This text talks about a family invited to face their family album. To do that, it was considered this time, in which families relation nets are (re) configured and established in another manner. In this way, due to the complexity of this theme, this album was considered as a liquid family album. These facts are pointed in order to cause curiosity about a family album and then reflect about it as a reason for other senses and knowledge as well as a dispositive of conversation in investigations related to education. From this perspective, it was done some inferences about a liquid family album that has among its images/senses/characters a subject with mental disability. This is because the main objective of this study consists in asking about the liquid family configuration and also about the place and non-place of the subject who has the mark mental disability in this relation net. With this investigation, it is proposed the (de) construction of the mark mental disability based on the configuration of the liquid family and the studies about this liquid time (ephemeral, volatile, in bitter (de) construction of concepts, marks, values, tendencies ), described by some scholars, specially by Zygmunt Bauman. Thus, it was talked about something that has been produced, that is product and produces contemporary time. / Este texto disserta a respeito de uma família convidada a um enfrentamento com o seu álbum de família. Para isso, levou-se em consideração este tempo, em que as redes de relações familiares (re) configuram-se e se estabelecem de outra maneira. Sendo assim, devido à complexidade dessa temática, considerou-se esse álbum como sendo um álbum de família líquida. Esses elementos são considerados a fim de curiosear um álbum de família, e, assim, problematizá-lo como disparador de sentidos outros e de conhecimento, bem como um dispositivo de conversação na investigação em educação. A partir dessa perspectiva, fizeram-se algumas inferências acerca de um álbum de família líquida que tem, dentre as/os suas/seus imagens/sentidos/personagens, um sujeito que carrega a marca deficiência mental. Isso porque, o propósito deste estudo consiste em se perguntar sobre a configuração de família líquida e o lugar ou não-lugar do sujeito que carrega a marca deficiência mental nesta rede de relações. Com esta investigação, propõe-se a (des) construção da marca deficiência mental, tendo em vista a configuração de família líquida e os estudos sobre este tempo líquido (efêmero, volátil, em crônica (des) construção de conceitos, marcas, valores, tendências...), descrito por alguns teóricos, especialmente por Zygmunt Bauman. Desse modo, dissertou-se acerca de algo que está sendo produzido, é produto e produz a contemporaneidade.

Orientador: Maria Filomena Gregori / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Filosofia e Ciências Humanas / Made available in DSpace on 2018-08-24T12:16:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simoes_Julian_M.pdf: 2033136 bytes, checksum: f09ac501f60bfdf63206f849ffee19ed (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Deficiente ou não o corpo carrega marcas sociais e culturais apreendidas em processos de interação. Vista por este ângulo, o empreendimento investigativo por mim realizado se divide em três eixos analíticos. No primeiro eixo busco reconstituir a disputa conceitual sobre os termos "deficiência" e "deficiência intelectual". A proposta é pensar os deslizamentos semânticos do conceito e as implicações políticas dessas transformações. No segundo eixo procuro analisar os discursos dos professores, técnicos especialistas e funcionários da APAE de Vila de Santa Rita, bem como os prontuários de atendimento dos matriculados. O Objetivo é compreender como é formulada a noção de "deficiência" e de "deficiência intelectual", a fim de reconhecer quais categorias operam e como elas ganham significado na instituição. Ainda são analisadas as implicações dessas categorias no modo como é entendida, mas também como é tratada, a sexualidade dos alunos matriculados na APAE. No terceiro eixo o intuito é evidenciar como a "deficiência intelectual" é percebida pelos alunos da APAE e quais as categorias operam na construção do desejo afetivo e sexual destes. Dessa maneira, proponho descontruir tanto a imagem de sujeito anormal como a imagem de uma sexualidade descontrolada associada aos alunos com deficiência intelectual / Abstract: Disabled or not the body carries social and cultural brands seized in interaction processes. Viewed from this angle, this investigative project I conducted is divided into three analytical axes. In the first point I seek to reconstruct the conceptual dispute over the terms "disability" and "intellectual disability". The proposal is to think the semantic slips of the concept and policy implications of these transformations. In the second axis I analyze the discourses of teachers, technical specialists and employees of APAE in Vila de Santa Rita, as well as the medical charts of the enrolled. The goal is to understand how it is formulated the concept of "disability" and "intellectual disability" in order to recognize which categories they operate and how they acquire meaning in the institution. Are further analyzed the implications of these categories in the way it is understood, but also how it is treated, the sexuality of students enrolled in APAE. The third axis the intent is to show how "intellectual disability" is perceived by students of APAE and which categories operate in the construction of these affective and sexual desire. Thus, I propose to deconstruct the image of abnormal subject as well as the image of an uncontrolled sexuality associated with students with intellectual disabilities / Mestrado / Antropologia Social / Mestre em Antropologia Social

Made available in DSpace on 2017-06-01T18:08:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernando Goes.pdf: 1760346 bytes, checksum: ed153f6a29c7b96797727f151d7498fc (MD5) Previous issue date: 2004-03-18 / The aim of this research was to study psychic presentations in father and/or mother of holder child of special necessities mentally disability, and consequently feelings of rejection/acceptance experienced by those parents, in those cases. Specificly, were analysed the conscious and unconscious behaviors and affections of parents related to those psychics presentations, among which, highlight: the wish of death, the feeling of guilty, the feeling of inferiority, the wish(and behaviors) of remedy and the refusal of reality (negation/disavowal), that were collected in the interviews did with the parents. The Theory of Psycho-analysis gave the opportunity to theoretical grounding to this study, being the parents speech analysed by psycho-analysis interpretation. After the analyse of different psychic presentations related to affections, already mentioned, it was possible to make up an ample point of view about the parents psychic conflict and to establish that it occurs an alternate movement of different