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Síntese e avaliação de NiMo/Beta e NiMo/SAPO-5 no hidrocraqueamento do cumeno com piridina.

CABRAL, Rucilana Patrícia Bezerra. 12 September 2018 (has links)
Submitted by Maria Medeiros (maria.dilva1@ufcg.edu.br) on 2018-09-12T14:38:14Z No. of bitstreams: 1 RUCILANA PATRÍCIA BEZERRA CABRAL - TESE (PPGEP) 2008.pdf: 6571244 bytes, checksum: d2b524bd924cc294214a4507138e3b56 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-12T14:38:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RUCILANA PATRÍCIA BEZERRA CABRAL - TESE (PPGEP) 2008.pdf: 6571244 bytes, checksum: d2b524bd924cc294214a4507138e3b56 (MD5) Previous issue date: 2008-07-06 / Devido ao aumento na produção de óleo pesado, a indústria do refino voltou-se para os processos de hidrocraqueamento (HCC) que fornecem combustíveis básicos e leves atendendo as exigências da sociedade moderna. O processo HCC é realizado, geralmente, sob temperaturas e pressões elevadas na presença do hidrogênio e de um catalisador de hidrocraqueamento. As cargas de petróleo brasileiras inevitavelmente contêm muitas impurezas, como os compostos orgânicos nitrogenados. Estes compostos de nitrogênio presentes nas cargas de hidrocraqueamento atuam como venenos temporários dos catalisadores, resultando numa diminuição de atividade destes catalisadores. Normalmente, os catalisadores de HCC compreendem de um suporte ácido mais um componente hidrogenante selecionado do Grupo VIB e do grupo VIII da Tabela periódica dos Elementos, na forma de óxido ou sulfeto. Zeólita Beta e SAPO-5 foram propostos para serem usados como suportes ácidos. A respeito do componente hidrogenante, a combinação de metais usados, expressada como óxidos, foi NiO-MoO3. Uma série de catalisadores NiMo suportados em Zeólita Beta e SAPO-5, de diferentes composições, foram preparados por impregnação seqüencial úmida dos materiais utilizando soluções aquosas precursoras de Ni(NO3)2.6H2O e (NH4)6 Mo7O24. 4H2O. Os suportes e catalisadores foram analisados pelas técnicas: Difração de raios-X (DRX), Espectrometria de Emissão Atômica de Plasma Acoplado Induzido (ICPAES), Adsorção Física de N2 pelo método BET, Redução com Temperatura Programada (RTP), Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET), Espectroscopia no Infravermelho de piridina adsorvida (IV), Espectroscopia de Refletância Difusa (DRS) e Espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear (RMN). Os catalisadores NiMo sulfetados foram avaliados usando um reator tubular de fluxo contínuo, no hidrocraqueamento do cumeno na presença e ausência de piridina. Foi verificado que os catalisadores suportados em zeólita Beta promoveram maiores conversões que os suportados em SAPO-5, principalmente o que usou zeólita Beta (Si/Al=8,2) com 4%NiO e 15%MoO3. A presença da piridina foi prejudicial à performance de todos os catalisadores, inclusive para os padrões cedidos pelo CENPES. / Due to the increasing of the heavier crude oil feedstocks production, the oil refining industry has turned to hydrocracking (HCK) processes to provide the lighter basic fuels which modern society demands. The HCK process is generally carried out under high temperatures and pressures in the presence of the hydrogen and a HCK catalyst. The feedstocks of the Brazilian crudes inevitably contain many impurities, such as organic nitrogen compounds. These nitrogen compounds present in the feeds of hydrocracking process act as, temporary poisons to the catalysts, thereby decreasing the catalyst activity. Usually, hydrocracking catalysts comprise of an acidic support plus a hydrogenating component selected from the Group VIB metals and Group VIII metals of the Periodic Table of the Elements, in their oxide or sulfide form. Beta zeolite and SAPO-5 are proposed as acidic support materials for hydrocracking. Regarding the hydrogenation component the combination of the metals used in the form of oxides, was NiO-MoO3. A series of NiMo catalysts supported on Beta zeolite and SAPO-5, of different compositions, were prepared by sequential incipient wetness impregnation of the materials with aqueous solutions of Ni(NO3)2 . 6H2O and (NH4)6 Mo7O24.4H2O. The supports and catalysts were analyzed by several techniques such as: X-ray diffraction (XRD), plasma-emission spectrometry (ICP-AES), N2 physical adsorption by BET method, temperature programmed reduction (TPR), transmission electronic microscopy (TEM), infrared spectroscopy of adsorbed pyridine (IR), diffuse reflectance spectroscopy (DRS) and nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. The sulfide NiMo catalysts were evaluated using a continuous-flow tubular reactor by the cumene hydrocracking in the presence and absence of pyridine. It was verified that the NiMo catalysts based on Beta zeolite produced the highest cumene conversion than those based on SAPO-5, particularly the one with Beta zeolite (Si/Al=8,2) containing 4%NiO and 15%MoO3. The presence of nitrogen as pyridine was detrimental for the performance of all catalysts, including the standards one, supplied for the CENPES.
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Agrotóxicos, sua utilização e os indicadores de risco no Estado do Rio de Janeiro / Pesticides, their use and the risk indicators in the State of Rio de Janeiro

Ribeiro Neto, Aloysio Araújo January 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2011-05-04T12:36:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / O estado do Rio de Janeiro, apesar da fraca participação do setor agropecuário na economia, apresenta áreas onde a atividade agropecuária é bastante desenvolvida, com a utilização intensiva e inadequada de agrotóxicos. Um dos passos primordiais para o controle dos riscos ambientais é a seleção de indicadores que sejam sensíveis para detectar situações de risco, e ao mesmo tempo abrangentes para envolver uma grande diversidade de condições. Este trabalho tem como objetivo propor um modelo para a tipificação e priorização de municípios, visando o aperfeiçoamento das ações de vigilância dos agrotóxicos. Esse modelo integra os setores de agricultura, saúde e ambiente, buscando dados censitários e da rotina de trabalho de órgãos de governo para caracterizar os cenários de uso dos agrotóxicos no estado. Foi levantado um total de 43 variáveis, transformadas em onze (11 ) indicadores de risco, que por sua vez foram grupados em 4 grupos (população exposta, produção agrícola, práticas agrícolas e serviços públicos) e ordenados segundo escores decrescentes de risco. Os escores dos grupos foram somados e transformados em um escore único que representa uma priorização de ações de vigilância de agrotóxicos no estado. Os indicadores apontaram uma concentração de municípios de maior risco na região serrana e noroeste fluminense, tanto por sua alta produção de itens agrícolas, quanto pela estrutura de produção, caracterizada pelo uso intensivo de insumos e mão de obra. Foi verificada, no entanto, uma fraca correlação entre indicadores, isto é, os municípios com maiores volumes de produção não necessariamente apresentam maiores efeitos sobre a saúde. Essa tendência aponta uma complementaridade entre indicadores e a diversidade de situações de risco no estado. / Despite of the weak participation of the agricultural sector in the regional economy, the state of Rio de Janeiro, presents areas where the agricultural activity is highly developed, with the intensive and inadequate use of pesticides. One of the prime steps for the control of environmental risks is the selection of sensitive indicators to detect risk situations, involving a broad diversity of risk conditions. The main objective of this work is to propose a model to classify and rank municipalities, aiming the improvement of health surveillance actions of pesticides. This model integrates the agriculture, public health and environmental sectors, using censitary data and existing routine data of government organizations to characterize the sceneries of pesticide use in the state. An amount of 43 initial variables were gathered and transformed into 11 risk indicators, which were grouped in 4 items (exposed population, agricultural production, agricultural practices and public services) and ranked according to decreasing risk scores. The group scores were summed and transformed into an unique score that represents priorization needs for health surveillance actions of pesticides in the state. The indicators pointed out a concentration of municipalities under risk in the highland area and northwest regions of Rio de Janeiro state, due to the high production of agricultural items, and the production structure, characterized by the intensive use of chemical inputs and labor force. However, it was verified, a weak correlation among indicators, i.e., municipalities with large production volumes doesn’t necessarily present larger health effects. This tendency confirms a complementarity between indicators and the diversity of risk situations in the state.
