São diversos os estudos sobre a compreensão de dicas comunicativas humanas pelo cão. Em todos eles, a verificação da compreensão do sinal é realizada imediatamente após a emissão do mesmo. A nossa pesquisa busca refletir sobre os processos de memória envolvidos na operação de designação-busca do objeto escondido pelo cão, tendo como objetivo investigar a memória operacional dos cães para um sinal comunicativo humano. Comparamos a retenção de informações para duas condições: quando o cão tinha contato visual direto com o objeto-alvo (não-comunicativa) e quando recebia a informação a respeito da localização do alvo por um sinal comunicativo humano (comunicativa). Num primeiro experimento, quisemos saber como a retenção das informações era afetada em função do intervalo de tempo decorrido para as duas condições. Em outro, também para as duas condições, como a retenção da informação, em um mesmo intervalo de tempo, era afetada em função de diferentes tipos de distração. Para tanto, utilizamos nos dois experimentos uma tarefa de busca pelo objeto escondido, em que o cão recebia a informação sobre a localização de um alimento desejado em uma de duas caixas, esperava por um intervalo retido atrás de um anteparo (barreira visual) e depois era liberado e poderia aproximar-se de uma das caixas. Na condição indicação gestual (comunicativa), a informação era dada pelo experimentador em um gesto de apontar proximal momentâneo. Na condição observação, o cão podia ver o alimento disponível em uma de duas caixas após a colocação do anteparo as caixas eram giradas e o cão perdia a visão do objeto. No Experimento I, os sujeitos recebiam a informação e eram liberados para responder após intervalos de 5, 60 ou 240 segundos. Os resultados indicaram uma tendência à significância nas respostas dos sujeitos no intervalo de 60 segundos, favorecendo a condição indicação gestual. No experimento II, os sujeitos eram testados no mesmo intervalo de retenção (60 segundos), mas variavam as situações de distração entre as tentativas: distração por comando (comunicativa) ou por deslocamento (não-comunicativa), além de uma tentativa controle (sem distração). Os resultados indicam que as distrações não tiveram efeitos significativos para nenhuma das condições. De maneira geral, podemos concluir que a informação transmitida por um gesto comunicativo humano (o apontar do local onde está escondido alimento) pode ser conservada na memória e que ela tem um trajeto mnemônico semelhante a outros constatados no estudo da cognição de cães / There are many studies regarding the comprehension of human cues by dogs. In all of them, the comprehension of the cue is verified immediately after its emission. Our research intends to reflect over the memory processes involved in the operation of designation-search of a hidden object by the dog, with the objective of investigating the dogs operational memory for a communicative human sign. We compared the informations retention under two conditions: when the dog had direct visual contact with the target-object (non-communicative situation) and when it received information regarding the targets location through a human communicative sign (communicative situation). In the first experiment, we wanted to know how the informations retention was affected based on the elapsed time for the two conditions. In another experiment, for the same two conditions, we wanted to know how the informations retention, under only one latency period, was affected based on different types of distraction. To do so, we utilized in both experiments a object search task, in which the dog received information regarding the location of a desired piece of food in one of two boxes. The dog was retained for a certain latency period, recluse behind a screen (visual barrier), and then was released and could approach one of the boxes. Under the gestural indication condition (communicative situation), information was given by the experimenter, using a proximal momentary pointing gesture. Under the observation condition, the dog could see the piece of food available in one of two boxes which were turned after the screen was placed, making the dog lose sight of the object. In Experiment I, the subjects received information and were released to respond after a time frame of 5, 60 or 240 seconds. The results indicate a tendency of a difference in the performance of dogs in the 60 seconds-latency period, favoring the gestural indication condition. In Experiment II, the subjects were tested under the same retention latency period (60 seconds), but the distraction situations vary between the attempts: command distraction (communicative situation) or dislocation distraction (non-communicative), besides a control situation (without distraction). The results point that the distractions had no significant effects for neither the conditions. In general, we can conclude that the transmitted information through a human communicative gesture (pointing the location where the food is hidden) can be conserved in the dogs memory and that it has a mnemonic path similar to others found in studies of the dogs cognition

Foram realizadas as biometrias ultrassonográficas testiculares e prostáticas, e mensurações corporais como altura de cernelha, comprimento do corpo, estatura e peso corporal de 54 cães inteiros, com idade entre 24 e 50 meses e escore corporal definido eliminando animais obesos. As medidas testiculares apresentaram correlação positiva forte com as medidas prostática, medidas corporais e peso metabólico (p<0,001), e correlação positiva moderada com o índice de massa corporal canino (IMCC). Foi possível determinar um intervalo de confiança entre as medidas testiculares e prostáticas no grupo de animais estudados e elaborar equações lineares simples para se estimar as medidas prostáticas a partir das medidas testiculares. Definiu-se equações utilizando o comprimento testicular (CT) ou o diâmetro testicular (DT) em centímetros. Comprimento próstata = CT x 0,82 (r2 = 0,97); Comprimento da próstata = DT x 1,27; Altura próstata = CT x 0,72 (r2 = 0,97); Altura da próstata = DT x 1,12; Largura próstata = CT x 0,85 (r2 = 0,96); Largura da próstata = DT x 1,32. Não houve diferença estatisticamente significativa entre as dimensões de comprimento e diâmetro dos testículos direito e esquerdo / The ultrasound biometry of testicular and prostate as well as body measurements such as