Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-03T21:24:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Minelli Albuquerque Sousa.pdf: 1685422 bytes, checksum: aa0b6a25cf3fdcb5be14a26639ecfd22 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-17T22:19:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Minelli Albuquerque Sousa.pdf: 1685422 bytes, checksum: aa0b6a25cf3fdcb5be14a26639ecfd22 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-17T22:19:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Minelli Albuquerque Sousa.pdf: 1685422 bytes, checksum: aa0b6a25cf3fdcb5be14a26639ecfd22 (MD5) Previous issue date: 2011-12-20 / CAPES / Materiais queratinosos são insolúveis e resistentes à degradação por enzimas proteolíticas comuns, tornando-se importante o estudo de microrganismos produtores de queratinases para ser usado na indústria biotecnológica. O objetivo deste estudo foi selecionar fungos isolados do solo armazenados na Micoteca URM, para ser empregado na síntese de queratinases extracelular, caracterizar as cepas quanto a capacidade queratinolítica, efeito de diferentes substratos, da composição do meio e das condições de cultivo na produção de queratinase em cultivo submerso, otimizara aprodução, caracterizar e purificar a enzima. Para a determinação da capacidade de utilizar substratos queratinosos, 50 cepas fúngicas foram utilizadas. Elas foram cultivadas em fermentação submersa em meio contendo sais e penas durante 10 dias a 30 °C em agitador orbital a 120 rpm. Para avaliar a capacidade queratinolítica e o efeito de diferentes substratos na produção da queratinase foram utilizadas as seguintes cepas: Aspergillus sulphureus URM 5029, A. avenaceus URM5051, A. sclerotiorum URM5586 e Trichoderma aureoviride URM5574. Com a linhagem que apresentou a melhor produção e o melhor substrato, foi realizado estudos do efeito da composição do meio, condições de cultivo na produção da queratinase, otimização da produção, caracterização e purificação da enzima. Aspergillus sulphureus, Trichoderma aureoviride, Aspergillus avenaceus e A. sclerotiorum mostraram os melhores resultados com 7,35 U /ml, 7,2 U/ml, 6,7 U/ml e 6,05 U/ml de atividade queratinolítica, respectivamente. As espécies testadas se destacaram na colonização dos diferentes substratos queratinosos e o melhor substrato para a produção de queratinase foi a pena de frango. A produção de queratinase por A. sulphureus foi incrementada nas seguintes condições: 2 g/50 ml de pena de frango, 0,1 g/50 ml de NaNo₃, 0,001 g/50 ml de CaCl₂, pH 7,8, 35ºC, 160 rpm e 10⁶ esporos/ml em cultivo líquido submerso em 10 dias de incubação. A partir desses resultados foi realizado um planejamento fatorial completo 2⁴, para otimizar a produção da queartinase, e as melhores condições de produção foram: pH 8,0, 36 °C, 120 rpm, 2,5% (p/v) de penas de frango em 10 dias, com a máxima atividade de 10,06 U/ml, mostrando um aumento de 1,44 vezes. A queratinase de A. sulphureus apresentou melhor atividade em pH 10,0 e 35 ºC e é pouco inibida na presença de íons metais (Co²⁺, Mg²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, Mn²⁺, Ca²⁺) e PMSF e fortemente inibida por EDTA, sugerindo ser uma metaloprotease. As melhores condições para purificação da queratinase de Aspergillus sulphureus, após análise estatística, foram: massa molecular do PEG, 8000; concentração do PEG, 20% e concentração de citrato 15%, apresentando aumento de pureza e recuperação queratinolítica de 25,04 e 184,9%, respectivamente. Com base nos resultados, concluímos que a preservação, sob óleo mineral é satisfatório para manter a viabilidade e a taxonomia das culturas por longos períodos de tempo e os microorganismos do solo podem ser uma interessante fonte de fungos produtores de queratinases. Além disso a capacidade da queratinase de A. sulphureus ser estável em uma ampla faixa de pH (6,5–9,0) e temperatura (25–60 °C) sugere o uso desta cepa em processos biotecnológicos industriais. / Keratinous materials are insoluble and resistant to degradation by common proteolytic enzymes, making it important to study keratinases producing microorganisms for use in the biotechnology industry. The aim of this study was to select fungi isolated from soil stored in the URM Culture Collection, to be employed in the synthesis of extracellular keratinases, characterize the strains and the ability queratinolítica, effect of different substrates, the medium composition and cultivation conditions in the production of keratinase in submerged culture, aprodução optimize, characterize and purify the enzyme. To determine the ability to use keratinous substrates, 50 fungal strains were used. They were grown in submerged fermentation in medium containing salts and penalties for 10 days at 30 ° C on an orbital shaker at 120 rpm. To assess the ability queratinolítica and the effect of different substrates on keratinase production we used the following strains: Aspergillus sulphureus URM 5029, A. avenaceus URM5051, A. sclerotiorum URM5586 and Trichoderma aureoviride URM5574. With a lineage that had the best production and best substrate, was carried out studies of the effect of medium