-glucopyranoside and tiliroside showed promising antiprotozoal activity and effect on cell viability for both T. cruzi tipomastigotas, and amastigotas of L. (L.) amazonensis. The extracts exhibited anti-inflammatory activity in vitro with inhibition of denaturation of BSA protein (IC50 between 41.1 and 400 ug/mL), where the ethanolic phases for the ethanol extract partition and flavonoids isolated patuletin 3-O-B-D-glucopyranoside and tiliroside inhibited in vivo the paw edema induced by carrageenan and the migration of leukocytes in the pleural cavity induced by carrageenan. The extravasation of proteins were also measured by Bradford reaction. The phytochemical study was monitored by biological and antioxidants activities, and was possible to identify five steroids, three triterpenoids, three acetates triterpenoids, four phenolic acids and three flavonoids in bioactive samples. It is as well possible to isolate two flavonoids (patuletin 3-O-B-D-glucopyranoside and tiliroside). The results obtained in this study justify, at least in part, the popular use of the genus Pfaffia and confirm the potential of the Amaranthaceae family as a source of bioactive molecules and its inputs to health. It is important to continue on the studies with the most promising bioactive samples, with goals on the pharmaceutical, biotechnological and clinical applications / Doutorado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Doutor em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Microrganismos endofíticos apresentam grande diversidade genética e metabólica, com enorme potencial biotecnológico para aplicações em diferentes áreas. A bioprospecção desses microrganismos possibilita a obtenção de novos bioprodutos agrícolas. Endofíticos podem ser aplicados, por exemplo, para a biorremediação de áreas contaminadas ou para o controle de insetos pragas pela produção de compostos entomotóxicos. Apesar de sua importância, ainda existem poucos estudos voltados à bioprospecção da microbiota endofítica em regiões tropicais. Assim, o presente trabalho pretendeu verificar a diversidade de microrganismos endofíticos cultiváveis em milho e a comparar a diversidade de metabólitos desses endofíticos ao de isolados de Citrus. Também foi explorado o potencial dos diferentes endófitos em degradar os principais inseticidas (lufenuron, spinosad, chlorpyrifos ethyl, lambda-cyhalothrin e deltamethrin) utilizados em lavouras de milho para o controle de lagartas de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera, Noctuidae), para exploração dos mesmos em programas de biorremediação. Finalmente, foi avaliado o potencial entomotoxida dos extratos orgânicos dos endofíticos estudados até a identificação das moléculas ativas. Foram isolados 30 microrganismos endofíticos de milho (27 bactérias e 3 fungos), os quais foram comparados aos endófitos de citros do acervo do Laboratório de Genética de Microrganismos \"Prof. João Lúcio de Azevedo\". Dos isolados obtidos, sete apresentaram capacidade de metabolização dos cinco inseticidas testados, sendo a maioria deles capaz de metabolizar pelo menos um dos inseticidas testados. Ensaios de bioatividade dos extratos orgânicos do cultivo dos endofíticos contra lagartas de S. frugiperda, levaram à identificação de extratos que induziram 100% de mortalidade de lagartas do terceiro ínstar. O isolamento e a caracterização da molécula ativa do extrato produzido pelo isolado LGM-CR-JM-02 - Streptomyces badius, permitiu a identificação da valinomicina (CL50 = 4,38 Mi g/mL) como molécula ativa. Assim, demonstramos que a comunidade de endofíticos pode reunir grande diversidade biológica e, principalmente, metabólica, sendo uma excelente oportunidade para exploração de microrganismos com potencial para biorremediação e produção de compostos com atividade inseticida / Endophytes are microorganisms with great genetic and metabolic diversity, and with a huge biotechnological potential for applications in different areas. The bioprospection of these microorganisms makes possible to obtain new agricultural bioproducts. Endophytes may be applied, for example, to bioremediation of contaminated areas or to the control of pest insects with entomotoxic compounds. Despite its importance, there are few studies focused on the bioprospection of endophytic microbiota in tropical regions. Thus, we investigated the biological diversity of culturable endophytes