Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-24Bitstream added on 2014-06-13T19:28:58Z : No. of bitstreams: 1 zaneti_vm_me_araiq.pdf: 906459 bytes, checksum: 31326d4c24892f34266c70f06d8d025a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Neste trabalho foi utilizada a metodologia de superfície de resposta, por meio de delineamento composto central rotacional para investigar as melhores condições de produção de xilanase pelo fungo filamentoso Aspergillus niger. Este micro-organismo é considerado um bom produtor de enzimas xilanases, sendo que estas enzimas têm a capacidade de hidrolisar xilana em xilooligossacarídeos e xilose. Produtos assim obtidos estão sendo cada vez mais utilizados em rações animais para melhoria da flora intestinal; para a produção de xilitol e também para a produção de álcool de segunda geração. A análise estatística dos resultados obtidos neste trabalho mostrou que as melhores condições de produção da enzima extracelular foram: pH 5,0, temperatura de 37 ºC, agitação de 80 rpm, e concentração de fonte de carbono de 2 % (p/v). Após a determinação das condições ideais, o extrato foi clarificado por filtração em caulim, e as proteínas assim obtidas foram precipitadas com acetona ocorrendo uma melhora sensível na atividade específica. Após filtração em Sephadex G-75 foi mostrada a presença de atividade xilanolítica em dois picos, e as frações referentes ao segundo pico foram reunidas e submetidas à coluna de troca iônica DEAE-Trisacryl, na qual se constatou uma fração sendo eluída com 0,06 mol/L de NaCl, contendo atividade de xilanase. A SDS-PAGE da fração majoritária revelou uma única banda protéica com massa molar aparente de 34 kDa. A cromatografia em sílica gel P60 revelou que os produtos de hidrólise foram constituídos de xilooligossacarídeos, após 120 min de hidrólise / In the present work, response surface methodology was utilized, through appliance of rotational central composite design to investigate the best conditions of production of xylanase by the filamentous fungus Aspergillus niger. This microorganism is considered a good producer of xylanase enzyme, which has the ability to hydrolyze hemicelluloses in xylooligosaccharides and xylose. Products obtained this way are being increasingly utilized in animal feeding to improve the intestinal flora, to produce xylitol and also to produce second generation ethanol. The statistical analysis of the obtained results showed that the best conditions for the extracellular enzyme production were: pH 5.0, 37 ºC, 80 rpm shaking, and 2 % (w/v) carbon source concentration. After the determination of the ideal production conditions, the enzyme extract was clarified through filtration in kaolin, and the protein obtained were precipitated with acetone, with a sensitive increase in the specific activity. After molecular exclusion chromatography in Sephadex G-75 the presence of xylanolitic activity was shown in two peaks, and the fractions related to the second peak were collected and submitted to DEAE-Trisacryl ion exchange column, in which were observed fractions showing xylanase activity that was eluted with 0.06 mol/L NaCl. SDS-PAGE of the majority fraction revealed only one proteic band with apparent molar mass of 34 kDa. P60 silica gel chromatography revealed that the product of hydrolysis was constituted of small xylooligosaccharides released after 120 min of hydrolysis

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:29:02Z : No. of bitstreams: 1 masiero_moc_me_araiq_parcial.pdf: 159337 bytes, checksum: 4eb636fc3724eef5326659eceac0184f (MD5) Bitstreams deleted on 2015-07-02T12:36:09Z: masiero_moc_me_araiq_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-02T12:37:31Z : No. of bitstreams: 1 000685621_20190823.pdf: 159179 bytes, checksum: 87cac4ca086a6fd34d713ed1c92719c3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A biomassa lignocelulósica contém quantidades significativas de fontes de carbono, sendo assim uma fonte de energia renovável. O presente trabalho teve como objetivo estabelecer meios líquidos e sólidos para o estudo dos efeitos dos inibidores presentes nos hidrolisados do bagaço de cana-de-açúcar e, por fim, estabelecer um coquetel de inibidores que permitisse o crescimento e a fermentação da levedura Saccharomyces cerevisiae no meio líquido estabelecido. Por esta razão, o conjunto de resultados deste trabalho compreende três partes. A primeira parte foi dedicada ao estabelecimento de meios sólidos e líquidos para comparação de leveduras na presença do inibidor mais abundante do hidrolisado do bagaço de cana, o ácido acético. No meio sólido YPD, as diferentes linhagens de leveduras ensaiadas sofreram menos os efeitos inibitórios deste ácido do que o meio sintético solidificado. Em meio líquido, foi necessário adicionar 2% de extrato de levedura para ativar o crescimento da levedura 63M, mas este efeito foi suprimido em presença de ácido acético. As variações em pH inicial (3,5 – 5,5) afetaram mais a produção de etanol do que a biomassa, ao passo que a viabilidade não variou. A segunda parte deste trabalho foi dedicada ao estabelecimento de um meio sintético que