psychic presentations, alternating acceptance/rejection about the child with special necessities. Those psychic presentations about the son with mentally disability are welcome in Ego in each one of parents, by three different ways: such as refusal (through defense mechanisms: Verneinung and Verleugnung ); such as a thing (that it isn t possible to say in words Unheimlich ); and such an appropriated establishment of reality, in other words, like holding mentally disability. It notices a dynamic with feedback, constant expression that alternate movement around the parent s rejection/acceptance about their child. It hopes this research gives theoretical support and pratical informations to professionals that do treatments to mentally disabled person and his family / Esta pesquisa teve por objetivo estudar as representações psíquicas no pai e/ou na mãe do filho portador de necessidades especiais - deficiência mental, e os conseqüentes sentimentos de rejeição/aceitação experimentados por esses pais, nesses casos. Foram analisados, especificamente, os afetos e os comportamentos conscientes e inconscientes dos pais, relacionados a essas representações, dentre os quais, assinalaram-se: o desejo de morte, o sentimento de culpa, o sentimento de inferioridade, as demandas de reparação e a negação (recusa da realidade), que foram colhidas nas entrevistas realizadas com os pais. A Teoria Psicanalítica proporcionou a fundamentação teórica para este estudo, sendo o discurso dos pais analisado com base na interpretação psicanalítica. Após a análise das diversas representações psíquicas relacionadas aos afetos já mencionados, foi possível compor uma visão ampla do conflito psíquico dos pais e constatar que ocorre um movimento de báscula, alternando aceitação/rejeição do filho portador de deficiência mental. Essas representações do filho deficiente são acolhidas no Ego de cada um dos pais, de três formas diferentes, a saber: como negado (através dos mecanismos de defesa: Verneinung e Verleugnung); como uma coisa inominável (Unheimlich); e como uma constatação adequada da realidade, ou seja, como portando deficiência mental. Verificou-se uma dinâmica com retroalimentação, expressão constante desse movimento de báscula em torno da rejeição/aceitação dos pais em relação ao seu filho. É esperado que esta pesquisa venha proporcionar suporte teórico e informações práticas aos profissionais que realizam atendimentos destinados à pessoa deficiente mental e à sua família

As alterações cromossômicas estruturais associadas a fenótipos clínicos oferecem a oportunidade de identificação de genes cujas mutações possam estar determinando essas patologias, tendo em vista a possibilidade de que esses genes podem ter sido alterados pelas quebras ou ter o número de cópias modificado. Um número cada vez maior de evidências aponta para a participação de certas seqüências do genoma na formação de rearranjos cromossômicos recorrentes e não recorrentes. Neste trabalho, estudamos duas deleções cromossômicas detectadas em indivíduos com retardo mental associado a sinais clínicos. O objetivo foi determinar que mecanismos originaram esses rearranjos e como a perda ou quebra dos segmentos cromossômicos está relacionada com o fenótipo dos portadores. A caracterização das seqüências nos pontos de quebra e junção desses rearranjos é fundamental para a compreensão dos mecanismos de formação das alterações cromossômicas. A delimitação precisa dos segmentos deletados é necessária para a correlação com o quadro clínico. Para isso, este trabalho aliou o estudo cromossômico por hibridação in situ fluorescente (FISH) à análise do DNA. / Structural chromosomal alterations related to clinical phenotypes bring the opportunity to identify gene mutations determining the pathologies, because the causative genes may have been disrupted by the breaks or may have an altered number of copies. The delimitation of the segments involved in the chromosomal rearrangements is necessary for these genotype-phenotype correlations. The characterization of breakpoint and junction sequences in these chromosome alterations enables the identification of mechanisms originating them, and evidence has been produced pointing to the participation of particular genomic sequences in their formation. In this work, we studied two chromosomal deletions in patients with syndromic mental retardation, combining chromosomal analysis by fluorescent in situ hybridization (FISH) to DNA analysis. Our aim was to determine the mechanisms that originated these aberrations and how they were involved with the clinical phenotypes.

Orientador: Anna Augusta Sampaio de Oliveira / Banca: Sadao Omote / Banca: Regina Celia Alegro / Resumo: Segundo estatística do Ministério da Educação e Cultura (BRASIL, 2006), de 1998 a 2005, foram registradas 218.320 novas matrículas inclusivas nas escolas regulares, sendo 65,4% somente no Ensino Fundamental. Considerando que o mesmo quadro estatístico aponta que 43,4% destas matrículas são de alunos com deficiência intelectual, propomos a análise da dinâmica estabelecida no interior das escolas regulares, particularmente nas aulas de História, a partir do momento em que esses alunos começam a fazer parte do contexto escolar. O estudo teve como objetivo específico a busca em compreendermos qual seria a concepção de êxito no ensino de História para esses alunos. Frente ao objetivo, realizamos entrevistas com todos os 14 (quatorze) alunos com deficiência intelectual matriculados entre 5ª e 8ª série do Ensino Fundamental de uma Diretoria Regional de Ensino no interior do Estado de São Paulo, bem como seus respectivos professores de História. O resultado da coleta e análise de dados, estudados quantitativa e qualitativamente através da Análise Social Discursiva, demonstrou que a dinâmica do ensino não apresenta mudanças quando da presença desses alunos, mas promove uma constante busca por ferramentas capazes de adequá-los às características de uma educação que demonstrou-se essencialmente bancária (FREIRE, 2005). Reconhecendo a inexistência de tais ferramentas de controle e sujeição, percebemos finalmente que a inclusão escolar destes apresenta dois grandes potenciais: a inauguração de uma nova forma de exclusão social em que alunos estarão inseridos em espaços que sutilmente desconsiderarão a sua presença, ou a provocação de uma completa revisão dos objetivos da escola. / Abstract: According to statistics of the Ministry of Education and Culture (BRASIL, 2006), from 1998 to 2005, there has been registered 218,320 new inclusive school registrations in the regular schools, being 65.4% only in Basic School. Considering that the same statistical picture points that 43.4% of these school registrations are of pupils with intellectual deficiency, we consider the analysis of the dynamics established in the interior of the regular schools, particularly in the lessons of History, from the moment when these pupils start to be part of the school context. The study had as specific goal the search in understanding