from maize and compared the diversity of metabolites endophytes from maize and Citrus produced. We also explored the potential of different endophytes to grow in minumum medium containing one of the main insecticides (lufenuron, spinosad, chlorpyrifos ethyl, lambda-cyhalothrin and deltamethrin) applied in maize crops to control the caterpillars Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera, Noctuidae) as the only source of carbon in order to evaluate their potential use in bioremediation programs. Finally, we evaluated the entomotoxic potential of the organic extracts of the endophytes and the fractions up to the identification of the active molecules. In total, thirty maize endophytes (27 bacteria and 3 fungi) and five endophytes isolated from citrus that were deposited at the collection of the Laboratory of Genetics of Microorganisms \"Prof. João Lúcio de Azevedo\" were investigated. Seven out of 35 endophytes tested metabolized the five insecticides used, and most of them were able to metabolize at least one of the tested insecticides. Bioactivity assays of the organic extracts produced from cultured endophytes were fed to third instars of S. frugiperda causing 100% mortality. The isolation and characterization of the active molecule produced by one of these isolates (LGM-CR-JM-02 - Streptomyces badius) led to the identification of valinomycin (LC50 = 4.38 Mi g / mL) as the active molecule. Thus, we demonstrated that endophytes can gather great biological and metabolic diversities, demonstrating endophytes are an excellent opportunity for the identification of microorganisms with potential for bioremediation and production of compounds with insecticidal activity

Neste trabalho, foram preparados inicialmente dez diferentes extratos brutos etanólicos de diferentes espécies vegetais da região da mata atlântica mineira das proximidades do município de Alfenas-MG. Após a padronização do teste antichagásico in vitro contra as formas epimastigotas da cepa Y, e utilizando-se o método colorimétrico com solução de resazurina, todos os extratos foram submetidos ao bioensaio, o que permitiu a determinação do extrato de maior potencial anti-epimastigota como sendo da Miconia willdenowii, da família Melastomataceae. Tal extrato, foi posteriormente submetido a particionamento por extração líquido-líquido com hexano, acetato de etila e uma mistura etanol:água (1:3), o que permitiu separar compostos em grupos por diferença de polaridade. As 3 frações obtidas foram novamente submetidas ao teste biológico, para determinação do grupo de compostos de maior atividade. A fração acetato foi assim determinada como a de maior potencial contra as formas epimastigotas dos parasitas da doença de Chagas, sendo esta submetida ao fracionamento por cromatografia em coluna, obtendo-se assim ao final, um total de 12 subfrações. Estas foram na sequência submetidas também ao teste in vitro, determinando-se as de maior potencial contra os epimastigotas. No geral, três destas subfrações apresentaram maior atividade antichagásica (A2, A3 e A4), as quais foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) por conseguinte, a partir das quais puderam ser isoladas dois derivados de hidroquinonas, já relatadas para outras espécies de Miconia: miconidina e primina. As duas substâncias tiveram suas estruturas identificadas por espectroscopia de RMN e também espectrometria de massas, e confirmadas com dados da literatura. A quantificação das duas substâncias isoladas foi feita para cada amostra de M. willdenowii (extrato bruto, fração acetato e subfrações), o que permitiu deduzir que a presença de tais compostos, nestas amostras, é a principal responsável pela atividade tripanocida apresentada pelas mesmas. O bioensaio anti-T. cruzi realizado também para os compostos isolados permitiu observar o alto potencial tripanocida frente a forma epimastigota do parasita, apresentando valores de CE50 inferiores até mesmo que a droga padrão de referência, o benznidazol. O teste de citotoxicidade in vitro com fibroblastos derivados de pele humana normal também com a miconidina e primina, isoladas de M. willdenowii, demonstrou que estas só apresentavam efeito adverso a partir de 50 µg/mL (dentre as concentrações testadas), valor este superior ao CE50 apresentado pelas mesmas, sugerindo o alto potencial efetivo de utilização destes compostos na terapia da doença de Chagas. / In