Orientador: Vânia Regina Nicoletti / Coorientador: Marília Gonçalves Cattelan / Banca: Izabela Dutra Alvim / Banca: Maria Aparecida Mauro / Resumo: O óleo essencial de orégano é conhecido por suas propriedades antimicrobianas, porém trata-se de uma mistura de compostos voláteis sensíveis à luz, ao oxigênio e à temperatura e que podem ser facilmente degradados. A encapsulação permite a sua proteção, estendendo sua vida útil e promovendo sua liberação controlada. O objetivo deste trabalho foi estudar a influência do método de encapsulação e material de parede e, consequentemente da morfologia das partículas, na cinética de liberação do óleo essencial de orégano em um meio líquido com condições análogas à uma solução de marinação, bem como avaliar se os processos de recobrimento por interação eletrostática com concentrado proteico de soro de leite e liofilização influenciam na liberação do composto ativo. As partículas produzidas por gelificação iônica apresentaram capacidades de carga e retenção entre 64,19 e 78,64 % e 57,58 e 73,26 %, respectivamente, enquanto as partículas produzidas por coacervação complexa apresentaram capacidade de retenção entre 64,58 e 66,12 % e eficiência de encapsulação entre 88,84 e 90,84 %. Enquanto o processo de liofilização diminuiu o diâmetro médio e tornou a superfície das partículas irregulares, acelerando a liberação do óleo, o processo de recobrimento não teve interferência significativa na cinética de liberação. As partículas produzidas por ambos os processos demoraram entre 420 e 660 minutos para liberar 95 % ou mais do óleo retido. Durante o processo de liberação, as amostras não... / Abstract: Oregano essential oil is known for its antimicrobial properties; however, it is a mixture of volatile compounds sensitive to light, oxygen, and temperature, and that can be easily degraded. Encapsulation allowed its protection, extending its shelf life and promoting its controlled release. The objective of this work was to evaluate the influence of the encapsulation method and wall material, and consequently the particle morphology, in the release kinetics of oregano essential oil in a liquid medium with conditions analogous to a marinating solution, as well as to evaluate if the electrostatic interaction with whey protein concentrate and freeze-drying processes have influence on the release of the oil. Particles produced by ionic gelation presented loading and retention capacities between 64.19 and 78.64 % and 57.48 and 73.26 %, respectively, while particles produced by complex coacervation presented a retention capacity between 64.58 and 66.12 % and encapsulation efficiency between 88.84 and 90.84 %. Whereas the freeze-drying process decreased the mean size and made the particle surfaces to become irregular, accelerating the oil release, the coating process did not have significative interference in the release process. Particles produced by both processes took between 420 and 660 minutes to release 95 % or more of the trapped oil. During the release process, samples did not show dissolution or erosion; however, particles produced by ionic gelation undergone swelling and ... / Mestre

Orientador: Ary Fernandes Júnior / Banca: Maria de Lourdes Ribeiro da Cunha / Banca: Rosemeire Cristina Lianhri Rodrigues Pietro / Resumo: A pesquisa por novas drogas antimicrobianas tem aumentado, seja na indústria farmacêutica e também na indústria de alimentos. Isso acontece devido ao aumento no número de bactérias resistentes aos antimicrobianos, e a busca por conservantes alimentares que possibilitem o aumento na vida de prateleira dos alimentos. O interesse por alimentos mais saudáveis, especialmente aqueles sem adição ou com quantidades reduzidas de aditivos químicos, vem aumentando constantemente. Os produtos naturais, especialmente os de origem microbiana e de espécies vegetais são considerados fontes importantes para o desenvolvimento de novos antimicrobianos. O trabalho teve como objetivo avaliar a ação antibacteriana de óleos essenciais de plantas, seus compostos majoritários, a ação antibacteriana da nisina (bacteriocina produzida por Lactococcus lactis) e a ação antibacteriana da combinação desses compostos majoritários com a nisina em meio de cultura e no leite. Inicialmente foi avaliado o potencial antibacteriano com a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) dos óleos essenciais de orégano (Origanum vulgare), tomilho (Tymus vulgaris), cravo da índia (Syzygium aromaticum) e canela (Cinnamomun