Orientadores: Adriana Franco Paes Leme, Ricardo Della Coletta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-28T02:02:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Macedo_CarolinaCarneiroSoares_M.pdf: 3754068 bytes, checksum: 36ddb6796cb6690a37ce3e4e9447009c (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: O carcinoma espinocelular oral (CEC) é o tipo de neoplasia maligna mais comum em cabeça e pescoço, com alta prevalência e morbidade. O tratamento é baseado em sistemas de classificação pouco precisos e o prognóstico é ruim em muitos casos. Diferentes padrões histológicos já foram descritos na tentativa de melhor compreender o curso da doença, predizer prognóstico e auxiliar no tratamento. As diferentes áreas do tumor apresentam características morfológicas e moleculares distintas resultando em comportamentos clínicos específicos, e estudos recentes apontam a região de invasão tumoral (do inglês invasive front tumor) como área de interesse para análises de perfil molecular e identificação de possíveis marcadores de prognóstico. O padrão de invasão neoplásico tem relação com a agressividade tumoral e a presença de ilhas no fronte invasivo já foi descrita como pior padrão. Assim, o objetivo desta dissertação foi comparar a composição diferencial de proteínas totais de ilhas neoplásicas grandes e pequenas do fronte e do interior do tumor, e correlacionar essas proteínas com o prognóstico. A proteômica foi associada à microdissecção a laser (ML), consideradas juntas como ferramentas de alta robustez para identificação de proteínas em tecidos neoplásicos em regiões específicas. Vinte peças cirúrgicas de CEC oral de língua fixadas em parafina foram submetidas a ML para obtenção das amostras compostas pelas seguintes regiões do tecido: 1) ilhas neoplásicas grandes da região frontal, 2) ilhas neoplásicas pequenas da região frontal, 3) ilhas neoplásicas grandes do interior do tumor e 4) ilhas neoplásicas pequenas do interior do tumor, seguida pela extração de proteínas e análise por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS/MS). A anotação funcional das proteínas e a correlação aos dados clínico-patológicos dos pacientes foram realizadas. Foram identificadas 1906 proteínas totais, sendo 1480 proteínas comuns entre as quatros regiões estudadas. Duas proteínas foram exclusivas nas ilhas grandes do fronte e sete nas ilhas grandes do interior. Oitenta e cinco proteínas foram diferencialmente expressas entre a região do fronte e o interior tumoral, e destas, 57 foram relacionadas a dados clínico-patológicos importantes para o prognóstico. Os processos biológicos, como desenvolvimento da epiderme, adesão celular, apoptose, ciclo celular, degradação da matriz extracelular e expressão gênica, evidenciados entre as proteínas diferencialmente expressas confirmam as mudanças moleculares associadas à progressão neoplásica. A combinação de ML, MS e bioinformática foi capaz de identificar um painel de proteínas que podem auxiliar a desvendar o curso do CEC oral, predizendo agressividade e prognóstico. Em acréscimo, essa abordagem pode ajudar ainda na compreensão das diferenças e dos mecanismos de sinalização entre diferentes áreas do tecido / Abstract: Oral squamous cell carcinoma (SCC) is the most common type of malignant tumor in head and neck, with high prevalence and morbidity. Treatment is based on inaccurate classification systems and the prognosis is poor in many cases. Different histological patterns have been described in an attempt to better understand the course of the disease, predict prognosis and assist in treatment. Different areas of the tumor have different morphological and molecular characteristics resulting in specific clinical behaviors, and recent studies point to the region of tumor invasion as an area of interest for molecular profile analysis and identification of possible prognostic markers. The pattern of neoplastic invasion is related to tumor aggressiveness and the presence of islands in the invasive front has been described as worst invasion pattern. The objective of this work was to compare the protein differential expression of large and small islands neoplastic from the front and the inner tumor, and to correlate these proteins with prognosis. Proteomics was associated with laser microdissection (ML), and together they are considered robustness tools to identify proteins in neoplastic tissues in specific regions of interest. Twenty surgical specimens of oral tongue SCC fixed in paraffin were subjected to ML to obtain sample composed by the following regions of tissue: 1) large neoplastic frontal islands, 2) small neoplastic islands of the frontal region, 3) large neoplastic islands inside the tumor and 4) small islands within the neoplastic tumor, followed by extraction and analysis of proteins by liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC-MS/MS). The functional annotation of proteins and correlation with clinicopathological data from patients were performed. A total of 1906 proteins were identified, with 1480 common proteins between the four regions studied. Two proteins were exclusives in the large islands of the forehead and seven in large islands in the interior. Eighty-five proteins were differentially expressed between the front region and inner tumor, and of these, 57 were related to clinical and pathological data. The biological processes such as development of the epidermis, cell adhesion, apoptosis, cell cycle, disassembly of the extracellular matrix and gene expression, evidenced among the differentially expressed proteins confirmed the molecular changes associated with neoplastic progression. The combination of ML, MS, and bioinformatics was able to identify a panel of proteins that may help to unravel the course of oral SCC, predicting aggressiveness and prognosis. In addition, this approach may also help in understanding the differences and signaling mechanisms between different areas of the tumor tissue / Mestrado / Patologia / Mestra em Estomatopatologia