this work, ten different ethanol crude extracts were prepared from different plant species of rainforest nearby the city of Alfenas-MG. After standardization of in vitro antichagasical test against T. cruzi (Y strain) epimastigote form, and using colorimetric method with resazurin solution, all extracts had the activity evaluated and the most active was Miconia willdenowii extract, from the Melastomataceae family. This extract was subsequently subjected to partitioning by liquid-liquid extraction using hexane, ethyl acetate and ethanol:water (1:3) mixture, allowing the separation of compounds in groups by difference in polarity. The 3 fractions obtained were submitted to bioguided assay in order to determine the most active. The ethyl acetate fraction displaying the higher potential against epimastigote form of Chagas’ disease parasites was extensively purified under CC conditions. In the end, this process provided a total of 12 subfractions. All subfractions were subjected to bioguided assay, determining those with the greatest potential against epimastigote. Overall, three subfractions showed antichagasical activity (A2, A3 and A4), which were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC), and two hydroquinones derivatives previously reported for other species Miconia: miconidin and primin, could be isolated. Both compounds had their structures identified by NMR spectroscopy, mass spectrometry and confirmed by database comparison in the literature. The quantification of these two compounds was made for each sample of M. willdenowii (crude extract, acetate fraction and subfractions), which allowed deducing that their presence or absence is related to trypanocidal activity. The anti-T. cruzi bioassay, when performed to the isolated compounds, allowed observing higher trypanocidal potential than the reference drug (benznidazole). The in vitro cytotoxicity assay for miconidin and primin, using normal human skin-derived fibroblasts, showed that they only present cytotoxicity over 50 µg/mL, in which is higher than the EC50 presented by these compounds in the trypanocidal assay, suggesting high potential for effective use of these compounds as therapeutical alternative for Chagas’ disease after further studies. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O câncer representa uma das principais causas de morte no mundo. De acordo com a Organização Mundial da Saúde (OMS) surgem, a cada ano, nove milhões de casos e cerca de cinco milhões de pessoas morrem em consequência da doença. Apesar do aprimoramento nos métodos de diagnóstico, muitos tipos de câncer ainda são diagnosticados em fase avançada, assim os tratamentos convencionais são apenas paliativos. Muitos medicamentos rotineiramente utilizados em tratamento quimioterápico são oriundos de produtos naturais e o Brasil dispõe de uma ampla diversidade de plantas, as quais são úteis como fonte de pesquisa para a identificação de novos compostos com atividade antitumoral. O objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial antitumoral de nove espécies de plantas coletadas na Mata Atlântica da região sul de Minas Gerais, sendo elas: Duguetia lanceolata (folhas), Trichilia emarginata (folhas), Miconia willdenoii (folhas), Allophylus racemosus (folhas e galhos), Metrodorea stipularis (folhas), Mollinedia widgrenii (folhas), Casearia arborea (folhas), Acacia polyphylla (folhas) e a Casearia sylvestris (folhas). Os resultados mostraram que o extrato obtido a partir das folhas de Casearia sylvestris foi potencialmente ativo contra cinco linhagens diferentes de células derivadas de cânceres humanos: A549 (adenocarcinoma pulmonar), MCF7 (adenocarcinoma mamário), HepG2 (hepatocarcinoma), U251 MG (glioblastoma), HT144 (melanoma). Assim sendo, o extrato bruto dessa espécie foi fracionado por extração líquido-líquido a fim de selecionar as frações enriquecidas com substâncias bioativas. As frações acetato de etila e hexânica (substâncias de média e baixa polaridade) mostraram promissoras nos resultados dos ensaios bioguiados, sendo que a fração acetato foi selecionada para isolamento de substâncias com potencial antitumoral. Após Cromatografia em Coluna e Cromatografia Líquida foi possível o isolamento da casearina D. A mesma foi submetida aos testes biológicos e verificou-se que tem potencial antitumoral sobre as linhas de hepatocarcinoma e adenocarcinoma pulmonar. / Cancer has