composition, cultivation conditions on keratinase production, production optimization, characterization and purification of the enzyme. Aspergillus sulphureus, Trichoderma aureoviride, Aspergillus avenaceus and A. sclerotiorum showed the best results with 7.35 U / ml, 7.2 U / ml, 6.7 U / ml and 6.05 U / ml keratinolytic activity, respectively. The species tested stood out in the colonization of different keratinous substrates and the best substrate for the production of keratinase was the poultry feathers. Keratinase production by A. sulphureus was increased in the following conditions: 2 g/50 ml of poultry feathers, 0.1 g/50 ml of NaNO3, CaCl2 0.001 g/50 ml, pH 7.8, 35 ° C, 160 rpm and 106 spore/ml in submerged in liquid culture 10 days of incubation. From these results we carried out a full 2⁴ factorial design to optimize the production of queartinase, and the best production conditions were: pH 8.0, 36 ° C, 120 rpm, 2.5% (w/v) feather chicken in 10 days, with maximum activity of 10.06 U/ml, showing an increase of 1.44 times. The keratinase of A. sulphureus showed better activity at pH 10.0 and 35 ° C and is slightly inhibited in the presence of metal ions (Co²⁺, Mg²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, Mn²⁺, Ca²⁺) and PMSF and strongly inhibited by EDTA, suggesting that a metalloprotease. The best conditions for purification of keratinase from Aspergillus sulphureus, after statistical analysis were: molecular weight of PEG 8000, PEG concentration, 20% and 15% concentration of citrate, an increase of purity and keratinolytic recovery of 25.04 and 184.9%, respectively. Based on the results, we conclude that the preservation under mineral oil is satisfactory to maintain the viability and taxonomy of cultures for long periods of time and soil microorganisms may be an interesting source of keratinases producing fungi. Furthermore the ability of keratinase of A. sulphureus be stable over a wide pH range (6.5 to 9.0) and temperature (25-60 ° C) suggests the use of this strain in industrial biotechnology processes.

O gênero Aeromonas representa um importante grupo de patógenos emergentes responsáveis por diversas afecções em animais e em humanos. Nestes, as Aeromonas têm sido associadas a infecções intestinais e extraintestinais em pessoas imunocompetentes e comprometidas, tanto na comunidade como em ambiente hospitalar. É de consenso geral que a resistência a antibióticos nessas bactérias pode vir a representar um problema potencial no tratamento das infecções. Assim sendo, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a freqüência de resistência a distintos antibióticos em bactérias do gênero Aeromonas isoladas de humanos e de suínos, com ênfase na resistência a antibióticos -lactâmicos. Foram avaliados um total de 62 isolados, frente a um painel de 15 antibióticos, evidenciando-se uma elevada percentagem de bactérias resistentes a mais de três antibióticos -lactâmicos, além de alta resistência à tetraciclina, ao cotrimazol e ao cloranfenicol. Entre os antibióticos testados, os mais eficazes contra as Aeromonas foram os ciprofloxacina, os gentamicina e os tobramicina. Alta freqüência de Aeromonas resistentes à tetraciclina e ao cotrimazol foi evidenciada em isolados de suínos, mostrando a importância da pressão de seleção exercida por uso indiscriminado desses antibióticos nas rações. A maior parte dos isolados com resistências múltiplas apresentou plasmídios conjugativos e alguns plasmídios de baixo peso molecular; os quais, em princípio, podem estar associados à resistência a antibióticos. Entre os isolados com resistência a vários antibióticos -lactâmicos, um apresentou características fenotípicas de ESBL. A análise, através de PCR, confirmou a presença de três genes de -lactamases de espectro expandido (TEM, CTX e ampC) neste isolado. Os genes TEM e CTX foram transferidos por conjugação para E. coli, junto com a resistência ao cloranfenicol e à gentamicina, indicando que todos esses genes se encontram em plasmídio conjugativo. A análise da atividade -lactamásica em três isolados mostrou que a mesma é muito elevada em bactérias desse gênero. No isolado portador de ESBLs, as metalo--lactamases são responsáveis pela maior parte da atividade penicilinásica e apenas por uma pequena parte da atividade sobre cefotaxima. Constatou-se ainda que a atividade -lactamásica de Aeromonas é inibida por temperaturas acima de 40C, apresentando um decréscimo linear da atividade em função do tempo. / The genus Aeromonas represents an important group of emergent pathogens responsible for several disorders in animals and humans. In humans there are associated with intestinal and extra-intestinal infections in immunocompetent and compromised person of the community and hospital settings. It is of general concern that antibiotic resistance will potentially become a problem among Aeromonas strains causing infections. In this sense, the objective of the present work was to evaluate the frequency of resistance to different antibiotics in Aeromonas isolated from humans and suines, with enfasis in the resistance to -lactamic antibiotics. A total of 62 isolates were evaluated against