Made available in DSpace on 2018-08-01T22:56:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6594_BIANCA BARCELOS MARTINS20140319-135604.pdf: 1675884 bytes, checksum: 6f554422d441568e97406529cc64bdc1 (MD5) Previous issue date: 2013-08-26 / O uso de esteróides com ações no sistema reprodutor feminino pode afetar o desenvolvimento e diferenciação uterina, podendo levar a alteração no desenvolvimento das glândulas endometriais, com diminuição da eficiência reprodutiva e até mesmo esterilidade. Desta forma, esta metodologia poderia ser aplicada no controle populacional de cães. Entretanto, nos casos de inibição parcial do desenvolvimento das glândulas, não se conhece os efeitos dos esteróides sobre a funcionalidade das glândulas formadas, bem como a possível ocorrência de fibrose endometrial. Objetivou-se avaliar a atividade secretória das glândulas endometriais de cadelas pré-púberes submetidas a protocolo de ablação parcial da adenogênese uterina. Foram utilizadas dezesseis fêmeas, sem raça definida, de ninhadas diferentes, distribuídas nos grupos MPA (n = 8), fêmeas que receberam aplicações de acetato de medroxiprogesterona (10mg/kg/SC), a cada 3 semanas, desde o dia 1 após nascimento até a idade de 6 meses, e C (n = 8), fêmeas controle, não tratadas, que receberam aplicações de solução de NaCl 0,9%, de maneira similar as tratadas. Aos 6 meses de idade, foi realizada ovariohisterectomia em todos os animais, e amostras dos cornos uterinos foram coletadas e fixadas para exame histológico e de histoquímica. Para avaliar a intensidade de secreção (graus 1-4), foram utilizadas as colorações de Periodic Acid Schiff (PAS) e Alcian Blue (AB) pH 2,5. Para a avaliação histológica foram utilizadas as colorações de Tricrômico de Masson e Azul de Toluidina. A análise estatística foi realizada pelo teste Kruskal-Wallis, pelo software R, com nível de significância de 5%. Nenhuma cadela, em ambos os grupos, apresentou hiperplasia cística endometrial (HCE) e presença de conteúdo no interior do lúmen uterino. Para coloração de PAS apenas marcações graus 1 (ausente) e 2 (discreta) foram observadas em ambos os grupos, sem diferença na intensidade de secreção uterina entre grupos com relação aos graus encontrados. Entretanto, o grupo 8 MPA apresentou maior intensidade de secreção uterina (grau 2) em relação ao grupo (p<0,05). Com relação ao AB pH 2,5, em ambos os grupos também for encontradas apenas marcações de graus 1 (ausente) e 2 (discreta), sem diferença estatística entre grupos com relação a intensidade de secreção uterina. Não foram observadas marcações para a coloração de Tricrômico de Masson na região periglandular, em ambos os grupos. Foi observada maior quantidade de mastócitos presentes no útero na região do miométrio em relação ao endométrio, em ambos os grupos. Conclui-se que cadelas pré-púberes com ablação parcial da adenogênese uterina apresentam mínima atividade secretória uterina, ausência de fibrose periglandular e maior presença de mastócitos no miométrio em relação ao endométrio.

As diversas interações hormonais durante e gestação e parto na espécie canina são parcialmente conhecidas. A resposta dos tecidos frente ao estímulo hormonal é dependente da expressão gênica de seus receptores, bem como da concentração local dos hormônios. Desta maneira, o presente estudo apresentou como objetivos: caracterizar a expressão gênica dos receptores de estrógeno e ocitocina no endométrio, miométrio e placenta, correlacionando com as concentrações séricas dos respectivos hormônios durante a gestação e o parto. As cadelas gestantes foram alocadas em 4 grupos de acordo com a idade gestacional: até 20 dias de gestação (grupo 1, n=11), de 20 a 40 dias de gestação (grupo 2, n=12), de 40 a 60 dias de gestação (grupo 3, n=12) e em pródromos do parto (grupo 4, n=11). As cadelas dos grupos 1, 2 e 3 foram submetidas à ovário-histerectomia e as cadelas do grupo 4, à cesariana seguida da ovário-histerectomia. Amostras de endométrio, miométrio e placenta foram colhidas, bem como amostras de sangue para obtenção do soro sangüíneo. A extração do RNA total e a confecção do cDNA das amostras foram realizadas a partir de kits comerciais. As reações da PCR em tempo-real foram realizadas para os genes (RNAm) do receptor do estrógeno &alpha; (RE&alpha;) e receptor da ocitocina (OTR), utilizando o 18S e RPS5 como controles endógenos. As dosagens hormonais foram realizadas por radioimunoensaio. A expressão gênica do RNAmRE&alpha; e RNAmOTR diferiram de acordo com o tecido e período gestacional. No endométrio, a expressão do RNAmRE&alpha; foi constante durante toda a gestação e parto, enquanto que o RNAmOTR foi mais expresso no grupo 4. Em relação ao miométrio, a expressão do RNAmRE&alpha; foi maior nos grupos 2 e 4, já o RNAmOTR foi mais expresso nos grupos 3 e 4. Na placenta, o RNAmRE&alpha; apresentou maior expressão nos grupos 1 e 2, e o RNAmOTR não sofreu mudanças durante a gestação e o parto. As concentrações séricas de ocitocina mantiveram-se constantes, enquanto os níveis estrogênicos aumentaram a partir de 40 dias de gestação até o início do parto. Conclui-se que a expressão gênica dos RE&alpha; e OTR diferem de maneira temporal durante a gestação e o parto nos tecidos avaliados e as concentrações séricas de ocitocina não interferem na expressão gênica de tais receptores, enquanto os níveis de estrógeno elevam-se ao final da gestação, sendo