withers height, body length, height and weight were done of 54 dogs, aged between 24 and 50 months and body condition defined eliminating obese animals. The testicular measurements showed strong positive correlation with prostate size and body measurements as well as with metabolic weight (p < 0,001), and moderate positive correlation with de canine body mass index (IMCC). It was possible to determine a confidence interval between testicular and prostate measures. Simple linear equations to estimate prostate measures from the testicular measures were done. The equations was defined using testicular length or testicular diameter in centimeters. Prostate length = testicular length x 0,82 (r2 = 0,97); Prostate length = testicular diameter x 1,27; Prostate height = testicular length x 0,72 (r2 = 0,97); Prostate length = testicular diameter x 1,12; Prostate width = testicular length x 0,85 (r2 = 0,96); Prostate widht = testicular diameter x 1,32. There was no statistically significant difference between the dimensions of the right and left testicles

Canine brucellosis is a zoonotic disease, caused by Brucella canis, which is the main cause of abortion and infertility in dogs. This study had the objective to investigate a B. canis outbreak in a breeding kennel, to describe a multistep approach to characterize the B. canis isolates obtained, and to identify B. canis proteins specifically reacting with antibodies from naturally infected dogs. The kennel was located in São Paulo, SP, Brazil. At the time of sampling, in 2014, the kennel comprised 17 adult Pug dogs. Blood samples were used both to isolate the bacteria and to detect Brucella spp. DNA by the polymerase chain reaction. Serum samples were used to detect antibodies against B. canis using an immunocromatographic test, the rapid slide agglutination test with or without 2-mercaptoethanol and two ELISA kits. The Brucella isolates were characterized through the classical bacteriological tests, mass spectrometry and whole genome sequencing. The total protein content of Brucella isolates was extracted and separated using one and two-dimension polyacrylamide gel electrophoresis (1D and 2D, respectively), and then tested against sera collected from bacteremic, non-bacteremic and non-B. canis infected dogs using western immunoblotting. The reacting protein spots were identified using matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Vaginal discharge, abortion, stillbirth, conception failure and general lymphadenopathy were the clinical signs found in the infected dogs. Gram-negative, coccoid rod-shaped bacteria were isolated from 24 blood samples. Antibodies against B. canis were detected in all dogs at least once by the performed serological tests. Mass spectrometry analysis assigned all isolates to the genus Brucella. The phenotypic data clearly identified the isolates as B. canis with only slight differences in phage typing patterns. The 2D separated protein spots were identified by MALDI-TOF MS as 93 different proteins, out of them, 19 were identified in infected dogs (during the bacteremic and non-bacteremic phases of the infection) and were not identified in non-infected dogs. These proteins have the potential to be used as antigens in serological tests in an attempt to improve the diagnosis of the infection, since a reliable diagnosis is an essential measure for the control and prevention of canine brucellosis. The multistep approach using classical microbiological methods, mass spectrometry and whole genome sequencing allowed the characterization of the B. canis with high discriminatory power, which may be useful for outbreak investigations. / A brucelose canina é uma doença zoonótica, causada pela Brucella canis, que é uma das principais causas de abortamentos e infertilidade em cães. O objetivo deste estudo foi investigar um surto de B. canis em um canil, caracterizar os isolados de Brucella obtidos e identificar proteínas de B. canis reagentes especificamente a anticorpos de cães naturalmente infectados. O canil é localizado em São Paulo, SP, Brasil e no momento da amostragem, em 2014, o canil era composto por 17 cães adultos da raça Pug. Amostras de sangue foram utilizadas tanto para isolar as bactérias quanto para detectar o DNA de Brucella spp. pela reação em cadeia pela polimerase. Amostras de soro foram utilizadas para detectar anticorpos contra B. canis nos soros dos cães, utilizando um teste imunocromatográfico, o teste de soroaglutinação rápida em placa com ou sem 2-mercaptoetanol e dois kits de ELISA. Os isolados foram caracterizados pelos métodos bacteriológicos clássicos, espectrometria de massa e pelo sequenciamento do genoma completo. O conteúdo proteico total dos isolados de B. canis foi extraído e as proteínas separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida de uma e duas dimensões (1D e 2D, respeectivamente), sendo então testadas frente aos soros dos cães infectados (com ou sem bacteremia) e não infectados, utilizando Western Immunoblotting. Os spots proteicos reagentes foram identificados usando espectrometria de massa por ionização/dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-TOF MS). Secreção vaginal, aborto, natimorto, falha na concepção e linfoadenopatia foram os sinais clínicos observados nos cães infectados. Coco-bacilos gram-negativos foram isolados em 24 amostras de sangue. Anticorpos contra B. canis foram observadas em todos os cães, em pelo menos uma amostragem, pelos testes sorológicos empregados. A MS atribuiu todos os isolados ao gênero Brucella. Os dados fenotípicos identificaram claramente B. canis com apenas pequenas diferenças nos padrões de lise por fagos. Os spots de proteínas, separados por 2D, foram identificados por MALDI-TOF MS como 93 diferentes proteínas, dentre elas, 19 foram identificadas em cães infectados (com ou sem bacteremia) e não foram identificadas nos cães não infectados. Tais proteínas são candidatas a serem utilizadas como antígenos para o aprimoramento do sorodiagnóstico, uma vez que a existência de um diagnóstico confiável constitui uma medida essencial para o controle e a prevenção da brucelose canina. A abordagem múltipla utilizada, envolvendo métodos microbiológicos clássicos, espectrometria de massa e sequenciamento completo do genoma bacteriano possibilitou a caracterização dos isolados de B. canis com elevado poder discriminatório, o que pode auxiliar em investigações de surtos.

