A laserterapia em baixa intensidade (LLLI) é uma nova metodologia com comprovada eficácia na formação e na diminuição da reabsorção óssea, porém ainda não existe uma padronização quanto à sua utilização, sendo, portanto, necessários mais estudos para investigar o efeito de diferentes parâmetros como o comprimento de onda, duração da aplicação e número de sessões. Este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da LLLI em defeitos ósseos críticos em calvária de ratas Wistar com modelo experimental para osteoporose. A qualidade do tecido ósseo neoformado foi analisada por meio da microscopia de luz, e por meio da estereologia, foram estimados os seguintes parâmetros: volume do tecido de reparação do defeito (Vtr - μm3), densidade de volume das trabéculas (Vvt), volume total das trabéculas ósseas neoformadas (Vtot - μm3), densidade numérica de osteócitos (Nvost - μm-3), número total de osteócitos (Ntoost), volume médio dos osteócitos (Vnost - μm3), densidade de superfície das trabéculas (Svt - μm-1) e superfície de área das trabéculas (Sαt - μm2). A quantidade total de colágeno também foi analisada (Ac - μm2). Foram utilizadas 54 ratas que foram submetidas à ovariectomia bilateral. Após 150 dias, foram realizados defeitos ósseos na calvária. Os animais foram divididos em 9 grupos (n=6) e 24 horas após a confecção do defeito iniciou-se o tratamento com laser de Arseneto Gálio-Alumínio (AsGaAl; 780 nm). Os Grupos 1, 2 e 3 (G1, G2 e G3) receberam a dose ou densidade de energia de 0 J/cm2, 20 J/cm2 e 30 J/cm2 respectivamente, por 3 sessões; os grupos 4, 5 e 6 (G4, G5 e G6) receberam 0 J/cm2, 20 J/cm2 e 30 J/cm2 respectivamente, por 6 sessões e os grupos 7, 8 e 9 (G7, G8 e G9) receberam 0 J/cm2, 20 J/cm2 e 30 J/cm2 respectivamente, por 12 sessões. Comparando os grupos G2 e G1 os resultados estereológicos foram significantes para Vtr (p=0,023), Vvt (p=0,003), Vtot (p=0,04), Ntoost (p=0,048), Svt (p=0,000), Sαt (p=0,001) e Ac (p=0,000). Na comparação de G3 e G1 encontrou-se resultados significantes para Vvt (p=0,002) e Vtot (p=0,02). Na comparação de G5 e G4 os resultados foram significantes para Svt (p=0,041) e Sαt (p=0,043) e na comparação de G6 e G4 os resultados foram significantes para Vtr (p=0,005), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,011), Svt (p=0,034), Sαt (p=0,028) e Ac (p=0,001). A comparação de G8 e G7 mostrou que a Sαt foi significante (p=0,047) e na comparação entre G9 e G7 os resultados foram significantes para Vtr (p=0,014), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,024), Svt (p=0,042), Sαt (p=0,014) e Ac (p=0,023). Pôde-se concluir que houve neoformação óssea nos grupos que receberam as doses de 20 e 30 J/cm2 quando comparados com os respectivos grupos controles, porém, ao longo do tempo, a dose de 30 J/cm2 mostrou parâmetros estereológicos melhores quando comparada à dose de 20 J/cm2 / Low-level laser irradiation (LLLI) is a new methodology with proven clinical benefits in increased formation and decreased resorption of bone, however, the use of LLLI still needs to be clarified and standardized. Therefore, more studies are needed to analyze the effects of different parameters, such as wavelength, duration of application and number of sessions. This study aimed to assess the effects of LLLI on critical bone defects in rat calvaria used as an experimental model of osteoporosis. Light microscopy was used to analyze the quality of newly formed bone tissue and stereology was used to calculate the following parameters: tissue repair volume (Vtr - μm3), volume density of trabecular bone (Vvt), total volume of newly formed trabecular bone (Vtot - μm3), numerical density of osteocytes (Nvost - μm-3), total number of osteocytes (Ntoost), mean volume of osteocytes (Vnost - μm3), surface density of trabecular bone (Svt - μm-1) and area surface of trabecular bone (Sαt - μm2). The total amount of collagen was also examined (Ac - μm2). Fifty-four Wistar rats were subjected to bilateral ovariectomy. The bone defects were created in calvaria after 150 days. The animals were divided into 9 groups (n=6) and 24 hours after creating the defect, the treatment started with 780nm low intensity gallium-aluminum-arsenide (GaAlAs) laser: Groups 1, 2 and 3 (G1, G2 and G3) received the energy density of 0 J/cm2, 20 J/cm2 and 30 J/cm2 respectively, in 3 sessions; Groups 4, 5 and 6 (G4, G5 and G6) received 0 J/cm2, 20 J/cm2 and 30 J/cm2 respectively, in 6 sessions; Groups 7, 8 and 9 (G7, G8 and G9) received 0 J/cm2, 20 J/cm2 and 30 J/cm2 respectively, in 12 sessions. For the comparison between groups G2 and G1, the results obtained were significant for Vtr (p=0,023), Vvt (p=0,003), Vtot (p=0,04), Ntoost (p=0,048), Svt (p=0,000), Sαt (p=0,001) and Ac (p=0,000). For the comparison between G3 and G1, the results were significant for Vvt (p=0,002) and Vtot (p=0,02). For the comparison between G5 and G4, the results were significant for Svt (p=0,041) and Sαt (p=0,043) and for the comparison between G6 and G4, the results were significant for Vtr (p=0,005), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,011), Svt (p=0,034), Sαt (p=0,028) and Ac (p=0,001). The comparison between G8 and G7 was significant for Sαt (p=0,047) and for the comparison between G9 and G7, the results were significant for Vtr (p=0,014), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,024), Svt (p=0,042), Sαt (p=0,014) and Ac (p=0,023). In conclusion, there was new bone formation in the groups that received doses of 20 and 30 J/cm2 when compared with the respective control groups, but over time, the dose of 30 J/cm2 showed better stereological parameters when compared to 20 J/cm2

