Orientador: Chung Man Chin / Coorientadora: Lídia Moreira Lima / Banca: Wagner Vilegas / Banca: Leoberto Costa Tavares / Resumo: A anemia falciforme é uma anemia hemolítica hereditária crônica devida à herança de um gene para a hemoglobina S, de cada um dos progenitores, e caracteriza-se pela presença de glóbulos vermelhos que, quando privados de oxigênio, tomam a forma de foice. Tem sido relatado que pacientes com anemia falciforme apresentam aumento dos níveis circulantes de citocinas, incluindo fator de necrose tumoral-α (TNF-α). A hidroxiuréia (HU), fármaco citotóxico, é a estratégia terapêutica disponível para o tratamento, e atua como fonte de óxido nítrico beneficiando pacientes por aumentar os níveis de hemoglobina fetal (Hb F), uma hemoglobina geneticamente distinta que evita a polimerização de hemoglobina falciforme desoxigenada. Nesse contexto, dentro de uma linha de pesquisa que visa o planejamento, síntese e avaliação farmacológica de novos candidatos à protótipos de fármacos foram sintetizados uma série de compostos híbridos com propriedades inibidoras de TNF-α e doadoras de óxido nítrico, a fim de explorar eventual sinergismo de ação benéfico ao tratamento da anemia falaciforme.Foram sintetizados seis compostos, dos quais cinco, são derivados nitratos e um sulfonamídico. Os compostos: (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)metil nitrato (composto I); (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)etil nitrato (composto II);3-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto III);4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)-N-hidroxibenzenosulfonamida (composto IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)fenil]etil nitrato (composto VI), foram obtidos utilizando metodologia sintética linear, e obtidos com ótimos rendimentos globais. Todos os compostos apresentam atividade antinflamatória em edema de orelha de camundongo, e propriedades de inibição da infiltração leucocitária. Os compostos arílicos III, IV e V apresentam menor ... / Abstract: The sickle cell disease is a chronicle hereditary hemolitic anemia due to the inheritance of each one of the ancestors, to a gene for the hemoglobina S. It is characterized for the red globule presence that, when private of oxygen, they take the form of a scythe. It has been reported that patient with sickle cell disease present increase the circulating levels of cytokines, including TNF-alpha. The hydroxyurea (HU), a cytotoxic drug, is the mainly available therapeutical strategy for the treatment which acts as nitric oxide source benefiting patient for increasing the levels of fetal hemoglobin (HbF), a kind of hemoglobin that decrease the polimerizaron of hemoglobin S in deoxy state. In this context, inside of a research program that aims at the designing, synthesis and pharmacological evaluation of new drug candidates we synthetized a hybrid compounds series with properties of TNF-alpha inhibition and nitric oxide donors, acting by a sinergic effect that may improve the life quality of sickle cells patients. We had sinthetized six compounds: five nitrates and one sulfonamidic.The compounds : 1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)methyl nitrate (compound I); (1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)ethyl nitrate (compound II); 3-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound III); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)-N-hydroxybenzenesulfonamide (compound IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)phenyl]ethyl nitrate (compound VI), had been synthetized using linear synthetic methodology, with good global yields. All compounds had presented antiinflamatory activity, and white blood cells infiltration inhibition properties. Aryl compounds III, IV and V had presented minor mutagenic effect when comparative to compounds I, II and VI. Compounds IV and VI, showed activity in the assay with erythroid progenitor K562 cells, increasing the genic expr / Mestre

Orientadora: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Geraldo Stachetti Rodrigues / Banca: Thaís Cristina Casimiro Fernandes / Resumo: O herbicida seletivo de maior destaque, desenvolvido na década de 1940, é o ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), uma auxina sintética cujo modo de ação é semelhante ao das auxinas naturais, porém com maior estabilidade na planta e por isso, mais eficaz que o hormônio natural. O uso constante e indiscriminado desta classe de agroquímicos tem causado sérios danos ao meio ambiente. Diante do exposto o presente trabalho objetivou investigar a toxicidade do herbicida 2,4-D comercial DMA 806 BR® utilizando os organismos testes Allium cepa e Tradescantia pallida. Foi intuito ainda comparar os resultados aqui obtidos investigando a formulação comercial com os dados já constantes na literatura que investigaram o princípio ativo do ácido 2,4-diclofenoxiacético para