permitisse o crescimento e fermentação da linhagem 63M em presença de ácido acético. O aumento de 33% em biomassa na presença de 83 mmol/L de ácido acético foi devido à elevação da glicose (10-18%) e do inóculo (5-10 mg/mL). As concentrações crescentes e variadas de ácido acético em meio sintético foi utilizado para estudar seus efeitos sobre o crescimento (inibição acima de 50 mmol/L), a viabilidade (acima de 250 mmol/L) e a produção de etanol (acima de 83 mmol/L). As concentrações de outros inibidores... / Lignocellulosic biomass contains significant quantities of carbon sources, being a renewable energy source. The aim of the present work was to determine liquid and solid media for the study of the effects of inhibitors present in hydrolysates of sugarcane bagasse, and to establish a cocktail of inhibitors that allow the growth and the fermentation of the yeast Saccharomyces cerevisiae in the liquid medium established. Thus, the results of this work consist of three parts. The first part was dedicated to establishing solid and liquid media in order to compare different yeast strains in the presence of the most abundant inhibitor found in hydrolysates of sugarcane bagasse, the acetic acid. On YPD solid medium, this acid had less inhibitory effect on the different yeast strains tested than on the synthetic solid medium. In liquid medium, it was necessary to add 2% yeast extract to activate the growth of the strain 63M, but this effect was abolished in the presence of acetic acid. Variations in the initial pH (3.5 - 5.5) affected more the ethanol production than the biomass, while the viability was not influenced. The second part of this work was dedicated to establishing a synthetic medium that allows the growth and fermentation of the strain 63M in the presence of acetic acid. The 33% increase in biomass in the presence of 83 mmol/L acetic acid was due to the high glucose concentration (10-18%) and inoculum (5-10 mg/mL) used. The increasing concentrations of acetic acid in the synthetic medium were used to study its effects on growth (inhibition above 50 mmol/L), viability (over 250 mmol/L) and ethanol production (above 83 mmol/L). The concentrations of the other inhibitors had different limits of tolerance by the yeast... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-25Bitstream added on 2014-06-13T20:50:03Z : No. of bitstreams: 1 cardoso_ra_me_botfm.pdf: 896730 bytes, checksum: 97ac1a0ea8e45d9861c31c7feaac2ecb (MD5) / Fundação para o Desenvolvimento Médico e Hospitalar (Famesp) / A tecnologia de produção de anticorpos monoclonais revolucionou a investigação diagnóstica, especialmente a análise dos grupos sanguíneos em imuno-hematologia. O polimorfismo das hemácias humanas torna a produção de novos insumos extremamente necessária. Dentre os sistemas de grupos sanguíneos descritos, o sistema Rh tem se mostrado um dos mais complexos pela vasta composição de antígenos. Analisando aspectos estruturais do antígeno D associado às técnicas de biologia molecular, identificam-se numerosas variantes deste antígeno por trocas de DNA entre genes similares levando a alteração de epítopos e consequentemente de padrão de expressão fenotípica na superfície das hemácias. Desvendar e identificar estas variantes com insumos biotecnológicos desenvolvidos no país foi o desafio desta pesquisa, onde anticorpos monoclonais contra antígenos eritrocitários foram produzidos através de fusão celular, utilizando-se células de baço de camundongos BALB/c imunizados com hemácias fenótipo D categoria IVa. Nove fusões foram realizadas e os sobrenadantes de cultura foram triados por teste de hemaglutinação em microplacas. Foram congelados e mantidos em nitrogêncio líquido 41 híbridos. Estes híbridos foram clonados e mantidos em meio de cultura para a obtenção dos anticorpos monoclonais, resultando em 12 clones IgG1, 5 IgG2a e 10 IgM. Os clones foram selecionados para produção de líquido ascítico, através da injeção dos clones em camundongos BALB/c. Os anticorpos monoclonais produzidos, inicialmente não demonstraram a especificidade foco do presente trabalho que foi a produção de anticorpos anti-D, no entanto, os hibridomas podem ter secretado diferentes especificidades de anticorpos monoclonais, de acordo com os antígenos presentes na membrana das hemácias utilizadas para a imunização dos camundongos. Uma segunda fase da pesquisa está sendo... / The blood groups analyses in immunohematology have been highly benefited based on the advance of the monoclonal antibody technology improvement on diagnostics investigation. The human red blood cell polymorphism increases the need for new alternatives. The Rh system blood group is the most complex of all, due to the vast antigenic composition. When analyzing the structural aspects of the D antigen in combination with the molecular techniques, based upon DNA exchange between similar genes it is possible to identify a huge number of partial D variants, this situation leads to a change of epitopes and hence the red blood cell phenotypic expression pattern. Unveil and identify these variables through the use of local biotechnology was the challenge of this