possível atribuir a tal perfil a diferente modulação dos RE&alpha; e OTR nos tecidos estudados. / Several hormone interactions during pregnancy and parturition in the canine species are still unknown. Tissue response to hormonal stimulation is dependent on the expression of its receptor gene, as well as of the local hormonal concentration. Hence, the present study aimed to characterize the expression of the canine estrogen and oxytocin receptor genes in the endometrium, myometrium and placenta and its correlation with blood levels of the referred hormones during pregnancy and parturition. Pregnant bitches were allocated into 4 groups according to the gestational period: up to 20 days of pregnancy (Group 1, n=11), from 20 to 40 days of pregnancy (Group 2, n=12), from 40 to 60 days of pregnancy (Group 3, n=12) and in the early stage of labor (Group 4, n=11). Bitches from groups 1, 2 and 3 were subjected to ovaryhisterectomy and bitches from group 4 were submitted to cesarian section followed by ovaryhistectomy. Endometrium, myometrium and placenta samples were colleted, as well as blood samples. Extraction of the total RNA and cDNA synthesis were accomplished through commercial kits. The real-time PCR reactions were performed for the estrogen-&alpha; (RE&alpha;) and oxytocin (OTR) receptor genes, using the 18S and RPS5 as control. Estrogen and oxytocin hormonal assays were performed by radioimunoassay. The results of the mRNARE&alpha; and mRNAOTR gene expression differed among gestational periods and tissues. In the endometrium, RNAmRE&alpha; expression was homogeneous during pregnancy and labor, whereas group 4 presented a higher expression of RNAmOTR. In relation to the myometrium, RNAmRE&alpha; expression increased in groups 2 and 4, whilst RNAmOTR expression was higher in groups 3 and 4. In the placenta, groups 1 and 2 presented the highest RNAmRE&alpha; expression and the RNAmOTR expression did not change during pregnancy and parturition. Blood concentration of oxytocin remained constant, while estrogen levels increased from 40 days of gestation to labor. In conclusion, the expression of canine RE&alpha; and OTR genes differed temporally during pregnancy and parturition in the experimented tissues. Oxytocin blood levels did not influence the receptor gene expression, whereas estrogen concentrations increased at the end of the gestation, possible modulating RE&alpha; and OTR expression in the canine endometrium, myometrium and placenta.

O mecanismo do estresse já é conhecido e apresenta dois momentos: o estresse agudo que libera fatores termogênicos e inflamatórios mediados por Interleucina 6 (IL6) e o crônico que busca a supressão da reação inflamatória e é mediado pela presença de cortisol. Quando cães abandonados são alojados em abrigos, também passam por um momento de adaptação, entretanto não existe até o momento um programa de ressocialização destes cães instituído em nível governamental, visando o bem estar junto a seus novos donos. A intervenção da ressocialização neste momento, a correlação do comportamento de cães com parâmetros fisiológicos e endócrinos relativos ao estresse ainda não foram descritas, o que suscita a hipótese de que a mesma possa amenizar os impactos traumáticos do abandono. Foram utilizadas 27 cadelas divididas em 3 grupos: com donos, abandonadas não treinadas e abandonadas treinadas. As cadelas abandonadas e treinadas foram depois adotadas. O adestramento durou 15 min/dia por 21 dias. A avaliação comportamental (etograma e etoteste) foi realizada a cada 7 dias e a avaliação dos parâmetros fisiológicos (frequência cardíaca, frequência respiratória, taxa de oxigenação sanguínea, pulsação) bem como a coleta de saliva, diariamente. Após a adoção, os grupos foram acompanhados por mais uma semana. Os dados foram analisados por ANOVA, após verificação da normalidade dos mesmos. A correlação entre os parâmetros foi analisada por meio do teste de correlação de Pearson. Os valores foram considerados diferentes para p<0,05. O resultado mais surpreendente foi a manutenção da IL6 em níveis baixos após a cirurgia de castração nas cadelas treinadas, enquanto os outros dois grupos, submetidos à mesma cirurgia tiveram elevação significativa desta citocina. Os resultados do treinamento foram mais evidentes nos etogramas após a adoção: houve melhora da interação dos cães com a nova família, aumento das atitudes de brincadeira, e maior receptividade aos novos donos. O abanar de cauda como comportamento de comunicação apareceu com frequência muito maior nas cadelas treinadas depois de adotadas. Cadelas não treinadas após a adoção manifestaram mais comportamento de ociosidade, desestímulo e depressão, reduzindo seu estado de alerta. Estes resultados sugerem que o evento do adestramento tranquiliza as cadelas no ambiente estressante do abrigo, melhora seus parâmetros fisiológicos, controla comportamentos de medo tornando-as mais aptas a se adaptarem melhor após a adoção. Não houve diferenças no cortisol entre os três grupos (p > 0,05). No entanto, a concentração de IL6 foi menor nos cães treinados em relação aos demais (p < 0,05). No que diz respeito ao etoteste, houve correlação negativa entre IL6, sociabilidade e treinabilidade em todos os grupos (r=-0,48 a -0,72; p<0,04) e com temperamento somente nos cães abandonados (r=-0,72; p=0,02). Após a adoção, observou-se correlação positiva entre o cortisol e