verificar se há interação aditiva e/ou sinérgica entre o ingrediente e as demais substâncias que compõem o produto comercial. Para avaliar a ação do herbicida 2,4-D comercial foram testadas três concentrações, a utilizada em campo, metade e um quarto. Cem sementes de A. cepa foram submetidas à germinação de forma contínua para avaliação da toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade das três concentrações do herbicida testadas. O controle positivo foi feito com o herbicida Trifluralina® (0.95 μL mL-1) e o negativo com água destilada. O ensaio foi conduzido em triplicata. Para avaliar genotoxicidade por meio do teste de micronúcleo com T. pallida, 10 hastes florais jovens com botões fechados, foram coletadas e expostas as três concentrações do 2,4-D comercial por 8 horas, seguidas de 24 horas de recuperação em água destilada sob constante aeração. O mesmo foi feito com controle positivo metil metano sulfonato (7.7 x 10-3 μL ml-1) e controle negativo em água destilada. Foram contabilizadas 3.000 tétrades por tratamento. A distribuição dos dados em relação a normalidade foi realizada com o teste Shapiro-Wilk, o teste paramétrico... / Abstract: The most prominent selective herbicide, developed in the 1940s, is the 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), with an auxin whose mode of action is similar to the natural auxin, but with greater stability in plant and therefore, more effective than the natural hormone. The constant and indiscriminate use of this agrochemical class has caused serious damage to the environment. Given the above the present study aimed to investigate the toxicity of the commercial 2,4-D herbicide DMA 806 BR®, using the Allium cepa and Tradescantia pallida as models. It was still aimed to compare the results obtained by investigating a commercial formulation with data already constants in the literature that investigated the active ingredient (2,4-diclofenoxiacético acid) to check for additive interaction and/or synergic ingredient and other substances contained in the commercial product. Three concentrations of commercial 2,4-D herbicide were tested to assess the toxic potential effects: field concentration, half and a quarter of field concentration. One hundred seeds of A. cepa were subjected to continuously germination for evaluating the toxicity, cytotoxicity and genotoxicity of the three tested concentrations. The positive control was performed with the herbicide Trifluralin® (0.95 μL mL-1) and negative control with distilled water. The experiment was conducted in triplicate. To assess genotoxicity by means of the micronucleus test with T. pallida, 10 young flowers stems with closed buds were collected and exposed to three different concentrations of 2,4-D Commercial for 8 hours, followed by 24 hours recovery in distilled water under constant aeration. The positive control was performed with methyl methane sulfonate positive control (7.7 x 10-3 μL ml-1) and negative control in distilled water. Three thousand tetrads were counted per treatment. Data distribution for normality was performed with the Shapiro-Wilk test, the parametric test was performed... / Mestre

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Gisela de Aragão Umbuzeiro / Banca: Elza Tiemi Sakamoto Hojo / Banca: Daisy Maria Fávero Salvador / Banca: Eliana Aparecida Varanda / Resumo: O etanol obtido da cana-de-açúcar tem sido considerado um combustível alternativo. Entretanto, em países em desenvolvimento, a colheita de cana é realizada manualmente depois da queima, sendo responsável pela emissão sazonal de poluentes atmosféricos. A mutagenicidade dos resíduos de queima de cana (RQCA) e as partículas presentes na ROFA (residual oil fly ash) foram observados nos ensaios de micronúcleo em células sanguíneas de camundongos e de células mãe de grão de pólen de Tradescantia pallida (TRAC-MCN) particulado. O estudo também verificou a citotoxicidade, apoptose e genotoxicidade nas células tratadas com extrato orgânico contendo grande quantidade de HPAs e suspensão na biomassa do período de safra e entressafra. Uma alta freqüência de MN foi observada no TSP do período de safra que na entressafra e a porcentagem de células mortas foi maior em células tratadas com extrato orgânico contendo grande quantidade de HPAs e particulado. Elevada expressão de Bcl-2 e baixa expressão de p53 fosforilado foi verificado em células tratadas com extrato orgânico contendo grande quantidade de HPAs no período de safra e entressafra e em 24 e 48h pós-tratamento. É possível concluir que os HPAs presentes no período de safra e entressafra são genotóxicos e citotóxicos. Políticas públicas deveriam ser discutidas para se buscar alternativas que diminuam a emissão desse poluente. / Abstract: Ethanol obtained from sugar cane has been considered an alternative fuel. However, in developing countries, the handly harvesting is usually done after to sugar