a panel of 15 antibiotics showing high percentage of resistance to more than three -lactam antibiotics, as well as resistance to tetracycline, cotrimazol and cloranphenicol. The most efficient antibiotics against Aeromonas were ciprofloxacin, gentamicin, and tobramicin. High frequency of tetracyclin and cotrimazol resistance was evidenced among suine isolates, showing the selection pressure effect exerced by the indiscriminate use of these antibiotics on feed. Most isolates with multiple resistance harbored conjugative plasmids and some exhibited low molecular plasmids, that may be associated with antibiotic resistance. Among isolates with multiple resistance to -lactam antibiotics, one showed a characteristic ESBL phenotype. PCR analysis confirmed the presence of three extended spectrum -lactamase genes (TEM, CTX, and ampC) in this isolate. The TEM and CTX genes were transferred by conjugation to E. coli, together with the resistances to chloranphenicol and gentamicin, indicating that all these genes are present in a conjugative plasmid. The analysis of -lactamase activity in three isolates showed that is very high in this Aeromonas. In the isolate with ESBLs, the metalo--lactamases are responsible for the main penicillinasic activity but just for a small part of the activity on cefotaxime. The -lactamasic activity of Aeromonas is inhibited by temperatures over 40C, showing a linear decrease on the activity in function of time.

Orientador: Meuris Gurgel Carlos da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-12T02:56:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amorim_WandaBatistade_M.pdf: 4206113 bytes, checksum: 83245e6b92cdbd8e5b5fa6ca5be1423d (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O cromo, por ser um metal de grande importância nas indústrias de galvanoplastia, polimento de metais, curtumes, tintas, pigmentos e na preservação de madeiras, é considerado um grande poluidor do meio ambiente. Este metal pode ocorrer em vários estados de oxidação, mas as formas mais comuns são a trivalente (C_+) e a hexavalente (Cr61, sendo esta última mutagênica e carciogênica. Os métodos convencionais utilizados para remoção de metais pesados tais como a precipitação química, a oxidação ou redução química nem sempre são eficientes, o que incentiva pesquisas no sentido do desenvolvimento de tecnologias alternativas para tratamentos mais adequados. Nos últimos anos, um grande número de estudos têm sido realizados visando a utilização de microorganismos/biomassas para a remoção de metais pesados de efluentes através de processo denominado biossorção. Dentre as biomassas destacam-se as algas marinhas pela sua abundância e riqueza estrutural, que podem ser usadas como retentores sólidos de metal pesado, substituindo as resinas convencionais. As vantagens deste processo estão na eficiência de remoção e na possibilidade de reutilização da biomassa através da dessorção dos íons metálicos. Este trabalho apresenta um estudo do processo de dessorção de cromo hexavalente ligado à algas marinhas do gênero Sargassum _p, provenientes do processo de biossorção; através do uso da técnica de planejamento fatorial 23 usando três eluentes: HCI, HzS04 e EDTA. Foram avaliados três fatores de grande importância para o processo: Concentração do eluente, razão S/L (massa de biossorvente por volume de eluente) e tempo de processo. A partir da análise estatística feita com os resultados dos ensaios realizados, para os três eluentes verificamos que: as três variáveis avaliadas mostraram-se estatisticamente significativas, e que os modelos obtidos para o processo de dessorção do cromo mostraram-se também significativos, ajustando satisfatoriamente os valores observados nos ensaios. Através do uso da metodologia de superficie de resposta, técnica de otimização baseada no emprego de planejamentos fatoriais, foi possível identificar a faixa de valores para as variáveis de processo que resultou numa maior dessorção do cromo adsorvido. Esta faixa foi usada para otimizar o processo, apresentando uma capacidade máxima de dessorção para o eluente EDTA de 50 mglg (mg de cromo por g de biossorvente), o equivalente a 52% de dessorção / Abstract: Chromium plays an important role in industries involved with electroplating, polish of metals, tannings, paints, pigments and wood preservation. It is considered a major poluter of the natural environrnent. This metal occurs in many oxidation states, but the most commom are the trivalent (Cr3) and hexavalent (Cr6), being the last one carciogenic and mutagenic. The conventional methods used to remotion of heavy metaIs such as chemical precipitation and chemical oxitation or reduction are not always efficient. This stimulates research oriented to the development of altemative technologies enabling more adquate processes of remotion. In the last years, an expressive research effort has been accomplished towards the utilization of microorganismslbiomass to remotion of heavy metais ITom efluents by a process called biosorption. Among the biomass, the marine algaes, which exhibit interesting characterists such as abundance and strutural richness can be used as solid