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Atividades antirreabsortiva e anti-inflamatÃria do ranelato de estrÃncio na periodontite induzida em ratos / ANTIRESORPTIVE AND ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITIES OF STRONTIUM RANELATE ON LIGATURE-INDUCED PERIODONTITIS IN RATSAna PatrÃcia Souza de Lima 26 March 2010 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A Periodontite à uma doenÃa que envolve a presenÃa de bactÃrias e se caracteriza principalmente por eventos inflamatÃrios que levam à perda dos tecidos periodontais como cemento radicular ligamento periodontal e osso alveolar O Ranelato de estrÃncio (RS) à um fÃrmaco recÃm desenvolvido para tratamento da osteoporose que diferente de outros agentes anti-osteoporÃticos possui duplo efeito no metabolismo Ãsseo: diminui a reabsorÃÃo e estimula a formaÃÃo Ãssea O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito antirreabsortivo do RS na periodontite experimental considerando aspectos locais e sistÃmicos e a resposta inflamatÃria atravÃs de modelos experimentais clÃssicos de inflamaÃÃo em animais A periodontite foi induzida pela colocaÃÃo de um fio de sutura (nÃilon 3) ao redor dos 2o molares superiores esquerdos de ratos (Â200 g) utilizando a prÃpria hemiarcada contralateral para controle Os animais foram divididos em 4 grupos (n=6/cada) que receberam por via oral RS (70, 210 e 630 mg/kg) ou soluÃÃo Salina (SAL) durante 11 dias Foram acrescidos 2 grupos (RS e SAL) para anÃlise histolÃgica A perda Ãssea alveolar (POA) foi avaliada atravÃs de anÃlises macroscÃpica (mm2) histolÃgica e imunohistoquÃmica e por dosagens sÃricas de Fosfatase Alcalina Ãssea (FAO) Para verificar possÃveis repercussÃes sistÃmicas avaliou-se Leucograma, VariaÃÃo de massa corpÃrea (g) e os nÃveis sÃricos de Transaminases (AST e ALT) UrÃia e Creatinina Para investigaÃÃo da resposta inflamatÃria utilizaram-se os modelos de peritonite e de edema de pata ambos induzidos por Carragenina (Cg 700 Âg) por via intraperitoneal e intraplantar, respectivamente. Os animais foram divididos em grupos (Â200 g; n=6/cada) que receberam, previamente à injeÃÃo de Cg, RS 630 mg/kg-vo, Dexametasona 1 mg/kg-sc (DEX) e soluÃÃo Salina-vo (SAL) No modelo de peritonite 1 grupo de animais nÃo manipulados (Normal) foi acrescido ApÃs a 4 h da peritonite os ratos foram sacrificados para coleta do lÃquido peritoneal e avaliaÃÃo da migraÃÃo neutrofÃlica No modelo de edema de pata o volume de lÃquido deslocado pelas patas dos ratos, considerado o edema foi mensurado por hidropletismÃmetro antes e 1, 2, 3 e 4 h apÃs injeÃÃo de Cg Observou-se que o RS (70, 210 e 630 mg/kg) reduziu (p<0,05) a POA em 16,9%, 39,4% e 37,5% respectivamente à anÃlise imunohistoquÃmica e histolÃgica, RS diminuiu a expressÃo de TNF-a porÃm nÃo reduziu expressÃo de IL-1b e promoveu importante (p<0,05) reduÃÃo do infiltrado leucocitÃrio e osteoclastos, assim como preservaÃÃo do osso alveolar, ligamento periodontal e cemento [RS630= 1,5 (1-3); SAL= 2,5 (2-3)] Tais anÃlises foram corroboradas pelo aumento (p<0,05) dos nÃveis sÃricos de FAO (RS70= 94Â4,6; RS210= 90,9Â6; RS630= 107,5Â14,2; SAL= 57,9Â6,9 U/l) Inicialmente os animais apresentaram perda de peso, seguido de tendÃncia a normalidade mas tal como no leucograma ou nas demais dosagens sÃricas bioquÃmicas nÃo foram observadas alteraÃÃes significante (p>0,05) entre os grupos Quanto a resposta inflamatÃria RS 630 mg/kg foi capaz de reduzir a migraÃÃo neutrofÃlica induzida por Cg [RS=5,7Â0,6; Sal=8,3Â0,6 (x103/mm3); p<0,05] alÃm de reduzir edema de pata na 3 e 4 h apÃs administraÃÃo da Cg Em conclusÃo, o RS foi capaz de reduzir a POA confirmando seu potencial antirreabsortivo alÃm de exibir atividade anti-inflamatÃria podendo portanto vir a ser uma ferramenta importante no tratamento adjuvante da periodontite / Periodontitis is a disease which involves the presence of bacteria and it is characterized by inflammatory events that lead to loss of periodontal tissues such as root cementum periodontal ligament and alveolar bone Strontium Ranelate (RS) is a recent developed drug used for osteoporosis treatment that different from other anti-osteoporotic drugs it possess a dual effect on bone metabolism: it decreases bone resorption by the time it stimulates bone formation The aim of this study was to evaluate the RS anti-resorptive effect in experimental periodontitis considering local and systemic aspects and the inflammatory response through classical inflammation experimental models in animals Periodontitis was induced by placing a suture (nylon 3.0) around the left 2nd upper left molars of rats ( 200g) using their contralateral hemimaxillae for control. The animals were divided into 4 groups (n = 6/each) which received RS (70, 210 and 630 mg/kg) or saline 0.9% (SAL) orally during 11 days Two more groups were added (RS and SAL) for histological analysis Alveolar bone loss (ABL) was evaluated by macroscopic mm2) histologic and immunohistochemistry analysis and by serum bone alkaline phosphatase (BALP) levels In order to evaluate possible systemic repercussions body weight variation (g) leukocyte count and serum levels of: transaminases (AST and ALT) urea and creatinine were assessed In order to investigate inflammatory response peritonitis model and paw edema we used both of them induced by carrageenan (Cg 700 g) a potent anti-inflammatory agent by intraperitoneal and in rat hind