cane burning which is responsible for seasonal emission of air pollutants. The genotoxicity of sugar cane burning residues (SCBRs) and particle surrogates of residual oil fly ash (ROFA) were observed in micronuclei (MN) assay in mouse peripheral blood and bone marrow cells as well as in the pollen mother cells of Tradescantia pallida (TRAC-MCN). The study also verified cytotoxicity and genotoxicity of cells treated with polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) and suspension, in harvesting and non-harvesting particulated biomass. Higher frequency of MN was observed in harvesting TSP than non-harvesting and the cell death was higher in cells treated with PHAs in both particulates. Bcl-2 overexpression of p53 phosphorylated low expression was verified in the cells treated with PHAs in harvesting and non-harvesting in 24 and 48 hours after treatment. We can conclude that PHAs presenting in harvesting time, which represents burning sugar cane biomass and non-harvesting time (fuel fossil combustion) are cytotoxic and genotoxic. Public politics should be discussed to found alternatives which could decrease air pollution emissions. / Doutor

Orientador: Regildo Márcio Gonçalves da Silva / Banca: Eutímio Gustavo Fernández Núñez / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Resumo: Hymenaea courbaril e Hymenaea stigonocarpa são plantas medicinais nativas do Brasil. Conhecidas popularmente como "jatobá" são utilizadas largamente na medicina popular para o tratamento de várias enfermidades, tais como problemas respiratórios, inflamações, dores no estômago, e como cicatrizante. Essas espécies apresentam potencial valor terapêutico em virtude da presença de diversos metabólitos secundários como flavonoides e terpenoides. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antioxidante e fotoprotetora dos extratos hidroetanólicos e metanólico de partes vegetais (folhas, frutos casca, polpa e sementes) de H. courbaril e H. stigonocarpa, bem como determinar seu conteúdo de fenóis e flavonoides totais.Além disso, foi avaliado também a citotoxicidade do extrato hidroetanólico da semente de H. coubaril. A atividade antioxidante dos extratos foi realizada pelos testes do seqüestro de radicais livres, usando o DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazil), pelo teste do poder antioxidante de redução do ferro (FRAP) e pelo ensaio da capacidade de absorção do radical oxigênio (ORAC-FL). O teor de fenóis e flavonoides totais foram determinados por métodos espectrofotométricos. A citotoxicidade do extrato hidroetanólico da semente de H. courbaril sobre células de melanoma murino (B16F10-Nex2) foi investigado pelo teste da viabilidade celular utilizando o método de exclusão do corante azul de Tripan. O fator de fotoproteção solar (FPS) foi determinado por método in vitro. Os resultados demonstraram que, exceto os extratos das polpas, todos os extratos de ambas as espécies apresentaram atividade antioxidante para os testes DPPH e FRAP, sendo que o extrato hidroetanólico da semente de H. coubaril apresentou maior atividade antioxidante com EC50=149,43μg/mL para o teste do DPPH e 3073,51±66,73 μM Equivalente Trolox (ET) /g de extrato para o teste FRAP... / Abstract: Hymenaea courbaril and Hymenaea stigonocarpa are native medicinal plants of Brazil. Popularly known as "jatobá-da-mata" and "jatobá-do-cerrado" are widely used in folk medicine to treat various diseases, the different parts of the plants in the form of tea or syrup are used to treat respiratory problems, inflammation, stomach pain, and how healing. These species have potential therapeutic value due to the presence of various secondary metabolites such as flavonoids and terpenoids. Therefore, the objective this study was to evaluate the antioxidant and photoprotective activity of the hydroethanolic and methanolic extracts from plant parts (leaves, fruit rind, pulp and seed) of H. courbaril and H. stigonocarpa, as well as their content of total phenols and flavonoids. Moreover, it was also evaluated the cytotoxicity of the hydroethanolic extract from seeds of H. coubaril.The antioxidant activity of the extracts was performed by free radical scavenging using DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazil), antioxidant power reduction of iron (FRAP) and the Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC-FL) assays. The content of total phenols and flavonoids was determined by spectrophotometric methods. The cytotoxicity of the hydroethanolic extract from seeds of H. coubaril on murine melanoma (B16F10-Nex2) cells was investigated by cell viability test using the Trypan blue dye exclusion method.The sun protection factor (SPF) was determined by in vitro method. The results showed that, except for pulp extracts, all extracts of both species showed antioxidant activity for DPPH and FRAP assays, and the hydroethanolic extract from seeds of H. coubaril presented the highest antioxidant activity with EC50 = 149.43μg/ mL for DPPH assay and 3073.51 ± 66.73 μM Trolox Equivalent (TE)/ g extract for the FRAP assay. The hydroethanolic extract from leaf of H. stigonocarpa showed the highest antioxidant potential (0.56 Trolox... / Mestre