what would be the conception of success in the education of History for these pupils. Front to the objective, we carried through interviews with all the 14 (fourteen) pupils with intellectual deficiency registered between 5ª and 8ª grades of Basic School of a Regional Direction of Education in the countryside of the State of São Paulo, as well as their respective History teachers. The result of the collection and analysis of data, studied quantitatively and qualitatively through the Discursive Social Analysis, demonstrated that the dynamics of education does not present changes when of the presence of these pupils, but promotes a constant search for tools capable to adjust them to the characteristics of an education that demonstrated essentially bankwise (FREIRE, 2005). Recognizing the inexistence of such tools of control and subjection, we realize finally that the school inclusion presents two great potentials: inauguration of a new form of social exclusion, where pupils will be inserted in spaces that will subtly not consider their presence, or the provocation of a complete revision of the objectives of the school. / Mestre

A presente pesquisa teve como um dos objetivos contribuir para os estudos sobre a prática dos professores diante do desafio de trabalhar com as diferenças nas salas de aula regulares, tendo como foco o trabalho com alunos com deficiência intelectual e como cenário, a implementação de políticas públicas favoráveis à educação inclusiva. A pesquisa, de caráter qualitativo, além de contar com dados das entrevistas realizadas com professores do ensino fundamental II de uma escola da rede pública do município de São Paulo, recomendada por um CEFAI (Centro de Formação e Acompanhamento à Inclusão), considerou dados coletados na observação da escola. Partiu-se da hipótese de que o professor constrói e reconstrói continuamente um patrimônio pedagógico conjunto de saberes e representações - ao longo de sua trajetória profissional, utilizando saberes diferenciados e estruturados no interior de uma certa cultura escolar. O objetivo da pesquisa foi identificar e analisar as características do patrimônio pedagógico de um grupo de professores de uma das salas da referida escola, da qual era aluno um menino com deficiência intelectual, e também do coordenador pedagógico responsável pelo ciclo II da escola. A análise de dados levou em conta o conceito de cultura escolar enunciado por Dominique Julia e complementado por Antonio Viñao Frago e também a tipologia dos saberes docentes elaborada por Maurice Tardif e Claude Lessard. O conceito de diferença foi apresentado a partir de reflexões de Goffman (2008), Cury (2002,2005), Silva (2009) e Skliar (2006), que procuram problematizar as relações entre igualdade-diferença/ identidade-diferença. Para analisar as representações referentes à possibilidade de trabalhar com alunos com deficiência intelectual na sala de aula, foi usada a reflexão proposta por Henri Lefebvre, segundo a qual as representações, apesar de serem elaboradas em sociedade, poderiam ser superadas pelos sujeitos. A análise foi organizada em três eixos temáticos relacionados à construção do patrimônio pedagógico: a trajetória pessoal de cada sujeito da pesquisa, os saberes docentes e as representações sobre a possibilidade de se realizar um trabalho pedagógico com alunos com deficiência intelectual na sala regular e as questões institucionais que também incidiriam sobre essa construção. A análise apontou alguns caminhos: a trajetória pessoal, sobretudo o tempo de trabalho na mesma instituição e o envolvimento na construção do seu projeto político pedagógico podem colaborar para uma prática mais eficiente em relação aos alunos com deficiência intelectual; a superação de representações sobre a impossibilidade de um trabalho educacional com esses alunos pode advir do saber experiencial e daquilo que Henri Lefebvre chama de vivido; e finalmente, esta pesquisa apontou para a importância do compartilhamento de patrimônios, que poderia ocorrer nos momentos de reuniões pedagógicas, mas que por questões institucionais nem sempre acontece de forma efetiva e producente. / This research aimed to contribute to studies on the practice of teachers facing the challenge of working with differences in regular classrooms, with focus on working with intellectual disability students, and the implementation of public policies for inclusive education as a backdrop. This qualitative research considered the data collected in the observation and from interviews with elementary school (cycle II) teachers of a public school in São Paulo, recommended by a CEFAI (Centre for Training and Monitoring to Inclusion). The hypothesis was that the teacher builds and continuously rebuilds a pedagogical heritage a set of knowledge and representations - throughout his professional career, using different and structured knowledge within a certain school culture. The objective of the research was to identify and analyze the features of the pedagogical heritage of a group of teachers from one class of the school, in which there were an intellectual disability student, and also the pedagogical coordinator responsible for the elementary school (cycle II). Data analysis took into account the concept of school culture enunciated by Dominique Julia and complemented by Antonio Viñao Frago, and also the typology of knowledge teaching developed by Maurice Tardif and Claude Lessard. The concept of difference was presented from reflections of Goffman (2008), Cury (2002, 2005), Silva (2009), and Skliar (2006), seeking to discuss the relationship between equality-difference/identity-difference. To analyze the representations regarding the possibility of working with students with intellectual disabilities students in the classroom, it was used the reflection proposed by Henri Lefebvre, according to which the representations, despite being prepared in society, could be overcome by the subjects. The analysis was organized into three themes related to the construction of the pedagogical heritage: the personal history of each subject of research, the teaching knowledge and representations about the possibility of developing a pedagogical work with intellectual disability students in regular class, and the institutional issues, that also had been part of this construction. The analysis pointed out some ways: the personal history, specially the working time at the same institution and involvement in shaping their political pedagogical project may contribute to a more efficient practice related to intellectual disabilities students; the overcoming of the representations about the impossibility of an educational work with these students may come from the practical knowledge and from what Henri Lefebvre calls lived; and finally, this research pointed to the importance of sharing heritage, which could occur in pedagogical meetings, but for institutional issues not always happen in an effective and productive manner.