treinabilidade no grupo de cães treinados (r = 0,99; p<0,0001). O adestramento permitiu maior aprendizado e concentração e maior socialização dos cães após a adoção. O aumento de IL6 interfere negativamente nesta ressocialização. Sugerimos que o cortisol contribua para a treinabilidade e aumento de IL6 seja um indicativo de falta de bem-estar. / The mechanism of stress is already known and can be divided in two stages: acute stress, which releases thermogenic factors and inflammatory -mediated interleukin 6 (IL6) and chronic stress, which suppresses the inflammatory response and is mediated by the presence of cortisol. When stray dogs are housed in shelters, they undergo a period of adaptation; however, until now there is not a ressocialization program at the governmental level aiming to improve their welfare along with their new owners. The ressocialization program beginning when dogs arrive to the shelter and the correlation of dogs´ behavior with physiological and endocrine parameters related to stress have not yet been described , which raises the hypothesis that it can decrease the traumatic impact of abandonment. Twenty seven healthy bitches were divided into 3 groups: with owners, abandoned not trained and abandoned trained. The trained and abandoned dogs were later adopted. The training lasted 15 min / day for 21 days. The behavioral assessment (ethogram and ethotest) was performed every 7 days and physiological parameters assessment (heart rate, respiratory rate, blood oxygenation rate, pulse) as well as saliva collection, daily. After the adoption, the bitches were evaluated for 7 additional days. Data were analyzed by ANOVA, after testing the results for normality. The correlation between parameters was analyzed using the Pearson correlation test. Values were considered different at p < 0.05. The most surprisingly result was the maintenance of low levels of IL6 in trained dogs after neutering, whereas the other two groups showed a significant increase of IL6. The consequences of training were evident in ethograms after adoption: there was an improvement of the interaction of dogs with the new family, attitudes of playing were more numerous, and dogs showed a greater receptivity to the new owners. The tail wagging, as communication behavior, appeared much more frequently in trained dogs after adoption. Abandoned dogs after adoption manifested more idleness, discouragement and depression behaviors and reduced alertness. These results suggest that the training reassures bitches in the stressful shelter environment, improves their physiological parameters, controls fear behaviors making them more able to adapt to the new environment after adoption. There were no differences in cortisol among the groups (p > 0.05). However, IL-6 concentration was lower in trained than in abandoned or owned dogs (p < 0.05). Concerning the ethotest, there was a negative correlation between IL6, sociability and trainability in all groups (r = -0.48 to -0.72; p <0.04) and only in relation to temper in abandoned dogs (r = - 0.72; p = 0.02). Upon adoption, there was a positive correlation between cortisol and trainability in trained dogs (r = 0.99, p < 0.0001). Training allowed greater learning and concentration and greater socialization of dogs after adoption. The increase in IL6 seems to impair this re-socialization. We suggest that cortisol contributes to the trainability and increases of IL6 denote lack of welfare.

Vários autores já enfatizaram a importância do monitoramento do ciclo estral em cadelas e citaram exemplos de como ele pode ser feito. O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de dosagem de progesterona salivar para monitorar o ciclo estral da espécie. Para composição do grupo experimental, foram utilizadas 13 cadelas. As amostras de sangue e saliva foram colhidas paralelamente em todos os animais, a partir dos primeiros sinais de proestro. As amostras salivares foram obtidas com o uso de dispositivo específico para coleta Salivette®, método que se mostrou eficaz, visto que foi possível obter volume suficiente para dosagem de progesterona na grande maioria das amostras. As concentrações de progesterona no soro foram determinadas pela técnica de RIE e na saliva por EIE. Embora haja uma relação linear crescente e positiva entre a progesterona sérica e salivar (r=0,704; p<0,0001), não é possível utilizar o parâmetro salivar para determinar o momento da ovulação. / Several authors have already emphasized the importance of monitoring estrous cycle in bitches and mentioned examples of how it can be done. The aim of this study was to evaluate the salivary progesterone quantification technique in order to monitor the estrous cycle in this species. To compound the experimental group, 13 bitches were used. Blood and saliva samples were collected simultaneously in all animals, starting about the first day of proestrus signs. Salivary samples were collected with a specific device: Salivette®. This method was effective, since it was possible to obtain enough volume in almost all samples to quantify progesterone. Serum progesterone was quantified by radioimmunoassay and salivary progesterone by enzyme immunoassay. Although there is an increasing, linear and positive correlation between salivary and serum progesterone (r=0,704; p<0,0001), it is not possible to use the salivary parameter to set the moment of ovulation.