O tamanho do fígado é um critério importante para o diagnóstico diferencial de cães com suspeita de doenças hepáticas, porém, há uma carência na literatura veterinária no que se refere à avaliação de seu volume, principalmente pelo ultrassom, que é considerado um excelente recurso para avaliação desse órgão. Para se obter uma maneira prática e de simples execução de se mensurar o volume hepático através da ultrassonografia, foram realizadas medidas externas (altura, largura e perímetro do tórax) e medidas ultrassonográficas lineares do fígado de 82 cadáveres de cães, de idades e raças variadas, por dois observadores. Essas medidas foram correlacionadas com o volume hepático determinado por deslocamento de água, através de regressões lineares. As equações obtidas por regressão linear foram: Volume hepático (ml) = 639 + 10 &rho; + 75 medA - 55h - 23peri + 1,4h &#42 peri (r2 ajustado = 0,81; p &lt; 0,01), Volume hepático (ml) = 822 + 14 &rho; + 59 medE - 59h - 28peri + 1,7h &#42; peri (r2 ajustado= 0,83; p < 0,01), e Volume hepático (ml) = 30 + 0,3 &#42; x (r2 = 0,88; p < 0,01), onde peri = perímetro do tórax (cm); &rho;= peso corporal (kg); medA = medida ultrassonográfica.A (cm), mensurada do início do parênquima hepático até o diafragma, tangenciando o colo da vesícula biliar; medE= medida ultrassonográfica.E (cm), mensurada na linha média, da borda caudal do fígado até o diafragma; h = altura do tórax (cm) e; x = h &#42; largura do tórax &#42; medA. A associação entre medidas ultrassonográficas hepáticas com o peso corpóreo, assim como com a altura e o perímetro torácicos permitiu boa correlação com o volume hepático. As medidas ultrassonográficas estabelecidas mostraram-se reprodutíveis por um mesmo observador ou observadores diferentes / The liver size is an important criterion for differential diagnosis of dogs with suspected liver disease, however, there is a lack in the veterinary literature regarding estimation of liver volume, especially by ultrasound, which is considered an excellent resource for evaluation of that organ. In order to obtain a practical and simple method of measuring liver volume by ultrasonography, external measures (height, width and girth of the chest) and linear ultrasound measures of the liver of 82 dog corpses of various ages and breeds were done by two observers. By linear regression these measures were correlated with liver volume, determined by water displacement. The equations obtained were: Hepatic volume (ml) = 639 + 10 &rho; + 75 medA - 55h - 23peri + 1.4h &#42; peri (adjusted r2 = 0.81; p < 0.01), Hepatic volume (ml) = 822 + 14 &rho; + 59 medE - 59h - 28peri + 1.7h &#42; peri (adjusted r2 = 0.83; p < 0.01), and Hepatic volume (ml) = 30 + 0,3 &#42; x (adjusted r2 = 0,88; p < 0,01), where peri = perimeter of the chest (cm); = body weight (kg); medA = ultrassonographic measurement A (cm), from the beginning of the hepatic parenchyma to the diaphragm tangent to the neck of the gallbladder; MedE= ultrassonographic measurement.E (cm), from the caudal border of the liver to the diaphragm, measured on the midline; h = height of the chest (cm) and; x = h &#42; width of the chest &#42; medA. The association of liver ultrasound measures with the weight, height and thoracic perimeter provided good ground for a correlation with the liver volume. The ultrasound measures proved to be reproducible inter as well as intra observer

Com o objetivo de avaliar o envolvimento da resposta imune humoral no desenvolvimento da anemia e das alterações quantitativas e qualitativas das plaquetas na erliquiose canina, sete cães adultos, livres de infecção, foram inoculados com E. canis e acompanhados durante 10 semanas. Três cães permaneceram como controles. Os animais foram submetidos a exame físico diário e avaliação laboratorial (hemograma, contagem de plaquetas, mielograma, bioquímica sangüínea, fragilidade osmótica eritrocitária e teste de Coombs), reação em cadeia da polimerase (PCR), pesquisa de anticorpos anti-E. canis, antiplaquetários e antimegacariocíticos (IFI), e teste da atividade de agregação plaquetária, em diferentes momentos durante o período de observação. Febre, esplenomegalia, linfadenomegalia, trombocitopenia, anemia não regenerativa, aumento das atividades séricas