paw, respectively Animals were divided in groups ( 200 g; n = 6/each) which received 0.9% saline-vo (SAL); Dexamethasone 1 m/kg-sc (DEX) and RS 630 mg/kg-vo before Cg injection. On peritonitis model a group of non-handled (Normal) animals was added After the 4th hour of peritonitis animals were sacrificed in order to collect peritoneal fluid and to evaluate neutrophil migration On paw edema model the dislocated liquid volume by rats paw (edema) was measured by a hydropletismometer before (0h) and 1 2 3 and 4 h after Cg injection It was observed that RS (70, 210 and 630 mg/kg) prevented ABL (p<0.05) by 16.9% 39.4% and 37.5% respectively On immunohistochemical and histologic analysis RS reduced TNF-a but not reduced IL-1b expression and additionally promoted important (p<0.05) decrease on leukocyte infiltrate and osteoclast number as well as alveolar bone periodontal ligament and root cementum preservation [RS 630 = 1.5 (1-3); SAL=2.5 (2-3)] These analyses were corroborated by the increase (p<0.05) of BALP serum levels (RS70= 94Â4.6; RS210= 90.9Â6; RS630= 107.5Â14.2; SAL= 57.9Â6.9 U/l) Initially animals presented loss of weight followed by a normal tendency but as well as in leukogram or in the other serum biochemical dosage it was not observed any significant alteration (p>0.05) between groups About inflammatory response RS 630 mg/kg was able to reduce neutrophil migration induced by Cg [RS=5.7Â0.6; Sal=8.3Â0.6 (x103/mm3); p<0.05] besides paw edema decreased on the 3rd and 4th hour after Cg administration In summary RS was able to prevent ABL confirming its anti-resorptive potential and also exhibit anti-inflammatory activity which can be an important tool as adjuvant to periodontitis treatment
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Alterações dimensionais mandibulares e sua relação com atividade muscular em pacientes portadores de próteses implantossuportadas / Mandibular dimensional changes and its relationship with muscular activity in pacients when implant-supported prosthesis are usedTânia Mara de Tassis Mandelli 07 November 2008 (has links)
Objetivos: este estudo se propôs avaliar a correlação entre atividade do músculo masseter e alteração óssea mandibular, posterior ao último implante, um ano após a reabilitação com próteses implantossuportadas, em pacientes com fissura labiopalatina já reparada. Material e Método: As alterações dimensionais ósseas foram medidas em radiografias panorâmicas digitalizadas realizadas antes e um ano após a reabilitação de dezessete pacientes. A eletromiografia dos músculos masseteres foi realizada durante a contração voluntária isométrica máxima (CVIM) por 5s, mastigação habitual de cenoura (MH), mastigação unilateral direita (MUD) e esquerda (MUE) de látex. Resultados: ocorreu aumento ósseo significativo na mandíbula de 1,98mm (p<0,001) para o tipo de prótese inferior overdenture implantossuportada. O lado direito é maior que o esquerdo em 0,9mm. Um significante aumento da amplitude para a MH (9V) e para a MUE (19V) foi observado, independente do tipo de prótese. Um aumento significante para a MUE (19V) foi observado para a prótese overdenture. Ocorreu um aumento estatisticamente significante para o ato mastigatório durante os três tipos de mastigação (MH=0,13s, MUD=0,06s, MUE=0,12s), independente do tipo de prótese. Para o ciclo mastigatório também foi observado aumento estatisticamente significante, independente do tipo de prótese durante a MH (0,12s) e MUE (0,11s). Conclusão: Ocorreu aposição óssea na região posterior da mandíbula para a prótese overdenture e apesar do aumento da atividade muscular, não foi encontrada correlação estatisticamente significante com a atividade muscular do masseter. / Purpose: The purpose of the present study was to evaluate the correlation between masseter muscle activity and changes occurred in mandibular bone height, posterior to the last implant, one year after implant-supported prosthesis rehabilitation in repared cleft lip and palate patients. Materials and Methods: changes in mandibular bone height were measured in digitalized images of panoramic radiographies taken before and one year after oral rehabilitation of seventeen repared cleft lip and palate patients (Radiocef 2 Radiomemory). Parameters for electromyography of masseter muscle were: maximum voluntary isometric clench (MVC) for 5s, habitual chewing of carrots (HC) and unilateral right (URL) and left (ULL) chewing of latex. Results: a mean increase in mandibular bone height of 1,98mm (p<0,001) for the implant retained overdenture was observed. Bone apposition was higher in the right side. Significant increase in the amplitude was observed during HC (9V) and during ULL (19 V), regardless prosthesis type and side. A significant increase was observed during URL (19 V) for the implant retained overdenture. A significant statistical increase for the masticatory act was observed during the three types of mastication (HC=0,13s, URL=0,06s, ULL=0,12s), regardless prosthesis types. A significant statistical increase was observed for the masticatory cycle during HC (0,12s) and ULL (0,11s), regardless prosthesis type. Conclusion: Mandibular bone apposition in the posterior region to the last implant, in patients using implant retained overdentures and improvement in muscular activity in both types of prosthesis were observed, although no significant correlations were encountered between them.