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AvaliaÃÃo do impacto do uso de agrotÃxicos nos trabalhadores rurais dos MunicÃpios de Ribeiro GonÃalves, Baixa Grande do Ribeiro e UruÃuà â Piauà / Evaluation of the Impact of the use of Pesticides on Agricultural Laborersâ Health in the Cities of UruÃuÃ, Ribeiro GonÃalves and Baixa Grande do Ribeiro

Tatiana Vieira Souza Chaves 27 November 2007 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os agrotÃxicos estÃo entre os mais importantes fatores de risco para a saÃde dos trabalhadores. No PiauÃ, a expansÃo agrÃcola implementada nos cerrados, por intermÃdio da intensificaÃÃo do plantio de soja, a partir da dÃcada de 1990, consistiu em um forte fator para o aumento do uso de agrotÃxicos. A utilizaÃÃo indiscriminada dos agrotÃxicos, geralmente, està associada a intoxicaÃÃes agudas e crÃnicas. A dosagem de colinesterase plasmÃtica e eritrocitÃria sÃo parÃmetros relevantes para diagnÃstico de casos cuja exposiÃÃo se deu, principalmente, de forma aguda. A genotoxicidade associada ao uso destes produtos vem sendo estudada, sendo fortes as evidÃncias que estes produtos sÃo carcinogÃnicos. No estado do PiauÃ, em setembro de 2005, no municÃpio de Ribeiro GonÃalves, ocorreram mortes cuja suspeita principal era de intoxicaÃÃo por uso dos pesticidas agrÃcolas. Este fato desencadeou uma investigaÃÃo nos municÃpios produtores de soja (UruÃuÃ, Ribeiro GonÃalves e Baixa Grande do Ribeiro). O objetivo deste trabalho foi avaliar o impacto do uso de agrotÃxicos sobre a saÃde dos trabalhadores rurais dos municÃpios de UruÃuÃ, Ribeiro GonÃalves e Baixa Grande do Ribeiro. Dividiu-se, metodologicamente, o estudo em trÃs etapas. Na primeira, aplicou-se questionÃrio sÃcio epidemiolÃgico de acordo com OrganizaÃÃo Mundial de SaÃde (OMS) e coletaram-se amostras de material biolÃgico para anÃlises bioquÃmicas, hematolÃgicas e enzimÃticas (acetil colinesterase plasmÃtica e eritrocitÃria) de 120 trabalhadores agrÃcolas da regiÃo sul do PiauÃ. Na segunda etapa, estudou-se 75 indivÃduos. Estes se submeteram a uma segunda avaliaÃÃo, tendo como ferramenta os mesmos exames anteriormente realizados. Como terceira etapa, realizou-se o teste de micronÃcleo em 31 indivÃduos que encontravam-se com os parÃmetros alterados. Fez-se coleta de cÃlulas da mucosa oral, para avaliaÃÃo do nÃvel de lesÃo de DNA atravÃs de contagem de micronÃcleos. Quanto ao questionÃrio sÃcio epidemiolÃgico os resultados encontrados indicaram que 100% da populaÃÃo estudada pertencia ao sexo masculino, com idade mÃdia de 35 anos. Ainda sobre o questionÃrio, 66% eram casados, 76,67% trabalhavam em fazendas (lavradores, operadores de mÃquinas e tÃcnicos agrÃcolas), 16,67% eram agentes de endemias ou servidores pÃblico, sendo que 21,3% tomavam medicamento sem prescriÃÃo mÃdica e que 71,67% nÃo realizaram exames mÃdicos nos Ãltimos 06 meses. A investigaÃÃo evidenciou ainda que, quanto ao estilo de vida e trabalho, 33,33% dos trabalhadores possuem o hÃbito de fumar, 55,83% de consumir bebidas alcoÃlicas, 29,9% entraram em contato direto com o agrotÃxico durante o preparo do produto, 38% atravÃs da aplicaÃÃo do produto por pulverizaÃÃo, 10% atravÃs da limpeza e manutenÃÃo dos equipamentos, 17,5% nÃo utilizavam nenhuma proteÃÃo, sendo que a grande maioria utilizavam apenas 01 tipo de EPI. Outro achado relatado refere-se que os trabalhadores utilizaram mais de 34 diferentes formulaÃÃes, sendo as classes mais utilizadas os inseticidas (45,18%), herbicidas (27,68%) e fungicidas (6,21%). Quanto ao tempo de exposiÃÃo dos trabalhadores aos pesticidas, 50,84% estavam expostos a menos de 2 anos e 10% estavam expostos a mais de 10 anos. Dentre os sintomas mais relatados, os efeitos no SNC destacaram-se com 230 queixas relatadas durante a aplicaÃÃo do questionÃrio sÃcio-epidemiolÃgico. Sobre o destino final das embalagens, 84,21% dos mesmos eram queimados, enterrados e deixados a cÃu aberto, sendo 15,79% entregues na central de recebimento. Em relaÃÃo Ãs anÃlises bioquÃmicas e hematolÃgicas dos indivÃduos submetidos à primeira coleta, os resultados indicaram que 11,67%; 4,17%; 10,83%; 0,83% ; 5,83%; 5% e 9,17% encontravam-se com nÃveis respectivamente alterados de Gama GT, Fosfatase Alcalina e TGO/ TGP, UrÃia, Creatinina componentes protÃicos, acetilcolinesterase plasmÃtica e eritrocitÃria . Na segunda etapa, os achados indicaram que os indivÃduos estavam com os nÃveis alterados de: gama GT ( 4,00%); fosfatase alcalina e TGO/TGP ( 4,00%); urÃia (4,00%); creatinina (5,33%); proteÃnas totais (17,33%); acetilcolinesterase plasmÃtica (4,00%) e acetilcolinesterase eritrocitÃria (2,67%). Com relaÃÃo à terceira etapa, dos 31 indivÃduos que realizaram teste de micronÃcleo 84,00% encontravam-se com danos citogenÃticos. Os danos citogenÃticos evidenciados nÃo apresentaram correlaÃÃes com idade, fumo, bebidas, equipamentos de proteÃÃo, medicamentos e doenÃas, confirmando a correlaÃÃo dos danos citogenÃticos evidenciados, com a exposiÃÃo aos agrotÃxicos (P<0,05) / The pesticides are some of the main risky factors for agricultural laborersâ health. In the state of PiauÃ, the agricultural expansion which was implemented in the cerrados through the growth of the soy crops in the 90âs was a relevant factor that increased the use of pesticides. The unbalanced usage of pesticides is often related to acute and chronic poisonings. The dosage of plasma cholinesterase and erythrocyte cholinesterase are relevant parameters to diagnose mainly cases in which an acute contact has occurred. The genotoxicity related to the use of these kinds of products has been studied and there are strong evidences that they are carcinogenic. Deaths which the main suspicion was poisoning by the misuse of agricultural pesticides happened in September of 2007 in the city of Ribeiro GonÃalves, state of PiauÃ. The fact unchained an investigation in the cities that produce soy (UruÃuÃ, Ribeiro GonÃalves and Baixa Grande do Ribeiro). The purpose of this study was evaluating the impact of the use of pesticides on agricultural laborerâs health in the cities of UruÃuÃ, Ribeiro GonÃalves and Baixa Grande do Ribeiro. The study was divided in three steps. Firstly, a social epidemiologic questionnaire Word Health Organization (WHO) was applied and samples and collected material to biochemical, hematological and enzymatic plasma acetylcholinesterase and erythrocyte acetylcholinesterase analysis of 120 agricultural laborers from the region. The second step was a study of these workers. These ones submitted salf of Piauà to a second evaluation which used, as a tool, the tests which had been previously discribed. In the third step 31 individuals with irregular parameters were submitted to a micronucleus test. Cells from the oral mucosa were collected to evaluate the level of DNA injury through micronucleus counting. The results of the social epidemiologic questionnaire pointed that 100% of the subjects who had benn studied were males with an average age of 35 years old. 66% were married, 76.67% worked in farms (farmers, machinists and agricultural technicians), 16.67% worked as endemic diseases agents or civil servants. 