retainers of heavy metal, substituting the conventional resines. The advantages of this process are removal efficiency and possibilities of reuse of the biomass through the desorption of metalic ions. This workpresents a study of the desorption process of hexavalent chromium with the marine algaes (Sargassum sp), obtained ftom the process of biosorption. The study was rea1ized through the factorial planning 23 using three eluents: HCI, HzSO4 and EDT A. Three important factors to the process were analyzed: Eluent concentration, S/L relation (biosovent mass divided by eluent volume) and process time. The result of statistical analysis ITom the trials realized, for three eluents used, showed that the three analyzed variables were statistically significant, and the obtained models for the chromium desorption yielded a satisfactory fitting to the observed values in the trials. Using the response surface methodology, which is a technique of optimization based on the use of factorial design, it made possible the identification of the range of values for the process variables for a higher desorption of the adsorbed chromium. This range of values was used to optimize the process, giving maximum desorption capacity for the eluent EDT A of 50 mg/g (mg of chromium per g ofbiosorbent), reaching 52% ofthe desorption / Mestrado / Engenharia de Processos / Mestre em Engenharia Química

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-03-13T19:52:38Z No. of bitstreams: 1 renatadacostabarrossilva.pdf: 1433857 bytes, checksum: f5d2ce8839102f4ecd28191491a39c39 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-03-16T12:52:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 renatadacostabarrossilva.pdf: 1433857 bytes, checksum: f5d2ce8839102f4ecd28191491a39c39 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-16T12:52:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 renatadacostabarrossilva.pdf: 1433857 bytes, checksum: f5d2ce8839102f4ecd28191491a39c39 (MD5) Previous issue date: 2016-12-14 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Os ruminantes são animais capazes de utilizar a fibra contida nos vegetais como alimento devido a atuação de microrganismos contidos em seu trato digestivo. A prospecção por organismos da microbiota ruminal com potencial capacidade de degradação de celulose e xilana tem grande importância em atividades antrópicas e processos industriais. Foram realizadas coletas semanais de conteúdo ruminal de bovinos fistulados para posterior isolamento de bactérias com o auxílio da metodologia desenvolvida por Hungate (1966) com modificações e outros meios de cultura específicos para microrganismos do rúmem. Os isolados foram avaliados quanto as suas características morfo-tintoriais com o auxílio da coloração de Gram e quanto a motilidade mediante inoculação em meio SIM suplementado. Também foi avaliado o metabolismo energético dos isolados por meio de teste respiratório, assim como o seu perfil enzimático com a utilização de zimogramas. Uma vez caracterizados, os isolados foram acondicionados em freezer -20ºC para caracterização molecular e posterior inclusão na coleção de microrganismos da Embrapa. No total foram obtidos 67 isolados, sendo destes 52 cocos Gram positivos, 10 bacilos Gram negativos e 5 bacilos Gram positivos. O teste de motilidade revelou que apenas 12 dos 67 isolados eram móveis e no teste respiratório observou-se que 14 eram anaeróbios estritos. Os zimogramas demonstraram que 14 isolados são celulolíticos e 53 são xilanolíticos. Pelos kits comerciais de identificação microbiana, das 67 linhagens bacterianas isoladas, 49,3% foram identificadas no nível de espécie com identidade aceitável (15,15%) ou boa identificação (34,15%), enquanto que 50,7% linhagens não foram identificadas pela técnica utilizada. Os isolados foram agrupados em biogrupos, de acordo com as semelhanças em seus perfis bioquímicos, e uma ribotipagem foi realizada com até três integrantes de cada biogrupo. A reação só foi possível com os bacilos Gram positivos e negativos. Um integrante de cada ribotipo e até três de cada biogrupo foram selecionados para amplificação a região do DNA codificadora do rRNA 16S e posterior sequenciamento. Após análise das sequências de DNA resultantes, as espécies Selenomonas ruminantium, Streptococcus sp., Pseudobutyrivibrio sp. e Lactobacillus vitulinus foram identificadas entre os isolados. Um dos isolados não obteve identificação satisfatória. Foi possível avaliar que não houve alterações significativas no perfil da comunidade bacteriana frente as diferentes dietas. A comparação entre os resultados dos dois métodos de identificação indicou que os kits bioquímicos utilizados no trabalho não são aconselhados para a identificação de bactérias ruminais. O sequenciamento da região do DNA codificadora do rRNA 16S ainda é a forma de identificação mais segura. A identificação de isolados potencialmente celulolíticos e xilanolíticos como Selenomonas ruminantium e Lactobacillus vitulinus constitui novas evidências da presença de atividade fibrolítica em indivíduos dessas espécie. Mais estudos devem ser realizados de forma a comprovar a expressão de