Orientador: Valeria Helena Alves Cagnon Quitete / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-05T09:34:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_CesarAlexandreFabrega_D.pdf: 8130788 bytes, checksum: 3f9894f04fafdeae064bae417ac67424 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Os efeitos nocivos da nicotina nos diferentes sistemas orgânicos foram relatados em diferentes estudos. Todavia, seus efeitos sobre o sistema genital masculino permanecem obscuros. Assim, o objetivo do presente estudo foi analisar as alterações histológicas, histoquimícas e ultra-estruturais associadas ao estudo morfométrico no lobo ventral da próstata de ratos submetidos à administração crônica de nicotina, estabelecer relações entre essas alterações e as doenças píOstáticas e avaliar os níveis de testosteíOna circülantes no soro. Vinte ratos machos Wistar (Rattus norvergicus) foram divididos em dois grupos experimentais: grupo I nicotina que recebeu 0,125mg /100g de peso corpóreo/diariamente de nicotina e o grupo II controle que recebeu solução fisiológica pela mesma via por 90 dias. Após o período experimental, os animais foram anestesiados e os pesos testiculares, da glândula de coagulação e vesícula seminal foram aferidos. Amostras do lobo ventral das próstatas provenientes dos diferentes grupos foram coletadas, processadas e submetidas às análises: histológica, histoquímicas e ultra-estruturais de transmissão e varredura. Os resultados mostraram que os pesos dos testículos, das vesículas seminais e das glândulas coaguladoras não diferiram significativamente entre os grupos experimentais. As células epiteliais secretoras do lobo ventral da próstata apresentaram-se atrofiadas, além da ocorrência de neoplasia intra-epitelial prostática (NIP), presença de micro-ácinos e diminuição da expressão da fosfatase ácida nas regiões supranuc1ear e apical. Também, foi observada desorganização das organelas envolvidas no processo secretor glandular. No estroma, houve aumento das fibras colágenas e reticulares, amplo pregueamento da membrana basal, células musculares lisas com fenótipo secretor. Assim, conclui-se que a nicotina promove drásticas alterações tanto no epitélio secretor como no estroma da próstata ventral, prejudicando o funcionamento da mesma. Além disso, conclui-se que a nicotina é um agente indutor de lesões pré-malignas podendo contribuir como um fator de risco para desenvolvimento de doenças na glândula prostática / Abstract: The harrnful effects of nicotine on different organ systems have been reported in various experimental and clinical studies. However, its effects on the male genital system remain obscure. Thus, the aim of the present study was to analyze the histological, histochemical and ultrastructural alterations, following by stereology, of the ventral lobe of the prostate of rats submitted to chronic nicotine administration. Also, it was established the relationships between these changes and prostate diseases. Twelve male Wistar rats (Rattus norvegicus) were divided in two experimental groups: group I (nicotine) in wich each rodent, received daily subcutaneously injections of 0.125 mg nicotinell 00 body weight and group II (control) whose rodents received only injections of physiologic saline by the same route for 90 days. Body weight, food and water intake were measured throughout the experimento At the end of the experimental period, the animals were anaesthetized and testicular, coagulation gland and seminal vesicle gland weights were determined. Samples of the ventral prostate obtained ITom the two groups were collected, processed and submitted for histological, histochemical and ultrastructural analyses by transmission and scanning electron microscopies. The results showed no significant differences in testicular, seminal vesicle and coagulation gland weights between the groups. In the nicotine group, the secretory epithelial cells of the ventral lobe of the prostate were atrophied, in addition to the occurrence of prostatic intraepithelial neoplasia, micro-acini and reduced expression of acid phosphatase in the supranuclear and apical cellular regions. Disorganization of organelles involved in the glandular secretory process followed by plasmatic membrane destructuring was also observed. The stroma showed increased collagen and reticular fibers, infolded basal membrane and smooth muscle cells which demonstrated secretory feature. In conclusion, nicotine caused drastic alterations not only in the secretory epithelium but also on the stroma of the ventral prostate lobe, compromising its function. Furtherrnore, nicotine also induced premalignant lesions in the prostatic gland, thus representing a risk factor for the deveIopment of prostate pathlogy / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-17T11:06:11Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Cacilda S. Y. Mallmann.pdf: 3158977 bytes, checksum: 98919264cd60f9ac2f5553060b4c6c44 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-17T11:06:24Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Cacilda S. Y. Mallmann.pdf: 3158977 bytes, checksum: 98919264cd60f9ac2f5553060b4c6c44 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-17T11:06:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Cacilda S. Y. Mallmann.pdf: 3158977 bytes, checksum: 98919264cd60f9ac2f5553060b4c6c44 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-17T11:06:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Cacilda S. Y. Mallmann.pdf: 3158977 bytes, checksum: 98919264cd60f9ac2f5553060b4c6c44 (MD5) Previous issue date: 2015-03-30 / Sjögren's syndrome (SS) is a chronic inflammatory disease that affects the epithelial tissue of exocrine secretion glands, characterized by immunological changes as the infiltration of salivary and lacrimal glands by CD4 + T lymphocytes and B lymphocytes and the presence of autoantibodies against nuclear antigens. Genetic, hormonal and environmental factors are also important in its pathogenesis. In its diagnosis are used different criteria approved by the American College of Rheumotology (ACR) and the European Call Against Rheumatism (EULAR) which include semi-quantitative histological examination of samples of minor salivary glands sublabial processed in paraffin