research. Monoclonal antibodies against human red blood cell were produced by cell fusion, using spleen cells from immunized BALB/c mice and DIVa red blood cells. Nine fusions had been made and the culture supernatants were selected to the hemaglutination test using microplates. Forty-one hybrids had been frozen and kept in liquid nitrogen. These hybrids had been cloned and kept in the culture to collect monoclonal antibodies, resulting in 12 IgG1, 5 IgG2a e 10 IgM. The clones had been selected for ascitic fluid production, by injection in BALB/c mice. The monoclonal antibodies produced initially had not produced the anti-D as expected by the research. However, the hibrydomas could have created different specificities of monoclonal antibodies, according to the antigen located in the donor red blood cells membrane used in the mice’s immunization. The second phase of the research is being done to confirm the monoclonal antibodies specificities produced through the deployment of new tests to immunoglobulin identification

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:08:59Z : No. of bitstreams: 1 sabino_js_me_botfm.pdf: 566217 bytes, checksum: 240c61c93ab7c7cbdc92982de0adea0d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Secretaria do Estado da Saúde de São Paulo / O Sistema Rh é constituído por 48 antígenos eritrocitários, sendo o antígeno Rh D, considerado o mais imunogênico seguido dos antígenos c, E, C, e. A probabilidade de imunização por Rh D é muito mais alta quando comparada com outros antígenos de grupos sanguíneos humano que ocasionalmente produzem anticorpos irregulares, tornando esse sistema de grande importância clínica. O antígeno Rh D é composto por 37 epítopos, formando um mosaico. Qualquer mudança de aminoácidos em uma parte da proteína pode afetar a expressão da seqüência de epítopos ou resultar em novos epítopos. Por isso, os antígenos do grupo sanguíneo Rh D podem apresentar variações de sua expressão na membrana eritrocitária. As hemácias com fenótipo Rh D fraco diferem quantitativamente das células Rh D positivas normais, por serem definidas como tendo todos os epítopos Rh D presentes, porém com uma redução dos níveis de antígeno Rh D. As hemácias Rh D parcial diferem qualitativamente das células Rh D positivas normais, pois carecem de um ou mais epítopos que formam o antígeno Rh D. Em geral, os fenótipos Rh D parcial se expressam devido à presença de genes híbridos, os quais ocorrem predominantemente em indivíduos de origem africana. O número de amostras classificadas como Rh D fraco e Rh D parcial depende das características do reagente utilizado para a fenotipagem Rh D. Anteriormente os reagentes utilizados eram os policlonais, porém atualmente, com a descoberta do anticorpos monoclonais e a dificuldade de obtenção dos policlonais, tem-se utilizado apenas os reagentes monoclonais. Desde então, diferenças entre a reatividade de vários reagentes, especialmente na detecção de Rh D fraco e Rh D parcial, têm criado uma discussão sobre o teste adequado para doadores de sangue, pacientes e receptores. / The Rh System is constituted by 48 red cells antigens, where the Rh D antigen is considered the most immunogenic followed by c, E, C, e antigens. The probability of immunization by Rh D is higher when is compared with other human sanguineous groups antigens, that occasionally produce irregular antibodies, what makes this system very important clinically. The antigen Rh D is composed by 37 epitopes, which forms a mosaic. Any amino acid change in a protein part can affect the expression of the epitopes sequence or results in new epitopes. Therefore, the sanguineous group Rh D antigens can present variations in the red cells membrane expression. The red cells with weak D phenotype are quantitatively different from the Rh D normal positive cells, because of the presence of all epitopes in their definition, but with a reduction of Rh D antigen levels. The red cells D partial are qualitatively different from the Rh D normal positive cells, because they need one or more epitopes that form Rh D antigen. In general, the partial D phenotype occurs due to the presence of hybrid genes, which occur predominantly in African individuals. The number of classified samples as weak D and partial D depends on the reagent used for the Rh D phenotyping characteristics. Previously the used reagents were polyclonal, but currently, with the discovery of the monoclonal antibodies and the difficulty of attainment of the polyclonal, it has been used only monoclonal reagents. Since then, differences between the reactivity of many reagents, especially in the detention of weak D and partial D, have been created a discussion about the apropriated tests for blood donators, patients and receivers.