Orientadora: Profª. Drª. Antônio Carlos L. Campos / Coorientador: Prof. Dr. Jorge Eduardo Fouto Matias / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa: Curitiba, 19/12/2016 / Inclui referências: f. 75-82 / Resumo: Introdução: A cicatrização é um processo complexo que resulta na formação de novo tecido para o reparo de uma solução de continuidade. A desnutrição e as deficiências nutricionais específicas podem ter grande impacto no resultado final de feridas cirúrgicas ou traumáticas. Estudos mostram que o uso do ácido graxo poliinsaturado ômega-3 pode criar um microambiente mais favorável à cicatrização de feridas. Em outros, devido à sua capacidade de competir pela produção de eicosanoides menos pró-inflamatórios, foi relatado prejuízo à cicatrização. Portanto a influência do ômega-3 sobre a cicatrização cutânea permanece indefinida. Objetivo: Avaliar o processo de cicatrização da ferida excisional e incisional da pele de ratos sob o efeito do uso da suplementação nutricional com ácido graxo ômega-3. Método: Sessenta ratos fêmeas foram divididos aleatoriamente em 4 grupos de 15 (Epre, Eper, Cpre, Cper) conforme o lipídeo de suplementação (E - óleo de peixe e C - óleo de soja) e o momento de suplementação (pre - somente nos 7 dias antecedentes ao procedimento, per - 7 dias antes e 7 dias após o procedimento). A suplementação do óleo (peixe ou soja) foi administrada através de gavagem diariamente, além da dieta ad libitum. Sob anestesia geral, após 7 dias de suplementação nutricional inicial, as ratas foram submetidas a procedimento cirúrgico com confecção de ferida em dorso (2x2cm) que foi deixada cicatrizar por segunda intenção, e ferimento incisional (5cm) no ventre, fechado por meio de sutura. Fotografou-se de forma padronizada a ferida no pós-operatório imediato, assim como no 1º,3º, 5º e 7º dias para cálculo de área e taxa de contração da ferida. Após a eutanásia no 7º dia, a ferida do dorso foi enviada para estudo imunoistoquímico (miofibroblasto e neovasos) e de colágeno. A ferida do ventre foi submetida a teste tensiométrico utilizando máquina universal de ensaio mecânico Emic®. Os resultados foram analisados estatisticamente, com nível de significância de 5%. Resultados: O peso dos animais não mostrou diferença significativa entre os grupos. Na análise da contração nos primeiros dias após o procedimento, o grupo Cpre apresentouse com maiores taxas de contração da ferida (p= 0,017 para diferença 1PO- 3PO e p=0,004 para diferença 3PO-5PO). O grupo Epre mostrou as maiores taxas de contração na avaliação entre o período de pós-operatório imediato e o 7º dia (p= 0,002). O estudo tensiométrico (força máxima e de ruptura) não mostrou diferença entre os grupos, assim como as análises de miofibroblasto e neoangiogênese. Houve associação entre maior força tênsil com maior número de miofibroblastos para o grupo Epre (p=0,011) e maior força com maior número de CD34 para o grupo Cpré (p=0,03). Para o colágeno, não houve diferença entre os momentos "pré" e "per", somente entre os grupos experimento e controle, com o primeiro apresentando maior quantidade de colágeno tipo III (imaturo - p<0,001). Conclusão: A utilização da suplementação enteral com ômega-3 em ratos sem desnutrição não altera o peso, força tênsil da cicatriz, quantidade de miofibroblastos e neoangiogênese. Promove maior taxa de contração da ferida e atraso na deposição de colágeno maduro, em relação à suplementação com óleo de soja. Palavras-chave: Cicatrização. Ácidos Graxos Ômega-3 Estado Nutricional. Rato. Colágeno. Miofibroblastos. Resistência à Tração. / Abstract: Background: Healing is a complex process that results in new tissue formation for repair of a continuity solution. Malnutrition and specific nutritional deficiencies can have a major impact on the final outcome of surgical or traumatic wounds. Some studies show that the use of omega-3 polyunsaturated fatty acid can create a microenvironment that is more conducive to wound healing. In others, due to its ability to compete for the production of less proinflammatory eicosanoids, damage to healing has been reported. Therefore, the influence of omega-3 on cutaneous healing remains undefined. Aim: To evaluate the healing process of excisional and incisional wounds of the skin of rats under the effect of nutritional supplementation with omega-3 fatty acid. Method: Sixty female rats were randomly divided into four groups of 15 (Epre, Eper, Cpre, Cper) according to the supplementation lipid (E - fish oil and C - soybean oil) and the moment of supplementation (pre - 7 days prior to the procedure, per - 7 days before and 7 days after the procedure). Oil supplementation (fish or soybean) was administered through orogastric gavage daily, in addition to the ad libitum diet. Under general anesthesia, after 7 days of initial nutritional supplementation, the rats were submitted to a surgical procedure with a wound on the back (2x2cm) that was allowed to heal by second intention, and incisional wound (5cm) in the abdomen, closed by suture. The wound was photographed in a standardized way in the immediate postoperative period, as well as in the 1st, 3rd, 5th and 7th days to calculate the area and rate of wound contraction. After euthanasia on the 7th day, the back wound was sent to immunohistochemical study (myofibroblasts and neoangiogenesis) and collagen study. The abdomen wound was submitted to a tensile test using the Emic® universal mechanical test machine. The results were statistically analyzed, with a significance level of 5%. Results: The weight of the animals did not show any significant difference between the groups. In the analysis of the contraction in the first days after the procedure, the Cpre group presented with higher rates of wound contraction (p = 0.017 for 1PO-3PO difference and p = 0.004 for 3PO-5PO difference). The Epre group showed the highest rates of contraction in the evaluation between the immediate postoperative period and the 7th day (p = 0.002). The tensiometric study (maximum and rupture force) showed no difference between groups, as well as the myofibroblast and neoangiogenesis analyzes. There was an association between greater tensile strength with greater number of myofibroblasts for the Epre group (p = 0.011) and higher strength with greater number of CD34 for the Cpre group (p = 0.03). For the collagen, there was no difference between the "pre" and "per" moments, only between the experimental and control groups, with the first showing higher levels of collagen type III (immature - p <0.001). Conclusion: The use of enteral supplementation with omega-3 in rats without malnutrition does not alter the weight, tensile strength of the scar, myofibroblasts and neoangiogenesis. It promotes a higher rate of wound contraction and a delay in the deposition of mature collagen in relation to soybean oil supplementation. Key-Words: Wound-Healing. Fatty Acids Omega-3. Nutritional Status. Rats. Collagen. Myofibroblasts.Tensile Strength.