zeylanicum) e respectivos compostos majoritários carvacrol, timol, eugenol e cinamaldeído, e da nisina sobre cepas padrões ATCC de bactérias de importância na área de alimentos: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli O157 ATCC 43895, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterococcus faecalis ATCC 10100, Listeria monocytogenes ATCC 15313, Aeromonas hydrophila ATCC 7966 e Lactobacillus rhamnosus ATCC 9595 utilizando a metodologia da microdiluição em meio de Mueller Hinton Caldo (MHC). Em alguns casos a atividade inibidora dos óleos essenciais foi maior que a atividade do seu respectivo composto isolado, e em outros a atividade inibidora do composto isolado foi maior que ... / Abstract: The research for new antimicrobial drugs has increased in a pharmaceutical industry as well as in the food industry. This happens due to the increase in the number of bacteria resistant to antimicrobial agents, and the search for food preservatives which make possible the increase in the shelf life of foods. The interest in healthier foods, especially those without addition or with reduced amounts of chemical additives is increasing constantly. The natural products, especially of microbial origin and plant species are considered important sources for the development of new antimicrobial. This study purpose to evaluate the antibacterial activity of essential oils from plants, their major compounds, the antibacterial action of nisin (bacteriocin produced by Lactococcus lactis) and the antibacterial activity of the combination of these major compounds with nisin in culture medium and in milk. First was evaluated antimicrobial activity with determination of minimum inhibitory concentration (MIC) of the essential oils of oregano (Origanum vulgare), thyme (Tymus vulgaris), clove (Syzygium aromaticum) and cinnamon (Cinnamomun zeylanicum) and their major compounds carvacrol , thymol, eugenol and cinnamaldehyde, and nisin on ATCC strains of bacteria of importance in the food industry: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli O157 ATCC 43895, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterococcus faecalis ATCC 10100, Listeria monocytogenes ATCC 15313, Aeromonas hydrophila ATCC 7966 and Lactobacillus rhamnosus ATCC 9595 using the microdilution method in Mueller Hinton Broth medium (MHC). In some cases the inhibitory activity of essential oils has been higher than the activity of the respective isolated compound, and in others the inhibitory activity of the compound isolate was greater than that of the respective essential oils, whereas nisin was active against Gram-positive bacteria and a lower inhibitory ... / Mestre

Orientador: Márcia Ortiz Mayo Marques / Banca: Ling Chau Ming / Banca: Ademir Farias Morel / Resumo: A espécie Lychnophora pinaster, espécie microendemica do Cerrado brasileiro, encontra-se na categoria vulnerável da lista vermelha das espécies ameaçadas de extinção da flora de Minas Gerais. Amplamente utilizada na medicina popular, esta espécie sofre o impacto do constante extrativismo desordenado e a degradação do seu ambiente natural. O objetivo deste tabalho foi avaliar a influência de duas épocas de colheita (verão e inverno) no rendimento e na composição química dos óleos essenciais de populações nativas de Lychnophora pinaster Mart e caracterizar morfologicamente as folhas e os tricomas glandulares, gerando informações relevantes para potencial uso da espécie. Foram amostradas três populações nativas de L. pinaster, oriundas dos municípios de Carrancas, Lavras e Itumirim no Estado de Minas Gerais. O óleo essencial das folhas de cada indivíduo foi extraído por hidrodestilação e analisados em cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massas (CG-EM, Shimadzu, QP-5000). Para a caracterização da anatomia foliar foram selecionadas folhas jovens e adultas de um indivíduo proveniente do banco de germoplasma localizado em Campinas-SP. Foram analisadas lâminas permanentes e semi-permanentes e realizados testes histoquímicos para identificar e localizar as principais classes químicas dos metabólitos presentes nas folhas. Todo o laminário obtido foi analisado em microscópio Olympus BX41 equipado com câmera digital Olympus C7070. As análises da morfologia do indumento foliar foram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Lychnophora pinaster Mart is one of the microendemical species of the Brazilian Cerrado and it is in the vulnerable category of the Red List of endangered