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2708.pdf: 1722678 bytes, checksum: c0ee45aaea69459b47db244e6d015ad4 (MD5) Previous issue date: 2009-10-16 / Universidade Federal de Sao Carlos / Microorganisms represent an important source for production of bioactive metabolites for diverse applications. The production of these substances is directly related to the culture medium associated with sources of carbon and nitrogen available. Thus this study aimed to establish an appropriate composition of culture media for growth of Streptomyces carpaticus, Streptomyces acrimycini and Streptomyces cebimarensis. These microorganisms were isolated from marine sediments that were preserved in cryovials stored at-80ºC. The species studied were grown on solid media ISP4, ISP5 and GYM and phenotypically characterized. It was observed that Streptomyces carpaticus developed uniformly in all culture media and presented production of pigment in Gym medium. Microorganisms were also grown in solid media (Gym, A1RDP, ISP4 and ISP5). It was observed that Gym is the best medium to promote the microorganism growth. The strains were grown in different concentrations on osmotic medium Gym and on minimal medium with different sources of carbon and nitrogen in crops with flasks. The three strains were grown in batch bioreactors using conventional Gym medium and it was obtained 4 g / L of cell mass of S. carpaticus and S. acrymicini and 6 g / L of cell mass of S. cebimarensis. It was observed the presence of substances with cytotoxic activity on the breeding grounds. Besides, it was observed that the three species probably present diauxic behavior. S. carpaticus consumed preferentially maltose, while other species used glucose first. / Os microrganismos representam uma fonte importante para produção de metabólitos bioativos com diversas aplicações. A produção destas substâncias está diretamente relacionada aos meios de cultura associados às fontes de carbono e nitrogênio disponíveis. Desta forma o presente trabalho teve como objetivo estabelecer uma composição adequada de meios de cultura para o crescimento de Streptomyces carpaticus, Streptomyces acrimycini e Streptomyces cebimarensis isolados de sedimento marinho que foram preservadas em criotubos acondicionados a 80oC. As espécies estudadas foram cultivadas nos meios sólidos ISP4, ISP5 e GYM e caracterizadas fenotipicamente em que salienta-se o Streptomyces carpaticus que desenvolveu-se de forma homogênea em todos os meios de cultivo e apresentou produção de pigmento em meio Gym. As também foram cultivadas em meios sólidos (Gym, A1RDP, ISP4 e ISP5), sendo o melhor meio para crescimento o Gym, as linhagens foram cultivadas em diferentes concentrações osmóticas em meio Gym e em meio mínimo com diferentes fontes de carbono e nitrogênio em cultivos com frascos agitados. As três linhagens foram cultivadas em batelada utilizando-se biorreatores convencionais com meio Gym e obteve-se em termos de massa celular 4 g/L para S. carpaticus e S. acrymicini e 6 g/L para S. cebimarensis. Observou-se também a presença de substâncias com atividade citotóxica nos caldos de cultivo. Observou-se que as três espécies apresentavam comportamento possivelmente diáuxico. S. carpaticus consumiu maltose preferencialmente, diferindo das outras espécies que utilizam primeiramente glicose.

Cyphomandra betacea, popularmente conhecida como tomate árvore ou tamarillo, é uma planta de origem andina da família Solanaceae, com alto potencial econômico como frutífera. A propagação desta espécie ocorre principalmente através de sementes, o que eleva a variabilidade genética, prejudicando a produção de mudas para cultivo em larga escala. Uma alternativa para a produção de mudas é a propagação in vitro. Neste contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o comportamento in vitro de diferentes explantes de C. betacea frente a reguladores de crescimento, assim como determinar a atividade antioxidante e conteúdo fenólico em folhas, frutos in vivo e folhas de plantas micropropagadas de tamarillo. Os resultados obtidos mostram que a micropropagação por subdivisão de segmentos nodais em meio MS sem reguladores de crescimento, é uma alternativa viável para a obtenção de plantas uniformes a partir de explantes oriundos de plantas selecionadas. Regeneração direta foi obtida através do cultivo de segmentos de hipocótilos em meio MS contendo 0,5 mg/L de BA, servindo como alternativa de propagação. Auxinas como 2,4-D, picloram e ANA induziram a formação de calos em explantes foliares e caulinares de C. betacea. Entretanto, a elevada oxidação fenólica de explantes e calos impediu a regeneração indireta de plantas a partir destes calos. Por outro lado, regeneração indireta por organogênese foi obtida de calos formados na ausência de reguladores quando transferidos para meio MS com 0,5 mg/L de BA. Extratos foliares de C. betacea apresentaram maior atividade antioxidante do que os sucos de frutos maduros e imaturos. Reguladores de crescimento influenciam a atividadade antioxidante, de folhas de plântulas in vitro. Tratamentos com BA induzem um aumento no teor de polifenóis totais e na atividade antioxidante in vitro. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-05-29T18:57:19Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Valquiria de Lima Tavares.pdf: 1080543 bytes, checksum: d6972c52d4a04a2bb1f389e82f38cefc (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-29T18:57:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Valquiria de Lima Tavares.pdf: 1080543 bytes, checksum: d6972c52d4a04a2bb1f389e82f38cefc (MD5) / Cyphomandra betacea, popularly known as "tomate árvore" or "tamarillo", is an Andean species of the Solanaceae family with high economic potential as fruit crop. The propagation of this specie is made by seeds, a system that provoke undesirable variations in fruit shape, color, plant behavior and yield, among other traits. An alternative for the production of C. betacea is in vitro propagation. In this context, the aims of the present work were to evaluate the in vitro response of different explants of C. betacea to growth regulators, as well as the determination of the antioxidant activity and phenolic content of leaves, fruits and micropropagated plants of tamarillo. The results obtained showed that micropropagation by divition of nodal segments and their culture on MS medium without growth regulators, is a feasible alternative for the production of uniform propagules from selected plants. Direct regeneration was obtained from hypocotiles segments cultivated on MS medium supplemented with 0.5 mg/L of BA, representing an alternative for C. betacea propagation. Auxins, as 2,4-D, picloram and NAA, induced callus formation from leaves and stem explants of C. betacea. However, high phenolic oxidation of both explants and calli prevented the indirect regeneration from those calli. However, indirect organogenic regeneration was obtained from stem derived calli developed in the absence of growth regulators, when transferred to MS medium with 0.5 mg/L of BA. Leaf extracts of C. betacea exhibited higher antioxidant activity than the juice obtained from mature and immature fruits. In vitro growth on BA containing media duplicated the phenolic content and the DPPH free radical scavenging prorierty, and significantly reduced the CAT-like activity.

Estudos têm indicado que representantes de Meliaceae, incluindo o neem, apresentam metabólitos secundários com importante atividade biológica sobre insetos. Cabralea canjerana é uma Meliacaea arbórea endêmica da América e de ampla distribuição, utilizada na medicina indígena, devido as suas propriedades terapêuticas. Dentre os principais insetos-praga associados à produção agrícola da América do Sul, destacam-se a mosca-das-frutas-sul-americana - Anastrepha fraterculus e a lagarta-do-cartucho-do-milho - Spodoptera frugiperda. Este estudo objetivou avaliar os efeitos de extratos de frutos e sementes de C. canjerana obtidos em acetato de etila e etanol sobre a ingestão e a oviposição de adultos de A. fraterculus e sobre ovos, larvas e pupas de S. frugiperda. O extrato de fruto (acetato de etila), adicionado a dieta artificial (5mg/mL), em 48h, foi significativamente mais efetivo, induzindo 69,42% de mortalidade das moscas. Todos os extratos provocaram deterrência de oviposição, reduzindo significativamente o número de moscas por fruto de mamão papaia. Entre os demais efeitos biológicos sobre A. fraterculus verificou-se que o extrato de fruto (acetato de etila), induziu a mortalidade larval, ocorrência de pupas larviformes e de adultos anormais. Todos os extratos induziram atividade antialimentar e larvicida à S. frugiperda nas concentrações de 500 e 1000 ppm. O extrato de semente (acetato de etila), a 1000 ppm, foi o mais ativo, induzindo mortalidade larval e embrionária (100% e 69%, respectivamente). Do seu fracionamento em coluna de cromatografia foram obtidas cinco frações. A partir destas frações, a terceira, composta principalmente por triterpenos induziu mortalidade larval três vezes maior do que o extrato bruto. Todos os extratos e frações alteraram significativamente a duração do ciclo, do peso larval e induziram a ocorrência de diversas anormalidades larvais e pupais em S. furgiperda. A maior atividade dos extratos de semente e de fruto de C. canjerana, obtidos com acetato de etila indica a presença de limonóides e triterpenos com atividade biológica que, potencialmente podem vir a ser utilizados no manejo de A. fraterculus e S. frugiperda. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-12T13:12:51Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Flaviane Eva Magrini.pdf: 3507033 bytes, checksum: 672c1d6c7db8b39c5e1eb27bb41bff12 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-12T13:12:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Flaviane Eva Magrini.pdf: 3507033 bytes, checksum: 672c1d6c7db8b39c5e1eb27bb41bff12 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Many reports in the literature indicated that representatives of Meliaceae, including neem, have secundary metabolites with important biological activities on insects. Cabralea canjerana is a widely distributed America native tree from Meliacaea, witch it is and used in indigenous medicine, due to its therapeutic properties. Among the major insect pests associated with agricultural production in South America, stand out the South American fruit fly - Anastrepha fraterculus and the fall armyworm Spodoptera frugiperda. This study evaluated the effects of C. canjerana ethyl acetate and ethanol extracts of mature fruits and their seeds on the intake and oviposition the adults of