and stained with hematoxylin-eosin (foci scores; 50 lymphocytes/4 mm2). From the experimental point of view, this method is susceptible to bias, since it is based on an extremely limited area of tissue to be analyzed and has the potential to result in lower precision and accuracy. In an attempt to minimize such bias this proposal aims to standardize quantitative morphometric measurements in minor salivary gland biopsies (GSM) in SS suspected patients using stereological tools free of systematic bias, therefore, to ensuring precision and accuracy in morphometry. Such tools allow the detection of minimal morphological changes that would otherwise be overlooked by semi-quantitative assessment of routine. To this end, 10 biopsies of female patients suspected of having SS were histologically processed and embedded in acrylic resin hydroxyethyl methacrylate (Technovit 7100, Heraues-Kulzer, Germany). The blocks containing the biopsy fragments were randomly oriented to allow obtaining isotropic sections (Orientator). Serial sections (6-13/biopsy) were stained with eosin hematoxylin and Harrys. Fields of view chosen in a uniform, systematic and random way were photographed and analyzed quantitatively using appropriate software (IMOD 4.5/Stereology). Based on the criteria for the diagnosis of SS by the ACR, patients were divided into Group Non-SS (N = 4; 0-1 satisfied criterion) and SS group (N = 6; 2-3 criteria met). In evaluating the density of the components of GSMs (t-test), there was a significant increase in the proportion of lymphocytes in the SS group (p = 0.033). The other components showed no significant changes. The number of lymphocytes (p=0.025) and lymphoplasmacytic infiltrates (p = 0.038) were increased in the SS group, but no significant change was observed in the number of plasma cells and the volume of GSMs between groups. The CE of GSM Cavaliere volume remained below 5%. The number of evaluated sections influences the precision and accuracy of the results. There is no correlation between pathological score and stereological evaluation of lymphocytic infiltrates. The SS group was characterized by the presence of positive values for the Anti-SSA antibodies/Anti- SSB, high focal score and reduced dry score. We conclude that quantitative analysis of GSM by stereology provides detailed information that can implement and complement the laboratory and clinical findings in the diagnosis of Sjögren's syndrome. / No diagnóstico da Síndrome de Sjögren (SS) usamos os critérios aprovados pela American College of Rheumotology (ACR), que é uma doença inflamatória crônica do tecido epitelial das glândulas de secreção exócrina. É caracterizada por alterações imunológicas como a infiltração das glândulas salivares e lacrimais por linfócitos T CD4+ e linfócitos B e pela presença de autoanticorpos contra antígenos nucleares. Do ponto de vista experimental, as metodologias envolvidas nesta caracterização são suscetíveis ao viés, visto que se baseiam em uma área extremamente restrita de tecido a ser analisado e têm o potencial de gerar resultados com baixa precisão e acurácia. A proposta neste trabalho foi padronizar medidas morfométricas usando estereologia na glândula salivar menor (GSM) de pacientes suspeitos de SS afim de garantir precisão e acurácia na determinação de SS. Para tal, 10 biópsias de mulheres foram processadas histologicamente e incluídas em resina acrílica. Seções seriais (6-13/biópsia) foram coradas após a fragmentação da biópsia em blocos orientados ao acaso, para permitir a obtenção de seções isotrópicas (orientator). Campos de vista escolhidos de forma uniforme, sistemática e ao acaso foram fotografados em Estereomicroscópio Digital System e analisados quantitativamente. Aplicando os critérios da ACR para SS, houve segregação dos pacientes em Grupo Não-SS e Grupo SS. Na avaliação da densidade de volume dos componentes das GSMs (test-t) houve um aumento significativo na proporção de linfócitos do Grupo SS (p = 0,033). Os demais componentes não apresentaram alterações significativas. O número de linfócitos (p = 0,025) e infiltrados linfoplasmocitários (p = 0,038) estiveram aumentados no Grupo SS, contudo nenhuma alteração significativa foi observada no número de plasmócitos e no volume das GSMs entre os grupos. Na determinação do volume da GSM o coeficiente de erro manteve-se abaixo de 5%. O número de seções avaliadas influencia a precisão e acurácia dos resultados. Não há correlação entre os dados patológicos e o estereológico na avaliação dos infiltrados linfocitários. Concluímos que a análise estereológica fornece informações detalhadas que podem implementar e complementar os achados no diagnóstico da Síndrome de Sjögren.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-29T19:50:46Z No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-29T19:51:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-29T19:51:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-07-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present work evaluated the impact of parasitism on hematological and biochemical parameters in the rearing of tambaqui (Colossoma macropomum) and tissue damage caused by Acanthocephala infection Neoechinorhynchus buttnerae. To reach these objectives a total of 42 tambaqui specimens were collected in commercial fish culture. Of these, 32 fish were used to identify the metazoan parasites and characterization of the hematological and biochemical profile; While 10 specimens (5 parasitized and 5 non-parasitized) were used for the application of stereological techniques in the morphometric investigation of the changes caused by the presence of acanthocephals (N. buttnerae) in the intestine of tambaqui (Colossoma macropomum). Of the analyzed fish, 100% were parasitized, being 100% by Monogenea helminths and acantocephalans, 59.38% by copepod crustaceans and 53.13% by branchiura. The highest mean intensity was of Acanthocephala, followed by