A cirurgia micrográfica de Mohs (CMM) é realizada em fases sucessivas de retirada tumoral. Cada fase demora de uma a duas horas, dependendo do tamanho da lesão; portanto, é muito importante conseguir predizer o número de fases da cirurgia a fim de poder programar melhor o tempo de uso da sala cirúrgica e da equipe cirúrgica, o uso de anestésicos, os custos da cirurgia, melhor orientar o paciente e assegurar a remoção completa do tumor. Com o intuito de encontrar fatores preditivos do número de fases da CMM no tratamento do carcinoma espinocelular da cabeça, realizou-se o levantamento dos prontuários de 44 pacientes submetidos a 51 CMM no ambulatório de cirurgia dermatológica da Divisão de Dermatologia do HC-FMUSP/SP, de 1994 a 2003. Foram constituídos três grupos quanto ao número de fases da CMM: uma fase, duas fases e três ou mais fases. Os grupos foram comparados em relação às variáveis: duração da lesão até a cirurgia, morfologia, tamanho e limites da lesão, tumor primário ou recidivado, grau de diferenciação histológica do tumor e localização anatômica do tumor. Identificou-se um único fator significante na análise univariada: a distribuição dos tumores recidivados segundo o número de fases da cirurgia e que diferiu da distribuição dos tumores primários (p=0,081, teste exato de Fisher), sendo maior o número de fases para os tumores recidivados. Na análise multivariada, não houve fatores estatisticamente significantes que pudessem estar associados ao número de fases da cirurgia. Na análise da razão de chances, observou-se maior chance de apresentar maior número de fases para as variáveis: limites clínicos imprecisos, tumor ulcerado, tumor recidivado, tumor mais agressivo histologicamente e tumor maior que 1 cm. / Mohs micrographic surgery (MMS) is proceeded in successive stages of cancer removal. Each stage lasts from 1 to 2 hours, depending on the tumor size. So it is very important to predict the number of phases of the surgery so that one can plan better the time of the surgical room use, the time of the surgeon and his team, the use of anaesthetics, the surgical costs, to give the patient better orientations about his surgery and to ensure complete tumor erradication. With the intention to find predictive factors of the number of stages of MMS in the treatment of squamous cell carcinoma, we reviewed the record of 44 patients on a total of 51 surgeries proceeded in the dermatologic surgical clinic of the Dermatological Division of HC-FMUSP/SP from 1994 to 2003. For the number of stages in the MMS we established 3 groups: 1 stage, 2 stages and 3 or more stages. These groups were compared with regard to this variables: continuance of the lesion until the surgery, morphology and size of the lesion, lesion limits, primary or recurrent cancer, histological grade (Broders) and anatomic localization. In the univariated analysis one single factor was significant: the distribution of the recurrent cancers related to the number of stages of the surgery that was different from the distribution of the primary ones (p=0.081, Fisher\'s exact test), been higher the number of stages for the recurrent cancers. In the multivariated analysis, there were no statistically significant factors associated with higher number of stages of the surgery. In the analysis of the odss ratio, we noted a higher chance of a higher number of stages for the variables: inaccurate clinical limits, ulcerated lesions, recurrent cancer, higher aggressive histology and tumor bigger than 1 cm.

A cirurgia micrográfica de Mohs (CMM) é realizada em fases sucessivas de retirada tumoral. Cada fase demora de uma a duas horas, dependendo do tamanho da lesão; portanto, é muito importante conseguir predizer o número de fases da cirurgia a fim de poder programar melhor o tempo de uso da sala cirúrgica e da equipe cirúrgica, o uso de anestésicos, os custos da cirurgia, melhor orientar o paciente e assegurar a remoção completa do tumor. Com o intuito de encontrar fatores preditivos do número de fases da CMM no tratamento do carcinoma espinocelular da cabeça, realizou-se o levantamento dos prontuários de 44 pacientes submetidos a 51 CMM no ambulatório de cirurgia dermatológica da Divisão de Dermatologia do HC-FMUSP/SP, de 1994 a 2003. Foram constituídos três grupos quanto ao número de fases da CMM: uma fase, duas fases e três ou mais fases. Os grupos foram comparados em relação às variáveis: duração da lesão até a cirurgia, morfologia, tamanho e limites da lesão, tumor primário ou recidivado, grau de diferenciação histológica do tumor e localização anatômica do tumor. Identificou-se um único fator significante na análise univariada: a distribuição dos tumores recidivados segundo o número de fases da cirurgia e que diferiu da distribuição dos tumores primários (p=0,081, teste exato de Fisher), sendo maior o número de fases para os tumores recidivados. Na análise multivariada, não houve fatores estatisticamente significantes que pudessem estar associados ao número de fases da cirurgia. Na análise da razão de chances, observou-se maior chance de apresentar maior número de fases para as variáveis: limites clínicos imprecisos, tumor ulcerado, tumor recidivado, tumor mais agressivo histologicamente e tumor maior que 1 cm. / Mohs micrographic surgery (MMS) is proceeded in successive stages of cancer removal. Each stage lasts from 1 to 2 hours, depending on the tumor size. So it is very important to predict the number of phases of the surgery so that one can plan better the time of the surgical room use, the time of the surgeon and his team, the use of anaesthetics, the surgical costs, to give the patient better orientations about his surgery and to ensure complete tumor erradication. With the intention to find predictive factors of the number of stages of MMS in the treatment of squamous cell carcinoma, we reviewed the record of 44 patients on a total of 51 surgeries proceeded in the dermatologic surgical clinic of the Dermatological Division of HC-FMUSP/SP from 1994 to 2003. For the number of stages in the MMS we established 3 groups: 1 stage, 2 stages and 3 or more stages. These groups were compared with regard to this variables: continuance of the lesion until the surgery, morphology and size of the lesion, lesion limits, primary or recurrent cancer, histological grade (Broders) and anatomic localization. In the univariated analysis one single factor was significant: the distribution of the recurrent cancers related to the number of stages of the surgery that was different from the distribution of the primary ones (p=0.081, Fisher\'s exact test), been higher the number of stages for the recurrent cancers. In the multivariated analysis, there were no statistically significant factors associated with higher number of stages of the surgery. In the analysis of the odss ratio, we noted a higher chance of a higher number of stages for the variables: inaccurate clinical limits, ulcerated lesions, recurrent cancer, higher aggressive histology and tumor bigger than 1 cm.

