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Avaliação toxicológica do extrato aquoso dos ramos de E. tirucalli L. in vitro

Waczuk, Emily Pansera 06 March 2014 (has links)
Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-08T15:22:01Z No. of bitstreams: 1 Emily Pansera Waczuk.pdf: 1582858 bytes, checksum: b6530e7a5d41da951557fd7d3947c87d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-08T15:22:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Emily Pansera Waczuk.pdf: 1582858 bytes, checksum: b6530e7a5d41da951557fd7d3947c87d (MD5) Previous issue date: 2014-03-06 / A Euphorbia tirucalli, popularmente conhecida como avelós, é uma planta tóxica, tradicionalmente usada como um chá na medicina popular brasileira para o tratamento de várias doenças, demonstrando atividades antibacteriana, antiviral e anticarcinogênica. No entanto, não há nenhum relatório científico dos efeitos tóxicos podem surgir a partir de consumo desta planta, bem como os mecanismos pelos quais ela induz sua toxicidade. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar in vitroa genotoxicidade e citotoxicidade do extrato aquoso de E. tirucalliem leucócitos humanos usando os testes do ensaio cometa e azul de tripan, respectivamente. Adicionalmente, o efeito do extrato aquoso de E. tirucalli sobre a fragilidade osmótica foi investigada em eritrócitos humanos. Além disso, avaliamos a expressão de genes que codificam enzimas antioxidantes (SOD2, CAT e GPx4)através de qRT-PCR. Os nossos resultados demonstraram que a exposição de E. tirucalli em leucócitos humanos provocou aumentos significativos de danos no DNA nas concentrações mais elevadas testadas (100-150 µg/mL), que foi associada a uma diminuição significativa da viabilidade celular em concentrações de 10 a 150µg/mL. Por outro lado, a E. tirucalli não induziu a hemólise de eritrócitos humanos em todas as concentrações testadas. A exposição de leucócitos humanosàE. tirucalli(10-50µg/mL) causouregulação positiva significativa sobre no RNAm da SOD2 e expressões dos genes daCAT, e diminuiu significativamente o RNAm da GPx4 nas concentrações mais elevadas (100-150µg/mL).Adicionalmente, a expressão genica do gene da SOD2 foi regulada negativamente na maior concentração testada (150 µg/mL). Em resumo, com base nos resultados de genotoxicidade observados em nosso estudo, recomendamos cautela no uso agudo ou crônico deste preparado caseiro.Com todos estes aspectos, nossos resultados sugerem que o extrato da E. tirucalliinduz genotoxicidade e citotoxicidade em leucócitos humanos, possivelmente através da interação com o sistema enzimático antioxidante, assim, aumentando a formação de ROS e diminuindo o nível de tolerância celular para os constituintes químicos desta planta. / Euphorbia tirucalli, popularly known as avelós, is a toxic plant traditionally used as a tea in the Brazilian folk medicine for the treatment of various diseases, by presentingantibacterial, antiviral and anticarcinogenicproperties. However, there is no scientific report regardingthe toxic effects of this plant in human cells which may occurfrom its consumption, as well as the mechanisms by which it induces its toxicity. Therefore, the objectiveof the present study was to evaluate in vitrothe genotoxicity and cytotoxicity potential of aqueous extract of E. tirucalliin human leukocytes using comet assay and trypan blue exclusion respectively. In addition, the effect of the aqueous extract of E. tirucalli on osmotic fragility was investigated in human erythrocytes. Furthermore, we evaluated the qRT-PCR expressions of selected antioxidant mRNA genes (SOD2, CAT and GPx4). Our results demonstrated that exposure of E. tirucalli to human leukocytes caused significant increase in DNA damage at the higher concentrations tested (100-150 µg/mL), which was associated with a significant decrease of cellular viability at concentrations 10 to 150 µg/mL. In contrast, E. tirucallidid not induce hemolysis of human erythrocytes at all the concentrations tested. Exposure of E. tirucalli (10-50µg/mL)to human leukocytes significantly up-regulated the mRNA of SOD2 and CAT genes expressions, and significantly decreasedthe mRNA of GPx4 at higher concentrations (100-150 µg/mL). In addition, the mRNA gene expression of SOD2 was down-regulated at the highest concentration tested (150 µg/mL).In summary, based in the results of genotoxicity observed in our study, we recommend caution in the acute or chronic use of thishomemade prepared.Taken together, our results suggest that the extract aqueous of E. tirucalliinduces genotoxicity and cytotoxicity to human leukocytes, possibly by interacting with the antioxidant enzyme system, thereby, increasing the formation of ROSand decreasing the cellular tolerance level to chemical constituents of this plant. Therefore, we recommend caution in the acute or chronic use of this plant.