species of the Minas Gerais flora. Widely used in folk medicine, this species suffers the impact of constant non-organized extractivism and degradation of its natural environment. The objective of this research was to evaluate the influence of two harvest seasons (summer and winter) on the yield and chemical composition of the essential oil from native populations of L. pinaster and the morphological characterization of the leaves and glandular trichomes, generating relevant information about the potential use of the species. Was sampled three native populations of L. pinaster, at Carrancas, Lavras and Itumirim localities in the State of Minas Gerais (Brazil). The essential oil from the leaves of each individual was extracted by hydrodistillation and analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS, Shimadzu QP-5000). To characterize the leaf anatomy, old and young leaves were selected 4 from a single plant of the Campinas-SP germoplasm bank. We analyzed permanent and semipermanent slides and histochemical tests were performed to identify and locate the main chemical classes of metabolites present in the leaves. The entire slide collection obtained was analyzed in Olympus BX41 microscope equipped with Olympus C7070 digital camera. The morphological analysis of the leaf indumentum was performed in scanning electron microscope (SEM), FEI Quanta 200 (Philips). The results of seasonality showed no significant difference in the average yield of the essential oil production within populations, but we observed a lower average yield of essential oil in the population from Carrancas. Trans-methyl cinnamate and trans-caryophyllene were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Vera Lúcia Mores Rall / Banca: Ary Fernandes Júnior / Banca: Carlos Henrique Camargo / Resumo: A mastite bovina é uma inflamação da glândula mamária das vacas, causando perdas econômicas na bovino-cultura leiteira e Staphylococcus aureus é um dos micro-organismos mais comumente isolado nesse tipo de doença. A produção de biofilmes por S. aureus constitui um importante fator de virulência e contaminação desse micro-organismo, envolvendo a adesão da bactéria em superfícies sólidas. Neste trabalho foram testados os óleos essenciais de Syzygium aromaticum (OESA) e Cinnamomum zeylanicum (OECZ) e seus compostos majoritários, eugenol e cinamaldeído, quanto à atividade sobre a formação de biofilmes em cepas de S. aureus, em diferentes superfícies. Os resultados demonstraram inibição significativa (p<0,05) da produção de biofilme pelo OESA em superfície de poliestireno e aço inox (69,4% e 63,6%, respectivamente). Entretanto, seu composto majoritário, o eugenol, não apresentou a mesma eficácia, reduzindo a formação em apenas 52,8% em poliestireno e 19,6% em aço inox (p>0,05). Por outro lado, o OECZ e seu composto majoritário, cinamaldeído, reduziram significativamente a capacidade de produção de biofilme, tanto em superfícies de poliestireno (74,7% e 69,6%, respectivamente) quanto em superfície de aço inox (45,3% e 44,9%, respectivamente). Pela significante redução da produção de biofilme por OESA, OECZ e cinamaldeído, em baixa concentração, estas substâncias podem ser consideradas, como princípio ativo, na produção de sanitizantes na indústria de alimentos / Abstract: Bovine Mastitis is an inflammation of the mammary gland of cows causing economic losses in dairy cattle and Staphylococcus aureus is one of the microorganisms most commonly isolated in this kind of disease. The production of biofilms by S. aureus is an important virulence factor and spreed of this microorganism, involving the adhesion of bacteria on solid surfaces. In this work we tested the essential oils of Syzygium aromaticum (OESA) and Cinnamomum zeylanicum (OECZ) and their major compounds, eugenol and cinnamaldehyde, as the activity on biofilm formation in strains of S. aureus on different surfaces. The results showed a significant inhibition (p <0.05) for the biofilm production on the by OESA on polystyrene and stainless steel surface (69.4% and 63.6 %, respectively). However, its major compound, eugenol, did not show the same effectiveness, reducing in only 52.8 % and 19.6 % in polystyrene stainless steel (p > 0.05). On the other hand, OECZ and its major compound, cinnamaldehyde, reduced significantly the capacity of biofilm production, both in polystyrene (74.7% and 69.6%, respectively) and on the of stainless steel surfaces (45.3% and 44.9%, respectively). Due to the significant reduction of biofilm production by OESA, OECZ and cinnamaldehyde, at low concentration, these substances may be considered as active ingredient, in the production of sanitizers in the food industry / Mestre