Orientador: Adelino Vieira de Godoy Netto / Co-orientador: Regina Célia Galvão Frem / Banca: Vânia Martins Nogueira / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Rose Maria Carlos / Banca: Sofia Nikolaou / Resumo: Ligantes N,S-doadores, bem como as fenantrolinas, vêm sendo amplamente utilizados na obtenção de complexos de elevada citotoxicidade. Tendo em vista estas propriedades, esses ligantes foram utilizados na síntese de complexos de paládio(II) com a finalidade de obter compostos com atividade antitumoral. A escolha do metal foi baseada na similaridade entre sua química de coordenação e a da platina(II), cujos complexos, como a cisplatina e a carboplatina, são amplamente utilizados como agentes quimioterápicos. Este trabalho apresenta a síntese de 4 ligantes e 23 complexos de Pd(II), dos quais 18 são inéditos. Os complexos 1-4 apresentam fórmula geral [PdX2(tmdmPz)] {X = Cl, Br, I, SCN; tmdmPz = 3,5-dimetil-1-metiltiocarbamoilpirazol}. Os complexos 5-23 são do tipo [PdCl2(NN)] ou [Pd(NN)(L)2]Cl2 {NN = 1,10-fenantrolina (phen), 4,7-dicloro-1,10-fenantrolina (Cl2-phen), dipirido[3,2-a:2'3'-c]fenazina (dppz), 7-metildipirido[3,2-a:2'3'-c]fenazina (CH3-dppz), 7-clorodipirido[3,2-a:2'3'-c]fenazina (Cl-dppz); L = tioureia (tu), N-metiltioureia (mtu), N,N'-dimetiltioureia (dmtu), N-feniltioureia (ftu)}. A caracterização dos compostos foi feita por espectroscopia na região do IV, RMN de 1H e 13C, análise elementar e condutividade. Os complexos preparados tiveram sua citotoxicidade avaliada frente a células tumorais e alguns ensaios foram realizados com o objetivo de avaliar sua possível interação com o DNA e, posteriormente, estabelecer relações estrutura-atividade. Para cada grupo de compostos, testes pertinentes foram realizados. Destacam-se os seguintes experimentos: reação com a guanosina, desenrolamento do DNA, determinação do Kb por espectroscopia UV, deslocamento do brometo de etídio, desnaturação térmica do DNA e coeficiente de partição dos complexos. Os resultados obtidos indicaram que diversos fatores interferem tanto na citotoxicidade quanto na afinidade pelo DNA. Dentre as propriedades mais... / Abstract: The use of N,S-donor ligands, as well as phenanthrolines, has been widely explored in the preparation of complexes with increased cytotoxicity. Thus, these ligands were employed in the synthesis of new palladium(II) complexes with the aim to obtain compounds displaying good antitumor activity. The choice for using this metal was based on the similarity of its coordination chemistry to that of platinum(II) whose compounds, such as cisplatin and carboplatin, are widely used as antitumor agents. This works presents the synthesis of 4 ligands and 23 Pd(II) complexes. Complexes 1-4 have the general formulae [PdX2(tmdmPz)] {X = Cl, Br, I, SCN; tmdmPz = 3,5-dimethyl-1-methylthiocarbamoylpyrazole}. Complexes 5-23 of the type [PdCl2(NN)] or [Pd(NN)(L)2]Cl2 {NN = 1,10-phenanthroline (phen), 4,7-dichloro-1,10-phenanthroline (Cl2-phen), dipyrido[3,2-a:2'3'-c]phenazine (dppz), 7-methyldipyrido[3,2-a:2'3'-c]phenazine (CH3-dppz), 7-chlorodipyrido[3,2-a:2'3'-c]phenazine (Cl-dppz); L = thiourea (tu), N-methylthiourea (mtu), N,N'-dimethylthiourea (dmtu), N-phenilthiourea (ftu)} have been synthesized. These complexes were characterized by IR spectroscopy, 1H and 13C NMR, elemental analysis and molar conductivity. The complexes were tested against tumor cell lines. Some studies have been made aiming at evaluating their possible interaction with DNA and to establish preliminary structure-activity relationships. For each group of compounds selected experiments were made, including: reaction with guanosine, DNA unwinding, Kb determination, bromide ethidium displacement, thermal denaturation of DNA and partition coefficient of the complexes. The results indicated that cytotoxicity and also DNA binding affinity are influenced by several factors such as electronic distribution, hydrophobic effects and stereochemistry. / Doutor