Orientador: Juliano Vilaverde Schmitt / Resumo: FUNDAMENTOS: As queratoses actínicas são lesões pré-malignas com risco de transformação para carcinoma espinocelular invasivo. OBJETIVOS: Correlacionar as características clínicas das queratoses actínicas dos antebraços e dorso das mãos com o grau de atipia do exame histológico (Keratinocyte Intraepidermal Neoplasia) e a expressão lesional e perilesional de p53 e Ki-67; desenvolver e validar uma escala de gravidade clínica que possa inferir o grau histológico das queratoses actínicas. MÉTODOS: Estudo transversal em que foram avaliadas clinicamente 162 queratoses actínicas quanto ao diâmetro, eritema, infiltração, hiperqueratose e exulceração e biopsiadas 34 lesões com diferentes padrões. As características clínicas foram correlacionadas com o grau de atipia histológica e expressão de p53 e Ki-67. RESULTADOS: As características clínicas apresentaram baixa consistência entre si (Cronbach=0,24). Apenas o diâmetro das lesões se correlacionou significativamente com o grau de atipia (p=0,04), e apenas o eritema, a hiperqueratose e o diâmetro se correlacionaram com as marcações imuno-histoquímicas. Foi desenvolvido um escore clínico incluindo o diâmetro, a hiperqueratose e a exulceração, o qual se correlacionou significativamente com o grau de atipia (Rho de Spearman=0,43; p=0,01). LIMITAÇÕES DO ESTUDO: O escore obtido não pode ser extrapolado para áreas que não sejam os antebraços e dorso das mãos; não houve seguimento prospectivo dos pacientes; não incluímos pacientes com genoderm... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: BACKGROUND: Actinic keratosis are pre-malignant lesions with risk of transformation for invasive squamous cell carcinoma. OBJECTIVES: To correlate the clinical features of actinic keratosis of the forearms and dorsum of the hands with its histological features (Keratinocyte Intraepidermal Neoplasia) and p53 and Ki-67 staining in the lesion and around the lesion; develop and validate a clinical severity scale that can infer the histological grade of actinic keratosis. METHODS: A cross-sectional study in which 162 actinic keratosis were clinically evalueted for diameter, erythema, infiltration, hyperkeratosis and exulceration, and 34 lesions with different patterns were biopsied. Clinical features were associated with degrees of atypia and p53 and Ki-67 staining. RESULTS: Clinical features were low in consistency (Cronbach=0.24). Only the diameter of the lesions was significantly correlated with the degree of atypia (p=0.04), and only erythema, hyperkeratosis and diameter were correlated with immunohistochemical staining. A clinical score including the diameter, hyperkeratosis and exulceration was developed, with significant correlation with the degree of atypia (Spearman's Rho=0.43; p=0.01). LIMITATIONS: The developed score can not be extrapolated to areas other than the forearms and back of the hands; there was no prospective follow-up of the patients; we did not include patients with genodermatosis or immunosuppressed patients. CONCLUSION: Clinical features of actinic kerato... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Introdução: A metástase linfonodal tem impacto significativo não somente no prognóstico do carcinoma espinocelular (CEC) de laringe, como também na sobrevivência. O índice de densidade linfonodal (IDL) combina a análise da extensão e a qualidade do esvaziamento cervical, com a habilidade na análise anatomopatológica. Objetivo: Avaliar o IDL como fator prognóstico no CEC de laringe. Métodos: Foi realizado um estudo retrospectivo com 186 pacientes submetidos a tratamento cirúrgico da laringe com esvaziamento cervical entre janeiro de 2009 a dezembro de 2016. Variáveis clínico-patológicas foram avaliadas, assim como o ponto de corte de IDL para determinar fatores prognósticos. Resultados: Foram calculados dois valores de IDL no estudo: considerando os pacientes N0 (IDL= 0,018) e considerando pN+ (IDL= 0,06). A curva de Kaplan-Meier (log-rank) em relação à sobrevivência acumulada mostrou que tanto os pacientes com IDL > 0,018 quanto considerando o IDL >= 0,06 tiveram maior taxa de mortalidade do que os pacientes com IDL <= 0,018 ou IDL < 0,06, mostrando uma forma mais agressiva da doença, com recidiva mais precoce. Entretanto, apenas o IDL > 0,06 mostrou impacto tanto no intervalo livre de doença quanto na sobrevivência global. Conclusão: O IDL mostrou ser um índice importante na avaliação prognóstica dos pacientes com CEC de laringe, tendo relação direta com recidiva da doença. Pacientes com IDL > 0,060 provavelmente têm doença mais agressiva e devem ser candidatos à terapia adjuvante / Introduction: Lymph node metastasis has a significant impact not only on the prognosis for laryngeal squamous cell carcinoma (SCC), but also on survival. The index of lymph node density (LND) combines the analysis of the extension and quality of the neck dissection with the skill in analyzing the pathology. Objective: To evaluate LND as a prognostic factor