monogenetic, copepods and branchiura. The species of helminths identified were: Anacanthorus spathulatus, Mymarothecium boegeri and Notozothecium janauachensis (Monogenea) and Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala). There was a significant positive correlation between fish weight and hematocrit (Ht), hemoglobin (Hb), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (HCM), as well as between total length and MCV, HCM. For the condition factor, as well as Ht and Hb a negative correlation with Copepoda parasites was observed. There was a significant negative correlation between Acanthocephala and the parameters Ht, Hb, thrombocytes and glucose, as well as between Monogenea and glucose, indicating that the hemogram could be influenced by endogenous factors such as length and body weight of the fish, as well as by parasitism, affecting the health status of tambaquis. Regarding the evaluation of the tissue damage, using a stereological tool, the portions of the intestine were classified into 7 regions, according to how the loops are naturally loosened in the coelomic cavity. As regards the mean volume of the intestinal layers (mucosa, submucosa, muscular and serous), the increase in mucosa volume was statistically significant in regions 3, 4 and 5. In these regions, the average parasitic load was approximately 34 parasites / region. In the evaluation of the intestinal layers of tambaqui, the mucosa layer was the most affected by the presence of acanthocephala, and a significant difference could be observed between all regions analyzed in the comparison of parasitized and non-parasitized groups, while the submucosa presented significant leukocytes infiltrate in regions 2, 3 and 4 in the parasitized fish. The muscular showed leukocytes infiltrate in regions 2, 3 and 5 of the parasitized group. There was relevant muscular edema only in regions 2 and 5 of the parasitized group. It should be noted that the surface area of the mucosa was not altered in the parasitized fish, suggesting that the absorption at the villi level was not altered. Therefore, the tambaquis evaluated presented moderate infestation by metazoan parasites, capable of weakening the hosts as observed through hematological and biochemical alterations; it is further added that the intestinal mucosa layer of tambaqui was affected by the presence of N. buttnerae, and that despite the damage observed the surface area of the mucosa, the main site of nutrient absorption, was preserved. / O presente trabalho avaliou o impacto do parasitismo sobre os parâmetros hematológicos e bioquímicos na criação de tambaqui (Colossoma macropomum) e os danos teciduais provocados pela infecção por acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae. Para alcançar esses objetivos um total de 42 exemplares de tambaqui foram coletados em piscicultura comercial. Destes, 32 peixes foram utilizados para identificação dos parasitos metazoários e caracterização do perfil hematológico e bioquímico; enquanto 10 exemplares (5 parasitados e 5 não parasitados) foram utilizados para aplicação de técnicas estereológicas na investigação morfométrica das alterações provocadas pela presença de acantocéfalos (N. buttnerae) no intestino de tambaqui (Colossoma macropomum). Dos peixes analisados, 100% estavam parasitados, sendo 100% por helmintos Monogenea e acantocéfalos, 59,38% por crustáceos copépodos e 53,13% por branquiúros. A maior intensidade média foi de acantocéfalos, seguida por monogenéticos, copépodos e branquiúros. As espécies de helmintos identificadas foram: Anacanthotus spathulatus, Mymarothecium boegeri e Notozothecium janauachensis (Monogenea) e Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala). Foi observada correlação positiva significativa entre peso dos peixes e os valores de hematócrito (Ht), hemoglobina (Hb), volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), bem como entre comprimento total e VCM, HCM. O fator de condição, Ht e Hb foram negativamente correlacionados com parasitos Copepoda. Houve correlação negativa significativa entre Acantocephala e os parâmetros Ht, Hb, trombócitos e glicose, bem como entre Monogenea e glicose, indicando que o hemograma pode ser influenciado por fatores endógenos como o comprimento e o peso corporal dos peixes, assim como pelo parasitismo, afetando a saúde de tambaquis. Já com relação à avaliação do dano tecidual, com emprego de ferramenta estereológica, as porções do intestino foram classificadas em 7 regiões, de acordo como as alças estão naturalmente enoveladas na cavidade celomática. No que se refere ao volume médio das camadas intestinais (mucosa, submucosa, muscular e serosa), o aumento no volume da mucosa foi estatisticamente significativo nas regiões 3, 4 e 5. Nessas regiões, a carga parasitária média foi de aproximadamente 34 parasitos/região. Na avaliação dos danos nas camadas intestinais do tambaqui, a camada mucosa foi a mais afetada pela presença de acantocéfalos, podendo ser verificada diferença significativa entre todas as regiões analisadas na comparação dos grupos parasitados e não parasitados, enquanto a submucosa apresentou infiltração leucocitária significativa nas regiões 2, 3 e 4 nos peixes parasitados. A muscular apresentou infiltrado leucocitário nas regiões 2, 3 e 5 do grupo parasitado. Houve edema muscular relevante apenas nas regiões 2 e 5 do grupo parasitado. Destaca-se ainda que a área superficial da mucosa não foi alterada nos peixes parasitados, o que sugere que a absorção no nível dos vilos não foi alterada. Portanto, os juvenis de tambaqui avaliados apresentaram infestação moderada por parasitos metazoários, capazes de debilitar os hospedeiros como observado através das alterações hematológicas e bioquímicas; acrescenta-se ainda que a camada mucosa intestinal de tambaqui foi afetada pela presença de N. buttnerae, e que apesar dos danos observados a área superficial da mucosa, principal sítio de absorção de nutrientes, foi preservada.