da ALT, AST e FA foram as principais alterações clínicas e de patologia clínica observadas, com pico máximo entre o 21&ordm; e 28&ordm; dias pós-infecção. Houve diminuição da capacidade de agregação plaquetária dos animais infectados (p<0,05) nos dias 14, 21, 28 e 35 pós-infecção e aumento do número das células megacariocíticas, principalmente seus precursores (megacarioblastos e pró-megacariócitos) no 14&ordm; dia pós-infecção. Não foram detectados anticorpos antiplaquetários ou antimegacariocíticos. O teste de Coombs, bem como a fragilidade osmótica eritrocitária, mantiveram-se inalterados, comprovando não ter ocorrido hemólise imunomediada. Conclui-se que a anemia desenvolvida durante a fase aguda da infecção experimental por E. canis, de característica eritroregenerativa, ainda que tardia, pelo menos nos animais estudados, não teve envolvimento de mecanismo imunológico direcionado contra as hemácias, e ainda, que a causa da trombocitopenia e da hipofunção plaquetária observada durante esta fase da doença não parece estar relacionada ao desenvolvimento de mecanismos imunológicos direcionados contra as plaquetas ou seus precursores. / In order to determine the involvement of humoral and immune response on development of anemia and quantitative and qualitative platelets disorders in experimental canine ehrlichiosis, seven adult naïve dogs were inoculated with E. canis and followed during 10 weeks. Three dogs were remained as control. Daily clinical evaluation and laboratorial exams (hematological, platelet counts, bone marrow evaluation, biochemistry, erythrocyte osmotic fragility and Coombs? test) polymerase chain reaction assay (PCR), anti-E.canis, antiplatelet and antimegakaryocyte antibodies detection (IFA) and platelet aggregation studies were evaluated at different moments during all the experimental period. Fever, splenomegaly, lymphadenomegaly, thrombocytopenia, non-regenerative anemia and increase on liver?s enzymes serum activity (ALT, AST and ALP) were the main clinical and laboratorial findings observed, with the highest point between days 21 and 28 post-infection. The infected animals showed a decrease in platelet aggregation responses (p<0.05) on days 14, 21, 28 and 35 post-infection and increase of megakaryocytic cells, mainly its precursors (megakaryoblasts and promegakaryocytes) on day 14 post-infection. It weren?t detected any antiplatelet or antimegakaryocyte antibodies, as well as, there were no variations on erythrocyte osmotic fragility and Coombs? tests results, which confirms the absence of immune-mediated hemolysis. It is concluded that the anemia observed during the experimental acute phase of the E. canis infection, with regenerative pattern, even though late, at least in the studied animals, wasn?t related with immune mechanism against the red blood cells, and that, the thrombocytopenia and platelet dysfunction observed during this phase of the disease don?t seen to be related with immune mechanisms against platelets or its precursors.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:15:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008- Guilherme Gomes Verocai.pdf: 1894302 bytes, checksum: 5ccd7810baade85b48a7205abe9c4126 (MD5) Previous issue date: 2008-02-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The objective of the present study was to establish trial infections in adult dogs by administering T. canis larvae recovered from tissues of experimentally infected mice and to evaluate patent infection by determining the pre-patent period (PPP) and the number of recovered nematodes in relation to the different infective larvae doses. T. canis females were collected from naturally infected dogs. These were dissected and the eggs were obtained from their uteri followed by posterior incubation at 27?1? C under 75 ?10% RH. After 60 days, mice were orally infected by the embryonated eggs gathered from the culture. The mice were killed 26 days post-infection (dpi) and then submitted to necropsy. Its organs and carcasses were processed by the Acid-Isolation Technique for the recovery of larvae, which were quantified and subdivided in aliquots for the dogs infection. Twelve adult male Beagle dogs from the Kennel of the Laboratory of Experimental Chemotherapy