in patients with laryngeal SCC. Methods: A retrospective study was carried out with 186 patients submitted to laryngeal surgical treatment with neck dissection between January 2009 and December 2016. Clinical-pathological variables were assessed, as well as the cut-off point for LND, to determine prognostic factors. Results: Two LND values were calculated in the study: one considering N0 patients (LND=0.018) and the other considering pN+ (LND=0.060). The Kaplan-Meier curve (log-rank) related to cumulative survival demonstrated that not only patients with LND > 0.018 but also those with LND >= 0.060 had a higher mortality rate than those with LND <= 0.018 or LND < 0.060, presenting a more aggressive form of the disease, with earlier recurrence. However, only the LND >= 0.060 group had impact on both disease-free survival, and overall survival. Conclusion: The LND proved to be an important index in the prognostic evaluation of larynx SCC patients, having a direct relationship with disease recurrence. Patients with LND >= 0.060 are likely to have a more aggressive form of the disease and should be considered for adjuvant therapy

A diminuição da sobrevida registrada para pacientes com câncer de laringe nas últimas décadas pode estar relacionada a mudanças nos padrões de tratamento. Na literatura recente, há uma polëmica sobre o tratamento de tumores laríngeos em estádio clínico T3 devido ao emprego disseminado de estratégias de preservação de orgãos (Hoffman, 2006). Embora os critérios de inclusão para o grupo de preservação de órgãos tendam a selecionar tumores de \"baixo volume\", a escolha de uma determinada estratégia depende também da formação profissional do médico, da experiência e da infraestrutura do hospital e dos desejos dos pacientes. Essa consideração pressupõe uma distribuição homogênea dos pacientes entre os grupos de tratamento. No entanto, deve-se destacar o papel prognóstico das variáveis relacionadas ao tumor, ao paciente e à opção terapêutica na prática clínica. Objetivo: Avaliar as características clínicas, patológicas e a expressão de biomarcadores ativados pela via do EGFR em uma série de casos em relação à evolução e ao prognóstico. Metodologia: No presente estudo, 145 pacientes consecutivos com diagnóstico de carcinomas avançados de laringe cT3N0-3M0 foram analisados retrospectivamente. Foram incluídos casos de carcinoma epidermoide de supraglote, glote, subglote e transglotte, tratados em uma única instituição por quatro diferentes estratégias de tratamento (cirurgia exclusiva; cirurgia mais terapia adjuvante; radioterapia exclusiva, e radioquimioterapia). Os dados foram obtidos a partir do Registro de Câncer do Hospital A.C. Camargo, São Paulo (1990-2007). Uma série de variáveis clínicas e patológicas foi avaliada pelo métodos de Kaplan-Meier e de regressão de Cox. Opções de tratamento também foram avaliadas como fator prognóstico. Associações entre características clínico-patológicas do tumor e sobrevida, sobrevida livre de doença e risco de morte, foram investigadas. Resultados: Três variáveis clínicas, as variáveis terapêuticas e cinco variáveis patológicas, foram estatisticamente significativas na estimativa de sobrevida específica em 5 anos (CS-5a). A sobrevida foi influenciada negativamente pela invasão do tumor primário do espaço pré-epiglótico (45,5%, P = 0,003), pescoço clínico (cN) positivo (37,6%, P = 0,031), invasão da área retrocricóide (0,0%, P = 0,009) , invasão linfática (44,1%, P = 0,015), extravasamento capsular (43,1%, P = 0,003), pescoço patológico (pN) positivo (42,9%, P = 0,001), linfonodos positivos nos níveis cervicais IV-VI (33,3%, P = 0,008), margens cirúrgicas positivas (22,2%, P = 0,001). O tratamento teve impacto na sobrevida (CS-5a): a taxa foi de 51,6%, quando houve tratamento adjuvante (devido a achado patológico positivo na peça operatória), diminuiu até 41,5% no grupo de radioterapia exclusiva (P = 0,039). Cirurgia exclusiva e radioquimioterapia influenciaram a sobrevida de maneira semelhante (74,0% ; 77,5%). Considerando variáveis clínicas e terapêuticas, resultaram ser fatores prognósticos independentes: invasão do espaço paraglótico (RR multivariado 1,92; IC 1,02-3,61), pescoço clínico (cN) positivo (RR multivariado 2,24; IC 1,11-4,50), invasão do espaço pré-epiglótico (RR multivariado 2,65; IC 1,46-4,81) e tratamento radioterapico exclusivo (RR multivariado 2,88; IC 1,31-6,30); incluindo as variáveis patológicas, resultaram ser fatores prognósticos independentes achados patológicos de extravasamento capsular (RR multivariado 3,09; IC 1,56-6,12) e margens cirúrgicas comprometidas (RR multivariado 3,45; IC 1,11-10,75). A investigação de expressão imunoistoquímica de dez biomarcadores das vias de transdução de sinal ativadas pelo receptor tirosina quinase Erb B (EGFR, Erb B2, Erb B3, Erb B4, RAS, MEK, ERK, mTOR, PTEN, p53) mostrou associação entre expressão imunoistoquímica positiva de ErbB3 e ErbB4 e expressão de biomarcadores da via MAPKs e AKT-PI3K (MEK e mTOR). A