21.3% of them used non-prescribed medication and 71.67% had not did medical tests for the last 6 months. About life and work style the investigation showed that 33.33% of the workers is smokers, 55.83% drink alcohol, 29.9% has direct contact with the pesticide while it was being prepared to be use, 38% during the pulverization process, 10% during the equipment cleaning and maintenance, 17.5% did not take any safety protection measure, while the most used only a single kind of EPI. Another related discovery about the workers showed that they used more than 34 different formulations. Insecticides (45.18%), herbicides (27.68%) and fungicides (6.21%) were the most used products. Concerning the time of exposure the workers had to the pesticides, 50.84% were exposed to them for less than 2 years and 10% for more than 10 years. The effects on the SNC detached themselves among the most related symptoms with a 230 complaints reported during the application of the social epidemiologic questionnaire. Concerning the final destination of the containers, 84.21% were burned, buried and left outdoors while 15.79% were brought to the appropriate organ headquarter. The results from the biochemical and hematological analysis indicated that 11.67%; 4.17%; 10.83%; 0.83%; 5.83%; 5% e 9.17% of the individuals who were submitted to the first sample collection had, respectively, irregular levels of Gamma-Glutamyl Transferase (GGT); Alkaline Fosfatase and Glutamic-Oxaloacetic Transaminase/ Glutamic Pyruvic Transaminase; Urea; Creatinine; Proteic components; Plasma acetylcholinesterase and Erythrocyte acetylcholinesterase. The findings in the second step indicated that the individuals had irregular levels of: Gamma GT (4.00%); Alkaline Fosfatase and GOT/GPT (4.00%); Urea (4.00%); Creatinine (5.33%); Total Protein (17.33%); Plasma acetylcholinesterase (4.00%) and Erythrocyte acetylcholinesterase (2.67%). In the third step, 84.00% of the 31 subjects who had a micronucleus test presented cytogenetic injuries. The cytogenetic injuries which could be observed were not related to age, smoke, alcohol consumption; safety equipment, medications and diseases which confirms the co-relation between the presented cytogenetic injuries and the exposure to pesticides ( P<0.05)
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Comunicação de riscos relacionada a agrotóxicos no Pólo floricultor de Nova Friburgo, RJ / Risk communication related to pesticides in the Hub florist Nova Friburgo, RJ

Belo, Mariana Soares da Silva Peixoto January 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2011-05-04T12:36:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / O uso intensivo de agrotóxicos nas lavouras desacompanhado de políticas normativas e de controle resulta numa série de impactos sobre a saúde humana e sobre o meio ambiente. As intoxicações sofridas pelos trabalhadores rurais podem estar atreladas a vários fatores como, por exemplo, a dificuldade de compreensão das informações sobre os agrotóxicos. Uma solução seria uma assistência técnica mais eficaz e dissociada das casas comerciais, fato cada vez mais presente, acarretando o aumento no consumo desses produtos. Em alguns casos, o acesso às informações fica restrito somente à leitura de bulas e rótulos dos produtos utilizados, sendo a única fonte de comunicação de riscos existente. É um dado preocupante, já que é reconhecido o baixo nível de escolaridade dos agricultores. O presente estudo tem como objetivo analisar o processo de comunicação de riscos relacionado aos agrotóxicos no trabalho rural do Pólo Floricultor de Nova Friburgo/ RJ, através de um estudo de recepção de informações, por parte de agricultores, referente aos rótulos e bulas dos principais agrotóxicos utilizados por eles durante o seu processo de trabalho. Através de uma abordagem qualitativa, foram aplicados questionários semi-estruturados a 29 dos 30 produtores de flores locais, avaliando o seu processo de trabalho, seus anseios e o conhecimento acerca das questões que envolvem o uso dos agrotóxicos. A análise dos dados identificou uma série de situações relacionadas com o nível de informações e a sua interpretação pelos trabalhadores; o manejo indevido atribuído ao desconhecimento dos reais riscos que estão expostos é uma delas. Os resultados encontrados criam novas expectativas para a adoção de uma política eficaz de comunicação de riscos no campo, sobre tudo com a participação ativa de políticas normativas e que garantam o entendimento das instruções por pessoas comuns, conforme previsto na Legislação. O estudo subsidia uma estratégia mundial voltada para a harmonização global de informações dos produtos químicos, tendo como foco, os agrotóxicos. Uma comunicação de riscos mais segura, eficaz e ética pode ser caminho para garantir maior segurança aos trabalhadores. / The intensive use of pesticides for crop protection results in impacts on human and environmental health status, particularly when this use is not associated with normative policies and control actions. Major rural workers poisonings can be straight associated to a number of factors, including difficulties to comprehend the available information. One of many solutions should be a more effective and independent technical assistance, dissociated with commercial interests – a serious situation usually more seen and that can be pointed as one of the main determinants of pesticides use increase in the last few years. In some cases, information access is restricted to labels reading, constituting the only information resource available for a large group of rural workers. This situation is even more serious considering these professionals’ low formal-educational background. The present study aims to analyze pesticides risk communication process in a rural, flower-producer community of Nova Friburgo municipality, Rio de Janeiro State – Brazil, through an information-reception study focusing labels reading. Through a qualitative health research approach, semi-structured questionnaires were applied to 29 of the 30 local flower producers aiming to characterize local work processes, workers beliefs and perceptions, as well as to identify their ability to correctly understand pesticides labels information (visual and written). Results showed that this information is not correctly understood by workers, leading to some unsafe work practices such as inappropriate pesticides formulation and use and several exposures situations, as well as the non-adoption of protective gear. These data point the need of a more effective risk communication policy, particularly involving the community, that be effectively representative of what the National Legislation demands (all pesticides information present in labels should be correctly understood by any people, independent of their academic background). This study can be used as a subsidy for the GHS implementation in Brazil, particularly regarding pesticides information legislation.