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Efeitos genotóxicos e citotóxicos ex vivo do antifúngico fluconazol em leucócitos humanos

Silva, Gabriela de Souza da 27 April 2016 (has links)
Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T14:32:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Gabriela de Souza da Silva.pdf: 747981 bytes, checksum: c098f507cfc2f2c6e90b43f8f1a81fec (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T14:32:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Gabriela de Souza da Silva.pdf: 747981 bytes, checksum: c098f507cfc2f2c6e90b43f8f1a81fec (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-22T14:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Gabriela de Souza da Silva.pdf: 747981 bytes, checksum: c098f507cfc2f2c6e90b43f8f1a81fec (MD5) Previous issue date: 2016-04-27 / O fluconazol é um fármaco antifúngico de amplo espectro muito utilizado pela população. Contudo, são poucos os registros na literatura que imputem a segurança do uso do fluconazol e tampouco a dose mínima capaz de induzir lesões no material genético do paciente. Embora a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) exija testes de genotoxicidade para admissão de novos medicamentos, os que têm seu registro expedido antes do ano de 2006 não trazem essa obrigatoriedade, incluindo-se aqui o fluconazol. Portanto, é de extrema importância estudos sobre a avaliação genotoxicológica de fármacos, principalmente os que são tão conhecidos e utilizados como o fluconazol. O presente estudo investigou os efeitos genotóxicos da cápsula e do princípio ativo do fluconazol através do teste cometa e do teste de proliferação celular e também os efeitos citotóxicos da cápsula e do princípio ativo do fluconazol através do teste de viabilidade celular. As concentrações testadas da cápsula e do princípio ativo do fluconazol foram 6, 12, 30, 60 e 120 μg/mL. Todos os ensaios foram realizados em triplicatas e o peróxido foi utilizado como controle positivo e tampão PBS 7,4 como controle negativo. Todas as concentrações testadas da cápsula do Fluconazol (6, 12, 30, 60 e 120 μg/mL) demonstraram ser capazes de interferir negativamente no processo de proliferação celular, diminuindo o número de células proliferadas em todas as concentrações testadas, quando comparadas ao controle negativo. Já no caso do princípio ativo do Fluconazol, apenas as três últimas concentrações (30, 60 e 120 μg/mL) interferiram negativamente no processo de proliferação celular. Na avaliação do índice de dano ao DNA (teste cometa), foi observado dano à estrutura de DNA nas concentrações 60 e 120 μg/mL da cápsula do Fluconazol. Já as concentrações testadas com o princípio ativo do Fluconazol não foi observado dano à estrutura de DNA. Foi verificado que a cápsula do Fluconazol possui atividade citotóxica sobre leucócitos humanos nas duas maiores concentrações testadas (60 e 120 μg/mL) de forma concentração dependente. Porém, o princípio ativo do Fluconazol não demonstrou ser citotóxico nas concentrações testadas (6 12, 30, 60 e 120 μg/mL). / Fluconazole is a broad-spectrum antifungal drug widely used by the population. However, there are few reports in the literature that imput the safety of the use of fluconazole and either the minimum dose capable of inducing lesions in the genetic material of the patient. Although the National Health Surveillance Agency (ANVISA) requires genotoxicity tests for admission of new medicines, which have their registration issued before 2006 do not bring this obligation, including here fluconazole. Therefore, it is extremely important genotoxicológica studies on the evaluation of drugs, especially such that are known and used as fluconazole. This study investigated the genotoxic effects of the capsule and the active principle of fluconazole by the comet test and the cell proliferation test and also the cytotoxic effects of the capsule and the active principle of fluconazole by cell viability test. The tested concentrations of the capsule and the active principle of fluconazole were 6, 12, 30, 60, and 120 mg/mL. All assays were performed in triplicate and peroxide was used as a positive control and PBS buffer as negative control 7.4. All tested concentrations of fluconazole capsule (6, 12, 30, 60 and 120 μg/mL) were capable of induce a negative interference in the cellular proliferation process, reducing the number of proliferating cells at all concentrations tested when compared to the negative control. In the case of the active ingredient, the fluconazole, only the last three concentrations (30, 60, and 120 μg/mL) were able to decrease the cellular proliferation process. In the assessment of DNA damage index (comet assay), there was observed damage of fluconazole capsule on the DNA structure at concentrations 60 and 120 μg/mL. On the other hand, the concentrations tested with the active ingredient of Fluconazole was not observed damage to the DNA structure. Fluconazole has been found that the capsule has a cytotoxic activity on human leukocytes at the two highest concentrations tested (60 and 120 μg/mL) as a concentration-dependent manner. However, the active ingredient of Fluconazole not induced any cytotoxic effect at the concentrations tested (6, 12, 30, 60, and 120 μg/mL).