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Avaliação radiografica da influencia do consumo de cigarros sobre alterações dimensionais no rebordo alveolar apos extração dentariaMenezes, Juliana Bezerra Saldanha 24 February 2005 (has links)
Orientadores: Francisco Humberto Nociti Junior, Enilson Antonio Sallum / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:59:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2005 / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do consumo de cigarros sobre as alterações dimensionais que ocorrem no rebordo alveolar após a extração dentária. Foram selecionados 21 pacientes, com extrações indicadas de elementos anteriores na maxila, por causas periodontais, fraturas ou presença de cáries. Cada participante foi designado para um dos seguintes grupos: grupo 1 (n=11)- não fumantes ou grupo 2 (n=10)-pacientes que fumam um mínimo de 10 cigarros/dia. No período máximo até 7 dias após a extração, os participantes foram submetidos a uma tomografia linear, para determinação da altura e da largura do rebordo alveolar, e a uma radiografia periapical, para cada dente extraído, que foi utilizada para determinação da densidade radiográfica. Os parâmetros foram reavaliados com 6 meses após a extração. A análise intragrupos (teste t-pareado) revelou uma redução estatisticamente significante para o parâmetro altura óssea, no grupo dos não-fumantes (P=0,019) e dos fumantes (P<0,001), entretanto quando as médias de altura dos dois grupos foram comparadas entre si, não houve diferença estatística, em nenhum dos tempos avaliados (teste-t). Para os parâmetros de largura média e coronária, apenas o grupo dos fumantes apresentou uma redução significante do início aos 6 meses do experimento. A densidade radiográfica no centro do alvéolo diferiu estatisticamente, no grupo dos fumantes, na análise intragrupo (P=0,011) e intergrupos (P=0,006), na reavaliação. As análises intergrupos, nos dois períodos de avaliação, apresentaram médias de densidade radiográfica do osso íntegro significativamente inferiores, no grupo dos fumantes. Dentro dos limites do presente estudo, pode-se concluir que o consumo de cigarros influencia negativamente o processo de remodelação do rebordo alveolar pós-extração / Abstract: The aim of the present study was to radiographically evaluate the effect of cigarette smoking on dimensional alveolar bone changes following teeth extraction. Twenty-one subjects were included and designated to one of the groups, regarding their smoking status: group 1(n=11)- non-smoking and group 2 (n=10)- smoking. After tooth extraction, linear tomography images and conventional periapical radiographs were taken to evaluate the following parameters: height, width and density of alveolar ridge. The radiographic examinations were repeated after six months. The intragroup analysis (paired t-test) demonstrated statistically significant difference for the bone height in smokers (P<0,001) and non-smokers (P=0,019), although no differences were noted between smokers and non-smokers (P> 0,05). The smoking group experienced a significant loss in bone width, in the middle (P=0,009) and coronary (P<0,001) region of the alveolar ridge, over six months. The radiographic density of the socket area in smokers was statistically lower than in non-smokers, after six months (P=0,006). In addition, smokers experienced a radiographic density loss over six months (P=0,011). The radiographic density in a well-defined area apical to the socket was also statistically significant different between smokers and non-smokers at baseline (P=0,036) and after 6 months (P=0,023). Within the limits of the present study, it was concluded that cigarette smoking may negatively influence the alveolar ridge remodeling after tooth extraction / Doutorado / Periodontia / Doutor em Clínica Odontológica
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Development of an osteoclast-targeted cathespin K inhibitor for postmenopausal osteoporosis : in vitro evaluation and pharmacokinetic profileDai, Rongchen 19 August 2020 (has links)
Background: Postmenopausal osteoporosis which results in a reduction of bone quality and bone density is one of the most prevalent diseases affecting people around the world. Cathepsin K (CatK) is one of the most potent proteases in lysosomal cysteine proteases family, of which main function is to mediate bone resorption. Currently, the Odanacatib (ODN) developed by Merck & Co. is the only Phase III CatK inhibitor candidate with high efficacy in treating postmenopausal osteoporosis. Unfortunately, the development of ODN was finally terminated due to the cardio-cerebrovascular adverse effects. In order to enhance the specificity of ODN to osteoclasts for suppression of bone resorption in postmenopausal osteoporosis, we have previously designed and synthesized (D-Asp8)-ODN conjugate by linking ODN with a promising osteoclast-targeted moiety D-Asp8. The data showed that D-Asp8 could facilitate the conjugated ODN specifically approaching osteoclasts, with reduced distribution in non-bone tissues, to inhibit the functional CatK activity within bone tissues in healthy rats. In this thesis, we hypothesized that the in vitro antiresorptive effects of (D-Asp8)-ODN conjugate were comparable with that of ODN. On the other hand, we also developed a QQQ-LC/MS method for quantitation of (D-Asp8)-ODN conjugate in plasma, which will be a valuable tool to support further pre-clinical studies. Aim: (1) To compare the antiresorptive effect between (D-Asp8)-ODN conjugate and ODN in vitro. (2) To develop and validate a practicable method for pharmacokinetic profile of (D-Asp8)-ODN conjugate in rats. Materials and Methods: The cytotoxic effect of (D-Asp8)-ODN conjugate and ODN were evaluated and compared by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The effect of (D-Asp8)-ODN conjugate and ODN on Receptor activator of nuclear factor κB ligand (RANKL)-induced osteoclasts formation and osteoclast function-related genes were evaluated and compared by Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining and quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR). The effect of (D-Asp8)-ODN conjugate and ODN on osteoclast bone resorption activities were evaluated and compared by bone resorption pit assay. Moreover, the pharmacokinetic profile of (D-Asp8)-ODN conjugate in rat plasma was determined by using triple quadrupole liquid chromatography-mass spectrometry (QQQ-LC/MS) system. Result: The cytotoxicity of (D-Asp8)-ODN conjugate was significantly lower than that of ODN on the murine macrophage RAW 264.7 cell line. (D-Asp8)-ODN conjugate had no effect on RANKL-induced osteoclast formation, which was comparable with that of ODN. (D-Asp8)-ODN conjugate had no effect on the mRNA level of CTSK, but it could upregulate the mRNA levels of ACP5 and OSCAR, which was comparable with that of ODN. (D-Asp8)-ODN conjugate inhibited osteoclast bone resorption activity, which was comparable with that of ODN. The newly established QQQ-LC/MS protocol had good precision and accuracy for detecting (D-Asp8)-ODN conjugate in rat plasma. Finally, the pharmacokinetic profile of (D-Asp8)-ODN conjugate in rat plasma was determined. Following subcutaneous administration, the time to reach maximum concentration (Tmax) was 1.0 h, the antibiotics area under the concentration time-curves from time zero to infinity (AUC0-∞) was found to be 27.78 ug·mL-1·h and the terminal half-life (t½) was 1.4 h. Conclusion: (D-Asp8)-ODN conjugate had no effect on RANKL-induced osteoclast formation, which was comparable with ODN. The antiresorptive effect of (D-Asp8)-ODN conjugate was comparable with that of ODN. On the other hand, a new QQQ-LC/MS protocol has been established for the pharmacokinetic profile of (D-Asp8)-ODN conjugate in rat.