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Estudo da ativação de inflamassoma por toxinas isoladas de venenos botrópicos e modulação da resposta imune / Evaluation of the inflammasome activation by toxins isolated from bothropic venoms and modulation of the immune response

Silva, Priscila de Andrade Ranéia e 16 July 2018 (has links)
A lesão tecidual é um dos efeitos locais descritos nos envenenamentos botrópicos. Toxinas isoladas, como: a jararagina (JAR) e bothropstoxina-I (BthTX-I), obtidas dos venenos de B. jararaca e B. jararacussu, respectivamente, induzem intensa resposta inflamatória e lesão tecidual, porém apresentam diferentes mecanismos de ação. Como descrito, a resolução da lesão tecidual envolve a interação entre mecanismos de reparo do tecido e o sistema imune. Neste contexto, a resposta inflamatória é iniciada por meio da detecção de sinais de dano tecidual agudo devido a distúrbios da homeostasia resultantes ou não de agentes microbianos (DAMPs) e/ou por reconhecimento de padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs). Uma vez induzida, a resposta inflamatória está envolvida tanto no processo de lesão visando a eliminação do agente indutor, assim como no reparo tecidual. Diversos receptores estão envolvidos no reconhecimento de PAMPs e DAMPs como os transmembrânicos representados pelos do tipo Toll, e os citosólicos que compreendem complexos proteicos que formam os inflamassomas. Estes complexos multiproteicos citosólicos podem participar da indução da resposta imune inata por ativação de caspase-1 com consequente liberação de IL-1&#946, que pode resultar em morte celular. Considerando o exposto, o objetivo deste trabalho foi estudar a participação de inflamassoma na resposta inflamatória no tecido muscular de injeção das toxinas, a capacidade da BthTX-I e JAR de induzir a ativação de inflamassoma em macrófagos e os mecanismos moleculares envolvidos nesse processo. O estudo da migração de neutrófilos e macrófagos para o músculo gastrocnémio de animais C57BL/6 ou deficientes em caspase 1/11 (Caspase 1/11-/-) ou NLRP3 (NLRP3-/-) injetados com JAR e BthTX-I permitiu verificar que o inflamassoma NLRP3 participa da migração destas células inflamatórias para local de injeção das toxinas. A análise da produção de IL-1&#946 nas culturas de macrófagos peritoneais incubados com JAR e BthTX-I (6 e 24h) mostrou que somente a BthTX-I foi capaz de induzir a secreção desta citocina por um mecanismo dependente de caspase 1/11, ASC e NLRP3 e independente de IPAF. A incubação de macrófagos humanos com as toxinas permitiu verificar que ambas as toxinas induziram a secreção de IL-1&#946 dependente de caspase 1, porém esta produção foi significativamente maior em resposta à BthTX-I. Nos macrófagos peritoneais de camundongos observamos a relação entre a secreção de IL-1&#946 e morte celular em ensaio de incorporação do brometo de etídio nas culturas incubadas com BthTX-I por 24h e não com a JAR. Visto que ambas as toxinas injetadas via intramuscular induzem resposta inflamatória intensa, foi analisado o efeito delas sobre a viabilidade e secreção de IL-6 e MCP-1 em miotubos C2C12. Os resultados mostraram que somente a BthTX-I induz efeito miotóxico sobre esta linhagem celular. Além disso, pudemos verificar que BthTX-I induz altos níveis de IL-6 e MCP-1 quando comparados aos obtidos com a JAR. Visto que a BthTX-I induziu alta secreção de MCP-1 pelos miotubos C2C12, em experimento in vivo realizado em camundongos C57BL/6 ou deficientes em CCR2 (CCR2-/-) pode ser observada a dependência da interação entre MCP-1 e o CCR2 para a migração dos macrófagos em resposta a injeção de BthTX-I. Em culturas de miotubos incubados com as toxinas pôde ser observada alta liberação de ATP induzida pela BthTX-I in vitro. Em outros experimentos foi estudada a capacidade do sobrenadante de miotubos incubados com BthTX-I de induzir a secreção de IL-1&#946 pelos macrófagos in vitro. Os resultados mostraram a produção de IL-1&#946 nessas culturas de macrófagos, assim como a produção desta citocina em macrófagos incubados com BthTX-I juntamente com ATP. A hidrólise do ATP no sobrenadante da cultura de C2C12 estimulada com BthTX-I aboliu a secreção de IL-1 pelos macrófagos in vitro. Além disso, foi observada a inibição da produção de IL-1&#946 nas culturas de macrófagos primados com LPS e incubados com a BthTX-I em condições de altas concentrações de KCl sugerindo papel relevante do efluxo de K+ na produção de IL-1&#946 induzida pela BthTX-I. Em conjunto, os resultados acrescentam novas informações sobre o potencial inflamatório da JAR e BthTX-I, quanto à ação destas toxinas em macrófagos, ativação de inflamassoma e células musculares. / Tissue damage is one of the local effects described in bothropic envenomations. Isolated toxins, such as jararhagin (JAR) and bothropstoxin-I (BthTX-I), obtained from B. jararaca and B. jararacussu venoms, respectively, induce intense inflammatory response and tissue injury, however mediated by distinct mechanisms. As described, resolution of tissue injury involves the interaction between mechanisms of tissue repair and the immune system. In this context, the inflammatory response is initiated by detecting of signs of acute tissue damage due to disorders of homeostasis resulting from distinct agents (DAMPs) and / or recognition of pathogens associated molecular patterns (PAMPs). Once induced, the inflammatory response is involved both in the injury process for the elimination of the pathogenic agent, as well as in the tissue repair. Several receptors are involved in the recognition of PAMPs and DAMPs as the transmembrane receptors such as the Toll-like, and the cytosolic ones that comprise protein complexes - inflammasomes. These cytosolic multiprotein complexes may participate in the induction of the innate immune response by activation of caspase-1 with consequent release of IL-1&#946, which may result in cell death. Thus, we aimed to study the role of inflammasome on the inflammatory response in muscular tissue of JAR and BthTX-I injection, the ability of BthTX-I and JAR to induce the activation of inflammasome in macrophages and the molecular mechanisms involved in this process. The analyses of the neutrophils and macrophages migration in gastrocnemius muscle of C57BL/6 or Caspase 1/11 (Caspase 1/11-/-) or NLRP3 (NLRP3-/-) deficient mice injected with JAR e BthTX-I allow us to verify that NLRP3 inflammasome participates in these cells migration for the local of the toxins injection. The detection of IL-1&#946 on supernatants from macrophage cultures incubated with JAR or BthTX-I (6 e 24h) showed that only BthTX-I was able to induce this cytokine secretion by a mechanism dependent of caspase 1/11, ASC and NLRP3 and independent of IPAF. The incubation of human