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:37:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigo Pereira DOnofrio.pdf: 430951 bytes, checksum: f36788577a3f6671901b039c26cddf12 (MD5) Previous issue date: 2010-11-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / While treating a patient diagnosed with light mental deficiency, I try to make a theoretical-clinical reflection aiming to understand the peculiarities of the clinic for this kind of patient. My first contact with this kind of patient was through SORRI- São José dos Campos, where I started my quest in this very special clinic. My Aim was to understand the subjectivity of patients with this diagnosis and to create possible clinical interventions. To achieve it a theoretical study about the influence of family bonds of children with light mental deficiency and their consequences on these children s emotional development was necessary. Based on the theories of D. W. Winnicott about mental growth and of Maud Mannoni about children with mental deficiency, I was able to create actings based on the fact that this clinic is related not only to the patients but also to their families which are deeply hurt by the pain of having a person with this diagnosis within them / Por meio de um atendimento de um paciente diagnosticado como deficiência mental leve, procuro realizar uma reflexão teórico-clínica, buscando compreender as peculiaridades da clínica com esse tipo de paciente. Foi a partir dos encaminhamentos da SORRI- São José dos Campos que tive o contato com esses pacientes, iniciando meu percurso e minhas questões sobre essa clínica tão peculiar. Tendo como objetivo compreender a subjetividade dos pacientes com esse diagnóstico e formular as possíveis intervenções clínicas, se fez necessário um estudo teórico que abordasse a influência dos vínculos familiares de uma criança com deficiência mental leve e as consequências destes para o seu desenvolvimento emocional. Através das teorias de D. W. Winnicott sobre o amadurecimento e de Maud Mannoni sobre a criança com deficiência, pude elaborar algumas formas de atuação a partir da compreensão da maneira como essa clínica envolve não apenas o paciente em questão como também sua família, tão atingida pela dor ao ter em seu seio uma pessoa com esse diagnóstico

Em trabalho anterior, identificamos a mutação c.382C8594;T no gene UBE2A, localizado em Xq24 e codificador de enzima conjugadora de ubiquitina, como causa de nova síndrome de deficiência mental (DM) de herança ligada ao cromossomo X. Foi a primeira descrição de mutação nesse gene e a primeira associação de mutação em gene que codifica conjugase de ubiquitina com patologia humana. Neste trabalho, focalizamos o gene UBE2A quanto a expressão dos transcritos alternativos, função das isoformas por eles codificadas e o efeito da mutação c.382C 8594; T como causa de deficiência mental (DM). No Capítulo I, revisamos os aspectos genéticos da DM, dando ênfase à herança ligada ao cromossomo X, principal causa de DM herdada e resumimos o estudo que levou à identificação da mutação em UBE2A como causa de quadro sindrômico de DM. Revisamos o papel da via de ubiquitinação de proteínas e das enzimas que participam do processo, em especial as conjugases de ubiquitina. Levantamos evidências na literatura que não deixam dúvida sobre a importância da via de ubiquitinação no sistema nervoso, tanto em processos de neurodesenvolvimento como neurodegeneração. No Capítulo II, avaliamos a contribuição de mutações em UBE2A como causa de DM. Apresentamos os resultados do sequenciamento direto da região codificadora do gene UBE2A em afetados de 23 famílias em que a DM segrega ligada à segmento que inclui Xq24, onde está localizado o gene UBE2A. Uma dessas famílias foi averiguada no Serviço de Aconselhamento Genético do Laboratório de Genética Humana do Departamento de Genética e Biologia Evolutiva, Instituto de Biociência, USP (LGH-IB/USP), coordenado pelo Dr. Paulo A. Otto e pela Dra. Angela Vianna Morgante. As demais 22 famílias pertencem ao banco de amostras do Consórcio Europeu de Deficiência Mental (European Mental Retardation Consortium EURO-MRX). A triagem foi também realizada em um indivíduo afetado por DM sindrômica que compartilha características clínicas com nossos pacientes. Como acontece com a maioria dos genes do cromossomo X, o gene UBE2A não parece ser responsável por parcela significativa dos casos de DM, já que novas mutações em UBE2A não foram detectadas nessa triagem. Avaliamos o efeito da mutação c.382C 8594; T nos níveis da transcrição e da tradução em homem afetado e em mulher portadora. A presença da mutação que leva a um códon de parada prematura não resultou na degradação do RNA, que detectamos nas células do afetado. Já na mulher portadora, apenas o transcrito normal foi detectado, de acordo com nossos dados anteriores que mostraram desvio completo no padrão de inativação do cromossomo X nas portadoras da mutação, tendo um mesmo cromossomo X ativo nas células do sangue. A vantagem proliferativa das células em que o cromossomo X com alelo mutado estava inativo deve ter levado a esse padrão de inativação desviado do casual, evidenciando o efeito deletério da mutação. Entretanto, o mecanismo pelo qual a mutação afeta a via de UBE2A permanece interrogado. A proteína UBE2A alterada foi encontrada em baixa quantidade nas células do paciente, o que pode ser o resultado de síntese prejudicada ou de degradação pós-traducão. Independente do mecanismo responsável, o fato de apenas uma pequena quantidade da proteína mutada ter sido encontrada, nos permite afirmar que, nas células desses indivíduos, há perda de função de UBE2A. Devemos, contudo, considerar que a proteína mutada é sintetizada e que, no caso de a menor quantidade dever-se à degradação pós-tradução, esse processo pode prejudicar a homeostase celular e contribuir para o quadro clínico. O capítulo II focaliza os transcritos alternativos de UBE2A. Diversos bancos de dados apontam para a existência de três transcritos alternativos do gene UBE2A humano, mas não há trabalho científico que caracterize os tecidos em que os transcritos são expressos ou a função das proteínas por eles codificadas. A mutação c.382C 8594; T localiza-se no éxon 6 do gene, comum a todos os transcritos, de forma que, no caso de eles codificarem proteínas funcionais, a mutação comprometeria três proteínas, e não apenas uma. Demonstramos que os três transcritos de UBE2A são xpressos em leucócitos, pré-adipócitos, placenta, córtex cerebral e hipocampo humanos. Detectamos também os três transcritos nas células de sangue e pré-adipócitos de um de nossos pacientes portador da mutação c.382C 8594; T. Embora os bancos de dados apontem para a existência de apenas um transcrito de UBE2A em camundongos, identificamos um transcrito alternativo correspondente ao transcrito alternativo 3 humano. Este foi detectado inclusive em camundongos nocaute quanto ao gene UBE2A o processo de geração do animal nocaute foi realizado por recombinação homóloga em que o cassete de neomicina foi inserido no