Orientador: Geovanni Dantas Cassali / Resumo: As neoplasias mamárias constituem os tumores com maior incidência em cadelas. Dentre os fatores que contribuem para o desenvolvimento desta e de outras neoplasias, o microambiente tumoral inflamatório desempenha um papel crucial. Vários estudos relataram papéis importantes para linfócitos, macrófagos, plasmócitos, neutrófilos, eosinófilos e mastócitos neste contexto. No presente estudo, o objetivo foi avaliar a densidade de células inflamatórias e área de fibrose tumoral e sua relação com tumores mamários caninos com diferentes características histológicas e clínicas (tumor misto benigno, carcinoma em tumor misto, carcinoma sólido e carcinoma tubular). A análise de células inflamatórias e área de fibrose tumoral foram realizadas por meio de técnicas histoquímicas, enquanto a identificação de linfócitos Tregs foram realizadas por imuno-histoquímica. A análise estatística das densidades de células inflamatórias e áreas fibrose tumoral e sua relação com os tipos histológicos revelou diferença significativa para as plasmócitos (p = 0,035), neutrófilos (p = 0,0113), macrófagos (p = 0,0047) e fibrose tumoral (p = 0,05). Os dados encontrados sugerem associações entre alto número de neutrófilos e neoplasias mamárias agressivas, entre altas densidades de plasmócitos, macrófagos e células CD8+ e entre menor densidade de células CD4+ e neoplasias menos agressivas. Maiores áreas de fibrose tumoral mostraram relação com neoplasias mamárias caninas mais agressivas. / Abstract: Mammary neoplasias constitute the tumors with higher incidence in bitches. Among the factors that contribute for the development of this and other neoplasias, the inflammatory tumor microenvironment plays a crucial role. Several studies reported important roles for lymphocytes, macrophages, plasma cells, neutrophils, eosinophils and mast cells in this context. In the present study, the goal was to evaluate density of inflammatory cells and area of tumor fibrosis and their relation with canine mammary tumors with different histologic and clinical presentation (benign mixed tumor, carcinoma in mixed tumor, solid carcinoma and tubular carcinoma) Counting and staining of inflammatory cells and tumor fibrosis were performed through histochemistry, while counting and staining of Tregs were performed through immunohistochemistry. Statistical analysis of the densities of inflammatory cells and tumor fibrosis related to histologic types revealed significant difference for plasma cells (p=0,035), neutrophils (p=0,0113), macrophages (p=0,0047), and tumor fibrosis (p=0,05). The found data suggest associations between high number of neutrophils and agressive mammary neoplasias, between high densities of plasma cells, macrophages and CD8+ cells and between low density of CD4+ cells and less aggressive neoplasias. Higher areas of tumor fibrosis showed relation with more aggressive canine mammary neoplasias. / Mestre

O trabalho teve como objetivo avaliar a concentração sérica de estrógeno e progesterona em cadelas durante o ciclo estral por imunoensaio multianalito (Luminex® xMAP®), visando avaliar a aplicabilidade fisiológica e comparar os resultados obtidos com os valores já estabelecidos na literatura pelo método de radioimunoensaio (RIE). Foram utilizadas 7 cadelas da raça Border Collie, residentes do Canil Espaço Ducão (Valinhos/SP) de diferentes idades e ao primeiro sinal de sangramento vulvar (proestro/estro) foram coletadas amostras a cada 48 hs e ao seu termino (diestro), foi realizado coletas semanalmente (intervalo de 7 dias) durante aproximadamente 3 semanas. Houve correlação positiva apenas entre os valores de progesterona na fase de proestro/estro (p=0,001). Apesar de não ter ocorrido correlação entre as outras fases, as medias dos valores séricos de estradiol e progesterona foram estatisticamente significantes, em ambas as fases, sendo os valores obtidos pelo Luminex® maiores que os obtidos pelo RIE. Os valores de progesterona confirmaram os dados fisiológicos esperados em ambas as metodologias, porém os valores de estradiol não foram compatíveis com o esperado fisiologicamente, exceto quando analisados a partir das medias globais em ambas as fases. Novos estudos de validação laboratorial serão necessários para confirmar a validação fisiológica, principalmente no perfil da progesterona. Podemos concluir ainda que os valores de referência para o Luminex® devem ser diferentes dos valores já estabelecidos pelo RIE para ambos os hormônios testados / The study aimed to evaluate the serum concentration of estrogen and progesterone in female dogs during the estrous cycle by multiplex immunoassay (Luminex® xMAP®), to evaluate the physiological applicability and compare the results with the values established in the literature by radioimmunoassay (RIA). We used seven Border Collie bitches, residents in Kennel Espaço Ducão (Valinhos/SP), of different ages and for the first sign of vulvar bleeding (proestrus/estrus) samples were collected every 48 hours and its end (diestrus) were collected weekly (every 7 days) for about three weeks. There was a positive correlation only between progesterone values in the proestrus/estrus phase (p = 0.001). Despite having not occurred correlation between the other phases, the median of serum estradiol and progesterone values were statistically significant in both phases, the values obtained by Luminex® is higher than by RIA. Progesterone values confirmed the expected physiological data in both methods, however estradiol values were not physiologically compatible with the expected, except when analyzed from the global mean in both phases. A laboratory validation studies will be needed to confirm the physiological validation, especially in progesterone profile, and we can conclude that the reference values for the Luminex® should be different from the values established by RIE for both hormones tested