macrophages with the toxins demonstrated that both toxins induced IL-1&#946 secretion, however this production was significantly higher in response to BthTX-I. On murine macrophage cultures it was verified the correlation between the IL-1&#946 secretion and the cell death in the incorporation of ethidium bromide assay of cultures incubated with BthTX-I during 24h and not with JAR. Since that both toxins injected in the muscle induced intense inflammation, it was analyzed the effect of both toxins on the viability and the secretions of IL-6 and MCP-1 by C2C12 myotubes. The results showed that only BthTX-I induces a myotoxic effect on this cell line. Furthermore, it was verified that BthTX-I induces high secretion of IL-6 and MCP-1 when compared with those induced by JAR. Considering that BthTX-I induces high levels of MCP-1, in in vivo experiment using C57BL/6 and CCR2 deficient (CCR2-/-) mice it was observed that the interaction of MCP-1 and CCR2 is essential for the macrophage recruitment for the toxin injection. High release of ATP was detected in C2C12 myotube cultures incubated with BthTX-I but not with JAR. In another experiments it was studied the ability of the supernatants of C2C12 myotubes incubated with BthTX-I to induce the IL-1&#946 secretion by peritoneal macrophages in vitro. The results showed the IL-1&#946 secretion in the macrophage cultures as well as the cytokne secretion in macrophages incubated with BthTX-I and ATP independent of the priming with LPS. The hydrolysis of the ATP on the supernatants of C2C12 incubated with the BthTX-I abolished the IL-1&#946 production by macrophages in vitro. In addition, it was not observed IL-1&#946 production by macrophages primed with LPS and incubated with BthTX-I in the presence of high concentration of KCl suggesting a relevant role of K&#43 efflux for this cytokine secretion in response to BthTX-I. Taken together, the results show new findings about the inflammatory effect of JAR and BthTX-I, concerning about the action of these toxins on macrophages, inflammasome activation and muscle cell.
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Estudo dos aspectos clínicos e epidemiológicos do escorpionismo na Região Metropolitana de Belém

COELHO, Johne de Souza 27 November 2015 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-18T13:04:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudoAspectosClinicos.pdf: 2259793 bytes, checksum: 716dcd79ff35a0b14f3d83f54b23c3d9 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-11-07T14:11:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudoAspectosClinicos.pdf: 2259793 bytes, checksum: 716dcd79ff35a0b14f3d83f54b23c3d9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-07T14:11:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudoAspectosClinicos.pdf: 2259793 bytes, checksum: 716dcd79ff35a0b14f3d83f54b23c3d9 (MD5) Previous issue date: 2015-11-27 / O escorpionismo ou acidente por escorpião é um problema de saúde pública em todas as regiões brasileiras. Na Região Norte, é o Estado do Pará o que mais notifica a ocorrência de casos. Os municípios da Região Metropolitana de Belém (RMB) são os que mais têm apresentado estudos sobre estes acidentes, porém em poucos casos há comprovação do escorpião agressor. O objetivo principal deste estudo foi determinar os aspectos clínicos e epidemiológicos dos acidentes comprovadamente causados por escorpiões na RMB. Foram realizadas a identificação, a caracterização e a avaliação da importância médica dos escorpiões responsáveis por escorpionismos, doados ao Centro de Informação Toxicológica de Belém (CIT-Belém). Após notificação e atendimento médico das vítimas, foi traçado o perfil clínico e epidemiológico dos acidentados entre janeiro de 2007 a junho de 2015. Os municípios da RMB que apresentaram 55 acidentes comprovadamente causados por escorpião foram Belém (50,9%), Ananindeua (47,3%) e Benevides (1,8%). Os escorpiões identificados são espécies nativas na região: o Tityus obscurus Gervais, 1843 (76%), de cor escura que atinge até 87,95 mm de comprimento e o Tityus silvestris Pocock, 1897 (24%), de cor amarelada com manchas escuras que atinge até 45,84 mm de comprimento. As duas espécies acidentaram as pessoas preferencialmente no ambiente domiciliar e durante o período diurno, as vestimentas eram o local preferencial que ocultava o escorpião T. silvestris antes de ocasionar o acidente (53,8%), enquanto o abrigo mais frequente de T. obscurus foram os frutos (35,5%). Os casos ocorreram com maior frequência em pessoas entre 30 e 44 anos de idade, sendo as mãos o sítio anatômico preferencial da picada, não houve predominância de gênero nos acidentados. A maioria das vítimas de T. obscurus apresentou manifestações locais de envenenamento (83,3%), algumas evoluíram com manifestações sistêmicas (11,9%), todos os acidentados por T. silvestris tiveram manifestações locais e destes 23% evoluíram para quadro clínico de envenenamento sistêmico. Todas as vítimas após atendimento evoluíram para alta com cura total. Concluímos que ocorre escorpionismo na RMB por duas espécies nativas na Amazônia, o T. obscurus e o T. silvestris com diferenças morfológicas e epidemiológicas. É a primeira vez que se relata sintomatologia sistêmica nos envenenamentos por T. silvestris revelando a importância médica desta espécie. Estudos da peçonha desta devem ser realizados para verificar sua real importância em saúde pública. / The scorpionism or accident by scorpion is a public health problem in all Brazilian regions. In the North Region, is the State of Pará which more notifies the occurrence of cases. The municipalities in the Metropolitan Region of Belém (RMB) are that more have presented studies about these accidents, but in a few cases there was evidence the scorpion aggressor. The main objective of this study was to determine the clinical and epidemiological aspects of accidents caused by scorpions in RMB. Were performed the identification, characterization and evaluation of medical importance of scorpions responsible for scorpionisms, donated to the Center for Toxicological information of Belém (CIT-Belém). After notification procedure and medical care of victims, it was traced the clinical and epidemiological profile of the accident victims between January 2007 to June 2015. The municipalities of RMB that presented 55 accidents demonstrably caused by scorpion were Belém (50.9%), Ananindeua (47.3%) and Benevides (1.8%). The scorpions identified are native species in the region: the Tityus obscurus Gervais, 1843 (76%), dark in color that reaches up to 87,95 mm in length and the Tityus silvestris Pocock, 1897 (24%), yellowish with dark spots that reaches up to 45,84 mm of length. The two species injured people preferably into domicile and during the day, the garments were the common location that hid the scorpion T. silvestris before cause the accident (53.8%), while the most frequent shelter of T. obscurus were the fruits (35.5%). The cases occurred with greater frequency in individuals between 30 and 44 years of age, being hands the most common anatomical site for stings, there was no predominance of gender in victims. The majority of victims to T. obscurus presented local manifestations of poisoning (83.3%), some have evolved with systemic manifestations (11.9%), all the victims by T. silvestris had local manifestations and of these 23% evolved to clinical condition of systemic poisoning. All victims after answer evolved to high with total cure. We conclude that occurs scorpion envenomation in RMB by two native species in the Amazon, T. obscurus and T. silvestris with morphological differences and epidemiological characteristics. It is the first time that reports systemic symptoms in poisoning by T. silvestris revealing the medical importance of this species. Studies of the poison of this should be carried out to check their real importance in public health.