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Análise in vitro da citotoxicidade em osteoblastos de dispositivos poliméricos incorporados com antimicrobianos para uso local / In vitro analysis of cytotoxicity in osteoblasts of polymer devices incorporated with antimicrobials for local use

Lage, Thais Claudino 08 August 2017 (has links)
Os osteoblastos são células de origem mesenquimal envolvidas na formação óssea. Essas células podem sofrer alterações decorrentes de traumas, intervenções, e infecções. As infecções podem ser minimizadas a partir do uso de antimicrobianos. O poli(L-lactídeo) ou PLLA, é um polímero sintético que se destaca por sua biocompatibilidade e absorção, o qual pode ser utilizado como um liberador farmacológico local, como alternativa à terapêutica antimicrobiana sistêmica. Esse polímero também é empregado como matriz de suporte celular na engenharia de tecidos ósseos, por auxiliar na reparação e regeneração. A incorporação de partículas nesse polímero pode gerar reações adversas, portanto, devemos nos certificar que o dispositivo polimérico incorporado com antimicrobianos não seja citotóxico. Proposição: Analisar a estrutura e a citotoxidade em osteoblastos de dispositivos poliméricos de PLLA incorporados com antimicrobianos, sendo eles: Amoxicilina ou Azitromicina ou Clindamicina ou Metronidazol para uso local. Metodologia: Foram confeccionados 270 dispositivos poliméricos com 6mm de diâmetro composto de PLLA com a incorporação de antimicrobianos a 20%, Amoxicilina (AM) ou Azitromicina (AZ) ou Clindamicina (CL) ou Metronidazol (ME) sendo confeccionados através de dois métodos: eletrofiação (malhas) ou deposição (filmes). Posteriormente, foi realizado o teste de citotoxicidade direta MTT nesses dispositivos com a cultura de osteoblastos em 24, 48 e 72h de experimento. Para análise da estrutura do dispositivo, foram feitas análises macroscópicas através de fotografias digitais e microscópicas com Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV). Resultados: A reação de citotoxidade mostrou que malhas e filmes incorporados à antimicrobianos são compatíveis com a cultura de osteoblastos, não apresentando citotoxicidade em nenhum momento do estudo (p<0.05). Na fotografia pudemos observar que os dispositivos apresentam coloração semelhante em relação às malhas e coloração diferenciada para filmes dependendo do tipo de antimicrobiano incorporado. No MEV, através da análise dos dispositivos pudemos notar que houve diferença no aspecto das superfícies dos filmes, sendo que os filmes de AM apresentaram aspecto irregular e poroso, enquanto AZ aparece liso com alguns grânulos, os de CL e ME possui superfícies ásperas e os de PLLA apresentaram superfície lisa. Quanto às malhas, notamos que todas as amostras apresentaram microfibras e poros que imitam a matriz extracelular, diferenciando-se apenas na espessura das fibras. Houve a presença de osteoblastos em todos os filmes confeccionados, mas os filmes de AM não induziram a proliferação, aparecendo apenas células isoladas. Enquanto nas malhas só foram observados osteoblastos em malhas de AM, ME e PLLA. Conclusão: Os dispositivos poliméricos confeccionados com PLLA incorporados com antimicrobianos podem ser usados na reparação e regeneração óssea uma vez que não apresentaram citotoxicidade em osteoblastos. / Osteoblasts are mesenquima originated cells, which are involved in the bone formation. These cells may suffer alterations due to traumas, interventions and infeccions. The infections can be minimized by the handling of antimicrobials. Poly (L-lactide) or PLLA is a synthetic polymer known for its biocompatibility and absorption, which can be used as a local pharmacological releaser, as an alternative to the systemic antimicrobial therapy. This polymer also can be frequently used as a supporting structure to cellular matrix in the bone tissue engineering as it can be used for support in repair and regeneration. The particle incorporation in this polymer can create side effects, therefore, we need to certificate that the polymeric device incorporated with antimicrobials are not cytotoxic. Proposition: Analyse the structure and cytotoxicity in osteoblasts of PLLA polymeric devices associated with antimicrobials, being them: Amoxicillin, Azithromycin, Clindamycin and Metronidazole. Methods: For this study 270 polymerical devices were manufactured with 6mm diameter of PLLA with a 20% antimicrobials incorporation of Amoxicillin (AM), Azithromycin (AZ), Clindamycin (CL) and Metronidazole (ME) that have been produced through two methods: eletrospinning (mesh) or casting (film). Afterwards a MTT cytotoxicity test was made over the periods of 24, 48 and 72 hours of experiment. To make a structural analysis of the device a macroscopic analysis was performed through photographs and microscopic imaging with scanning electron microscope (SEM). Results: The cytotoxicity reaction exhibited that meshes and films incorporated with antimicrobials are comparable with the osteoblasts culture, indicating that there was no cytotoxicity in any moment (p < 0.05). In the phothograph we could observe that the devices showed a similar coloration among the meshes and different coloration for the films depending on the incorporated antimicrobial. The SEM analysis displayed a difference in the surface appearance of the films. The AM films displayed an irregular and porous appearance, meanwhile, AZ looked smooth with few grains, the CL and ME have rough surfaces and PLLA presents smooth surfaces. As for the meshes, we noticed that all the samples had microfibers and pores that mimic the extracellular matrix, differing only in the thickness of the fibers. Osteoblasts were present in all films but AM did not induce proliferation, with only isolated cells emerging. In meshes osteoblasts were only found in AM, ME and PLLA. Conclusion: Polymeric devices made with PLLA incorporated with antimicrobials can be used in bone repair and regeneration given that they did not offer cytotoxicity for osteoblasts.
