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Evidências de células-tronco na cóclea humana adulta: formação de esferas e presença do marcador de células-tronco ABCG2 / Evidences of stem cells in the human adult cochlea: sphere formation and identification of ABCG2

Bissoli, Milene Massucci 05 October 2016 (has links)
A cóclea humana adulta é reconhecidamente incapaz de se regenerar de modo significativo na prática clínica após uma lesão. Tal fato se explica pela perda da capacidade de proliferação de suas células sensoriais após o período neonatal. Em diferentes espécies de mamíferos neonatos, foi demonstrada a capacidade de proliferação das células sensoriais cocleares através de ensaios de formação de esferas e da presença de marcadores para células-tronco, como o ABCG2. Neste estudo, foram utilizadas cócleas humanas adultas para ensaio de formação de esferas e para a pesquisa do marcador de células-tronco ABCG2 através de citometria de fluxo. As cócleas foram obtidas de pacientes portadores de schwannomas vestibulares submetidos a procedimento cirúrgico para ressecção do tumor via translabiríntica e doadores de órgãos em morte encefálica. Foi possível observar formação de esferas in vitro e identificar o marcador ABCG2 através de citometria de fluxo nas células dissociadas do tecido coclear / The human cochlea is, allegedly, unable to regenerate after trauma due to the loss of the proliferation capacity after the neonatal period. It has been demonstrated in different neonatal mammal species that sensorial cochlear cells retain their proliferation capacity in the neonatal period using sphere-formation assays and stem cell markers such as ABCG2. In the present work, human adult cochleas have been used for sphereformation assay and flow cytometric identification of ABCG2. Human adult cochleas have been removed either from patients undergoing vestibular schwannoma resection via translabyrinthine approach or brain-dead organ donors. There have been identified sphere formation in vitro and the stem cell marker ABCG2 in flow cytometry analysis after cochlear dissociation
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Immobilizing Mutation in an Unconventional Myosin15a Affects not only the Structure of Mechanosensory Stereocilia in the Inner Ear Hair Cells but also their Ionic Conductances

Syam, Diana 01 January 2014 (has links)
In the inner and outer hair cells (OHCs) of the inner ear, an unconventional myosin 15a localizes at the tips of mechanosensory stereocilia and plays an important role in forming and maintaining their normal structure. A missense mutation makes the motor domain of myosin 15a dysfunctional and is responsible for the congenital deafness DFNB3 in humans and deafness and vestibular defects in Shaker-2 (Sh2) mouse model. All hair cells of homozygous Shaker-2 mice (Myo15sh2/sh2) have abnormally short stereocilia, but, only stereocilia of Myo15sh2/sh2OHCs start to degenerate after the first few days of postnatal development and lose filamentous tip links between stereocilia that are crucial for mechanotransduction. The exact mechanisms of this degeneration are unknown even though they may underlie DFNB3 deafness in humans. We hypothesize that structural abnormalities in Myo15sh2/sh2 OHCs may alter the mechanical forces applied to the mechano-electrical transduction (MET) channels resulting in abnormal ionic homeostasis, which may lead to eventual degeneration of Myo15sh2/sh2 OHCs. Therefore, we investigated the ionic conductances and integrity of mechanotransduction apparatus in Myo15sh2/sh2 OHCs. Surprisingly, we found that myosin 15a-deficiency is associated not only with structural abnormalities of OHC stereocilia but also with alterations of voltage-gated ion conductances.
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The role of tryptophan-rich basic protein (WRB) in inner hair cell synaptic transmission and hearing

Panou, Iliana 08 May 2013 (has links)
No description available.