Orientador: Prof. Dr. Jorge Eduardo Fouto Matias / Co-orientadora: Profª. Drª. Maria de Lourdes Pessole Biondo-Simões / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa: Curitiba, 16/12/2016 / Inclui referências : f.49-50 / Resumo: A fim de abordar os efeitos da administração tópica do metronidazol na absorção local e neovascularização durante cicatrização experimental por segunda intenção, 108 ratos machos, Wistar, pesando entre 300-350g foram submetidos a uma ferida de pele de espessura total, circular, com 2cm de diâmetro. Os animais foram divididos em 5 grupos (18 cada grupo) de acordo com a concentração usada da solução de metronidazol (4%, 6%, 8%, 10% e 12%) durante todo o período do experimento os curativos foram realizados diariamente, cada subdividido em três tempos de análise ( após 3, 7 e 14 dias de observação). Amostras de sangue venoso para avaliação da concentração de metronidazol foram obtidas por punção cardíaca e manipuladas por cromatografia líquida de alta performance; neovasos formados foram demonstrados usando CD34 e vimentina por técnicas de imunoistoquímica. Análise estatística, incluindo comparações intergrupos e intragrupos foram calculados por testes não paramétricos de Kruskal-Wallis usando SSPS software e valor de "p" 0,05, significância estatística de 95%. O metronidazol esteve presente na corrente sanguínea em todos os grupos de metronidazol e momentos estudados mas não houve diferença estatística de acordo com a concentração de metronidazol usada ou o tempo de exposição da ferida à droga. Foi significante o número de neovasos formados (p=0,005) nas feridas tratadas com administração de solução de metronidazol tópico 6% e 8%. Concentrações séricas de metronidazol não foram afetadas pelo uso tópico das concentrações da solução de metronidazol topicamente ou pela duração do tempo de administração. O uso tópico de metronidazol em soluções de 6% e 8% em feridas com cicatrização experimental por segunda intenção melhorou significativamente a neovascularização local conforme avaliado pelas técnicas imunoistoquímicas CD34 e vimentina. Estes achados podem ser potencialmente usados em favor do processo de cicatrização de feridas. Descritores: Cicatrização. Metronidazol. Absorção cutânea. Neovascularização. Administração tópica. Fisiológica. Ratos. / Abstract: In order to address beneficial effects of metronidazole topical administration on local absorption and neovascularization during experimental second-intention healing, 108 Wistar male rats, weighing 300-350g were submmited to a circular, 2 cm diameter, total deep back skin wound. Animals were divided into five groups (18 each group) according to the metronidazole solution concentration used (4%, 6%, 8%, 10% and 12%) during the dressing performed daily all over the period of experiment which was subdivided into three times of analysis (after 3, 7 and 14 days of observation). Blood samples for metronidazole venous concentration were obtained from cardiac puncture and manipulated by High-Performance Liquid Chromatography; newly formed vessels were demonstrated using CD34 and vimentin immunohistochemistry techniques. Statistical analysis, including intergroups and intragroups comparisons was calculated by non-parametric Kruskal-Wallis test using SSPS software and p value of 0,05, statistical significance of 95%. Metronidazole was present at bloodstream in all metronidazole groups and moments studied but there was no statistical differences according to metronidazole solution concentration used or time of wound exposure to the drug. There was significantly more newly formed vessels (p=0,005) at the wounds treated by topical administration of 6% and 8% metronidazole solutions. Metronidazole serum concentrations are not affected by metronidazole solution concentration used topically or by the duration time of administration. Topical administration of metronidazole solutions at 6% and 8% in experimental second-intention skin wounds was able to improve significantly local neovascularization as assessed by CD34 and vimentin immunohistochemistry techniques. These findings can be potentially used in favor of the wound healing process. Keywords: Wound Healing. Metronidazole. Administration, Topical. Skin Absorption. Neovascularization, Physiologic. Rats.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-29Bitstream added on 2014-06-13T18:50:21Z : No. of bitstreams: 1 taveira_hm_me_botfm.pdf: 216679 bytes, checksum: 73e6957f40c412e7b3fc10fa87466585 (MD5) / Fundação Pio Xii - Barretos / Trata-se de um estudo piloto, prospectivo randomizado, realizado com pacientes em cuidados paliativos oncológicos portadores de Úlceras por Pressão em estágios III e IV. A randomização foi realizada, pelo Núcleo de Apoio ao Pesquisador - NAP, em dois Grupos, sendo Grupo – A pacientes elegidos para utilização de curativo bio-ativo – cola de fibrina, desenvolvido home made, pelo Laboratório de Biotecnologia do Hemocentro da UNESP-Botucatu. E os pacientes randomizados para o Grupo – B foram elegidos para utilizarem o Alginato de cálcio, produto já disponível comercialmente e padronizado na Instituição. O objetivo do estudo foi avaliar a eficácia do uso do Biocurativo – Cola de Fibrina em relação ao curativo “Convencional” no tratamento de Úlcera por Pressão