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2016-12-06T16:54:56Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bruno César Ferreira Gonzaga - 2016.pdf: 2851863 bytes, checksum: 3316d056c52b9a8ca6ed7608909e2b80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-12-13T15:35:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bruno César Ferreira Gonzaga - 2016.pdf: 2851863 bytes, checksum: 3316d056c52b9a8ca6ed7608909e2b80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-13T15:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bruno César Ferreira Gonzaga - 2016.pdf: 2851863 bytes, checksum: 3316d056c52b9a8ca6ed7608909e2b80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-09-30 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The Brachiaria grass, with broad geographic distribution in Brazil, has been shown to cause photosensitization and appearance of foamy macrophages in the liver and liver and mesenteric lymph nodes of ruminants. Weight loss of 2.52% in cattle with subclinical hepatogenous photosensitization was documented and it is estimated that in one year in a single slaughterhouse more than R$ 100,000 in annual losses are caused by liver damage resulting from consumption of Brachiaria spp. The aim of this study was to corelate the extent of liver parenchyma containing foamy macrophages with hot carcass weight of cattle. Carcasses of cattle aged 20-36 months were weighed and divided into two groups: Group 1 (544.87-607.13 pounds) and Group 2 (689.42-757.24 pounds) The livers of bovines were weighed and samples of the right lobe were collected for histopathologic analysis. The areas of hepatic parenchyma containing foamy macrophages were measured using the ImageJ® program. Statistical analysis of the parameters (liver weight, hot carcass weights and affected area of liver tissue) was performed quantitatively, by calculating the mean, standard deviation and coefficient of variation. These data were analyzed for normality and homogeneity of variances, through the Kolmogorov-Smirnov and Bartlett tests. As the variables were homogeneous and had a normal distribution were evaluated by parametric test analysis of variance. The correlation of variables was performed by Spearman test. The significance level was set at 5% and all descriptive analyzes were performed by EXCEL program and statistical tests by the software R. Cattle grazing Brachiaria spp. presented hepatic lesions characterized by degeneration, necrosis, presence of mild inflammatory infiltrates and small area of hepatic tissue containing foamy macrophages. There was no influence of the affected area of the hepatic parenchyma containing foamy macrophages with hot carcass weight of cattle. / O capim braquiária, com ampla distribuição geográfica no Brasil, vem sendo apontado como causa de fotossensibilização e do aparecimento de macrófagos espumosos no fígado e linfonodos hepáticos e mesentéricos de ruminantes. Foram relatadas perdas de peso na ordem de 2,52% em bovinos com fotossensibilização hepatógena subclínica e estimou-se que mais de R$ 100.000 em perdas anuais por lesões hepáticas em apenas um frigorífico fosse decorrente do consumo de Brachiaria spp. O objetivo deste estudo foi correlacionar a extensão do parênquima hepático contendo macrófagos espumosos com o peso de carcaça quente dos bovinos. As carcaças dos bovinos, com idade entre 20 a 36 meses, foram pesadas e distribuídas em dois grupos: Grupo 1 (247,15 a 275,39 kg) e Grupo 2 (312,72 a 343,48 kg). Os fígados dos bovinos foram pesados e amostras do lobo direito coletadas para análise histopatológica. As áreas do parênquima hepático contendo macrófagos espumosos hepáticos foram mensuradas utilizando-se o programa ImageJ®. A análise estatística dos parâmetros (peso do fígado, peso da carcaça quente e área comprometida do tecido hepático) foi realizada de forma quantitativa, calculando a média, desvio padrão e coeficiente de variação. Esses dados foram analisados quanto à normalidade e homogeneidade das variâncias, por meio dos testes de Kolmogorov-Smirnov e Bartlett. Como as variáveis foram homogêneas e tiveram uma distribuição normal, foram avaliadas pelo teste paramétrico de análise de variâncias. A correlação das variáveis foi realizada pela correlação de Spearman. O grau de significância adotado foi de 5% e todas as análises descritivas foram realizadas pelo programa EXCEL e os testes estatísticos pelo programa R. Os bovinos sob pastejo de Brachiaria spp. apresentaram lesões hepáticas caracterizadas por degeneração, necrose, presença de infiltrados inflamatórios de intensidade leve e pequena área do tecido hepático contendo macrófagos espumosos. Não houve influência da área comprometida do parênquima hepático contendo macrófagos espumosos com o peso de carcaça quente dos bovinos.