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Ensino de literatura: an?lise da obra o corti?o sob a perspectiva da est?tica da recep??o aplicada aos alunos do 9? ano do ensino fundamental

Lima, Cleidiane Braga 16 December 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-06-02T23:16:19Z No. of bitstreams: 1 CleidianeBragaLima_DISSERT.pdf: 6732550 bytes, checksum: 4c205714d1a48aeba5a8b8ace6547017 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-06-12T21:00:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CleidianeBragaLima_DISSERT.pdf: 6732550 bytes, checksum: 4c205714d1a48aeba5a8b8ace6547017 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T21:00:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CleidianeBragaLima_DISSERT.pdf: 6732550 bytes, checksum: 4c205714d1a48aeba5a8b8ace6547017 (MD5) Previous issue date: 2016-12-16 / Quando pensamos na experi?ncia da leitura, a obra liter?ria seria o artefato que ? oferecido ? consci?ncia de um leitor, o texto liter?rio n?o deve ser uma realidade independente dessa consci?ncia, que sente e percebe os significados de uma forma particular, cont?nua, livre de amarras impostas por delimita??es alheias. A obra liter?ria precisa de seu leitor para percorrer diferentes ?pocas e contextos e existir, de fato. Fazer o autor perder a unidade detentora de sentidos e possibilitar ao texto a liberdade necess?ria para desprender-se dos preceitos estruturalistas e formalistas que - por atribu?rem exclusivamente ? pr?pria textualidade a responsabilidade interpretativa de uma obra, n?o privilegiaram o leitor nessa rela??o - ? o pressuposto levantado pela est?tica da recep??o, corrente contempor?nea da teoria da literatura, escolhida para nortear esta proposta de interven??o. A proposta desta disserta??o ? centrada em utilizar a est?tica da recep??o, aplicada atrav?s de uma sequ?ncia did?tica idealizada por Cosson (2009) junto a uma turma do 9? ano do ensino fundamental em uma escola do munic?pio de Fortaleza, Cear?. Objetivamos valorizar o papel ativo do aluno/ leitor na an?lise e interpreta??o de uma obra fundamental da literatura brasileira que ? O corti?o, de Alu?sio Azevedo. Trata-se de uma pesquisa-a??o, com a abordagem de dados qualitativos propostos por Bogdan e Biklen (1991). A fundamenta??o te?rica recorre ? aplica??o de conceitos de grandes predecessores e estudiosos da teoria receptiva como Barthes (1968), Jauss (1994), Iser (1999), assim como te?ricos que nos auxiliam nas novas formas de compreender o texto liter?rio, como Zilberman (1989), C?ndido (2000), Cosson (2009), Oliveira (2009), Zappone (2009), dentre outros. Ao final de nossa interven??o, observamos que os alunos adquiriram apre?o pela obra lida, tra?aram suas pr?prias impress?es acerca dela e buscaram novas fontes para exercerem uma leitura consciente, al?m de enxergarem sua pr?pria import?ncia na constru??o de significados, livres de julgamentos, n?o apenas em O corti?o, mas tamb?m em leituras vindouras. / When we think of the experience of reading, the literary work would be the artifact that is offered to the consciousness of a reader, the literary text shouldn't be a reality independent of that consciousness, which feels and perceives the meanings in a particular, continuous, imposed by other people's delimitations. The literary work needs its reader to traverse different epochs and contexts and exist, in fact. To make the author lose the sensory unity and allow the text the freedom necessary to detach itself from the structuralist and formalist precepts which - because they attributed exclusively to their own textuality the interpretative responsibility of a work, didn't privilege the reader in this relation - is the presupposition Raised by the aesthetics of the reception, contemporary current of the theory of literature, chosen to guide this proposal of intervention. The proposal of this dissertation is centered in using the reception aesthetics, applied through a didactic sequence idealized by Cosson (2009) next to a class of the 9th year of elementary education in a school in the city of Fortaleza, Cear?. We aim to value the active role of the student / reader in the analysis and interpretation of a fundamental work of Brazilian literature that is O Corti?o, by Alu?sio Azevedo. It is an action research, with the approach of qualitative data proposed by Bogdan and Biklen (1991). The theoretical basis is based on the application of concepts of great predecessors and students of receptive theory such as Barthes (1968), Jauss (1994), Iser (1999), as well as theorists who help us in the new ways of understanding the text Literary, such as Zilberman (1989), Candido (2000), Cosson (2009), Oliveira (2009), Zappone (2009), among others. At the end of our intervention, we observed that the students acquired appreciation for the work they read, drew their own impressions on it, and sought new sources to exercise a conscious reading, as well as seeing their own importance in constructing meanings, free from judgments, not just in O corti?o, but also in readings to come.