éxon 1 do gene, de maneira que não eliminou a existência do transcrito correspondente ao transcrito 3 humano, que utiliza uma 5 UTR alternativa localizada no íntron 3. Entretanto, as proteínas codificadas pelos transcritos alternativos não foram detectadas nos extratos protéicos analisados humanos e de camundongo. Esse resultado poderia ser explicado pela falta de especificidade do anticorpo utilizado ou por essas isoformas representarem pequena parcela do pool de proteínas da célula. Os anticorpos comerciais anti-RAD6 e anti-HR6A/HR6B foram produzidos após imunização de coelhos com a porção N-terminal da isoforma 1. Seria, portanto, possível que não fossem capazes de detectar as isoformas 2 e 3, em que o segmento utilizado para a produção dos anticorpos está total ou parcialmente ausente. No caso de as proteínas estarem pouco representadas na célula, experimentos de co-imunoprecipitação auxiliariam na identificação dessas isoformas nos extratos protéicos. Entretanto, para a detecção de todas as isoformas de UBE2A seria necessário anticorpo que reconhecesse a porção C-terminal de UBE2A. Em 2009, duas novas mutações em UBE2A foram descritas em estudo colaborativo realizado no Welcome Trust Sanger Institute, Hinxton, Cambridge, Reino Unido, após sequenciamento em larga escala de aproximadamente 700 genes do cromossomo X de cerca de 200 indivíduos com DM de herança ligada ao X. Ambas as mutações c.215C 8594; T e c.328C 8594; G eram do tipo missense. Não foram fornecidas informações quanto ao quadro clínico dos portadores dessas mutações e também não foi esclarecido porque apenas a alteração c.215C 8594; T que resulta na troca do resíduo de fenilalanina da posição 72 por um resíduo de serina (F72S) foi considerada pelos autores como possivelmente patogênica. Nossos estudos in vitro, apresentados no Capítulo III, sugerem que ambas as alterações afetam a função de UBE2A. Em 2010, foram publicados dois trabalhos associando novas alterações em UBE2A a quadro de DM. Honda e col. (2010) descreveram uma microdeleção em Xq24 que inclui UBE2A e outros oito genes, em um menino com DM e características também presentes em nossos pacientes. Budny e col. (2010) descreveram mutações missense em UBE2A em duas famílias em que segregava quadro de DM sindrômica semelhante ao de nossos pacientes. Por comunicação pessoal de Arjan de Brouwer (Departamento de Genética Humana da Universidade Radboud, Nijmegen, Holanda), soubemos da existência de três outras microdeleções de segmentos do cromossomo X que incluem UBE2A, em pacientes do sexo masculino, não aparentados. Comparamos as características clínicas de nossos pacientes com as dos portadores das microdeleções em Xq24 e com aquelas dos portadores de mutações missense em UBE2A. A DM grave e o comprometimento significativo ou ausência de fala são comuns a todos. Outras características como baixa estatura, sinófris, boca grande e lábios finos com comissuras voltadas para baixo, pescoço curto e largo, implantação baixa de cabelos na nuca, mamilos espaçados, pênis pequeno, hirsutismo generalizado e a ocorrência de convulsões parecem predominar. Entretanto, enquanto a microcefalia aparece em dois dos três portadores de microdeleções avaliados, a macrocefalia parece predominar no grupo em que ocorrem as mutações de ponto. No Capítulo III, abordamos estudos funcionais in vivo e in vitro para avaliar se as isoformas alternativas de UBE2A compartilham suas funções de conjugase de ubiquitina e compreender o efeito da mutação c.382C8594;T na função de UBE2A. Buscamos estabelecer modelo celular para avaliar o efeito da mutação na formação de neuritos. Trabalho previamente publicado havia demonstrado que a diferenciação neuronal de células PC12 concomitantemente com a inibição parcial do mRNA de UBE2B (parálogo de UBE2A) resultava na redução de 20-30% do comprimento de neuritos. Entretanto, nossos ensaios de diferenciação de pré-adipócitos não responderam nossas questões sobre o efeito da mutação na formação de neuritos, pois não conseguimos obter, nas células do controle ou nas do paciente, a densidade de neuritos descrita anteriormente na diferenciação de pré-adipócitos. Diferentemente das células PC12, de origem ectodérmica, os pré-adipócitos tem origem mesodérmica, o que dificulta sua diferenciação em linhagem derivada de outro folheto germinativo. A elevada conservação entre as proteínas ortólogas UBE2A e UBE2B humanas e RAD6 de levedura e a observação de que ambas as parálogas humanas são capazes de complementar os fenótipos apresentados pela linhagem 916;rad6 de Saccharomyces cerevisiae nos levou a considerar a linhagem de levedura 916;rad6 como modelo para nossos estudos funcionais. Também, avaliamos a capacidade das isoformas 2 e 3 e da isoforma Q128X de UBE2A para ubiquitinar histonas H2A in vitro, conforme previamente descrito para a isoforma UBE2A/1. Os resultados dos ensaios in vivo indicam que apenas a expressão do transcito 1 de UBE2A é capaz de complementar os fenótipos apresentados pela linhagem 916;rad6 de S. cerevisiae. A expressão dos transcritos 2 ou 3 não resulta na restituição do fenótipo de sensibilidade à UV - a expressão gera certa toxicidade, agravada quando as células são cultivadas a 37o C. Entretanto, as isoformas por eles codificadas não parecem ser estáveis na levedura: assim como nos tecidos humanos testados, não conseguimos detectá-las nos extratos protéicos das leveduras que expressavam esses transcritos. A expressão do transcrito 1 contendo a mutação c.382CT revelou que a isoforma UBE2A/Q128X, por sua vez, é estável na linhagem 916;rad6, porém, além de não restituir o fenótipo de sensibilidade à UV, foi, dentre as isoformas de UBE2A, a mais tóxica. Os fenótipos de toxicidade não foram observados após expressão em linhagem selvagem de S. cerevisiae. Esses resultados indicam que as isoformas 2 e 3 de UBE2A não apresentam atividade de conjugase de ubiquitina e que são, aparentemente, degradadas imediatamente após sua expressão em levedura. O fato de o fenótipo de toxicidade ser agravado, em condições de choque térmico, apóia a hipótese de degradação dessas isoformas, em levedura. A degradação pode ser resultado da ausência de parceiro que permita sua estabilidade, mas a ausência das isoformas também em extratos protéicos de tecidos humanos sugere que o mesmo processo de degradação ocorra em mamíferos. Segundo a classificação das E2, as diversas conjugases de ubiquitina têm em comum o domínio UBC altamente conservado e as variações observadas consistem em inserções ou extensões C-terminais, mas nunca deleções, como ocorre nas isoformas 2 e 3 de UBE2A. Os transcritos alternativos teriam, assim, função regulatória. Os ensaios in vitro confirmaram a capacidade de UBE2A/1 ubiquitinar histonas H2A. Os ensaios com UBE2A/2 e UBE2A/3 não foram conclusivos, uma vez que a incapacidade de ubiquitinação de histonas que observamos pode ter consequência da renaturação in vitro, que pode ter ocorrido prejudicando sua função. Entretanto a obtenção das isoformas puras nos permitiu verificar