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Estudo de novos compostos guanidínicos inibidores da enzima desoxi-hipusina sintase (DHPS) como agentes antiproliferativos e antifúngicos /

Barrios Eguiluz, Alexandra Daniela. January 2018 (has links)
Orientador: Cleslei Fernando Zanelli / Coorientadora: Tatiana Maria de Souza Moreira / Banca: Alexandra Ivo de Mendeiros / Banca: Geisiany Maria de Queiroz-Fernandes / Resumo: O fator de tradução de eucariotos eIF5A é descrito como a única proteína que apresenta o aminoácido hipusina, o qual é gerado por uma modificação pós-traducional essencial para a proliferação celular em todos os eucariotos estudados até o momento, sendo que a enzima desoxi-hipusina sintase (DHPS) é responsável pela primeira etapa da formação desse aminoácido em eIF5A. Portanto, a inibição de DHPS também impede a modificação de eIF5A, tornando esta proteína não funcional, o que pode ter aplicação no tratamento dos tipos de câncer em que o fator está envolvido. Embora N1-guanil-1,7-diamino-heptano (GC7) seja potente inibidor da enzima DHPS, foram observados outros efeitos na célula devido à atuação do composto em alvos não específicos. Desta forma, o presente trabalho tem como objetivo a busca por novos inibidores de DHPS, com baixa citotoxicidade e que reduzam a proliferação celular ou que inibam o crescimento de micro-organismos eucarióticos patogênicos, como algumas espécies de fungos. Primeiramente, foi avaliada a citotoxicidade de diferentes compostos com núcleo guanidínico frente a macrófagos murinos. Entre os compostos testados, aqueles que apresentaram menor citotoxicidade foram o composto GC7 e os compostos de núcleo guanidínico com um grupo fenil substituído em para por uma metila e outro por um flúor. A partir deste resultado, os compostos foram submetidos à avaliação de sua atividade antiproliferativa frente às mesmas células. GC7 promoveu inibição da proliferação c... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Eukaryotic translation factor eIF5A is described as the only protein that presents the amino acid hypusine that is generated by a post-translational modification, which is essential for cell proliferation in all the eukaryotes studied to date. The enzyme deoxyhypusine synthase (DHPS) is responsible for the first stage of formation of this amino acid in eIF5A. Therefore, the inhibition of DHPS also prevents the modification of the eIF5A, making this protein non-functional, which may have application in the treatment of cancer kinds in which this factor is involved. Although N1-guanyl-1,7-diaminoheptane (GC7) is a strong inhibitor of the DHPS enzyme, other effects on the cell were observed due to the acting of the compound on non-specific targets. Thus, the present work aims to search for new DHPS inhibitors, with low cytotoxicity and able to reduce cell proliferation or inhibit the growth of pathogenic eukaryotic microorganisms such as some fungal species. Firstly, the cytotoxicity of different compounds with guanidinic nucleus against murine macrophages was evaluated. Among the compounds tested, those that showed the lowest cytotoxicity were the GC7 compound and the guanidine core compounds with a phenyl group substituted in para for one methyl and another with fluorine. From these data, the antiproliferative activity of the compounds towards the same cells was evaluated. GC7 promoted inhibition of proliferation as already described in the literature, but the compounds tested... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Polysaccharide-based nanoparticles for cancer therapy

Moreira, Inês Maria Pimentel January 2012 (has links)
Tese de Mestrado Integrado. Bioengenharia. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2012
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Desenvolvimento, avaliação da eficácia e segurança de fitocosmético contendo extrato de Psidium guajava L

Chiari, Bruna Galdorfini [UNESP] 14 February 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-14Bitstream added on 2014-06-13T18:50:46Z : No. of bitstreams: 1 chiari_bg_me_arafcf.pdf: 1173668 bytes, checksum: 726d2e7845d81dc66e4154e6890494cc (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O Brasil apresenta a flora mais diversificada do mundo e, por este motivo, os centros de pesquisa brasileiros devem se aproveitar desta riqueza vegetal existente no país para buscar tratamentos alternativos, fazendo com que a população se beneficie deste bem natural. A Cosmetologia atual tem como importante objetivo a prevenção de enfermidades, principalmente as que acometem a pele. Neste contexto, este trabalho teve por objetivo utilizar uma fruta de grande disponibilidade no território brasileiro, a goiaba, para a obtenção de um fitocosmético com atividade antioxidante. Este cosmético visa evitar o envelhecimento precoce da pele e a formação de cânceres cutâneos, ambos causados pelos radicais livres, gerados a partir da radiação ultravioleta proveniente da luz solar, que estamos expostos diariamente. Para isto, foi obtido um extrato da fruta, contendo significativo teor de compostos fenólicos, inclusive flavonóides. Em seguida, foi preparado um fitocosmético estável contendo concentração adequada deste extrato, determinada através da avaliação da atividade antioxidante, citotoxicidade e retenção cutânea do ativo vegetal. Os resultados obtidos mostraram que o extrato etanólico 70° GL apresenta considerável atividade antioxidante, é seguro, e incorporado no fitocosmético desenvolvido, é capaz de ficar retido no estrato córneo, na epiderme e derme / Brazil has the most diversified flora in the world, for this reason, the Brazilian research centers should take advantage of this rich plant species existing in the country to seek alternative treatments, allowing the population