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A conexina 26 e sua relação com outras proteínas no órgão de Corti / The connexin 26 and its relationship with other proteins from the organ of Corti

Batissoco, Ana Carla 04 November 2011 (has links)
A causa mais frequente de surdez de herança autossômica recessiva são as mutações no lócus DFNB1, onde estão os genes GJB2 e GJB6. Dentre os indivíduos com deficiência auditiva associada a esse lócus, 10% a 50% apresentam uma única mutação recessiva no gene GJB2, frequência muito superior à esperada em função da frequência de heterozigotos na população geral. Apesar de alguns desses casos terem sido elucidados após a identificação de grandes deleções no gene GJB6 ou nas suas proximidades, a existência de muitos indivíduos com uma única mutação patogênica no gene GJB2 sugere que a haplo-insuficiência nesse gene possa interagir com outras mutações no mesmo gene, no gene GJB6 vizinho, ou até em outros genes. O objetivo desse estudo foi identificar novos alelos patogênicos, novas proteínas e novos genes que interagem com o lócus DFNB1, do ponto de vista molecular e celular, e que possam ser responsáveis por surdez de herança autossômica recessiva. Desse modo, pretendemos contribuir para o esclarecimento da patogênese da surdez de herança autossômica recessiva. Nesse trabalho, três tipos de estudos foram realizados, com metodologias próprias. Na primeira parte, buscamos identificar novos alelos patogênicos no lócus DFNB1 que poderiam ser responsáveis por surdez quando presentes em heterozigose composta com outros alelos patogênicos nos genes GJB2 e GJB6. Foi realizada a análise do DNA de 16 pacientes surdos portadores de uma única mutação patogênica em um desses dois genes por meio: (i) do sequenciamento das regiões codificadora, promotora e doadora de splicing (intron 1) do gene GJB2, (ii) da triagem de uma deleção de 200 kb localizada a 130 kb da proximidade distal da região 5\' do gene GJB6 e (iii) da pesquisa de variações no número de cópias de um ou mais exons dos genes GJB2, GJB6, GJB3 e WFS1 por MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification). Detectamos uma segunda mutação provavelmente patogênica em dois dos 16 pacientes heterozigotos: em um deles, a mutação p.L76P (c.C227T) foi identificada na região de código do gene GJB2 e foi por nós descrita pela primeira vez; no segundo caso, uma duplicação (0,4-1,2Kb) que inclui a região de código do gene GJB2 foi detectada, também inédita na literatura. Na segunda parte, tivemos como objetivo obter um modelo experimental para estudos funcionais in vitro da proteína codificada pelo gene GJB2, a conexina 26, em seu local de expressão que são as células de suporte do órgão de Corti. Padronizamos o cultivo in vitro de células progenitoras do órgão de Corti de camundongos e de cobaias e conseguimos obter a diferenciação in vitro das otoesferas dos camundongos em células que expressam marcadores de células ciliadas (Miosina VIIa e Jagged2) e de células de suporte (p27kip e Jagged1). Por fim, na terceira parte, buscamos por proteínas que interagem com a conexina 26 por meio de ensaios de precipitação por afinidade. Para isso, produzimos clones recombinantes de uma proteína de fusão GST-Cx26 e de uma proteína controle (GST), e realizamos sua expressão in vitro em bactérias E.coli B21. Ensaios de precipitação por afinidade entre a proteína de fusão GST-Cx26 ou GST sozinha e proteínas extraídas de cérebro ou fígado de camundongos foram realizados em diferentes condições. A identificação e a análise das proteínas presentes em bandas de SDS-PAGE, obtidas no ensaio de precipitação com a proteína de fusão GST-Cx26 e ausentes no ensaio com a GST, foram realizadas por espectrometria de massas. Identificamos um total de 49 proteínas candidatas a interagirem com a região C-terminal da Cx26. Realizamos diversas análises in silico e em literatura específica e após exclusão de candidatas por: (i) redundância de representação no ensaio GST-Cx26, (ii) diferença entre a massa molecular esperada e a obtida, (iii) precipitação inespecífica e (iv) localização