que, caso a isoforma 2 estivesse presente nos extratos de levedura, ela seria reconhecida pelo anticorpo anti-RAD6. Verificamos que a proteína mutada UBE2A/Q128X é capaz de interagir com a E1, da qual recebe a molécula de ubiquitina, mas não é capaz de transferi-la para a histona. O segmento C-terminal ausente nessa isoforma é, portanto, importante nesse processo. Os ensaios in vitro despertaram nossa atenção para o fenômeno de autoubiquitinação de UBE2A, possível mecanismo de autorregulação previamente considerado na literatura. O fato de alguns trabalhos sugerirem que as E2 atuem também como dímeros in vivo e in vitro e a elevada conservação entre as parálogas humanas UBE2A e UBE2B nos levaram a considerar a possibilidade de mecanismo de regulação recíproca. Dessa maneira, a degradação de UBE2A/Q128X nas células do paciente poderia ser dependente de UBE2B. A reduzida capacidade de autoubiquitinação da isoforma mutada dificultaria sua degradação e tornaria necessária a atividade da paráloga. Isso explicaria porque ela é estável quando expressa na linhagem de levedura 916;rad6, mas não nas células do paciente. A presença de RAD6 estaria diretamente relacionada à ausência de toxicidade após a expressão de UBE2A/Q128X em linhagem selvagem a degradação da isoforma mutada está ocorrendo nessas células. A não viabilidade de camundongo duplo-nocaute quanto as parálogas UBE2A e UBE2B não permite testar a estabilidade da isoforma mutada em células de mamíferos. Observamos, de fato, que a inibição do proteassoma nas células do paciente leva ao acúmulo dessa proteína. A presença da mutação c.382C8594;T nas células do paciente parece resultar no fenótipo de DM devido à perda de função de UBE2A: a isoforma mutada não restitui o fenótipo de sensibilidade à UV de S. cerevisiae e não foi capaz de ubiquitinar histonas H2A in vitro. Além disso, indivíduos com microdeleções de UBE2A apresentam fenótipo semelhante ao de nossos pacientes. Por outro lado, a presença da proteína mutada que necessitaria de UBE2B para ser degradada pode caracterizar um ganho tóxico de função - comprometeria a função de ambas as parálogas. É possível que os dois mecanismos contribuam para o quadro clínico. Os dados dos ensaios in vivo e in vitro abrem caminhos de investigação do processo de regulação de UBE2A e UBE2B no nível da proteína, sugerindo a autoubiquitinação e a ubiquitinaão recíproca como possíveis mecanismos reguladores, que podem explicar a conservação das duas parálogas de RAD6 em mamíferos. / We have previously described a nonsense mutation (c.382C8594;T) in the UBE2A gene, at Xq24, which encodes a ubiquitin conjugating enzyme (E2), as the cause of a new X-linked mental retardation syndrome. The predicted protein lacks the 25 C-terminal amino acid residues conserved in vertebrates and in Drosophila. This was the first description of a mutation in a ubiquitin conjugating enzyme gene causative of a human disease. In the present work, we focused on the UBE2A gene, its alternative transcripts and isoforms, and the effect of the c.382C8594;T mutation. We screened for UBE2A mutations 23 males presenting X-linked mental retardation (XLMR), previously mapped to the interval encompassing this gene, and one isolated case, who shared clinical features with our previously described patients. No mutations were detected in this selected series of patients suggesting that mutations in UBE2A is not a common cause of XLMR, similarly to the majority of the XLMR genes hereto described. Very recently four Xq24 microdeletions encompassing UBE2A and three missence mutations were found by other groups in mentally retarded males that shared several clinical features with our patients. Comparing these and our patients, a clinical picture emerges of mental retardation associated with severe speech impairment, present in all of them. Short stature, large mouth with downturned corners and thin lips, short and broad neck, low posterior hairline, widely spaced nipples, marked generalized hirsutism and seizures are common features. However, microcephaly was observed only in patients carrying UBE2A deletions, while carriers of missense or nonsense mutations showed macrocephaly. We evaluated the effect of the UBE2A c.382C8594;T mutation on transcription and translation. This mutation affects the last UBE2A exon and, as expected, does not lead to nonsense mediated RNA decay, demonstrated by the presence of UBE2A mRNA in leucocytes of an affected male. However, only a small amount of the mutated protein was detected in the patients cells, suggesting the loss of UBE2A function as the cause of the syndrome. The posttranslational degradation of the mutated protein could also disturb the cellular homeostasis, a gain of function that remained a possibility. The detrimental effect of the c.382C8594;T mutation was further supported by the presence of only the normal transcript in leucocytes of a heterozygous woman, who had completely skewed X inactivation, thus pointing to the selective advantage of lymphocytes carrying the normal allele on the active X chromosome. Our search in DNA and protein sequence databases suggested that the UBE2A gene produces three alternative transcripts all classified as protein coding. These three tanscripts contain the mutation site (c.382C8594;T). We showed that all three UBE2A transcripts are expressed in human leucocytes, adipocytes, placenta, cerebral cortex and hippocampus. We also detected an alternative transcript in murine, which corresponds to the human transcript 3. This alternative transcript was present in all murine tissues analyzed, including samples from a UBE2A knockout mouse. However, we failed to detect the proteins encoded by the alternative transcripts. This could result from low affinity of the used commercial antibody to the isoforms. Alternatively, a small amount of these proteins in the pool of cellular proteins, might have not been detected by Western blotting. We performed in vivo and in vitro assays to address the role of the alternative UBE2A isoforms, and to evaluate the effect of c.382C-T mutation on UBE2A function. Taking into account the high amino acid conservation between the human UBE2A and the Saccharomyces cerevisiae ortholog RAD6, we used a 916;rad6 yeast strain to verify whether UBE2A alternative and mutated isoforms were able to complement its UV-sensitivity phenotype, as previously demosntrated for UBE2A isoform 1. We also performed in vitro assays to evaluate their ubiquitination activity towards histone H2A, a known in vitro substrate of RAD6 and UBE2A. Only UBE2A isoform 1 could rescue the UV sensitivity phenotype of the knockout yeast strain. The expression of the alternative isoforms 2 and 3 was partially toxic to this yeast strain, and toxicity increased under heat shock conditions. However, these two isoforms do not seem to be stable in yeast cells: as in human tissues, we failed to detect UBE2A isoforms 2 and 3 in yeast cells expressing the corresponding transcripts. The mutant isoform was stable in yeast, but