em pacientes portadores de Neoplasia Em Cuidados Paliativos. Os objetivos específicos foram Comparar a evolução da perimetria da área, celularidade e vascularização da lesão, avaliar o grau da dor relacionada à lesão e avaliar a qualidade de vida. Participaram do estudo 14 pacientes. Os pacientes foram acompanhado por 40 dias, aplicou-se questionário de qualidade de vida Eortc-30, questionários semi-estruturado sobre condições epidemiológicas, clinicas e de característica da lesão. Foi realizada biópsia punch com finalidade de avaliar a celularidade e vascularização e fotografias da lesão para análise da perimetria, comparando cada lesão no primeiro e no último dia do estudo. Outros dados como níveis de hemoglobina, proteínas/albumina, e avaliação nutricional também foram realizados. Houve várias perdas do estudo por óbitos dos pacientes, com o tamanho amostral reduzido não foi possível obter análise estatística significativas entre ou grupos, o que sugere continuidade do estudo até atingir tamanho amostral com significância estatística / This is a pilot study, a prospective randomized study with patients in palliative care cancer patients with pressure ulcers in stages III and IV. The randomization was performed by the Center for Research Support - NAP in two groups, Group - A patients elected to use of bio-active wound dressing - fibrin glue, developed home made by the Biotechnology Laboratory of the Blood Center of UNESP-Botucatu . And patients randomized to Group - B were elected to use the calcium alginate, a product already commercially available and standardized within the institution. The aim of this study was to evaluate between the efficacy of the Biocure - Fibrin Glue end the curative conventional treatment of Pressure Ulcers in patients with cancer in palliative care. The specific objectives were to compare the evolution of the perimeter of the area, cellularity and vascularity of the lesion, assess the degree of pain related to injury and assess the quality of life. The study included 14 patients. Patients were followed for 40 days, we applied the quality of life questionnaire EORTC-30, semi-structured questionnaires conditions on epidemiological, clinical and lesion characteristics. Punch biopsy was performed in order to evaluate the cellularity and vascularity of the lesion and photographs for analysis of perimetry, comparing each lesion in the first and last days of the study. Other data such as hemoglobin, protein / albumin, and nutritional assessment were also conducted. There were several losses due to deaths in the study of patients with reduced sample size was not possible to obtain meaningful statistical analysis or between groups, suggesting continuity of the study until sample size reach statistical significance

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-12Bitstream added on 2014-06-13T20:10:22Z : No. of bitstreams: 1 alvarado_lg_me_botfm.pdf: 1760073 bytes, checksum: e4d09ac4f0fa7011862a2bf823b68c57 (MD5) / The improvement of a formulation involves several important steps that range from knowledge of the characteristics of the inputs used, until proof that the application is safe for commercialization. The objective of this work is to study the use of chitosan and platelet concentrates CP in the repair of epithelial tissues mainly by chronic venous wounds. This will be produced transdermal membranes chitosan CP associated with the use of cross linking agents adsorbed at various concentrations. It is estimated that nearly 3% of the population suffer from this type of injury, which rises to 10% for diabetics, and that around 4 million people are suffering from chronic injuries or have some type of complication in the process healing. Search, therefore, new features and technologies that enable the population access to a treatment effective, efficient and low cost

Orientador: Prof. Dr. Antônio Carlos Ligocki Campos / Co-orientador: Prof. Dr. Jorge Eduardo F.Matias / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa: Curitiba, 13/07/2015 / Inclui referências f. 54-59 / Área de concentração : Clinica cirurgia / Resumo: Introdução: Tendo em vista o número de cirurgias plásticas no Brasil e a busca por melhores resultados estético-funcionais fazem-se necessárias pesquisas para encontrar meios para melhorar a cicatrização e as cicatrizes. Objetivo: Avaliar os efeitos de três sessões de radiofrequência na cicatrização da pele de ratos no 7º e 14º dia de cicatrização. Método: Quarenta e oito ratos machos foram divididos em 4 grupos (GC7, GR7, GC14 e GR14) conforme ao grupo que pertenciam (GC: grupo controle; GR: grupo radiofrequência) e o dia do sacrifício (7: 7º dia P.O; 14: 14º dia P.O). Sob anestesia com ketamina 80 mg/kg e xilazina 8 mg/kg foi realizado a tricotomia e antissepsia com PVPI. Logo em seguida, foi feita a marcação da ferida excisional com tamanho de 2cm x 2cm (4cm²) e utilizado a lâmina 20 nas bordas laterais do quadrado. Foi feita a dissecação do segmento da pele. Também utilizou-se um punch metálico de 6mm com lâmina cortante na sua borda inferior para a realização de duas feridas excisionais de 0,6cm de diâmetro. Após 24h, foi realizada a aplicação da radiofrequência com o equipamento Spectra® na região dorsal, diretamente sobre as feridas por 7 minutos