to be benefit from this natural patrimony. In addition to substances found in plants for the treatment of serious diseases affecting the population, nature can also offer us substances that could help to prevent these diseases, thus avoiding the suffering of people who might be sick, and even avoiding that the government spends with the treatment of these citizens. The modern Cosmetology has as important objective the prevention of diseases, especially those that involve the skin. In this context, this work aimed to use a fruit widely available in Brazil, called guava, for develop a phytocosmetic with antioxidant activity. This cosmetic is intended to avoid premature aging of the skin, and the formation of skin cancers, both caused by free radicals, generated from the ultraviolet radiation from sunlight, that we are exposed daily. For this, we obtained an extract of the fruit containing significant content of phenolic compounds, including flavonoids. Next, we prepared a stable phytocosmetic containing appropriate concentration of the extract, determined by evaluating the antioxidant activity, cytotoxicity and skin retention of the vegetal active. The results showed that the ethanolic 70º GL extract presents important antioxidant activity, is safe, and when incorporated in the phytocosmetic developed, is able to be retained in the corneum stratum, epidermis and dermis
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Biocompatibilidade de resinas acrílicas para base e reembasamento de próteses após períodos de imersão em soluções desinfetantes: análise do metabolismo celular / Biocompatibility of denture base and reline acrylic resins after immersion in disinfectant solutions periods: cellular metabolism analysis

Masetti, Paula [UNESP] 05 April 2016 (has links)
Submitted by PAULA MASETTI null (paulamasetti@foar.unesp.br) on 2016-05-19T20:53:43Z No. of bitstreams: 1 Tese Corrigida Paula.pdf: 1034060 bytes, checksum: f68e39b40f15f384b00f2c850a864a26 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-23T18:59:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 masetti_p_me_arafo.pdf: 1034060 bytes, checksum: f68e39b40f15f384b00f2c850a864a26 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T18:59:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 masetti_p_me_arafo.pdf: 1034060 bytes, checksum: f68e39b40f15f384b00f2c850a864a26 (MD5) Previous issue date: 2016-04-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito cumulativo das soluções desinfetantes na citotoxicidade de resinas acrílicas para base (Vipi Wave) e reembasamento (Tokuyama Rebase II) de próteses. Corpos de prova com 14 mm de diâmetro e 1,2 mm de espessura foram distribuídos em grupos (n=3) de acordo com o tipo de solução: água destilada, digluconato de clorexidina a 2%, perborato de sódio a 3,8%, hipoclorito de sódio a 0,5% e vinagre de maçã, e de acordo com o tempo de imersão: 0, 1, 3 e 6 meses. Os corpos de prova, tanto de base quanto de reembasamento, ficaram 8 horas imersos nas soluções e 16 horas em água destilada, simulando desinfecção noturna das próteses. As soluções foram trocadas diariamente. Após os diferentes períodos de imersão, as amostras foram colocadas em meio de cultura por 24 horas para obtenção de extratos para análise da citotoxicidade sobre queratinócitos humanos (HaCaT: 0341). O metabolismo celular foi avaliado pelo teste Alamar Blue ®. Empregou-se análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey, com significância de 5%. Os resultados demonstraram que o tipo de resina não teve influência sobre o metabolismo celular. Além disso, a imersão das amostras de resina acrílica para base e reembasamento de próteses em água destilada, perborato de sódio a 3,8% e hipoclorito de sódio a 0,5% não influenciou o metabolismo celular dos queratinócitos, independentemente do tempo de imersão. Os extratos obtidos a partir da imersão das amostras em digluconato de clorexidina a 2% ou em vinagre de maçã durante 3 e 6 meses foram considerados intensamente citotóxicos. Pôde-se concluir que o digluconato de clorexidina a 2% e o vinagre de maça aumentaram citotoxicidade de resinas acrílicas para base e reembasamento de próteses. / The objective of this study was to evaluate the cumulative effect of disinfectant solutions in cytotoxicity base acrylic resins (Vipi Wave) and reline (Tokuyama Rebase II) of dentures. Samples of 14 mm diameter and 1.2 mm thick were distributed in groups (n = 3) according to the type of disinfectant solution: distilled water, 2% chlorhexidine digluconate, 3.8 % sodium perborate, 0.5% sodium hypochlorite and apple vinegar and in accordance with the immersion time: 0, 1, 3 and 6 months. The samples of both base and of reline, eight hours were immersed in solutions and 16 hours in distilled water, simulating night disinfection of prostheses. The solutions were changed daily. After different periods of immersion, the samples were placed in culture medium for 24 hours to obtain extracts for analysis of cytotoxicity on human keratinocyte (HaCaT: 0341). The cellular metabolism was assessed by Alamar Blue ® test. It used analysis of variance (ANOVA) and Tukey test, with 5% significance. The results demonstrated that the resin type had no influence on cellular metabolism. Furthermore, the immersion of the samples in acrylic resin base and reline dentures in distilled water, 3.8% sodium perborate and 0.5% sodium hypochlorite did not influence the cellular metabolism of keratinocytes, regardless of the time of immersion. The extracts obtained from immersing the samples 2% chlorhexidine digluconate or apple vinegar for 3 and 6 months were considered strongly cytotoxic. It was concluded that chlorhexidine digluconate 2% and apple vinegar increased cytotoxicity of denture base and reline acrylic resins.