fitases por essas bactérias. Os resultados obtidos nesse estudo são importantes para a melhor compreensão do ecossistema ruminal e futuramente podem contribuir para o melhoramento da hidrólise de material lignocelulósico na indústria. / Ruminants are animals capable of utilizing the fiber contained in vegetables as feed due to the microrganisms present in their digestive tract. The prospection of organisms with potential ability to degrade cellulose and xylan in the rumen microbiota is of great importance in anthropogenic activities and industrial processes. Samples of ruminal content were collected weekly from fistulated bovines for later bacteria isolation by making use of the technique described by Hungate (1966) with modifications by Bryant and Burkey (1951). The isolates were evaluated regarding their morphotintorial characteristics by using Gram stain and regarding their motility by inoculation in supplemented SIM media. The isolates energetic metabolism was also evaluated by respiratory test, as well as their enzymatic profile by zymmograms. Once characterized, the isolates were stored in -20ºC freezer for molecular identification and later inclusion in the EMBRAPA microorganism collection. A total of 67 isolated were obtained, of which 52 were Gram positive cocci, 10 were Gram negative rods and 5 were Gram positive rods. The motility test revealed that only 12 out of the 67 isolates were motile and in the respiratory test it was possible to observe that 14 bacteria were obligate anaerobes. The zymmograms showed that 14 isolates were potencially cellulolytic and 53 were potencially xylanolytic. The commercial biochemical identification kits revealed that out of the 67 bacteria, 49,3% obtained species identification with acceptable (15,15%) or good identification (34,15%), while 50,7% were not identified by this technique. The isolates were grouped in biogroups, according to the similarities in their biochemical profiles, and up to three integrals were chosen for ribotyping. The reaction was only possible with the rods. One member of each ribotype and up to three members of each biogroup were selected for amplification of the DNA region that encodes the 16S rRNA and later sequencing. After analysis of the resulting sequences, the species Selenomonas ruminantium, Streptococcus sp., Pseudobutyrivibrio sp. e Lactobacillus vitulinus were identified among the isolates. One of the isolates did not present satisfactory identification. It was possible to evaluate that the two different diets did not cause significant changes in the bacterial community profile. The comparison between both identification methods showed that the biochemical kits utilized during this research should not be used for the identification of ruminal bacteria. The sequencing of the the DNA region that encodes the 16S rRNA is still the safest form of identification. The identification of potencially cellulolytic and xylanolytic isolates as Selenomonas ruminantium and Lactobacillus vitulinus presents new evidence of the fibrolytic activity in individuals from those species. More studies are needed so as to verify the phytase expression by those bacteria. The results in this study are important for better comprehension of the rumen ecosystem and, in the future, could contribute to improvements in the industrial hydrolysis of lignocellulosic material.

Orientador: Lucia Regina Durrant / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:44:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Clemente_AndreaRoberta_D.pdf: 32298161 bytes, checksum: 5131372a9a96e8e6ca92b94d6ab335cd (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Utilizou-se cinco linhagens fúngicas não identificadas (710, 870, 898, 984 e 1040), doadas pela Fundação Tropical André Toselo. Assim, a seguinte identificação para tais linhagens, Acremoniun sp (710), Trichoderma sp (870), Fusarium sp (898), Aspergillus sp (984) e Verticillium sp (1040), foi proposta, após visualização das características macroscópicas e mic HAPs: naftaleno (0,5%), antraceno (0,1 %), pireno (0,05%) e benzo[a]pireno (0,05%). As linhagens cresceram em meio líquido onde variou-se o tamanho do inóculo, para verificar o efeito deste na biodegradação dos compostos. Micélio de 1 cm2 contendo esporos, foi utilizado como inóculo, onde foi adicionado pedaços de 1 cm2, 2 x 1 cm2 e 3 x 1 cm2 ao meio líquido base contendo os HAPs. Após 5 e 10 dias de cultivo os sobrenadantes foram coletados e analisados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE)...Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The five fungal strains used is this work, namely 710, 870, 898,984 and 1010, were a gift from Fundação Tropical André Toselo, and were isolated from soil samples collected at the Jureia-Itatins Ecological Reserve. Following microscopically examinations these strains were classified as Acremoniun sp. (710), Trichoderma sp. (870), Fusarium sp. (898), Aspergillus sp. (984) and Verticillium sp. (1040). The following Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs): naphthalene (0,5%), anthracene (0,1%), pyrene (0,05%) and benzo[a]pyrene (0,05%), were used throughout this work, as the carbon source. These fungi were grown in liquid medium with varying inoculum amounts, to determine the effect of the size of the inoculum on the biodegradation of the PAHs. Pieces of mycelia of lcm, 2xl cm2and 3xlcm2 were used for each PAH and after 5 and 10 days of cultivation the supernatants were collected and degradation was determined by reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC)....Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Marcilio Rabello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Economia / Made available in DSpace on 2018-07-24T18:37:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RuizOlalde_Alicia_D.pdf: 4534968 bytes, checksum: e8072db00213c40b87bd6c1c5d945043 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Economia

Estudos têm indicado que representantes de Meliaceae, incluindo o neem, apresentam metabólitos secundários com importante atividade biológica sobre insetos. Cabralea canjerana é uma Meliacaea arbórea endêmica da América e de ampla distribuição, utilizada na medicina indígena, devido as suas propriedades terapêuticas. Dentre os principais insetos-praga associados à produção agrícola da América do Sul, destacam-se a mosca-das-frutas-sul-americana - Anastrepha fraterculus e a lagarta-do-cartucho-do-milho - Spodoptera frugiperda. Este estudo objetivou avaliar os efeitos de extratos de frutos e sementes de C. canjerana obtidos em acetato de etila e etanol sobre a ingestão e a oviposição de adultos de A. fraterculus e sobre ovos, larvas e pupas de S. frugiperda. O extrato de fruto (acetato de etila), adicionado a dieta artificial (5mg/mL), em 48h, foi significativamente mais efetivo, induzindo 69,42% de mortalidade das moscas. Todos os extratos provocaram deterrência de oviposição, reduzindo significativamente o número de moscas por fruto de mamão papaia. Entre os demais efeitos biológicos sobre A. fraterculus verificou-se que o extrato de fruto (acetato de etila), induziu a mortalidade larval, ocorrência de pupas larviformes e de adultos anormais. Todos os extratos induziram atividade antialimentar e larvicida à S. frugiperda nas concentrações de 500 e 1000 ppm. O extrato de semente (acetato de etila), a 1000 ppm, foi o mais ativo, induzindo mortalidade larval e embrionária (100% e 69%, respectivamente). Do seu fracionamento em coluna de cromatografia foram obtidas cinco frações. A partir destas frações, a terceira, composta principalmente por triterpenos induziu mortalidade larval três vezes maior do que o extrato bruto. Todos os extratos e frações alteraram significativamente a duração do ciclo, do peso larval e induziram a ocorrência de diversas anormalidades larvais e pupais em S. furgiperda. A maior atividade dos extratos de semente e de fruto de C. canjerana, obtidos com acetato de etila indica a presença de limonóides e triterpenos com atividade biológica que, potencialmente podem vir a ser utilizados no manejo de A. fraterculus e S. frugiperda. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Many reports in the literature indicated that representatives of Meliaceae, including neem, have secundary metabolites with important biological activities on insects. Cabralea canjerana is a widely distributed America native tree from Meliacaea, witch it is and used in indigenous medicine, due to its therapeutic properties. Among the major insect pests associated with agricultural production in South America, stand out the South American fruit fly - Anastrepha fraterculus and the fall armyworm Spodoptera frugiperda. This study evaluated the effects of C. canjerana ethyl acetate and ethanol extracts of mature fruits and their seeds on the intake and oviposition the adults of A. fraterculus and on eggs, larvae and pupae of S. frugiperda. The ethyl acetate fruit extract added to an artificial diet (5mg/mL), within 48 hours, was significantly more effective than the other evaluated extracts, inducing 69.42% mortality of the flies. All extracts caused oviposition deterrence, significantly reducing the number of flies in papaya fruit. Among other biological effects on A. fraterculus was found that the ethyl acetate fruit extract, induced larval mortality, occurrence of larviform pupae and abnormal adults. All extracts induced antifeedant and larvicidal activity of S. frugiperda at concentrations of 500 and 1000 ppm. The ethyl acetate seed extract at 1000 ppm was the most active one, inducing both larval and embryonic mortality (100% and 69%, respectively). From its fractionation on Colum Chromathography five fractions were obtained. From these obtained fractions, the third one, composed principally of triterpenes induced larval mortality three times higher than the crude extract. All extracts and fractions significantly altered the life cycle, the larval weight and induced the occurrence of various abnormalities on S. furgiperda larvae and pupae. The greater activity of seed extracts and fruit of C. canjerana obtained with ethyl acetate indicates the presence of limonoids and triterpenes with biological activity that can potentially come to be used in the management of A. fraterculus. and S. frugiperda.