subcelular incompatível com a conexina 26, selecionamos um total de 22 proteínas candidatas a interagirem com a região C-terminal da conexina 26, para estudos futuros. A confimação da interação entre essas 22 proteínas e a conexina 26 é desejável por meio de estudos de co-localização e imuno-coprecipitação / The most frequent causes of nonsyndromic recessive hearing loss are mutations in locus DFNB1, in the GJB2 and GJB6 genes. Among the individuals with hearing loss with mutations in this locus, 10% to 50% present a single recessive mutation in the GJB2 gene, frequency much higher than expected taking into account the frequency of heterozygotes in the general population. Although some of these cases have been elucidated after the identification of large deletions in GJB6 or its surrounding regions, the existence of many individuals with a single pathogenic mutation in the GJB2 gene suggests that haplo-insufficiency of this gene may interact with other types of mutations in the same gene, in the neighbor gene GJB6, or even in other genes. The aim of this study was to identify new pathogenic alleles, proteins and genes that interact with the locus DFNB1, from the molecular and cellular perspective, and that may be responsible for autosomal recessive deafness. Thus, we aimed to contribute to the understanding of the pathogenesis of autosomal recessive deafness. In this work, three different types of studies were performed, each one with a particular methodology. In the first part, we searched for new pathogenic alleles in the locus DFNB1 that could be responsible for deafness, when present in compound heterozygosis with other pathogenic alleles in GJB2 and GJB6 genes. We performed DNA analysis in samples from 16 deaf patients, carriers of a single pathogenic mutation in one of these two genes by: (i) sequencing the coding, promoter and splice donor (intron 1) regions of the GJB2 gene, (ii) screening for a deletion of 200 kb located 130 kb upstream from GJB6 gene and (iii) investigating copy number variations in of one or more exons of the genes GJB2, GJB6, GJB3 and WFS1 by MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification). We detected a second mutation, probably pathogenic, in two of the 16 heterozygous patients: in one case, the p.L76P (c.C227T) mutation was identified in the coding region of the GJB2 gene and was firstly described by us; in the second case, a novel duplication (0.4 - 1.2 Mb) that includes the coding region of the GJB2 gene was detected. In the second part, our objective was to obtain an experimental model for in vitro functional studies of the protein encoded by the GJB2 gene, connexin 26, in its site of expression, that is, in the supporting cells of the organ of Corti. We standardized the culturing of guinea pigs and mice progenitor cells of organ of Corti. We were also able to induce differentiation of mice\'s otospheres into cells that express markers of hair (myosin VIIa and Jagged2) and supporting cells (p27kip and Jagged1). Finally, we searched for connexin 26 interacting proteins by pull-down assays. Recombinant clones expressing a fusion protein GST-Cx26 and a control protein (GST) were produced, so that in vitro expression in E. coli B21 could be performed. Pull-down experiments, perfomed with fusion protein GST-Cx26 or GST alone, and with proteins from mice brain or liver extracts were done under several different conditions. The identification and analysis of proteins present in SDS-PAGE bands in experiments performed with the fusion protein GST-Cx26, and absent in the GST assay, were performed by mass spectrometry. We identified a total of 49 candidate proteins for interaction with the C-terminal region of Cx26. In silico analyses performed in several databases and search in the literature allowed exclusion of candidates by: (i) redundancy of representation in the GST-Cx26 experiments; (ii) discrepancy between the expected and the obtained molecular weight; (iii) nonspecific precipitation and (iv) subcellular localization incompatible with connexin 26 localization. Summing up, we selected a total of 22 candidate proteins to interact with the C-terminal region of connexin 26. Confirmation of the interaction between these proteins and connexin 26 is planned to be performed by co-localization studies and by immuno-coprecipitation