Orientador: Adelino Vieira de Godoy Netto / Co-orientador: Carolina Valério Barra Rocha / Banca: Filipe Vieira Rocha / Banca: Sofia Nikolaou / Resumo: A descoberta das propriedades antitumorais do composto cis - [PtCl 2 (NH 3 ) 2 ], conhecido como cisplatina, colocou o uso de compostos de coordenação em evidên cia nas aplicações medicinais . Desde então, a comunidade cientifica se empenha para encontrar compostos de coordenação que possuam um espectro de atividade mais amplo e que apresentem menos efeitos adversos do que a cispla tina. A escolha do paládio como centro metálico se baseia no fato de possuírem similaridade com a química de coordenação da platina. O trabalho apresenta quatro novos complexos de Pd(II), sintetizados partindo - se do precursor [PdCl 2 (MeCN) 2 ] com o ligante N - Metil - 2 - [4 - (4 - hidróxifenil )butan - 2 - ilideno ]h i drazin a - 1 - carbotioamida ( FMTSC ), trifenilfosfina e os íons Cl -, I -, SCN - e N 3 -, formando assim os complexos [PdCl(FMTSC)(PPh 3 )]Cl ( 1 ), [PdI(FMTSC)(PPh 3 )]Cl ( 2 ), [Pd(SCN)(FMTSC)(PPh 3 )]Cl ( 3 ) e [Pd(N 3 )(FMTSC)(PPh 3 )] ( 4 ). Todos os complexos foram isolados, purificados e caracterizados por análise elementar, espectroscopia vibracional na região do infravermelho, ressonância magnética nuclear de 1D e 2 D, análise termogravimétrica e espectrometria de mass a . Os dados experimentais sugerem que, em todos os casos, a coordenação do ligante FMTSC ocorreu através do átomo de enxofre do grupo tioca r bonil a e pelo nitrogênio azometínico. Os dados de ressonância magnética nuclear para os complexos 1 - 3 apresentam o s inal do hidrogênio hidrazínico, mostrando coordenação com o ligante neutro. Já no complexo 4, a ausência deste sinal mostra a desprotonação do ligante. Em todos os compostos foi confirmada a presença de dois conjuntos de sinais para os núcleos de 1 H e 13 C, indicando a presença de duas espécies em solução (a/b). Os complexos tiveram sua citotoxicidade investigada, in vitro, pelo método do MTT frente linhagem de célul... / Abstract: The discovery of the antitumor properties of the compound cis - [PtCl 2 (NH 3 ) 2 ], known as cisplatin, put in evidence the use of coordination compounds in evidence in medicinal applications. Since then, intense efforts have been undertaken to find coordination compounds that have a broader spectrum of activity with less adverse effects than cisplatin. The choice of palladium as the metal center is based on the fact that it has similarity with the platinum coordination chemistry. This work presents four new complexes of Pd (II), synthesized starting from the precursor [PdCl 2 (MeCN ) 2 ] with ligand N - Methyl - 2 - [4 - (4 - hydroxy - phenyl)butan - 2 - ylidene]hydrazine - 1 - Carbothioamide (FMTSC), triphenylphosphine and the ions (Cl -, I -, SCN - and N 3 - ), thus forming the complex [PdCl(FMTSC)(PPh 3 )]Cl ( 1 ), [PDI(FMTSC)(PPh 3 )] Cl ( 2 ), [Pd(SCN)(FMTSC)(PPh 3 ) ]Cl ( 3 ) and [Pd(N 3 )(FMTSC)(PPh 3 )] ( 4 ). All complexes were isolated, purified and characterized by elemental analysis, infrared vibrational spectroscopy, 1D and 2D nuclear magnetic resonance, thermogravimetric analysis and mass espectrimetry. The e xperiment al data suggest that, in all cases, the FMTSC coordinat es through the sulfur atom of the thiocarbonyl group and the azomethynic nitrogen. Nuclear magnetic resonance spectra for complexes 1 - 3 show the presence of the hydrazinic hydrogen signal, indicating that the ligand behaves as neutral ligand coordination with the neutral ligand. For complex 4, the absence of this signal suggests the deprotonation of the ligand. In all the compounds it was verified the presence of two sets of signals for 1 H and 13 C nucl ei, indicating the existence of two species in solution (a/ b). The in vitro cytotoxicity of the complexes was investigated, by MTT method against line of MCF - 7 tumor cell s - human mammary adenocarcinoma, with promising IC 50 values in the range 0,73 -... / Mestre

Orientador: Luciane Dias de Oliveira / Banca: Marcela Pellegrini Peçanha / Banca: Cristina Pacheco Soares / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Samira Esteves Afonso Camargo / Resumo: No presente estudo foram avaliadas algumas atividades biológicas dos extratos de R. officinalis L. (alecrim) e T. vulgaris L. (tomilho), verificando: I. Atividade antimicrobiana sobre biofilmes monomicrobianos de Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa e associações de C. albicans com cada uma destas bactérias, após determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração microbicida mínima (CMM) sobre culturas planctônicas destes micro-organismos; II. Viabilidade celular sobre macrófagos de camundongo (RAW 264.7), fibroblastos gengivais humanos (FMM-1), linhagem tumoral de carcinoma mamário (MCF-7) e linhagem tumoral de carcinoma cervical (HeLa); III. Atividade antiinflamatória sobre RAW 264.7 estimulada por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli; e IV. Atividade genotóxica. Após verificação da capacidade antimicrobiana dos extratos, por método de microdiluição em caldo, as concentrações mais efetivas foram aplicadas nos demais testes. Sobre os biofilmes mono e polimicrobianos, formados por 48 h em poços de placa de microtitulação, a ação dos extratos foi analisada após exposição de 5 min, com quantificação de UFC/mL e analise de sua viabilidade. Da mesma forma, sobre as linhagens celulares (RAW 264.7, FMM-1, MCF-7 e HeLa), cultivadas por 24 h em placas de microtitulação, os extratos foram analisados com os ensaios de MTT, vermelho neutro (VN) e cristal violeta (CV). Foi analisado o efeito anti-inflamatório dos extratos com ensaio imunoenzimático ELISA, pela quantificação de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-1β). A genotoxicidade dos extratos foi verificada pela frequência de micronúcleos (MN) formados em 1000 células. Os resultados foram analisados por T-Test ou ANOVA e Tukey Test (p ≤ 0,05). Em relação ao extrato de R. officinalis L. foi observada redução significativa de todos os biofilmes após.. / Abstract: his study performed some biological activities of R. officinalis L. (rosemary) and T. vulgaris L. (thyme) extracts, such as: I. Antimicrobial activity on monomicrobial biofilms of Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa and C. albicans association with each of these bacteria, after determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum microbicidal concentration (MMC) on planktonic cultures of these microorganisms; II. Cell viability on mouse macrophages (RAW 264.7), human gingival fibroblasts (FMM-1), human breast carcinoma cells (MCF- 7) and cervical carcinoma cells (HeLa); III. Anti-inflammatory activity on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7; and IV. Genotoxic activity. After checking the antimicrobial capacity of the extracts by broth microdilution method, the most effective concentrations were applied in the other tests. On mono- and polymicrobial biofilms formed by 48 h in microtitre plate wells, the action of the extracts was analyzed after 5 min exposure, with counting of CFU/mL and analysis of their viability. Likewise, in the cell lines (RAW 264.7, FMM-1, MCF-7 and HeLa cells) cultured for 24 h in microtitre plates, the extracts were analyzed by MTT, neutral red (NR) and crystal violet (CV) assays. By ELISA assay, anti-inflammatory effect of the extracts was analyzed with quantification of proinflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β). The genotoxicity of the extracts was verified by the micronuclei frequency (MN) formed in 1000 cells. The results were analyzed by T-Test or ANOVA and Tukey test (p ≤ 0.05). Regarding the R. officinalis L. extract was observed significant reduction of all biofilms after 5 min of exposure, as well as reduction their viability. Additionally, cell viability above 50% to ≤ 50 mg/mL was observed on lineages. The IL-1β level did not change with the concentrations of the extract, but.... / Doutor

Orientador:Marlus Chorilli / Coorientador: Patrícia Bento da Silva / Banca: Luis Alexandre Pedro de Freitas / Banca: Fernando Rogério Pavan / Resumo: A Tuberculose (TB) é mundialmente conhecida como a principal doença infecto-contagiosa de evolução crônica, em que o abandono do tratamento antes do período recomendado tende a ocasionar o desenvolvimento de casos mais graves da doença, gerando o aparecimento de cepas resistentes. O cobre interage com ligantes biologicamente ativos desenvolvendo complexos de cobre(II) com ações antimicrobiana. Carreadores lipídicos nanoestruturados (CLNs) vêm se destacando na área farmacêutica, pois apresentam a capacidade de compartimentalizar, de maneira eficiente fármacos lipofílicos e de modificar suas propriedades e comportamento em meio biológico. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de CLNs acrescidos de complexos de cobre(II) aplicáveis no estudo frente ao Mycobacterium tuberculosis. Foram obtidos 3 complexos de cobre(II), intitulados C1, C2 e C3 que contem o ligante isoniazida e os co-ligantes aniônicos cloreto, tiocianato e cianato, respectivamente. Os CLNs foram obtidos pela técnica de fusão-emulsificação, testando-se diversas formulações por Ultra turrax a 5000 rpm por 10 minutos e por sonicador com amplitude 8% por 20 minutos até a obtenção de CLNs estáveis, que foram constituídos de 3,50% e 0,50 % de poloxamer 407 e brometo de cetrimônio, respectivamente, e de 2,07%, 2,50% e 0,88% de estearato de polioxietileno, triglicérides do ácido cáprico/caprílico e óleo de rícino hidrogenado e etoxilado 40 (F32) ou óleo de rícino (F38), respectivamente. Os complexos de cobre(II) foram incorporados nos CLNs (F32.OE.C1, F32.OE.C2, F32.OE.C3, e F38.OR.C1, F38.OR.C2, F38.OR.C3), e caracterizados por diâmetro hidrodinâmico médio (Dnm), índice de polidispersidade (IPD) e potencial zeta (PZ) por 1, 15, 30, 45 e 60 dias, revelando homogeneidade da dispersão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Tuberculosis (TB) is known worldwide as the leading infectious disease of chronic evolution in which the abandonment of treatment before the recommended period tends to cause the development of more severe disease, such as the appearance of resistant strains. Copper interacts with biologically active ligands developing copper(II) complex with activities antimicrobial. Nanostructured lipid carriers (NLCs) have gained prominence in the pharmaceutical field, since they have the ability to compartmentalize efficiently lipophilic