Diversas espécies de anuros da família Leptodactylidae se reproduzem em corpos dágua sazonais, temporários e mantidos exclusivamente por chuvas. Em períodos de estiagem prolongada a poça pode secar completamente, ocasionando elevadas taxas de mortalidade de ovos e girinos dessas espécies, podendo exercer forte pressão seletiva na evolução de mecanismos de resistência e sobrevivência nas fases iniciais do desenvolvimento. Algumas espécies de girinos conseguem sobreviver cerca de cinco dias fora dágua o que pode proporcionar uma adaptação vantajosa, porque possibilita a sobrevivência dos girinos por um período que pode ser suficiente para a reincidência de novas chuvas e restabelecimento do corpo dágua. Apesar dessa capacidade de sobrevivência, pouco se sabe sobre as possíveis modificações que a desidratação pode causar na locomoção e na morfologia durante o desenvolvimento desses animais. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do estresse hídrico: (1) no nível de sobrevivência e perda de massa corpórea; (2) no desempenho locomotor; (3) na morfologia externa (morfometria linear) e interna, analisando tanto o volume total quanto o volume visceral (estereologia); e (4) no tempo até metamorfose após o estresse. Utilizamos girinos de duas espécies de anuros, Leptodactylus fuscus (Leptodactylinae) e Physalaemus nattereri (Leiuperinae), ambas as espécies se reproduzem em corpos dágua temporários, em áreas com estação seca definida estando, portanto sujeitas as mesmas pressões seletivas. Além disso, as duas espécies apresentam modos reprodutivos diferentes, podendo apresentar diferentes graus de resistência ao estresse hídrico. Os girinos das duas espécies foram divididos em dois grupos, os que ficaram em água (grupo controle) e os que foram submetidos ao estresse hídrico (grupo tratamento), por três períodos de tempo (12, 24 e 72 horas). Houve diferenças significativas para valores de perda de massa entre os grupos controle e tratamento em ambas as espécies, sendo o grupo tratamento que mais perdeu massa corpórea em todos os períodos, além disso, quase metade dos girinos de P. nattereri morreram em 36 horas de estresse. Não houve diferenças significativas para os dados de desempenho locomotor e volume total entre os grupos testado para girinos de L. fuscus, mas houve diferenças morfometricas significantes nos componentes relacionados a cauda e no volume visceral, onde, o intestino do grupo tratamento foi menor que do controle. Já em P. nattereri, houve diferenças significativas entre os grupos testados para desempenho locomotor, volume total, morfometria da cauda e volume visceral, sendo o estomago e anexo do tratamento maior que do controle. Nossos resultados sugerem que a exposição ao estresse hídrico não afeta significativamente a morfologia e o desempenho locomotor dos girinos de L. fuscus. No entanto, girinos de P. nattereri apresentaram uma sensibilidade ao estresse hídrico prolongado, principalmente sobre o seu desempenho locomotor. / Several species of frogs (Leptodactylidae) breed in temporary pools maintained exclusively by rainfall. These pools easily dry out causing high mortality of eggs or tadpoles thereby possibly exerting strong selective pressure on the evolution of resistance mechanisms and survival in the early stages of development. However, the tadpoles of some species can survive up to five days in pools that are drying out, needing only a humid substrate for development which can provide an advantageous adaptation, because it enables the survival of tadpoles for a period that may be enough for the recurrence of new rains and restoration of the water body. Despite this ability to survive out of water, it is not known which possible damages dehydration stress causes in tadpoles during their ontogeny. The aim of this study was to evaluate the effect of hydric stress on: (1) the level of survival and weight loss; (2) locomotor performance; (3) external (linear morphometry) and internal morphology, analyzing the total volume and visceral volume (stereology); and (4) the time of development after stress. We used tadpoles of two species, Leptodactylus fuscus (Leptodactylinae) and Physalaemus nattereri (Leiuperinae), both species breed in temporary ponds in areas with well-defined dry season therefore these species are subject to the same selective pressure. In addition, the two species show different reproductive modes, and may possess different degrees of resistance to water stress. To this end, the tadpoles were divided into two groups, those who stayed in 100 ml of water (control group) and those that were subjected to hydric stress (treatment group) for three time periods (12, 24 and 72 hours). Significant differences for weight loss were found between the groups (control/treatment) in both species, with the treatment group losing more weight in all stress levels. Furthermore almost half of P. nattereri tadpoles died within 36 hours of stress. There was no significant difference for locomotor performance and total volume between control group and treatment group of L. fuscus tadpoles, but morphometric analyses indicated a significant difference in the components related to tail and visceral volume, with the gut of the treatment group was lower than the control. In P. nattereri tadpoles, there were significant differences between the groups tested for locomotor performance, total volume, tail morphometry and visceral volume, with the stomach of the treatment group being greater than in the control group. Our results suggest that hydric stress has a significant effect on locomotion and morphology of P. nattereri tadpoles, but not in L. fuscus.

Os estudos relacionados ao coração têm sido realizados ao longo dos anos de forma bastante comum, tendo em vista a grande importância que este órgão tem na medicina. Problemas relacionados ao mesmo são uma das principais causas de mortes e internações no Brasil e no mundo, por causa disso, avanços no que diz respeito a inovações tecnológicas e novas metodologias de estudo tem sido propostas cada vez com mais freqüência, e, o suíno tem se mostrado um modelo bastante útil, pois apresenta diversas similaridades em relação ao ser humano.O uso da estereologia se encaixa nesta nova busca, pois através de suas ferramentas nos proporciona excelentes resultados a níveis de mensuração, e quantificação de estruturas microscópicas. O objetivo desse estudo foi obter valores referentes à quantificação de cardiomiócitos do ventrículo esquerdo em suínos normais. Utilizaram-se 3 suínos fêmeas pesando em torno de 25kg, os quais após serem eutanasiados tiveram o coração retirado e suas câmaras separadas. Em seguida lâminas referentes a esse material foram preparadas e fotografadas, para serem analizadas utilizando-se o disector e o nucleator como ferramentas estereologicas. Os resultados nos mostram que a média de peso do ventrículo esquerdo dos animais foi de 660 mg, o volume médio dos cardiomiócitos foi de 16.32 µm³, a média do numero de cardiomiócitos foi de 3,91x108, enquanto que a média do volume de cardiomiócitos que ocupam o ventrículo esquerdo foi de 3,32x106. / Investigations involving the heart have been largely carried out all over the years due to its importance in medicine. Heart diseases are the one of the major causes of deaths and hospitalizations in Brazil and worldwide. In this context, technological innovations and progresses in methodological investigation have been frequently proposed; Swine has been shown as a useful model due to similarities to human. The application of stereological tools for investigations in the morphology of the heart has been intensely applied based on the reliability on the results for measuring and quantification. This study aimed to evaluate morphological and quantitative aspects of cardiomyocytes in the left ventricle in healthy swine. Three female swine, averaging 25 kg were euthanasiated and have the hearth chambers separated. Left ventricles were fixed and slides obtained. Images were acquired and analyzed by dissector and nucleator. The results showed us that the average weight of the left ventricle of the animals was 660 mg, the mean volume of cardiomyocytes was 16:32 µm3, the average number of cardiomyocytes was 3.91 x108, while the average volume of cardiomyocytes that occupy the left ventricle was 3.32 x106.