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Estudo do efeito de bisfosfonatos nas células clásticas durante a ossificação endocondral do joelho de ratos e em cultura primária: abordagens morfológicas e moleculares. / Study of bisphosphonate effects on clastic cells during endochondral ossification in the rat knee and in primary cultures: morphological and molecular approaches.Rezende, Eloiza de 06 December 2013 (has links)
Na ossificação endocondral, osteoclastos (Oc) reabsorvem os remanescentes de cartilagem, e osteoblastos (Ob) depositam matriz óssea. Bisfosfonatos (Bps) inibem a ação dos Oc. Foi avaliado o efeito dos Bps alendronato (Aln) e etidronato (Etn) em joelhos de ratos jovens (in vivo) e na cultura primária de Oc (in vitro). O material in vivo foi analisado por MEV, MET e ML (morfologia e histoquímica para TRAP). RNA foi extraído para análise por RT-PRC e proteínas para análise por WB, que também foram extraídos após o tratamento da cultura com Bps. O tratamento com Etn revelou lâmina epifiseal desorganizada com extensa área de cartilagem; a MEV mostrou pouco osso trabecular com lacunas de reabsorção, que não foram observadas com Aln. O Aln revelou numerosos Oc TRAP-positivos latentes, confirmados por MET. In vivo os Bps diminuem a expressão dos genes analisados; In vitro o Aln diminui somente a expressão de Runx2, menos expresso com Etn, assim como Spp1. A expressão proteica variou entre os grupos. Aln é o mais potente em inibir os Oc enquanto o Etn atua sobre os Ob. / In endochondral ossification, clastic cells (Oc) resorb the calcified cartilage, while osteoblasts (Ob) form new bone. Bisphosphonates (Bps) inhibit the action of Oc. The effect of the Bps alendronate (Aln) and etidronate (Etn) on the knees of young rats (in vivo) and in primary cultures of Oc (in vitro) was evaluated. The specimens were analyzed by SEM, TEM, and LM or TRAP histochemistry. RNA was extracted to analysis by RT-PRC and protein to analysis by WB. RNA and protein were also extracted after the treatment of cultures with Bps. Rats treated with Etn exhibited a disorganized epiphyseal plate containing large area of cartilage; SEM showed few bone trabeculae with resorption lacunae, which were not observed in Aln specimens. Aln showed numerous latent Oc by TRAP histochemistry and TEM. In vivo, the Bps decreased the expression of all analyzed genes; in vitro, Aln decreased only the expression of Runx2 as well as SPP1, which expression was less with Etn. Protein expression varied among the groups. Aln is more potent for inhibiting the Oc, while Etn acts on Ob.
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Retenção prolongada de dentes decíduos: possíveis fatores etiológicos locais e sistêmicos / Persistent primary teeth: possible systemic and local etiological factorsXavier, Thaís Aparecida 24 June 2016 (has links)
A reabsorção radicular é um evento fisiológico para os dentes decíduos. Porém, há casos em que esses dentes são mantidos à cavidade bucal além do tempo de esfoliação normal, mesmo quando os dentes permanentes sucessores estão presentes. Como são escassos os dados disponíveis sobre a real causa da retenção prolongada dos dentes decíduos, as razões exatas merecem ser investigadas. O objetivo desta pesquisa foi analisar se fatores locais (RANKL, RANK, OPG, MCP-1, RUNX2) ou sistêmicos (vitamina D, PTH, IGF-I) poderiam estar relacionados à biologia óssea e radicular em casos de retenção prolongada de dentes decíduos, com presença dos dentes permanentes correspondentes in situ, a fim de se buscar compreender possíveis etiologias do quadro. Para isso, foram selecionados pacientes com dentes decíduos em retenções prolongadas (n=14, grupo R) e pacientes sem dentes decíduos retidos (n=14, grupo C), mas com indicações ortodônticas de exodontias. Após as extrações dentais, foram coletados remanescentes do ligamento periodontal em torno das raízes dentais e amostras de sangue dos pacientes, que foram avaliados por qPCR e quimioluminescência, respectivamente. Houve diferença estatisticamente significante para RANKL (p=0,023) entre os grupos C e R, com menor expressão gênica de RANKL no grupo R. Da mesma forma, foi observada uma menor expressão de RANK no grupo R, comparado ao grupo C; contudo, essa diferença não foi significativamente diferente. Houve também um resultado próximo do valor de significância para vitamina D (p=0,0572), com níveis séricos reduzidos dessa vitamina no grupo R. Não houve diferenças estatisticamente significantes entre os grupos para os outros fatores estudados. Com base nos dados deste estudo, pode-se sugerir que menores expressões de RANKL e RANK possam estar envolvidas na retenção prolongada de dentes decíduos e que baixos níveis séricos de vitamina D também possam estar associados com o retardo na esfoliação radicular decídua. / Root resorption is a physiological event for primary teeth. However, there are cases where these teeth are maintained beyond the normal exfoliation time, even when the corresponding permanent teeth is present. Since there are few data concerning the real cause of prolonged retention of primary teeth, the exact reasons must be investigated. The aim of this study was to assess if local factors like RANKL, RANK, OPG, MCP-1, RUNX2, or systemic factors such as vitamin D, PTH and IGF-I could to be involve in the bone and root biology, in cases of persistent primary teeth, with the corresponding permanent teeth in situ. Patients with persistent primary teeth (n=14, group R) and patients without persistent primary teeth (n=14, group C), but with orthodontic indication of tooth extraction, were selected. After the teeth extractions, remaining periodontal ligament around the roots and blood samples were collected and assessed by qPCR and chemiluminescence, respectively. The present study found significant lower level of RANKL in the group R compared to group C (p=0,023). Although it was not significantly different, the level of RANK was also reduced in group R compared to group C. The expression of others local factors was similar between group R and C. Concernig systemic factors, the serum level of vitamin D were reduced in the group R compared to group C (p=0,0572) although it was not statistically significant. There were no significant differences between both groups for the others systemic studied factors. It is possible that a lower RANKL and RANK expression is involved in prolonged retention of primary teeth and our data also suggest that low serum levels of vitamin D could also be involved in the etiology of the retention.