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Intoxicação por Ipomoea spp. em ruminantes na Ilha de Marajó

TORTELLI, Fábio Py 09 February 2009 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-02-03T21:23:11Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_IntoxicacaoIpomoeaRuminantes.pdf: 4833600 bytes, checksum: b2c0edd4ee6e5d2653d9520e66b75d22 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2014-02-04T11:48:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_IntoxicacaoIpomoeaRuminantes.pdf: 4833600 bytes, checksum: b2c0edd4ee6e5d2653d9520e66b75d22 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-04T11:48:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_IntoxicacaoIpomoeaRuminantes.pdf: 4833600 bytes, checksum: b2c0edd4ee6e5d2653d9520e66b75d22 (MD5) Previous issue date: 2009 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / Na Ilha de Marajó, embora exista grande quantidade de I. asarifolia e I. carnea subsp. fistulosa, não há relatos de intoxicação por essas plantas em caprinos, ovinos e bubalinos. A intoxicação por I. asarifolia foi observada nessa região somente em bovinos (Barbosa et al. 2005). O objetivo do presente trabalho foi descrever a intoxicação por em bovinos e ovinos e a intoxicação por I. carnea subsp. fistulosa em caprinos na Ilha de Marajó, sendo constituído de dois capítulos: Capitulo I- Intoxicação por Ipomoea carnea subsp. fistulosa (Convolvulaceae) em caprinos na Ilha de Marajó; e Capítulo II- Intoxicação por Ipomoea asarifolia (Convolvulaceae) em ovinos e bovinos na Ilha de Marajó.
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Anticorpos aviários como reagentes para o diagnóstico da intoxicação humana por organofosforados / Avian antibodies as reagents for diagnosis of human poisoning by organophosphorus

Brum, Beatriz Coutinho January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2011-05-04T12:36:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010 / Os agrotóxicos são substâncias usadas para exterminar pragas ou doenças que causam danos às plantações. Os organofosforados são agrotóxicos responsáveis por 70 por cento das intoxicações ocupacionais e atuam inibindo a enzima acetilcolinesterase por meio da fosforilação do aminoácido serina do sítio ativo. Existem diversos métodos de diagnóstico para monitorar a exposição a estes compostos, tais como: identificação e análise quantitativa de compostos livres noplasma; identificação e análise quantitativa de metabólitos na urina; determinação da atividade de colinesterases no plasma ou no sangue total. Entretanto, estas metodologias possuem algumas limitações, como por exemplo, a falta de especificidade, tecnologias de análise caras e variações interindividuais (sexo, idade, etc.). Uma tentativa de contornar estas limitações na quantificação da atividade de colinesterases é o desenvolvimento de metodologias baseadas na detecção da enzima fosforilada através de técnicas imunoquímicas. Este estudo teve como objetivo desenvolver um método de imunoensaio para o diagnóstico rápido da exposição humana aos organofosforados pela detecção deacetilcolinesterase inibida no sangue humano por anticorpos aviários produzidos contra uma sequência de aminoácidos ao redor da serina fosforilada do centro catalítico da enzima. Para isto, foram adquiridos dois decapeptídeos sintéticos correspondentes ao sítio catalítico "não fosforilado" (SOH) e outro com o resíduode serina fosforilado (SOP). Estes peptídeos foram conjugados com albumina bovina de soro (BSA), injetados em galinhas poedeiras da raça Isa-Brown e anticorpos IgY foram obtidas das gemas dos ovos das galinhas imunizadas. A especificidade dos anticorpos IgY anti-SOH e anti-SOP foi testada por meio de métodos ELISA constatando-se que estes anticorpos reconhecem os peptídeos livres, os peptídeos conjugados com BSA e a própria BSA. Além disso, ocorreu uma significativa reação cruzada, ou seja, os anticorpos IgY anti-SOH e anti-SOP não conseguiram diferenciar os peptídeo SOH e SOP. Estes resultados não permitem a indicação destes anticorpos para o desenvolvimento de métodos para diagnóstico de intoxicação. / Pesticides are chemical substances used to control plagues and diseases in plantations. Organophosphates are the pesticides involved in 70% of the occupational intoxications and act inhibiting the enzyme acetylcholinesterase by phosphorylation of the serine residue of catalytic centre. There are several methods for monitoring the exposition to these compounds, as so: identification and assay the free compounds into plasma; identification and assay metabolites into urine; cholinesterases assay into plasma or blood. However, these methods have some limitations, as for example lack of specificity, expensive analytical technologies and inter-individual variety (sex, age, etc.). One way to outline these limitations on cholinesterase assay is the development of methods based on phospho-enzyme detection by imunochemical techniques. This study have had the objective to developing an imuno-assay method for rapid diagnosis of human exposition to organophosphorus compounds by imuno-detection of inhibited acetylcholinesterase using aviary antibodies produced against a peptide sequence of the catalytic centre around phospho-serine residue. Two synthetic decapeptides were bought: one with the sequence of "not-phosphorylated" catalytic centre (SOH) and another with a serine-phosphorylated residue. These peptides were conjugated with bovine serum albumin (BSA), injected into Isa-Brown hens and antibodies IgY were isolated from egg yolk of immunized hens. The specificity of IgY anti-SOH and anti-SOP was tested using ELISA methods showing that these antibodies recognize free peptides, conjugated peptides and BSA. In addition, there was a significant cross reaction, or in other words, the antibodies IgY anti- SOH and anti-SOP failed on differentiate the peptide SOH and SOP. These results do not allow the indication of these antibodies for developing methods for intoxication diagnosis.