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Influência da espessura do substrato dental sobre a eficácia clareadora e citotoxicidade de diferentes protocolos de clareamento / Influence of enamel and dentin thicknesses on the esthetic outcome and cytotoxicity of different tooth bleaching protocols

Duque, Carla Caroline de Oliveira [UNESP] 23 March 2016 (has links)
Submitted by CARLA CAROLINE DE OLIVEIRA DUQUE null (carlacoduque@hotmail.com) on 2016-05-19T21:24:16Z No. of bitstreams: 1 Carla corr final 19.05.26 Repositorio Unesp.pdf: 6964321 bytes, checksum: 22480753de2d82fb176b13a6a33d913e (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-23T20:16:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 duque_cco_me_arafo.pdf: 6964321 bytes, checksum: 22480753de2d82fb176b13a6a33d913e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T20:16:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 duque_cco_me_arafo.pdf: 6964321 bytes, checksum: 22480753de2d82fb176b13a6a33d913e (MD5) Previous issue date: 2016-03-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Tem sido demonstrado que a susceptibilidade do complexo dentino-pulpar aos efeitos adversos do clareamento dental apresenta uma relação direta com a espessura de esmalte/dentina do substrato dental. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito estético e biológico de um gel clareador contendo 10% de peróxido de hidrogênio (H2O2) aplicado por diferentes períodos sobre a superfície de discos simulando a espessura de incisivos inferiores (ICI) e pré-molares superiores (PMS). Discos de esmalte/dentina, provenientes de incisivos bovinos, com 2,3 e 4,0 mm de espessura foram adaptados a câmaras pulpares artificiais e distribuídos nos Grupos ICI e PMS, respectivamente. O gel clareador com 10% de H2O2 foi aplicado na superfície de esmalte por 3x15, 1x15 ou 1x5 minutos. Como controle positivo, um gel com 35% de H2O2 aplicado por 3x15 minutos (protocolo tradicional) foi empregado. Nenhum tratamento foi realizado na superfície de esmalte no grupo controle negativo. O meio de cultura em contato com a dentina imediatamente após o clareamento (extrato) foi coletado e aplicado por 1 hora sobre células pulpares humanas. A viabilidade e morfologia celular foram avaliados imediatamente após exposição aos extratos (T1), bem como 72 horas pós-tratamento (T2). O estresse oxidativo e a quantificação do H2O2 nos extratos também foram analisados em T1. A atividade de ALP (atividade de fosfatase alcalina) e deposição de nódulos de mineralização (NM) foram avaliados em períodos de 14 e 21 dias pós-clareamento, respectivamente. De forma a avaliar a eficácia estética dos protocolos testados nas diferentes condições experimentais, mensurou-se ainda a alteração de cor (ΔE) durante seis sessões clareadoras. De uma forma geral, observou-se que todos os protocolos experimentais com gel a 10% de H2O2 promoveram diminuição dos efeitos deletérios promovidos pelo protocolo tradicional. O protocolo 10% 3x15 causou redução significativa na viabilidade celular em relação ao controle negativo no período T1, em ambos os Grupos ICI e PMS, sendo que as células expostas a este protocolo no Grupo ICI não demonstraram capacidade proliferativa em T2. As alterações morfológicas, a intensidade do estresse oxidativo e a redução nos marcadores fenotípicos (ALP e NM) também foram mais intensos para este protocolo nos Grupos ICI e PMS. Para os protocolos 10% 1x15 ou 1x5 minutos, ausência de redução significante na viabilidade celular foi observada, independente da espessura. No entanto, estresse oxidativo significativo foi observado nas células do Grupo ICI. Estes protocolos promoveram redução na atividade de ALP, a qual foi proporcional ao tempo de contato e espessura do substrato dental; entretanto não se observou redução na deposição de NM aos 21 dias. Valores de ΔE similares ao protocolo tradicional foram observados para os protocolos 10% 3x15 e 10% 1x15 no Grupo ICI após 4 e 6 sessões, respectivamente. Para o Grupo PMS, este parâmetro foi atingido apenas para o protocolo 10% 3x15 após 6 sessões clareadoras. Concluiu-se que a espessura do substrato dental influenciou significativamente na citotoxicidade trans-amelodentinária do gel com 10% de H2O2. A aplicação deste gel por períodos de 45 ou 15 minutos sobre discos simulando a espessura de incisivos inferiores minimizou significativamente a toxicidade celular e promoveu clareamento tão efetivo quanto o protocolo tradicionalmente empregado. / The susceptibility of pulp-dentin complex to the adverse effects of tooth bleaching therapies has a direct relationship with the thickness of dental substrate. Therefore, the aim of this study was to assess the biologic and esthetic effect of a 10% hydrogen peroxide (H2O2) bleaching gel applied for different periods onto enamel/dentin discs simulating the thickness of low incisors (LI) and upper pre-molars (PM). Enamel/dentin discs from bovine incisors measuring 2.3 and 4.0 mm were adapted to artificial pulp chambers and distributed into the IC Group (low incisors) and PM Group (upper premolars), respectively. The enamel surface was bleached with a 10% H2O2 gel for 3x15, 1x15 or 1x5 minutes. The 35% H2O2 gel applied for 3x15 minutes was used as positive control (traditional