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Análise da movimentação dentária induzida em ratos: influência do alendronato nas reabsorções dentárias, estudo comparativo em cortes transversais e longitudinais e avaliação microscópica em diferentes períodos de observação / Analysis of induced tooth movement in rats: Influence of alendronate on root resorptions, comparative studies on transverse and longitudinal sections and microscopic evaluation at different study periodsFracalossi, Ana Carolina Cuzzuol 03 August 2007 (has links)
A movimentação dentária induzida em ratos representa um bom modelo para estudar a aposição e reabsorção óssea induzidas na normalidade e nas doenças ósseas metabólicas, bem como nas avaliações quanto aos efeitos de medicamentos. Desta maneira, no primeiro capítulo estudaremos a influência do alendronato no percentual de reabsorções radiculares durante a movimentação dentária induzida, utilizando o modelo experimental em ratos em cortes transversais. O alendronato é um tipo de bisfosfonato, uma classe de drogas amplamente utilizada na medicina, no controle da osteopenia, prevenindo a osteoporose humana e na prevenção das fraturas em osteoporose pós-menopausal. O modelo experimental empregado nos trabalhos é o movimento de inclinação mesial do primeiro molar superior. Variações metodológicas são observadas neste modelo experimental em ratos, quanto aos períodos de movimentação e aos cortes empregados para a análise microscópica. Desta maneira, no segundo capítulo compararemos o percentual e a freqüência das reabsorções radiculares em cortes transversais e longitudinais, e sugeriremos o plano de corte ideal para o estudo da movimentação dentária induzida em ratos. A biologia da movimentação dentária induzida modifica-se por uma série de condicionantes, por exemplo, por diferentes períodos de observação e por planos dos cortes microscópicos Desta maneira, no terceiro capítulo avaliaremos os fenômenos teciduais e celulares da movimentação dentária induzida nos períodos de três, cinco, sete e nove dias de observação e nos planos dos cortes microscópicos transversais e longitudinais. / Induced tooth movement in rats is a good model to investigate the induction of bone resorption and apposition in normality and in metabolic bone diseases, as well as to evaluate the effects of drugs. Thus, the first chapter addresses the influence of alendronate on the percentage of root resorptions during induced tooth movement, using the experimental model of rats on transverse sections. Alendronate is a type of bisphosphonate, a class of drugs widely used in Medicine for osteopenia control, human osteoporosis prevention, as well as for fracture prevention in postmenopausal osteoporosis. Investigations employ the experimental model of mesial inclination of the maxillary first molar. Methodological variations are observed in this experimental model in rats concerning the periods of tooth movement and sections employed for microscopic analysis. Thus, on the second chapter, the percentage and frequency of root resorptions on transverse and longitudinal sections are compared, and the ideal direction of section for investigation of induced tooth movement in rats is suggested. The biology of induced tooth movement is changed by several factors, e.g. the different study periods and directions of microscopic sections. For this reason, the third chapter comprises evaluation of tissue and cellular phenomena of induced tooth movement at study periods of three, five, seven and nine days, on transverse and longitudinal sections.