As diversas interações hormonais durante e gestação e parto na espécie canina são parcialmente conhecidas. A resposta dos tecidos frente ao estímulo hormonal é dependente da expressão gênica de seus receptores, bem como da concentração local dos hormônios. Desta maneira, o presente estudo apresentou como objetivos: caracterizar a expressão gênica dos receptores de estrógeno e ocitocina no endométrio, miométrio e placenta, correlacionando com as concentrações séricas dos respectivos hormônios durante a gestação e o parto. As cadelas gestantes foram alocadas em 4 grupos de acordo com a idade gestacional: até 20 dias de gestação (grupo 1, n=11), de 20 a 40 dias de gestação (grupo 2, n=12), de 40 a 60 dias de gestação (grupo 3, n=12) e em pródromos do parto (grupo 4, n=11). As cadelas dos grupos 1, 2 e 3 foram submetidas à ovário-histerectomia e as cadelas do grupo 4, à cesariana seguida da ovário-histerectomia. Amostras de endométrio, miométrio e placenta foram colhidas, bem como amostras de sangue para obtenção do soro sangüíneo. A extração do RNA total e a confecção do cDNA das amostras foram realizadas a partir de kits comerciais. As reações da PCR em tempo-real foram realizadas para os genes (RNAm) do receptor do estrógeno &alpha; (RE&alpha;) e receptor da ocitocina (OTR), utilizando o 18S e RPS5 como controles endógenos. As dosagens hormonais foram realizadas por radioimunoensaio. A expressão gênica do RNAmRE&alpha; e RNAmOTR diferiram de acordo com o tecido e período gestacional. No endométrio, a expressão do RNAmRE&alpha; foi constante durante toda a gestação e parto, enquanto que o RNAmOTR foi mais expresso no grupo 4. Em relação ao miométrio, a expressão do RNAmRE&alpha; foi maior nos grupos 2 e 4, já o RNAmOTR foi mais expresso nos grupos 3 e 4. Na placenta, o RNAmRE&alpha; apresentou maior expressão nos grupos 1 e 2, e o RNAmOTR não sofreu mudanças durante a gestação e o parto. As concentrações séricas de ocitocina mantiveram-se constantes, enquanto os níveis estrogênicos aumentaram a partir de 40 dias de gestação até o início do parto. Conclui-se que a expressão gênica dos RE&alpha; e OTR diferem de maneira temporal durante a gestação e o parto nos tecidos avaliados e as concentrações séricas de ocitocina não interferem na expressão gênica de tais receptores, enquanto os níveis de estrógeno elevam-se ao final da gestação, sendo possível atribuir a tal perfil a diferente modulação dos RE&alpha; e OTR nos tecidos estudados. / Several hormone interactions during pregnancy and parturition in the canine species are still unknown. Tissue response to hormonal stimulation is dependent on the expression of its receptor gene, as well as of the local hormonal concentration. Hence, the present study aimed to characterize the expression of the canine estrogen and oxytocin receptor genes in the endometrium, myometrium and placenta and its correlation with blood levels of the referred hormones during pregnancy and parturition. Pregnant bitches were allocated into 4 groups according to the gestational period: up to 20 days of pregnancy (Group 1, n=11), from 20 to 40 days of pregnancy (Group 2, n=12), from 40 to 60 days of pregnancy (Group 3, n=12) and in the early stage of labor (Group 4, n=11). Bitches from groups 1, 2 and 3 were subjected to ovaryhisterectomy and bitches from group 4 were submitted to cesarian section followed by ovaryhistectomy. Endometrium, myometrium and placenta samples were colleted, as well as blood samples. Extraction of the total RNA and cDNA synthesis were accomplished through commercial kits. The real-time PCR reactions were performed for the estrogen-&alpha; (RE&alpha;) and oxytocin (OTR) receptor genes, using the 18S and RPS5 as control. Estrogen and oxytocin hormonal assays were performed by radioimunoassay. The results of the mRNARE&alpha; and mRNAOTR gene expression differed among gestational periods and tissues. In the endometrium, RNAmRE&alpha; expression was homogeneous during pregnancy and labor, whereas group 4 presented a higher expression of RNAmOTR. In relation to the myometrium, RNAmRE&alpha; expression increased in groups 2 and 4, whilst RNAmOTR expression was higher in groups 3 and 4. In the placenta, groups 1 and 2 presented the highest RNAmRE&alpha; expression and the RNAmOTR expression did not change during pregnancy and parturition. Blood concentration of oxytocin remained constant, while estrogen levels increased from 40 days of gestation to labor. In conclusion, the expression of canine RE&alpha; and OTR genes differed temporally during pregnancy and parturition in the experimented tissues. Oxytocin blood levels did not influence the receptor gene expression, whereas estrogen concentrations increased at the end of the gestation, possible modulating RE&alpha; and OTR expression in the canine endometrium, myometrium and placenta.

