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Ο ακριβής ρόλος των μεταγραφικών παραγόντων AP-1, NF-κB και PPARγ στην καρκινογένεση του παχέος εντέρου δεν είναι πλήρως εξακριβωμένος. Είναι γνωστό ότι ο υποκινητής του γονιδίου cox-2 περιλαμβάνει περιοχές πρόσδεσης των μεταγραφικών παραγόντων AP-1 και NF-κB. ΣΚΟΠΟΣ Με σκοπό την διερεύνηση του ρόλου των AP-1, NF-κB και PPARγ στην καρκινογένεση του παχέος εντέρου, εξετάστηκε η έκφραση των c-FOS, pc-JUN (φωσφορυλιωμένος-ενεργός c-JUN), pIκB-α (φωσφορυλιωμένος IκB-α – δείκτης ενεργοποίησης του μονοπατιού του ΝF-κB), CBP (κοινός μεταγραφικός συνενεργοποιητής των AP-1, NF-κB και PPARγ), EGFR, p53, PPARγ και COX-2, τόσο στον φυσιολογικό εντερικό βλεννογόνο όσο και σε αδενοκαρκινώματα παχέος εντέρου. ΥΛΙΚΟ-ΜΕΘΟΔΟΣ Εφαρμόστηκε ανοσοϊστοχημική μεθοδολογία σε τομές μονιμοποιημένες σε ουδέτερη φορμόλη και εγκλεισμένες σε παραφίνη από 60 ασθενείς με καρκίνο παχέος εντέρου. Για κάθε ασθενή δημιουργήθηκε ένα “μοριακό προφίλ”, τόσο για τα φυσιολογικά επιθηλιακά κύτταρα όσο και για τα καρκινικά. Οι στατιστικές σχέσεις μεταξύ των μεταγραφικών παραγόντων και των γονιδίων-στόχων μελετήθηκαν με την χρήση του Spearman’s rho συντελεστή συσχετίσεως, και έγινε περαιτέρω ανάλυση και επιβεβαίωση των αποτελεσμάτων με την βοήθεια μη-παραμετρικής ανάλυσης Kruskall-Wallis. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ Ο pΙκΒ-α βρέθηκε υπερεκφρασμένος στο 81.7% των αδενοκαρκινωμάτων σε σχέση με το γειτονικό φυσιολογικό επιθήλιο και η έκφρασή του συσχετιζόταν θετικά με την COX-2 (Spearman’s rho = 0.513, P < 0.001). H έκφραση του PPARγ βρέθηκε ελαττωμένη στο 77.3% των αδενοκαρκινωμάτων και παρουσίαζε αρνητική συσχέτιση με την έκφραση της COX-2 (Spearman’s rho = -0.412, P < 0.001) και του pIκB-α (Spearman’s rho = -0.444, P < 0.001). Ο CBP βρέθηκε υπερεκφρασμένος στο 50% των αδενοκαρκινωμάτων σε σχέση με το γειτονικό φυσιολογικό επιθήλιο και η έκφρασή του συσχετιζόταν θετικά με την COX-2 (Spearman’s rho = 0.461, P < 0.001). Οι EGFR και pc-JUN βρέθηκαν υπερεκφρασμένοι στο 41.7% και στο 43.3% των αδενοκαρκινωμάτων, αντίστοιχα, σε σχέση με το γειτονικό φυσιολογικό επιθήλιο και η έκφρασή τους συσχετιζόταν θετικά με την COX-2 (Spearman’s rho = 0.444, P < 0.001 και Spearman’s rho = 0.431, P < 0.001, αντίστοιχα). Επιπλέον, η έκφραση του p53 εμφάνιζε θετική συσχέτιση με την έκφραση της COX-2 (Spearman’s rho = 0.435, P = 0.004). ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ Η ανάλυση των παραπάνω αποτελεσμάτων οδηγεί στο συμπέρασμα ότι η επαγωγή του μονοπατιού EGFR–MAPK–AP-1 και του μονοπατιού του ΝF-κB, καθώς και η ελάττωση της έκφρασης του PPARγ, είναι σημαντικά γεγονότα κατά την διάρκεια της καρκινογένεσης του παχέος εντέρου. Οι σχέσεις μεταξύ των μεταγραφικών παραγόντων AP-1, NF-κB, PPARγ και της COX-2 οδήγησαν στην δημιουργία ενός μοριακού μοντέλου, το οποίο εξηγεί την υπερέκφραση της COX-2 στα αδενοκαρκινώματα του παχέος εντέρου. Η κλινική σημασία αυτού του μοντέλου για την χημειοπροφύλαξη και την θεραπεία του καρκίνου παχέος εντέρου συζητείται διεξοδικά. / The exact role of AP-1, NF-κB and PPARγ in the development of colon cancer remains to be elucidated. Cox-2 promoter contains transcriptional regulatory elements for various transcription factors including AP-1 and NF-κB. OBJECTIVE The present study evaluated the expression of c-FOS, pc-JUN (phosphorylated-active c-JUN), pIκB-α (phosphorylated IκB-α, a signaling intermediate of the NF-κB pathway), CBP (a known AP-1, NF-κB and PPARγ transcriptional coactivator), EGFR, p53, PPARγ and COX-2 in normal colonic epithelial cells and colon adenocarcinoma cells. METHOD Immunohistochemical methodology was performed on formalin-fixed, paraffin-embedded sections from 60 patients with colon adenocarcinomas. A “molecular profile” was created for each patient both for normal colonic epithelial cells and colon adenocarcinoma cells. Relationships between transcription factors and downstream molecular targets were evaluated by Spearman’s rho correlation coefficient and all results were further validated by nonparametric Kruskall-Wallis test. RESULTS pIκB-α was overexpressed in 81.7% of adenocarcinomas as compared to adjacent normal colon and correlated positively with COX-2 (Spearman’s rho = 0.513, P < 0.001). PPARγ was down-regulated in 77.3% of the adenocarcinomas and correlated inversely with COX-2 (Spearman’s rho = -0.412, P = 0.001) and pIκB-α (Spearman’s rho = -0.444, P < 0.001). CBP was induced in 50% of the cases and its expression correlated positively with COX-2 (Spearman’s rho = 0.461, P < 0.001). Induction of EGFR and pc-JUN was detected in 41.7% and 43.3% of the cases, respectively, and their expression correlated positively with COX-2 (Spearman’s rho = 0.444, P < 0.001 and Spearman’s rho = 0.431, P < 0.001, respectively). Moreover, p53 expression correlated positively with COX-2 (Spearman’s rho = 0.435, P = 0.004). CONCLUSIONS The results of this study indicate that activation of the EGFR–MAPK–AP-1 and NF-κB pathways as well as down-regulation of PPARγ expression are important events in colon carcinogenesis. The correlations between AP-1, NF-κB, PPARγ and COX-2 lead to the proposal of a dynamic molecular model that explains COX-2 induction in colon adenocarcinomas. The clinical implications of this model in chemoprevention and treatment of colorectal cancer are thoroughly discussed.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-23Bitstream added on 2014-06-13T18:41:47Z : No. of bitstreams: 1 denardi_ab_dr_jabo.pdf: 758766 bytes, checksum: efc4e6ede867b7e7930b46b41a712f2f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Tendo em vista a relação da ciclooxigenase-2 (COX-2) com a progressão do câncer, este trabalho teve como objetivo investigar a expressão da atividade desta enzima com a imunorreativadade do Ki-67 , P53 e Caspase-3 no diagnóstico e prognóstico de neoplasias mamárias em cadelas. Para a realização deste estudo foram selecionadas 60 amostras de tumores mamários de cadelas. As amostras foram divididas em seis grupos, com 10 tumores em cada grupo, de acordo com a classificação histopatológica. Nos grupos adenoma, carcinoma com prognóstico bom e