positividade desses biomarcadores, ou seja, a desregulação da rede ErbB foi associada à invasão linfática, ponto de partida do acometimento linfonodal que resultou ser fator prognóstico independente entre as variáveis clínicas e patológicas (extravamento capsular). Conclusões: Entre as variáveis clínicas e terapêuticas, resultaram ser fatores prognósticos independentes: invasão do espaço paraglótico, pescoço clínico (cN) positivo, invasão do espaço pré-epiglótico e tratamento radioterápico exclusivo. Quando foram incluídas as variáveis patológicas, resultaram ser fatores prognósticos independentes achados patológicos de extravasamento capsular e margens cirúrgicas comprometidas. A positividade dos biomarcadores estudados (desregulação da rede ErbB), foi associada a invasão linfática. / The decreased survival recorded for patients with laryngeal cancer in the last decades may be related to changes in patterns of management; in literature a recent debate has been dedicated to the management of clinical stage T3 due to the disseminated use of organ preservation strategies (Hoffman, 2006). Although inclusion criteria for organ preservation group tends to select \"low volume\" tumors, in clinical practice the choice of a determined strategy depends also to medical and hospital experience and infrastructure and on patients\' wishes. This consideration may suppose an homogenous distribution of the patients among the treatment groups, however in clinical practice several clinico-pathological and therapeutic prognostic factors are considered for therapeutic decision. Objectives: Evaluate clinical and pathological characteristics and expression of biomarkers activated by the EGFR cascade in a case series and analise the association with outcomes and prognosis. Materials and method: In the present study 145 consecutive patients with diagnosis of laryngeal advanced carcinomas, cT3N0-3M0, were retrospectively analyzed, including cancer of the supraglottis, glottis, subglottis and trans-glottis, treated in a single institution by four different treatment strategies (exclusive surgery, surgery and adjuvant therapy, radiotherapy alone, and radiochemotherapy). Data was obtained from the Cancer Registry, Hospital AC Camargo, São Paulo (1990-2007). A set of clinical and pathological variables were assessed by Kaplan-Meier and Cox regression methods. Treatment option was also assessed as prognostic factor. Associations between clinical-pathological features of the tumor and survival, disease free-survival and risk of death, were investigated. Results: Three clinical variables, the therapeutic variable and five pathological variables, were statistically significant in estimating cancer specific survival at 5 years (CS-5y). Survival was negatively influenced by primary tumour spreading as filling of pre-epiglottic space (45.5%, P = 0.003), clinical neck (cN) positive (37.6%, P = 0.031), invasion of retrocricoid area (0.0%, P = 0.009), lymphatic invasion (44.1%, P = 0.015), extra-capsular nodal spread (43.1%, P = 0.003), pathological neck (pN) positive (42.9%, P = 0.001), positive IV-VI levels cervical nodes (33.3%, P = 0.008), positive surgical margins (22.2%, P = 0.001); treatment impacted on CS-5y, it decreases at 51.6% if adjuvant treatment (positive pathological finding on operative specimen), up to 41.5% in exclusive radiotherapy group (P = 0.039); exclusive surgery and radio-chemotherapy influenced survival similarly (74.0%; 77.5%). Among clinical e therapeutic variables, invasion of paraglottic space (HR adjusted 1.92; IC 1.02-3.61), positive clinical neck (cN) (HR adjusted 2,24; IC 1,11-4,50), invasion of pre-epiglottic space (HR adjusted 2,65; IC 1,46-4,81) and exclusive radiotheraphy (RR adjusted 2,88; IC 1,31-6,30) resulted to be independent prognostic factors; including pathological variables, extracapsular node invasion (HR adjusted 3,09; IC 1,56-6,12) and positive resection margins (HR adjusted 3,45; IC 1,11-10,75) were independent prognostic factors. Exploration of immunohistochemical expression of ten biomarkers of the signal transduction pathways activated by tyrosine kinases receptor Erb B (EGFR, Erb B2, Erb B3, Erb B4, RAS, MEK, ERK, mTOR, pTEN, p53) showed association between positive immunohistochemical expression of ErbB3 and ErbB4 and biomarkers of MAPKs and AKT-PI3K pathways (MEK and mTOR); the dysregulation of the Erb B network was associated with lymphatic invasion, starting point for lymph-nodes involvement that resulted to be clinical independent prognostic factors. Conclusion: Among clinical and therapeutic variables, the identified independent prognostic factors were: invasion of paraglotic space, clinically positive neck, invasion of pre-epiglotic space and radiotherapy alone. When pathologic variables were included, extracapsular spread and positive surgical margins were identified as independent prognostic factors. Positive results of the studied biomarkers (dysregulation of Erb B network) was associated with lymphatic invasion.