com temperatura de 38ºC. Esse procedimento foi realizado por três vezes, em dias alternados. No grupo controle foi realizado o procedimento com o aparelho desligado. As feridas foram fotografadas em diferentes tempos pós-operatórios: dia da cirurgia, 1ºdia P.O, no 7º dia P.O e no 14º dia P.O. As áreas cruentas foram calculadas utilizando programa específico de computador. No sacrifício (7º P.O ou 14º P.O), as feridas foram ressecadas e fixadas, para posterior análise histológica com HE. Os resultados foram analisados estatisticamente. Resultados: Foi encontrada área maior na ferida quadrado, no 3º dia pós cirurgia do grupo radiofrequência (GR7 3,3cm² ± 0,7cm² X GC7 2,4cm² ± 0,4cm², p=0,009). A diferença no dia da cirurgia para o dia da eutanásia do GR14 e GC14 foi uma ferida maior no dia da eutanásia no GR14 quando comparado ao GC14 (GR14 1,9cm² ± 0,5cm² X GC14 1,0cm² ± 0,3cm², p=0,001). No 7º e 14º dia de pós-operatório as feridas dos grupos controle e experimento de todos os animais exibiram aspectos diferentes entre si. Houve fechamento de 90% das feridas no GC14. No GR14, 60% dos ratos com feridas de punch foram reepitelizadas, enquanto 40% permaneceram ulceradas. No GC7, 70% das feridas de punch permaneceram ulcerados e 30% foram reepitelizadas. Já no GR7, 8% dos ratos, com feridas de punch foram reepitelizadas e 92% dos ratos permaneceram ulcerados. Conclusão: Pode-se afirmar que a radiofrequência tem influência sobre o processo inflamatório mostrando que, nos ratos que foram aplicados a radiofrequência, o quadrado permaneceu ulcerado. A radiofrequência reduz a contração cicatricial em feridas excisionais. Palavras-chave: Ondas de Rádio. Cicatrização. Fibroblastos / Abstract: Introduction: Considering the number of plastic surgeries in Brazil and the search for better aesthetic-functional results, researches are necessary to find ways to improve the healing process and scars Objective: The objective of this study was to evaluate the effects of 3 sessions of the radiofrequency device in the cicatrization process of rat skins at 7 º and 14 º days of healing. Methods: Forty-eight male rats were divided into 4 groups (GC7, GR7, GR14 and GC14), according to the group (CG: control group; GR: RF group) and the day of sacrifice (7: 7th post-operative day; 14: 14th post-operative day). Under anesthesia with ketamine 80mg/kg and xylazine 8mg/kg, the trichotomy and antisepsis with PVP-I was done on each animal before marking the 2cm x 2cm (4cm²) excisional wound, to finally initiate surgery with No.20 blades on the sides of the marked square, dissecting the skin segment. A 6mm metal punch with a cutting blade at its lower edge was used as well. After 24h, the radio-frequency with Spectra® equipment was applied on the dorsal region for 7 minutes with a temperature of 38 °C. This procedure was performed three times on alternate days. The control group went through the process with Spectra® turned off. The wounds were photographed at different post-operative stages: Surgery day, 1º day PO, 7º day PO and 14º day PO the raw areas were calculated using specific computer program. We reevaluated histologically with HE. Results were statistically analyzed by non-parametric Mann-Whitney test, p<0, 05. Results: Larger area in the wound square was found, on the 3rd day after surgery in radiofrequency group (GR7 3,3cm² ± 0,7cm² x GC7 2,4cm² ± 0,4cm², p=0,009).The difference between surgery day to euthanasia of the GC14 and GR14 is a smaller wound on euthanasia day in C14 compared to R14, (GR14 1,9cm² ± 0,5cm² x GC14 1,0cm² ± 0,3cm², p=0,001).On 7th and 14th postoperative days, wounds of control and experimental groups of all animals exhibit different aspects. There was 90% closure of wounds in the GC14. 60% of the rats in the GR14 had epidermal regeneration while 40% remaining ulcerated. In GC7, 70% of punch wounds remained ulcerated and 30% was healed. The GR7 had 8% rats with punch wounds healed and 92% remained ulcerated. Conclusion: It can be said that the radio has influence on the inflammatory process, showing negative effects applying RF; the Q-square remained ulcerated. This, study have found harmful results about the application of radiofrequency in the initial PO. However, it is necessary to conduct more studies to elucidate the action mechanism of RF in skin wounds healing. Keywords: Radio Waves. Cicatrization. Fibroblasts

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000379483-0.pdf: 11148782 bytes, checksum: 3e2c17b0713861a21e02b80c5cd06cd8 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The vascular corrosion cast technique associated with SEM (Scanning Electron Microscopy) is a suitable method to define the angioarchitecture of different organs and to verify the development of intussusceptive angiogenesis. The capillary lumen is casted with resin and the surrounding tissues are corroded with alkaline solution. The aim of this study was to describe the vascular pattern of the tongue ventral surface from Wistar rats submitted or not to a surgery in the region and to verify the development of sprouting and intussusceptive angiogenesis during wound healing in different postsurgical periods. Tongue’s ventral surface from control rats showed a loose net with small mesh as a superficial capillary