A. fraterculus and on eggs, larvae and pupae of S. frugiperda. The ethyl acetate fruit extract added to an artificial diet (5mg/mL), within 48 hours, was significantly more effective than the other evaluated extracts, inducing 69.42% mortality of the flies. All extracts caused oviposition deterrence, significantly reducing the number of flies in papaya fruit. Among other biological effects on A. fraterculus was found that the ethyl acetate fruit extract, induced larval mortality, occurrence of larviform pupae and abnormal adults. All extracts induced antifeedant and larvicidal activity of S. frugiperda at concentrations of 500 and 1000 ppm. The ethyl acetate seed extract at 1000 ppm was the most active one, inducing both larval and embryonic mortality (100% and 69%, respectively). From its fractionation on Colum Chromathography five fractions were obtained. From these obtained fractions, the third one, composed principally of triterpenes induced larval mortality three times higher than the crude extract. All extracts and fractions significantly altered the life cycle, the larval weight and induced the occurrence of various abnormalities on S. furgiperda larvae and pupae. The greater activity of seed extracts and fruit of C. canjerana obtained with ethyl acetate indicates the presence of limonoids and triterpenes with biological activity that can potentially come to be used in the management of A. fraterculus. and S. frugiperda.

O gênero Aeromonas representa um importante grupo de patógenos emergentes responsáveis por diversas afecções em animais e em humanos. Nestes, as Aeromonas têm sido associadas a infecções intestinais e extraintestinais em pessoas imunocompetentes e comprometidas, tanto na comunidade como em ambiente hospitalar. É de consenso geral que a resistência a antibióticos nessas bactérias pode vir a representar um problema potencial no tratamento das infecções. Assim sendo, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a freqüência de resistência a distintos antibióticos em bactérias do gênero Aeromonas isoladas de humanos e de suínos, com ênfase na resistência a antibióticos -lactâmicos. Foram avaliados um total de 62 isolados, frente a um painel de 15 antibióticos, evidenciando-se uma elevada percentagem de bactérias resistentes a mais de três antibióticos -lactâmicos, além de alta resistência à tetraciclina, ao cotrimazol e ao cloranfenicol. Entre os antibióticos testados, os mais eficazes contra as Aeromonas foram os ciprofloxacina, os gentamicina e os tobramicina. Alta freqüência de Aeromonas resistentes à tetraciclina e ao cotrimazol foi evidenciada em isolados de suínos, mostrando a importância da pressão de seleção exercida por uso indiscriminado desses antibióticos nas rações. A maior parte dos isolados com resistências múltiplas apresentou plasmídios conjugativos e alguns plasmídios de baixo peso molecular; os quais, em princípio, podem estar associados à resistência a antibióticos. Entre os isolados com resistência a vários antibióticos -lactâmicos, um apresentou características fenotípicas de ESBL. A análise, através de PCR, confirmou a presença de três genes de -lactamases de espectro expandido (TEM, CTX e ampC) neste isolado. Os genes TEM e CTX foram transferidos por conjugação para E. coli, junto com a resistência ao cloranfenicol e à gentamicina, indicando que todos esses genes se encontram em plasmídio conjugativo. A análise da atividade -lactamásica em três isolados mostrou que a mesma é muito elevada em bactérias desse gênero. No isolado portador de ESBLs, as metalo--lactamases são responsáveis pela maior parte da atividade penicilinásica e apenas por uma pequena parte da atividade sobre cefotaxima. Constatou-se ainda que a atividade -lactamásica de Aeromonas é inibida por temperaturas acima de 40C, apresentando um decréscimo linear da atividade em função do tempo. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-07-04T14:20:02Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Adriana de Carli.pdf: 955154 bytes, checksum: 51d920df359e3b8b5871fd0d4d679bd0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-04T14:20:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Adriana de Carli.pdf: 955154 bytes, checksum: 51d920df359e3b8b5871fd0d4d679bd0 (MD5) / The genus Aeromonas represents an important group of emergent pathogens responsible for several disorders in animals and humans. In humans there are associated with intestinal and extra-intestinal infections in immunocompetent and compromised person of the community and hospital settings. It is of general concern that antibiotic resistance will potentially become a problem among Aeromonas strains causing infections. In this sense, the objective of the present work was to evaluate the frequency of resistance to different antibiotics in Aeromonas isolated from humans and suines, with enfasis in the resistance to -lactamic antibiotics. A total of 62 isolates were evaluated against a panel of 15 antibiotics showing high percentage of resistance to more than three -lactam antibiotics, as well as resistance to tetracycline, cotrimazol and cloranphenicol. The most efficient antibiotics against