was unable to rescue the UV-sensitivity phenotype, its expression resulting in severe toxicity to the 916;rad6 strain. On the other hand, toxicity was not observed when the mutant UBE2A isoform was expressed in wild type yeast. These findings suggest that isoforms 2 and 3 do not have ubiquitin conjugating activity and, apparently, are degraded immediately after translation. The fact that toxicity is enhanced when these isoforms are expressed under heat shock conditions supports Degradation hypothesis. The degradation could also be due to the absence of a functional partner, in yeast, that could contribute to their stability. Since the alternative isoforms were not detected in the human tissues analyzed, the degradation might occur in human cells as well. E2 enzymes share a catalytic domain and variations among them consist of insertions or terminal extensions, never deletions. Both isoforms 2 and 3 would have deletions of the catalytic domain, suggesting that they are not functional. A regulatory role for these transcripts is a possibility. Our in vitro assays confirmed that UBE2A isoform 1 is capable of histone H2A ubiquitination. The assays for isoforms 2 and 3 were inconclusive, since their lack of ubiquitin conjugating activity could be caused by incorrect in vitro refolding, required because the proteins were obtained from bacterial inclusion bodies after heterologous expression. The mutated protein, however, was able to interact with the ubiquitin molecule, but failed to transfer it to histones, thus pointing to the importance of the C-terminal segment in this process. Our in vitro assays stongly suggested that UBE2A autoubiquitination occur, an activity previously considered a possible E2 regulatory mechanism. Since there is evidence that some E2s form functional dimers, we hypothesized that, due to their high amino acid conservation, UBE2A and its paralog UBE2B might form heterodimers in vivo, as a mutual regulating mechanism. Under this hypothesis, the degradation of the mutated protein could be UBE2B dependent. The reduced autoubiquitination capacity of the mutated isoform could impair its degradation, and require the participation or the paralog. This would explain why the mutated protein was stable in the 916;rad6 yeast strain, but not in the patient´s cells with a functional UBE2B. Following the same reasoning, in wild type yeast, the presence of RAD6 would explain the absence of the mutated protein and toxicity. The non-viability of the double (UBE2A and UBE2B) knockout cells prevented testing whether the mutated protein was stable in the absence of its paralog. However, proteasome inhibition in cultured cells from one of our patients resulted in accumulation of the mutated protein, confirming its degradion via the ubiquitin-proteasome pathway. In conclusion, the UBE2A c.382C8594;T mutation seems to lead to mental retardation in our patients due to loss of UBE2A function: the mutated isoform is unable to rescue the UV-sensitivity phenotype of 916;rad6 yeast or to ubiquitinate histones in vitro. In addition, patients carrying UBE2A deletions share clinical manifestations with our patients. On the other hand, the possibility remains of a clinical effect of the requirement of UBE2B for degrading the mutated UBE2A. Our data suggest reciprocal ubiquitination in addition to autoubiquitination as UBE2A and UBE2B regulatory mechanism that would explain the conservation of the two paralog genes in mammals.

Made available in DSpace on 2016-04-27T16:33:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jose Luiz Germano Martins.pdf: 3157599 bytes, checksum: d390715e78bc40634190511093e20b32 (MD5) Previous issue date: 2007-03-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present study aims at investigating the interaction between mentally impaired students enrolled on regular school courses and their classmates, and identifies evidences of rejection or acceptance behaviors. This work verifies the variation in the levels of acceptance or rejection by comparing two schools, one with an implemented inclusion program and other with no such concern. It is based upon the concept that inclusion processes bring about new questions that require investigation and in the presumption that a mental impairment (as a negative characteristic of a student) brings difficulties to his social relationships which can be reduced by well defined inclusion policies. Two hypotheses are proposed considering this: first, that the rejection levels towards mentally disabled students are high, especially in terms of study matters, due to their learning capability; and second, that the existence of a pedagogic program on school inclusion favors interpersonal relationships between the mentally impaired student and his classmates. Pursuing a broader view of the students relationships and answers to these questions, the main data collection tool was the sociometric test. It has been chosen due to its competency for denoting multiple aspects of the social processes in a more vivid and spontaneous manner, and for its versatility and universality. The research was conducted with students of the second grade of one school and with students of the fourth grade of a different one. It verifies the effects of a pedagogic program on school inclusion, present in only one of the two schools, in the relationships established by the disabled students. Considering the interaction between regular students and disabled ones, it was found that penalty truly existed in all fields surveyed, named affectivity, playing and study. But differences were observed as the rejection levels towards the disabled student were not the highest in one school meanwhile the presence of the disabled student was not even noticed in the other. This was expected and had been registered before in the literature (Moreno, Bastin). The hypothesis of highest disadvantage in terms of study, probably due to learning deficiencies of the impaired students, has not been verified as they have not been the most reject students. Similarly, their rejection levels in terms of study were not above their average regarding the other topics of the survey. Finally, there has been no confirmation regarding the hypothesis of social relationships benefits for the disabled student in a school with a pedagogic program on school inclusion. In fact, the study pointed that regular students seemed to consider the disabled student more like a classmate than in the school with the inclusion policy / O presente trabalho teve por objetivo investigar como ocorrem as interações entre o aluno deficiente mental incluído em escola regular e os demais colegas de classe, buscando verificar as manifestações de rejeição e de aceitação do primeiro e de verificar se esses níveis de rejeição e aceitação sofrem alteração entre uma escola que tenha um projeto definido de inclusão escolar e outra que não tenha. Partiu-se do princípio de que os processos de inclusão trazem à tona novas questões que merecem ser investigadas e