carcinoma com prognóstico ruim a seleção dos casos se deu pela classificação histológica e evolução clínica do tumor. Os outros 30 tumores foram representados por 10 amostras de carcinoma primário metastático, 10 de metástase pulmonar e 10 de carcinoma inflamatório. A avaliação da expressão da COX-2 (Dako, CX-294), Ki67 (Dako, M7240), P53 (Novocastra, CM1), Caspase-3 (Neomarkers, Asp175) foi conduzida por imunoistoquímica, utilizando-se a técnica de estreptoavidina-biotinaperoxidase. Em relação aos resultados houve correlação da expressão da COX-2 com o índice de proliferação celular Ki-67 no grupo dos adenomas, metástases pulmonares e carcinomas inflamatórios (P<O,05). Em todos os grupos estudados a COX-2 apresentou correlação com a proteína P53 (P<0,01). Observou-se correlação da expressão da ciclooxigenase-2 com a Caspase-3 no grupo dos carcinomas primários metastáticos e nas metástases pulmonares (P<0,05). A expressão da ciclooxigenase-2 variou de acordo com a agressividade das neoplasias mamárias nos casos de adenoma, carcinoma metastático e carcinoma não metastáticos (P<O,05). A sobrevida das pacientes com neoplasias mamária no pós-operatório está ligada à expressão da COX-2, no grupo dos adenomas, carcinoma com prognóstico bom e carcinoma com prognóstico ruim (P<O,01). / Considering the relationship between cyclooxygenase-2 (COX-2) with the cancer evolution, this study aimed to detect the expression of this enzyme with the immunoreactive of Ki-67, P53 and Caspase-3 in the diagnosis and prognostic of mammary neoplasms in bitches. Sixty mammary tumors samples were selected for the accomplishment of this study. The samples were divided into six groups, contenting 10 tumors in each group, in accordance to histopathology classification. In adenoma, good prognosis carcinoma and poor prognosis carcinoma groups the criteria for selection was made by histology classification and clinical tumor evolution. The others 30 tumors samples were represented by 10 samples of metastatic primary carcinoma, 10 of pulmonary metastases, and 10 of inflammatory carcinoma. The evaluation of the COX-2 (Dako, CX-294), Ki-67 (Dako, M7240), P53 (Novocastra, CM1), Caspase-3 (Neomarkers, Asp175) expression was achieved by immunohistochemistry, by means of streptavidine-biotine-peroxidase. About the results a positive correlation between COX-2 and the cellular proliferation index Ki-67 was found in the adenomas, pulmonary metastases, and inflammatory carcinomas groups (P<0,05). In ali studied groups the COX-2 presented correlation with P53 protein (P<O,01). There was correlation of cyclooxygenase-2 with caspase-3 in the primary metastatic carcinoma and in the pulmonary metastases group (P<0,05). The cyclooxygenase-2 expression varied in accordance with aggressiveness of mammary neoplasms in cases such adenoma, metastatic carcinoma, and non metastatic carcinoma (P<0,05). The post operative survival rate of patients with mammary neoplasms was linked to COX-2 expression in the adenomas, good prognosis carcinoma and poor prognosis carcinoma groups (P<O,01).