O carcinoma espinocelular é o principal tipo histológico de neoplasia esofágica, com o pico de incidência ocorrendo na 6ª década de vida, o que sugere a ação prolongada de agente(s) carcinogênico(s) do ambiente externo como fator etiológico. A associação entre câncer de cabeça e pescoço e esôfago é conhecida de longa data, ocorrendo em 2 a 36% dos pacientes, com risco relativo 10 a 30 vezes maior comparado ao da população em geral. Uma das hipóteses sobre a ocorrência de tumores malignos múltiplos baseia-se na teoria da cancerização de área (field cancerization) descrita por Slaughter et al. em 1953, a qual explica a ação de fatores causais atuando em conjunto sobre o trato aerodigestivo e originando a carcinogênese. No Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, Brasil, foi realizado um estudo retrospectivo com a finalidade de examinar pacientes portadores de neoplasia primária de cabeça e pescoço quanto a: prevalência de câncer esofágico, consumo de etanol, tabaco e hábitos alimentares como fatores de risco. No período de dezembro de 1995 a outubro de 2000, 326 pacientes com neoplasia primária de cabeça e pescoço foram avaliados clínica e endoscopicamente com auxílio de corante (cromoendoscopia com lugol). Foram detectados 36 casos de câncer esofágico (prevalência: 11,04%) e nos pacientes que desenvolveram segunda neoplasia maligna do esôfago, os seguintes fatores foram relevantes: idade precoce de início do consumo de etanol (p<0,05), maior duração e consumo semanal de etanol (p<0,05). Não se observou um risco maior de incidência de câncer de esôfago em relação ao consumo de tabaco isoladamente (p>0,05), porém, o consumo conjunto de tabaco e etanol foi relacionado a um risco maior de neoplasia de esôfago (p<0,05). Não foi demonstrada associação entre hábitos alimentares e a presença de um segundo tumor maligno de esôfago. / Spinocellular carcinoma is the predominant histological type of esophageal cancer with its peak incidence in the sixth decade of life, which suggests the long-term action of external carcinogenic agents as an etiologic factor. The association between head and neck cancer and esophageal cancer has long been known, occurring in 2 to 36% of the patients, with a relative risk 10 to 30 times higher compared to that of the general population. One of the hypothesis on the occurrence of multiple malignant tumors is based on the \"field cancerization\" theory described by Slaughter et al. in 1953. It explains the combined action of causal factors on the aerodigestive tract which leads to carcinogenesis. A retrospective study was conducted in Hospital das Clinicas of the Medical School of the University of São Paulo, Brazil, aiming at investigating patients with head and neck primary tumors for: the predominance of esophageal cancer, ethanol consumption, tobacco smoking and dietary habits as risk factors. From December 1995 to October 2000, 326 patients with primary head and neck tumors were clinically and endoscopically assessed with the use of Lugol\'s dye chromoendoscopy. 36 cases of esophageal cancer were detected (prevalence:11,04%) and in those patients that developed a second malignant tumor in the esophagus the following factors were relevant: ethanol consumption beginning at adolescence (p<0,05), longer duration of drinking habit and weekly consumption of ethanol (p<0,05). No increased risk of esophageal cancer was found associated with tobacco smoking alone (p>0,05), however, combined alcohol and tobacco consumption was found to increase the risk of esophageal cancer (p<0,05). No association was found between dietary habits and the presence of a second malignant tumor of the esophagus.

O carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (CECP) é um problema de saúde relevante no mundo, por sua prevalência e agressividade. Os papéis do tabaco e do álcool estão bem definidos na sua etiologia, mas uma minoria crescente dos pacientes acometidos pela doença não é tabagista ou etilista. A infecção pelo papilomavirus humano (HPV) parece ser responsável por parte desses casos. Sugere-se que o CECP que acomete pacientes não tabagistas e não etilistas (NTNE) tenha processos carcinogênicos e evolução clínica distintos daqueles de pacientes tabagistas e etilistas (TE). Os objetivos desse estudo foram verificar se os aspectos demográficos, clínicos e histopatológicos de pacientes com CECP são diferentes conforme os hábitos tabágico e etílico; verificar se os CECPs de pacientes NTNE e TE diferem em relação à positividade para HPV; e comparar a sobrevida específica pela doença e a expressão de marcadores biológicos em amostras tumorais e de mucosa normal do trato aerodigestório de pacientes NTNE e de pacientes TE. Para tanto, realizamos estudo transversal de pacientes com carcinomas epidermóides de cavidade oral (exceto lábio), orofaringe, laringe e hipofaringe, prospectivamente incluídos em um banco de tumores de CECP de 2001 a 2009, pelo grupo de pesquisa multi-institucional GENCAPO. Seus dados demográficos, clínicos e patológicos foram analisados conforme os hábitos de tabagismo e etilismo. Através de análise de pareamento, pacientes NTNE e TE foram comparados em relação à sobrevida, à positividade para o HPV no tumor por reação em cadeia da polimerase (PCR) e aos marcadores imunohistoquímicos p53, FHIT, Ki-67, VEGF, EGFR e p16 tanto em amostras tumorais como de epitélio não tumoral. Dos 1633 pacientes selecionados, 80 eram NTNE (4,9%), 1374 TE (84,1%), 140 tabagistas atuais ou no passado mas não etilistas (TNE:8,6%) e 39 apenas etilistas atuais ou no passado, mas não tabagistas (NTE:2,4%). O grupo de pacientes NTNE constituiu-se principalmente por mulheres, preferencialmente idosas, com tumores da cavidade oral, diferentemente de pacientes tabagistas e/ou etilistas (p<0,001). Considerando os diferentes padrões de hábitos, pacientes TE eram geralmente mais jovens (p<0,001), pacientes TNE apresentaram proporcionalmente mais tumores de laringe (p<0,001) e pacientes NTNE apresentaram menor número de parentes de primeiro grau tabagistas (p<0,001). Observou-se