que a deficiência mental, como marca negativa do sujeito, interfere nas relações sociais, mas que estas tendem a diminuir em escola com projeto definido de inclusão escolar. Nesse sentido, formulamos duas hipóteses: 1) que os índices de rejeição dos alunos com deficiência mental são altos, especialmente no quesito estudos, dada as suas dificuldades de aprendizagem; 2) a existência de um projeto político-pedagógico explícito de inclusão escolar favorece as relações interpessoais entre o aluno deficiente mental e seus pares. No intuito de se obter uma visão mais abrangente das relações entre os alunos e respostas aos questionamentos que movem o estudo a ser realizado, o instrumento básico adotado para a coleta de dados foi o teste sociométrico, porque possui grande capacidade para ressaltar os espaços múltiplos do processo social de forma mais viva e espontânea e por seu caráter de versatilidade e universalidade. A pesquisa foi realizada em duas escolas distintas (em uma delas em classe de 2ª série e, na outra, de 4ª), sendo que uma delas possui projeto político pedagógico voltado à inclusão e a outra não, com o intuito de verificar quais as possíveis repercussões desse fato nas relações estabelecidas entre os alunos estudados. Com relação às interações entre os alunos normais e o aluno com deficiência mental, pode-se constatar que, se é verdade que existem prejuízos em todos os quesitos estudados, ou seja, afetividade, brincadeiras e estudos, eles se manifestam de maneira diferente, pois enquanto em uma escola o aluno deficiente praticamente não existe para seus colegas, na outra, os índices de rejeição do aluno deficiente não são os mais elevados da classe, situando-se dentro de parâmetros esperados apontados pela literatura especializada (Moreno, Bastin). Quanto ao maior índice de prejuízos quando se trata na área de estudos, pela provável maior dificuldade dos alunos incluídos em aprender, a hipótese não se confirmou, posto que os alunos não foram os mais rejeitados das classes, bem como, para cada um deles, o número de rejeições nesse quesito não foi superior aos dos demais quesitos. Finalmente, a hipótese de que um projeto político-pedagógico sobre inclusão escolar deveria favorecer as relações sociais entre o aluno deficiente e seus pares não se confirmou, já que nos pareceu que nesta última, o aluno foi tratado muito mais como um colega como tantos outros do que na primeira escola

Made available in DSpace on 2016-04-27T16:33:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Aparecida Augusto Satto Vilela.pdf: 786537 bytes, checksum: c068b2b27a9ddf743ad4c823109d1316 (MD5) Previous issue date: 2006-08-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This paper, of documental characteristic, deals with the concept of mental disability, searching to identify the spread conceptions of this concept in the magazine Revista Educação, during the period of 1927 to 1946. The choice of this magazine, as well as the period, was configured later that I had access to the research project co-coordinated by Bueno (1995), through that report I could verify that although a special education policy of vast and organic aspect had only appeared after the 1950 s, in São Paulo, during the first half of the last century conditions for its emergence had been prepared, among those the spread of a specific perspective about handicapped people, based on what Januzzi (2004) called doctor-physiological model .Among all the material collected for that research I was attracted by the magazine Education, which circulated uninterruptedly in Saõ Paulo from 1927 through 1946 and had a relevant role because it has spread the educational ideas of that period and the orienting principles of education policy. In order to analyze the contents divulgated by the articles of this periodic I have used the criteria established by Bardin (1977), through the selection of several divulgated contents, the classification and organization of these contents in thematic groupings and the construction of thematic categories a posteriori, with the gathering of the close thematic groupings (concept of intelligence, applied terminology characterization of the abnormality, classification of the abnormalities and causes of the abnormalities The main findings resulting from the analysis of the 27 selected articles were: the spread of the intelligence concept as an inherited and immutable characteristic, great inaccurate terminology typical of a period in which the special education was being prepared, low concern about a deeper characterization of intellectual abnormality; ambiguous and anachronistic classifications of the different kinds of intellectual abnormality and emphasis in the hereditary and irreversibleness of this abnormality, although few studies had emerged where they did not impute to it the only cause of the intellectual abnormality / Este trabalho, de cunho documental, versa sobre o conceito de deficiência mental, procurando identificar as concepções disseminadas na Revista Educação, no período de 1927 a 1946. A escolha pela revista e pelo período configurou-se depois que tive acesso ao Relatório de Pesquisa coordenado por Bueno (1995), por meio do qual pude constatar que, embora uma política de educação especial de caráter mais amplo e orgânico tenha surgido somente após os anos de 1950, em São Paulo, durante a primeira metade do século passado foram gestadas as condições para o seu surgimento, entre elas, a disseminação de uma determinada perspectiva sobre os deficientes, calcada no que Jannuzzi (2004) denominou de modelo médico-psicológico. Dentre todo o material coletado por aquela pesquisa chamou-me a atenção a Revista Educação, que circulou ininterruptamente em São Paulo de 1927 até 1946 e que teve um papel de relevância, pois propagou o ideário educacional do período e os princípios orientadores das políticas de ensino. Para analisar os conteúdos veiculados pelos artigos desse periódico, utilizei critérios estabelecidos por Bardin (1977), por meio da seleção dos diferentes conteúdos veiculados, da classificação e organização desses conteúdos em agrupamentos temáticos e a construção de categorias temáticas a posteriori, com a junção de agrupamentos temáticos próximos (conceito de inteligência, terminologias utilizadas, caracterização das anormalidades, classificação das anormalidades e causas das anormalidades). Os principais achados decorrentes da análise dos 27 (vinte e sete) artigos selecionados foram: a disseminação do conceito de inteligência como característica herdada e imutável; grande imprecisão terminológica característica de um período em que o campo da educação especial estava sendo gestado; pequena preocupação com uma caracterização mais aprofundada da anormalidade intelectual; classificações ambíguas e anacrônicas dos diferentes tipos de anormalidades intelectuais; e uma ênfase na hereditariedade dessa anormalidade, embora tenham surgido alguns poucos estudos em que não se imputava a ela a única causa das anormalidades intelectuais