therapy) and no treatment was performed on negative control group. The culture medium immediately after bleaching (extract) was applied for 1 hour on human dental pulp cells. Cell viability and morphology were evaluated immediately after bleaching (T1) and 72 h thereafter (T2). Oxidative stress and the amount of H2O2 in culture medium were also quantified at T1. The ALP activity and mineralized nodule (MN) deposition were assessed 14 and 21 days after bleaching, respectively. The color change (ΔE) of enamel was analyzed throughout six bleaching sessions. Overall, the experimental protocols with the 10% H2O2 gel minimized significantly the negative effects of traditional therapy to cultured pulp cells. The protocol 10% 3x15 promoted significant cell viability reduction in comparison with negative control at T1, in both, IC and PM Groups; however, the cells of IC Group did not feature proliferative capability at T2. The morphologic alterations, oxidative stress intensity and reduction on phenotype markers (ALP and NM) expression were also more intense on IC Group for this bleaching protocol. Regarding the protocols 10% 1x15 and 1x5, no significant cell viability reduction related to negative control was observed regardless of the thickness of dental substrate. Nevertheless, significant oxidative stress was observed on cells from IC Group. These protocols caused significant reduction of ALP activity in comparison to negative control, which intensity being proportional to enamel/dentin thickness; however, no reduction on NM was detected at 21 days post-bleaching. Similar ΔE values as positive control were found for the 10% 3x15 and 1x15 protocol on IC Group after 4 and 6 sessions, respectively. For PM Group, this feature was reached out after 6 bleaching sessions for the 10% 3x15 protocol. It was concluded that the enamel/dentin thickness of dental substrate played a significant role on the trans-enamel and trans-dentinal cytotoxicity of a 10% H2O2 bleaching gel on human dental pulp cells in vitro. Application of gel during 45 or 15 minutes onto thin dental substrate minimizes significantly the cell toxicity in comparison to high concentrated gels (35%) associated with similar esthetic outcome by increasing the number of bleaching sessions. / FAPESP: 2014/07229-6 / CNPq: 442336/2014-4
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Avaliação do potencial antioxidante, citotóxico e fotoprotetor de extratos de Hymenaea courbaril L. e Hymenaea stigonocarpa Mart. ex Hayne

Figueiredo, Patricia Aparecida [UNESP] 04 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-04Bitstream added on 2015-04-09T12:48:23Z : No. of bitstreams: 1 000814136.pdf: 1035774 bytes, checksum: 7e95847eee2ad3cfa1faad7e3020dd1f (MD5) / Hymenaea courbaril e Hymenaea stigonocarpa são plantas medicinais nativas do Brasil. Conhecidas popularmente como “jatobá” são utilizadas largamente na medicina popular para o tratamento de várias enfermidades, tais como problemas respiratórios, inflamações, dores no estômago, e como cicatrizante. Essas espécies apresentam potencial valor terapêutico em virtude da presença de diversos metabólitos secundários como flavonoides e terpenoides. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antioxidante e fotoprotetora dos extratos hidroetanólicos e metanólico de partes vegetais (folhas, frutos casca, polpa e sementes) de H. courbaril e H. stigonocarpa, bem como determinar seu conteúdo de fenóis e flavonoides totais.Além disso, foi avaliado também a citotoxicidade do extrato hidroetanólico da semente de H. coubaril. A atividade antioxidante dos extratos foi realizada pelos testes do seqüestro de radicais livres, usando o DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazil), pelo teste do poder antioxidante de redução do ferro (FRAP) e pelo ensaio da capacidade de absorção do radical oxigênio (ORAC-FL). O teor de fenóis e flavonoides totais foram determinados por métodos espectrofotométricos. A citotoxicidade do extrato hidroetanólico da semente de H. courbaril sobre células de melanoma murino (B16F10-Nex2) foi investigado pelo teste da viabilidade celular utilizando o método de exclusão do corante azul de Tripan. O fator de fotoproteção solar (FPS) foi determinado por método in vitro. Os resultados demonstraram que, exceto os extratos das polpas, todos os extratos de ambas as espécies apresentaram atividade antioxidante para os testes DPPH e FRAP, sendo que o extrato hidroetanólico da semente de H. coubaril apresentou maior atividade antioxidante com EC50=149,43μg/mL para o teste do DPPH e 3073,51±66,73 μM Equivalente Trolox (ET) /g de extrato para o teste FRAP... / Hymenaea courbaril and Hymenaea stigonocarpa are native medicinal plants of Brazil. Popularly known as jatobá-da-mata and jatobá-do-cerrado are widely used in folk medicine to treat various diseases, the different parts of the plants in the form of tea or syrup are used to treat respiratory problems, inflammation, stomach pain, and how healing. These species have potential therapeutic value due to the presence of various secondary metabolites such as flavonoids and terpenoids. Therefore, the objective this study was to evaluate the antioxidant and photoprotective activity of the hydroethanolic and methanolic