in Veterinary Parasitology, Department of Animal Parasitology, Veterinary Institute, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro were used in our study. They were considered free from parasitism, however with previous history of exposition. The animals were divided in two groups of six animals each. The dogs from Group I were infected with 60 larvae, and the ones from Group II with 300 larvae, which were recovered from the brains and carcasses of the paratenic hosts. To evaluate the PPP we used the coproparasitological techniques of Centrifugal flotation, Sedimentation and Sedimentation centrifugal flotation on days +8, + 12 and, consecutively between days +16 e + 56. For the recovery of nematodes from feces, the dogs were treated on days +57, +58 e +59 with piperazine. The animals from Group I reached the PPP on 48?5.37 dpi, and Group II on 41.5?5.09 dpi, presenting statistically significant difference between the periods (p<0.05). Ten nematodes were collected from Group I, with the mean intensity of 1.66?1.63, resulting in 2.78?2.73% of recovery. The 85 nematodes collected from Group II, presented mean intensity of 14.17?28.12, resulting in 4.72?9.39% of recovery from the total of administered larvae. Non-statistical difference was noted regarding the total recovered nematodes. It is possible to establish patent T. canis infection in adult dogs by administering larvae recovered from tissues of experimentally infected mice. / O objetivo do presente estudo foi promover a infec??o experimental de c?es adultos atrav?s da administra??o de larvas de T. canis obtidas de tecidos de camundongos experimentalmente infectados. E, conseq?entemente, avaliar a infec??o patente, determinando o per?odo pr?patente (PPP) e o n?mero de nemat?ides recuperados em rela??o as diferentes quantidades de larvas infectantes administradas. F?meas de T. canis foram coletadas de animais naturalmente infectados, estas foram dissecadas para obten??o dos ovos e posterior cultura em solu??o de formalina a 2%, em estufa climatizada do tipo B.O.D. ? temperatura de 27?1? C, com umidade relativa de 75 ?10%. Ap?s 60 dias, camundongos foram infectados com os ovos embrionados oriundos da cultura. Os roedores foram eutanasiados 26 dias p?s-infec??o (dpi), submetidos ? necropsia. Seus ?rg?os e carca?as submetidos ? T?cnica de Isolamento ?cido para recupera??o das larvas, as quais foram subdivididas em al?quotas para infec??o dos c?es. Foram utilizados 12 c?es machos adultos da ra?a Beagle, pertencentes ao Canil do Laborat?rio de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterin?ria do Departamento de Parasitologia Animal, Instituto de Veterin?ria da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Os animais eram comprovadamente livres de infec??o pelo nemat?ide, por?m com pr?vio hist?rico de parasitismo pelo nemat?ide em quest?o. Os animais foram divididos em dois grupos de seis animais cada. Sendo os animais do Grupo I infectados com 60 larvas e, os pertencentes ao Grupo II com 300 larvas, sendo estas recuperadas apenas dos c?rebros e carca?a dos hospedeiros parat?nicos. Para avalia??o do per?odo pr?-patente foram empregadas em associa??o, as t?cnicas coproparasitol?gicas de Centr?fugo-flutua??o Simples, Sedimenta??o Simples e Sedimento-centr?fugo-flutua??o nos dias +8, + 12 e, consecutivamente entre os dias +16 e + 56. Para recupera??o dos nemat?ides os animais foram vermifugados nos dias +57, +58 e +59 com um produto a base de piperazina. Os animais do Grupo I atingiram o PPP, em m?dia, aos 48 ?5,37dpi, j? os do Grupo II aos 41,5?5,09 dpi, havendo diferen?a estat?stica entre os per?odos (p<0,05). Foram recuperados ao todo dez nemat?ides dos animais do Grupo I, com uma intensidade m?dia de 1,66?1,63, resultando num total de recupera??o de 2,78?2,73%. Enquanto, no Grupo II, foi recuperado um total de 85 helmintos, com uma intensidade m?dia de 14,17?28,12 parasitos por animal, perfazendo 4,72?9,39% do total de larvas administradas. N?o havendo diferen?a significativa entre os grupos em rela??o ao total de recupera??o de nemat?ides. ? poss?vel estabelecer infec??o patente em c?es adultos a partir da administra??o das diferentes cargas de larvas recuperadas de tecidos de camundongos experimentalmente infectados.