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Tratamento de defeitos ósseos cervicais com materiais osseocondutores porosos imediatamente à instalação de implantes: estudo histológico, histométrico, micro-tomográfico e de análise de frequência de ressonância em cães / Treatment of cervical bone defects with porous osteoconductive materials in immediate implants: a histological, histometric, micro-CT and RFA study in dogsAntunes, Antonio Azoubel 13 September 2013 (has links)
O objetivo do presente estudo foi comparar a eficácia da implantação de biomateriais porosos na neoformação óssea e reparo de defeitos cervicais mandibulares em cães, com ou sem a técnica de regeneração óssea guiada (ROG). Bio-Oss Block® (BB), Bio-Oss Collagen® (BC), Bio-Oss® em grânulos (BG), osso autógeno (Ab) e coágulo (Cg) foram utilizados nas mesmas situações experimentais. Para o grupo com membrana foi utilizado o BioGide®. Doze cães foram submetidos a extrações dos pré-molares e primeiros molares mandibulares bilateralmente. Quatro meses após cinco defeitos ósseos (6 mm de diâmetro/4 mm de profundidade) foram confeccionados em um lado. Implantes de 3,3 x 10 mm foram instalados na mesial de cada defeito, proporcionando um \"gap\" distal de 2,7 mm. Os defeitos foram aleatoriamente preenchidos com Ab, Cg, BB, BC e BG. Os mesmos procedimentos foram executados no lado oposto após oito semanas. A membrana foi utilizada para recobrir os defeitos em metade dos lados. Os animais foram sacrificados após oito semanas. A estabilidade dos implantes foi aferida pelo Osstell Mentor®, na instalação do implante e no sacrifício. Os espécimes (n=60, sendo 3 de cada grupo) foram escaneados em micro-tomógrafo Skyscan® 1172. Após aquisição das imagens, o volume de interesse de 3,0 x 6,0 x 4,0 mm foi estabelecido e os parâmetros relativos à formação óssea foram avaliados. Todos os biomateriais foram escaneados in vitro para avaliação da porosidade. Utilizando a técnica de cortes por desgaste, lâminas histológicas foram confeccionadas para a avaliação histológica e histométrica de cada espécimen. As análises histométricas revelaram que o BC apresentou formação óssea semelhante ao Ab em 8 semanas sem BGd. O Cg mostrou a maior formação óssea entre os tratamentos testados em 16 semanas com BGd, e foi superior ao BB e BG em 8 semanas sem BGd (p<0,05). O BB exibiu pior formação óssea entre os tratamentos (8 e 16 semanas, com ou sem membrana). O BC obteve o melhor desempenho dentre os biomateriais. Todos os biomateriais foram parcialmente reabsorvidos de 8 a 16 semanas, no entanto, o BB foi encontrado em maior quantidade em comparação com os demais biomateriais (p<0,05). Em relação à análise da crista alveolar, o BB apresentou a menor reabsorção entre os tratamentos, com e sem BGd a 8 e 16 semanas (p<0,05). A aplicação da BGd proporcionou maior ISQ em 16 semanas, independentemente do material testado (p<0,05). A análise micro-tomográfica mostrou que quando a BGd não foi utilizada, o BG proporcionou a maior quantidade de osso no interior do defeito, seguido pelo BC (p<0,05). Quando o defeito foi coberto com BGd, o Ab rendeu superior formação óssea (p>0,05). A análise de superfície óssea mostrou valores aumentados em sítios tratados com BG, seguido por BC em 8 semanas sem BGd, e Ab em 8 semanas com BGd (p<0,05). O BC apresentou superfície/volume ósseo superior a 8 (com e sem BGd) e 16 semanas com BGd (p<0,05). O BB apresentou os menores valores em 16 semanas (sem BGd). O Cg em 16 semanas (com BGd) foi o pior entre os tratamentos aplicados (p<0,05). Em relação à espessura trabecular, Ab e BB apresentaram respectivamente valores maior e menor (p<0,05), independente do tempo experimental avaliado ou uso de membrana. A análise da porosidade dos biomateriais revelou que o BG apresentou maiores números, volume e superfície de poros fechados. O BB apresentou maiores valores de volume de poros abertos, porosidade aberta e porosidade total em comparação com os outros materiais. Conclui-se que a implantação de bloco de alta porosidade (BB) falhou em proporcionar maior reparo ósseo no interior do defeito e foi o tratamento que mais reduziu a reabsorção da crista óssea alveolar distal. Biomateriais com menor porosidade (BC e BG) apresentaram superior ou semelhante formação óssea e estabilidade dos implantes em comparação ao osso autógeno. A utilização da técnica de ROG melhorou o padrão de formação óssea em todos os tratamentos e períodos testados e reduziu a presença de tecido mole no interior do defeito. Uma relação inversa entre a porosidade dos biomateriais e a formação óssea in vivo foi observada no modelo experimental adotado. / The aim of this study was to compare the effectiveness of porous biomaterials in bone formation and repair of cervical mandibular defects in dogs, with or without Guided Bone Regeneration (GBR) technique. Bio-Oss Block® (BB), Bio-Oss Collagen® (BC), Bio-Oss® in granules (BG), autogenous bone (Ab) and coagulum (Cg) were used under the same experimental conditions. For the membrane group, BioGide® was used. Twelve dogs underwent bilateral extractions of mandibular premolars and first molars. After four months five bone defects (6 mm long / 4 mm deep) were prepared at one side. Implants of 3.3 x 10 mm were installed on each of mesial defect, providing a distal gap of 2.7 mm. The defects were randomly filled with Ab, Cg, BB, BC and BG. The same procedures were performed in the opposite side after eight weeks. A membrane was used to cover the defects in half of the sides. Animals were sacrificed after eight weeks. Implant stability was measured by Osstell Mentor®, at implant installation and sacrifice. The specimens (n=60, 3 in each group) were scanned in Skyscan® 1172 micro-CT scanner. A volume of interest of 3.0 x 6.0 x 4.0 mm was established and the parameters related to bone formation were evaluated. All used biomaterials were also scanned for in vitro porosity evaluation. Using Exakt® system, ground section of each specimen were prepared for histological and histometric assessment. Histometric analysis revealed that BC presented similar bone formation to Ab in 8 weeks without BGd. Cg showed greater bone formation between treatments at 16 weeks with BGd, and was superior to BG and BB at 8 weeks without BGd (p<0.05). BB exhibited worse bone formation within treatments (8 and 16 weeks, with or without membrane). BC had the best performance among biomaterials. All biomaterials were partially resorbed from 8 to 16 weeks. However, BB was found in greater amounts in comparison with other biomaterials (p<0.05). Regarding the alveolar crest analysis, BB had the lowest resorption between treatments with and without BGd at 8 and 16 weeks (p<0,05). The BGd use promoted higher final ISQ values at 16 weeks, regardless the tested treatment (p<0.05). Micro-CT analysis showed that when BGd was not used, BG yielded the highest amount of bone within the defect, followed by BC (p<0.05). When the defect was covered with BGd, Ab yielded higher bone formation (p>0.05). Bone surface area analysis showed that increased values in sites treated with BG, followed by BC without BGd at 8 weeks, and Ab at 8 weeks with BGd (p<0.05). The BC presented greater Bone Surface Area/Bone volume at 8 (with and without BGd) and 16 weeks with BGd (p<0.05). BB had the lowest values at 16 weeks (without BGd). Cg presented the worst performance among treatments at 16 weeks (with BGd) (p<0.05). Regarding the Trabecular Thickness, Ab and BB showed the highest and lowest values, respectively (p<0.05), regardless of the time point or membrane use. In biomaterials porosity analysis, BG showed higher numbers, volume, and surface area of closed pores. BB had the highest volume of open pores, open porosity and total porosity compared with the other treatments. It can be concluded the use of a high porosity block (BB) failed to provide greater bone formation within the defect area and it was the treatment that better reduced distal alveolar crest resorption. Biomaterials with lower porosity (BC and BG) showed higher or similar bone formation and implant stability if compared to autogenous bone. The appliance of BGd improved bone formation in all treatments and tested periods and reduced soft tissue presence within the defect. An inverse relationship between biomaterials\' in vitro porosity and in vivo bone formation was observed in the experimental model used.