Cyphomandra betacea, popularmente conhecida como tomate árvore ou tamarillo, é uma planta de origem andina da família Solanaceae, com alto potencial econômico como frutífera. A propagação desta espécie ocorre principalmente através de sementes, o que eleva a variabilidade genética, prejudicando a produção de mudas para cultivo em larga escala. Uma alternativa para a produção de mudas é a propagação in vitro. Neste contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o comportamento in vitro de diferentes explantes de C. betacea frente a reguladores de crescimento, assim como determinar a atividade antioxidante e conteúdo fenólico em folhas, frutos in vivo e folhas de plantas micropropagadas de tamarillo. Os resultados obtidos mostram que a micropropagação por subdivisão de segmentos nodais em meio MS sem reguladores de crescimento, é uma alternativa viável para a obtenção de plantas uniformes a partir de explantes oriundos de plantas selecionadas. Regeneração direta foi obtida através do cultivo de segmentos de hipocótilos em meio MS contendo 0,5 mg/L de BA, servindo como alternativa de propagação. Auxinas como 2,4-D, picloram e ANA induziram a formação de calos em explantes foliares e caulinares de C. betacea. Entretanto, a elevada oxidação fenólica de explantes e calos impediu a regeneração indireta de plantas a partir destes calos. Por outro lado, regeneração indireta por organogênese foi obtida de calos formados na ausência de reguladores quando transferidos para meio MS com 0,5 mg/L de BA. Extratos foliares de C. betacea apresentaram maior atividade antioxidante do que os sucos de frutos maduros e imaturos. Reguladores de crescimento influenciam a atividadade antioxidante, de folhas de plântulas in vitro. Tratamentos com BA induzem um aumento no teor de polifenóis totais e na atividade antioxidante in vitro. / Cyphomandra betacea, popularly known as "tomate árvore" or "tamarillo", is an Andean species of the Solanaceae family with high economic potential as fruit crop. The propagation of this specie is made by seeds, a system that provoke undesirable variations in fruit shape, color, plant behavior and yield, among other traits. An alternative for the production of C. betacea is in vitro propagation. In this context, the aims of the present work were to evaluate the in vitro response of different explants of C. betacea to growth regulators, as well as the determination of the antioxidant activity and phenolic content of leaves, fruits and micropropagated plants of tamarillo. The results obtained showed that micropropagation by divition of nodal segments and their culture on MS medium without growth regulators, is a feasible alternative for the production of uniform propagules from selected plants. Direct regeneration was obtained from hypocotiles segments cultivated on MS medium supplemented with 0.5 mg/L of BA, representing an alternative for C. betacea propagation. Auxins, as 2,4-D, picloram and NAA, induced callus formation from leaves and stem explants of C. betacea. However, high phenolic oxidation of both explants and calli prevented the indirect regeneration from those calli. However, indirect organogenic regeneration was obtained from stem derived calli developed in the absence of growth regulators, when transferred to MS medium with 0.5 mg/L of BA. Leaf extracts of C. betacea exhibited higher antioxidant activity than the juice obtained from mature and immature fruits. In vitro growth on BA containing media duplicated the phenolic content and the DPPH free radical scavenging prorierty, and significantly reduced the CAT-like activity.

Orientador: Mario Luiz Possas / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Economia / Made available in DSpace on 2018-07-18T03:51:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SallesFilho_Sergio_D.pdf: 8044266 bytes, checksum: cba6157e87151e35195f732ba8bacb76 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Economia

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2015-12-03T14:40:27Z No. of bitstreams: 1 thamirisdornelasdearaujo.pdf: 2561728 bytes, checksum: fff1785edaa93117a2f0ca8fea98bc43 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2015-12-03T14:42:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 thamirisdornelasdearaujo.pdf: 2561728 bytes, checksum: fff1785edaa93117a2f0ca8fea98bc43 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-03T14:42:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 thamirisdornelasdearaujo.pdf: 2561728 bytes, checksum: fff1785edaa93117a2f0ca8fea98bc43 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / As mudanças climáticas constituem ameaça às espécies e à sustentabilidade financeira dos sistemas de produção. Estudos preliminares mostraram que embriões bovinos submetidos ao choque térmico apresentam níveis diferenciados de heterocromatina, o que pode comprometer o desenvolvimento. Algumas substâncias interferem na estrutura da cromatina ou na metilação do DNA e podem influenciar os eventos epigenéticos do desenvolvimento embrionário. O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de 5-aza-2’-deoxycytidine na produção de embriões bovinos utilizando oócitos submetidos ao choque térmico. Oócitos de vacas de abatedouro foram maturados em TCM-199+10% soro de vaca em cio e distribuídos em: experimento 1(NHS, sem choque térmico) - 5%CO2 e 38,5ºC 24h; experimento 2 (HS, choque térmico) - 6,5-7,0%CO2 e 41,5ºC 12h + 12h em 5%CO2 e 38,5ºC. Foi realizada FIV em FERT-TALP por 20h nas condições convencionais de maturação. Procedeu-se o cultivo em CR2aa+2,5%SFB a 38,5ºC, 5%CO2 e 5%O2 por 8 dias. Em cada experimento os embriões foram divididos nos seguintes tratamentos: sem adição de 5-aza (NHS ou HS - Controles), expostos a 5-aza (10nM) por 24h (NHS24h ou HS24h) ou por 48h (NHS48h ou HS48h). Após exposição à droga os embriões foram cultivados em meio idêntico ao de NHS e HS até completarem o desenvolvimento. O estágio de desenvolvimento e a taxa de embriões foram avaliados nos dias 3 (D3), 7 (D7) e 8 (D8), e blastocistos D8 foram avaliados por TUNEL quanto à taxa apoptótica. Embriões D2 e D3 foram submetidos à imunofluorescência para marcação de HP1β. Não houve diferença na clivagem dos dois experimentos. O percentual de embriões com 8 células em D3 foi menor em todos os grupos tratados com 5-aza. Menores taxas de blastocistos em D7 e D8 foram obtidas no tratamento NHS48h. Menores taxas de blastocistos foram produzidas em D7 e D8 para HS24h e HS48h. O número de células totais e da massa celular interna dos blastocistos não diferiu entre os grupos dos dois experimentos. O índice apoptótico nos grupos do experimento 1 foi similar, e no experimento 2 ocorreu diferença apenas entre os grupos HS24h e HS48h. O índice apoptótico da massa celular interna não diferiu nos dois experimentos. O uso de 5- aza não influencia as taxas de clivagem em D3, mas a longa exposição reduz as taxas de blastocistos. Associado ao choque térmico, 5-aza reduz as taxas de blastocistos independente do tempo de exposição. No entanto, não houve injúrias celulares detectáveis nos embriões que se desenvolveram a blastocisto. A intensidade do sinal para heterocromatina em embriões com 4-7 células foi similar entre os grupos, o percentual de núcleos não marcados foi baixo e NHS24h marcou mais núcleos fortemente. Embriões de 8-16 células apresentaram redução na intensidade do sinal quando expostos a 5-aza, o que não ocorre nos embriões de choque térmico, com intensidades similares a NHS, e 5-aza não tem aparente efeito sobre a presença de HP1β. Mudanças nos padrões de eucromatina e heterocromatina nos embriões de choque térmico podem estar relacionadas a uma ativação do genoma embrionário mais complexa, reduzindo a produção de blastocistos. / Climate changes is a threat to the species and the financial sustainability of the production systems. Preliminary studies showed that bovine embryos submitted to heat shock presented differentiated levels of heterochromatin, which can compromise the development. Some substances interfere in the chromatin structure or DNA methylation can influence the epigenetic events of embryonic development. The objective of this work was to evaluate the effect of 5-aza-2'deoxycytidine in the production of bovine embryos using oocytes submitted to heat shock. Oocytes of slaughterhouse cows were matured in TCM-199 + 10% serum cow in heat and distributed on: experiment 1 (NHS without heat shock) - 5%CO2 and 38.5ºC 24h; experiment 2 (HS with heat shock) - 6.5-7.0%CO2 and 41.5ºC 12h + 12h in 5%CO2 and 38.5ºC. IVF was performed in FERT-TALP for 20h in conventional maturation conditions. The cultivation was performed in CR2aa+2.5%FBS a 38.5ºC, 5%CO2 and 5%O2 for 8 days. In each experiment, the embryos were divided into the following treatments: without addition of 5-aza (NHS or HS - Controls), exposed to 5- aza(10nm) for 24h (or NHS24h or HS24h) or 48h (or NHS48h or HS48h). After exposure to the drug, embryos were cultivated in the same NHS and HS to complete development. The development stage and the rate of embryos were evaluated at day 3 (D3), 7 (D7) and 8 (D8), and blastocysts were evaluated by TUNEL as the apoptotic rate. Embryos D2 and D3 were submitted to immunofluorescence for marking HP1β. There was no difference in the cleavage of the two experiments. The percentage of 8-cell embryos D3 was lower in all the groups treated with 5-aza. Lower blastocyst rates were obtained in treatment NHS48h. Lower blastocysts rates were produced in D7 and D8 to HS24h and HS48h.The number of total cells and the inner cell mass of blastocysts was similar between groups in the two experiments. The apoptotic index in experimental group 1 was similar, and in experiment 2 occurred only difference between HS24h and HS48h groups. The apoptotic index of the inner cell mass did not differ in both experiments. The use of 5-aza do not affect the cleavage rates in D3, but the long exposition reduces blastocyst rates. Associated with heat shock, 5-aza reduces blastocyst rates independent of the exposition time. However, there was no detectable cell injury in embryos that developed to blastocyst. The intensity of the signal for heterochromatin in embryos with 4-7 cells was similar between the groups, the percentage of HP1β negative nucleus was low and more nucleus were exhibiting increased HP1β signal in NHS24h. 8-16 cell embryos present a reduction of signal intensity when exposed to 5-aza, which does not occur in the heat shock embryos with similar intensities to NHS, and 5-aza has apparently no effect on HP1β levels. Changes in euchromatin and heterochromatin patterns in the heat shock embryos may be related to a complex EGA related to those groups, which might be related to lower blastocyst rate.