drugs and modify their properties and behavior in the biological environment. The aims of this study was to evaluate the potential of copper(II) complexes-loaded NLCs applicable in the study against Mycobacterium tuberculosis. Copper(II) complexes containing isoniazid binder were obtained and they were entitled C1, C2, and C3 where they have co-binders anionic chloride, cyanate and thiocyanate, respectively. NLCs were obtained by fusion-emulsification technique, formulations were obtained by Ultra turrax at 5000 rpm for 10 minutes followed by sonicator at 8% amplitude for 20 minutes to obtain stable NLCs, those were incorporated of 3.50% and 0.50% to surfactant poloxamer 407 and cetrimonium bromide, respectively, and 2.07%, 2.50% and 0.88% of polyoxyethylene stearate lipids, triglycerides of capric acid/caprylic and ethoxylated hydrogenated castor oil 40 OE (F32) or castor oil (F38), respectively. Copper(II) complexes were incorporated into NLCs (F32.OE.C1, F32.OE.C2, F32.OE.C3 and F38.OR.C1, F38.OR.C2, F38.OR.C3) and characterized by diameter (Dmn), polydispersivity index (PDI) and zeta potential (ZP) for 1, 15, 30, 45 and 60 days, which revealed homogeneous dispersion and excellent physical stability over the same period; the atomic force microscopy confirmed that developed... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Luis Octavio Regasini / Coorientador: Isabel Cristiane da Silva / Banca: Débora Aparecida Pires de Campos Zucari / Banca: Eduardo Borges de Melo / Resumo: Câncer é o nome dado a um conjunto de doenças que têm em comum o crescimento desregulado de células, as quais invadem orgãos e tecidos, resultando no desenvolvimento de tumores. Apesar do tratamento quioterápico contra neoplasias ter se desenvolvido nos últimos anos, ainda se faz necessária a busca por novos agentes antineoplásicos que atuem com maior seletividade contra as células tumorais, a fim de atenuar os efeitos adversos do tratamento. A curcumina é um pigmento amarelo presente no açafrão que possui um amplo espectro de atividades biológicas, destacando-se o seu potencial antineoplásico. O cinamaldeído é a substância responsável pelo odor e sabor da canela e apresenta atividade citotóxica contra várias linhagens tumorais. Assim, o objetivo deste trabalho foi sintetizar e avaliar a citotoxicidade de curcuminoides e híbridos moleculares curcumina-cinamaldeído contra as linhagens celulares humanas de carcinoma de próstata (DU-145), hepatocarcinoma (HepG2), adenocarcinoma de pulmão (A549) e fibroblasto normal de pulmão (MRC-5). Os curcuminoides foram sintetizados pela metodologia de Pabon pela reação entre a acetilacetona e derivados de aldeídos benzoicos com rendimentos entre 47 e 95 %. Os híbridos curcumina-cinamaldeído foram sintetizados pela reação de condensação aldólica entre a benzalacetona e derivados de aldeídos benzoicos, sob catálise básica ou ácida, com rendimentos entre 40 e 98 %. A citotoxicidade das substâncias foi determinada pelo método de Resazurin Microtiter Assay (REMA). O curcuminoide I.25 (3-OH) apresentou a maior potência citotóxica contra as quatro linhagens, com valores de IC50 variando de 28,6 a 34,3 µmol L-1. Além disso, I.25 demonstrou potência citotóxica e IS superiores a curcumina, com destaque para a atividade contra a linhagem A549, a qual exibiu potência três vezes superior a curcumina. Os híbridos... / Abstract: Cancer is the name given to a group of diseases that have in common the poorly adjusted cell growth. These cells invade the organs and tissues, resulting in the development of tumors. Although the treatment against neoplasia have been developed in the last years, there is still the need for searching new antineoplastic agents, that can act with a higher selectivity against the tumoral cells, in order to attenuate the adverse effects of the treatment. The curcumin is a yellow pigment present in the saffron, and has a wide spectra of biological activities, highlighting its antineoplasic potential. The cinnamaldehyde is the compound responsible for the smell and flavor of the cinnamon, and presents cytotoxic activity against many tumoral lineages. The aim of this work was to synthesize and evaluate the cytotoxicity of the curcuminoids and curcumin-cinnamaldehyde hybrids against the human cells lines of prostate cancer (DU-145), hepatocellular carcinoma (HepG2), lung adenocarcinoma (A549) and normal lung fibroblast (MRC-5). The curcuminoids were synthesized via Pabon methodology, through the reaction between the acetylacetone and benzoic aldehydes derivatives with yields between 47 and 95%. The curcumin-cinnamaldehyde hybrids were synthesized through the aldol condensation between the benzalacetone and benzoic aldehydes derivatives, under basic or acid catalysis, with yields between 43 and 98%. The cytotoxicity of the substances was determined by the Resazurin Microtiter Assay (REMA) method. The curcuminoid I.25 (3-OH) showed more cytotoxic potency against the four lines, with IC50 values of varying from 28,6 to 34,3 µmol L-1. Besides, I.25 showed cytotoxic potency and IS values superior to the curcumin, especially for activity against the lineage A549, which showed potency three timmes superior to the curcumin. The curcumin-cinnamaldehyde hybrids II.25 (3-OH) and II.30 (3,4-diOH) ... / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-26T19:16:13Z No. of bitstreams: 1 MarinaSampaioDeMenezesCruz_DISSERT.pdf: 1274699 bytes, checksum: f39afb06729aedccb850680b592f9def (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-28T22:46:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MarinaSampaioDeMenezesCruz_DISSERT.pdf: 1274699 bytes, checksum: f39afb06729aedccb850680b592f9def (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-28T22:46:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarinaSampaioDeMenezesCruz_DISSERT.pdf: 1274699 bytes, checksum: f39afb06729aedccb850680b592f9def (MD5) Previous issue date: 2015-07-30 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Os produtos naturais derivados de plantas servem de mat?ria-prima para a s?ntese de fitoter?picos, sendo amplamente utilizados por v?rias popula??es em todo o mundo. Dentre estes compostos, destacam-se as saponinas e seus metab?litos. Seu intenso uso ? decorrente de suas propriedades bioativas, somado a sua similaridade estrutural a horm?nios. As saponinas derivam-se em sapogeninas, como, por exemplo, a Diosgenina e a Hecogenina. Al?m de serem utilizadas na ind?stria farmac?utica para a produ??o de horm?nios e anti-inflamat?rios esteroidais, estas duas sapogeninas tamb?m s?o empregadas como fitoter?picos, estando presentes tamb?m em vegetais que comp?em a dieta de muitas popula??es. Apesar da vasta utiliza??o destes compostos, existe uma falta de informa??es sobre a toxicidade gen?tica, o que torna o consumo destas sapogeninas um risco para as popula??es. Diante deste contexto, o presente trabalho apresentou como objetivo investigar as potencialidades t?xicas, em n?vel celular e de DNA, da Diosgenina e da Hecogenina. Ensaios em c?lulas HepG2 para a avalia??o da citotoxicidade, genotoxicidade, e mutagenicidade foram realizados. Considerando os resultados obtidos com a Diosgenina, esta sapogenina revelou efeito citot?xico em concentra??es acima de 30 ?M, assim como induziu significativamente incrementos na frequ?ncia de danos no DNA e de micron?cleos. Por outro lado, a Hecogenina somente se revelou citot?xica acima de 150 ?M, por?m em concentra??es abaixo deste valor, foi capaz de induzir danos ao material gen?tico sem promover um aumento na frequ?ncia de micron?cleos. A an?lise do conjunto destes dados sugere que o consumo de alimentos, fitoter?picos ou de medicamentos que contenham a Diosgenina na sua composi??o apresenta um risco maior de toxicidade, quando comparados com as formula??es a base de Hecogenina, uma vez que a Diosgenina apresenta um potencial mutag?nico demonstrado por meio de um aumento significativo na frequ?ncia de micron?cleos que s?o biomarcadores de instabilidade gen?mica. / Natural products derived from plants are used as raw material for the synthesis of phytotherapeutics, and are widely used by many populations around the world. Among these compounds, there are the saponins and its metabolites. Its intense use is due to its bioactive properties, added to its structural similarity to hormones. Saponins derived in sapogenins, as Diosgenin and Hecogenin. Besides its use by pharmaceutical industries to synthesis of steroidal hormones and anti-inflammatories, these two sapogenins are also used as phytotherapeutics, being also present in vegetables from diets of many populations. Despite the widespread use of these compounds, there are a lack of information about their genetic toxicity, which makes the use of these sapogenins a risk. Given this context, the present work aimed to investigate the toxic potential of Diosgenin and Hecogenin, at cellular and DNA level. Assays with HepG2 cells was performed to evaluate the cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity. Considering the results obtained with Diosgenin, that sapogenin showed cytotoxic effects at concentrations higher than 30 ?M, as well as significantly induced increases in frequency of DNA damage and micronucleus. On the other hand, Hecogenin only revealed cytotoxicity above 150 ?M, however, at concentrations below this value, it was able to induce DNA damage without promote an increase in micronucleus frequency. The analysis of these results together suggests that the consumption of foods, phyotheraputics or medicines containing Diosgenin on its composition, presents a higher risk of toxicity when compared with formulations with Hecogenin, since Diosgenin shows a mutagenic potential demonstrated by a significant increase in micronucleus frequency, which are biomarkers of genome instability.