plexus and anatomical variations of the confluent vessels of the ranina veins. Rats subjected to surgery showed, on the first postsurgical day, sectioned capillary vein and artery extremities to be conically and round respectively. A process of intussusceptive and sprouting angiogenesis involving the blood vessels of the wound healing was observed on the second day following surgery. On the third postsurgical day the same process of the angiogenesis was observed in the granulation tissue. On the seventh postsurgical day, a complete vascularization of the wound capillary bed was achieved, showing parallel running blood vessels perpendicular to the superficial capillary plexus. On the fourteenth postsurgical day, the central blood capillary vessels presented a radial arrangement from the center of the wound. On day twenty-one after surgery the pattern of the superficial vasculature has not achieved previous pre surgical pattern of blood vessels. Intussusceptive and sprouting angiogenesis occurs more frequently on the root end of surgical wound in the tongue and mainly in the second and third postsurgical days. / A técnica de moldagem vascular seguida de corrosão, associada à microscopia eletrônica de varredura (MEV), é um método adequado para descrever a angioarquitetura de diferentes órgãos e para verificar a ocorrência de angiogênese por intussuscepção e por brotamento. O lúmen dos vasos é moldado com resina e a corrosão do tecido circunjacente à resina com solução alcalina. O objetivo do presente estudo foi descrever o padrão vascular do ventre da língua de ratos Wistar submetidos ou não a uma ferida na região, verificar a ocorrência de angiogênese por brotamento e por intussuscepção durante a cicatrização em diferentes tempos pós-operatórios. No ventre da língua dos animais não submetidos ao procedimento cirúrgico, foi observada a presença de trama vascular superficial em forma de rede frouxa, e de variações anatômicas dos vasos confluentes das veias raninas. Nos ratos submetidos ao procedimento cirúrgico, no primeiro dia pós-operatório, as extremidades dos capilares venosos seccionados apresentaram forma cônica, e dos capilares arteriais, forma arredondada. No segundo dia pós-operatório, iniciou-se o processo de angiogênese por intussuscepção e por brotamento.No terceiro dia pós-operatório, observou-se também a ocorrência destas angiogênese nos capilares do tecido de granulação. No sétimo dia pós-operatório, todo o leito cirúrgico encontrava-se revascularizado com capilares centrais paralelos entre si e perpendiculares à trama vascular superficial circunjacente. No 14º dia pós-operatório, os capilares centrais apresentaram inclinação gradual que, no 21º dia, juntamente com a trama vascular superficial, formaram o padrão radial a partir do centro da ferida. O padrão vascular da superfície ventral da língua, 21 dias após o procedimento cirúrgico, ainda não se encontra na mesma organização e disposição do padrão vascular das línguas não submetidas ao procedimento cirúrgico. A ocorrência de angiogênese por intussuscepção e por brotamento é mais freqüente no limite posterior da ferida cirúrgica e no segundo e no terceiro dia pós-operatório.

Introdução: Na cirurgia das hérnias da parede abdominal, as próteses de baixa gramatura têm sido valorizadas por conter menor quantidade de material sintético, diminuindo o desconforto crônico e ainda assim permitindo um reforço seguro. Durante a cicatrização, a tela está sujeita a uma diminuição de sua área, conhecida por retração. Os objetivos deste estudo são avaliar e comparar entre telas de alta (A) e baixa (B) gramatura: o percentual de retração, a resposta inflamatória e a fibroplasia. Métodos: Os dois tipos de tela foram fixados anteriormente à fáscia abdominal íntegra de 25 ratos Wistar. Os animais foram divididos em 3 grupos e reoperados em 7, 28 e 90 dias, para a aferição das dimensões das próteses. A resposta inflamatória foi avaliada pela análise histológica corada com hematoxilina-eosina, quantificando-se neutrófilos, linfócitos, células gigantes e macrófagos perifilamentares. A fibroplasia foi avaliada por imuno-histoquímica mensurando os tipos I e III de colágeno. Resultados: A taxa mediana de retração da tela A foi nula em 7 dias (p 0,647); de 2,76% em 28 dias (p 0,020) e de 2,5% em 90 dias (p 0,013). A tela B retraiu 3,71% em 7 dias (p 0,040), 4,52% em 28 dias (p 0,014) e 5,0% em 90 dias (p < 0,001). Houve maior retração na tela B do que na A em 7 (p 0,036) e 90 dias (p 0,038). Na análise histológica, a quantidade de neutrófilos foi significativamente maior na tela B no 7º dia pós-operatório (p 0,008), diminuindo em ambos os tipos de telas e assemelhando-se à tela A aos 90 dias. Os linfócitos apresentaram níveis semelhantes no 7º dia pós-operatório, diminuindo em ambos os tipos de telas, especialmente na tela B, com uma diferença de aproximadamente 50% (p < 0,001). Conforme o tempo pós-implante, houve aumento progressivo da razão de colágeno I/III, de cerca de 5x aos 90 dias, nos 2 tipos de tela (p < 0,001), sem diferença entre elas. Conclusão: A tela B apresentou maior retração tanto precoce quanto tardiamente, maior resposta inflamatória precoce e menor reação tardia de corpo estranho do que a tela A, sem comprometer a adequada formação de colágeno.