Aeromonas were ciprofloxacin, gentamicin, and tobramicin. High frequency of tetracyclin and cotrimazol resistance was evidenced among suine isolates, showing the selection pressure effect exerced by the indiscriminate use of these antibiotics on feed. Most isolates with multiple resistance harbored conjugative plasmids and some exhibited low molecular plasmids, that may be associated with antibiotic resistance. Among isolates with multiple resistance to -lactam antibiotics, one showed a characteristic ESBL phenotype. PCR analysis confirmed the presence of three extended spectrum -lactamase genes (TEM, CTX, and ampC) in this isolate. The TEM and CTX genes were transferred by conjugation to E. coli, together with the resistances to chloranphenicol and gentamicin, indicating that all these genes are present in a conjugative plasmid. The analysis of -lactamase activity in three isolates showed that is very high in this Aeromonas. In the isolate with ESBLs, the metalo--lactamases are responsible for the main penicillinasic activity but just for a small part of the activity on cefotaxime. The -lactamasic activity of Aeromonas is inhibited by temperatures over 40C, showing a linear decrease on the activity in function of time.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-04Bitstream added on 2014-06-13T20:59:35Z : No. of bitstreams: 1 blanco_idp_me_botfmvz.pdf: 957805 bytes, checksum: d8fe74b65ba19ca53f1ec69c651d4a0a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Em éguas, o aprimoramento e a aplicação de técnicas como a ICSI, TO e transferência nuclear é restrita devido à dificuldade de obtenção de oócitos in vivo, atribuída a particularidades dos folículos ovarianos da espécie. Em folículos pré-ovulatórios, a expansão do cumulus que ocorre com a progressão da maturação folicular e deposição de ácido hialurônico aumenta os índices de recuperação de oócitos por folículo, enquanto o tratamento superovulatório, embora não seja eficiente em aumentar os índices de recuperação por folículo, melhora os índices de recuperação por égua. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da administração de hCG na expansão das células da granulosa e do cumulus e no índice de recuperação de oócitos a partir de folículos imaturos de éguas superovuladas. Para isso 10 éguas foram submetidas à OPU após três diferentes tratamentos hormonais (G1: EPE, G2: EPE/hCG e G3:controle). Cada égua foi submetida aos três tratamentos, tendo sido alternados um ciclo onde era permitido que houvesse ovulação, sem interferência, e um ciclo com OPU. No ciclo onde devia ocorrer aspiração, as éguas recebiam aplicações de prostaglandina no sétimo e oitavo dia após a ovulação. Para os grupos 1 e 2, iniciava-se o tratamento com EPE no D7. Quando a maioria dos folículos atingia entre 22 e 27 mm, somente o grupo 1 recebia hCG, a EPE era suspensa e efetuava-se OPU 24 horas depois para ambos os grupos. Para o grupo controle, após a aplicação de prostaglandina a OPU era efetuada 24 horas após o folículo dominante atingir 27-30 mm. Em todos os grupos foram aspirados folículos entre 10 e 35 mm. Não houve diferença entre os 3 grupos quanto aos índices de recuperação de oócitos por folículo, com médias de 15% a 16,7%. Entretanto, a hCG foi capaz de induzir uma expansão e luteinização precoce das células foliculares. / In mares, the use of artificial reproductive techniques (ART) such as intracitoplasmatic sperm injection (ICSI), oocyte transfer (OT), and cloning is limited by the low availability of oocytes obtained either in vitro or in vivo. The low recovery rate of oocytes from immature follicles seems to be linked with anatomical particularities of the follicular wall. In pre-ovulatory follicles (>35mm in diameter), final oocyte maturation is accompanied by the expansion of the cumulus, which releases the oocyte from the follicular wall resulting in increased recovery rates after follicular aspiration. The number of oocytes recovered in each OPU (Ovum Pick Up) section should be higher with superovulation. However, although the total number of oocytes recovered by each individual mare is increased, the recovery rate per follicle is still low. Treatment with hCG modifies the intra-follicular environment by inducing precocious expansion of the granulosa cells, leading to a higher recovery rate during OPU of pre-ovulatory follicles. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of hCG treatment on the recovery rate of oocytes obtained from immature follicles in mares superovulated with Equine Pituitary Extract (EPE). Ten mares were rotated in three different treatments: G1 – superovulated with EPE; G2 – Superovulated with EPE and treated with hCG, and G3 – Control. For all treatments, when the biggest follicle reached 27 – 30 mm, all follicles bigger than 10 mm were aspirated. Each OPU cycle was alternated with a rest cycle when a spontaneous ovulation occurred. Although treatment with hCG increased the number of follicles presenting expanded granulosa and high intra-follicular progesterone concentration, no statistically significant differences were observed between groups regarding oocyte recovery.