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1843.pdf: 1192914 bytes, checksum: 124690357d5fd2c475721de4dd0a5c76 (MD5) Previous issue date: 2008-02-27 / Financiadora de Estudos e Projetos / As lesões musculares são bastante comuns na prática esportiva e na reabilitação ortopédica. A terapia laser de baixa intensidade (TBLI) apresenta bons resultados no tratamento de diferentes afecções que acometem o tecido muscular esquelético, entretanto a fluência utilizada neste tratamento ainda é controversa. Este estudo tem como objetivo verificar os efeitos de diferentes fluências do laser de &#955;= 830nm no processo de regeneração muscular. Foram utilizados ratos machos Wistar, distribuídos em 8 grupos de 7 animais cada: grupo controle (C); grupos em que os músculos tibial anterior direito (TAD) foram apenas irradiados com laser diodo (&#955;= 830nm) com fluência de 4J/cm 2 (4J), 8J/cm 2 (8J) e 16J/cm2 (16J); grupo lesão (CL), no qual o músculo foi submetidos à criolesão; grupos em que os músculos TAD foram submetidos à criolesão e tratados com laser diodo (&#955;= 830nm) com fluência de 4J/cm 2 (L6J), 8J/cm 2 (L8J), 16J/cm2 (L16J). A irradiação teve início 24horas após a lesão por 5 dias consecutivos de forma pontual, sobre a área de lesão. No sexto dia após a lesão, os animais foram eutanaziados. O sangue foi coletado para avaliação dos níveis plasmáticos de NOx-, através da técnica de Griess. A avaliação muscular contou com análises histológicas da área de lesão (Hematolina e Eosina e Fosfatase Ácida). Além disso, a atividadade da COX-2 foi analisada pelas técnicas de Biotin Switch e a atividade e expressão protéica de MMP-2 por técnica de Zimografia e Western Blotting, respectivamente. Os resultados mostraram que houve uma diminuição da área de lesão conforme aumento da fluência do laser (8J/cm2 e 16J/cm2); um aumento nos níveis plasmáticos de NOx- em todos grupos lesados e uma diminuição apenas no grupo L16J em relação aos grupos lesados; a COX-2 foi ativada apenas nos grupos CL e L4J; a atividade da MMP-2 aumentou em todos grupos lesados e a expressão protéica aumentou nos grupos L8J e L16J. Conjuntamente os resultados permitem concluir que as fluências de 8J/cm2 e 16J/cm2 foram as que apresentaram um melhor desempenho na TLBI nos processos que envolvem regeneração do músculo esquelético de ratos. Este estudo trouxe dados importantes para o uso clínico, pois confrontou variáveis importantes como o comportamento de diferentes fluências no processo de regeneração muscular, proporcionando verificar um protocolo de aplicação mais seguro e eficaz.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os antiinflamatÃrios podem apresentar efeitos diferenciados quanto a eficÃcia terapÃutica, podendo, alguns serem bons analgÃsicos e outros potentes antiinflamatÃrios. Neste estudo, foram avaliados e comparados os efeitos anti-edematogÃnicos de antiinflamatÃrios nÃo esteroidais seletivos COX-2, lumiracoxibe 5mg/Kg, 30mg/Kg, 100mg/Kg, relativamente seletivos, nimesulida 25mg/Kg, meloxicam 30mg/Kg, nÃo seletivos COX, diclofenaco de sÃdio 20mg/Kg, alÃm dos glicocorticÃides dexametasona (3mg/Kg) e hidrocortisona (4mg/Kg), no clÃssico modelo de edema em pata de rato induzido por carragenina (EPICg). Cada grupo com 4 animais, recebia uma hora antes da injeÃÃo subcutÃnea (s.c) intraplantar do estÃmulo inflamatÃrio a dose referente de cada droga a ser testada, sendo que o grupo-controle recebia soluÃÃo salina 0,9%. ApÃs uma hora da administraÃÃo destas doses, 0,1mL de carragenina a 1% era injetada na pata direita de cada animal. O volume da pata edemasiada foi aferido quatro vezes em intervalos de uma hora, em um pletismÃgrafo digital (Ugo Basile Â).O efeito antiedematogÃnico de cada droga testada foi determinado pela comparaÃÃo dos resultados com o grupo-controle atravÃs do teste ANOVA. Dexametasona (3mg/Kg) e diclofenaco (20mg/Kg) foram as drogas