A piometra canina é uma infecção bacteriana que acomete o útero de cadelas sexualmente maduras e gera a síndrome clínica conhecida como sepse e síndrome da resposta inflamatória sistêmica. Quando não tratada adequadamente ocorre a progressão da doença para estágios mais graves como a sepse grave e o choque séptico. Embora as alterações ocasionadas pela infecção serem conhecidas, o correto estadiamento da gravidade do quadro ainda é um obstáculo. O processo de inflamação sistêmica é complexo, o fator de necrose tumoral (TNF-&#945; e a interleucina 1&#946; (IL-1&#946) aparecem como mediadores inflamatórios centrais nos casos de sepse. Estudos recentes do DNA de pacientes em choque séptico têm demonstrado a presença de mutações ou polimorfismos que exercem grande influência na produção do TNF-&#945; e da IL-1&#946. Com exceção da avaliação sérica de lactato, a proteína C reativa (CRP) é o biomarcador mais utilizado em testes clínicos para o diagnóstico e tratamento da sepse. Os objetivos principais do estudo foram avaliar a gravidade do caso; as alterações sistêmicas e metabólicas do paciente no período pré-operatório; as concentrações plasmáticas do TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-6 e CRP no momento do diagnóstico; a presença de polimorfismos na região decodificadora do TNF-&#945; e da IL-1&#946. Foram incluídas 9 cadelas sem piometra e 85 com piometra, afecção diagnosticada a partir do histórico e dos sinais clínicos identificados por meio do exame físico e ultrassonografia abdominal; e foram estratificadas para a gravidade do caso em sepse, sepse grave ou choque séptico. As variáveis clinicas e laboratoriais foram coletadas no momento do diagnóstico e confrontadas estatisticamente pelo método de comparações múltiplas. Os resultados mostraram 23 (24,4%) animais em sepse, 60 (63,82%) em sepse grave e dois (2,12%) em choque séptico. As alterações mais significativas foram observadas nos animais com sepse grave e em choque séptico e pode-se destacar a variação no tempo de preenchimento capilar, na pressão arterial, na contagem leucocitária, na albuminemia, na fosfatase alcalina, na creatinina, no pH, na CRP e na IL-6. O exame do gene da IL-1&#946; demonstrou que os animais em sepse com o alelo GG apresentam níveis séricos de IL-1&#946; mais elevados. Foi possível concluir que a estratificação da gravidade do caso para os animais em sepse grave é muito branda e não distingue os animais em estado mais grave dos menos grave dentro do mesmo grupo; que o estadiamento da gravidade poder ser realizado com avaliações corriqueiras e empregadas de forma rotineira no atendimento dos pacientes; que a proteína C reativa e a IL-6 apresentam correlação direta com a gravidade do caso; e que o polimorfismo do gene da IL-1&#946; e o tempo decorrido entre o inicio dos sintomas até que os proprietários procurassem ajuda médica foram os de maior influência sobre a gravidade do caso / Canine pyometra is a bacterial infection that affects the uterus of sexually mature bitches and generates the clinical syndrome known as sepsis and systemic inflammatory response syndrome. When not treated properly the disease progression to more severe stages as severe sepsis and septic shock occurs. Although the changes caused by the infection are known, the correct staging of the severity of the condition is still an obstacle. The process of systemic inflammation is complex, tumor necrosis factor (TNF-&#945;) and interleukin 1&#946; (IL-1&#946;) appear as central inflammatory markers in sepsis. Recent studies of DNA from patients in septic shock have shown the presence of mutations or polymorphisms that exert great influence on the production of TNF-&#945; and IL-1&#946;. Except the assessment of serum lactate, C-reactive protein (CRP) is the most widely used biomarker in clinical trials for the diagnosis and treatment of sepsis. The main objectives of the study were to evaluate the severity of the case, systemics and metabolics changes in the patient preoperatively, plasma concentrations of TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-6 and CRP at the time of diagnosis; the presence of polymorphisms in the decoding region of the TNF-&#945; and IL-1&#946;. In the study was included 9 bitches without pyometra and 85 bitches with pyometra, disease was diagnosed from the history and clinical signs identified through physical examination and abdominal ultrasonography; and were stratified according to the severity of the case in sepsis, severe sepsis or septic shock. The clinical and laboratory variables were collected at diagnosis and compared statistically by the method of multiple comparisons. The results showed 23 (24.4%) animals with sepsis, 60 (63.82%) in two and severe sepsis (2.12%) in septic shock. The most significant changes were observed in animals with severe sepsis and septic shock and can highlight the variation in capillary refill time, blood pressure, leukocyte count, the albumin, alkaline phosphatase, creatinine, pH, CRP and IL-6. Examination of the IL-1&#946; gene showed that animals with sepsis with GG allele have higher levels of seric IL-1&#946;. It was concluded that the stratification of the severity of the case for animals in severe sepsis is very bland and does not distinguish the animals in a more severe state of less severe within the same group; the staging of gravity can be done with ordinary ratings and employed routinely in patient care; the C reactive protein and IL-6 show a direct correlation with the severity of the case; and the polymorphism of the IL-1&#946; and the time elapsed between the onset of symptoms until the owners sought medical help were the most influence on the severity of the case

Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-01T02:38:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-04T14:43:23Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-05T14:11:15Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-11T18:47:11Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2017-12-13T12:06:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 souza_ta_me_jabo.pdf.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T12:06:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 souza_ta_me_jabo.pdf.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) Previous issue date: 2017-10-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As neoplasias mamárias constituem os tumores com maior incidência em cadelas. Dentre os fatores que contribuem para o desenvolvimento desta e de outras neoplasias, o microambiente tumoral inflamatório desempenha um papel crucial. Vários estudos relataram papéis importantes para linfócitos, macrófagos, plasmócitos, neutrófilos, eosinófilos e mastócitos neste contexto. No presente estudo, o objetivo foi avaliar a densidade de células inflamatórias e área de fibrose tumoral e sua relação com tumores mamários caninos com diferentes características histológicas e clínicas (tumor misto benigno, carcinoma em tumor misto, carcinoma sólido e carcinoma tubular). A análise de células inflamatórias e área de fibrose tumoral foram realizadas por meio de técnicas histoquímicas, enquanto a identificação de linfócitos Tregs foram realizadas por imuno-histoquímica. A análise estatística das densidades de células inflamatórias e áreas fibrose tumoral e sua relação com os tipos histológicos revelou diferença significativa para as plasmócitos (p = 0,035), neutrófilos (p = 0,0113), macrófagos (p = 0,0047) e fibrose tumoral (p = 0,05). Os dados encontrados sugerem associações entre alto número de neutrófilos e neoplasias mamárias agressivas, entre altas densidades de plasmócitos, macrófagos e células CD8+ e entre menor densidade de células CD4+ e neoplasias menos agressivas. Maiores áreas de fibrose tumoral mostraram relação com neoplasias mamárias caninas mais agressivas. / Mammary neoplasias constitute the tumors with higher incidence in bitches. Among the factors that contribute for the development of this and other neoplasias, the inflammatory tumor microenvironment plays a crucial role. Several studies reported important roles for lymphocytes, macrophages, plasma cells, neutrophils, eosinophils and mast cells in this context. In the present study, the goal was to evaluate density of inflammatory cells and area of tumor fibrosis and their relation with canine mammary tumors with different histologic and clinical presentation (benign mixed tumor, carcinoma in mixed tumor, solid carcinoma and tubular carcinoma) Counting and staining of inflammatory cells and tumor fibrosis were performed through histochemistry, while counting and staining of Tregs were performed through immunohistochemistry. Statistical analysis of the densities of inflammatory cells and tumor fibrosis related to histologic types revealed significant difference for plasma cells (p=0,035), neutrophils (p=0,0113), macrophages (p=0,0047), and tumor fibrosis (p=0,05). The found data suggest associations between high number of neutrophils and agressive mammary neoplasias, between high densities of plasma cells, macrophages and CD8+ cells and between low density of CD4+ cells and less aggressive neoplasias. Higher areas of tumor fibrosis showed relation with more aggressive canine mammary neoplasias.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-16T15:12:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 957808 bytes, checksum: 0664cd1f51e73dacc00d61782e989003 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-16T15:12:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 957808 bytes, checksum: 0664cd1f51e73dacc00d61782e989003 (MD5) Previous issue date: 2009-02-18 / A anestesia é um procedimento rotineiro dos veterinários e a pesquisa de novos fárma- cos anestésicos é uma necessidade constante frente à evolução dos diversos setores da medi- cina veterinária. Durante os procedimentos cirúrgicos de cães, procura-se um protocolo anes- tésico que atenda às exigências de segurança e bem-estar dos animais, mas que também for- neça tranquilidade ao