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Papel do receptor NLRP12 na modulação da reabsorção óssea durante a progressão da lesão periapical experimental / Role of NLRP12 on bone resorption during the progression of a periapical lesion modelTaira, Thaise Mayumi 29 June 2017 (has links)
O receptor NLRP12 é um receptor intracelular que está envolvido no reconhecimento de PAMPs e DAMPs durante uma infecção. Foi visto que durante a osteoclastogênese, há uma diminuição da transcrição de NLRP12, e que este receptor inibe a reabsorção óssea através da supressão da via alternativa de NF-κB, exercendo um papel protetor sobre o tecido ósseo. Além disso, foi observado que a deficiência de NLRP12 em monócitos sob o estímulo de RANKL levou a maior estabilização de NIK e maior translocação de RelB para o núcleo, aumentando a formação dos osteoclastos in vitro. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar o papel de NLRP12 no desenvolvimento e progressão da lesão periapical induzida em camundongos. Para isso, foi induzida a lesão periapical dos primeiros molares inferiores dos camundongos fêmeas C57/Bl6 (WT) e camundongos deficientes para o receptor NLRP12 (Nlrp12-/-). Após 14 e 21 dias, as amostras de mandíbula foram submetidas às análises: determinação da área de lesão periapical em cortes histológicos; expressão gênica de marcadores osteoclastogênicos por qPCR; contagem de osteoclastos submetidos ao ensaio de histoenzimologia (TRAP); avaliação enzimática das MMPs por Zimografia. Os linfonodos cervicais foram submetidos à análise da expressão dos fatores de transcrição T-bet, RORγt, GATA-3 e Foxp-3 por qPCR. Aos 14 dias, na análise histomorfométrica os animais Nlrp12-/- apresentaram uma maior lesão periapical quando comparados aos animais WT, associado com o aumento da expressão de Trap, Catepsina K e MMP-9 em amostras de hemi-mandíbulas com lesão. Além disso, o número de células TRAP positivas foi significantemente maior em Nlrp12-/- com lesão quando comparado com seu controle, enquanto no grupo WT com e sem lesão foram semelhantes. Assim como foi observado o maior aumento dos osteoclastos presentes no local da lesão dos animais Nlrp12-/-, estes também se mostraram com maior atividade gelatinolítica de MMP-9 e MMP-2 em relação ao seu controle, diferente dos animais WT que não apresentaram diferença entre os grupos controle e com lesão. Ainda nesse período, foi observado nas amostras de linfonodos cervicais que, no grupo Nlrp12-/- houve uma tendência à maior expressão de RORγt, seguidos de menor expressão de T-bet quando comparados com o grupo WT. Aos 21 dias, os animais WT e Nlrp12-/- apresentaram lesões periapicais de tamanhos semelhantes. Além disso, somente o grupo Nlrp12-/- com lesão apresentou um aumento significativo da expressão de Trap em relação ao seu controle e a expressão de Catepsina K foi semelhante em ambos os grupos. Neste período houve um aumento na quantidade de células TRAP positivas em ambos os grupos com lesão quando comparados com seus respectivos controles, entretanto também não houve diferença entre os animais WT e Nlrp12-/-. A atividade de MMP-9 e MMP-2 foram semelhantes entre os animais WT e Nlrp12-/- e entre seus respectivos controles aos 21 dias. Nossos dados sugerem que a deficiência de NLRP12 levou a uma maior perda óssea aos 14 dias de lesão periapical e que isso ocorre via modulação da formação e atividade dos osteoclastos. Portanto, o NLRP12 inibe a osteoclastogênese e a atividade dos osteoclastos durante a fase inicial da lesão periapical, retardando o desenvolvimento da doença. / NLRP12 is an intracellular sensor that recongnizes PAMPS and DAMPs during infeccion. It was seen that NLRP12 transcription is down-regulated during osteoclastogenesis, and NLRP12 protect bone via suppression of alternative NF-κB-induced osteoclastogenesis. It has been shown that NLRP12 deficiency in monocytes under RANKL stimuli exhibited more stabilization of NIK and nuclear translocation of RelB, increasing osteoclasts formation in vitro. Therefore, the aim of this study was to evaluate the role of NLRP12 in the development and progression of experimentally induced periapical lesions in mice. Periapical lesions were induced in first molars of WT and NLRP12 knockout (KO) mice. Samples were collected at 14 and 21 days of the lesion for the analyses. Jaw samples with lesion and control area were subjected to periapical lesions area determination by histological sections; osteoclastogenic markers expression by q-PCR; count of osteoclasts submitted to the enzyme assay for TRAP; evaluation of MMPs activity by Zymography. The expression of T cells markers´ transcription factors was evaluated in lymph nodes by q-PCR. Fourteen days after periapical lesion induction, histological analysis revealed that NLRP12KO mice exhibited higher area of periapical lesion compared to WT group, which was associated with up-regulated mRNA expression of Trap, Cathepsin K and MMP-9 in the jaw samples. Moreover, the number of multinuclear TRAP-stained cells was significantly higher in the NLRP12KO with lesion group when compared to it control, whereas in the WT the number between the lesion and control groups were similar. Still, NLRP12KO showed higher MMP-9 and -2 gelatinolytic activity than it control, unlike WT mice that showed no difference between control and lesion group. In this period, NLRP12KO mice lymph nodes showed more RORγt expression than WT mice and less T-bet expression. At 21 days, WT and NLRP12KO presented periapical lesions of similar sizes. In addition, NLRP12KO group with lesion showed a significant increase in Trap expression when compared with their control, but the increase in Trap e Cathepsin K was similar in both groups. Additionally, there was an increase of multinuclear TRAP-stained cells in both lesion groups when compared with their respective controls; however, there was also no difference between WT and NLRP12KO mice. MMP-9 and -2 activity was similar between WT and NLRP12KO and with their respective controls at 21 days. Our results suggest that NLRP12 deficiency led to increased bone loss at 14 days of periapical lesion and it occurs due to increased osteoclasts formation and activity. Therefore, NLRP12 inhibits osteoclastogenesis and osteoclasts activity during the early stages of periapical lesion, slowing the development of the disease.