Durante as duas últimas décadas ocorreram progressos substanciais a respeito do entendimento da patofisiologia da cicatrização de feridas, e novas terapias têm sido desenvolvidas. Contudo, acelerar o processo de reparo continua sendo um desafio no campo da cirurgia plástica reconstrutiva. Tratamentos inovadores para melhorar a cicatrização e a regeneração cutânea são necessários e é nesse âmbito que as pesquisas com as células-troncos mesenquimais (MSCs) vêm ganhando espaço na última década. As MSCs foram estudadas em diversas áreas no que diz respeito ao seu efeito sobre a cicatrização de lesões e suas aplicações clínicas. O uso de MSCs, em feridas agudas ou crônicas, resultam em uma aceleração no processo cicatricial, em decorrência do impacto benéfico que elas trazem para todas as fases da cicatrização (inflamatória, proliferativa e remodelamento). O momento da aplicação das MSCs nas feridas e o número ideal de aplicações ainda não são bem conhecidos; alguns autores citam em sua metodologia o seu uso, mas dificilmente eles justificam ou concluem sobre as aplicações. Nessas condições, o presente trabalho visa apresentar os resultados da aplicação de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (ADSCs), em duas fases consecutivas da cicatrização – uma delas na fase inflamatória e outra na proliferativa. Além disso, irá indicar em qual dessas duas fases a aplicação de ADSCs é mais eficaz. Paralelamente a isso, definir se duas doses são mais eficientes do que apenas uma para promover a cicatrização durante sete dias de observação. Para tanto, os resultados foram divididos em dois artigos. O primeiro compara o momento da aplicação das células, ao passo que o segundo compara a eficiência de duas doses em relação a uma, ambos em um período de avaliação de sete dias. Portanto, no primeiro artigo o objetivo foi avaliar a ação das ADSCs no tratamento de feridas cutâneas agudas a fim de entender se o momento da aplicação das células resulta em diferença na cicatrização nos primeiros sete dias de lesão. As células-tronco foram isoladas de tecido adiposos de camundongos C57Bl/6 GFP+. Para tanto, foram utilizados 49 camundongos C57Bl/6 divididos em quatro grupos: Grupo I (GI/controle; n= 14); Grupo II (GII; n= 14): ADSCs injetadas ao no d0; Grupo III (GIII; n= 14): ADSCs injetadas no 3° dia após a indução da lesão (d3) e Grupo IV (GIV; n= 7): ADSCs injetadas no 5° dia após a indução da lesão (d5). As avaliações clínicas ocorreram nos dias 0, 3, 5 e 7 e as histopatológicas nos dias 5 e 7. Na metodologia proposta podemos observar que, em apenas sete dias de avaliação, o uso de ADSCs aumenta a vascularização, a formação de tecido de granulação, a colagenização e incrementa o número de folículos pilosos. Além disso, o momento da aplicação das células não repercutiu diferenças significativas na fase inflamatória e proliferativa do processo de cicatrização de feridas cutâneas. Contudo, os diferentes momentos de aplicação das ADSCs resultaram em efeitos benéficos para aspectos importantes dos mecanismos da cicatrização como a presença de tecido de granulação, a proliferação vascular, a colagenização e a presença de folículos pilosos, porém distintos. Assim, a escolha do momento de aplicação dependerá da necessidade de cada paciente e da intenção do médico quando estudos clínicos forem realizados. No segundo artigo o objetivo foi avaliar a ação das ADSCs no tratamento de feridas cutâneas agudas a fim de entender se duas aplicações consecutivas de células promovem a cicatrização nos primeiros sete dias de lesão. Para o experimento foram utilizados 49 camundongos C57Bl/6 divididos em quatro grupos: (G0/controle; n = 14); (G1D; n = 14): ADSCs injetadas no d0; Grupo 3D (G3D; n = 14): ADSCs injetadas no d0 e no d3; Grupo 5D (G5D; n = 7): ADSCs injetadas no d0 e no d5. As avaliações clínicas ocorreram nos dias 0, 3, 5 e 7 e as histopatológicas nos dias 5 e 7. Nesse estudo pode-se observar que o uso de duas doses de ADSCs aumenta a proliferação celular e vascular e uma aplicação incrementa o número de folículos pilosos em apenas sete dias de avaliação. Assim, é possível concluir que utilizar duas doses é mais eficiente do que uma quando avaliamos os sete primeiros dias de cicatrização. Além disso, não há diferença no momento de aplicação da segunda dose de ADSCs quando em um período de observação de 7d. / During the last two decades, there has been substantial progress regarding the understanding of the pathophysiology of wound healing, and new therapies were developed. However, in the field of reconstructive plastic surgery acceleration the repair process remains a challenge. It is necessary innovative treatments to improve healing and skin regeneration. In this context that research on mesenchymal stem cell (MSCs) have been gaining ground in the last decade in the field of reconstructive plastic surgery. MSCs studies in different areas with respect to their effect on the healing of injuries and their clinical applications. The use of MSCs in acute or chronic wounds, result in an acceleration of the healing process, due to the beneficial impact they bring to all stages of healing (inflammatory, proliferative and remodeling). The time of application of MSCs in the wounds and the ideal number of doses is still not very clear, and although some authors cite in their methodology use, they hardly justify or conclude about the applications. Under these conditions, the results of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue (ADSCs) applied in two consecutive stages of healing - one in the inflammatory phase and another in proliferative. Also, indicate which of these two phases ADSCs of the application is more efficient. Parallel to this, determine whether two doses are more effective in promoting healing of a seven-day observation period. Therefore, the results were divided into two articles. The first compares the time of application of the cells, and the second article compares the efficiency of two doses