Orientador: Crispin Humberto Garcia-Cruz / Coorientador: Rejeana Márcia Santos Lima / Banca: Vidiany Aparecida Queiroz Santos / Banca: Vanildo Luiz Del Bianchi / Banca: Marília Gonçalves Cattelan / Banca: Edson José Fragiorge / Resumo: Os óleos essenciais obtidos de plantas medicinais vêm sendo ressaltados ao longo das décadas e sua eficácia tem sido evidenciada por pesquisadores de todo mundo, devido ao seu efeito antibacteriano. Objetivou-se avaliar a atividade antibacteriana de óleos essenciais extraídos por hidrodestilação e determinar a composição química por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) de cinco plantas medicinais dentre elas alecrim (Rosmarinus officinalis L.), capim-limão (Cymbopogon citratus (D. C.) Stapf), cravo-da-índia (Caryophyllus aromaticus L.), eucalipto (Eucalyptus citriodora H.) e manjericão (Ocimum basilicum L.), selecionadas em mercados e/ou feiras livres de São Luís - MA. Para tanto, os testes microbiológicos foram utilizados seis cepas bacterianas da American (ATCC): Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 10876) e Enterococcus faecalis (ATCC 29212) Gram-positivas além de Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella enterica sorotipo Choleraesuis (ATCC 12011) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027) Gram-negativas e comparados com antimicrobiano padrão. As Concentrações Mínimas Inibidoras (MIC) utilizadas foram 25, 50, 75 e 100µɡ/mL. Os resultados da atividade antibacteriana in vitro com os halos de inibição das espécies bacterianas selecionadas, foram analisadas sobre teste de ANOVA, utilizando-se o Delineamento em Blocos ao Acaso, contendo cinco tratamentos, em dois blocos sendo possível constatar a não existência de diferença estatística... / Abstract: Essential oils obtained from medicinal plants have been highlighted over the decades and their efficacy has been evidenced by researchers around the world due to their antibacterial effect. The objective of this study was to evaluate the antibacterial activity of essential oils extracted by hydrodistillation and to determine the chemical composition by gas chromatography coupled to mass spectrometry (CG/MS) of five medicinal plants such as rosemary (Rosmarinus officinalis L.), lemon grass (Cymbopogon citratus (DC) Stapf), clove (Caryophyllus aromaticus L.), eucalyptus (Eucalyptus citriodora H.) and basil (Ocimum basilicum L.), Selected in markets and/or free fairs of São Luís - MA. For this purpose, six bacterial strains of Grampositive American Type Culture Colletion (ATCC): Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 10876) and Enterococcus faecalis (ATCC 29212) were used in addition to Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella enterica serotype Choleraesuis (ATCC 12011) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027) Gram-negative and compared with standard antimicrobial. The Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) used were 25, 50, 75 and 100μɡ/mL. The results of the in vitro antibacterial activity with the inhibition halos of the selected bacterial species were analyzed on the ANOVA test, using the randomized block design, containing five treatments, in two blocks and it was possible to verify the existence of statistical difference In variables (p≤0,05). For lemongrass essential oil, especially for Staphylococcus aureus and Bacillus cereus with a concentration of 75μɡ/mL. The essential oil of the clove reached a result against Staphylococcus aureus with a concentration of 25μɡ/mL and the other bacteria Bacillus cereus, Escherichia coli and Salmonella enterica serotype Choleraesuis with 50μɡ/mL, being Pseudomonas aeruginosa at the concentration of ... / Doutor