um provável efeito do álcool na ocorrência de metástases ganglionares (p<0,001), enquanto o tabaco pareceu relacionar-se a menor grau de diferenciação tumoral à histologia e a menores índices de massa corpórea (p<0,001). Detectou-se a presença de material genético do HPV em 32,8% dos tumores de pacientes NTNE. Desses tumores positivos para o HPV, metade apresentou também hiperexpressão pelo p16. Foi observado menor risco de óbito pela doença em pacientes NTNE quando apresentavam expressão tumoral intensa do p16 (p=0,011 / RR = 0,07; IC 0,01-0,55) e menor sobrevida se apresentavam marcação pelo FHIT em camada basal de margem não tumoral (p= 0,031). Ao comparar pacientes NTNE e TE, não se observaram diferenças na sobrevida específica pela doença ou na positividade para o HPV de forma independente de sexo, idade, sítio tumoral, grau de diferenciação, variante morfológica, estádio T e presença de metástases linfonodais. Pacientes NTNE apresentaram marcação nuclear pelo FHIT em camada basal menos frequentemente do que pacientes TE (p=0,021) / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a major health problem worldwide, due to its prevalence and aggressiveness. The role of tobacco and alcohol in its etiology is well established; however, a growing minority of patients with HNSCC neither smokes nor consumes alcohol. Human Papillomavirus (HPV) infection seems to be responsible for some of these cases. It is suggested that HNSCC affecting non smoking and non drinking (NSND) patients has different carcinogenesis and outcomes than those in smoking and drinking (SD) subjects. The objectives of this study were to test if demographic, clinical and pathological aspects of patients with HNSCC vary according to smoking and drinking habits; to test if HNSCC in NSND and SD patients differ in terms of HPV positivity; and to compare NSND and SD patients with HNSCC according to survival and biomarkers in tumor and mucosal samples of the aerodigestive tract. We conducted a cross-sectional study of patients with oral cavity (lips excluded), oropharynx, larynx and hypopharynx tumors prospectively included in a multi-institutional HNSCC tumor bank - GENCAPO, from January 2001 to February 2009. Demographic, clinical and pathological data were analyzed in regards of smoking and drinking habits. Using matched-pair analysis, we compared NSND and SD patients in relation to disease-free survival, HPV positivity through polymerase chain reaction (PCR) and Immunohistochemical staining of p53, FHIT, Ki-67, VEGF, EGFR and p16 biomarkers in tumor and mucosal samples. From 1633 patients, 80 were NSND (4.9%), 1374 SD (84.1%), 140 current or past smokers, but non drinkers (SND:8.6%) and 39 current or past drinkers, but non smokers (NSD:2.4%). NSND patients were most frequently women, remarkably elderly, with oral cavity cancers more commonly than the other groups (p<0.001).Comparing to the other groups, SD patients were younger (p<0.001); SND patients were more frequently affected by larynx tumors (p<0.001) and NSND patients had fewer smoking first degree relatives (p<0.001). We observed that alcohol may influence the presence on node metastasis (p<0.001) whereas tobacco may be related to less differentiated tumors and lower body mass indexes (p<0.001). We found HPV DNA in 32.8% of tumors of NSND subjects. Half of the HPV positive tumors were also positive for p16 staining. A lower risk of death from disease was observed among NSND patients with intense p16 staining (p=0.011 / RR = 0.07; CI 0.01-0.55) and lower survival rates in patients with positive nuclear staining for FHIT at the basal layer of mucosal epithelium (p=0.031). We found no differences in disease-free survival of NSND and SD patients in an independent manner of gender, age, tumor site, differentiation grade at histology, pathological variants, T stage and the presence of node metastasis. NSND patients presented less frequently with nuclear staining for FHIT at the basal layer of mucosal epithelium than SD patients (p=0.021)

Proteína 2 ligante de SH3 ativadora da GTPase de Ras (G3BP2) parece estar envolvido em vias importantes de sobrevivência celular como a via do NF-B. Já o fator tecidual (TF) e sua isoforma asHTF parecem estar envolvidos nos processos de angiogênese, proliferação e metástase. Assim, os genes G3BP2, TF e asHTF parecem possíveis fatores prognósticos em carcinoma epidermóide (CE) de cabeça e pescoço. Para avaliar a importância desses genes nesse tipo de câncer, foi realizada a quantificação da expressão do RNAm desses marcadores por PCR (reação em cadeia da polimerase) em tempo real em tumores primário e mucosas adjacente de 148 pacientes com CE de cavidade oral, língua e laringe e a proteína de TF e asHTF foi determinada por Western blotting em 17 pacientes com CE de cavidade oral. Os dados da expressão do RNAm foram correlacionados com variáveis clínico-patológicos e sobrevida dos pacientes. A expressão relativa do RNAm de G3BP2 foi menor nos tumores primários em relação à mucosa adjacente em todos os sítios analisados. TF e asHTF não apresentaram nenhuma correlação entre a expressão relativa no tumor primário e na mucosa adjacente para os três sítios analisados. Quando comparados aos tumores sem comprometimento linfonodal (pN0), tumores de cavidade oral e língua com comprometimento linfonodal (pN+) apresentaram maior expressão de TF (P=0,003; P=0,033, respectivamente) e de asHTF (P=0,004; P=0,018, respectivamente Teste não paramétrico de Mann-Whitney). Em seguida, construímos as curvas de sobrevida pelo método de Kaplan-Meier considerando como positivos os pacientes com expressão maior que a mediana para cada marcador. Para os CE de cavidade oral, pacientes com expressão positiva dos genes TF (P=0,034 Teste Log-rank) e asHTF (P=0,010) apresentaram pior sobrevida livre de doença na análise univariada. Quando realizado a análise multivariada tanto TF como asHTF mantiveram a significância estatística (P=0,002 para ambos os genes), sugerindo, assim, serem fatores prognósticos independent. A análise da proteína apontou 76,4% de concordância