instead one, both in seven days evaluation period. Therefore, the results were divided into two articles. The first compares the time of application of the cells, and the second article compares the efficiency of two doses instead one, both in seven days evaluation period. Therefore, in the first article we evaluated the action of ADSCs in the treatment of acute wounds in order to understand if the time of application of the cells results in difference in healing the first seven days of injury. The stem cells were isolated from adipose tissue of C57BL / 6 mice GFP +. Thus, we used 49 mice C57BL / 6 divided into four groups: Group I (GI / control, n = 14); Group II (GII; n = 14): ADSCs injected to the d0; Group III (GIII; n = 14): ADSCs injected on the 3rd day after the induction of injury (d3) and Group IV (GIV; n = 7): ADSCs injected on day 5 after induction of skin defect (d5). Clinical evaluations were performed on days 0, 3, 5 and 7 and the histopathology on days 5 and 7. In the proposed methodology, can be seen that the use of ADSCs increased vascularization, formation of granulation tissue, collagen deposition and increases the number of hair follicles in just seven days of evaluation. In addition, the time of application of the cells did not affect significant differences in the inflammatory and the proliferative phase of wound healing skin. However, the use of different periods ADSCs resulting in beneficial effects on important aspects of wound healing mechanisms. Such as the presence of granulation tissue, vascular proliferation, collagen deposition and the presence of hair follicles; but distinct. So, choose the time of application will depend on the needs of each patient and the doctor's intention. In the second article, we evaluated the action of ADSCs in the treatment of acute wounds in order to understand if two consecutive applications of cells promote healing in the first seven days of injury. For the experiment were used 49 C57BL / 6 mice divided into four groups: (G0 / control; n = 14); (G1D, n = 14): injected into the ADSCs d0; 3D Group (G3D; n = 14): ADSCs injected into the d0 and d3; 5D group (G5d; n = 7): ADSCs injected on d0 and d5. Clinical evaluations were performed on days 0, 3, 5 and 7 and the histopathology on days 5 and 7. In this study, it can be seen that the use of two doses of ADSCs enhances cell proliferation and vascular application and increases the number of follicles hair in just seven days of evaluation. Thus, we conclude that use two doses is more efficient than when evaluating the first seven days of healing. In addition, there is no difference in the time of the second treatment of ADSCs when an observation period of 7d.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-07-09T14:52:59Z No. of bitstreams: 1 2013_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 72511577 bytes, checksum: e0c0b9fca29eddd2b49e420ea1b8a90e (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-07-10T11:57:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 72511577 bytes, checksum: e0c0b9fca29eddd2b49e420ea1b8a90e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-10T11:57:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 72511577 bytes, checksum: e0c0b9fca29eddd2b49e420ea1b8a90e (MD5) / Introdução: A cirurgia laparoscópica apresenta diversas vantagens em relação a cirurgia aberta, sendo cada vez mais utilizada. Para prover exposição cirúrgica é utilizado pneumoperitônio com dióxido de carbono (CO2), gerando aumento da pressão abdominal. O CO2 é utilizado em diversas especialidades médicas para melhorar o processo cicatricial. Os possíveis efeitos benéficos deste gás na cirurgia laparoscópica motivou este estudo. Objetivo: Verificar os efeitos do CO2 e da pressão abdominal na cicatrização de anastomoses colônicas em ratos. Material e método: 70 ratos foram distribuídos em 4 grupos. Foi realizada uma ressecção de segmento colônico proximal à reflexão peritoneal com anastomose colônica término-terminal vídeo-assistida, utilizando um novo modelo experimental, com pneumoperitônio nas pressões de 5 mmHg (grupo I), 12 mmHg (grupo II) ou 20 mmHg (grupo III). A mesma operação foi realizada por laparotomia (grupo IV). Os animais dos grupos I, II e III foram divididos em subgrupos para uso de CO2 ou hélio para confecção do pneumoperitônio. Os animais foram mortos após 7 dias. Foram avaliados os seguintes parâmetros: óbito, peso, achados intra-operatórios, pressão de ruptura da anastomose, força de ruptura da anastomose, características histopatológicas, histomorfometria do colágeno, dosagem de hidroxiprolina, fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) e densidade de microvasos (CD31). Resultados: A pressão e os gases não influenciaram nos óbitos, nos achados intraoperatórios, na pressão de ruptura da anastomose, na força de ruptura da anastomose, na histopatologia, na dosagem de hidroxiprolina, no VEGF e no CD31. Há uma maior perda de peso na pressão de 20 mmHg em relação a cirurgia aberta (p=0,037). Na histomorfometria, o CO2 aumentou o percentual de colágeno em relação ao hélio na pressão de 20 mmHg (p=0,004). Conclusão: O CO2 não influenciou na cicatrização de anastomoses em cólon esquerdo de ratos nas pressões de 5 mmHg e 12 mmHg. Na pressão de 20 mmHg, o CO2 aumentou o percentual do colágeno na região anastomótica em relação ao hélio. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Laparoscopic surgery has several advantages over open surgery, being increasingly used. Pneumoperitoneum with carbon dioxide (CO2) is used to provide surgical exposure, increasing abdominal pressure. CO2 is used in various medical specialties to improve the healing process. The possibility of beneficial effects caused by this gas in laparoscopic surgery motivated this study. Objective: To investigate the effects of CO2 and abdominal pressure on the healing of colonic anastomosis in rats. Methods: 70 rats were divided in 4 groups. We performed a video-assisted resection of a colonic segment proximal to the peritoneal reflection with an endto- end colonic anastomosis, using a new experimental model, at pneumoperitoneum pressures of 5 mmHg (group I), 12 mmHg (group II) or 20 mmHg (group III). The same operation was performed by laparotomy (group IV). The animals in groups I, II and III were divided into subgroups to use CO2 or helium for pneumoperitoneum. The animals were killed after 7 days. We evaluated the following parameters: mortality, weight, intraoperative findings, bursting pressure, breaking strength, histopathologic features, histomorphometry of collagen, serum hydroxyproline, vascular endothelial growth factor (VEGF) and microvessel density (CD31). Results: Neither the pressure nor the gas influenced in mortality, intraoperative findings, bursting pressure, breaking strength, histopathology, VEGF and CD31. There was a greater weight loss in pneumoperitoneum pressure of 20 mmHg compared to open surgery (p=0.037). In histomorphometry, the CO2 increased the percentage of collagen in relation to helium at a pressure of 20 mmHg (p=0.004). Conclusion: The CO2 had no effect on anastomotic healing in the left colon of rats at pressures of 5 mmHg and 12 mmHg. At a pressure of 20 mmHg, CO2 increased the percentage of collagen in the anastomosis compared to helium.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-11-06T19:28:31Z No. of bitstreams: 1 dissertação total01.pdf: 714792 bytes, checksum: fdfd3d22be39f9a1cbc64666ef7e68ae (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-01-15T18:14:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dissertação total01.pdf: 714792 bytes, checksum: fdfd3d22be39f9a1cbc64666ef7e68ae (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-15T18:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertação total01.pdf: 714792 bytes, checksum: fdfd3d22be39f9a1cbc64666ef7e68ae (MD5) Previous issue date: 2006 / O diclofenaco sódico apresenta efeitos deletérios sobre a cicatrização e em vários estudos foi demonstrada a eficácia do Fator XIII da coagulação sanguínea sobre a cicatrização nas mais variadas situações no pós-operatório. Este estudo foi idealizado no intuito de avaliar se o Fator XIII da coagulação sanguínea poderia bloquear estes efeitos deletérios provocados pelo diclofenaco sódico. Este ensaio experimental randomizado duplo cego foi realizado com a utilização de 96 ratos da linhagem Winstar. Os animais foram distribuídos em quatro grupos de 24 animais de acordo com a utilização da drogas em estudo: DS (diclofenaco sódico), DSF (diclofenaco e Fator XIII da coagulação), SF (solução de NaCl a 0,9%) e F (Fator XIII da coagulação). Estes grupos foram realocados em três novos grupos cada de acordo com o dia de eutanásia (terceiro, sétimo e décimo - quarto) ficando cada grupo então com oito animais. Foi realizada incisão de 04 cm no dorso à esquerda com posterior sutura em pontos separados. A cicatrização foi avaliada quanto aos aspectos microscópicos do processo inflamatório cicatricial assim como a variação da resistência tênsil da ferida operatória no terceiro, sétimo e décimo - quarto dia de pós-operatório. Os resultados foram submetidos à análise estatística, tendo sido utilizado os testes Mann-Whitney Rank Sum Test e o t-test. Foi considerado estatisticamente significante p < 0,05. O Fator XIII da coagulação sanguínea diminuiu o edema no pós-operatório no 3º. dpo em relação ao grupo controle (p=0,015). O grupo do Fator XIII da coagulação sanguínea apresentou no 3º. dpo aumento da resistência tênsil em relação ao grupo do diclofenaco sódico (p=0,024). O grupo do diclofenaco sódico apresentou diferença estatisticamente significante com maior presença de leucócitos polimorfonucleares no sétimo dia de pós-operatório (p=0,04; p=0,01; p=0,04), maior presença de células mononucleares (p=0,021; p=0,021; p=0,021), maior neoformação vascular (p=0,038; p=<0,01; p=0,021) e maior quantidade de tecido de granulação (p=0,03; p=0,001; p=0,03) no décimo quarto dia de pós-operatório em relação aos demais grupos avaliados. O Fator XIII da coagulação sanguínea foi eficaz em bloquear parte dos efeitos deletérios na cicatrização provocados pelo diclofenaco sódico. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diclofenac presents deleterious effects on the healing process and many studies showed effectiveness of Factor XIII in the healing of different kinds of post-operatory situations. The aim of this study was to detect if Factor XIII could block this pernicious effects in the healing process promoted by diclofenac. 96 rats was randomized in four groups: group DS (diclofenac), group DSF (diclofenac + Factor XIII), group SF (NaCl 0,9%) and group F (Factor XIII). Each group was divided again in another three groups of eight animals. Four groups of each initial group were killed in the third, seventh and fourteenth postoperatory day. The microscopic inflammatory healing process and the breaking strength of wound was examined in the third, seventh and fourteenth postoperatory day. The Mann-Whitney Rank Sum Test and the T-test was utilized in the statistical analysis. It was considered statistical significant p < 0,05. In third post-operatory day the Factor XIII decreased edema in relation to the control group (p=0,015) and increased the breaking strength in relation to the diclofenac group (p=0,024). In the seventh post-operatory day diclofenac increased the number of polymorfonuclear cells in relation to the other groups: DSF (p=0,04), SF (p=0,01) and F (p=0,04). In the fourteenth post-operatory day diclofenac increased the number of mononuclear cells in relation to the other groups: DSF (p=0,021), SF (p=0,021) and F (p=0,021). Also diclofenac increased vascular neofomation in relation to the other groups respectively (p=0,038; p=<0,01 and p<0,021) and granulation tissue (p=0,03; p=0,001 and p=0,03). The coagulation Factor XIII was efficient in prevent part of deleterious diclofenac effects in the normal healing process.