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this work was to study the effects of the essential oil of Lippia sidoides, nanoformulated (OEN), on microbiological counts, chemical composition, fermentative losses and aerobic stability of corn silage. The experiment was conducted at the experimental farm (Campus Rural) of the Federal University of Sergipe (UFS), located in the municipality of São Cristovão / SE, Brazil. The design was completely randomized in a 4x3 factorial scheme with five replications. The treatments were composed of four levels of essential oil addition of lippia sidoides nanoformulated (0, 100, 400 and 700 mg kg-1) in the natural material (MN) and three silage opening times (15, 30 and 45 days after closure of the silo). Sixty experimental mini silos were used, totaling 12 treatments with five replicates. The addition of 700 mg kg-1 of OEN reduces the development of Clostridium, fungi, yeast and controls the development of enterobacteria in the early days of silage, also reduces the level of effluents reducing nutrient leaching. For fungi and yeast, the level of 700 mg kg-1 was also the one that showed better responses in relation to the control, inhibiting their growth with a minimum reduction of 0.9 log ufc g-1. It was not observed the effect of the inclusion of OEN in the chemical composition, making evident the capacity of the oil in the conservation of the chemical components of the forage after the fermentation process. The aerobic stability was not directly influenced by the OEN addition, but showed a significant difference (P <0.05) for the variables accumulated temperature and maximum temperature as a function of the days of opening. The essential oil of Lippia sidoides nanoformulated presents potential as an alternative to the use of additives in corn silage, however more studies are needed. / Objetivou-se no presente trabalho estudar os efeitos do óleo essencial de Lippia sidoides, nanoformulado (OEN), na contagem microbiológica, composição química, perdas fermentativas e estabilidade aeróbia da silagem de milho. O experimento foi conduzido na fazenda experimental (Campus Rural) da Universidade Federal de Sergipe (UFS), localizado no município de São Cristovão/SE, Brasil. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 4x3 com cinco repetições. Os tratamentos foram compostos quatro níveis de adição de óleo essencial de Lippia sidoides nanoformulado (0, 100, 400 e 700 mg kg-1) na matéria natural (MN) e três tempos de abertura do silo (15, 30 e 45 dias, após fechamento do silo). Foram utilizados 60 mini silos experimentais totalizando 12 tratamentos com cinco repetições. A adição de 700 mg kg-1 de OEN reduz o desenvolvimento de Clostridium, fungos, leveduras e controla o desenvolvimento de enterobactérias nos primeiros dias de ensilagem, também reduz o nível de efluentes diminuindo o lixiviamento de nutrientes. Para fungos e leveduras, o nível de 700 mg kg-1 também foi o que mostrou melhor respostas em relação ao controle inibindo o crescimento dos mesmos com uma redução mínima de 0,9 log ufc g-1. Não foi observado efeito da inclusão do OEN na composição química, deixando evidente a capacidade do óleo na conservação dos componentes químicos da forragem após o processo fermentativo. A estabilidade aeróbia não foi influenciada de forma direta com a adição do OEN, porem mostrou diferença significativa (P<0,05) para as variáveis temperatura acumulada e temperatura máxima em função dos dias de abertura. O óleo essenciais de Lippia sidoides nanoformulado apresenta potencialidade como alternativa ao uso de aditivos na silagem de milho, porém mais estudos são necessários. / São Cristóvão, SE

Orientador: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Banca: Noeli Pereira Rocha / Banca: Marcos José Salvador / Banca: Marcelo Aparecido Silva / Banca: Percilia Cardoso Giaquinto / Resumo: Artrite reumatóide (AR) é uma doença auto-imune, crônica, inflamatória e sistêmica cuja etiologia não é totalmente conhecida e até o presente, não existe cura. Esta doença é caracterizada pela inflamação simétrica e progressiva das juntas sinoviais que resulta em uma erosão óssea e da cartilagem. Apesar de todos os inconvenientes causados pelas drogas anti-inflamatórias não esteroidais (DAINE), estas constituem a base da pirâmide no tratamento da AR e são os medicamentos mais prescritos no início do tratamento da AR. A prevalência de úlceras gástricas e duodenais, dentre os usuários crônicos das DAINE, está acima de 20%, dentre estes, cerca de 4% desenvolvem complicações graves. Outro fato muito relevante na prevalência da AR é que pacientes com AR e usuários de DAINE são muito mais susceptíveis as úlceras gástricas causadas por DAINE do que os usuários comuns destes anti-inflamatórios. A partir de resultados obtidos anteriormente foi demonstrado que o óleo essencial de Citrus aurantium (OEC) e o limoneno (LIM), seu constituinte majoritário, apresentaram atividade gastroprotetora frente á úlceras gástricas induzidas por DAINE além de uma ação cicatrizante na mucosa gástrica de ratos. Sendo assim, os objetivos iniciais deste trabalho foram de avaliar a ação gastroprotetora e cicatrizante do OEC e LIM na mucosa gástrica de ratos artríticos e também avaliar a atividade anti-inflamatória destes compostos per si e em associação com uma DAINE em modelos de inflamação aguda e crônica (artrite reumatóide). Para isso foram realizados modelos de inflamação aguda induzida por diferentes agentes pró-inflamatórios (carragenina, histamina, bradicinina, serotonina, e substância P) além do modelo de inflamação crônica (artrite reumatóide) induzida por colágeno. Para avaliar a atividade destes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Doutor