emerged as a major cause of morbidity and mortality in recent times. According the report from the World Health Organization (WHO), there were 9 million deaths with 5 million new cases of cancer for wear. Unfortunately, many cases are still diagnosed at advanced stages when treatment options are only palliative. Many medications routinely used in chemotherapy are derived from natural products, and Brazil has a wide diversity of plants, which are useful as a source of research for the identification of new compounds with antitumor activity. The aim of this study was to evaluate the anti-tumor potential of nine species of plants collected in the Atlantic Forest in the southern region of Minas Gerais, which are: Duguetia lanceolata (leaves), Trichilia emarginata (leaves), Miconia willdenoii (leaves), Allophylus racemosus (leaves and branches), Metrodorea stipularis (leaves), Mollinedia widgrenii (leaves) and Casearia arborea (leaves), Acacia polyphylla (leaves), Casearia sylvestris (leaves). The results showed that the extract obtained from Casearia sylvestris leaves were potentially active against five different strains derived from human cancer cells: A 549 (lung adenocarcinoma), MCF 7 (breast carcinoma), HepG2 (hepatocellular carcinoma), U251 MG (glioblastoma) HT 144 (melanoma). Thus, the crude extract of this species was fractionated by liquid-liquid extraction in order to select the fractions enriched with bioactive substances. The ethyl acetate fraction (medium polarity substance) showed a higher antitumor activity and was selected for isolation for the isolation of substances with antitumor potential. After column chromatography, liquid chromatography has been possible to isolate the casearin D. The same was subjected to biological tests and have found that antitumor potential on the lines of hepatocellular carcinoma and lung adenocarcinoma. / Programa Institucional de Bolsas de Pós-Graduação - PIB-PÓS

Manguezais são ecossistemas costeiros que ocorrem na transição entre os ambientes terrestres e marinhos, ao longo das regiões tropicais e subtropicais, sofrendo influência direta do regime das marés. A comunidade microbiana diversificada é fundamental para a ocorrência da ciclagem de nutrientes e, portanto, manutenção da biodiversidade faunística e florística nestes ambientes. As actinobactérias correspondem um grupo heterogêneo de bactérias filamentosas, que naturalmente habitam o solo, adaptam-se às diversas condições do ambiente, produzem antibióticos e são capazes de colonizar a rizosfera e tecidos internos das plantas. Neste trabalho foi possível observar a diversidade de actinobactérias rizosféricas isoladas nos manguezais de Cananéia e Bertioga SP; avaliar a produção de metabólitos secundários antifúngicos desses microrganismos; analisar o perfil químico dos extratos orgânicos das actinobactérias por espectrômetro de massas, seguidos de avaliação dos constituintes químicos desses extratos por cromatografia em camada delgada e coluna preparativa para separação dos mesmos, onde após os bioensaios com as frações ativas, foi determinado a concentração inibitória mínima dessas frações. / Mangroves are coastal ecosystems which occur in the areas of transition between marine and terrestrial environments throughout the tropical and subtropical regions, suffering direct tide influence. The diverse microbial communities are important to the nutrient cycling occurrence and consequently to the maintenance of these environments fauna and flora biodiversity. The Actinobacteria are a heterogeneous group of filamentous bacteria that naturally inhabit the soil. They can easily adapt to different environmental conditions, producing antibiotics and colonizing the rhizosphere and plants internal tissues. This study aims were: to allow the assessment of the diversity of the diversity of rhizosphere Actinobacteria isolated from mangroves located in Cananeia and Bertioga, cities under the jurisdiction of Sao Paulo State; to evaluate the production of antifungal secondary metabolites of these microorganisms; to analyze the chemical profile of organic extracts of Actionobacteria by mass spectrometry, followed by the evaluation of the chemical components of theses extracts through thin-layer chromatography and preparative column for their separation. After this process minimum inhibitory concentration of the active fractions of the bioassays were determined.