O estudo da comunicação animal-ser humano mediada por signos arbitrários concentrou-se tradicionalmente em chimpanzés, bonobos, golfinhos e papagaios. O cão doméstico (Canis familiaris), na medida em que adaptado pela domesticação à interação com o ser humano, constitui um modelo interessante para a análise dos processos de comunicação interespecíficos. Sofia, o sujeito do presente estudo, é uma cadela treinada a usar um teclado, pressionando teclas com símbolos arbitrários (lexigramas), para comunicar desejos (Rossi & Ades, 2008). A questão examinada aqui foi a capacidade de Sofia levar em conta, quando usa o teclado, os sinais de atenção do ser humano e o acesso visual deste ao teclado. Para tanto, foram realizadas três séries de experimentos. Na primeira série de experimentos Sofia devia escolher entre dois teclados idênticos, a partir do aspecto dos experimentadores que permaneciam em frente a cada um deles: (1) condição de orientação corporal (OC): um experimentador de frente, outro de costas; (2) condição de visibilidade dos olhos (VO): um experimentador com venda nos olhos, outro sem venda. Numa segunda série de experimentos, Sofia, depois de usar o teclado, devia escolher entre dois experimentadores para receber o pedido, (3) condição OCexp: um experimentador de frente, o outro de costas; (4) condição VOexp: um experimentador com venda nos olhos, o outro sem. Finalmente, na terceira série de experimentos, Sofia devia escolher entre dois teclados, um deles situado atrás de um anteparo opaco, fora do campo de visão do experimentador e o outro visível: (5) condição AA: anteparo opaco alto; (6) condição AB: anteparo opaco baixo; (7) condição AT: anteparo opaco baixo de um lado, anteparo transparente baixo do outro. Sofia não escolheu em proporção significativa o teclado próximo aos experimentadores que poderiam vê-la (OC, VO), entretanto escolheu significativamente o experimentador situado de frente a ela (OCexp) para receber o alimento, sem contudo manifestar preferência no caso VOexp, resultados que indicam que Sofia é capaz de levar em conta um sinal de atenção (posição frentecostas) quando se dirige diretamente para o experimentador. Nos experimentos com anteparos, observou-se escolha quase que total da alternativa sem anteparo ou com anteparo transparente (AA, AB e AT), resultado que demonstra a sensibilidade de Sofia à condição de acesso visual do experimentador ao teclado. / Studies on animal-human being communication through arbitrary signs were traditionally concentrated in chimpanzees, bonobos, dolphins and parrots. The domestic dog (Canis familiaris) constitutes an interesting model for the analysis of interespecific communication processes since it is well adapted by domestication to interact with the human being. Sofia, the subject of the present study, is a mongrel dog trained to press keys on a keyboard with arbitrary signs to communicate her desires (Rossi & Ades, 2008). The question here examined was Sofias capacity of taking into account the human attention signs and his visual access to the keyboard when she uses it. In order to answer these questions three series of experiments were carried out. In the first series, Sofia had to choose between two identical keyboards, based on the experimenter condition that was in front of each keyboard: (1) body orientation condition (OC): one experimenter was facing the keyboard, while the other one was facing backwards; (2) The eye visibility condition (VO): one experimenter had a blindfold covering his eyes, while the other one did not. In the second series of experiments, Sofia, after pressing the keyboard, should choose between two experimenters to receive what she asked for: (3) OCexp condition: one experimenter facing Sofia, and the other one facing backwards; (4) VOexp condition: one experimenter with a blindfold covering his eyes, the other one without it. Finally, in the third series of experiments, Sofia should choose between two keyboards, one of them placed behind an opaque barrier, out-of-view from the experimenter point, and the other one plainly visible for him: (5) AA condition: a high opaque barrier; (6) AB condition: a low opaque barrier and (7) AT condition: a low opaque barrier on one side, and a transparent barrier on the other side. Sofia did not choose significantly more the keyboard in front of experimenters that could see her pressing it, in front of her or without a blindfold (OC, VO). However, she chose significantly more the experimenter facing her to receive what she had just asked for (OCexp), although she did not preferred the experimenter without blindfold (VOexp). These results indicate that Sofia is able to take into account the attention signs (body orientation) when she goes directly to the experimenter. In the barrier experiments, she chose for almost all sessions the no-barrier alternative or the transparent barrier (AA, AB and AT), which demonstrate that Sofia is sensitive to the human visual access to the keyboard.