Orientador: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Coorientador: Lúcia Regina Machado da Rocha / Banca: Luiz Borges Bispo-da-Silva / Banca: Patrícia Fidelis de Oliveira Gregolini / Resumo: O presente trabalho investigou o efeito do óleo essencial de Citrus aurantium L. (OEC) em modelos experimentais de infarto do miocárdio em ratos. Para tanto, foram analisados parâmetros enzimáticos, séricos, morfológicos e funcionais de ratos submetidos à indução de infarto por isoproterenol. Foram analisados também parâmetros morfológicos de corações de animais tratados com OEC, posteriormente submetidos à isquemia/reperfusão in vitro. O OEC foi administrado oralmente por 7 dias na dose de 250 mg/kg. Nos dois últimos dias de tratamento, foi aplicado isoproterenol (2x100 mg/kg, a cada 24 horas) ou salina (2 mL/kg). Foram feitas medidas bioquímicas de injúria do miocárdio, através da dosagem sérica de CK-MB, AST, ALT, ureia, creatinina, colesterol total, que foram significativamente elevadas nos ratos infartados, apesar dos mesmos não apresentarem alterações nos parâmetros funcionais avaliados (pressão arterial e pressão intraventricular). A análise morfológica feita pelo método de coloração com TTC verificou presença de lesão isquêmica nos animais tratados com isoproterenol, assim como alterações na estrutura do miocárdio, observadas em cortes histológicos. O OEC não foi eficaz em evitar os parâmetros alterados pelo isoproterenol, assim como não preveniu contra os danos induzidos pela isquemia/reperfusão in vitro. O estudo conclui que o pré-tratamento com OEC não foi eficaz na cardioproteção nos modelos experimentados / Abstract: The effect of treatment with Citrus aurantium essential oil (OEC) on rat models of experimental myocardial infarct was evaluated. Rats were treated with OEC 250mg/kg (p.o.) for 7 days and the infarct was induced by isoproterenol administration (100mg/kg, sc) on treatment days 6 and 7. Twenty four hours after the second isoproterenol injection the rats were killed and the enzymatic, serum, heart morphological and functional parameters were evaluated. Isoproterenol administration increased significantly the level of biochemical markers of myocardial (CK-MB, total cholesterol), liver (AST, ALT) and kidney (urea, creatinine) injury and induced myocardial damage and necrosis as evaluated by histopathological evaluation and TTC staining, respectively. No functional impairment was observed in the Langendorff perfused rat hearts from isoproterenol-treated animals. The OEC treatment was not able to prevent or attenuate the isoproterenol-induced myocardial lesion or any of the biochemical and morphological changes accompanying the infarct. In addition, hearts from OEC treated rats were not protected from the myocardial lesion induced by in vitro ischemia-reperfusion. The results obtained in the two different models of myocardial infarct show that OEC (250mg/kg) administration has no cardioprotective effect / Mestre

Orientador: Eunice Oba / Coorientador: Álan Maia Borges / Banca: Fernanda da Cruz Landim / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: Luiz Sérgio de Almeida Camargo / Banca: Moysés dos Santos Miranda / Resumo: Esta pesquisa pretendeu estabelecer estratégias para aumentar a eficiência da produção in vitro de embriões (PIVE) bubalinos. Neste contexto, avaliou a eficiência de protocolos de sincronização de doadoras de oócitos bubalinas visando aumentar a disponibilidade e qualidade dos oócitos obtidos pela aspiração folicular guiada por ultrassom (OPU) e o efeito da fonte de obtenção dos oócitos sobre a quantidade e qualidade dos mesmos. Além disso, analisou-se o efeito do fotoperíodo sobre a quantidade e qualidade do oócitos disponíveis, além da competência destes expressos pelas taxas de PIVE. Por fim, avaliou-se o efeito da adição do