com melhor desempenho, com taxa de reduÃÃo significativa do edema, na 3Â hora, em 94,20% e 84,43%, respectivamente. JÃ o lumiracoxibe, nas trÃs concentraÃÃes utilizadas, 5mg/Kg, 30mg/Kg, 100mg/Kg, obteve efeito significativo na reduÃÃo do edema, com 47,49%, 61,21%, 47,76% respectivamente na 3Â hora. Meloxicam, nimesulida e hidrocortisona tambÃm demonstraram eficiÃncia, com taxas de 42,48%, 62,27% e 58,84%, respectivamente. O presente estudo demonstrou que dexametasona (3mg/Kg) e diclofenaco (20mg/Kg) apresentaram potente aÃÃo antiedematogÃnica e que drogas mais seletivas COX-2 nÃo mostraram eficÃcia comparÃvel ao diclofenaco / The anti-inflammatories might present several efects about de therapeutical efficacy being some powerful antiinflammatories, but others act as excellent analgesics. In this study were observed and compared the anti-edematogenic efects of selective COX-2 non-steroidal antiinflammatories, lumiracoxib 5mg/Kg, 30mg/Kg, 100mg/Kg, relatively selected, nimesulide 25mg/Kg, meloxicam 30mg/Kg, non selective COX, diclofenac 20mg/Kg, yet of the glucocorticoids dexamethasone (3mg/Kg) and hydrocortisone (4mg/Kg), on the classic model of the edema on rat paw induced by carrageenan. Each group of four animals got one hour before the subcutaneous injection (sc) of the inflamatory estimulation the dosage of each drug to be tested, being that the control group received saline solution 0.9%. After one hour of the management of those dosages, 0.1% to 1% of carrageenan was injected in the right paw of each animal. The volume of the edema paw was checked four times in between one hour breaks, in a digital pletismograph (Ugo Basile Â).The antiedematogenic effect of each tested drug was determined by the comparission of the results with the control group through the ANOVA test. Dexamethasone (3mg/Kg) and Diclofenac (20mg/Kg) were the drugs with best performance with significative reduction rate of the edema, on the third hour, in 94.20% and 84.43% respectively. But the lumiracoxib on the three concentrations used, 5mg/Kg, 30mg/Kg, 100mg/Kg got significative effect on the reduction of the edema with 47,49%, 61,21%, 47,76% respectively on the third hour. Meloxicam, nimesulide and hydrocortisone also demonstrated eficiency with rates of 42,48%, 62,27% and 58,84% respectively. The current study demonstrated that dexamethasone (3mg/Kg) and diclofenac (20mg/Kg) presented potencial antiedematogenic action and that more COX-2 selective drugs didnât show eficacy comparable to diclofenac

Einleitung: Die Mucositis enoralis stellt die bedeutendste und schwerwiegendste frühe Nebenwirkung bei der Strahlentherapie fortgeschrittener Kopf-Hals-Tumoren dar. Sie führt häufig zu einer Unterbrechung der Behandlung, mit der Folge einer reduzierten Tumorheilungschance. Des Weiteren wirkt sie sich nachteilig auf die Lebensqualität aus, erhöht das Risiko später Nebenwirkungen und Infektionen und stellt einen erheblichen Kostenfaktor dar. Trotz umfangreicher experimenteller und klinischer Untersuchungen wurde bisher keine allgemein anerkannte Strategie zur Prophylaxe oder Therapie der Mucositis enoralis klinisch etabliert. Die Blockade der Cyclooxygenase-2 (COX-2), welche in einer Reihe von Tumoren überexprimiert wird, wird in der Kombination mit einer Strahlentherapie diskutiert. Außerdem kommen COX-2-Inhibitoren als entzündungshemmende Medikamente therapiebegleitend zum Einsatz. C-Jun und NF-kB p50 sind Transkriptionsfaktoren, die möglicherweise in der Pathogenese der radiogenen Mukositis eine wichtige Rolle spielen. Ziel der Untersuchungen: Ziel der vorliegenden Arbeit ist es, die Wirkung von Celecoxib, einem selektiven COX-2-Inhibitor, auf die Strahlenreaktion der oralen Mukosa (Zellzahl, Epitheldicke) und die epitheliale Expression von c-Jun und NF-kB p50 im etablierten Tiermodell der Schleimhaut der Zungenunterseite der Maus zu untersuchen. So soll