extracts from plant parts (leaves, fruit rind, pulp and seed) of H. courbaril and H. stigonocarpa, as well as their content of total phenols and flavonoids. Moreover, it was also evaluated the cytotoxicity of the hydroethanolic extract from seeds of H. coubaril.The antioxidant activity of the extracts was performed by free radical scavenging using DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazil), antioxidant power reduction of iron (FRAP) and the Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC-FL) assays. The content of total phenols and flavonoids was determined by spectrophotometric methods. The cytotoxicity of the hydroethanolic extract from seeds of H. coubaril on murine melanoma (B16F10-Nex2) cells was investigated by cell viability test using the Trypan blue dye exclusion method.The sun protection factor (SPF) was determined by in vitro method. The results showed that, except for pulp extracts, all extracts of both species showed antioxidant activity for DPPH and FRAP assays, and the hydroethanolic extract from seeds of H. coubaril presented the highest antioxidant activity with EC50 = 149.43μg/ mL for DPPH assay and 3073.51 ± 66.73 μM Trolox Equivalent (TE)/ g extract for the FRAP assay. The hydroethanolic extract from leaf of H. stigonocarpa showed the highest antioxidant potential (0.56 Trolox...
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Biocompatibilidade de pigmentos e a influência de diferentes métodos de incorporação em propriedades físicas e mecânicas de silicones para próteses bucomaxilofaciais /

Nobrega, Adhara Smith. January 2017 (has links)
Orientador: Marcelo Coelho Goiato / Banca: Adriana Cristina Zavanelli / Banca: Humberto Gennari Filho / Banca: Joel Ferreira Santiago Junior / Banca: Marcela Filié Haddad / Resumo: Uma prótese ideal deve reproduzir as estruturas perdidas nos mínimos detalhes e ser imperceptível em público. Entretanto a natureza do defeito, as habilidades do protesista e os materiais de escolha limitam a beleza da prótese e, consequentemente o seu uso, já que a sua principal função é a recuperação da estética. Sendo assim, cor, forma e textura, são características primordiais que irão determinar o sucesso ou falha da prótese bucomaxilofacial, bem como a sua durabilidade. O presente estudo tem como objetivo analisar a biocompatibilidade de um novo pigmento para coloração de próteses bucomaxilofaciais, bem como a influência dos métodos de incorporação de três pigmentos na estabilidade cromática, absorção e solubilidade, estabilidade dimensional e reprodução de detalhes dos silicones A2 A-2186 e Silastic MDX4-4210. Para a confecção das amostras, foram utilizados dois silicones faciais, três tipos de pigmentos, sendo dois deles específicos para caracterização de próteses bucomaxilofaciais nas cores bronze e preto, e um novo pigmento na cor rosa médio. Para se verificar a biocompatibilidade através dos testes in vitro de citotoxicidade com ensaios de MTT, Alamar Blue e Neutral Red com cultura de células foram confeccionadas 40 amostras, dividas em 8 grupos (n=5), de acordo com o silicone e pigmentos. Já para os testes físicos, foram confeccionadas 200 amostras para cada ensaio, divididas em 20 grupos (n=10), distribuídos de acordo com o tipo de silicone, pigmento adicionado e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: An ideal prosthesis should reproduce the structures lost to the smallest details and be imperceptible in public. However, the nature of the defect, the skills of the prosthodontist and the materials of choice limit the beauty of the prosthesis and consequently its use, since its main function is the recovery of aesthetics. Thus, color, shape and texture are prime characteristics that will determine the success or failure of the bucomaxillofacial prosthesis as well as its durability. The present study aims to analyze the influence of the incorporation of three pigments on the color stability, absorption and solubility, dimensional stability and detail reproduction of the silicones A2 A-2186 and Silastic MDX4-4210, as well as the biocompatibility of a new pigment for staining of buccomaxillofacial prostheses. For the preparation of the samples, two facial silicones, three types of pigments were used, two of them specific for the characterization of bucomaxillofacial prostheses in bronze and black, and a new pigment in the medium pink color. In order to verify biocompatibility through in vitro cytotoxicity tests MTT, Alamar Blue and Neutral Red assays with cell culture, and 40 samples were prepared, divided into 8 groups (n=5), according to the silicon and pigments. For the physical tests, 200 samples were prepared for each test, divided into 20 groups (n=10), distributed according to the type of silicone, pigment added and method of incorporation used (industrial, mechanical or conventional laboratory). The chromatic stability, absorption and solubility, detail reproduction and dimensional stability readings were performed at baseline and at the end of each aging cycle of 252, 504 and 1008 hours. The data were submitted to statistical analysis, using ANOVA (p <.05) and Bonferroni test for biocompatibility and Tukey for physical tests. It was... / Doutor

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