óleo essencial de Lippia origanoides (OELO) nas concentrações de 2,5; 5,0 e 10μg/mL, no meio de maturação in vitro (MIV) sobre as taxas de maturação oocitária, qualidade embrionária e PIVE em bovinos e bubalinos. Ovários e oócitos de animais não protocolados, protocolados por aspiração prévia dos folículos e protocolados com uso de hormônios esteróides e gonadotróficos, foram avaliados ultrassonograficamente e de acordo com a qualidade dos oócitos recolhidos por OPU. Demonstrou-se não haver variação na população folicular, no número e na qualidade dos oócitos recuperados por sessão, exceto uma redução dos folículos e oócitos Grau A foi notada quando o ciclo estral foi sincronizado por aspiração prévia dos folículos(p<0,05). Em relação a fonte de obtenção, para todos parâmetros avaliados, foi notada superioridade quando oócitos são recuperados de ovários de frigorífico(p<0,05). A qualidade dos oócitos recolhidos por OPU e a PIVE bubalinos foi influenciada pelo fotoperíodo na região estudada, elevando-se durante os meses de baixa luminosidade(p<0,05), fato não observado em bovinos. Por fim, a partir de avaliações da cromatina com DAPI, encontrou-se uma elevação da taxa de maturação nuclear em bovinos quando utilizou-se concentrações de... / Abstract: This study aimed to develop strategies to increase the efficiency of buffalo in vitro embryo production (IVEP). In this context, we evaluated the efficiency of synchronization protocols on buffalo oocyte donor aimed at increasing the availability and quality of oocytes obtained by ovum pick-up (OPU) and the effect of the source of obtaining oocytes on the quantity and quality. In addition, we analyzed the effect of photoperiod on the quantity and quality of oocytes available on ovary, beyond the competence of those expressed by the blastocyst rate. Finally, we evaluate the effect of essential oil of Lippia origanoides (EOLO) added at concentrations of 2.5, 5.0 and 10μg/ml, on in vitro maturation (IVM) media over oocyte maturation rate, embryo quality and IVEP on cattle and buffalo. Ovaries and oocytes of animals without protocol, protocol by prior aspiration of follicles and protocol with use of steroids and gonadotropic hormones were evaluated by ultrasonography and according to the of oocyte quality. It was demonstrated not vary the follicular population, number and quality of oocytes retrieved per session between the protocols but a reduction of follicles and Grade A oocytes was noted when the follicles were aspirated previously OPU. Regarding the oocyte source (live animals and abattoir ovaries), all evaluated parameters showed superiority when oocytes were derived from abattoir ovaries. The quality of oocytes collected by OPU and IVEP buffaloes was influenced by photoperiod in the region studied, increased when daylight decreases, which was not observed in cattle. Finally, from evaluations of chromatin stained with DAPI, it was found that bovine nuclear maturation rate increased when used concentrations of 2,5μg/ml EOLO. The quality of oocytes, expressed by cell number, increased when used concentrations of 2.5 and 5μg/ml of EOLO in buffaloes. Although it has not changed the blastocyst rate of PIVE in both species, the EOLO has ... / Doutor

Pela crescente utilização das plantas medicinais e óleos essenciais na prevenção e tratamento de enfermidades, embasados nas propriedades antibacterianas, antifúngicas e antioxidantes é que objetiva-se com o presente trabalho identificar a composição e atividade antioxidante dos óleos essenciais de Lavandula angustifolia, Pogostemon cablin, Rosmarinus officinalis, Thymus vulgaris, Hedyosmun brasiliense, Psidium guajava, Baccharis dracunculifolia e Schinus terebinthifolius, bem como avaliar o potencial antibacteriano in vitro frente Staphylococcus aureus; Salmonella enteretidis;Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa e a atividade antifúngica in vitro frente o Fusarium graminearum.Os óleos e as cromatografias foram obtidos por hidrodestilação com parcerias externas. A atividade antibacteriana foi determinada por meio da microdiluição em caldo. Enquanto que a atividade antifúngica dos óleos de Baccharis dracunculifolia e Pogostemon cablin foi determinada por solubilização dos óleos no meio de cultura e dispondo um disco miceliar de F. graminearum. A atividade antioxidante foi determinada pela ação sequestradora do radical 1-difenil-2-picrilidrazina (DPPH). Como resultados obtiveram-se as constituições dos óleos essenciais