no padrão de expressão do RNAm de TF e 58,8% para a expressão do RNAm de asHTF. Não foi observada nenhuma correlação entre esses marcadores com outros dados clínico-patológicos e nem com a sobrevida dos pacientes para os tumores de língua e laringe. Assim, sugerimos que a expressão de TF e asHTF parecem ser marcadores prognósticos nos CE de cavidade oral principalmente em relação a sobrevida livre de doença. Apoio FAPESP 06/53755-5 / GTPase activating protein (SH3 domain) binding protein 2 (G3BP2) seems to be involved in pathways important for cell survival as NF- B pathway. Tissue factor (TF) and its isoform asHTF appear to be involved in angiogenesis, proliferation and metastasis. Thus, the genes G3BP2, TF and asHTF seem possible prognostic factors in head and neck squamous cell carcinoma (SCC). To assess the importance of these genes in this type of cancer, we performed mRNA expression analysis of these markers by real time PCR (polymerase chain reaction) in primary tumors and adjacent mucosa of 148 patients with oral cavity, tongue and larynx SCC. TF and asHTF protein was determined by Western blotting in 17 patients with oral cavity SCC. mRNA expression levels were correlated with clinical and pathological variables and survival of patients. G3BP2 mRNA expression was lower in primary tumors as compared to adjacent mucosa at all sites analyzed. No difference was found between TF and asHTF expression in primary tumors and adjacent mucosa in the whole group. TF and asHTF levels mRNA expression were higher in pN+ tumors as compared to pN0 in oral cavity (P=0.003, P = 0.004, respectively) and tongue (P= 0.033, P= 0.018, respectively - Mann-Whitney test) tumors. For Kaplan Meier survival analysis patients were categorized positive (expression > tumor median relative expression) and negative (expression tumor median relative expression). For oral cavity SCC, patients with positive expression of TF (P =0.034 - log-rank test) and asHTF (P =0.010) genes presented shorter disease-free survival in univariate analysis. In multivariate analysis both TF as asHTF retained statistical significance (P=0.002 for both genes), suggesting, therefore, are independent prognostic factors. Protein analysis showed 76.4% agreement with mRNA expression for TF and 58.8% for asHTF. In patients with tongue and larynx tumors there correlation were not found. Thus, we suggest that the TF and asHTF expression seem to be prognostic markers in oral cavity SCC especially in relation to disease-free survival. Supported by FAPESP 06/53755-5

Tanto a invasão local como o comprometimento de linfonodos cervicais tem grande impacto na sobrevida de pacientes portadores de carcinomas epidermóides de cabeça e pescoço. Em nosso trabalho nós primeiramente determinamos a expressão dos receptores de quimiocinas de CXCR1 a CXCR5, além de CCR7 e CX3CR1 pelo método do ensaio de proteção à ribonuclease (RPA) em 98 fragmentos de tumores primários, 91 fragmentos de mucosas adjacentes e 26 linfonodos comprometidos e correlacionamos estes dados com parâmetros anátomo-patológicos e sobrevida. CXCL12 ligante do receptor CXCR4 e CCL19 e CCL21 ambos ligantes de CCR7 foram determinados em 38 fragmentos de tumores, 33 mucosas adjacentes e 25 linfonodos comprometidos pela técnica de real-time PCR. Os tumores primários apresentam expressão aumentada do mRNA de CXCR1 (P=0.013), CXCR3 (P=0.008) e CXCR4 (P=0.025). Não observamos correlações entre status linfonodal ou tamanho de tumor. Os linfonodos comprometidos expressam mais mRNA dos receptores de quimiocinas CXCR4, CXCR5, CCR7 e CX3CR1 (todos com P<0.0001) em comparação aos tumores comprometidos. Observamos um aumento de sobrevida (P=0.048) e uma tendência a aumento de sobrevida livre de doença (P=0.074) nos pacientes negativos para a expressão de CX3CR1 (n=17) em comparação aos pacientes positivos (n=21) somente no subgrupo de pacientes portadores de carcinomas da cavidade oral. O mesmo foi observado com os pacientes CCR7 negativos também no subgrupo de pacientes portadores de carcinomas da cavidade oral, tanto em sobrevida global (P=0.024) como para sobrevida livre de doença (P=0.049). Em relação aos ligantes de quimiocinas observamos um aumento do mRNA de CCL21 em linfonodos comprometidos em relação aos tumores primários (P=0.059). Concluímos que a interação quimiotática entre CCR7 e de seu ligante CCL21, poderia ser um mecanismo de atração de células tumorais para os linfonodos em tumores de cavidade oral, além disso a negatividade da expressão do mRNA de CCR7 e CX3CR1 são candidatos marcadores de uma melhor sobrevida em carcinomas epidermóides de cavidade oral. / Local invasion and lymph nodal spread impact in the outcome of Head and Neck squamous cell carcinoma (HNSCC) patients (pts). We determined CXCR1-5, CCR7 and CX3CR1 mRNA expression by means of RNAse protection assay in 98 HNSCC primary tumors and 91 adjacent mucosa and 26 metastatic lymph nodes, correlating this data with outcome. CXCL12 and CCL19/CCL21, ligands for CXCR4 and CCR7, were determined in 38 tumor fragments, 33 adjacent mucosas and 25 de metastatic lymph nodes, by means of Quantitative Real-Time PCR. Tumors presented higher CXCR1 (P=0.013), CXCR3 (P=0.008) and CXCR4 mRNA (P=0.025) expression as compared to mucosa. No correlations are observed neither lymph nodal status nor tumor size impacted on chemokine receptor expression. Metastatic lymph nodes expressed more CXCR4, CXCR5, CCR7 and CX3CR1 (P<0.0001) as compared to matched tumors. We found a longer overall survival (OS) (P=0.048) and a trend toward longer disease free survival (DFS) (P=0.074) in CX3CR1 negative (n=17) as compared to positive pts (n=21) only in oral subgroup. The same occurred for CCR7 negative oral SCC, in terms of OS (P=0.024) and DFS (P=0.049). We conclude that, of the chemokine receptors here studied, CCR7 and CX3CR1 mRNA expression seems to better reflect outcome in oral subsite only. In addition, CCL21, a CCR7 ligand mRNAs is more expressed in metastatic lymph nodes than tumors (P=0.059). Further studies are warranted to confirm these results.