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Avaliação de uma nova matriz tridimensional no processo de reparo de alvéolos dentários em humanos para preservação do rebordo alveolar / Investigation of a novel scaffold in the healing of extraction sockets in humans to alveolar bone preservationPires, Ana Claudia de Araujo 15 December 2010 (has links)
A preservação da arquitetura óssea alveolar, durante o processo de reparo do alvéolo dentário após exodontias, é um grande desafio clínico. É esperado que 40 a 60% do volume ósseo alveolar inicial sejam perdidos nos primeiros seis meses. O OsteoScaf é um novo substituto ósseo, desenvolvido pela Universidade de Toronto e representa uma alternativa promissora para a manutenção da integridade óssea alveolar nesse cenário. Esse material é uma matriz tridimensional trifásica reabsorvível e osteocondutiva, composta por ácido polilático-co-glicólico e duas fases de fosfato de cálcio reabsorvível. Com o objetivo de avaliar se o OsteoScaf poderia reduzir a perda óssea durante a fase de reparação/remodelação alveolar após a exodontia, quando comparado com o controle (apenas coágulo sanguíneo), foram implantados cilindros desse material (com duas porosidades diferentes - poros grandes e poros pequenos) em alvéolos de dentes anteriores superiores humanos, imediatamente após a exodontia. Dez pacientes (32 alvéolos) fizeram parte deste estudo, onde 16 alveólos receberam o implante de OsteoScaf e 16 foram usados como controle. Foram feitas tomografias computadorizadas de feixe cônico (TCFC) imediatamente após a exodontia e também aos 120 dias pós-operatóro, quando foram realizadas biópsias ósseas analisadas por microtomografia computadorizada (microTC) e microscopia. A análise quantitativa das microTCs mostraram mais trabéculas ósseas e menor espaço entre elas, com OsteoScaf de poros menores. A análise quantitativa das TCFC indicou menor perda óssea no grupo experimental, principalmente o OsteoScafTM de poros maiores. A avaliação qualitativa dos cortes histológicos mostrou neoformação óssea justaposta ao material, demonstrando sua natureza osteocondutiva. Nossas observações mostraram que o OsteoScaf (de poros pequenos ou grandes) reduziu a perda óssea alveolar durante o processo de reparação/remodelação óssea pós-exodôntica, aos 120 dias de pós-operatório, em humanos. Essa pesquisa recebeu apoio financeiro da CAPES (Brasil) e TRT (Canadá). / Preserving alveolar bone architecture during socket healing is a significant clinical challenge. It is expected that 40% to 60% of the initial alveolar bone volume will be lost up to 6 months after tooth extraction. OsteoScaf is a novel bone substitute material developed at the University of Toronto and represents a promising alternative for maintaining alveolar bone integrity in this clinical scenario. It is a resorbable, osteoconductive, 3-phase composite scaffold comprising poly(lactide-co-glycolide) and 2 osteoclast-resorbable calcium phosphate phases. Our hypothesis was that OsteoScaf lithomorphs (10x3mm cylinders), placed in fresh extraction sockets, would reduce post-extraction bone loss compared to sockets with coagulum alone (control). Thus, we placed OsteoScaf (of two different porosities small and large pores) in fresh extraction sockets of maxillary anterior teeth in humans. A total of 10 patients (32 sockets) were included in the study, of which 16 sockets were grafted with OsteoScaf and 16 were used as control. Cone Beam Computer Tomography (CBCT) was performed both immediately following extraction and also at 120 days postoperatively, at which time biopsy samples were also harvested for micro computer tomography (µCT) and histological analyses. Quantitative analysis of the µCT showed more bone trabeculae and smaller trabecular separation in the experimental group than control, specifically with small pore scaffolds. In addition, quantitative analysis of CBCT showed less bone resorption in the OsteoScafTM groups, especially with the large pore scaffolds. Qualitative histological analysis showed new bone tissue in direct apposition to the scaffold demonstrating its osteoconductive nature. Our observations showed that the OsteoScafTM groups (small and large pores) reduced alveolar bone loss after 120 days of socket healing in humans. Grants: CAPES (Brazil) and TRT (Canada).
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