anestesista e condições favoráveis ao cirurgião. O rocurônio é um blo- queador neuromuscular, com potencial para propiciar vantagens em cirurgias que exijam rela- xamento muscular de curta duração. O presente estudo teve como objetivo avaliar os possí- veis efeitos advindos da utilização do rocurônio como miorrelaxante em ovariosalpingohiste- rectomias (OSH) eletivas de cadelas. Foram selecionadas 20 cadelas, com indicação de OSH eletiva e classificadas como ASA I, segundo critérios da Sociedade Americana de Anestesio- logia. Os animais apresentavam peso e idade médios de 15kg e 4 anos. Foram divididos alea- toriamente em dois grupos de dez animais. Os animais do grupo 1 (G1) receberam como me- dicação pré-anestésica acepromazina na dose de 0,1mg/Kg pela via intravenosa (IV), propofol na dose de 6mg/Kg pela mesma via para indução, sendo, a seguir, introduzida anestesia inala- tória com isofluorano como agente de manutenção. No momento da incisão de pele foi admi- nistrado rocurônio na dose de 0,1mg/Kg IV. O grupo 2 (G2) recebeu o mesmo tratamento do G1, entretanto, ao invés do bloqueador neuromuscular, foi administrado soro fisiológico em volume idêntico ao calculado para o rocurônio, como placebo. A frequência respiratória (FR) e o volume minuto (VM) foram mensurados antes de qualquer tratamento (M0), 15 minutos após a MPA (M1), subsequente a indução (M2), e aos 2, 4, 6, 8, 10, 15, 20, 25, 30, 35 e 40 minutos após o rocurônio ou o placebo. As demais variáveis como pressão arterial sistólica, frequência cardíaca, temperatura corporal, saturação da oxihemoglobina, analgesia, tempo de preenchimento capilar, reflexo palpebral, corneal e laringotraqueal, eletrocardiografia (ECG), foram mensuradas no M0, M1, M2 e a partir deste momento a cada 10 minutos (M3, M4, M5 e M6). As coletas de sangue arterial para as análises hemogasométricas foram realizadas no M0, M3 e M6. Após as cirurgias, um questionário foi respondido pela equipe cirúrgica sobre o miorrelaxamento. Os resultados obtidos demonstraram que o rocurônio na dose de 0,1mg/Kg causou poucas mudanças na dinâmica respiratória, verificando-se apenas aos 2 mi- nutos, após a sua administração, redução no VM no G1 em comparação ao G2. Não foram observadas alterações significativas na dinâmica circulatória e demais variáveis estudadas. O miorrelaxamento foi considerado acentuado e facilitou a abordagem dos ligamentos suspensó- rios dos ovários em 80% dos animais tratados com o rocurônio. / Anesthesia is a common procedure for the veterinarians; still, the research of new an- esthetic drugs is a constant need due to the development of several areas in veterinary medi- cine. Surgical procedures in dogs require an anesthetic protocol joining both the safety's de- mands and the animal’s well being, but also needs to provide favorable conditions to the sur- geon and to the anesthetist. The rocuronium is a neuromuscular blocking, with potential ad- vantages in surgeries demanding skeletal muscles relaxation for a short period of time. The present study evaluated the possible efects of rocuronium in muscle relaxation during elective ovariohysterectomy (OSH) in bitches. Twenty female dogs assigned for elective OSH were selected and classified as ASA I, according to the American Society of Anesthesiology. The animals, medium weight and age of 15kg and four years old, respectively, were divided in two groups of ten animals. The animals in group 1 (G1) received intravenous (IV) acepromaz- ine (0,1mg/Kg) as preanesthetic medication, propofol intravenous (6mg/Kg) for general anes- thesia induction and maintenance with the inhalational anesthetic isofluorane. Rocuronium (0,1mg/Kg, IV) was administered in the moment of skin incision. Group 2 (G2) received the same treatment as G1, except for rocuronium, instead, they received saline solution at 0.9% in identical volume calculated for the rocuronium. The respiratory frequency (FR) and minute ventilation (VM) were measured before all treatments (M0), 15 minutes after MPA (M1), after induction (M2), and 2, 4, 6, 8, 10, 15, 20, 25, 30, 35 and 40 minutes after rocuronium or sa- line. The variables systolic pressure, heart rate, body temperature, oxyhemoglobin saturation, analgesia, capillary filling time, electrocardiography (ECG) and eyelid, corneal and laryngo- tracheal reflexes were measured in M0, M1, M2 and then, starting from this moment, every 10 minutes (M3, M4, M5 and M6). Arterial blood was collected for blood gas analysis in M0, M3 and M6. After the surgeries, a questionnaire was fulfilled by the surgeons, about muscular relaxation. Results demonstrated that rocuronium in the dose of 0,1mg/Kg caused few changes in the respiratory dynamics, verified only two minutes after its administration: reduc- tion in VM in G1 in comparison with G2. Significant alterations were not observed in the cir- culatory dynamics and other studied variables. Skeletal muscle relaxation was considered high, making the ovaries exposure easier in 80% of the animals treated with rocuronium.