Canine brucellosis is a zoonotic disease, caused by Brucella canis, which is the main cause of abortion and infertility in dogs. This study had the objective to investigate a B. canis outbreak in a breeding kennel, to describe a multistep approach to characterize the B. canis isolates obtained, and to identify B. canis proteins specifically reacting with antibodies from naturally infected dogs. The kennel was located in São Paulo, SP, Brazil. At the time of sampling, in 2014, the kennel comprised 17 adult Pug dogs. Blood samples were used both to isolate the bacteria and to detect Brucella spp. DNA by the polymerase chain reaction. Serum samples were used to detect antibodies against B. canis using an immunocromatographic test, the rapid slide agglutination test with or without 2-mercaptoethanol and two ELISA kits. The Brucella isolates were characterized through the classical bacteriological tests, mass spectrometry and whole genome sequencing. The total protein content of Brucella isolates was extracted and separated using one and two-dimension polyacrylamide gel electrophoresis (1D and 2D, respectively), and then tested against sera collected from bacteremic, non-bacteremic and non-B. canis infected dogs using western immunoblotting. The reacting protein spots were identified using matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Vaginal discharge, abortion, stillbirth, conception failure and general lymphadenopathy were the clinical signs found in the infected dogs. Gram-negative, coccoid rod-shaped bacteria were isolated from 24 blood samples. Antibodies against B. canis were detected in all dogs at least once by the performed serological tests. Mass spectrometry analysis assigned all isolates to the genus Brucella. The phenotypic data clearly identified the isolates as B. canis with only slight differences in phage typing patterns. The 2D separated protein spots were identified by MALDI-TOF MS as 93 different proteins, out of them, 19 were identified in infected dogs (during the bacteremic and non-bacteremic phases of the infection) and were not identified in non-infected dogs. These proteins have the potential to be used as antigens in serological tests in an attempt to improve the diagnosis of the infection, since a reliable diagnosis is an essential measure for the control and prevention of canine brucellosis. The multistep approach using classical microbiological methods, mass spectrometry and whole genome sequencing allowed the characterization of the B. canis with high discriminatory power, which may be useful for outbreak investigations. / A brucelose canina é uma doença zoonótica, causada pela Brucella canis, que é uma das principais causas de abortamentos e infertilidade em cães. O objetivo deste estudo foi investigar um surto de B. canis em um canil, caracterizar os isolados de Brucella obtidos e identificar proteínas de B. canis reagentes especificamente a anticorpos de cães naturalmente infectados. O canil é localizado em São Paulo, SP, Brasil e no momento da amostragem, em 2014, o canil era composto por 17 cães adultos da raça Pug. Amostras de sangue foram utilizadas tanto para isolar as bactérias quanto para detectar o DNA de Brucella spp. pela reação em cadeia pela polimerase. Amostras de soro foram utilizadas para detectar anticorpos contra B. canis nos soros dos cães, utilizando um teste imunocromatográfico, o teste de soroaglutinação rápida em placa com ou sem 2-mercaptoetanol e dois kits de ELISA. Os isolados foram caracterizados pelos métodos bacteriológicos clássicos, espectrometria de massa e pelo sequenciamento do genoma completo. O conteúdo proteico total dos isolados de B. canis foi extraído e as proteínas separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida de uma e duas dimensões (1D e 2D, respeectivamente), sendo então testadas frente aos soros dos cães infectados (com ou sem bacteremia) e não infectados, utilizando Western Immunoblotting. Os spots proteicos reagentes foram identificados usando espectrometria de massa por ionização/dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-TOF MS). Secreção vaginal, aborto, natimorto, falha na concepção e linfoadenopatia foram os sinais clínicos observados nos cães infectados. Coco-bacilos gram-negativos foram isolados em 24 amostras de sangue. Anticorpos contra B. canis foram observadas em todos os cães, em pelo menos uma amostragem, pelos testes sorológicos empregados. A MS atribuiu todos os isolados ao gênero Brucella. Os dados fenotípicos identificaram claramente B. canis com apenas pequenas diferenças nos padrões de lise por fagos. Os spots de proteínas, separados por 2D, foram identificados por MALDI-TOF MS como 93 diferentes proteínas, dentre elas, 19 foram identificadas em cães infectados (com ou sem bacteremia) e não foram identificadas nos cães não infectados. Tais proteínas são candidatas a serem utilizadas como antígenos para o aprimoramento do sorodiagnóstico, uma vez que a existência de um diagnóstico confiável constitui uma medida essencial para o controle e a prevenção da brucelose canina. A abordagem múltipla utilizada, envolvendo métodos microbiológicos clássicos, espectrometria de massa e sequenciamento completo do genoma bacteriano possibilitou a caracterização dos isolados de B. canis com elevado poder discriminatório, o que pode auxiliar em investigações de surtos.