Made available in DSpace on 2015-07-08T03:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000471707-Texto+Completo-0.pdf: 569 bytes, checksum: 3a501aadfbe21dd5858bbaba5eea0efa (MD5) Previous issue date: 2015 / Introduction : Non-living tissues have shown to be an important source of biomaterials, with advantages such as hydrophilicity, low toxicicidade, low immunogenicity, in addition to good adherence and cell multiplication. However, for these biomaterials to be used, techniques of descellularization is being used to make it less antigenic and also to serve as scaffolds. Objectives : The present study aims to compare different agents of descellularization regarding the above mentioned parameters, using detergents known to be effective for these processes. Materials and Methods : The samples used in this study were obtained from saphenous veins of seven individuals donors, in treatment of myocardial revascularization surgery and provided by the team of cardiovascular surgery of Hospital São Lucas da PUCRS, after signing the informed consent form. These samples were tested simultaneously three different detergents, sodium dodecyl sulfate (SDS), TRITON-X and trypsin, in addition to a control group containing Phosphate-Buffered Saline (PBS). After the process of descellularization and prior to the determination of cellularity, the samples were fixed in buffered formalin 10% during 24 hours, included in paraffin, sectioned (5 μ) and stained with hematoxylin and eosin. The number of cores was quantified in a radius of 0. 025 mm (objective 40x), in duplicate, corresponding to eight fields, with the aid of the software Image Pró-Plus 4. 5. 1. Data were analyzed using a model of analysis of variance for repeated measures (randomized blocks) with adjustment for multiple comparisons procedure of Finner's procedure were used. Results : The results evaluated all treatments showed a decrease in the number of cells, and the SDS the agent with greater descellularization. The TRITON-X and the Trypsin obtained similar values and there was no difference between them, for this process. Conclusion : In this way, it could be demonstrated that all detergents used, and the methodology it self, acts as agentes of descellularization in human veins and proved to be a promising agents to remove cells. / Introdução : Tecidos não vivos tem se mostrado uma importante fonte de biomateriais, apresentando vantagens como hidrofilidade, baixa toxicicidade, baixa imunogenicidade, além de boa adesão e multiplicação celular. Contudo, para que esses biomateriais sejam utilizados, técnicas de descelularização vêm sendo utilizadas para que sejam menos antigênicos e também para que sirvam como scaffolds. Objetivos : O presente estudo tem o objetivo de comparar diferentes agentes de descelularização quanto aos parâmetros citados acima, utilizando detergentes reconhecidamente eficazes para esses processos. Materiais e Métodos : As amostras utilizadas neste estudo foram obtidas de veias safenas de sete indivíduos doadores, em tratamento de cirurgia de revascularização do miocárdio e fornecidas pela equipe de cirurgia cardiovascular do Hospital São Lucas da PUCRS, após assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido (TCLE). Nessas amostras foram testados simultaneamente três diferentes detergentes, sódio dodecil sulfato (SDS), TRITON-X e tripsina, além de um grupo controle, contendo Phosphate-Buffered Saline (PBS) e um controle “a fresco”. Após o processo de descelularização e previamente à determinação da celularidade, as amostras foram fixadas em formalina tamponada 10% durante 24horas, incluídas em parafinas, seccionadas (5μ) e coradas com hematoxilina e eosina. O número de núcleos presentes foi quantificado em um raio de 0,025 mm (objetiva 40x), em duplicata, correspondente a oito campos, com o auxílio do software Image Pró-Plus 4. 5. 1. Os dados foram analisados em modelo de análise de variância de medidas repetidas (blocos casualizados) com ajuste de comparações múltiplas pelo procedimento de Finner. Resultados : Dos resultados avaliados todos os tratamentos mostraram um decréscimo no número de células, sendo o SDS o agente com maior descelularização. O TRITON-X e a Tripsina obtiveram valores similares e não houve diferença entre eles, para esse processo. Conclusão : Dessa forma, demonstrou-se que todos os detergentes empregados agem como descelularizadores em veias humanas, e mostram-se como promissores agentes de remoção celular.