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Intoxicações por agroquímicos no Brasil: análise temporal das características epidemiológicas. / Intoxications by agrochemicals in Brazil: temporal analysis of epidemiological characteristics.

QUEIROZ, Paulo Roberto. 04 June 2018 (has links)
Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-06-04T15:19:55Z No. of bitstreams: 1 PAULO ROBERTO QUEIRÓS - DISSERTAÇÃO PPGSA PROFISSIONAL 2016..pdf: 918901 bytes, checksum: 6b56904527605057f88b6008ef2a279f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-04T15:19:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PAULO ROBERTO QUEIRÓS - DISSERTAÇÃO PPGSA PROFISSIONAL 2016..pdf: 918901 bytes, checksum: 6b56904527605057f88b6008ef2a279f (MD5) Previous issue date: 2016 / O agronegócio no Brasil tem causado importantes transformações no território, com impactos significativos sobre a saúde humana em função da intensa utilização de agrotóxicos. Dentre estes impactos sobre a saúde humana, um dado preocupante é o aumento da incidência de intoxicação por agrotóxico (agrotóxico e agrotóxico de uso agrícola) em todo o país. O objetivo do estudo é analisar a incidência de intoxicações por agrotóxicos e as características epidemiológicas no Brasil, no período de 2001 a 2014. Trata-se de um estudo ecológico, de séries temporais, bem como descritivo. Os dados foram submetidos a tratamento estatístico através do modelo de regressão polinomial, teste MannWhitney e Teste Kruskal-Wallis, para estas análises, foi adotado um nível de significância de 5%. Utilizou-se também, análise estatística descritiva simples. A análise dos dados foi realizada pelo programa SPSS 20.0®. Foram notificados 80.069 casos de intoxicação por agrotóxico no período de 2001 a 2014, apresentando um crescimento linear exponencial de intoxicação por agrotóxico nesta população, cuja taxa de intoxicação foi de 0.377. No período, as Regiões Sul e Centro-Oeste apresentaram as maiores taxas de intoxicação. Em relação ao comportamento da circunstância da intoxicação, houve relação significativa para a tentativa de suicídio. Quanto à intoxicação por agrotóxico de uso agrícola, foram notificados 25.106 casos no período de 2007 a 2014. Neste período, houve um crescimento linear significativo de intoxicação por agrotóxico de uso agrícola nesta população, cuja taxa de intoxicação foi de 0.1644. No período, houve comportamento heterogêneo entre as taxas de incidência por unidades federativas, todavia, as taxas indicam crescimento por todas as regiões do Brasil. Das dimensões sócio-demográficas, a maioria das intoxicações ocorreram no Brasil em vitimas na faixa etária 20-59 anos (74,7%), sexo masculino (71,0%.), de pele branca (43,8%), zona urbana (54,1%), com apenas o ensino fundamental (42,4%). Para os aspectos relacionados à intoxicação, a maioria das intoxicações por agrotóxicos de uso agrícola no Brasil indicou a circunstância tentativa de suicídio (38,2 %), cura sem sequela (82,3%) e a exposição aguda-única (78,7%). Nesse sentido, o país precisa aprimorar as políticas voltadas a intoxicação por agrotóxico desenvolvendo medidas eficazes para a prevenção e diagnóstico precoce das pessoas intoxicadas. Em longo prazo, cabe desenvolver novos estudos para compreender se as medidas tomadas foram eficazes para reduzir as tendências e percentuais apontadas neste estudo. / Brazilian’s agribusiness has caused important transformation around the country, with significant impacts on human health due to the big use of pesticides. Among these impacts due the human health, the increased toxicity about pesticides (pesticides and agricultural pesticides) in Brazil is concerning. The objective of this study is to analyze the incidence of pesticide poisoning and epidemiological characteristics in Brazil, from 2001 to 2014. This is an ecological study, time series, as described. Data were analyzed statistically by polynomial regression model, Mann-Whitney test and Kruskal-Wallis test. These analyzes it adopted a 5% significance level. Also it was used descriptive statistical analysis simple. For the processing of the data was used SPSS 20.0® program. 80,069 cases of pesticide poisoning were reported in the period 2001-2014, with an exponential linear growth of poisoning by pesticides in this population, whose poisoning rate was 0.377. During the period, the South and the Midwest had the highest intoxication rates. Regarding the behavior of the condition of intoxication, there was a significant relationship to the suicide attempt. As for the pesticide poisoning of farm sweat, 25,106 cases were reported from 2007 to 2014. During this period, there was a significant linear growth of poisoning by pesticides for agricultural use in this population, whose poisoning rate was 0.1644. That moment, there were divergent behavior between the incidence rates for federal units, however, the rates show growth in all regions of Brazil. Sociodemographic dimensions, most poisonings occurred in Brazil in victims aged 20-59 years (74.7%), male (71.0%.), White skin (43.8%), area urban (54.1%), just primary education (42.4%). The analysis of socio-demographic dimensions of Regions indicated most of intoxication of victims of pesticide use in agriculture in the age group 20-59 years old in the Southeast (74.8%), male in the Southeast Region (72.7% ). Brown-skinned individuals were more frequent in the North, Northeast and Midwest while, in the Southeast and South, there was a higher percentage for white skinned individuals, urban exposure zone (55.7%) in the Southeast and elementary school (56.3%) in the South. For aspects related to intoxication, most poisonings from pesticide poisoning in Brazil indicated the circumstance suicide attempt (38.2%), healing without sequelae (82.3%) and acute-single exposure (78.7%). The evaluation of aspects related to poisoning by pesticide use in agriculture by Region indicated the attempted suicide as the most frequent in the Northeast (60.5%), without sequel healing in the South (87.7%) and acute-single in Southeast (76.6%). Therefore, the country needs to improve policies to poisoning by pesticides, developing effective measures for the prevention and early diagnosis of intoxicated people. In the future, it must be developing new studies to understand if the measures taken have been effective in reducing the tendencies and percentages cited in this study.