A saúde renal tem ao longo dos últimos anos chamado atenção dos médicos veterinários, pois o comprometimento deste órgão na insuficiência renal crônica se apresenta como a maior causa de morbidade e mortalidade em felinos. O presente estudo propõe a caracterização biométrica dos rins de gatos, Felis catus, sob os aspectos macroscópico (comprimento, altura, largura, peso e volume), mesoscópico (altura do córtex e da medula, e a sua inter-relação) e microscópica (volume glomerular), a fim de se estabelecer possíveis diferenças decorrentes de idade, sexo e simetria bilateral. Foram utilizados, rins de 30 animais da espécie Felis catus (gato deméstico), sendo 15 machos e 15 fêmeas com idade variando entre 3 meses a 15 anos, divididos em três grupos: grupo 1 (3 a 9 meses), grupo 2 (3 a 5 anos) e grupo 3 (acima de 10 anos). Os rins foram fotografados, pesados, mensurados e processados para histologia. O volume glomerular foi obtido através de estereologia. Os dados macroscópicos permitiram observar uma imparcialidade morfométrica e morfológica quando comparados os lados, independente do grupo e do sexo, sobre o comprimento, altura, largura, peso e volume dos rins. Para o sexo foi detectado diferença significante entre machos e fêmeas independente da faixa etária para comprimento, altura, peso e volume, com exceção da largura. Considerando a idade houve diferença significativa para todos os parâmetros: comprimento, altura, largura, peso e volume. Nas mensurações de córtex, medula e sua inter-relação, quando considerada a simetria bilateral, não foi detectada diferença significante entre rim direito e esquerdo. Para o sexo, não foi detectada diferença entre machos e fêmeas na mesoscopia no córtex, na medula e na inter-relação córtex / medula. Quanto à idade, a mensuração da altura do córtex e a inter-relação córtex / medula apresentou diferença significante, porém essa diferença não foi estabelecida para a medula do rim. Foram encontradas diferenças significantes entre grupos e entre machos e fêmeas, em relação ao volume ocupado pelo glomérulo no parênquima renal. Em todas as técnicas biométricas utilizadas não foram detectadas diferenças entre os rins direito e esquerdo. As mensurações macroscópicas mostraram que machos apresentaram um rim maior em comprimento, altura, largura, peso e volume do que as fêmeas. A faixa etária está diretamente relacionada ao tamanho do rim, que cresce em todas as dimensões, fica mais pesado e com maior volume quando comparados jovens e adultos, e se mostra estável morfometricamente em relação aos adultos e senis. O parênquima renal não difere entre os sexos, mas a altura do córtex e a relação com a medula aumentam com a idade. O volume do glomérulo renal é maior em machos do que em fêmeas e também aumenta em relação à idade. Os rins mostraram um predomínio de colágeno tipo I nos animais do grupo 1 e 2, e colágeno tipo III nos animais do grupo 3 / Renal Health has over the last few years called attention from veterinarians because of the commitment of this organ in chronic renal failure presents itself as a major cause of morbidity and mortality in cats. This paper proposes biometric characterization of the kidneys from cats, Felis catus, on the macroscopic aspects (length, height, width, weight and volume), mesoscopic (height of the cortex and medulla, and their inter-relationship) and microscopic (glomerular volume) in order to establish possible differences arising from age, gender and bilateral symmetry. It where used 30 kidneys of animals from specie Felis Catus (cat), 15 males and 15 females with ages between 3 months to 15 years, divided into three groups: group 1 (3-9 months), group 2 (3 - 5 years) and group 3 (above 10 years). The kidneys were photographed, weighed, measured and processed for histology. The glomerular volume was obtained by stereology. The macroscopic data allowed to observe a morphometric and morphologic impartiality when compared sides, regardless of group and sex, about the length, height, width, weight and kidney volume. Significant difference was detected between males and females regardless of age for length, height, weight and volume, except for the width. There was a significant difference for all parameters considering the age: length, height, width, weight and volume. Wasnt detected signficant diferences between left and right kdney measurements of cortex, medulla and their inter-relationship, when considered bilateral symmetry. No difference was detected between males and females in mesoscopy in the cortex, medulla and cortex interrelationship cortex / medulla. Regarding age, the measurement of the height of the cortex and the interrelationship cortex / medulla showed a significant difference, but this difference was not established to the medulla of the kidney. Significant differences were found between groups, males and females, compared to the volume occupied by the glomerulus on the parenchyma renal. In all of biometric techniques there wasnt differences between right and left kidneys. The macroscopic measurements showed that males had larger kidney when compared length, height, width, weight and volume than females. The age range is directly related to the size of the kidney, which grows in all dimensions, gets heavier and with higher volume when compared young adults, and shows morphometry stability in relation to adults and senile. The renal parenchyma did not differ between the sexes, but the height of the cortex and the medulla ratio increases with age. The volume of the renal glomerulus is higher in males than in females and also increases in with the age. The kidneys showed a predominance of type I collagen in group 1 and 2, and type III collagen in group 3