principalmente por monoterpenos como 32,5% de cânfora no óleo de Rosmarinus officinalis, 47,0% de timol no óleo de Thymus vulgaris, 31,5% de patchulol em Pogostemon cablin; e ésteres como 40,1 % de acetato de lanalina no óleo de Lavandula angustifolia. Nos óleos das plantas nativas, a composição foi basicamente de sesquiterpenos como 17,58% de cis trans_nerolidol no óleo de Baccharis dracunculifolia, 31,6% de germacreno B no Hedyosmun brasiliense; 16,1% de α-selineno no óleo de Psidium guajava e 18,6% de α-bergamoteno no de Schinus terebinthifolius. A atividade antibacteriana do óleo de Thymus vulgaris, apresentou os resultados mais efetivos, com concentrações inibitórias mínimas (CIM) e concentrações bactericidas mínimas (CBM) de 0,195 e 1,56 µl/mL frente S. aureus; 0,195 e 50 µl/mL respectivamente para S. enteritidis; para E. coli a CIM foi de 0,390 µl/mL e CBM 0,780 µl/mL e para P. aeruginosa 0,780 e 12,5 µl/mL. As atividades antifúngicas foram determinadas frente ao F. graminearum tendo o Pogostemon cablin (8,0 µl/mL), no tempo 96 h inibido 80,0% do fungo. A atividade antioxidante do óleo essencial de Pogostemon cablin foi superior aos demais, com 12,08 µmol trolox/mL-1 de atividade sequestradora do radical. Sugere-se que os óleos de Lavandula angustifólia, Thymus vulgaris, Rosmarinus officinalis, Baccharis dracunculifolia, Psidium guajava e Schinus terebinthifolius, podem ser utilizados no combate de infecções causadas por S. aureus, E. coli, S. enteritidis e mais estreitamente por P. aeruginosa. E que o óleo de Pogostemon cablin possa servir como agente antifúngico frente ao fitopatógeno F. graminearum, além do óleo de Thymus vulgaris desempenhar importante atividade antioxidante. / The growing use of medicinal plants and essential oils in order to prevent and carrie the diseases treatment, based on the antibacterial, antifungal and antioxidant properties is that the aim of this work, whichs ought to identify the composition and antioxidant activity of some essential oils as Lavandula angustifolia, Pogostemon cablin, Rosmarinus officinalis, Thymus vulgaris, Hedyosmun brasiliense, Psidium guajava, Baccharis dracunculifolia and Schinus terebinthifolius, as well as evaluate the antibacterial potential in vitro against Staphylococcus aureus; Salmonella enteretidis; Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa and antifungal activity in vitro againt Fusarium graminearum. The oils and chromatographies were obtained by hydrodistillation through external partnerships. While the antifungal activity of Baccharis dracunculifolia and Pogostemon cablin oils laying out a mycelial disc of F. graminearum. The scavenging activity of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical. As a result It was obtained the constitutions of essential oils mainly monoterpenes with 32.5 % of camphor in the Rosmarinus officinalis oil, 47 % of thymol in Thymus vulgaris, 31.5% of patchoulol in Pogostemon cablin; and esters with 40.1% of lanalin acetate in the Lavandula angustifolia oil. In the native plants oils the composition was basically of sesquiterpenes. Such as 17.58% of cis trans nerolidolin the Baccharis dracunculifolia oil; 31.6% of germacrene B in the lemon balm; 16.1% α-selinene in the Psidium guajava oil and 18.6% of α-bergamotene in the Schinus terebinthifolius.. The antibacterial activity of Thymus vulgaris oil has shown the most effective results, with minimal inhibitory concentration (MIC) and minimum bacterial concentration (MBC) of0.195 e 1.56 µL.mL-1 against S. aureus; and 0.195 e 50 µL.mL-1respectively for S. enteritidis; and for E. coli, the MIC was 0,390 µL.mL-1and MBC 0.780 µL.mL-1 and for P. aeruginosa 0.780 and 12.5 µL.mL- 1.The antifungal activities were determined against F. graminearum with Pogostemon cablin (8.0 μL.mL-1) during the period of 96h, It has inhibited 80.0% of the fungus. The antioxidant activity of the Pogostemon cablin essential oil was higher than the others with 12.08 µmol trolox/mL-1 radical scavenging activity. Based on this study, It is suggested that oils as Lavandula angustifólia, Thymus vulgaris, Rosmarinus officinalis, Baccharis dracunculifolia, Psidium guajava and Schinus terebinthifolius, can be used against infections caused by S. aureus, E. coli, S. enteritidis and more closely by P. aeruginosa. Also it was found out that Pogostemon cablin oil may serve as an antifungal agent against the phytopathogen F. graminearum. Moreover, the thyme oil can play an important antioxidant activity.