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Contribuição à investigação das alterações hemostáticas induzidas pelo veneno da serpente Bothrops jararaca em coelhos: estudo das glicoproteínas da membrana, função, secreção e sobrevivência plaquetárias. / Contribution to the investigation of hemostatic disturbances induced by Bothrops jararaca snake venom in rabbits: study of platelet membrane glycoproteins, function, secretion and survival.

Santoro, Marcelo Larami 15 May 2002 (has links)
Que o envenenamento pela serpente Bothrops jararaca causa distúrbios hemorrágicos sistêmicos, com alteração da coagulação e fibrinólise sangüíneas, é notório. Contudo, pouco se sabe sobre a ação in vivo desse veneno sobre as plaquetas. Em estudos recentes, demonstrou-se que esse veneno causa trombocitopenia, distúrbios da agregação e diminuição do número de corpos densos plaquetários, que, dessarte, sugeriam a ativação das plaquetas circulantes. Com o escopo de comprovar esta hipótese e melhor caracterizar as ações in vivo desse veneno sobre as plaquetas, serviu-se de um modelo experimental que empregava coelhos para o envenenamento pela B. jararaca. No grupo experimental, os animais foram injetados i.v. com o veneno da B. jararaca (60 µg/kg) e no grupo controle com salina. Previamente à administração de salina ou veneno, os coelhos tiveram suas plaquetas marcadas ex vivo com NHS-biotina. Para a avaliação das alterações plaquetárias, amostras de sangue foram coletadas seqüencialmente, em intervalos de tempo que variaram de 1 a 144 horas após a administração do veneno ou salina. Durante o envenenamento, houve trombocitopenia, hipofibrinogenemia, elevação dos níveis plasmáticos do fator de von Willebrand, diminuição da função plaquetária no sangue total induzida pela botrocetina e pelo colágeno e diminuição da secreção de ATP. Não obstante, os níveis plasmáticos de fator plaquetário 4, um marcador específico da ativação plaquetária in vivo, e os níveis intraplaquetários de serotonina se mantiveram constantes. Pela citometria de fluxo, observou-se um decréscimo significativo da expressão do epítopo da GPIIb-IIIa reconhecido pelo anticorpo monoclonal P2, porém isso não foi observado ao utilizar-se anticorpos policlonais. A expressão de fibrinogênio ou dos produtos de degradação do fibrinogênio/fibrina (PDF) na membrana plaquetária também não sofreu alteração significativa ao longo do tempo. Houve, todavia, elevações significativas da P-selectina plaquetária, um receptor cuja expressão é indicativa de ativação plaquetária, e do epítopo induzido por ligantes (LIBS1) da GPIIIa. A porcentagem de plaquetas reticuladas na circulação, assim como os tempos de sobrevivência plaquetária, não foram estatisticamente diferentes entre os dois grupos. As análises histológicas e imuno-histoquímicas dos órgãos dos coelhos mostraram que as plaquetas circulantes são retidas entre redes de fibrina nos capilares pulmonares. Os resultados obtidos sugerem que a trombina engendrada pelos componentes pró-coagulantes deste veneno desempenha uma função essencial na patogenia dos distúrbios da coagulação e plaquetários observados neste modelo de envenenamento. O aumento da expressão de P-selectina no grupo experimental comprovou a hipótese inicial de que as plaquetas dos coelhos envenenados são verdadeiramente ativadas na circulação. Os dados ora apresentados demonstram definitivamente que a diminuição do fibrinogênio ou o aumento dos PDF não são a causa fundamental da disfunção plaquetária observada no envenenamento botrópico e que outro(s) composto(s) parece(m) estar envolvido(s) com estes distúrbios plaquetários. / In spite of being well established that Bothrops jararaca snake venom causes blood coagulation and fibrinolysis disturbances in patients, scant information about blood platelet disorders during envenomation is available. In recent investigations, thrombocytopenia, platelet aggregation disturbances and decreased numbers of platelet dense bodies were observed following venom administration, suggesting that circulating platelets had been activated. In order to prove this hypothesis and to gain a better characterization of the in vivo role of this venom on platelets, an experimental model of B. jararaca envenomation was utilized. Rabbits were injected i.v. either with B. jararaca venom (60 µg/kg) (experimental group) or saline (control group). Previously to saline or venom administration, rabbit platelets were labeled ex vivo with NHS-biotin. To evaluate platelet disturbances, blood samples were collected consecutively, at time intervals that varied from 1 to 144 hours after venom or saline administration. During envenomation, there were thrombocytopenia, hypofibrinogenemia, elevation of von Willebrand factor plasma levels, reduced botrocetin- and collagen-induced platelet aggregation in whole blood, and decreased ATP secretion. However, plasma levels of platelet factor 4, a specific marker of in vivo platelet activation, and intraplatelet serotonin levels remained constant. By flow cytometry, a significant decrease on the expression of GPIIb-IIIa epitope recognized by P2 monoclonal antibody was observed; however, this was not observed when polyclonal antibodies were employed. Fibrinogen or fibrin(ogen) degradation product (FDP) expression on platelet surface showed no significant alteration. Nonetheless, significant elevations of platelet P-selectin, a receptor whose expression is indicative of platelet activation, and of ligand-induced binding sites (LIBS1) of GPIIIa were noted. The percentage of circulating reticulated platelets, as well as platelet survival times, were not statistically different between the two groups. Histopathological and immunohistochemical analyses of rabbit organs demonstrated that circulating platelets were sequestered among fibrin deposits in pulmonary capillaries. These results suggest that thrombin generated by procoagulating components of B. jararaca venom has an essential role in the pathogenesis of platelet and coagulation disorders in this experimental model. Increased expression of P-selectin in the experimental group proves the initial hypothesis that platelets of envenomed rabbits are indeed activated in the circulation. The data presented herein demonstrate definitively that decreased fibrinogen or increased FDP levels are not the primary cause of the platelet dysfunction observed in bothropic envenomation, but other substances seem to be responsible for it.

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