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Responsabilidade financeira: uma teoria sobre a responsabilidade no âmbito dos tribunais de contas / Responsabilità finanziaria: uma teoria sulla responsabilità nellambito delle Corte dei Conta

Gomes, Emerson Cesar da Silva 24 April 2009 (has links)
A responsabilidade financeira é uma espécie de responsabilidade jurídica existente nos países que adotam o modelo de Tribunais de Contas com função jurisdicional. No Brasil, existem duas modalidades de responsabilidade financeira: a reintegratória, que compreende o ressarcimento do dano causado ao erário (débito) e a sancionatória, que compreende a aplicação de uma multa, que pode ser cumulada ou não com a imputação de débito. É responsabilidade subjetiva que incide sobre um conjunto específico de sujeitos denominados de \"agentes contábeis\". Está vinculada às funções de fiscalização da gestão pública e de julgamento das contas, o que reforça a sua finalidade preventiva e, não somente, reparadora ou punitiva. A responsabilidade financeira tem características, pressupostos e finalidades próprias que a diferenciam de outras espécies de responsabilidade, tais como, a responsabilidade civil, a penal, a disciplinar, a administrativa e a responsabilidade por ato de improbidade administrativa. Os Tribunais de Contas exercem uma jurisdição especial e limitada, relacionada às pretensões do Estado à Responsabilidade Financeira, o que em outros países é denominada jurisdição contábil ou financeira. Esta modalidade de jurisdição é compatível com as demais jurisdições, ainda que se sujeite a eventual controle pelo Poder Judiciário, restrito aos aspectos formais e de manifesta ilegalidade. / La responsabilidad financiera (en España, responsabilidad contable) es una especie de responsabilidad jurídica existente en los países que adoptan el modelo de Tribunales de Cuentas con función jurisdiccional. En Brasil, existen dos modalidades de responsabilidad financiera: la \"reintegratoria\" (o compensatoria), que comprende el resarcimiento del daño causado al erario (débito) y la sancionatoria, que comprende la imposicion de una multa, que puede ser acumulada o no con la imputación del debito. Es responsabilidad subjetiva que incide sobre un conjunto específico de sujetos denominados \"cuentadantes\". Esta vinculada a las funciones de fiscalización de la gestión pública y de enjuiciamiento de las cuentas, lo que refuerza su finalidad preventiva y, no solamente, reparadora o punitiva. La responsabilidad financiera tiene características, presupuestos y finalidades propias que la diferencian de otras especies de responsabilidad, tales como, la responsabilidad civil, la penal, la disciplinar, la administrativa y la responsabilidad por acto de \"improbidade\" administrativa. Los Tribunales de Cuentas ejercen una jurisdicción especial y limitada, desde el punto de vista personal y material, relacionada con las pretensiones del Estado de Responsabilidad Financiera, lo que en otros países se denomina jurisdicción contable o financiera. Esta modalidad de jurisdicción es compatible con las demás jurisdicciones, aunque se sujete a un eventual control por el Poder Judicial, restringido a los aspectos formales y de manifiesta ilegalidad.
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ACF7 DEFICIENCY DOES NOT IMPAIR AUDITORY HAIR CELL DEVELOPMENT OR HEARING FUNCTION

Gilbert, Benjamin Lawrence 21 June 2021 (has links)
No description available.
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Synaptic vesicle recycling investigated by high-resolution microscopy in a conventional and a sensory synapse / Das synaptische Vesikelrecycling untersucht durch hochauflösende Mikroskopie in einer konventionellen und einer sensorischen Synapse

Kamin, Dirk 15 April 2011 (has links)
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