A clonagem de animais é uma técnica em desenvolvimento e ainda requer refinamento, uma vez que as perdas embrionárias são significativas. Mesmo com animais chegando à termo, algumas deficiências verificadas ao nascimento provocam a morte destes antes do primeiro mês de vida. As alterações placentárias durante a embriogênese estão relacionadas, à formação deficiente da placenta, principalmente nas regiões de troca materno-fetal. Considerando a necessidade de estudos mais detalhados sobre a morfologia da placenta e a ausência de estudos quantitativos das estruturas placentárias em grandes mamíferos, investigamos comparativamente os vilos coriônicos da placenta de bovinos não clonados e clonados usando delineamento estereológico. Foram utilizadas placentas de quatro fêmeas de bovinos clonados e quatro de não clonados. A amostragem foi realizada de modo uniforme, sistemático e aleatório, sendo obtidas estimativas de densidade de volume, volume referência, tamanho e comprimento e número de unidades volume star. Todos os parâmetros estereológicos apresentaram valores superiores (embora não significativos) para não clonados, com exceção do número de unidades volume star. No entanto, a placenta de não clonados foi mais eficiente (p= 0.014). Apesar de não significativos, os resultados sugerem a existência de diferenças biológicas, ou seja, a placenta de bovinos não clonados apresenta vilos maiores (porém em menor número), mas distribuídos em um número maior de placentomas. Já em animais clonados, estes vilos são menores, mais numerosos e distribuídos em um número menor de placentomas. / Animal cloning is still in development it requires further improvements since embryonic losses are remarkable animals die before the first month after birth. The placental changes during embryogenesis cause a deficiency in the placenta, mostly in the maternal-fetal exchange areas. Due to the need for more detailed studies on the placenta?s morphology, especially the quantitative analysis of the placenta structures in large animals, chorionic villi were comparatively investigated in both cloned and non-cloned bovines by means of stereology designed methods. Placentas from four cloned and four non-cloned bovines were used. Specimens were collected in a random uniformand systematic procedure, and stereological designed methods were pursued to estimate volume density of villi; the volume reference of placenta (Cavilieri Principle), surface density, surface area, star volume and number of star volume units. All parameters presented larger values for non-cloned, with exception of number of star volume units, thought these results were statistically non-significant larger in non-cloned animals (p= 0.014). In conclusion, it is possible to say that there are biological differences, in the placenta of non-cloned bovines which presents larger chorionic villi, small villi number, but distributed in a larger number of placentomas. In cloned bovines, however, villi are smaller, numerous more, and they are distributed in fewer number of placentomes.

A doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa caracterizada pela progressiva depleção dos neurônios dopaminérgicos da substância negra (pars compacta). A DP não ocasiona apenas uma desordem motora, mas também pode provocar uma disautonomia cardiovascular. A DP com sintomas similares aos que ocorrem em humanos pode ser experimentalmente induzida em ratos e camundongos com a administração das neurotoxinas 1-metil-1-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropirimidina (MPTP), 6-hidroxidopamina (6-OHDA) e rotenona. Mais, na década de 90, camundongos transgênicos que expressam altos níveis de alfa-sinucleína mutante humana têm sido produzidos e utilizados para investigar a possível relação entre a agregação da proteína alfa-sinucleína e a DP, uma vez que em humanos, a alta expressão dessa proteína está relacionada ao desenvolvimento do parkinsonismo associado à desnervação cardíaca simpática. No entanto, a desnervação cardíaca e suas conseqüências no miocárdio na DP não estão claramente caracterizadas, pois na literatura os métodos quantitativos empregados para tal finalidade têm sua confiabilidade e acurácia questionáveis. Desta forma, avaliou-se, no modelo de indução neurotóxico (MPTP), o miocárdio de camundongos C57/BL aplicando-se métodos morfoquantitativos tridimensionais (estereológicos). Neste trabalho, observamos que o volume da parede ventricular, o volume e a densidade de volume do interstício cardíaco foram, respectivamente, 0,8%, 5,3% e 2,4% maior no grupo MPTP. O volume do lúmen ventricular, o volume ventricular, o volume das fibras musculares cardíacas e a sua densidade de volume foram, respectivamente, 11,7%, 0,9%, 2,3% e 1,7% maior no grupo controle. O número total de núcleos de cardiomiócitos foi 14,8% menor no grupo MPTP bem como o número total de cardiomiócitos que foi 19% menor também neste grupo. Houve diferença estatística significativa entre os grupos para o parâmetro número de cardiomiócitos. Não houve, porém, diferença estatística significativa para os outros parâmetros avaliados. / Parkinson´s disease (PD) is a neurodegenerative disorder mostly characterised by a profound reduction of dopamine in the striatum due to a dramatic loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra (pars compacta). The disease is not only characterised by a motor disorder but also present cardiovascular dysautonomia. The disease has been chemically induced in rats and mice using neurotoxins such as 1-metyl-1-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyrimidina (MPTP), 6-OHDA and rotenone. In the nineties, transgenic α-synuclein mice have recently been used as a model of PD and alpha-synuclein aggregation, because the overexpression of this protein is related to the development of parkinsonism associated to the sympathetic cardiac denervation. Although, the cardiac denervation in PD and its consequences in myocardium is not well defined because the literature reports no reliable quantitative methods. Therefore, the myocardium of the C57/BL mice was investigated in the neurotoxin animal model (MPTP) applying tridimensional morphoquantitative methods (stereological). In this study, we observed an increase of 0,8%, 5,3% and 2,4% in ventricular wall volume, in cardiac interstitial volume and in cardiac interstitial volume density, respectively, in the MPTP group. The lumen ventricular volume, the ventricular volume, the cardiac muscle fibre and their volume density were, respectively, 11,7%, 0,9% , 2,3% and 1,7% larger in control group. The total number of cardiomyocyte nuclei was 14,8% lower in MPTP group as well as the total number of cardiomyocyte that was 19% lower for this group too. Significant difference was observed between the groups to the total number of cardiomyocyte. No significant difference, however, was detected for the others estimated parameters.