festgestellt werden, ob eine Interaktion zwischen den begleitenden Entzündungsreaktionen und der eigentlichen epithelialen Strahlenreaktion besteht. Material und Methoden: In vorangegangenen Untersuchungen wurden die Schnauzen von Mäusen des Stammes C3H/Neu mit 5x3 Gy/Woche über 2 Wochen (Tag 0-4, 7-14) bestrahlt (200 kV Röntgenstrahlung). In einer weiteren Versuchsgruppe erhielten die Tiere täglich an den Tagen 0 bis 13 25 mg/kg/Tag Celecoxib oral per Schlundsonde. Im vierzehntägigen Untersuchungszeitraum wurden täglich jeweils 5 Mäuse je Versuchsgruppe getötet, deren Zungen entnommen und fixiert. In diesem Zustand wurde das Material von der Autorin dieser Arbeit übernommen. Mit Hilfe eines Zählrasters wurden in den vorliegenden Untersuchungen die Zellzahl, die Epitheldicke und die Expression von c-Jun und NF-kB p50 im Epithel der Zungenunterseite der unbehandelten Kontrolle (n = 5), während alleiniger Bestrahlung, sowie nach Bestrahlung und Gabe von Celecoxib manuell erfasst. Aufgrund der geringen Tierzahlen pro Untersuchungszeitpunkt (n = 5) und Versuchsgruppe wurde auf eingehende statistische Analysen verzichtet. Die vorliegende Arbeit beschränkt sich auf eine beschreibende Darstellung des Verlaufs der Einzelparameter über den Gesamtzeitraum. Ergebnisse: Das unbehandelte Epithel besteht aus 402 ± 11 Zellen, wobei 281 ± 8 Zellen der Germinativ- und 121 ± 4 Zellen der funktionellen Schicht angehören. Die Dicke des Gesamtepithels beträgt 68 ± 3 μm. Davon nehmen Germinativ- und Keratinschicht je 15 ± 1 μm und die funktionelle Schicht 38 ± 4 μm ein. Im Kontrollepithel wird c-Jun von 81 % der Zellen der funktionellen und von 80 % der Zellen der Germinativschicht exprimiert, wobei die funktionelle Schicht scheinbar eine größere Färbeintensität aufweist. NF-kB p50 wird von 79 % der Epithelzellen exprimiert, wobei eine stärkere Expression in der Germinativschicht zu beobachten ist. Bei alleiniger fraktionierter Bestrahlung verringert sich die Zellzahl innerhalb der ersten Woche auf 68 % des Kontrollwertes und bleibt anschließend trotz weiterer Bestrahlung weitestgehend konstant. Der größere Anteil an Zellen geht dabei in der funktionellen Schicht verloren. Die Epitheldicke nimmt in der ersten Bestrahlungswoche bis auf 113 % zu und liegt in der folgenden Woche im normalen bis subnormalen Bereich. Die epitheliale c-Jun-Expression nimmt unmittelbar nach Bestrahlungsbeginn zu und liegt anschließend während des gesamten Beobachtungszeitraums über dem Kontrollbereich. Während der gesamten Bestrahlung liegt die Färbeintensität der funktionellen Schicht weiterhin über derer der Germinativschicht. Auch bei NF-kB p50 nimmt die Färbeintensität in der ersten Bestrahlungswoche zu und bleibt anschließend erhöht. Der Anteil NF-kB p50 exprimierender Zellen ist in der Germinativschicht scheinbar größer als in der funktionellen Schicht. Unter zusätzlicher Celecoxibgabe liegen die Zellzahlen vom 6.-12. Tag des Beobachtungszeitraums vermutlich unterhalb derjenigen bei alleiniger Bestrahlung. Dieser Effekt ist besonders innerhalb der Germinativschicht sichtbar. Der Anstieg der Epitheldicke in der ersten Bestrahlungswoche fällt bei zusätzlicher Celecoxibtherapie stärker aus. Im weiteren Verlauf sind kaum Differenzen zu verzeichnen. Die epitheliale Färbeintensität von c-Jun unterscheidet sich kaum von den alleinig bestrahlten Tieren. Bei NF-kB p50 ist dies mit Ausnahme einer scheinbar geringeren Expressionsintensität am 8. und 13. Beobachtungstag ebenso. Schlussfolgerungen: Bei der frühen Strahlenreaktion der Mundschleimhaut werden c-Jun und NF-kB p50 verändert exprimiert. Celecoxib reduziert im Vergleich zur alleinigen Bestrahlung die Zellzahl und verstärkt die Zunahme der Epitheldicke. Es hat keinen Einfluss auf die Expression von c-Jun und NF-kB p50. Somit ist die Regulation der Aktivität von c-Jun und NF-kB p50 unabhängig von der Aktivität von COX-2 erfolgt.