O estudo da comunicação animal-ser humano mediada por signos arbitrários concentrou-se tradicionalmente em chimpanzés, bonobos, golfinhos e papagaios. O cão doméstico (Canis familiaris), na medida em que adaptado pela domesticação à interação com o ser humano, constitui um modelo interessante para a análise dos processos de comunicação interespecíficos. Sofia, o sujeito do presente estudo, é uma cadela treinada a usar um teclado, pressionando teclas com símbolos arbitrários (lexigramas), para comunicar desejos (Rossi & Ades, 2008). A questão examinada aqui foi a capacidade de Sofia levar em conta, quando usa o teclado, os sinais de atenção do ser humano e o acesso visual deste ao teclado. Para tanto, foram realizadas três séries de experimentos. Na primeira série de experimentos Sofia devia escolher entre dois teclados idênticos, a partir do aspecto dos experimentadores que permaneciam em frente a cada um deles: (1) condição de orientação corporal (OC): um experimentador de frente, outro de costas; (2) condição de visibilidade dos olhos (VO): um experimentador com venda nos olhos, outro sem venda. Numa segunda série de experimentos, Sofia, depois de usar o teclado, devia escolher entre dois experimentadores para receber o pedido, (3) condição OCexp: um experimentador de frente, o outro de costas; (4) condição VOexp: um experimentador com venda nos olhos, o outro sem. Finalmente, na terceira série de experimentos, Sofia devia escolher entre dois teclados, um deles situado atrás de um anteparo opaco, fora do campo de visão do experimentador e o outro visível: (5) condição AA: anteparo opaco alto; (6) condição AB: anteparo opaco baixo; (7) condição AT: anteparo opaco baixo de um lado, anteparo transparente baixo do outro. Sofia não escolheu em proporção significativa o teclado próximo aos experimentadores que poderiam vê-la (OC, VO), entretanto escolheu significativamente o experimentador situado de frente a ela (OCexp) para receber o alimento, sem contudo manifestar preferência no caso VOexp, resultados que indicam que Sofia é capaz de levar em conta um sinal de atenção (posição frentecostas) quando se dirige diretamente para o experimentador. Nos experimentos com anteparos, observou-se escolha quase que total da alternativa sem anteparo ou com anteparo transparente (AA, AB e AT), resultado que demonstra a sensibilidade de Sofia à condição de acesso visual do experimentador ao teclado. / Studies on animal-human being communication through arbitrary signs were traditionally concentrated in chimpanzees, bonobos, dolphins and parrots. The domestic dog (Canis familiaris) constitutes an interesting model for the analysis of interespecific communication processes since it is well adapted by domestication to interact with the human being. Sofia, the subject of the present study, is a mongrel dog trained to press keys on a keyboard with arbitrary signs to communicate her desires (Rossi & Ades, 2008). The question here examined was Sofias capacity of taking into account the human attention signs and his visual access to the keyboard when she uses it. In order to answer these questions three series of experiments were carried out. In the first series, Sofia had to choose between two identical keyboards, based on the experimenter condition that was in front of each keyboard: (1) body orientation condition (OC): one experimenter was facing the keyboard, while the other one was facing backwards; (2) The eye visibility condition (VO): one experimenter had a blindfold covering his eyes, while the other one did not. In the second series of experiments, Sofia, after pressing the keyboard, should choose between two experimenters to receive what she asked for: (3) OCexp condition: one experimenter facing Sofia, and the other one facing backwards; (4) VOexp condition: one experimenter with a blindfold covering his eyes, the other one without it. Finally, in the third series of experiments, Sofia should choose between two keyboards, one of them placed behind an opaque barrier, out-of-view from the experimenter point, and the other one plainly visible for him: (5) AA condition: a high opaque barrier; (6) AB condition: a low opaque barrier and (7) AT condition: a low opaque barrier on one side, and a transparent barrier on the other side. Sofia did not choose significantly more the keyboard in front of experimenters that could see her pressing it, in front of her or without a blindfold (OC, VO). However, she chose significantly more the experimenter facing her to receive what she had just asked for (OCexp), although she did not preferred the experimenter without blindfold (VOexp). These results indicate that Sofia is able to take into account the attention signs (body orientation) when she goes directly to the experimenter. In the barrier experiments, she chose for almost all sessions the no-barrier alternative or the transparent barrier (AA, AB and AT), which demonstrate that Sofia is sensitive to the human visual access to the keyboard.

<p>Management of wolves is a complex issue, and molecular genetics is an important tool in this work. Molecular genetics can provide important information at the species, population and individual level, which can be essential for the development of management programs aiming at the long term survival of wolf populations.</p><p>In this thesis I developed new genetic markers on the canine Y chromosome to estimate the number of founders of the Scandinavian wolf population. This knowledge is important to reconstruct the history of the population and to design the most appropriate conservation strategies. Next, genetic markers with different pattern of inheritance have been used to identify hybrids between wolves and dogs. This allowed us to determine the direction of hybridization and to evaluate its possible impact on the gene pool of a wolf population. Furthermore, I also developed a method for a more reliable identification of the predator responsible of an attack by using saliva remains left on the prey. Since predation on livestock is perhaps the main reason for the negative opinions about the predator, the correct identification of the responsible for an attack (wolf, dog or hybrid) is essential. </p><p>Finally, this thesis has also been focusing on the domestication of dogs. By using Y chromosome markers (paternally inherited), it has been possible to complement previous studies based on mtDNA sequences (maternally inherited) and autosomal markers (inherited from both parents). In this way I have obtained a more complete picture of the domestication process and of the origin of breeds. This has shown that there has been a bias in the contribution of the two sexes in the origin of dog breeds (fewer males then females contributing to each breed) and that the origin of dogs was not marked by extensive backcrosses with male wolves over the entire species range.</p>