Mémoire en recherche-création / L'arthrose (OA) est la maladie musculosquelettique la plus fréquente au monde et peut affecter toutes les articulations. L’arthrose est caractérisée par la dégradation progressive du cartilage, l’inflammation de la synoviale et le remodelage de l’os sous-chondral. Ces changements sont dus à une augmentation d’expression des médiateurs pro-inflammatoires tels que la cyclooxygénase 2 (COX-2) et de facteurs cataboliques, notamment les métalloprotéinases 1 et 13 (MMP-1 et 13). Les métabolites de la 12-lipoxygénase jouent un rôle important dans de nombreux processus physiologiques et pathologiques. À la suite des réactions d'oxygénation / réduction de la 12 LOX, un facteur eicosanoïde particulier est produit: le 12-HydroxyEicosaTétraÉnoique (12-HETE), dont le rôle dans la pathogenèse de l’OA n’est pas caractérisé. L’objectif de ce travail est de définir le rôle de la 12-HETE dans la régulation des réponses inflammatoires et cataboliques dans les tissus articulaires, chondrocytes et synoviocytes, humains. Nous avons démontré que la 12-HETE n’affecte pas la prolifération (test MTT) des chondrocytes et des synoviocytes et n’a aucun effet sur leur migration (test de rayure). Un traitement avec la 12-HETE augmente l’induction de l’expression de la COX-2 dans les deux types cellulaires. La 12-HETE n’avait aucun effet sur l’expression de la MMP-1 et la MMP-13. La 12-HETE induit ses effets à l’aide d’un récepteur couplé à la protéine G : la GRP31. Nous avons décrit l’arthrose sur des coupes histologiques humaines, puis nous avons observé que l’expression de GPR31 était similaire dans le cartilage dégradé et le cartilage non dégradé. Finalement, nous avons montré que les chondrocytes et les synoviocytes expriment la GPR31 et son niveau est diminué en présence de l’interleukine-1 béta (IL-1β). En conclusion, nous avons démontré que la 12-HETE a des effets divers sur les réponses inflammatoires et cataboliques dans les tissus articulaires : elle augmente l’expression de la cyclooxygénase 2 (COX- 2) et n’a pas d’effet sur l’expression de la MMP-1 et la MMP-13. / Osteoarthritis (OA) is the world's most common musculoskeletal disease and can affect all joints. Osteoarthritis is characterized by progressive degradation of cartilage, inflammation of the synovium and remodelling of the subchondral bone. These changes are due to increased expression of pro-inflammatory mediators such as cyclooxygenase 2 (COX-2) and catabolic factors including metalloproteinases 1 and 13 (MMP-1 and 13). 12-lipoxygenase metabolites play an important role in many physiological and pathological processes. Following the oxygenation/reduction reactions of 12 LOX, a particular eicosanoid factor is produced: 12-HydroxyEicosaTetraenoic (12-HETE), whose role in the pathogenesis of AO is uncharacterized. This work aims to define the role of 12-HydroxyEicosaTetraenoic (12-HETE) in regulating inflammatory and catabolic responses in human joint tissues, chondrocytes and synoviocytes. We have demonstrated that 12-HETE does not affect the proliferation (MTT assay) of chondrocytes and synoviocytes and has no effect on their migration (scratch assay). Treatment with 12-HETE increased the induction of COX-2 expression in both cell types. 12-HETE had no effects on MMP-1 and MMP-13 expression. 12-HETE induces its effects using a G protein-coupled receptor: GRP31. We described osteoarthritis on human histological sections and then observed that GPR31 expression was the same in degraded and non-degraded cartilage. Finally, we showed that chondrocytes and synoviocytes express GPR31 and its level is decreased in the presence of Interleukin-1 beta (IL-1β). In conclusion, we demonstrated that 12-HETE has different effects on inflammatory and catabolic responses in joint tissues by increasing COX-2 expression and has no effect on MMP-1 and MMP-13 expression.

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